ajeagah gideon*, karie mouncharou jean€¦ · cycle de développement d’isospora belli (cdc,...

Hydroécol. Appl. (2018) Tome 20, pp. 85–102© EDF, 2018https://doi.org/10.1051/hydro/2014010

https://www.hydroecologie.org

Laboratoire d’Hydrobiologie et Environnement, Université de Yaoundé I, Faculté des Sciences, BP 812,Yaoundé, [email protected]

Résumé – Une étude visant à isoler, identifier et caractériser les oocystes d’I. belli dansl’Abiergué a été menée d’avril à novembre 2011. Les échantillonnages ont été faits men-suellement dans six stations le long du cours d’eau. Les oocystes ont été identifiés par destechniques de coloration notamment la coloration de Zielh-Neelsen modifiée et celle duLugol. Les résultats de la biologie révèlent la présence et la distribution des oocystes d’I.bellile long du cours d’eau avec une densité moyenne de 344 oocystes/L. Cette abondancerésulte de la contamination par les matières fécales déversées dans l’hydrosystème à partirdes latrines-canons. Les oocystes identifiés montrent une prédominance des oocystes à spo-roblaste non-individualisé, en moyenne 202 oocystes/L, aussi bien au niveau spatial que sai-sonnier. Ce travail a mis en évidence la dominance des oocystes de petite taille avec unedensité moyenne de 194 oocystes/L dans ce milieu aquatique en zone urbaine. Le calcul ducoefficient de corrélation de Spearman montre des corrélations positivement significatives(p=0,01) entre les nitrates, la turbidité et les oocystes d’une part et une corrélation négati-vement significative (p=0,05) entre le CO2 dissous et les oocystes d’autre part.

Mots-clés – abondance, Abiergué, protozoaire, Isospora belli, oocystes

Abstract – A study which consists of isolating, identifying and characterizing the oocysts ofI. belli, was carried out from April to November 2011 in the Abiergué Stream. The samplingwas done monthly on six sites along the stream. The oocysts were identified by stainingtechniques namely modified Zielh-Neelsen and Lugol stains. The physico-chemical analy-ses reveal that Abiergué sustains an organic pollution pressure. The results of biology showthe presence and the distribution of I. belli oocysts along Abiergué with an average densityof 344 oocysts/L. This value of abundance arises from the contamination of the stream byfecal matters which are released from the latrines. Identified oocysts show a predominanceof non-individualized sporoblast oocysts with an average density of 202 oocysts/L in all theseasons and in all the sampling sites. This research has revealed the dominance of small

Dynamique de l’abondance des oocystes d’Isospora belli dans un milieu aquatique en zone tropicale(Cameroun)

Abundance dynamics of the oocystic load of Isospora belli in a tropical aquatic medium (Cameroon)

Ajeagah Gideon*, Karie Mouncharou Jean E.

Article publié par EDP Sciences

http://publications.edpsciences.org

http://dx.doi.org/10.1051/hydro/2014010

https://doi.org/10.1051/hydro/2014010

https://www.hydroecologie.org

86 G. Ajeagah et J.E. Karie Mouncharou

size oocysts with an average density of 194 oocysts/L in this urban water system. The cal-culation of Spearman correlation coefficient shows positive significant correlations (p=0,01)between nitrates, turbidity and oocysts. However, the dissolved CO2 has a negative signifi-cant correlation with the oocysts.

Key words – Abiergué, abundance, protozoa, Isospora belli, oocysts

1 INTRODUCTION

L’eau est une ressource naturellevitale et importante pour toutes les com-posantes de divers écosystèmes duglobe. L’avoir en quantité suffisante etde bonne qualité rentre dans les objec-tifs du millénaire pour le développementau regard de la vitesse croissante dedégradation de cette ressource (ONU,2006). Toutefois, l’activité anthropiquefigure au premier rang des problèmesresponsables de la pollution de l’eaudouce à l’échelle mondiale. Cette situa-tion exige une gestion rigoureuse et unsuivi permanent des hydrosystèmesqui, sous l’action de l’anthropisation,constituent le siège de la prolifération etde la dissémination de divers agentspathogènes tels que les virus, les cham-pignons, les bactéries et les proto-zoaires parasites (Gomez et al., 2002).En effet, dans les pays en développe-ment, plus d’un milliard de personnesn’ont pas accès à l’eau potable et troismilliards de personnes environ n’ontpas accès aux services d’assainisse-ment adéquats avec une majorité vivanten Afrique et en Asie (Sonia et al.,2010). Ces insuffisances accentuéespar les perturbations climatiques,l’industrialisation et l’explosion démo-graphique favorisent la contaminationdes eaux par les fèces et diverseffluents domestiques et industriels, ladégradation croissante et l’épuisement

des ressources en eau (Pedro &Germano, 2001 ; Mircean et al., 2012).

