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ACTIVIDAD LEISHMANICIDA Y

CARACTERIZACION QUIMICA DE LOS

EXTRACTOS DE Clivadium remotiflorum

“huaca” USADOS EN MEDICINA

MINISTERIO DE SALUDINSTITUTO NACIONAL DE SALUDCENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA

2007

Mblgo.M. Sc. ARÉVALO RAMIREZ, HERIBERTO Y

Mblgo. Dr. VARGAS VÁSQUEZ, FRANKLIN ROGERQ.P. ROJAS GUTIERRES, AMPARO

SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº3

ACTIVIDAD LEISHMANICIDA Y CARACTERIZACION QUIMICA DE LOS EXTRACTOS DE Clivadium remotiflorum“huaca” USADOS EN MEDICINA TRADICIONAL

2

ANEXO A

TITULO DE LA INVESTIGACIÓN

NOMBRES Y APELLIDOS COMPLETOS DE LOS INVESTIGADORES

INVESTIGADOR PRINCIPAL

Mblgo.M. Sc. HERIBERTO ARÉVALO RAMIREZ

Director del Laboratorio Referencial Regional de San Martín

DNI : 17815382 Teléfono 042-526589 / 0429972981

E-mail: [email protected]

COINVESTIGADORES

Mblgo. Dr. VARGAS VÁSQUEZ FRANKLIN ROGER

Profesor principal D.E Universidad Nacional de Trujillo

Escuela Profesional de Microbiología y Parasitología

DNI: 17870406 Teléfono: 222331

Q.P. ROJAS GUTIERRES AMPARO

Facultad : farmacia y Bioquímica

Departamento : Farmacognocia.

ACTIVIDAD LEISHMANICIDA Y CARACTERIZACION QUIMICA DE LOS EXTRACTOS DE Clivadium remotiflorum “huaca” USADOS EN MEDICINA

TRADICIONAL


3

ESTABLECIMIENTO, SUBREGIÓN O REGIÓN DONDE SE REALIZARÁ EL ESTUDIOLUGAR DONDE SE DESARROLLARA EL PROYECTO

LOCALIDAD E INSTITUCION DONDE SE EJECUTARA EL PROYECTOLOCALIDAD (Trabajos de Campo)Provincia de Moyobamba, San Martín y Rioja.

INSTITUCION:6.2.1.DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD DE SAN MARTÍN

- Laboratorio Referencial Regional de Salud Pública6.2.2. UNIVERSIDAD NACIONAL DEL TRUJILLO.

RESUMEN ESTRUCTURADO

Objetivo. Comprobar la eficacia de Clivadium remotiflorum “huaca” como planta leishmanicida en la

Región San Martín. Intencionalidad. Es nuestro interés contribuir al conocimiento y control de la

Leishmaniasis en nuestro país, y conocedores del universo potencial de las plantas naturales que posee

nuestra Región y que los pobladores usan con eficacia en forma empírica; pretendemos contribuir en la

solución de esta enfermedad, con el mejor conocimiento de las plantas medicinales cuyo efecto

antileishmaniásico es aceptado por la comunidad nativa de la Región San Martín. Justificación. Los

fármacos recomendados para el tratamiento de esta enfermedad como el Glucantime y el stibogluconato

de sodio, continúan siendo las drogas de elección, que actúan eficazmente como leishmanicidas, pero

presentan inconvenientes como recaídas, resistencias, efectos colaterales importantes como cambios en

el electrocardiograma, aumento de los valores enzimáticos en el hígado y otros. Contrariamente, la

“huaca” es usada en forma tópica sin producir alteración internas de la persona afectada, de allí la

importancia de su estudio. Diseño Metodológico. Se realizará un estudio experimental longitudinal y

controlado de grupos paralelos en animales. Material y Método. Se obtendrán extractos de plantas e

infusiones de Clivadium remotiflorum. La eficacia se determinará definiendo la dosis que muestre

actividad en animales infectados La muestra estará constituída por cuatro grupos de animales infectados

con leishmania. Uno de ellos será expuesto al extracto de Clivadium remotiflorum, otro a la infusión del

mismo, un tercero a glucantime y un cuarto grupo servirá como control. Cada grupo estará constituido por

15 animales. Las observaciones del experimento se realizarán en el Laboratorio de Referencia de la

Región, los cultivos en el Hospital de Lamas y los extractos e infusiones de la planta en los laboratorios

de la Universidad Nacional de Trujillo. Los resultados se expresarán como dosis mínima eficaz para cada

presentación y serán comparados contra el grupo glucantime y control.


4

Monto Solicitado . S/. 26,150.00

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMALa Leishmaniasis constituye una de las siete enfermedades prioritarias por la

Organización Mundial de la Salud (OMS), son afecciones cosmopolitas o

endémicas que originan importantes problemas en la salud pública, debido a la

amplia diversidad en las formas clínicas, especialmente con aquellas personas

que tienen la forma mucocutánea, las que provocan mutilaciones que son difíciles

de tratar; por lo que producen un impacto psicológico en las personas afectadas

(53), (10).

En el Perú se han encontrado cinco especies de Leishmania: L. peruviana, L.

brasiliensis, L. guyanensis, L amazonensis y L. lainsoni, siendo la de mayor

importancia epidemiológica la Leishmaniosis cutánea andina "UTA" y la

Leishmaniosis selvática "ESPUNDIA"(8), (23).

El Perú posee una variedad topográfica y diversidad de climas que favorecen la

existencia de numerosas plantas, poco conocidas, por lo que su estudio puede

otorgarnos posibilidades de aplicación práctica en la terapéutica médica

especialmente aquellas que tienen actividad leishmanicida (27).

Las investigaciones llevadas a cabo en las dos últimas décadas en bioquímica y

biología molecular en estos tripanosomatídeos, han mostrado numerosos

"blancos" terapéuticos potenciales pero muy pocos compuestos han sido

seleccionados para uso clínico. Uno de ellos la Eflomithina, está restringida al

tratamiento humano de la Tripanosomiosis africana, algunos azoles y el

Allopurinol para las Leishmaniosis y la enfermedad de Chagas aunque su


5

desarrollo no ha pasado de los ensayos clínicos (22), (37), (38), (39), (40). (7),

(24), (25), (40), 44).

