اطروحة. الفطر الغذائي

159
يعت بغذاد جات كه انسراعت تأثيروي البروتين الحي اثيير الورلتغا وا فيلصفات ا نتاج ا ية والنوعيةائص والخص الطبية لبعضت سلبيضاء ار ا زر فطر اAgaricus bisporus اطروحة تقدم بيا يصطفذ رشذ يجس انق اعةجمس كمية الزر إلى ممعة بغداد جا وىي ج زء من متط مبات درجة اه دكتورمسفة ف فيوم العم اعية الزر- قسم البستنة وىندسة الحدائق- اعة عضوية زر اف إشر أ.د.لهاديخمف عبد ا له م عبد ا عبد الكريم أ.م.د. عبد حسن3416 هـ1035 م

Upload: oklo

Post on 11-Dec-2015

91 views

Category:

Documents


23 download

DESCRIPTION

mushroom

TRANSCRIPT

جايعت بغذاد

انسراعت كهت

والخصائص ية والنوعيةاإلنتاج الصفات في والتغاير الوراثي البروتين الحيوي تأثير Agaricus bisporus فطر االزرار البيضاء سالالتلبعض الطبية

تقدم بيا اطروحة انقس يجذ رشذ يصطف

جامعة بغداد –إلى مجمس كمية الزراعة دكتوراهدرجة مباتزء من متطوىي ج

زراعة عضوية-وىندسة الحدائق البستنة قسم-الزراعية العموم فيفمسفة

إشراف

حسن أ.م.د. عبد هللا عبد الكريم عبد االله مخمف عبد الهاديأ.د.

م 1035 هـ 3416

بسم ميحرلا نمحرلا هللا

ى األرض هامدة فإذا أنزلنا عليها وتر ت وربت الماء اهتز وأنبتت من كل

زوج بهيج

حج الي –سورة 5 ة ــ أ

5

نيإقرار املشـرف

/كميأأة قسأأم البسأأتنة وىندسأأة الحأأدائق فأأي ناتحأأت إاأأراف متأأ األطروحأأةبأأ ن إعأأداد ىأأ ه قررشالبسأأتنة الزراعيأأة/ عمأأومالفأأي فمسأأفة دكتأأوراهدرجأأة وىأأي جأأزء مأأن متطمبأأات ،دجامعأأة بغأأدا الزراعأأة/ .وألجمو تم التوقيع عمييا /زراعة عضوية،دائقالحوىندسة

المشرف توقيع المشرف توقيع

مساعد ذالعلمية: أستالمرتبة ا ذالعلمية: أستاالمرتبة

حس د. عبذ هللا عبذ انكرى د. عبذ االنه يخهف عبذ انهاد

وقات انباث انبسخت وهذست انحذائق

حكرج / جايعت كهت انسراعت جايعت بغذاد / كهت انسراعت

ىيبقشخاألطشحخ ششح ز ثبء عي اىزصبد اىزافشح،

انذكخىر

عبذ انرسىلجابر اا

اسخار

رئس نجت انذراساث انعها

وهذست انحذائق قسى انبسخت

جايعت بغذاد –كهت انسراعت

/ /2015

االهذاء

... ققاذو عها قااذا. ركاىاك وبهاىك عفاى وغفرااك .. ساائ . نىجهك انههى خانصاا

انقبىل انحس إـا

ان ب انهذي وانرحت دمحم ه هللا عهه وانه وحبه وسهى

ان ي رحم عا جسذا وبق ف كائرا وعقىنا .. وانذ رحه هللا

ان ي حفض عها عطفا وحاا. وانذح حفظها هللا

ان رفقت درب... زوجخ

الد... اس واسايتان ثرح ف انذا او

ان سذ اعسائ.... اخىح

اهذ ثرة جهذ انخىاكع عرفاا وحقذرا

انشكر وانخقذر

إى ال طت اىيو أال ثشنشك ال طت اىبس أال ثطبعزل ال رطت اىيحظبد أال ثزمشك ال رطت

صي هللا عي ثيغ اىشسبىخ اخشح أال ثعفك ال رطت اىجخ أال ثشؤزل، ىل اىشنش اىحذ سجحبل،

أد األبخ صح األخ سذب دمحم عي أفضو اىصالح اىسال ...... ثعذ

عبذ االنه يخهف عبذ سش ثعذ اجبص اطشحز ا ارقذ ثجضو اىشنش اى اسزبر اىششف اىذمزس

األثش اىنجش ف اجبص ز اىز مب ىب ذح اىسذ االسشبداد اىزجبد إلثذائ اساء اىقخ انهاد

اىشنش صه . هللا أ عي ثافش اىصحخ فق خذخ ىيعي فنب ع األسزبر االطشحخ ساجب

فقذ مب حقب اىع ف رزىو ىسبز ف االششاف عي ز اىذساسخ عبذ هللا عبذ انكرى حساى اىذمزس

اطشحز. اجبص ف اب مثششحبد اىقخ اىز اسزفذد ألفنبس اىقزاىصعثبد اثذاء ا

بقشخ ىزنش رئس وقعضاء نجت اناقشتأرقذ ثشنش رقذش ثنو جخ قبس إى اىسبدح

ى اطشحز إثذاء اىالحظبد اىعيخ اىسذذح اىز أغذ االطشحخ في خبىص اىشنش اىزقذش زب

ضذ اىزقذ اىشفعخ ف خذخ اىعي.

س نهسذ رئو ...اىيزب اربحزب ى اىفشصخ المبه دساسز نجايعت بغذاد وكهت انسراعت شنش اىجضو

ف اثذاء اىع .... وكادر انذراساث انعها ....واإلدار انكادر انخذرسقسى انبسخت وهذست انحذائق و

.اىسبعذ

س اىذمزس دمحم صذا طبىت اىعشفب اى اخ صي اىذمزس ابد ىذ اىججارقذ ثجضو اىشنش

ىسبعذر خاله شاحو اىذساسخ. عي األغزخ اىزقببد االحبئخ قس-اىشصاقعجذ اىنش عجذ اىذمزسا

جو ىسبعذر ف امبه رقذش ذخبى ىضي طبىت اىذمزسا اىفبء أ اعجش ع شنش رقذش

.اىشمجبد اىطجخ

عجذ سشاة اىذمزسحعذ اىذمزس حس ضالئ ف اىذساسبد اىعيبمو عجبساد اىشنش اىزقذش ى

مزس صطف عبدحاىذمزس أسبخ عجذ هللا اىذمزس فبىح حس اىذ اه طبىجخ اىذمزسا ثبئشح اىبد

يذمزسح حشخشنش اىجضو ىحس س. دمحم بد عذب غبص اىذمزساطبىت ب اىذمزسح

ىسبعذر ف يسذ ش سبى اىجضو ارقذ ثبىشنش .إلثذائ اىسبذ اىجبدقبخ قس -اىذمزسح فشبه

ادجخ اىسذ صخ اىسذ شبء اىسذ ىيسذ رقذش شنش .اىجضئخرحيو ثببد اىؤششاد امبه

.ىب أثذ سبعذ سبذ خاله شاحو اىذساسخ جب اخ اىخض

ج اىفطش، اخص ثبىزمش الزباىحذخ ضسعخ-أالد اى اىشخ حذ اىخشثظ رقذش شنش

رنشذ صالئ جبعخ-اىفطششنش اى مبدس ضسعخ .ف ىب اثذ سبعذ رعب مجشااىذمزس

.اىذمزس جبه اىسذ قذاد اىسبشائ اىز امج ف اىعو

صجز .... اىاخار أخ .... اىصجش سبعذر طيذ ذح دساسز اى ايشنش حجز

.اسبخ.... اس ع عز.... االد

انسذ رئس قسى انبسخت وانكادر انخذرسجايعت حكرج اى صالئ ف اسجو شنش رقذش

صبدد. حدد.ثبش د.د.حبسس حبص عجذ اىعضض د.عي فبسق د.ادت د. ...رامشا واإلدار

اىسذ اىسذ ط شبة د. بظ د.احسب خبىذ اىسشد. عبس فخشد.خبىذ بج د.د.عبس بش

اىذمزس عبد .بصاىسذ اىسذ سبض اىسذ عي امش اىسذ قزجخ اىسذ امش اىسذ غسب ثشا

قس اىحبصو اىحقيخ. –خيف

ى ارمش اس ى ذ ذ اىع مو بىشنش اىجضو اىارا س قي رقذ اىشنش اىثبء الحذ ف

..وي هللا انخىفق..

أ

المستخلص:

األولى نفذت في مشروع انتاج الفطر رئيستين،تضمنت هذه الدراسة تجربتين

-2102للسنة عة بغداد جام-كلية الزراعة–والعطرية الطبيةة النباتات التابعة الى وحد

كريت ت جامعة-في مزرعة الفطر التابعة الى كلية الزراعة نفذت والتجربة الثانية 2102

وفق تصميم القاعات العشوائية الكاملة صممت التجربتان على .2102-2102 للسنة

(RCBDوبواقع اربع )النتائج: وقد أظهرت لكل معاملة. تكرارات ة

%2بنسبة المعززة بالبروتين الحيوي من نخالة الطحين لمغذياتإضافة اان

الوسط الزرعي الى %2و %0بنسبة نوى التمر المعززة بالبروتين الحيوي مسحوقو

1.91و 1.80و 8..9الى ووعدد اجسامها الثمرية زيادة حاصل الجنية االولى الىأدى

نوى مسحوقضافة وان ا .بالتتابعجسم ثمري 160.00و 201.11و .098.8و 2كغم/م

في معنوية زيادة حقق الى الوسط %0و %2بنسبة بالبروتين الحيوي التمر المعزز

لمعاملة 2كغم/م 12.02مع مقارنة 2/مكغم 02.22و 14.73 الى وصل اذ الحاصل الكلي

الثمرية جساملالعدد اقصى و .بالتتابع %41.22و %42.10بلغت وبكفاءة حيوية القياس

نوى التمر المعزز بالبروتين الحيوي عند معاملة مسحوق جسم ثمري 390 وصل الى

معدل وزن الجسم الثمري للحاصل الكلي عند إضافة كسبة فول الصويا ووصل. %0بنسبة

انخفض الى وغم بالتتابع 60.75و 62.23اكبر زيادة معنوية بلغت الى %2و 0 بنسبة

نوى التمر المعزز بالبروتين الحيوي مسحوقمعاملة القياس ومعاملة إضافة ادناه عند

غم بالتتابع.37.47و 34.48الى 0%

بزيادة B62قد امتازت الساللة ف الكلي،ان للساللة تأثيرا معنوي في زيادة الحاصل

X21و Brownمن الساللة على كلت معنويا فوقوبذلك ت 2كغم/م 18.94الى الحاصل

كان للتداخل بين الساللة و. بالتتابع 2/مكغم 02.89و 15.17بلغ حاصلهما الكلي واللتين

لتداخل بين معاملة ا فقد تفوقت الكلي،را معنويا في الحاصل ومستوى تراكيز الكولشسين أث

على جميع المعامالت ما عدا معاملة التداخل بين الساللة %0.1والتركيز B62الساللة

B62 بالتتابع 2كغم/م 18.41و 23.06بلغ الحاصل الكلي لكل منها والذي % 0.5والتركيز

وكانت معاملة التداخل بين نفسها.التابع للساللة لمعاملة القياس 2كغم/م 17.74 مقارنة مع

525.00سجلت اكبر عدد من االجسام الثمرية وصل الى قد %0.0والتركيز X20الساللة

معاملة ان بينما أظهرت نتائج معدل وزن الجسم الثمري للحاصل الكلي جسم ثمري.