Au Cameroun en général et dansla ville de Yaoundé en particulier, lespopulations sont confrontées au pro-blème d’assainissement et aux diffi-cultés d’approvisionnement en eaupotable. Pour pallier ce problème,elles ont recours à des sources, despuits et des cours d’eau pour satisfaireleur besoin. Dans cette quête, elless’exposent à des parasitoses d’ori-gine hydrique et de nature diarrhéiquedont la prévalence est autour de14,4 % (Yongsi et al., 2008). Parmi lesparasitoses, figure l’isosporose, cau-sée par Isospora belli qui est respon-sable des maladies diarrhéiques chezles immuno-compétents et surtout lesimmuno-déprimés (VIH/SIDA) (Sasakiet al., 2004 ; Navaneethan et al., 2012).Cette entéropathologie est d’une gra-vité particulière chez les porteurs duVIH en raison d’une expression cliniquesévère et superposable à celle de lacryptosporidiose (Cranenbonk et al.,2003) car ces deux pathologies présen-tent presque les mêmes symptômes.I. belli, Cryptosporidium et Cyclosporasont des Apicomplexa à émergencequi se retrouvent dans les infectionsconcomitamment d’où des co-infec-tions dues à la nature de leur formeinfestante qui est le sporozoïte. Le trai-tement de référence pour l’isosporoseest la prise orale de l’association

Dynamique de l’abondance des oocystes l’Isospora belli dans un milieu aquatique en zone tropicale 87

Trimethoprime-sulfamethoxazole (160ou 800 mg) ou le Ciplofloxacine (500 mg)deux fois par jour pendant sept jourschez les immunodéprimés (Verdieret al., 2000).

Les travaux d’Ajeagah et al. (2007)ont montré la présence des formes derésistance des protozoaires du genreGiardia et Cryptosporidium dans leprésent cours d’eau ainsi que ceux deKenmogne et al. (2010) qui ont montréla dissémination des entéropatho-gènes comme des coliformes fécaux ettotaux, des œufs d’Helminthes et deskystes d’Entamoeba hystolitica dansl’Abiergué. Au regard de quelquessimilitudes autour des symptômes degastroentérites causées d’une part etde leur cycle de développementd’autre part, il était intéressant pournous d’observer si les oocystes deI. belli ne se retrouvaient pas aussidans le cours d’eau. Le cycle biolo-gique de cet entéropathogène se sub-divise en trois grandes phases dont lamultiplication asexuée, la reproductionsexuée et la sporogonie (Fig. 1) : (i) lamultiplication asexuée (dans les enté-rocytes humains) qui conduit à la libé-ration de 8 sporozoïtes à partir d’unoocyste mature ingéré par l’homme,leur division en mérozoïtes et leur dif-férenciation en gamétocytes et engamètes ; (ii) la reproduction sexuéequi intervient une semaine aprèsl’infection et consiste en une fertilisa-tion du macrogamète par un microga-mète issu des gamétocytes conduisantà la formation d’un oocyste ovale,immature (renfermant un sporo-blaste), dont la taille varie de 20 à33 µm, qui est rejeté avec la matièrefécale dans le milieu extérieur ; (iii) lasporogonie qui intervient dans les

conditions favorables de l’environne-ment et correspond à la phase de matu-ration du sporoblaste. Ce sporoblastesubit une mitose aboutissant à 2 sporo-cystes lesquels subissent une méioseproduisant 4 sporozoïtes (formes infes-tantes) chacun : c’est l’oocyste mature(Fig. 1).

À l’état actuel, nous ne disposonsd’aucune information sur la distributiondes coccidies entéropathogènes dansles hydrosystèmes à Yaoundé endehors des travaux d’Ajeagah et al.(2007, 2010) et Kenmogne et al.(2010). Par ailleurs, les travaux surI. belli sont essentiellement menés parexamen direct des échantillons de lamatière fécale en laboratoire commeceux de Udeh et al. (2008) et Meamaret al. (2009) et non à partir des échan-tillons d’eau des cours d’eau. À ceteffet, on procède par prélèvement deselles ou aspiration duodénale suiviepar des techniques de colorationcomme celle de Ziehl-Neelsen modi-fiée (Ousmane, 2010) ainsi que celleau Lugol.

Compte tenu du fait que I. belli abesoin d’un passage hors de l’hôtepour assurer sa maturité et que, deplus, les oocystes conservent leur pou-voir infectant pendant de longuespériodes dans l’eau, la présente étudevise à isoler, identifier et caractériserles oocystes d’I. belli dans un coursd’eau, l’Abiergué.