JUSTIFICACIÓN Y USO DE LOS RESULTADOS

FUNDAMENTO TEÓRICOSegún datos estadísticos, la Región San Martín (1999), indica que en los años de 1992 se

presentaron (176 casos), en 1993 (234 casos), en 1994 (196 casos), en 1995 (432 casos), 1996

(1030 casos), 1997 (704 casos), en 1998 (1051 casos), en 1999 se ha tenido 1031 casos y hasta la

semana epidemiológica 44 (2002) se han registrado 266 casos reportados, predominando la forma

cutánea de la enfermedad.

Los medicamentos utilizados más frecuentemente para el tratamiento de esta enfermedad son el

Glucantime y el stibogluconato de sodio; pero es conocido sus efectos adversos en los pacientes

que los reciben y la inaccesibilidad por los costos..

Por otro lado los productos usados empíricamente por la población nativa como la

“huaca” es usado en forma tópica (sin producir alteración internas de la persona -

presuntivamente).

Los extractos de plantas y las infusiones (ExPl) serán obtenidos en el Laboratorio

Referencial Regional de Salud Pública de San Martín donde la planta será

recolectada de su ambiente natural y analizados en los laboratorios de la

Universidad Nacional de Trujillo seleccionando en primer lugar con las dosis que

muestren actividad en animales infecta.

PROBLEMASon eficaces los extractos de Clivadium remotiflorum “huaca” en el tratamiento

de la Leishmaniasis cutánea y mucocutanea in vitro e in vivo, utilizados con

bastante éxito por los nativos de la región San Martín?


6

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓNObjetivo General:Comprobar la eficacia de Clivadium remotiflorum “huaca” como planta leishmanicida en la Región San Martín, 2003-2004.

Objetivos Específicos:

Determinar la eficacia antileishmanicida “in vitro” e “in vivo” de los extractos y establecer la(s) fracción(es) activa(s) de Clivadium remotiflorum “huaca”.

Extraer e identificar los fitoconstituyentes del producto natural C. remotiflorum “huaca” utilizados en los extractos acuosos y etanólicos según marchas fitoquímicas.

HIPÓTESIS

Los extractos de Clivadium remotiflorum “huaca” son eficaces en el tratamiento de la Leishmaniasis cutánea y mucocutanea in vitro e in vivo en la región San

METODOLOGÍA TIPO DE ESTUDIOEXPERIMENTAL LONGITUDINALAREA DE ESTUDIO

REGION SAN MARTÍN: Tiene una superficie de 51,253,31 km2 y una población

estimada en 643,233 habitantes, está ubicada en el sector nororiental del País.

Corresponde a la región natural de rupa-rupa o selva alta. El clima es cálido en las

márgenes del rio Huallaga y templado en las cumbres de la Cordillera Central.

Tiene 10 Provincias: Bellavista, Huallaga, Lamas, Mariscal Cáceres, Moyobamba,

Picota, Rioja, San Martín, Tocache y el Dorado. La producción agropecuaria es

principlamente arroz, maiz, cacao, algodón, caucho, yuca, plátano, limón, soya,

caña de azucar, frutales, tabaco y coca. El Producto bruto interno es de 1,750

millones de nuevos soles (1996). Las principales ciudades de la región son

Tarapoto, Moyobamba, Rioja, Lamas, Saposoa que cuentan con limitados

servicios de agua potable y de eliminación de excretas, en especial en viviendas

periurbanas y rurales, las que tienen como principal material de construcción

paredes de adobe o carrizo y barro, techos de calamina o de ramas de palmera y


7

en general piso de tierra, condiciones que son favorables para la presencia y

persistencia del vectores de enfermedades metaxénicas entre ellas las de la

leishmaniasis. La distribución de Clivadium remotiflorum es en toda la región,

pero principalmente las comunidades nativas que reportan su uso es la zona del

alto Mayo.

CRITERIOS DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÓNCriterios de Inclusión: No aplicable, pues, no se incluyen estudio de personas

Criterios de Exclusión: No aplicable. Los hamsters serán seleccionados

DISEÑO MUESTRALRecolección y Secado Para la colecta .se requerirá cuchillo de monte, tijeras

de podar y el material necesario para la

conservación de los ejemplares; la cantidad recolectada será lo

suficientemente adecuada para permitir realizar las pruebas químicas,

biológicas y su identificación correspondiente mediante el envío de ejemplares

a Herbarios nacionales e internacionales de referencia (28).

El secado se realizará en una habitación en la que no haya contacto directo

con el sol, sobre bolsas o papel esparciendo uniformemente la planta y

cambiándola (papel y bolsas) cada 24 horas.

Pulverización:

En caso de órganos frágiles, como hojas, se colocarán correctamente en el

moledor Moulinex. Organos duros, serán previamente desmenuzados con una

tijera, para ser molidos, posteriormente procederemos como en el caso

anterior.

Pruebas Químicas Preliminares:

Estas pruebas se realizarán en todas las plantas recolectadas, ya sean en


8

toda la planta o en órganos específicos para detectar los siguientes

componentes:

Alcaloides, Flavonoides, Saponinas,Taninos,Quininas, Esteroles y terpenos.

Extracción por Maceración:

En cada provincia se determinarán localidades con antecedentes de uso de

Clivadium remotiflorum en el tratamiento de leishmaniasis, de donde se

extrerán la planta y se continuará con su proceso en el Laboratorio de

Referencia Regional y en los laboratorios de la Universidad Nacional de

Trujillo.

Estudio etnofarmacológico y botánico:

Las investigaciones etnofarmacológicas y botánicas se realizarán de la

plantas localizadas en la provincia de Moyobamba, Rioja y San Martín, zonas

endémicas de Leishmaniasis cutánea y cutánea mucosa y localizadas a

menos de 2000 m.s.n.m. tomándose como criterio la existencia de

condiciones ecológicas, la presencia del vector, y personas con lesiones

características de “uta” los que han sido comprobados por los autores del

presente proyecto (51).