غم. 73.20 وصل الى ت اعلى معدل والذيبلغ %0.1والتركيز B62التداخل بين الساللة

ب

ه الىخفض الى % 0.0والتركيز X20في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة

اما النسبة المئوية للكفاءة الحيوية فقد وصلت الى أقصاها عند معاملة التداخل غم.40.30

في حين كانت نسبتها عند نفس الساللة %65.90الى %0.1والتركيز B62بين الساللة

.%50.7هي قياس لمعاملة ال

طول ساق الجسم الثمري الى معدل معنويا في وصول Brownتفوقت الساللة

% 0.5سم عن باقي السالالتين. اما المعاملة بالكولشسين فقد تميزت معاملة التركيز 6.41

0.3سم. في حين قل طول الساق عند التركيز 6.07في زيادة طول ساق الجسم الثمري الى

بالتتابع. وكان للتداخل بين الساللة سم 8.12و 5.52معنويا عن معاملة القياس الى %

دل طول مع فقد زاد معنويا،والمعاملة بالكولشسين اثر في تباين طول ساق الجسم الثمري

0.5والتركيز Brownالساق للجسم الثمري الى أقصاه عند معاملة التداخلة بين الساللة

سم. 7.29الى %

الى زيادة معنوية في معدل %0.5ما المعاملة بالكولشسين فقد أدت معاملة التركيز ا

سم. كان للتداخل بين الساللة والمعاملة 2.30سمك ساق الجسم الثمري والتي بلغت

بمستويات مختلفة من الكولشسين اثر معنوي في معدل سمك ساق الجسم الثمري، اذ تفوقت

ومعاملة التداخل بين الساللة %0.1والتركيز B62ساللة كل من معاملة التداخل بين ال

X20 سم. في حين انخفض 2.42و 2.43على جميع المعامالت بسمك %0.5والتركيز

والتركيز B62معدل سمك ساق الجسم الثمري الى ادناه عند معاملة التداخل بين الساللة

سم.1.71الى 0.3%

وجد ان للتداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين اثرا معنويا في معدل

الى %0.3والتركيز Brownعرض قبعة الجسم الثمري، اذ وصلت معاملة التداخل بين

والتركيز Brownسم والذي تفوق معنويا عن معاملة التداخل 9.76اقصى عرض بلغ

فقد أدت %0.3والتركيز B62بين الساللة سم. اما معاملة التداخل 8.29البالغة 0.0%

سم.7.49الى تقليل عرض قبعة الجسم الثمري الى ادناه حيث بلغ

معدل سمك قبعة الجسم في زيادة معنوية حقق %0.5 وجد ان تركيز الكولشسين

الى تقليل سمك قبعة الجسم الثمري معنويا %0.3سم. بينما أدى التركيز 2.29 تالثمري بلغ

تداخل فقد اثرت معاملة ال الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين سم. اما التداخل بين1.96الى

معنويا وذلك ببلوغ سمك قبعة الجسم الثمري الى %0.1والتركيز B62بين الساللة

ج

والتي سجلت سمكا %0.0سم مقارنة بمعاملة التداخل للساللة نفسها مع التركيز 2.43

سم. 2.14مقداره

B62تبعتها الساللة ثم %10.98 الى Brownلساللة نسبة المادة الجافة ل ازدات

افضل نسبة من X20بالتتابع. في حين أعطت الساللة %9.45و 10.48 الى X21و

%5.18و %4.77و %54.38الكربوهيدرات والدهون والمواد الصلبة الذائبة وصلت الى

لغت ب والرماد حيثالبروتين وااللياف فقد تفوقت في كل من نسبة B62اما الساللة بالتتابع.

الكولشسين فقد اثر في النسبة المئوية للمادة اما بالتتابع. %08.29و %16.48و 32.26%

والدهون عند التركيز % 0.3الجافة لالجسام الثمرية والمواد الصلبة الذائبة عند التركيز

ولم يؤثر في باقي بالتتابع، %4.63و %5.51 %11.14 معنوية بلغتبزيادة 0.1%

والتركيز Brown الساللة والساللة حققتاما التداخل بين الكولشسين .الصفات النوعية

معاملة التداخل بين امتازت .%13.47وصلت الى من المادة الجافة اعلى نسبة % 0.1

جميع علىللكربوهيدرات افضل نسبة معنوية بتسجيلها %0.5 والتركيز X20الساللة

قد اعطى التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز و .%57.05وصلت الى معامالت التداخل

ن الساللة اذ حققت معاملة التداخل بي للبروتين،الكولشسين تأثيرا معنويا في النسبة المئوية

B62 قدف لدهونل المئوية نسبةال اما .%34.25افضل نسبة وصلت الى %0.1والتركيز

هي افضل نسبة اذ كانتاثر التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين معنويا

النسبة اما .%0.3وتركيز الكولشسين X20الساللة عند معاملة التداخل بين 6.17%

%0.1 والتركيز B62قد تميزت فيها معنويا معاملة التداخل بين الساللة فالمئوية لاللياف

معاملة التداخل بين ووجد ان النسبة المئوية للرماد عند .%17.82الى وصلت بزيادة

معنويا بحصولها على اعلى عن جميع المعامالتتفوقت %0.1والتركيز B62الساللة

معاملة التداخل عند (TSS)قيمة المواد الصلبة الذائبة وكانت .%14.44وصلت الى نسبة

اعلى نسبة معنوية عن جميع قد سجلت %0.3وتركيز الكولشسين X20 الساللة بين

.%6.23بلغت المعامالت

X20معنويا عن الساللة Brownالساللة لالكسدة فقد تفوقتلقابلية المضادة اما ا

بالتتابع. واثرت تراكيز الكولشسين %82...و 58.07وقد بلغت النسبة المئوية لكل منهما

اعلى نسبة مئوية وصلت %0.5سجلت معاملة التركيز معنويا اذفي قابلية مضادة االكسدة

اما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين فقد أدى الى احداث .%58.10الى

اذ امتازت معاملة التداخل بين الساللة االكسدة،فروق معنوية بين المعامالت لقابلية مضادة

د

Brown وتفوقت .%58.38لهذه الصفة بلغت بتسجيلها اعلى نسبة مئوية %1.0والتركيز

باقي الساللتين بتسجيلها اعلى تركيز للمركبات الفينولية وصل الى على B62الساللة

ذ ا المعامالت،معنويا بين اتراكيز الكولسشين فقد احدث اثر . اما تأثير1-ملغم.غم 9.91

افضل تركيز من المركبات الفينولية بلغ %0.1و %0.3أعطت كل من معاملة التركيز

كان للتداخل بين . جميع المعامالت بذلك على متفوقة بالتتابع1-ملغم.غم 8.63و 8.94

فقد أدت ة،الفينوليتراكيز الكولشسين تأثيرا معنويا في كمية المركبات الساللة ومستوى

جميع اعلى فرق معنويا علىالى احداث %0.5والتركيز B62معاملة التداخل بين الساللة

.1-ملغم.غم 11.60المعامالت والذي بلغ

معنويا بمحتواها العالي من مركب اللكتين واالستاتين B62 وقد تميزت الساللة

9.79 1-ملغم.غم 19.29و 1-ملغم.غم 6.46و 1-ملغم.غم 9.38 الى الكايتينو والبيتا كلوكان

محتوى كل زيادة اثر معنوي في %0.3 التركيز سين عندشوكان للكول بالتتابع. 1-ملغم.غم

8.75و 1-ملغم.غم 5.75 1-ملغم.غم 8.27الى واالستاتين والكايتين اللكتين من مركب

عاملة م الكولشسين تميزتالتداخل بين الساللة ومستوى تراكيز اما بالتتابع. 1-ملغم.غم

مركب اللكتين محتوىمعنويا في كل من %0.5والتركيز B62التداخل بين الساللة

1-ملغم.غم 21.45و 1-ملغم.غم 8.42و 1-ملغم.غم 11.70 واالستاتين وبيتا كلوكان الى

والتركيز B62بين الساللة عند كل من معاملة التداخل الكايتينبالتتابع. وازداد محتوى

10.94و 12.50 الى % 0.1والتركيز Brownومعاملة التداخل بين الساللة % 0.5

وجود تغايرات وراثية بين السالالت DNAوقد أظهرت نتائج اختبار .بالتتابع 1-ملغم.غم

, فقد وصلت نسبة التباين الوراثي بين الساللة االصلية والعزالت المعاملة بالكولشسين

Brown وكان التركيز %55.6 الى %0.5وعزلتها المعاملة بالكولشسين عند التركيز

وصل B62 و X20اكثر التراكيز فعالية في احداث التباين الوراثي لكل من الساللة 0.1%

بالتتابع. %30.8و %33.3الى

الصفحت الموضوع التسلسل

1 المقدمت 1

4 مراجعت المصادر 2

4 نفطش االصساس انجؼبء االلزظبدخ مهخاأل 1.2

5 األمهخ انجئخ نفطش االصساس انجؼبء 2.2 5 انغزائخ وانطجخ نفطش االصساس انجؼبء األمهخ 3.2