2 MATÉRIEL ET MÉTHODES

2.1 Site d’étude et échantillonnage

Yaoundé, capitale politique duCameroun, est situé sur la bordure


ouest du plateau sud Camerounais à3°52’ de latitude Nord et 11°32’ de lon-gitude Est, et culminant à une altitudemoyenne d’environ 750 m (Santoir,1995). Le relief est accidenté et étendusur plusieurs collines d’altitude com-prises entre 25 et 50 mètres, les solssont dans la globalité de type ferro-latéritique (Yongué-Fouateu, 1986). Lesubstratum géologique est constitué

Fig. 1. Cycle de développement d’Isospora belli (CD

Fig. 1. Life cycle of Isospora belli (CDC, 2007).

d’un socle granito-gneissique surlequel se développent des solsferralitiques et hydromorphes (NdamNgoupayou et al., 2007).

Le climat est équatorial de typeyaoundéen chaud et humide, caracté-risé par des précipitations modéréeset une température variable au coursdu temps (Suchel, 1987). Ces carac-téristiques permettent de distinguer

C, 2007).


4 saisons : la grande saison sèche(GSS) de mi-novembre à mi-mars,une petite saison pluvieuse (PSP) demi-mars à fin juin, la petite saisonsèche (PSS) de juillet à mi-août etune grande saison pluvieuse (GSP)de mi-août à mi-novembre.

L’Abiergué est l’un des affluents ducours d’eau Mfoundi. Son débit estfonction du climat, du relief du bassinversant, de la variation de saisons, dela stabilité de fonds et des apports destributaires (Levêque, 2001). Le débitvarie de 0,1 ± 0,04 m3/s à la source,0,5 ± 0,1 m3/s au milieu et 0,7 ±0,2 m3/s en aval selon les variableshydro-météologiques. Il reçoit endehors de ses deux affluents, plusieurseffluents provenant des eaux uséesdomestiques et des commerces. Sonbassin versant est essentiellementoccupé par des lotissements, les mar-chés et une agriculture maraîchèreartisanale avec l’emploi des intrantsagricoles. Les activités pratiquées sontprincipalement commerciales (les mar-chés VIIIe et Mokolo), et agricoles avecquelques champs de légumes le longdu cours d’eau à des fins de subsis-tance et utilisant l’eau du cours d’eaupour arroser les plantes. D’unemanière générale, la densité de lapopulation est très forte avec des mai-sons en matériau provisoire et dépour-vues de dispositif d’assainissement.

Ainsi, on peut observer de nom-breuses latrines bâties sur lesberges, qui déversent directementleur contenu dans le cours d’eau (enmoyenne tous les 20 mètres). De plus,des tas d’ordures sont présents depart et d’autre du cours d’eau et mêmedans le lit, par endroit, rendant difficilel’écoulement des eaux. Cependant,

les pressions anthropiques à traversles pollutions fécales et les déchetsdomestiques ne sont pas distribuéesde façon uniforme tout au long du coursd’eau puisque les activités diffèrent.

Sur la base de la densité des popu-lations des quartiers riverains dul’hydrosystème, du degré d’insalubrité,des effluents domestiques et desaffluents ainsi que des sources de pol-lution, six stations ont été choisiesdans l’Abiergué, trois au crénon, deuxau rithron et un au potamon (Fig. 2).Les échantillonnages ont été menéssur l’Abiergué pendant la période allantd’avril à novembre 2011, suivant unefréquence de prélèvement mensuel etles résultats ramenés aux saisons àpartir des moyennes des valeurs men-suelles des différents paramètres.Ainsi, pendant la PSP, il y a eu troiséchantillonnages contre deux en PSSet enfin trois au cours de la GSP. Lesspécimens ont été prélevés dans desflacons en polyéthylène de 1 litre et leséchantillons ont ensuite été transpor-tés à température ambiante dans uneglacière au Laboratoire de biologiegénérale de l’université de Yaoundé Idans environ l’heure qui suit le prélève-ment pour analyse.

2.2 Analyses physico-chimiques

Les prélèvements ainsi que lesparamètres utilisés ont été effectuésde manière ponctuelle entre 7H30 et11H30 du matin sur le terrain. La tem-pérature qui varie très peu en zone tro-picale, a été mesurée à l’aide d’un ther-momètre à mercure, le pH grâce aupH-mètre (HACH) et l’O2 dissous àl’aide de l’oxymètre (HACH) in situ.


Ces trois paramètres sont importantsdans le processus de sporogonie parl’activation des enzymes, le métabo-lisme et le phénomène d’excystation.