La planta será identificada primariamente por grupos étnicos locales,

luego por personal de la Universidad Nacional de San Martín, del Museo

Botánico de la Universidad Nacional de Trujillo, el Museo Botánico Nacional

de Lima

Muestreo de plantas:

Se realizarán de las plantas completas en un número suficiente para obtener

una cantidad adecuada de la sustancia activa.

Preselección de las plantas:

Selección Fitoquímica:

Se dispone de bibliografía sobre la selección de plantas recogidas al azar en

diversas zonas geográficas para grupos de compuestos, entre ellas de

Clivadium remotiflorum. Suele considerarse que los datos procedentes en

éstos informes de selección son de poco valor para el descubrimiento de


9

productos naturales biológicamente activos (28), (51).

Estudio Quimiotaxonómico:

Consistirá en estudiar la tasa de obtención de medicamentos útiles

conocidos o sus derivados y extender las investigaciones mediante un

procedimiento taxonómico conexo. Tendrá interés para identificar nuevas

fuentes indígenas de medicamentos conocidos útiles, lo cual puede

conducir a una reducción del costo del medicamento (28).

Al miligramo disuelto en los 40 ul. de DMSO se añadirá la cantidad

necesaria del medio en el que se cultivó los parásitos (libre de ellos) para

obtener la concentración deseada, se agitará nuevamente para obtener

una distribución homogénea del principio activo. Para asegurar una

esterilidad completa, se pasará por filtros millipore 0.22 um.

Todas las concentraciones probadas se preparán al doble de la

concentración en estudio, para que al final de la experiencia la

concentración sea la deseada. Preparación de los parásitos:

Los parásitos serán tomados en la fase de crecimiento logarítmico, siendo

verificados el buen crecimiento de los promastigotes en las diferentes

cepas con las que se trabaja, evitando contaminaciones de cualquier tipo.

Generalmente se realizará diluciones 1:10 para el recuento de los

promastigotes, se separá los cúmulos de parásitos succionando repetidas

veces con la micropipetas.

Se tomará una alícuota de esta dilución y se llevará inmediatamente a la

cámara de Neubauer para su respectivo contaje. Se contarán los parásitos

que se encuentran en la totalidad de los cuadrantes. Para determinar el

número de parásitos presentes en cada mililitro se empleará la siguiente

fórmula:


10

N° de parásitos = (N° células ) ( factor de dilución) ( factor de conversión

de cámara)

EJEMPLO:

N° parásitos / ml = (82) (10) (1000) = 8.2 x 106 parásitos/ml

Después de conocer el número de parásitos presentes por cada ml se

ajustará a una concentración de 1 x 106 p/ml.

Con una micropipeta se introducirá 100 ul. De parásitos a cada pozo,

equivalente a 100 000 parásitos e inmediatamente se añadirá la misma

cantidad de la droga, que al mezclarse con los 100 ul de los parásitos, su

concentración tanto de los parásitos como el de la droga disminuirá a la

mitad.

Cada concentración probada se realizará por triplicado para disminuir

errores en la lectura.

En los pozos testigos se sustituirán la droga con el medio de cultivo libre de

parásitos. Aquellos pozos que servirá de control para el disolvente DMSO

se sustituirá la droga con la misma cantidad de disolvente empleado en la

disolución del extracto. Se flameará la cubierta de las placas antes de

cubrir las mismas y luego se llevará a estufa de cultivo a 28 °C para

posteriormente realizar la lectura a 72 horas:

+++ : Indicará lisis total.

++ : Inmovilidad y falta de desarrollo (50% de sobrevivencia).

+ : Disminución de la motilidad (25%de supervivencia).

0 : Parásitos en similar condición que testigos (todos vivos).

Pruebas biológicas In Vivo:

Conservación de Cepas de Leishmania in vivo:

Se matará al hámster con cloroformo.

Las patas traseras que presente el granuloma, serán cortadas y se

lavarán con alcohol yodado y posteriormente con etanol al 70 %.


11

Extraer el granuloma.

Se colocarán los granulomas en el mortero que contenga PBS 7.2 y

procederá a molerlo.

Se centrifugará la solución 5 minutos a 500 r.p.m.

Realizado esto se eliminará el sedimento y se recuperá el

sobrenadante, luego se añadirá 5 ml de RPMI y se cuantificará los

amastigotes para la inoculación.

Infección o inoculación: Para ello se tomará gafas de precaución y

guantes, extrayéndose la suspensión en una jeringa de tuberculina para

finalmente proceder a infectar al hamster.

Estudio de los productos in vivo (en hamster):

Se necesitará grupos de 10 hamster de 7 a 10 semanas y del mismo sexo.

El peso de cada grupo deberán ser homogéneos.

Preparación de los amastigotes para la infección:

Se realiza como lo descrito anterioprmente

Tratamiento:

Para iniciar el tratamiento será necesario obtener el granuloma de

dos a tres semanas de evolución.

La duración del tratamiento será de 10 a 15 días (según el

Protocolo).

La administración de la droga podrá ser por vía intralesional,

intraperitoneal u oral.


12

Lectura:

Una vez por semana se medirá con un “Shell tester”.

El tiempo de medida de los granulomas dependerá de la actividad

de los productos; normalmente se mide durante 8 semanas.

En caso de que el producto presente actividad de medición podrá

continuarse un lapso de 6 meses

D Variables principales

Eficacia leishmanicida in vitro

Eficacia leishmanicida in vivo

Extractos de Clivadium remotiflorum

EFINICIONES OPERACIONALES DE LAS VARIABLESPROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN

Procedimiento: Personal investigador y personal de comunidades nativas y

algunos de puestos de Salud de la DIRES San Martín, realizarán la encuesta

entobotánica y la recolección de las plantas de Clivadium remotiflorum.