6 انزظف انعه نفطش االصساس انجؼبء 4.2

5.2 Life cycle of Agaricus دوسح حبح فطش االصساس انجؼبء

bisporus 8

9 وازبعهفطش االصساس انجؼبء يشاحم صساعخ 6.2

composting 10رحؼش انىعؾ انضسع 1.6.2 Spawn &Spawning 12فطش انهمبػ ان 2.6.2

Casing layer 13ؽجمخ انزغطخ 3.6.2

13 اإلزبط وانغ 4.6.2

14 رأصش إػبفخ انغزبد ف ازبعخ فطش االصساس انجؼبء 7.2

1.7.2 رأصش إػبفخ انغزبد انغخ ثبنكبسثى ف ازبعخ فطش االصساس

انجؼبء15

2.7.2 خ ثبنزشوع انعؼى ف ازبعخ رأصش إػبفخ انغزبد انغ

فطش االصساس انجؼبء16

3.7.2 ف ازبعخ فطش االصساس (انجشور انحى) انكزهخ انحىخرأصش

انجؼبء

19

4.7.2 نهىعؾ انضسع C/N Ratioرأصش غجخ انكبسثى ان انزشوع

بعخ فطش االصساس انجؼبءف إز 20

Breeding & Improvement strains 21نغالالدرشثخ ورحغ ا 8.2

الصفحت الموضوع التسلسل

Mutation 21 طفشادان 1.8.2

22 ربصش انكىنشغ ف احذاس انطفشاد 1.1.8.2

2.8.2 ف رشثخ ورحغ وانؤششاد انغضئخ دوس انزمببد االحبئخ

فطش االصساس انجؼبءن انغالالد24

1.2.8.2 ورطجمبرهب ي electrophoresisزشحم انكهشثبئ رمبخ ان

انؤششاد انغضئخ24

2.2.8.2 ورطجمبرهب ي انؤششاد DNAرمبخ انزفبعم انزؼبعف نغهغهخ

انغضئخ: 25

1.2.2.8.2 DNA يزعذد االشكبل نغهغهخانعشىائ رطجك رمبخ انزفبعم

RAPD-PCR: 27

9.2 نفطش االصساس انعالعخوطجخ راد انزأصشاد ان انشكجبد

انجؼبء28

Antioxidant activity انمبثهخ انؼبدح نالكغذح 1.9.2

30

31 انشكجبد انفىنخ 2.9.2

β-glucan 33 يشكت انكهىكب 3.9.2

Lectin 34انهكز يشكت 4.9.2

10.2 رحغ انظفبد انىعخ نالعغبو انضشخ

35

36 العمل المواد وطرائق 3

1.3 انزغشثخ األون: رأصش إػبفخ ثعغ انغزبد انعؼىخ وانجشور

انحى ف إزبعخ فطش االصساس انجؼبء36

37 رحؼش انغزبد 1.1.3

37 يظبدس انجشور انعؼى 1.1.1.3

37 (Bioprotien) يظبدس انجشور االحبئخ 2.1.1.3

Spawn 73انهمبػ انفطش 2.1.3

الصفحت الموضوع التسلسل

composting 38رحؼش انىعؾ انضسع 3.1.3

spawning 39يشحهخ إػبفخ انهمبػ انفطش 4.1.3

39 يشحهخ رحؼش ؽجمخ انزغطخ واػبفزهب 5.1.3

2.3 انزغشثخ انضبخ: رأصش انغالنخ وانكىنشغ ف انظفبد اإلزبعخ

الصساس انجؼبء.وانىعخ وثعغ انخظبئض انطجخ نفطش ا39

40 يشحهخ االزخبة 1.2.3

40 رحؼش انهمبػ انفطشيشحهخ 2.2.3

40 رحؼش انىعؾ انضسع يشحهخ 3.2.3

41 يشحهخ إػبفخ انهمبػ انفطشخ 4.2.3

41 يشحهخ رحؼش ؽجمخ انزغطخ واػبفزهب 5.2.3

42 انمبعبد انذسوعخ 3.3

42 انزغشثخ األون وانضبخ() طفبد انحبطم ويكىبره 1.3.3

42 حبطم انغخ انىاحذح 1.1.3.3

42 عذد االعغبو انضشخ 2.1.3.3

42 يعذل وص انغغى انضش 3.1.3.3

42 انحبطم انكه 4.1.3.3

42 انغجخ انئىخ نهكفبءح انحىخ 5.1.3.3

42 )انزغشثخ انضبخ( انظفبد انظهشخ 2.3.3

42 )التجربة الثانية( النوعية الصفات 3.3.3

42 النسبة المئوية للكربوهيدراتتقدير 1.3.3.3

43 النسبة المئوية للبروتين تقدير 2.3.3.3

43 نو لدهالنسبة المئوية لتقدير .33.3.3

ج

الصفحت الموضوع التسلسل

43 لالليافانغجخ انئىخ تقدير 4.3.3.3

43 لرمادلخ انئىخ انغج تقدير 5.3.3.3

43 النسبة المئوية للمادة الجافة:تقدير 6.3.3.3

43 (TSSالمواد الصلبة الذائبة )تقدير 7.3.3.3

44 الصفات الطبية 4.3.3

44 انغجخ انئىخ نهفعبنخ انؼبدح نالكغذح 1.4.3.3

44 تقدير المركبات الفعالة والكشف عنها 2.4.3.3

5.3.3 شاد انىساصخ نهغالالد ورأصش انكىنشغ ف احذاصهب اخزجبس انزغب

DNAع ؽشك يؤششاد انـ47

DNA 47اعزخالص وعضل انـ 1.5.3.3

DNA 48لبط مبوح ورشكض انـ 2.5.3.3

Primers 48( RAPDانجىادئ ) 3.5.3.3

4.5.3.3 DNA يزعذد االشكبل نغهغهخانعشىائ انزفبعمرمبخ

Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) 49

50 رحؼش مهالو االكشوص 5.5.3.3

Electrophoresis 50انزشحم انكهشثبئ 6.5.3.3

53 احظبئب RAPD رحهم زبئظ يؤششاد 7.5.3.3

54 انزظى انزغشج 6.3.3

55 النتائج والمناقشت 4

1.4 خ فطش االصساس : رأصش إػبفخ انغزبد ف إزبعانزغشثخ األون

انجؼبء55

طم انغخ انىاحذح وانحبطم انكهحب انزأصش ف 1.1.4

55

الصفحت الموضوع التسلسل

2.1.4 رأصش إػبفخ انغزبد ان انىعؾ ف عذد االعغبو انضشخ نفطش

االصساس انجؼبء نكم عخ ي انغبد انضالس وانحبطم انكه57

3.1.4

غزبد ان انىعؾ ف يعذل وص انغغى انضش رأصش إػبفخ ان

نفطش االصساس انجؼبء نكم عخ ي انغبد انضالس وانحبطم

انكه

59

4.1.4 رأصش إػبفخ انغزبد ان انىعؾ ف انغجخ انئىخ نهىص انغبف

وكخ انحبطم انكه عه أعبط انىص انغبف وانكفبءح انحىخ61

نغزبد ان انىعؾ ف صبدح غجخ انحبطم انجكشرأصش إػبفخ ا 5.1.4

)انغخ االون(63

إزبعخ فطش وانكىنشغ فانزغشثخ انضبخ: رأصش انغالنخ 2.4

االصساس انجؼبء وانظفبد انىعخ وانخظبئض انطجخ64

64 طفبد انحبطم ويكىبره 1.2.4

حبطم انغخ ب فثه وانكىنشغ وانزذاخمرأصش انغالنخ 1.1.2.4

األون64

2.1.2.4 حبطم انغخ نشغ وانزذاخم ثهب فرأصش انغالنخ و انكى

خانضب65

3.1.2.4 حبطم انغخ نشغ وانزذاخم ثهب فرأصش انغالنخ و انكى

انضبنضخ66

66 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انحبطم انكه 4.1.2.4

68 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انكفبءح انحىخ 5.1.2.4

6.1.2.4 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو

األونانضشخ نحبطم انغخ 69

7.1.2.4 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو

خ انضبخانضشخ نحبطم انغ

70

8.1.2.4 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو

انضشخ نحبطم انغخ انضبنضخ71

الصفحت الموضوع التسلسل

9.1.2.4 ثهب ف عذد االعغبو وانكىنشغ وانزذاخمرأصش انغالنخ

انضشخ نهحبطم انكه72

10.1.2.4 ثهب ف يعذل وص انغغى نكىنشغ وانزذاخموارأصش انغالنخ

األونانضش نحبطم انغخ 73

11.1.2.4 ثهب ف يعذل وص انغغى وانكىنشغ وانزذاخم: رأصش انغالنخ

انضش نحبطم انغخ انضبخ74

12.1.2.4 ثهب ف يعذل وص انغغى وانكىنشغ وانزذاخمرأصش انغالنخ

انضش نحبطم انغخ انضبنضخ75

13.1.2.4 ثهب ف يعذل وص انغغى وانكىنشغ وانزذاخمرأصش انغالنخ

انضش نهحبطم انكه76

انظفبد انظهشخ 2.2.4

76

1.2.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف ؽىل عبق انغغى

انضش76

2.2.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عك عبق انغغى

انضش77

3.2.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عشع لجعخ انغغى

انضش77

4.2.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عك لجعخ انغغى

انضش77

انظفبد انىعخ 3.2.4

79

1.3.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نهىص انغبف نالعغبو انضشخ79

2.3.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نهكشثىمهذساد نالعغبو انضشخ81

3.3.2.4 غجخ انئىخ رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف ان

نهجشور نالعغبو انضشخ82

الصفحت الموضوع التسلسل

4.3.2.4 انئىخ رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ

نهذمهى نالعغبو انضشخ83

5.3.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نالنبف نالعغبو انضشخ84

6.3.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نهشيبد نالعغبو انضشخ85

7.3.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نهىاد انظهجخ انزائجخ نعظش االعغبو انضشخ86

87 انخظبئض انطجخ 4.2.4

1.4.2.4 نكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انمبثهخ انؼبدح رأصش انغالنخ وا

نالكغذح نغزخهض االعغبو انضشخ87

2.4.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض انشكجبد

نغزخهض االعغبو انضشخانفىنخ 88

3.4.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت

نغزخهض االعغبو انضشخ انهكز89

4.4.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت

االعزبر نغزخهض االعغبو انضشخ90

5.4.2.4 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت ثزب

كهىكب نغزخهض االعغبو انضشخ91

6.4.2.4 انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت رأصش انغالنخ و

انكبز نغزخهض االعغبو انضشخ92

5.2.4 نغالالد فطش االصساس انجؼبء RAPD يؤششاد زبئظ رحهم

انعبيهخ ثزشاكض يخزهفخ ي انكىنشغ93

6.2.4 تأثير الكولشسين في احداث التغايرات الوراثية لفطر االزرار

البيضاء 93

الصفحت الموضوع التسلسل

96 اإلستنتاجاث 5

96 التوصياث 6

97 المصادر 7

97 المصادر العربيت 7-1

99 المصادر األجنبيت 7-2

121 المالحق 8

128 الصور 9

الصفحة الجدول عنوان التسلسل

1

طش االصساس رأصش إػبفخ انغزبد ان انىعؾ ف إزبعخ ف

انجؼبء )كغى/و2

( ونكم عخ ي انغبد انضالس وانحبطم

انكه

56

2

رأصش إػبفخ انغزبد ان انىعؾ ف عذد االعغبو انضشخ

نفطش االصساس انجؼبء نكم عخ ي انغبد انضالس

وانحبطم انكه

58

3

انىعؾ ف يعذل وص انغغى رأصش إػبفخ انغزبد ان

نفطش االصساس انجؼبء نكم عخ ي انغبد ضش)غى( ان

انضالس وانحبطم انكه

60

4

رأصش إػبفخ انغزبد ان انىعؾ ف انغجخ انئىخ نهىص

انغبف وكخ انحبطم انكه عه أعبط انىص انغبف

نفطش االصساس انجؼبءهكفبءح انحىخ انغجخ انئىخ نو

62

5 وانزذاخم ثهب ف إزبعخ حبطم رأصش انغالنخ و انكىنشغ

)كغى/و األونانغخ 2

نفطش االصساس انجؼبء (64

6 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف إزبعخ

)كغى/و خحبطم انغخ انضب2

نفطش االصساس انجؼبء (65

7 ف إزبعخ حبطم انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهبرأصش

)كغى/و خ انضبنضخانغ2

نفطش االصساس انجؼبء( 66

8 رأصش انغالنخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انحبطم

)كغى/و انكه2

نفطش االصساس انجؼبء( 67

9 انغجخ انئىخ انكىنشغ وانزذاخم ثهب فو رأصش انغالنخ

نفطش االصساس انجؼبء انحىخ هكفبءحن68

11 نخ و انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو رأصش انغال

نفطش االصساس انجؼبء األونانضشخ نحبطم انغخ 69

11 انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو رأصش انغالنخ و

نفطش االصساس انجؼبء انضشخ نحبطم انغخ انضبخ70

الصفحة الجدول عنوان التسلسل

12 انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو نخ ورأصش انغال

نفطش االصساس انجؼبء انضشخ نحبطم انغخ انضبنضخ71

13 انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عذد االعغبو رأصش انغالنخ و