Fig. 2. Carte du bassin versant de l’Abiergué coCarte topographique au 1/10000 de l’INC, Yaoundé

Fig. 2. Map of the Abiergué drainage basin indicatinof 1/10000 of INC, Yaoundé - Cameroon 2008, mod

La turbidité qui est mesurée parspectrophotomètre DR2800 permetde comprendre le déplacement desoocystes-matières en suspension dans

mprenant les stations d’échantillonnage (Source:- Cameroun 2008, modifié).

g the sampling stations (Source: Topographic mapified).


les milieux aquatiques. Les nitrates ontété mesurés par colorimétrie au spec-trophotomètre (DR2800) au labora-toire. Le dioxyde de carbone (CO2) aété évalué par volumétrie au labora-toire après fixation au NaOH N/20 surle terrain. L’oxydabilité au permanga-nate déterminant la quantité de consti-tuants organiques oxydables a étéévaluée au laboratoire par volumétrie.Les nitrates (mg NO3/L) et le CO2dissous (mg CO2/L) sont des indica-teurs de la pollution anthropogénique(Ajeagah et al., 2013). Les nitratesretrouvés dans les cours d’eau pro-viennent régulièrement du lessivagedes sols agricoles (où se pratiquent lescultures maraîchères) et des proces-sus bactériens du cycle de l’azote àpartir des matières organiques (Rodier,2009). Le CO2 provient de la pluie, larespiration des organismes et ladécomposition de matières organiques(Ajeagah et al., 2013). Ces paramètresont été choisis par rapport à l’écologied’I. belli en milieux naturels et sur labase des paramètres utilisés dans destravaux antérieurs sur les protozoairesdu genre Giardia et Cryptosporidiumpar Ajeagah et al. (2007, 2010).

2.3 Analyses biologiques

En ce qui concerne les oocystesd’I. belli, les échantillons d’eau prélevésdans les flacons en polyéthylène(1 litre) ont été par la suite laissés sédi-menter pendant 24 à 48 heures à tem-pérature ambiante autour de 27 °C enmoyenne. Cet intervalle de temps estidéal pour le dépôt de la majorité desoocystes comme présenté par Ajeagahet al. (2007). Après les 48 heures, les

oocystes peuvent être ingérés par desbactéries et d’autres prédateurs pré-sents dans l’échantillon. Les culotsobtenus ont été homogénéisés et20 mL prélevés pour chaque échan-tillon ont été repartis dans 4 tubes àessai. Compte tenu des objectifsd’observation, deux méthodes ont étéutilisées : (a) la méthode d’observationdirecte car le travail consiste en uneévaluation de l’abondance et le comp-tage des oocystes est aisé pour uneévaluation quantitative ; (b) la méthoded’observation après coloration de Zielh-Neelsen modifié car cette méthode estplus qualitative et permet la confirma-tion de la présence des oocystes.

Pour l’observation directe, lescontenus des tubes ont été fixés au for-maldehyde 2 %, puis colorés au Lugol5 % et portés à centrifugation pendant10 minutes à 500 trs/min. Après la cen-trifugation, le culot a été prélevé àl’aide d’une micropipette, déposé surune lame et recouvert d’une lamelle etobservé au microscope optique (Olym-pus) aux grandissements 40X et 100Xpour identification, mensuration etdénombrement des oocystes jusqu’àépuisement du culot.

Par contre, pour l’observation aprèscoloration de Zielh-Neelsen modifié,une solution de sulfate de zinc 10 %est ajoutée au contenu des tubes pourfavoriser la flottaison, après fixation auformaldehyde 2 %, puis l’ensembleest centrifugé à 500 trs/min pendant10 minutes. Le surnageant est prélevéà l’aide d’une micropipette et posée surdes lames porte-objet. Après fixationau méthanol et coloration à la fuchsinebasique, on rince à l’eau puis à l’acidesulfurique 2 %. On réalise ensuite unecontre-coloration au bleu de méthylène


5 % puis, après rinçage à l’eau etséchage à l’air, l’examen des oocystesest réalisé au microscope optique(Olympus) aux grandissements 40X et100X.

2.4 Analyses des données

Après l’enregistrement du volumeintégral du culot (VX) et son homogé-néisation, un volume précis du culot(VY) est prélevé puis reparti dans diffé-rents tubes à essai. Le culot final dechaque tube à essai est reparti sur leslames puis le nombre d’oocystes estcompté. Le nombre total des oocystesdans l’échantillon est calculé en multi-pliant la valeur obtenue pour toutes leslames par la fraction VX/VY et le résul-tat est enfin ramené au litre. Les rela-tions entre la distribution des oocystesdu parasite et les variables physico-chimiques de l’eau ont été évaluées

Tableau I. Coefficients de corrélation obtenus entrela taille des oocystes et les différents stades de spoTable I. Correlation coefficients between the evaloocysts and the different stages of sporulation.