Instrumentos:

Encuesta etnobotánica. Se aplicará una encuesta al 30 % de pobladores de

localidades con antecedentes de tratamiento de leishmaniasis con “huaca”.

Tiempo de colección: 3 meses

INDICADORES PARA EL MONITOREO

Supervisar la colecta del espécimen vegetal.

Control periódico del crecimiento parasitario


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Eficacia in vitro e in vivo

CONTROL DE CALIDAD Confirmación de la especie Clivadium remotiflorum “dacha” por el Museo botánico

de la UNT.

Viabilidad de línea celular para estudio in vitro

Calidad química de los extractos

ANÁLISIS DE LOS DATOS (Mencionar las variables dependientes e independientes, las pruebas estadísticas a utilizar, y el software)

ASPECTOS ÉTICOS

No aplicable

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Plantas Medicinales del Perú. Trabajo presentado al I Curso

Internacional de Fitoterapia, Lima.2002

2. AKEREKE, O.1990. Plantas ANGULO, P. y col; 1994. Aspectos

Teóricos-Práctico para el desarrollo medicinales y atención primaria de

Salud; un calendario para la acción; Bol. De Med. Esenciales N10.

3. BERMAN J. D y WYLER D. J. 1980. An in vitro model for investigation of

chemotherapeutical study of some Bolivian isoenzimic strains.

4. BRAVO BARRERA (J. A.), 1992. Estudio Fitoquímico de Alcaloides en la

especie Aniba muca Reuíz y Pavón. Tesis de Grado UMSA. ORSTOM,

La Paz, 119p., Multigrup.

5. BRAZIL P. R. y GILBERT B. 1976. The actino of oxamniquine on

Leishmania braziliensis in hamsters, Rew. Inst. Med. Trop. 18 (2): 87-88.


14

6. BRUNETON (J.M.), RICHOMME (P), GUINAUDEAU (H.), ANGELO(A.),

MUÑOZ (V.), FOURNET (A.), 1992. Leishmanicialdad Activity of Aniba

cenalilla (Lauraceae) in BALB/c Mice infected whit Leishmania

amazonensis. Structural Elucidation of maion Alkaloids, Communication

prèsentee auz Trosiemes Journées internacionales de Biopathologie

Antine, La Paz, Bolive, 15-18 septembre.

7. CASTILLA, J.1994. Quimioterapia Experimental con Moléculas de

nuevas síntesis, frente a la Leishmaniosis Visceral y la Enfermedad de

Chagas. Tesis Doctoral. Univ. Granada- España.

8. CORDERO, F; ZEVALLOS, J; SIHUINCHA, M; 1991. Aspectos

Epidemiológicos de la Leishmaniasis Tegumentaria Americana en el

Distrito de Santa Cruz. Ancash. Dianóstico; 28: 11-14.

9. CUBA CUBA, C. NETO, E. COSTAJL; BARRETO AC, MARSEDEN PD;

1986. El cultivo in vitro como instrumento práctico para el Diagnóstico y

aislamiento primario de Leishmania braziliensis. Rev. Inst. Med. Trop.

Sao Paulo; 28: 317-374.

10.CHANG, K. y col.1985. Leishmaniasis. Elsevier Amsterdam- New York.

Oxford.

11.DEHARO (E.). MORETTI (C.), MUÑOZ (V), SAUVAIN (M.) y RUIZ (E.),

1992. Aspects de la recherche en chimiothérapie antiparasitaire en

Bolive. IBBA- ORSTOM. S.T.P. PHARMA PRATIQUES N 3, Vol 2, pp.

189-192.


15

12.DOMINGUEZ A. X. 1973. Metodos De Investigación Fitoquímica. México.

Limusa.

13.FARNWORTH, N.R. 1984. Blanco de datos computarizado para plantas

Medicinales. Foro mundial de la Salud, Vol5.

14.FOURNET (A.), MUÑOZ (V.), ANGELO (A.), 1988. Actividad in vitro de

los alcaloides de tipo bisbesiliso-quinoleico sobre Leishmania ssp y

Tripanosoma cruzi. Congreso extraordinario IBBA, LA Paz, Bolivia,

Communication.

15.FOURNET (A.), MUÑOS (V.), MANJON (A. m.), ANGELO (A.),

HOCQUEMILLER (R.), CORTES (D.), CAVE (.), BRUNETON (J.), 1988.

Activité antiparasitaire d alcaloides bisbenzylisoquinoleiques. I: Activité in

vitro sur des promastigotes de trois souches de Leishmania. Journal of

Ethnopharmacology, Vol.24, pp. 327-335.

16.FOURNET (A.), MUÑOZ (V.), ANGELO (A.), AGUILAR (M.), 1990.

Plantes médicinales bolivienes antiparasitaires. Comm. VII Congres

international de Parasitologie, (ICOPA), París aout, 1990.

17.FOURNET (A.), ANGELO (A.) MUÑOZ (v.), HOCQUEMILLER (R.).1992.

Effect of natural PRODUCTS IN BALB/C, mice infected with Leishmania.

Amazonensis and venezuelensis. Tropical medicine and Parasitology

Vol. 43, pp. 219-222-

18.FOURNET (A.), ANGELO BARRIOS (A.), MUÑOZ (V.),

HOCQUEMILLER (R.), CAVE (A.), BRUNETON (J.), 1993. 2- Subtituted

Quinoline Alkaloids as Potential Antileishmanial Drug. Antimicrobial

Agents and Chemotherapy. Vol. 37, pp. 859-863.


16

19.FOURNET (A.), ANGELO (A.B), MUÑOZ(V.), 1994. Leishmanicidal and

trypanocidal activities of Bolivian medicinal plants. Journal of

Ethnopharmacology. Vol 41, pp. 19-37.

20.GARCIA- BARRIGA, M.; 1986. Aplicabilidad de las plantas medicinales

en la terapéutica moderna. Rev. Acad. Colomb. Cienci. Cienc. Exact. Fis.

Nat. 16 (61): 79-89.

21.GUERRA, H.1985. Distribución de Leishmaniosis en el Perú..Elsevier.