نفطش االصساس انجؼبء انضشخ نهحبطم انكه72

14

وص انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف يعذل رأصش انغالنخ و

نفطش االصساس األوننحبطم انغخ )غى( انغغى انضش

انجؼبء

73

15

انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف يعذل وص رأصش انغالنخ و

نفطش االصساس نحبطم انغخ انضبخ )غى(انغغى انضش

انجؼبء

74

16

انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف يعذل وص رأصش انغالنخ و

نفطش االصساس نحبطم انغخ انضبنضخ ()غىغغى انضشان

انجؼبء

75

17 انكىنشغ وانزذاخم ثهب ف يعذل وص رأصش انغالنخ و

نفطش االصساس انجؼبء نهحبطم انكه )غى(انغغى انضش76

18 وعك رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف ؽىل

نفطش االصساس انجؼبء عبق انغغى انضش78

19 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف عشع وعك

لجعخ انغغى انضش نفطش االصساس انجؼبء79

21 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نهىص انغبف نالعغبو انضشخ نفطش االصساس انجؼبء80

21 ب ف انغجخ انئىخ رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثه

نفطش االصساس انجؼبء نهكشثىمهذساد نالعغبو انضشخ81

22 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نفطش االصساس انجؼبء نهجشور نالعغبو انضشخ82

23 ف انغجخ انئىخ انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهبرأصش

نفطش االصساس انجؼبء نالعغبو انضشخنهذمهى 83

الصفحة الجدول عنوان التسلسل

24 ف انغجخ انئىخ انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهبرأصش

نالنبف نالعغبو انضشخ

84

25 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

اس انجؼبءنفطش االصس نهشيبد نالعغبو انضشخ85

26

رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف انغجخ انئىخ

نفطش االصساس نهىاد انظهجخ انزائجخ نعظش االعغبو انضشخ

انجؼبء

86

27

انغجخ انئىخ انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رأصش

نفطش انمبثهخ انؼبدح نالكغذح نغزخهض االعغبو انضشخ

االصساس انجؼبء

87

28

رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض

نفطش االصساس انشكجبد انفىنخ نغزخهض االعغبو انضشخ

انجؼبء

88

29 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت

ءنفطش االصساس انجؼب انهكز نغزخهض االعغبو انضشخ89

30 رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت

نفطش االصساس انجؼبء االعزبر نغزخهض االعغبو انضشخ90

31

رأصش انغالنخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهب ف رشكض يشكت

نفطش االصساس ثزب كهىكب نغزخهض االعغبو انضشخ

انجؼبء

91

32 ف رشكض يشكت نخ وانكىنشغ وانزذاخم ثهبانغال رأصش

نفطش االصساس انجؼبء انكبز نغزخهض االعغبو انضشخ92

33

ي حش عذد انحضو انكهخ RAPDزبئظ رحهم يؤششاد

وورعذدارهب انشكهخ عذدا وغجخ وكفبءح انجبدئ وانمذسح

انزضخ

93

34 االصساس انجؼبءفطش لى انزجبعذ انىساص ث عالالد

ويذي ربصش انكىنشغ ف احذاس انزغبشاد انىساصخ94

الصفحت عنوان الشكل التسلسل

Agaricus bisporus 9يخطؾ األىاع انضالصخ نذوسح حبح فطش 1

23 انزشكت انكبئ نشكت انكىنشغ 2

3 انزظف انشئظ نهشكجبد انفىنخ-1

انفىنخ انشبئعخ رشكت انشكجبد -233

4 ،Brown، X20عخ )انغالالد 12ىارظ انزشحم انكهشثبئ نـ

B62 فشارهب( ثأعزعبل رمبخ بؽوRAPD 1نهجبدئ سلى 50

5 ،Brown، X20عخ )انغالالد 12ىارظ انزشحم انكهشثبئ نـ

B62 فشارهب( ثأعزعبل رمبخ بؽوRAPD 4نهجبدئ سلى 51

6 ،Brown، X20عخ )انغالالد 12م انكهشثبئ نـىارظ انزشح

B62 ويطفشارهب( ثأعزعبل رمبخRAPD 5نهجبدئ سلى 51

7 ،Brown، X20عخ )انغالالد 12ىارظ انزشحم انكهشثبئ نـ

B62 فشارهب( ثأعزعبل رمبخ بؽوRAPD 7نهجبدئ سلى 52

8 ،Brown، X20عخ )انغالالد 12ىارظ انزشحم انكهشثبئ نـ

B62 فشارهب( ثأعزعبل رمبخ بؽوRAPD 8نهجبدئ سلى 52

9 ،Brown، X20عخ )انغالالد 12ىارظ انزشحم انكهشثبئ نـ

B62 فشارهب( ثأعزعبل رمبخ بؽوRAPD 10نهجبدئ سلى 53

11 رأصش إػبفخ انغزبد ان انىعؾ ف صبدح غجخ انحبطم انجكش

االصساس انجؼبء نفطش )انغخ االون(63

11

نفطش B62و X20و Brownغالالد هانزحهم انعمىد ن

اعزبدا عه يؤششاد االصساس انجؼبء وعضالرهب انطبفشح

RAPDانـ

91

الصفحت ملحقعنوان ال التسلسل

1 نكىبد انحبطم ظفبد انذسوعخانيعبيم االسرجبؽ انجغؾ ث

زغشثخ االوننه121

2 نكىبد انحبطم ظفبد انذسوعخانعبيم االسرجبؽ انجغؾ ث ي

زغشثخ انضبخنه121

3 يعبيم االسرجبؽ ث انظفبد انذسوعخ نهظفبد انىعخ نهزغشثخ

انضبخ121

122 انزحهم نهشكجبد انفعبنخيحبد 4

DNA 124ثشورىكىل اعزخالص 5

127 ي انششكخ انزغخ 1دئ سلى اىرط ي انعهىيبد انزفظهخ نهجب 6

الصفحت ةصورعنوان ال التسلسل

128 عهخ رشؽت رج انحطخ لجم عهخ انزخش 1

128 رحؼش ؽجمخ انزغطخ 2

128 (Spawnانهمبػ انفطش ) 3

128 عبيعخ ثغذاد-وحذح انجبربد انطجخ/كهخ انضساعخ -اإلنتاجلبعخ 4

5 انفشولبد انظهشخ ث انعضالد انعبيهخ ثبنكىنشغ وانغضنخ

انغش يعبيهخ129

129 انهمبػ انفطش انحؼش داخم انخزجش 6

129 رعجخ االكبط ثبنىعؾ انضسع 7

130 كهخ انضساعخ/عبيعخ ركشذ -ف يضسعخ انفطش اإلنتاجلبعخ 8

130 ؽشمخ لبط انظفبد انظهشخ 9

TSS 130انغهبص انشل نمبط 11

مقدمةال 1

المقدمة: 1

النتاج يحاايا من التقانات االعد ي Cultivated Mushroomsانتاج الفطر الزراعي ان

والتي يسممممتعل Mycoprotienيسمممملب البروتان الفطري مااو Bioprotienالبروتان الحاوي

تخلرات انتق يحسمممم يتم تهائت وتحضممممار النباتا والحاوانا كوسممممم ينلو علا فاها اللخلفات

ومفضممممممب من فبمم الفطر لا ممممممبا مما زا Solid State Fermentationالحممالمم ال مممممملبمم

Agaricus bisporus والذي طلق علا تسلاWhite Button Mushroom.

علب البروتان ويحسمممممم وانلا يعد ناا النتا التسممممممويقا الغمذايا و القالم التقت ممممممر

وتعد .(Townsley، 1891و Tautorus) بالفاتامانات واالمبح الضمروري ل ح االنسان

الزراعا و ي من اكثر الفطريات الفطريات البازيدي من Agaricus نس األنواع التمابعم الب

اوربا من ضلنها فطر االزرار مسجل في انوع 09 ذا الجنس اكثر من يضمو انتشارا في العالم

التجاري والزراعا في العالم من النمايحا أ لهما المذي يعمدو Agaricus bisporus الباضمممممما

اللرتب ذا الفطر ويحت .(0222 ،واخرون Calvo-Bado) بعض االنواع االخرى فضب عن

وصمممممم االنتاجبحاث مذا الفطر في اوون األخار االولب في االنتماج العماللي ولقمد از ا انتماج

السممممنوات ت ممممدرت ال ممممان الدوة اللنتج ل فيمبيان طن سممممنويا و العاللي الب يحوالي اربع

االنتاج في ونسمممب %5وكوريا الجنوبا %0ثم الواليات اللتحد %55العشممر اللاضممما بنسمممب

%7.5وفرنسا %6اعب ا بولندا و ولندا لك منهلا %72الدوة االوربا مجتلع بلغت يحوالي

(.Kariaga ،0222) وبافي الدوة بنس اف متوزع بقام متفاوت

مختلف من ور بنس ومرايح الوسم الزرعيالب إضاف بعض اللغذيات الغاي من ان

تالي وبالوامدا ذا الفطر بالغذا كفا في تجهاز اكثر ملا يجعل وتعزيز ي إل نمايم االنتماج

. ختلف م زراعا مخلفات عضمممموي إضمممماف لذلك يلجأ اللنتجون الب .اإلنتاج كلا في يؤثر ايجابا

البروتانغنا بالطباعا كسمممب فوة ال مممويا وبذور القطن ونخال الطحان من الل ممما ر ال وتعتبر

.الكربو ادراتو والزيوت

تانا القال البرو زيا الب البايحثونتو االيحاايا مجاة التقاناتلتطور الواسمممممم في ل

لاها ع تنلا بعض االيحاا اللجهري من البكتريا والفطريات عن طريق لللخلفات الكربو ادراتا

نظام حس ب (الخلا الوايحد )بروتان علا يطلق ما اوالبروتان الحاوي وبالتالي تنتج ذ االيحاا

من ذ االيحاا الشايع االستعلاة و Solid state fermentationتخلرات الحال ال لب يدعب

واس من االوساط علب نطاق لكن تنلات يالذي و Aspergillus oryzae فطر الـ في ذا اللجاة

مقدمةال 2

Nationalكـ) قد سج ف ذا الفطر وال لا .علب نخال الحنط وتحديدا الغنا بالسلالوزعا الزر

Fungi) في الاابان (Bando 0221، واخرون).

ا خال ي النوعا صممفاتتحسممان و فطر االزرار الباضمما نتاج ا سمماي زيا من و ان

ول مممعوب انتاج الهجن عن طريق التضمممري بان ،لسمممبالت تحسمممانضممملن برنامج التربا وال

تجمم الممذا ،(dikaryotic) ثنممايامم النوى من ابواغ ي ان ا لمم ممما ينتجمم السممممممبالت بسممممممبمم

من خبة ا را عللا راثا والح وة علب ال فات اللطلوب ن الب ايحداث تغايرات واللخت و

.بالطرق اللختلف الفازيايا والكالاايا التطفار

ما الكولشمممممسمممممان اسمممممتعلاة اللتبع ي ر الكالااييعللا التطفاوسممممماي ا م ان من

(colchicine) يسلب التضاع او ما التضماع الكروموسمومي للخبياايحداث التي تعل علب

يحجم في الب زيا ذا التضمممماع يؤ يوبدور (Autopolyploidالكرموموسممممومي الذاتي )

تفا ي يسمممممالخبيا ومن ثم زيا العللاات االيضممممما وما ينتج عنها من مركبات اولا وثانوي والت

واخرون Hosseiniوفممد توصمممممممم (Shirai ،0221و Adaniya)منهمما كلركبممات طبامم

ز بلا الكولشسان بتراكا Pleurotus ostreatusالب ان معامل الغزة الفطري للفطر (0228)

الب يحدوث تضماع كروموسومي تم الكش عن بواسط فاا فطر النوا توازمن مختلف ا

مقارن بالفطر ار %27وفد انعكس ذا التضمماع علب كلا االنتاج مسممببا زيا وصمملت الب

اللتضاع .