TempératureOxygènedissous

Turbidi

Sporoblasteimmature

0,378 -0,426 0,418

Sporoblastemature

-0,198 -0,459 -0,076

Sporocystes -0,365 -0,38 -0,198

Petite taille -0,24 -0,631** -0,08

Taillemoyenne

0,008 -0,582* 0,115

Grande taille 0,555* -0,492* 0,680*

* La corrélation est significative au niveau 0,0** La corrélation est significative au niveau 0,0

par le test de corrélation de Spearman(Tab. I).

3 RÉSULTATS ET DISCUSSION

3.1 Caractéristiquesphysico-chimiques

3.1.1 Paramètres physiques

La température des eaux est com-prise entre 22,40 et 26,53 °C dansl’ensemble du réseau avec une ampli-tude thermique entre la valeur mini-male et maximale de 4,13 °C. La sta-tion Abiergué 2 (Ab2) au crénonpendant la PSS enregistre la plus faiblevaleur contrairement à la station Abier-gué 6 (Ab6) au potamon qui présente lavaleur la plus élevée pendant la PSP(Fig. 3A). La variabilité de la tempéra-ture résulte selon Villeneuve et al.

quelques variables physico-chimiques mesurées,rulation.uated physico-chemical variables, the size of the

té NitratesCO2

dissouspH Oydabi-lité

0,402 -0,404 -0,663** -0,364

0,304 -0,507* 0,097 -0,022

0,566* -0,518* 0,193 0,024

0,293 -0,43 0,006 -0,026

0,516* -0,629** -0,213 -0,218

* 0,625** -0,157 -0,671** -0,520*

5.1.


(2006) de l’étroitesse liaison entre latempérature de l’eau et celle du milieuambiant ainsi que d’éventuels rejetsd’eaux résiduaires comme c’est le casavec les ménages riverains et les net-toyeurs de l’abattoir traditionnel desvolailles du marché VIIIe qui évacuentles eaux usées chaudes dans le coursd’eau.

La turbidité de l’eau est compriseentre 34 et 133 NTU. La valeur maxi-male est obtenue à Ab3 au crénon enPSP et la valeur minimale est enregis-trée à Ab6 au potamon en PSS(Fig. 3B). Dans l’ensemble, le profil devariation de la turbidité montre que laPSP et la GSP présentent les valeursélevées résultant des torrents et deseaux de ruissellement qui drainent lesparticules solides et les maintiennenten suspension, rendant ainsi l’eau tur-bide. La diminution de la turbiditéd’amont en aval en PSP et PSS résul-terait d’une part d’un processus de dilu-tion suite à l’apport de l’affluent en Ab5et d’autre part du fait que le cours

20,0

22,0

24,0

26,0

28,0

Ab1 Ab2 Ab3 Ab4 Ab5 Ab6

Tem

péra

ture

(°C)

Sta�onsA

Fig. 3. Variation spatio-temporelle de la tempérad’étude.

Fig. 3. Spatio-temporal variation of temperature (A)

d’eau traverse une zone maréca-geuse entre l’amont Ab4 et l’aval deAb5 avec sa fonction épuratrice quiréduirait la turbidité.

3.1.2 Paramètres chimiques

Le pH présente des valeurs com-prises entre 6,86 et 7,81 respective-ment sur Ab5 au rithron (PSP) et Ab6(PSS) (Fig. 4C). Le profil de donnéesmontre une tendance vers la neutralité,propice à l’expression de nombreuxorganismes (Angelier, 2000). Cesrésultats sont semblables à ceux obte-nus par Kenmogne et al. (2010) surl’Abiergué. Cette tendance résulteraitde la qualité des déchets libérés dansle cours d’eau et de la nature acide dusol. Ce pH acide qui provient de lanature des roches sous-jacentes etdes sols drainés ainsi que de l’oxyda-tion de la matière organique dans leseaux devient légèrement neutre àbasique pour les eaux influencées par

0

50

100

150


Turb

idit

é (N

TU)

Sta�onsB

ture (A) et de la turbidité (B) pendant la période

and turbidity (B) during the study period.


les rejets urbains (Ndam Ngoupayouet al., 2007).

L’O2 dissous présente des valeurscomprises entre 4,36 et 74,12 %(Fig. 4D). La teneur minimale est enre-gistrée à Ab2 au crénon et Ab4 au

6,0

6,5

7,0

7,5

8,0


pH

(U

C)

StationsC

0,00

5,00

10,00

15,00

20,00

25,00


CO2

dis

sou

s (

mg/

L)

StationsE

0,02,04,06,08,010,0


Oxy

dab

ilit

é (m

g/L)

StationsG

Fig. 4. Variation spatio-temporelle du pH (C), de l’Oet de l’oxydabilité au permanganate (G) pendant la

Fig. 4. Spatio-temporal variation of pH (C), dissolvedability (G) during the study period.

rithron pendant la GSP et la maximaleà Ab5 et Ab6 (PSS).La forte teneurrésulte de la pente et des radiersobservés sur le lit au niveau des sta-tions Ab1 et Ab6 favorables à la réoxy-génation de l’eau à l’interface air/eau.