Ámsterdam. New York. Oxford.

22. IRVINE, J. y col. 1991. Bioquímica y Biología Molecular en

Tripanosomatidos en relación a blancos Terapéuticos. FEMS Microbiol.

Lett. 96: 67-72.

23.LOZOYA, X. 1993. Función de las plantas medicinales en la medicina del

siglo XXI, en la Investigación Científica de la Herbolaria Medicinal

Mexicana, Secretaría de Salud, México. P.:225.

24.LLANOS. E.1984. Estudio Clínico, Evolutivo Da Leishmaniose em área

endémico de Leishmania braziliensis braziliensis, tres bracos, Bahía..

Tesis de Maestria en Medicina tropical.

25.LLANOS . E.1991. Tratamiento De Leishmaniosis mucosa: Análisis de

los Factores asociados con la Respuesta Terapéutica a los Antimoniales

pentavalentes. Tesis para Obtar el Grado de Doctor de Medicina.

26.MESA V. Y col. 1996. Resistencia de Amastigotas frente a

Quimioterápicos. Agents and Chemotherapy y 40: 648-690.

27.MIRANDA M., ORTIZ, S. RODRÍGUEZ, F.,CHAFLOQUE, M., 1995


17

Leishmaniasis: Variables clínicas de las formas cutáneas en áreas andinas

de la Región La Libertad, Bol. Soc. per. De Enf. Infec. Y Trop,, 4(2):111.

28.MUÑOZ, (V.), FOURNET (A.)1987. Obención de la Fracción Activa y

Estudio de la Actividad Leishmanicida in vitro sobre Promastigotes de la

especie vegetal Munnozia maronii. Tesis de Grado de Licenciatura en

Farmacia y Bioquímica. La Paz. Bolivia.

29.MUÑOZ (V.), SAUVAIN (M.) DEHARO (E.), RUIZ (E.), MORETTI (C.),

CARON (C.), PORCEL (A.), MASSIOT (G.), LEMEN-OLIVIER (L.). 1992.

Actividad leishmanicida de alcaloides indólicos aislados de Pescheria van

heurki (Meull-Arg) L. Allorge. Commucication présenteé aux Trosiemes

Journées internacionales de Biopathologie Andine, La Paz, Bolivie, 15-18

septembre.

30.MUÑOZ (V.), MORETTI (C.), FOURNET (A.), SAUVAIN (M.), RUIZ (E.),

1993. Activité leishmanicide des drogues employées dans la médicine

tradicionelle bolivienne, Conférenci au 1er Congés international de

Plantes Médicinales et phytothérapie, Tunis, 19-20 mai.

31.OPS.- OMS. 1996. Epidemiología y Control de la Leishmaniosis en las

Américas por País o Territorio. Cuaderno Técnico N 44.

32.ORÉ R. 1994. Cultivo de plantas Medicinales en el Perú, viabilidad y

sostenibilidad. Trabajo presentados al I Curso Internacional de

Fitoterapia, Lima.

33.OLLIARO E. Y col. 1993. Modo de Acción de antimoniales

pentavalentes. Parasitol Today. 9:323-328.


18

34.OSUNA A. y col. 1980. Cultivo in vitro de T. cruzi, sobre células HeLa:

Estudio del ciclo intracelular. Rev. Ibérica de parasitología. 2,pp. 189-

201.

35.OSUNA A. y col. 1983. Some factors afffecting the in vitro invasion of

HeLa cells by T. cruzi. I. J. Parasitol. 14, pp.253-257.

36.OSUNA, A y col. 1983. Estudio Ultra Estructural de la acción de dos

derivados benzo (de) Isoquinolil-1,3-diona, sobre T. cruzi. Rev. inst.

Med. Trop. Saul Paulo. 25, pp. 133-8.

37.OSUNA, A y col. 1983. Estudio Ultra Estructural de la acción de dos

derivados benzo (de) Isoquinolil-1,3-diona, sobre T. cruzi. Rev. inst.

Med. Trop. Saul Paulo. 25, pp. 133-8.

38.OSUNA A. y col. 1984. Some factors affecting the in vitro invasion of

HeLa Cells by Trypanosoma cruzi. Int. J. Parasitol. 14, 253-257.

39.OSUNA A. y col. 1987. Antitripanosomal actino

cisdiamminedichloroplatimun II analogs. J. Parasit. 73, pp. 272-277.

40.OSUNA, A. y col. 1988. Chemother. 34, p.127. Citado por: MMESA-

VALLE, C.1991. Tesis Doctoral. Quimioterapia Experimental frente a la

Leishmaniosis Visceral. Univ. Granada-España.

41.OSUNA A. y col. 1990.Influence of electrolytes and non-electrolytes on

growth and differentiation of Trypanosma cruzi. Cell Differ. Develop. 30;

pp. 89-95.

42.OSUNA A. y col. 1990. Tripanosoma cruzi, Calcium ion movement during

internalitation in host HeLa Cells. Internation. Journ, parasitol.; 20,5,pp.

673-676.


19

43.OSUNA A. y col. 1993. Invasión mechanism of the Methaciclic forms of T.

cruzi in nonfagocitic host Cells. Biol. Res. Vol. 26, 1, pp. 19-26.

44.PANOSIAN C. y col. 1984. Treament of experimental cutaneus

Leishmaniosis whit liposome- intercalated Anfotericin B. Antimicrobial

agents and chemotherapy, 25(5): 655-6.

45.PEREZ J., OGUZUKUN E., INGA R., LOPEZ M., MONGE J., PAZ L., et

al., 1994. Natural Leishmania infección of Lutzomyia sp in Perú . Trans.

Rev. Soc. Trop. Med. Hyg; 88: 161-164.

46.RMIKUI, A. 1997. Estudios Inmunológicos de la Leishmaniosis Visceral

en la Cuenca Mediterránea Sur. Tesis Doctoral. Univ. de Granada-

España.