تساعد في تحسان صح الفطر الزراعي ل فوايد طبا عدأكدت الدراسمات ان اسمتهب

الب ان ذا الفطر ل ور في تنتايج ذ الدراسممات إرممار عظمالجسممم وماالنسممان وزيا مناع

عالا الفتعو و ،خفض ضممممغم الدم ومسممممتوى الكولاسممممتروةتثبام األورام والخبيا السممممرطانا و

لمم تعممما والتي منهمما ،من اللركبممات الكالامماويمم الفعممالمم كثارالفطر الب و و الطبامم الب ممذا

( flavonoid( والفبفونويممد )phenols) مثمم الفانوالت antioxidantلضممممممما ات اكسمممممممد ك

و ي عبار ergosterolوالتي تدعب Sterolsونسمب من الستاروالت ergothioneineوالـمممممم

والذي ل ور في اعاف امت مماا الكولاسممتروة statin( ومرك الـمممممممprovitamin D2عن )

،Jagadish ؛0221، واخرون B-glucan، Chitin (Takakuوالسممممممكريات اللتعد مث

(.Abah ،0212و Abah؛ 0228

مقدمةال 3

:هدفت الى لذلك فان الدراسة

و اللغذيات اللغذيات العضمممموي اضمممماف من خبة االزرار الباضمممما فطرانتا ا زيا .1

Aspergillus oryzaeمن الكتلمم الحاويمم للفطر الحاوي النمماتجمم بممالبروتان اللعزز

الناما علب كسب فوة ال ويا ونخال الحنط وطحان نوى التلر الب الوسم الزراعي.

ضممب ف فطر االزرار الباضمما وتحسممان ال ممفات النوعا لب سممام الثلري انتا ا زيا .7

ي ف راسمم تأثار الكولشممسممان من خبة بعض اللوا ذات الفعالا الطبا عن زيا تركاز

.RAPDبتقان عنها والكش اللبكرثا ايحداث التغايرات الورا

مراجعة المصادر 4

مراجعة المصادر: 2

االزرار البةضاء االقتصادية لفطر مهمةةاأل: 1.2

االستثمارية الناجحة, السيما اريعزراعة الفطر الزراعي من المشتعد مشاريع

كغم في 25-20مشاريع زيادة إنتاجية وحدة المساحة إذ يبلغ انتاج المتر المربع الواحد من

تكرار عملية وذلك من خالل في السنة او اكثر كغم 100, أي بما يصل إلى حوالي الدورة

اسبا ن دخال منوهذا االنتاج يمكن أن يضم ،دورات زراعية خالل السنة 5-4الزراعة من

صيل من المحا وأصبح الفطر الزراعي ،عملة الصعبةر اليفللمزارعين والمستثمرين وتو

تعد مخلفات زراعة الفطر و د مصادر الدخل القومي لبعض الدولوأح مهمةالبستانية ال

ب مخصك تستعملاالكيميائية لذلك الزراعي مادة عضوية عالية الخواص الفيزيائية و

اد إنتاج الفطر يزدال ونتيجة .(PAAF، 2002 ؛ 2002،)رضوانذا قيمة مرتفعة عضوي

على نيدفع القائممما ،ستهلكين على الطازج منه بشكل خاصبسبب إقبال الم الزراعي

فادة واال ته( الناتجة عن زراعRecyclingوضع تصاميم إلعادة تدوير الفضالت )بإنتاجه

عمالهاستال "SMS "Spent Mushroom Substrate وعرفت هذه المخلفات بـ منها

عالففي األ لمواشيواستهالكها من قبل ابوصفها مادة عضوية متحللة للتربة كمخصبات

نتاج الوقودإل لالحياء المجهرية عدها وسطا فعاال فضال عن كمدعمات غنية بالبروتين

الرئيس ان الغرض ( Uzun ،2002 ؛2002 ،واخرون Sharma)( Biogasالحيوي )

اوالقيمة االقتصادية من انتاج الفطر الزراعي هو الحصول على الغذاء ولكن هناك اهداف

وبالرغم من انتماء (Liu،2000و Kües) أخرى هي استخدامات طبية وفوائد بيئية

ل تج من محاصيالفطريات الزراعية الى مملكة الفطريات فهي تتداول بشكل شائع كمن

Hegde)من أنحاء العالم حيث يمتلك النكهة الرائعة والمتميزة كثيرالخضراوات في

بين هذا المحصول الرابع اقتصاديا من ديعومن الناحية االقتصادية (2002،واخرون

ات اذ بلغت المبيعماطة والخس أي بعد البطاطا والط الواليات المتحدةفي محاصيل الخضر

تصدر فطر االزرار البيضاء عن باقي و. 0234-0231دوالر في سنة بليون 1.12 بحدود

من بين %89بنسب االنتاج حيث بلغت في الواليات المتحدة بحدود ةالفطريات الزراعي

د الوحي المنتجهذا الفطر هو مجموع باقي الفطريات الزراعية اما المملكة المتحدة فيعد

الواليات في 0222سنة ل واشارت االحصائيات .%322والذي وصلت نسبته الى تقريبا

يمة وثالثين والية بق في ثالثانتاجه ور زراعة الفطر الزراعي اانتشالى المتحدة تحديدا

الكندي األكثر مليون دوالر اما كندا فيعد هذا الفطر المحصول 821انتاجية وصلت الى

مراجعة المصادر 5

مليون دوالر 083الى حوالي 0229االنتاج السنوي في عام اذ وصلالمبيعات في قيمة

(USDA ،2002 2002؛ 2002؛).

األمهمةة البةئةة لفطر االزرار البةضاء: 2.2

و Peroxidasesانتاج أنزيمات بقدرته في زرار البيضاءفطر االيمتاز

Laccase لمادة المتحللة جزئيا إلى غذاء تحويل ا المسؤولة عن تحلل اللكنين وقدرته في

تيجةن أهمية بيئية وتجارية كبيرة على مستوى العالم لهذه الخاصية واو بروتين فطري

مواد كالسليلوز الملكنن التي تهدر والتي يمكن استعمالها مخلفات للكميات الهائلة من

، Schumann و Thomas) التي تستعمل إلنتاج هذا الفطر أساسية في عمليات التخمر

التي المصانعوإن استعمال مخلفات المزارع و (0222، واخرون Bonnen؛ 0221

ه يمثل في حد ذات لغرض زراعة وإنتاج الفطر الزراعي تقدر بآالف األطنان بعد معالجتها

اذ أجريت دراسة الختبار ،المخلفات من آثار التلوث المحتملة جراء تراكمحماية للبيئة

للنفايات لذاتياتحلل ال اطلق عليها الهوائيةالنفايات والمخلفات المعاملة حيويا بفعل البكتريا

(GADE )"Garbage Automatic Decompose-extinguisher" كاوساط

إمكانية نمو هذا وقد لوحظ فطر االزرار البيضاءزراعية للفطريات الزراعية من ضمنها

(.2002، واخرون Sakae) الفطر على تلك المخلفات

لفطر االزرار البةضاءاألمهمةة الغذائةة والطبةة : 3.2

Cو Bو Aمصدرا جيدا للفيتامينات )مجموعة فيتامين عد فطر االزرار البيضاءي

كما .ن والنياسين وحامض البانتوثنيك(والثيامين وحامض الفوليك والرايبوفالفيD و

م والنحاس والصوديوموي على المعادن كالبوتاسيوم والحديد والزنك والمغنسيوتيح

فضال عن احتوائه على أحماض أمينية أساسية مهمة لتغذية اإلنسان والسلينيوم

Isoleucineو Valineو Threonineو Methionineو Cystineوصحته مثل

، واخرون Phenylalanine (Mattilaو Tyrosineو Lysineو Leucineو

(.2002 ،واخرون Mattila؛ 2002 ،واخرون Mattila؛ 2000

ادرمص عدهاسع تمتلك قيمتها من خالل تستهلك على نطاق وا ان الفطريات التي

من الدراسات أن بعض أنواع الفطر كثير اثبتتالطبية. وقد الفائدة فضال عن غذائيا

ألكسدة ل ةمضادال القابلية لها خصائص عالجية وطبية ومن هذه الخصاص

(Antioxidant activity) القابلية و( المضادة للميكروباتantimycrobial)

مراجعة المصادر 6

التأثيرات ووخفض الكولسترول (anticancer)ية لسرطانلالورام امضاد الفعالية الو

؛ 2002 ،واخرون Barros ؛Oyetayo، 2002)المحفزة للقابلية المناعية

Mondal ،2001)

الكوليسترول مستوى ر مستلخص فطر االزرار البيضاء علىاختب

(hypercholesterolemic في الفئران )في الكوليسترول اانخفاض وجد انه احدثو

Jeong)( ٪02.9و ٪12.0( في الكبد وتقدرت )triglycerideوالدهون الثالثية )

ووجد أيضا ان مستخلص هذا الفطر يثبط انتشار خاليا سرطان (2000، واخرون

وتشير بعض المصادر (2002، واخرون Chen ؛2000، واخرون Grube)الثدي

أن زيادة تناول فطر االزرار البيضاء قد عزز وحفز زيادة مناعة وحصانة الى أيضا

،وآخرون Adotey ؛ 2002، وآخرون Wu)الجسم ضد األورام والفيروسات

ران المصابة بداء السكري ئووجد ان تغذية الف (.2002واخرون، De Silva؛ 2000

لسكر في مكافحة نسبة ا امعنوي تاثيرا اظهرترار البيضاء باالجسام الثمرية لفطر االز

( anti-hypercholesterolemicالكوليسترول )( وanti-glycemicفي الدم )

(Jeong ،؛2000 وآخرون Volman 2000 ،وآخرون.) واختير من قبل جمعية

أنواع من 5-10من بين "The Canadian Cancer Society"الكندية السرطان

ات الخضراوات والفواكه لفعاليته ضد األمراض, فهو مهم ضد سرطان البروست

حيث عرف الفطر الغذائي مصدرا ( MC ،0222) والثدي ويخفض ضغط الدم العالي

.(Schmidt,2006) ف السنينطبيا منذ آال

التصنةف العلمي لفطر االزرار البةضاء: 4.2

يشار والتي طريات التي تكون االجسام الثمريةالفصنفت مملكة الفطريات حديثا

Ascomycota ما( هphyla) تينشعب الى (mushroom) بكلمةاليها عادة

طويلة تكون Basidiomycota الـ شعبةحياة معظم دورة Basidiomycotaو

اءت ا جمعلى نواتين كل واحد منهمن خاليا متعدد تحتوي يةفطرتكون خاللها خيوط ت

الثنائية و (Haploidاألحادية ) النواة نظام الحالة الوسطية بين وهي اإلباءمن احد

يوجد بها فتحات septaالخاليا مقسمة بحواجز تسمى طبيعة .(Diploidالكرموسوم )