0

20

40

60

80


O2

dis

sou

s (%

)

StationsD

0,00,51,01,52,02,53,0


Nit

rate

s (m

g/L)

StationsF

2 dissous (D), du CO2 dissous (E), des nitrates (F)période d’étude.

d O2 (D), dissolved CO2 (E), nitrates (F) and oxy-


Les teneurs en CO2 dissous variententre 16,41 mg/L et 21,12 mg/L. Lavaleur minimale est obtenue à Ab1(PSP) et la valeur maximale à Ab3, Ab2et Ab4 (PSP) et Ab2 et Ab4 (PSS)(Fig. 4E). Dans l’ensemble, le CO2 dis-sous présente peu de variations sur leplan spatio-temporel pendant la GSP,mais augmente de la source à l’exu-toire pendant la PSP et la PSS.

Les teneurs en ions nitrates variententre 0 et 2,47 mgNO3/L (Fig. 4F). Defaçon générale, la teneur reste infé-rieure à 0,5 mgNO3/L en moyenne etAb2 durant la GSP enregistre la teneurla plus élevée. La présence desnitrates dans le cours d’eau témoigned’une contamination par les activitésdomestiques et maraîchères exercéessur le versant.

L’oxydabilité au permanganate pré-sente des valeurs allant de 2,22 à8,30 mgO2/L (Fig. 4G). La plus faibleteneur est observée à Ab3 (PSP) et lateneur la plus forte à Ab3 (PSS). Leprofil de l’oxydabilité au permanganateprésente dans son ensemble uneteneur supérieure à 2 mgO2/L queRodier (2009) considère comme indi-catrice de pollution dans le cas deseaux superficielles.

Le résultat d’analyse des para-mètres physico-chimiques montre unedégradation de nature organique duruisseau.

3.2 Caractéristiques biologiques

Les oocystes d’I. belli mesurententre 20 à 30 µm selon Garcia (2007)et Lindsay et al. (2007). Pour une har-monie dans le traitement des donnéesau regard de l’étendue de la distributiondes tailles au cours de l’étude, nous

avons choisi délibérément de regrouperles oocystes en 3 gammes de taille : lesoocystes de petite taille (20 à 23 µm),ceux de taille moyenne (24 à 26 µm) etceux de grande taille (27 à 30 µm). Cedécoupage permet de vérifier la fré-quence des différentes types de tailledans notre environnement aquatique,de préconiser la nature de filtre à utiliserdans le cas de traitement des eaux etde commencer une analyse biologiquesur le génotypage d’I. belli en zoneéquatoriale (sub-saharienne).

Dans l’ensemble, les analysesbiologiques présentent la concentra-tion maximale des oocystes à Ab1(498 oocystes/L) en GSP et la concen-tration minimale à Ab5 (199 oocystes/L)en PSS. Les oocystes de petite tailleprésentent des abondances oscillantentre 117 et 296 oocystes/L (Fig. 5A).La plus faible abondance est relevéeà Ab5 durant la PSS et la plus forteest observée à Ab1 durant la GSP.Les abondances des oocystes detaille moyenne varient entre 30 et149 oocystes/L (Fig. 5B). L’abondanceminimale est enregistrée à Ab4 en PSSet l’abondance maximale est obtenue àAb4 en GSP. Les abondances desoocystes de grande taille varient entre28 et 109 oocystes/L (Fig. 5C). Lafaible abondance est obtenue à Ab4 etAb5 en PSS alors que la plus forte estrelevée à Ab4 en GSP. Nous pouvonsdire que les oocystes de petites taillessont ceux que portent la majorité deshôtes car l’oocyste étant la forme derésistance, il ne peut pas changer detaille dans le milieu extérieur. La varia-bilité intra saisonnière des abondancesdes oocystes de petite et moyennetaille est plus importante contrairementaux abondances des oocystes de


grande taille qui présentent plutôt unevariabilité inter saisonnière importante.

Par ailleurs, deux formes d’oocystesont été identifiées : les non-sporulées(ceux à sporoblaste nonindividualisé(Fig. 6A) et ceux à un sporoblaste(Figs. 6B et 7A) et les sporulées (ceuxà sporocystes) (Figs. 6C et 7B).