47.ROJAS E. SCORZAT, 1995. Leishmania braziliensis: Aislamiento de

lesiones por inoculados de hámsters con o sin adición de lisado de

glándulas salivales de lutzomyia. Rev. Saude-pública; 29(19:1-5.

48.RUTTER A. R.,1990. catálogo de plantas útiles de la amazonía peruana.

Inst. Ling. De Verano ministerio de Educación.

49.VARGAS, F. Y cols. Estudio in vitro de la Actividad Antimicótica de los

Extractos foliares de Nerium oleander L. Frente a Dermatofitos y

Candida albicans. Congreso Mundial de Medicina Tropical. Oct. 1999.

Lima .Perú.

50.VARGAS, F. Y cols . 1999.Determinación de la Actividad Antiinflamatoria

de Aloe vera en Rattus rattus. Var. Albinus. . Congreso Munial de

Medicina Tropical. Oct. 1999. Lima .Perú.


20

51.VARGAS, F. Y cols .1999. Determinación de la actividad

Antiileishmaniásica de los Fitoconstituyentes de Pernettya próstata en

Mesocrisetus auratus infectados con Leishmania peruviana. .

Congreso Mundial de Medicina Tropical. Oct. 1999. Lima .Perú.

52.VARGAS F. Y cols .1999. Efecro in vierto de Aloe vera (SABILA) sobre

Candida albicans y Trichomonas vaginalis. . Congreso Munial de

Medicina Tropical. Oct. 1999. Lima .Perú.

53.WORLD HELTH ORGANIZATION. 1990. Control of the leishmaniasis,

Technical report 793. Genérica:1-158

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADESACTIVIDADES 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Aplicación de la encuestaetnobotánica X XRecolección de plantas X X X XDeterminación de fitoconstituyentes X XEvaluación de eficacia in vitro X X X XDeterminación de eficacia in vivo X X X XAnálisis de datos XInforme final X

PRESUPUESTO DETALLADOBIENES:

5.3.11.30. BIENES DE CONSUMO

BIEN CANTIDAD COSTO S/.


21

Alimento balanceado.Antibióticos.Metanol x 1 lt.Guantes descartables N° 7.Jeringa tuberculina.Microplacas Tissue Culture Clustre.Hamster Película Ekta chrome 135 mmx 36.Película Kodak color 135 mmx 36.Dimetil sulfóxido.x 1 lt.Tijera de Campo.Matraz Kitasato. X 1 lt.Papel Bond A4 x millarAgar Bacteriológico x 1 lb.Cintas de pH Plumones indelebles ArtlineTinta para impresoraCámara fotográficaReactivos para experimento in vitro

150 kg20 ampollas02 unidades3 caja x 100150 unidades50 unidades100 unidades10 rollos10 rollos01 unidad01 unidad04 unidades03 unidades01 unidad02 unidades10 unidades04 unidades01 unidad02 kits

150.00200.00100.00300.00120.00500.00

1000.00180.00120.00150.00

30.00200.00100.00600.00150.00100.00350.00

1500.005000.00

SUBTOTAL S/ 10 850.00

SERVICIOS: CANTIDAD COSTO S/.

Pasajes a MoyobambaViáticos a MoyobambaPasajes a RiojaViáticos a RiojaPasajes a Trujillo-Tarapoto Viáticos TrujilloMovilidad local para personal de comunidades nativasMovilidad local para personal de laboratorio

2viajes/ 3 personas3días / 3 personas 2viajes/ 3 personas3días / 3 personas2viajes/ 3 personas3días / 3 personas 20 días /3 personas

30 días x 5 personas

300.001200.00

300.001200.00

800.001500.001500.00

3000.00

SUBTOTAL S/. 9800.00

OTROS GASTOSDESCRIPCION CANTIDAD PRECIO

UNITARIOPRECIO TOTAL


22

Construcción: Mueble de tamaño : 120 x 100 cm x 150 cms

Mueble de tamaño : 60 x 100 cm x 150 cms

1

1

600

450

600

450

Hamsters 30 50 1500

Línea celular 1 2500 2500

SUBTOTAL S/. 5500.00

TOTAL PRESUPUESTO S/. 26,150.00

PRESUPUESTO MENSUALIZADORUBRO/MES

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 TOTAL

RECURSOS HUMANOS:Viajes y Viáticos

1000

1000

1000

1000

1000

1000

1000

1000

1000

800 9800

Bienes 2000

3000

2000

2000

1000

850 10850

Otros 2000

2000

1000

500 5500

TOTAL 3000

6000

1000

4000

1000

4000

2000

1000

1850

1000

1300

26150

ANEXO: Currículum vitae (Máximo tres páginas A4 por investigador)

Hacer un breve currículum vitae no documentado de los investigadores participantes describiendo: (i) estudios, grados y títulos profesionales, (ii) área de trabajo, cargo y responsabilidades dentro del establecimiento de procedencia, (iii) experiencia profesional con relación al tema de estudio (si la hay) y, (iv)


23

experiencia previa en estudios de investigación y relación de trabajos publicados (si la hay).

CURRICULLUM VITAE

DATOS PERSONALES

NOMBRE : HERIBERTO ARÉVALO RAMÍREZ

Fecha de Nacimiento : 16 Marzo de 1961

Nacionalidad : Peruana

Documento de Identidad : DNI : 17815382

Pasaporte : 1161831

Brevete : X-003402

DATOS DE COLEGIACIÓN : CBP N° 1903 APM :

DIRECCIÓN Y TELEFONO : Jr. Yurimaguas 128 – La Banda /Tarapoto

: 042-522625 / 9972981

E-mail : [email protected]

FECHA DE NOMBRAMIENTO MINISTERIO DE SALUD : 31 diciembre de 1990

FECHA DE NOMBRAMIENTO UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTIN :

Enero 1995

RUBRO 1: GRADOS Y TITULOS, ESTUDIOS DE POSTGRADO

Grado académico Bachiller en CC Biológicas. 05/09/90. Univ. de Trujillo

Título Profesional Titulo Biólogo-Microbiólogo. 10/09/90. Univ.de Trujillo

Grado académico Master en Ciencias.Enero 2002. Fac. Med. Univ.de Chile

OTROS ESTUDIOS

Diplomado en gerencia de Proyectos de Inversión Pública. 2003.Univ.R.P.