(dolipore septa( تمتلك في الغالب روابط كالبية )Clamp connection). تنتج

بواغتحتوي على تراكيب تحمل االهذه االجسام Basidiocarpsتسمى ةثمري ااجسام

Kirk)نوع 32.000ضمن هذه الشعبة تم وصف مايقارب .basidiaتسمى

مراجعة المصادر 7

شعبتحت ثالثة قسمت هذه الشعبة الى .(Kendrick ،2000 ؛2002، واخرون

Agaricomycotina وUstilaginomycotina وPucciniomycotina :هي

yeasts و basidiomycetous و jelly fungiو mushroomوالتي تحتوي على

(Millanes ؛2000، واخرون Fell؛2000 ،واخرون Scorzetti واخرون ،

تم وصف تحت .(2002، واخرون Aime؛ 2002، واخرون Begerow؛ 2002

Agaricomycotina صف ومن صفوفهانوع 32222 مايقارب

Agaricomycetes تقريبا نوع 30222 والتي وصف منها(Kirk واخرون ،

تتضمنفقد euagarics cladeوالتي يطلق عليها Agaricalesرتبة اما ( 2002

؛ 2002، واخرون Binder) عائلة 02جنس و 122و نوع 8222-8500اكثر من

Hibbett ،2002 )أعطيت التسمية وتحت الرتبة Agaricineae وعليه فان

وفقأعاله يكون على في وفق ما ذكرعلى التصنيف العلمي الحديث لهذا الفطر

الترتيب التالي:

Kingdom………………….……….………………………….Fungi

Phylum……………………………..…………Basidiomycota

Sub- Phylum…………………..……….. Agaricomycotina

Class……………………….....…. Agaricomycetes

Sub-class……………..….…Agaricomycetideae

Order……………..…..Agaricales

Sub-order….….... Agaricineae

Family…...... Agaricaceae

Genus…Agaricus

مراجعة المصادر 8

Life cycle of Agaricus bisporus : دورة حةاة فطر االزرار البةضاء5.2

ي تنتهي الت دورة حياته الجنسيةان يتميز هذا الفطر عن باقي الفطريات البازيدية

النواة ثنائيكون ي األول النوع ،بواغاال نوعين من نتجت بتكوين االجسام الثمرية

dikaryotic يرمز له (n+nوتبلغ نسبته ) الثاني احادي النواة النوع و %85اكثر من

(Monokaryons) ويرمز له (nونسبته التتجاوز ) محمولة على والتي تكون %5

نوعين من دورة لفطرعلى هذا االساس يمتلك هذا او (basidiumتراكيب خاصة تسمى )

ففي حالة االبواغ الثنائية النوى Amphithallic life cycleالحياة يطلق عليها مصطلح

امتالكها انوية مختلفة وذلك بسبب self-fertilityفانها تكون خصبة ذاتيا

(heterokaryotics )ثانويةفطرية اتكون خيوط أي بعد انباتهاSecoundary

Mycelium متوافق معه وراثيا مكمال دورة حياته مباشرة دون التزاوج مع خيط فطري

secondary homothalicتسمى حالةال هالحياة في هذدورة وبتكوين االجسام الثمرية

(Psedohomothalic). غير ااحادي النوى فانه يكون عقيم بوغاما عند انبات ونمو ال

ولكي primary mycelium يطلق عليها فطرية ايكون خيوطو sterilizeخصب ذاتيا

دورة حياته الجنسية يجب ان يتحد مع خيط فطري اخر احادي النوى يتمكن من اكمال

ليكون compatibilityمتوافق معه وراثيا plasmogamyباالندماج السايتوبالزمي

في هذه الحالة ودورة الحياة secondery myceliumعليه يطلق ثنائي النوى افطري غزال

االحادية بواغبة االونسبة كل نوع من دورة الحياة تعود الى نس .Heterothallicتسمى

؛ 2002 ،واخرون Callac)التي تنتجها االجسام الثمرية النواة والثنائية

Sonnenberg ،2000 ؛Raper وفضال عن اكتشاف دور الحياة .(0222، واخرون

Agaricus bisporus var. burnettii (Callacفي الساللة Heterothallicالثانية

(2001) واخرون Callacتمكن وقد .(0222، واخرون Kerrigan؛ 0221، واخرون

Primaryاو ) Homothallicمن اكتشاف دورة حياة جديدة لهذا الفطر وهي من نوع

homothallicأحادية النوى تكون ابواغزيدي في الغالب يحمل أربعة ا( أي ان الحامل الب

طري فخيط مع االتحاد او جثمرية بدون التزاو اان تكون اجسامخصبة ذاتيا أي تستطيع

طلق اوينمو فيها هذا الفطر بريا حيثأوروبا مناطق من في هذا االكتشاف اخر وسجل

.Agaricus bisporus Varفيها هذا النوع من دورة الحياة على الساللة التي اكتشف

eurotetrasporus. ألنواع الثالثة المختلفة لدورة حياة يوضح ا .(3)وفيما يأتي الشكل

فطر االزرار البيضاء.

مراجعة المصادر 9

هوإنتاج فطر االزرار البةضاءمراحل زراعة : 6.2

لزرعي الوسط ا متعددة فلتحضيرالفطر يتم بطرق نظام االنتاج المستعمل لزراعة

45-09تمتد مابين (long method composting) األولى الطريقة الطويلة انطريقت

اما ايوم 03-32تأخذ مابين (short method composting) الطريقة القصيرةو ايوم

الحضن فهناك طريقة تتم داخل االنفاق واالخرى داخلمدة طرق تلقيح الوسط الزرعي و

رق تستغ دورة اإلنتاج لهذا الفطرعموما ف او االكياس وقاعات اإلنتاج نفسها على الرفو

تحضير الوسط إلى المرحلة إلكمال دورة اإلنتاج بأكملها، من بداية اأسبوع 35حوالي

9-2ويمكن ان تصل دورة اإلنتاج خالل السنة الى. بعد الحصاد وانتهاء الحاصل النهائية

Spawning) والتحضين عملية التلقيحختصار مرحلة تحضير الوسط ولو تم اما فيدورة

& Spawn run). االوساطمن نوعين فطر االزرار البيضاء يتطلب وخالل دورة االنتاج

compostالـ األول يطلق علية االجسام الثمرية، وتكوين مختلفة التمام مرحلة االنتاجال

ذائية المواد الغوسط فقير بالثاني الذي ينمو خضريا و يجهز ويمد الفطر بالغذاء انه دوره

Agaricus bisporusمخطط األنواع الثالثة لدورة حياة فطر 1شكل

Kamzolkina (2006)واخرون

Psedohomothalic

Heterothallic

Homothallic

مراجعة المصادر 10

وكيميائية واحيائية فيزيائية عوامل وفرت هو ( دورهCasing layer) يسمى طبقة التغطية

ي ف لتحفيز عملية الشروع بتكوين االجسام الثمرية بتوفرها فطرهذا ال هي شرط مناسبة

.(sanchez ،2002) هذا الفطر

composting الزرعيتحضةر الوسط : 1.6.2

المخلفات على هنمومن خالل رمية فطر االزرار البيضاءة تغذية ان طبيع

ختلف تالزرعي المعد لغرض اإلنتاج طريقة تحضير الوسط ة, لذلك فانالمتحلل العضوية

عن اكثر االنواع االخرى من الفطريات الزراعية, اذ يعد هذا الفطر محلال ثانويا وهذا

ونة كتحلل المواد االساسية الميعني ان االحياء المجهرية )البكتريا والفطريات( يجب ان

اج واالستمرار الى مرحلة اإلنت لنمو عليهل صبح جاهزاكي ي للخلطة المعدة لتحضير الوسط

جة بزراعة وأنتاالخاصالزرعي مكونات الوسط من و نافسة من قبل باقي الفطرياتدون م

زراعيةالمخلفات ال التي تستعمل بشكل شائع وتجاري لتوافرها في البيئة هيفطر هذا ال

في حين ةاو االدغال الجاف النجيليات تبن من النباتية والحيوانية, فأما النباتية فتكون عادة

. وكل جزء من هذه االغنام اوالدواجن االبقار او الخيول او من مخلفات الحيوانيةتكون

المخلفات له دور في وصول الوسط الى جاهزيته, فبشكل عام توفر المخلفات النباتية الكتلة

الرئيسة للوسط وتسمح بالتبادل الغازي ودخول االوكسجين الضروري لنمو االحياء

العالية فضال عن التجهيز بعنصر الكاربون لما تحتويه المجهرية والحفاظ على الرطوبة

هذه المخلفات من كميات كبيرة من السليلوز واشباه السليلوز واللكنين والبكتين. اما

توى واسع وتوفير مس المخلفات الحيوانية فلها دور بتجهيز عنصر النتروجين بشكل رئيس

ة تحول هذه الكتلة الحيوي ط فضال عنالتي لها دور في تحلل هذا الوس مجهريةالحياء اال من

.الفطرهذا ايتغذى عليه bioproteinمن االحياء بعد موتها الى مصدر للبروتين الحيوي

بنسب معينة من المخلفات الخلطوترطيب ال عموما طريقة تحضير هذا الوسط تضمنت

دخول الهواء ىلغرض التجانس بين مكوناته والحفاظ عل التقليبومن ثم النباتية والحيوانية

وبعد تكرار هذه العمليات بمدد زمنية محددة يتكون ما يسمى الوسط االختياري او االنتقائي

(selective .)هذه العملية دعىت Composting والوسط الناتجCompost

(MacCanna، 1984 ؛Ahlawat وVijay ،2000؛ Patyshakuliyeva و

DeVries،2000.)