Les oocystes à sporoblaste nonin-dividualisés ou inexistant montrentdes abondances variant entre 106 et260 oocystes/L (Fig. 8A). Le profil desabondances révèle que la station Ab5en PSS enregistre la plus faible valeurcontrairement à la station Ab2 en PSP

050100150200250300350


Nom

bre

d'o

ocys

tes/

L

StationsA

0

20

40

60

80

100

120


Nom

bre

d'o

ocys

tes/

L

StationsC

Fig. 5. Variation spatio-temporelle des abondances(B) et de grande taille (C) pendant la période d’étud

Fig. 5. Spatio-temporal variation of small size oocyperiod.

qui a la plus forte valeur. Aussi, lesabondances des oocystes à un sporo-blaste individualisé sont comprisesentre 51 et 157 oocystes/L (Fig. 8B). Lastation Ab5 en PSS enregistre l’abon-dance minimale et la station Ab1 enGSP présente l’abondance maxi-male. Les abondances des oocystesà sporocystes fluctuent entre 20 et99 oocystes/L (Fig. 8C). La stationAb1 en PSP obtient la plus faibleabondance alors que la station Ab4 enGSP a l’abondance la plus élevée. Lavariabilité intra saisonnière des abon-dances des oocystes à sporoblaste

0

50

100

150

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Nom

bre

d'o

ocys

tes/

L

StationsB

des oocystes de petite taille (A), de taille moyennee.

sts, average height and large size during the study


non individualisé et à un sporoblasteindividualisé est importante alors queles abondances des oocystes à sporo-cystes ont une variabilité inter saison-nière importante.

4 DISCUSSION

Ces observations montrent la pré-sence des oocystes d’I. belli dans lemilieu aquatique en zone tropicale ettraduisent la contamination fécale deseaux. De même, les résultats des

S

m

5 µm

B A

p n

mb

m

Fig. 6. Structure des oocystes d’I. belli. mb : memblisé (A), Sp in : sporoblaste individualisé (B), Sp : sp

Fig. 6. Structure of the oocysts of I. belli. mb: plasm(A), Sp in: individualized sporoblast (B), Sp: sporoc

A

Fig. 7. Structure des oocystes d’I. belli. Après colora(A) et oocyste à sporocystes (B).

Fig. 7. Structure of the oocysts of I. belli. After Lug(A) and oocyst with sporocysts.

travaux de Kenmogne et al. (2010) ontrévélé la présence des formes de résis-tance des entéropathogènes tels queles kystes d’Entamoeba hystolitica etGiardia sp. avec des abondancesfaibles qui seraient probablementliées aux techniques des concentra-tions et d’identification des échan-tillons. D’ailleurs, ces résultats corrobo-rent ceux obtenus par Ajeagah et al.(2007) révélant la présence des formesde résistance de deux protozoairesentéropathogènes (Cryptosporidium etGiardia). Toutefois, la distribution des

C

Sp in

5 µm

C

Sp

5 µm

rane plasmique, Sp n : sporoblaste non individua-orocyste (C).

a membrane, Sp n : non individualized sporoblastyst (C).

B

tion au Lugol : oocyste à sporoblaste individualisé

ol coloration: oocyst with individualized sporoblast


tailles d’oocystes ne présente aucuneliaison avec la charge organique pourles petites et moyennes tailles contrai-rement aux grandes tailles. Ceci résul-terait probablement des sérotypes (auniveau de taille) du parasite ingéré pardes sujets infectés car en dehors depotentielles mutations, ledit parasiteproduirait des oocystes de même taillequeceux ingérés par l’hôte enamont. Lacorrélation significativement positive,obtenue entre la turbidité et les oocystesde grande taille, pourrait s’expliquer parla liaison (électrostatique et Van derValls) des oocystes aux particules ensuspension qui influencerait la turbidité

0

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100

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Nom

bre

d'oo

cyst

es/L

Sta�onsA

020406080100120

Ab1 Ab2 Ab3 Ab4 Ab5 Ab6Nom

bre

d'oo

cyst

es/L

Sta�onsC

Fig. 8. Variation spatio-temporelle des abondancesoocystes à sporoblaste individualisé (B) et oocystes

Fig. 8. Spatio-temporal variation of the abundanceoocyst with individualized sporoblast (B) and oocys

de l’eau. L’Abiergué est une source dedissémination des oocystes d’I. bellidans les quartiers de son bassin versantdépourvus de systèmes d’épuration carLiu et al. (2012) souligne que les pro-cessus d’ultrafiltration, de sédimenta-tion et le traitement chimique peuventréduire l’abondance des oocystesd’I. belli et par conséquent la transmis-sion d’isosporose.