Diplomado en Gerencia y Liderazgo Administrativo. Abril 2005. C.L.A.P.Lima.

RUBRO 2: EXPERIENCIA PROFESIONAL

Director del Laboratorio Referencial Regional de Salud Pública. 1993-1996 DIRES-SM


24

Microbiólogo del Centro de Control de Enfermedades Transmisibles.1996-1998 DIRES-SM

Director del Laboratorio de Análisis Clínicos y Microbiológicos.2000. UNSM. Integrante del Comité de Becas. DIRES-SM.2001

Director de Recursos Humanos. DIRES-SM.2001- 2002

Miembro del Comité de Defensa Civil.2001. DIRES-SM

Miembro del Comité de Vigilancia de las Enfermedades Transmisibles. 2001-

2002.DIRES-SM

Miembro del Comité técnico de elaboración de proyectos de inversión. 2002.

DIRES-SM

Director del Laboratorio Referencial Regional .2003- 2004 DIRES-SM

Miembro Comité de Análisis Integrado de salud.. DIRES-SM. Octubre

2005.Tarapoto

Presidente Comité de Investigación y capacitación del Laboratorio de Salud

Pública. Diciembre 2005. DIRES-SM

Jefe del Laboratorio de Análisis Microbiológicos. Instituto de Investigación

Materno Infantil. Enero -actualidad 2007.

Director del Laboratorio Referencial Regional .Feb.2007-actualidad. DIRES-SM

RUBRO 3: EXPERIENCIA DOCENTE

Docente.Auxiliar Contratado.. Tiempo parcial. Fac.Obstetricia1990-1995

Docente.Auxiliar Nombrado.. Tiempo parcial. Fac.Ciencias de la Salud. 1996-

2000.

Docente.Asociado Nombrado.Tiempo completo Fac. CC.Salud.2001-2007

RUBRO 4: TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN, PROYECCIÓN SOCIAL Y

PUBLICACIONES

4.1. TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN


25

Diseño de un sistema doméstico de agua potable en la zona rural de la región

San Martín Coautor.1999 - 2000. Resol. Decanal de la UNSM.2002

Investigación Epidemiológica de la Calidad del Aire, Suelo Agua y

Neumoconiosis.Autor.2004. DIRES-SM

Actividad Leishmanicida y caracterización química de los extractos de

Clivadium remotiflorum, huaca, usados en medicina tradicional. Aprobado

RJ.N° 694-2005-J-OPD/INS. En proceso de Ejecución.

4.2: PUBLICACIONES

Trichomoniasis en Gestantes atendidas en Centros Asistenciales de Tarapoto

Boletín Peruano de Parasitología May-96, p35

Determinación de Ig Gs Anti Trypanosoma cruzi en sueros humanos mediante

métodos Inmunométricos Boletín Peruano de Prasitología , Setiembre '97

Leishmaniasis en San Martín 95-96. Sociedad Chilena Inmunología. Boleytín

Sociedad Chilena de Inmunología Setiembre '97/99

Experiencias del Manejo de las Enfermedades Transmisibles en la Región San

Martín Evaluación Regional Integrada PP188

Microorganismos asociados a secreciones vaginales Boletín Peruano de

Prasitología, 96

Prevalencia de leptospirosis en la Región San Martín. Coautor. Revista de

medicina experimental INS. 2003.

Calreticulina de Typanosoma cruzi (rTcCRT): valor diagnóstico Libro resumen

V. Congreso de Parasitología.2003

Aplicación De un Programa para la disminución de las IIH. Autor.2001-2002

Revista de Medicina Experimental. INS. 2003

Eficacia Terapéutica de Phyllantus niruri en microorganismos asociados a

vaginitis. Autor. 2003-2004 Revista UNSM.2005

Sensibilidad antibiótica de microorganismos asociados a IIH, en el Hospital

Banda de Shilcayo..Autor.2001-2002 Publicado en Revista INS/UNSM


26

Eficacia terapéutica de Chenopodium ambrosoides en enteroparásitos 2001-

2002. Coautor. Tesis aprobada y Publicada

RUBRO 4.3. PARTICIPACIÓN EN EVENTOS ACADÉMICOS Y CURSOS DE PERFECCIONAMIENTO

Curso Pre-Congreso Inmunología Parasitaria.02 / 07 / 95

Congreso Peruano de Parasitología. 06 / 07 / 95

Curso: "Vigilancia de las enfermedades febriles exantemáticas (EFES) -

Expositor. 11 / 10 / 95

Curso de Capacitación Integral a los Inspectores del Dengue. – Expositor. 21 /

12 / 95

Seminario-Taller: Evaluación Nacional del Programa de Control de Malaria y

otras Enfermedades Metaxénicas. 02/ 96. Lima

Seminario Taller "Métodos Estadísticos Aplicados a las Ciencias Humanas". 02

/ 12 / 95. Tarapoto.

Curso: Biología de la Relación Hospedero - Parásito en Trypanosoma cruzi y

en Echinococcus granulosus. 26 / 07 / 96. Arequipa.

Curso: Biología Molecular e Inmulogía de Parásitos. 09 / 97. Arequipa.

"III Seminario Nacional de Salud Pública y XVII Jornadas de Salud Pública". 11

/ 97. Lima.

Evaluación del Programa Nacional del Control de la Tuberculosis en Perú – 97.

17 / 04 / 98. Lima.

"I Jornada de Investigación Docente. 05 / 98. Tarapoto.

Curso de Actualización en el Diagnóstico y Tratamiento de Enfermedades

Infecciosas Prevalentes. 04 / 07/ 98. Lima.

Curso Internacional de Epidemiología y Control de la Tuberculosis. 13 / 10 / 97.

Lima.

Curso Teórico-Práctico "Aplicación de Dotelisa, Elisa y Western Blot en el

Diagnóstico de Leishmaniasis y Enfermedad de Chagas". 21 / 03 / 97.