مراجعة المصادر 11

:بمرحلتةن ينجزان وتهةئته الزرعيالوسط تحضةر عموما

(:phase1األولى )المرحلة

ومكائن ومسقفات خرسانيةمبلطة ارضية مع وجود في اماكن مفتوحة تجرى

تم استحداثها كبديل عن مكائن تقليب ( Bunkerطلق عليها )ي خاصة انفاق سط اووتقليب ال

من محركات ومراوح ةبواسطة منظومة مكون من االسفل دفع الهواء الوسط وظيفتها

خلط المكونات االساسية بعد من تحضير الوسط الزرعي تبدأ هذه المرحلة خاصة. وانابيب

الجزء فوق (4CaSO) والجبس النيتروجين وهي المكمالت فيما بعد شر. تنهاترطيبو معا

تغيرات دأبت في هذه المرحلة .يتم خلطها بشكل تام من قبل ماكنة التقليب .العلوي من الكدس

ائنات الك بفعل Aerobic Fermintation التخمير الهوائيحدوث نتيجةفي طبيعة الخلطة

الل هذه خ المضافة بكميات كبيرة يتم بشكل طبيعي في المكونات دوجوالتي ت الحية الدقيقة

الطبيعة تبدأأثناء هذه العملية في . ي أكسيد الكربونوثان واألمونيا الحرارة نبعاثا المرحلة

ثر كمصدر غذائي ا اذ اوسط مما يجعله لوسط الزرعي بالتحوللللمكونات الخام الكيميائية

كون هناك رطوبة تأن ومن العوامل التي تزيد من كفاءة هذه العملية الفطر. هذا مالءمة لنمو

ومن مؤشرات .العمليةهذه في جميع مراحل كسجينواألفضال عن توفر (74%) فيةكا

محتوى الخلطة طيعة وذا، لون بني اأن يكون الوسط ذ هي تهانهاي وصول هذه المرحلة الى

.اكتملت قد حلة األولىالمر تعد عندها ،رائحة قوية من األمونيا لها %24-29 رطوبي

(:Phase2)الثانةةحلةالمر

الحشرات ها كقتلو اآلفات الحد من االول :لمرحلةمن هذه ا انن رئيساهدف هناك

قد ي والت عن طريق البسترة الحرارية ، غيرها او المنافسة والديدان الخيطية والفطريات

تشكلت خالل المرحلة األولى منالتي المتراكمة إزالة األمونيا الثانيو .الوسط في تتواجد

الثانية بتركيز أعلى من حلة اذا كانت في نهاية المراألمونيا تحضير الوسط علما ان

مكن ي عموما ,ا، وبالتالي يجب إزالتهقاتلة لنمو فطر تكون في كثير من األحيان .2.22%

.%2.32عند تركيز أعلى من رائحة األمونيا ان يتحسس للشخص

ى نوع نظام اإلنتاج المستعمل ، وهذا يتوقف علالمرحلة تجري في واحد من ثالثة أماكنذه ه

عبأ او ي في غرف بسترة خاصة الوسط في الرفوف او الصواني وتوضعيعبأ ان وهو اما

ه المرحلةهذ نفذاو ت هانفسغرفة او قاعة اإلنتاج الوسط في الرفوف او الصواني وتنقل الى

م المزارع وهي المفضلة من قبل معظ (tannuleبوضع الوسط في انفاق خاصة )

ينبغي أن تمأل أو االنفاق والصوانيفي الرفوف الوسط الزرعي ععند وض، التجارية

وسطال بين بتبادل الغازات حتسم وبحدود ()الضغط كثافةالعمق و ال من حيثبشكل موحد

مراجعة المصادر 12

دأ هذه تب .الكربون استبدال األمونيا وثاني أكسيد خاللها سيتم والمحيط الخارجي والتي

ساعات لقتل المسببات 8-2م لمدة ˚22-52رفع درجة حرارة الوسط الى المرحلة ب

سترة تسمى هذه العملية البوالمرضية من الحشرات والديدان الثعبانية والفطريات المنافسة

(Pasteurization هذا النظام من رفع درجة )أن يتحقق عن طريق الحرارة يمكن

ريق حقن عن طأثناء نمو الكائنات الدقيقة التي تحدث بشكل طبيعي أو في الحرارة المتولدة

رة تدريجيا الى ان تصل الى . بعدها يتم خفض درجة الحراالبخار في الغرفة أو كليهما

وفي هذه المرحلة يتم استهالك المتبقي من االمونيا ايام 5-4م لمدة ˚42-48

deammonifying ارة التي لم تمت في الوسط من قبل االحياء المجهرية المحبة للحر

لى ا م ليتم التلقيح باضافة اللقاح الفطري˚05ثم تخفض حرارة الوسط الى بعملية البسترة

لوسط ا على درجة حرارة للسيطرة باستخدام الهواء هذه تتم عملية التحكم البيئيو الوسط

و نسبة %0.4-2.0وفي نهاية هذه العملية يفضل ان يكون محتوى النيتروجين من الوسط

، SWM؛ 2000، واخرون Biswas ؛Beyer ،2001) %20-29رطوبة بين ال

2012.)

Spawn &Spawning الفطري اللقاح: 2.6.2

بنقل المستعمرات الخضرية من الفطر النامية (spawn) الفطري اللقاحيتم انتاج

يروالشع على األوساط الغذائية الى الحبوب المختلفة من النباتات مثل حبوب الحنطة

% 45-50خفيض رطوبتها الى ت يتملق هذه البذور بالماء المغلي سوالدخن بعد والشيلم

مع حبوبالالقاعدية ومنع التصاق الى pHـلغرض تعديل ال خلط مع الكلس والجبست

جهاز الموصدة تعقم بواسطةو حرارية في زجاجات او كياس توضع .بعضها

(autoclave) بالغزل الفطري عندما تصل حبوبتلقح هذه ال بعد انتهاء عملية التعقيم

تكون جاهزة أي مكتملة مئوية،درجة 12او اقل من درجة مئوية 05 الى درجة حرارتها

يتم اضافتها الى الوسط الزرعي وخلطها الفطري اللقاح . بعد تحضيرأسابيع 1-0النمو بعد

الوسط المملوء بالرفوف او االكياس وبنسبة سم من 02-35معه في الطبقة العلوية ما بين

االنتشار وساعة يبدأ الغزل الفطر بالنمو 49-04بعد .من الوزن الرطب 2.25%-0.5%

أسابيع اذا ما انخفضت 4أسبوع ويمكن ان تصل الى 1-0 بعد مدة منشاره تويكتمل ان

نسبة حبوب اللقاح المضافة قلت درجة مئوية او اذا ما 04درجة الحرارة عن

(Maheshwari ،2001.)

مراجعة المصادر 13

Casing layer طبقة التغطةة: 3.6.2

البيت موس والرمل والكلس وبعض منتحضر طبقة التغطية من مواد مختلفة

تخلط هذه المكونات بنسب مختلفة ثم تعقم حيث الترب والوسط الزرعي المستنفذأنواع

تحفيز وتحول النمو الخضري للفطر الى تكوين اضافتها الغرض من .بالبسترة الحرارية

ثمرية او تكون قليلة الجساماالتتكون بدونها ال وهي عملية ضرورية االجسام الثمرية

لجيدة ة اجدا فضال عن منع جفاف الوسط وامداد الفطر بالرطوبة الالزمة وان لطبقة التغطي

ماء لل ةاو حامل ةخازنوصر الغذائية بالعنا ةكون فقيرتان منها مواصفات وشروط خاصة

خالية من المسببات المرضية و 6.5 - 8.5ما بين pHالـ جيدة نسجة ومسامية اتذو

طبقة وقت اضافة سم.5-1كون سمك طبقة التغطية المضافة مابين ييفضل ان .والحشرات

الفطري اللقاحيمكن اضافتها بعد اجراء اذ ,حسب النظام المتبع للزراعةبيختلف التغطية

(spawned) عد اكتمال ببعد أسبوعين اوثالثة أسابيع او احياناوللتبكير باإلنتاج للوسط

(Compostمن الوسط الزرعي ) %82 او %22 بنسبة تشار الغزل الفطريان

(Maheshwari ،2001.) الظروف البيئية المصاحبة لهذه المرحلة هي ان تكون

درجة مئوية ونسبة ثاني اوكسين 05ودرجة الحرارة % 85-95الرطوبة النسبية مابين

يفالتي تفسر تاثير طبقة التغطية ان الفرضيات .%0.3 الكاربون العالية والتي تصل الى

تحفيز تكوين االجسام الثمرية هي وجود االحياء المجهرية من البكتريا مثل

Pseudomonas putida تحفز تكوين االجسام الثمرية وزيادة التي في طبقة التغطية

من انوعالخر ان إضافة طبقة التغطية تعد واالعتقاد ا (Mohammad ،2002)اإلنتاج

.(Gaze ،0222و Noble) فتقارها للعناصر الغذائيةللفطر وذلك ال( strees)االجهاد

-0ن تتراوح مابي ان المدة الزمنية الالزمة لتحفيز االثمار الى وتشير الدراسات والبحوث

ت وتكوين التكتاليكتمل نمو الغزل الفطر على طبقة التغطية والتي خاللها أسبوع 1

. Mycelia Strandالفطرية التي تسمى او تدعى

اإلنتاج والجني: 4.6.2

Myceliaالفطرية تكون التكتالت بعد من مرحلة تكون االجسام الثمرية تبدأ

Strand يبدأ توفير الظروف المشجعة لها من خفض نسبة ثاني أوكسيد والتي عندها

39-32وخفض درجة الحرارة الى % 0.08الكاربون عن طريق التهوية الخارجية الى

دها يبدا تطور االجسام بع % 85-95الرطوبة الجوية بمعدل على درجة مئوية والحفاظ

ثم pin headتكوين رؤوس الدبابيس الى primordia البادئات الثمرية الثمرية بتكوين

مراجعة المصادر 14

يكون معدل الجنيات او ما يسمى الموجات .لفطرل fruiting bodiesاالجسام الثمرية

Flushes من %25تصل الى اكثر من اذ ها نسبة الجنية األولى تكون اعال .5-1ما بين

.(SWM، 2012) أيام 32-2وجنية مدة زمنية تستغرق من بين جنية ماواإلنتاج الكلي

فطر االزرار البةضاء ةةانتاج : تأثةر إضافة المغذيات في7.2

امل محددة لنمو وانتاج هذا تعد عو والنيتروجين الكربوهيدراتمن وجد ان كال

تاج نلذا فقد تم التأكيد على تدعيم الوسط بالمغذيات في مراحل مختلفة من دورة اال الفطر،

جنيات رئيسة االولى تمثل ثالجنيات الى اكثر من ثالزيادة عدد و وذلك لزيادة االنتاج

النسبة االكبر من االنتاج اما باقي الجنيات فتكون محدودة بسبب استهالك الخزين الغذائي

غذياتمالتحسينها باضافة من الوسط أو لعدم توفره الستمرار عملية االنتاج لذلك يمكن

في مراحل مختلفة تضاف المغذيات العضوية الى الوسط .(Beyer ،2001) العضوية

او مرحلة التلقيح Compostingقد تكون في مرحلة تحضير الوسط من دورة االنتاج

Spawning مرحلة التغطية اوCasing، ولتالفي انتشار االحياء المجهرية الضارة في

ي ف زيادةال فضال عن االضافة في المراحل المتاخرةالوسط بشكل مستعمرات عند اجراء

وقاتله عند oم29والتي تعد مؤذية للنسيج الفطري عند تجاوزها الـدرجـة حرارة الوسط

هذه الزيادة في درجات الحرارة ناتجة عن زيادة نشاط االحياء oم40وصولها الى

لذا يفضل اضافة المغذيات في المراحل ,المجهرية المختلفة الموجودة أصال في الوسط

، Mayو Royse) او اثناءه أي قبل عملية تلقيح الوسط باللقاح الفطري من االنتاج المبكرة

مثل كسبة بذور القطن او كسبة وصناعية مخلفات زراعية من هذه المغذياتو(. 0222

مرارية تجهيز تلتوفير اس وي يتم اضافتها الى الوسطغنية بالنيتروجين العضفول الصويا

، Muthersbaughو Beyer؛ Schisler ،a0222) الفطر بالغذاء الالزم للنمو

ومن المخلفات التي أدخلت مؤخرا في تعزيز الوسط الزرعي بالمغذيات نوى .(0222

نوى التمر ونخالة الحنطة (2001حسن )عبد الهادي واذ استخدم ،المطحونالتمر

لى ا افتهاكمغذيات للفطر المحاري وحصل على استجابة في زيادة الحاصل عندما تم اض

.%02و 32الوسط بنسبة

مراجعة المصادر 15

فطر االزرار ةةانتاج فيبالكاربون تأثةر إضافة المغذيات الغنةة: 1.7.2

البةضاء

يعد تبن الحنطة احد المكونات الرئيسة للوسط وهو المصدر األساسي للكاربون

متمثلة بالسليلوز والهيميسليلوز واللكنين ووجد ان الفطر %22اذ تصل نسبة الى العضوي

زالسكروالزراعي يفرز انزيمات خاصة لتحطيم هذه المركبات الى سكريات ابسط مثل

(Chang وMiles ،2002.) اجرى الباحث قد وDurrant دراسة (0220) واخرون

كنين( لز والسليلوالثالثة )السليلوز واشباه ال الرئيسة الكربوهيدراتيةلمصادر لتحليلية