Les observations au microscopedes oocystes de ce pathogène à émer-gence montrent une prédominancedes formes non sporulées (sporoblastenonindividualisé et sporoblaste indivi-dualisé) sur les formes sporulées qui

0

50

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150

200


Nom

bre

d'oo

cyst

es/L

Sta�onsB

des oocystes à sporoblaste non-individualisé (A),à sporocystes (C) pendant la période d’étude.

of oocysts with non individualized sporoblast (A),ts with sporocysts (C) during the study period.


sont responsables de l’hyperinfectionchez l’hôte (Navaneethan et al., 2012).La forte densité des oocystes imma-tures serait le résultat de la faible oxy-génation du plan d’eau. À ce propos,Garcia (2007) et Lindsay et al. (1997)relèvent que la sporulation a lieu dansun milieu oxygéné. Cependant, aucunecorrélation significative n’est obtenueentre la teneur en oxygène et lesoocystes sporulés. Néanmoins, unecorrélation positive et significative(p=0,05) est observée entre les ionsnitrates qui sont très mobiles dansl’eau et les oocystes à sporocystes. Or,les nitrates témoignent d’une oxygéna-tion assez bonne mais avec de l’oxy-gène sous forme liée dans l’eau(NOx) justifiant la corrélation avec lesoocystes sporulés. De manière glo-bale, les nitrates et les oocystes à spo-rocytes sont plus présents en GSP ettraduirait le drainage des intrants agri-coles et des matières fécales du bassinversant dans l’hydrosystème.

Les faibles densités des oocystes àsporocystes et les fortes densités desoocystes à sporoblaste non individua-lisé enregistrées au niveau spatio-tem-porel montrent une sporulation lente.Cette observation ne s’éloigne pas dutaux de sporulation de 27 % obtenu parJongwutives et al. (2007) sur lesoocystes excrétés.

Le pH a présenté une corrélationnégativement significative avec lesoocystes à sporoblaste non individua-lisé (p = 0,01) ainsi que le CO2 dissousqui a eu une corrélation négativementsignificative avec les oocystes à sporo-blaste individualisé et les oocystes àsporocystes (p = 0,05) (Tab. I). À cet

effet, la pollution ralentirait le proces-sus de sporulation et par conséquentinhiberait le caractère infectieux desoocystes de l’Abiergué et d’autresmilieux aquatiques pollués contraire-ment aux pH acides du tube digestif del’hôte qui accompagnent le cycle biolo-gique du parasite à travers la libérationdes sporozoïtes.

Bien que dans cette étude la tempé-rature n’ait aucune corrélation avec lesformes des oocystes, ce paramètreaurait un rôle déterminant dans le pro-cessus de sporogénèse car ce phéno-mène se déroule à une températureinférieure à 37 °C après excrétion(Lindsay et al., 1997 ; Garcia, 2007) etégalement dans un environnementoxygéné. Cependant, le climat étanttropical, les variations de températuresont trop faibles pour mettre en évi-dence un effet sur les oocystes (Tab. I).

Sur le plan temporel, la distributiondes oocystes montre une forte abon-dance durant la PSP et la GSP. Cecis’expliquerait par la contribution destorrents dans le processus d’apportd’oocystes contenu dans le péril fécalet les décharges domestiques dansl’hydrosystème lors des pluies. Pen-dant la saison des pluies, de grandesquantités d’eau sont drainées despentes du bassin versant jusqu’aucours d’eau lessivant les matièresorganiques et en plus, les riverains pro-fitent des pluies pour libérer les conte-nus des latrines à fosse perdue dansl’hydrosystème. Cela étant, lesoocystes sont également observésdurant la PSS avec des abondancesélevées, semblables à celles de la PSPet de la GSP.


CONCLUSION

Cette étude a permis l’isolement etla mise en évidence des oocystesd’I. belli dans l’Abiergué. Les analysesphysico-chimiques et biologiques révè-lent une pollution organique du coursd’eau et une contamination de l’amontà l’aval. Il est à noter une influencedes paramètres physico-chimiques surl’excystation et la viabilité de cet enté-ropathogène. Cependant, les oocystesnon sporulés (oocystes à sporoblastenon individualisé et ceux à sporoblasteindividualisé) sont les plus abondantsdans le milieu aquatique aussi bien auniveau des stations qu’au niveau dessaisons bien que la GSP ait enregistréles plus fortes abondances. La prédo-minance des oocystes non sporulésprouve l’existence d’une contaminationet exprime un risque d’exposition pourles populations même si les formessporulées les plus dangereuses sontmoins représentées. Par ailleurs, laprésence d’une gamme variée detailles d’oocystes du parasite est impor-tante pour le choix des filtres d’un éven-tuel système de traitement. Pour com-pléter cette étude, il est envisageabled’étudier les relations entre la qualité del’eau et le caractère infectieux desoocystes et faire un rapport entre lamorphométrie des oocystes et la sus-ceptibilité de l’hôte à l’isosporose.

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