Tarapoto.


27

Diagnóstico serológico de las enfermedades parasitarias. 05 / 99. Lima.

I Congreso de la Red de Laboratorios. 07/99. Lima

Buenas prácticas de Laboratorio. 09/07/99. Tarapoto

Garantía de la calidad en bancos de sangre.28/05/99. Lima.

Jornada de Investigación en microbiología. 24/4/99.URP.Lima.

I Congreso de la Red Nacional de Laboratorios. 22/07/99. Lima.

Curso de pasantía : Sangre Segura. 27/09/99. Chiclayo.

Evaluación integrada de daños y riesgos. 10/07/99. Tarapoto.

Elaboración Plan estratégico UNSM. 2000 –2009. 11/03/00. Tarapoto.

Auditoría interna. 27/10/00. Tarapoto

Capacitación para tutores de banco de sangre. 17/05/01. Chiclayo.

Consejería y tutoría en bancos de sangre. 23/03/01. Chiclayo.

Bioseguridad en el Laboratorio. 13/11/01. Tarapoto.

Certificación de tutores en capacitación permanente. 06/07/01. Lima.

Capacitador en promoción de la prevención de Cacu. 08/12/01. Tarapoto.

Seminario : Autoestima, Extravalor y Liderazgo.2001. Tarapoto.

Expositor : V Congreso Peruano de Parasitología.2002.Trujillo.

Panelista : XIV Congreso Nacional de Biología.2002 . Tarapoto.

Organizador : Campaña de prevención del dengue. 2002 Tarapoto.

Gerencia en Laboratorios de Salud Pública. 2002. Lima.

Organizador : XIV Congreso Nacional de Biología.2002. Tarapoto.

Microbiología de las IIH.2002. Tarapoto.

Perspectivas de la Investigación científica y tecnológica en el MINSA. 2002.

Lima.

II Curso internacional de Micobacterias.2002 . Lima.

Aplicación de la Biología Molecular en la Investigación.2002. Lima.

Asistente Congreso Científico Internacional en Salud pública.2002. Lima.

.Expositor Curso: Implementación de Nueva Técnica de ELISA para Dengue.

Tarapoto, setiembre 2003.

Curso : Inmunoflorescencia indirecta para el diagnóstico de Leishmaniasis.

junio 2003.Tarapoto.


28

Curso Taller: Control y certificación de calidad de productos

hidrobiológicos.Expositor. setiembre 2003. Tarapoto,

Curso Internacional “Gestión de calidad en Laboratorios de Análisis Clínicos.

Trujillo.UNT.Octubre 2003

Seminario Internacional “Derechos de los usuarios en la Prevención y

Resolución de Conflictos en Salud. Tarapoto-APDS, Agosto 2003.

Curso : Muestreo y Diseño muestral. Escuela Nacional de Estadística e

informática.Lima agosto del 2003.

Taller Formulación del Plan de desarrollo Estratégico 2004-2010 de la UNSM.

Febrero 2004. Tarapoto.

Taller Elaboración de la Propuesta Técnica sobre Intervención en Malaria en la

región Amazónica. DIRES-SM. Mayo 2005. Tarapoto.

Taller Internacional : Prevención y control del Dengue.Un reto para el siglo XXI.

Julio 2005. MINSA-INS.Lima.

Curso: Aislamiento e Identificación de Salmonella y Campylobacter. Agosto

2005. INS / DIRES-SM. Tarapoto.

Seminario: Seguridad y Defensa Nacional.Ministerio de Defensa-UNSM. Junio

2005. Tarapoto

Acreditación Universitaria y Standares de Evaluación en las Escuelas

profesionales.2003. Tarapoto.

Taller nacional de la Enfermedad de Chagas. INS.Abril 2006.Lima

Taller : Actualización en Hematología Básica. Mayo 2006. MINSA. Tarapoto.

Taller: hacia el control de uso de antimicrobianos y la resistencia bacteriana.

Instituto de medicina Tropical Alexander Von Humboldt. Agosto 2006.

Tarapoto.

RUBRO 5. RECONOCIMIENTO DE INSTITUCIONES CIENTÍFICAS Y

CULTURALES

Reconocimiento por contribución a Congreso de Estudian-

Tes de obstetricia Nov. '97

Reconocimiento del Colegio de Biólogos por trayectoria profesional Nov. '98

Reconocimiento del Ministerio de Salud Dic. '96


29

Sociedad Peruana de Parasitología1996

Certificate of appreciation2000

Miembro Tribunal de honor2001 Reconocimiento Por Jurado en II y III Etapa

FENCYT 2003

Felicitación por Elaboración Plan Operativo Institucional-2005. DIRES-SM

Felicitación Por elaboración de prueba de Gestión en Salud. Julio 2006. UNSM

Participación en campaña de atención integral médica.Agosto 2006.Tarapoto.

Reconocimiento por labor investigadora en la Fac.CC.Salud-UNSM. Diciembre

2006. Tarapoto.

Diploma de Reconocimientopor labor investigadora en la UNSM. Diciembre

2006. Tarapoto

RUBRO 6. PERTENENCIA A INSTITUCIONES ACADEMICAS Y CULTURALES

Sociedad Peruana de Microbiología y Parasitología Lima 1992-1999

Sociedad Peruana de Parasitología Lima 1996-2005

Tarapoto de Junio del 2007

INVESTIGADOR PRINCIPAL

Mblgo.M. Sc. HERIBERTO ARÉVALO RAMIREZ

Director del Laboratorio Referencial Regional de San Martín

DNI : 17815382 Teléfono 042-526589 / 0429972981

E-mail: [email protected]

Dirección domicilio. Jr. Yurimaguas 128- Banda de Shilcayo/Tarapoto

Dirección laboratorio. Jr. Tupac Amaru 5ta.Cuadra. s/n. Morales/Tarapoto


30

actividad leishmanicida y caracterizacion quimica … /informes_tecnicos/03.pdfde sodio, continúan...

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