وما تجرى عليها من تغيرات داخل الوسط الزرعي في نسبة هذه المركبات اتتغيروال

خالل دورة حياة الفطر اإلنتاجية أي من المرحلة الخضرية الى اإلنتاج وتحوالت كيميائية

تجزئتها هو اطالقمن هذه المركبات أي الناتج النهائي ئةتحلل وتجزعملية مشيرا الى ان

بدأ بعد مرحلة تسليلوز للسليلوز واشباه الالكبيرة جزئة الت عملية ان ,ثاني أوكسيد الكاربون

اما تحطم اللكنين فكان الجزء االعظم الى نهاية االنتاج primordia تكون االجسام الثمرية

ون االجسام لى بداية مرحلة تكا vegetative growth من بداية المرحلة الخضرية

.(pin head) الثمرية

للكاربون المغذيات الكربوهيدراتية ) من عدة مصادر (2002) الزبةدي عملتاست

على %3 بنسبة والسكروز %3بنسبة والدبس %4 بنسبة نخالة الحنطةب متمثلة (العضوي

فة ه تفوقت فيها إضاتحضيرتها الى الوسط الزرعي خالل مدة اضافتم أساس الوزن الجاف

ان (a2002وذكر شريف ). 0كغم/م 12.97نخالة الحنطة والتي وصل اإلنتاج فيها الى

لطاقة رئيسا ل امصدر الكاربون المعد لتغذية الفطر يجب ان يكون عضويا وهو يمثل مصدر

صدر وبناء على ذلك يمثل م االيضية،لعمليات حتاجها اتالجزيئات المختلفة التي ولهياكل

الكاربون الجزء األكبر من مكونات األوساط الغذائية للفطريات عالوة على ان

الكربوهيدرات تمثل نسبة مهمة من مكونات جسم الفطر.

ا انبماالزرار البيضاء ان فطر (2001)واخرون Patyshakuliyevaذكر

من خالل انتشار موجود من حوله في الوسط فانه يستمد الكاربون من خالل ما ةرمي تغذيته

تالتي تحلل السكريا خالل دورة حياته المختلفة الفطري وافرازه لالنزيمات النسيج

الى سكريات أحادية ذائبة والدليل على هذا فان نسبة عالية من السكريات المتعددة المتعددة

.تكوين االجسام الثمريةالخضري واثناء النمو في تنخفض

مراجعة المصادر 16

فطر ةةانتاج فيتأثةر إضافة المغذيات الغنةة بالنتروجةن العضوي : 2.7.2

االزرار البةضاء

ان نقص النيتروجين بصورة Sinden (1962)و Schislerاوضح كل من

فطر االزرار تحدد انتاج أحماض امينية او مجاميع االمين في الوسط الزرعي غالبا ما

-Proteinلذلك فقد امكن تعويضها باضافة المواد الغنية بالبروتينات والليبيدات ،البيضاء

Lipid Rich ينات تان اجراء التدعيم بالمواد الغنية بالبرو الى الوسـط الزرعي. وقد اثبتوا

يادة االنتاج في الجنيات غالبا ما تؤدي الى ز Spawning والليبيدات في مرحلة التلقيح

لوحظ ان الزيادة في انتاجية الجنيات المتأخرة تحدث عند تدعيم الوسط الزرعي و األولية

وعند اجراء التدعيم بعد Casingبالمواد الغنية بالبروتينات واللبيدات عند مرحلة التغطية

الى ان تدعيم الوسط الزرعي في Sinden (1966)و Schisler الجنية الثانية وتوصل

الطبيعية للبروتينات والزيوت والتي شملت بذور وكسبة وزيت مرحلة التغطية بالمصادر

كل من القطن وفول الصويا والفول السوداني وبنسبتين مختلفتين من االضافة لكل مادة

حسب المحتوى بمن الوزن الجاف للوسط الزرعي )وذلك 5-10%والتي كانت بحدود

ا ند اضافة البذور بكامل محتوياتهالنيتروجيني لكل مادة( ادت الى زيادة االنتاج والسيما ع

ة نة بكسبمن غير استخراج أي من منتجاتها والتي كانت افضل في زيادة الحاصل مقار

غم 1036و 518فقد كان معدل انتاج معاملتي االضافة بمقدار البذور التي ذكرت مسبقا

15.70 وسط الزرعي على اساس الوزن الجافكغم من ال 9من بذور فول الصويا لكل

على التوالي وكان معدل انتاج معاملتي االضافة لكسبة فول الصويا بمقدار 0كغم/م17.05و

على التوالي في حين 0م كغم/15.35و 13.3 نفسها كمية الوسط الزرعيغم ل844و 422

. اما اضافة زيوت هذه البذور فكان 0م كغم/ 8.4كان معدل انتاج معاملة المقارنة

والذي احدث زيادة في انتاج نفسها الوسط الزرعي السابقكمية مل ل 200-400بمقدار

زيادة حاصل فطر تجربة تهدف الى تحفيز Schisler (1967)اجرى وقد الجنية االولى.

ينالغنية بالبروت لمغذيات العضويةوذلك باضافة مجموعة مختلفة من ا االزرار البيضاء

القطن عند مرحلة التلقيحكسبة بذور كسبة فول الصويا وك فطر االزرار البيضاءل

كغم 7لكل مل 250غم و 400 معدلد ان اضافة كسبة فول الصويا بوقد وج. والتغطية

ادت الى الفشل في زيادة الحاصل جاف للوسط الزرعي عند مرحلة التلقيحمن الوزن ال

د اما عند زيادة نسبة اللقاح الفطري فق .اللقاح الفطري بالنسب االعتياديةفي حالة اضافة

عند مرحلة التغطية باضافة كسبة اما عند إضافة المغذيات .هناك زيادة في الحاصلكانت

مراجعة المصادر 17

من الوزن 8%و 4غم وهي تقريبا 286-572غم وبذور فول الصويا250-500بذور القطن

عظم عند م الجاف للوسط الزرعي ومواد بروتينية بنسب مختلفة ساهم في زيادة الحاصل

االضافات ماعدا االضافة بنسب عالية من المواد البروتينية وقد بلغ معدل الحاصل بعد

21.8و 22.4غم عند مرحلة التغطية الى 572و 286اضافة بذور فول الصويا بنسبة

. كما ادى 0م كغم/18.6على التوالي في حين كان معدل حاصل معاملة المقارنة 0كغم/م

النمواستعمال مجموعة من االحماض االمينية كمصدر للنيتروجين العضوي في وسط

Schislerوذكر (.Banerjee،0220و Guha)الفطري السائل الى تحفيز نمو النسيج

(1982b ) ان تدعيم الوسط الزرعي بالمواد الغنية بالبروتين والليبيدات يمكن ان يجرى

االنتاج أي من عملية تحضير الوسط الى ما بعد مرحلة التغطية في مراحل مختلفة من دورة

اء عملية ان اجرو علما ان عملية التدعيم تكون على كفاءة عالية عند مرحلة التغطية.

تحدث بعض االضرار كتشجيع بعض االحياء المجهرية المنافسة التلقيحالتدعيم في مرحلة

ارتفاع درجة الحرارة. وقد امكن تحديد هذه االضرار و نفضال ع Moldsمثل االعفان

Delayed-release nutrients التغلب عليها عن طريق انتاج مواد بطيئة التحرر تسمى

1976والتي هي عبارة عن زيوت مغلفة بغطاء بروتيني انتجت تجاريا بعد تطويرها سنة

(.May ،0222و Royse) Spawn mateوتسمى حاليا

إضافة اختبار Schlagnhaufer (1992)و Romaineاجرى كل من

مكونة من مواد متنوعة من باستعمال حبيبات المغذيات الى الوسط لفطر االزرار البيضاء

Hygramerhgوالـ Vermiculiteوسط الـمركبات بروتينية تحتوي على الصوديوم و

كملقحات استعملتوبتراكيز مختلفة من بروتين الصويا مع ملح كلوريد الكالسيوم والتي

المحضرة من حبوب المحاصيل وبعدما تم خلطها مع الوسط الزرعي من الملقحات بدال

وطبقة التغطية احدثت سرعة في النمو وتقصير مدة تكوين االجسام الثمرية وقللت من

ل من واثبت ك تؤثر في كمية الحاصل وحجم االجسام الثمرية.المدة بين الجنيات ولكن لم

Gupta وVijay (1992) ان إضافة المغذيات الى الوسط الزرعي لفطر االزرار

بعد تعقيمها 1-2%من كسبة فول الصويا وطحين بذور القطن بنسبة البيضاء بكل

اال ان النسب العالية من إضافة 20-30%بالفورملديهايد زادت من الحاصل بنسبة

ان اضافة مواد (1993واخرون ) Nairووجد .المغذيات زادت من نسبة تلوث الوسط

تم اختبار تأثير اضافة كسبة بذور القطن الى الوسط كما التحرر زادت كمية االنتاج بطيئة

معنوي اثيركن هناك اي تالزرعي عند مرحلة التغطية فوجد زيادة في االنتاج في حين لم ي

كبريتات الكالسيوم في زيادة خلطها مع و Formaldehydeعند تعقيم هذه المواد بالـ

مراجعة المصادر 18

الزيادة المعنوية في اإلنتاج عند انأوضح (1995الحبةب ) في دراسة اجراهاو االنتاج.

بكسبة بذور زهرة الشمس من الوزن الجاف للوسط 2,1,0.5%لنسب اإضافة المغذيات ب

سبة عند اضافة ككانت حلة اضافة اللقاح الفطريعند مرعلى التوالي وكسبة بذور القطن

الزيادة وجد من خالل النتائج التي حصل عليها ان اذفقط, 1%بذور زهرة الشمس بنسبة

.عن معاملة المقارنة 27%بنسبة كانت

الى ان اعلى انتاج كان عند زيادة محتوى Gaze (1996)و Nobleتوصل

على اساس الوزن الجاف للوسط. 3.1%الى 1.6%النيتروجين في الوسط الزرعي من

بعد اجراء اربع تجارب من Muthersbaugh (1996)و Beyerوتوصل

والتي اشتملت عدة اضافات لوسط الزرعي للفطر الزراعيل التلقيحعند مرحلة التغذية

وفوسفات الصوديوم Rock phosphateمختلفة من الحجر الفوسفاتي بنسب ومواد

Sodium phosphate وسط عضوي متحلل نوعHypnum peat المواد فضال عن

-Proteinواد غنية بالبروتينات واللبيداتالتي تحتوي على مو المصنعة البطيئة التحرر

Lipid rich من الوزن الجاف للوسط الزرعي احدثت زيادة في االنتاج 10%بنسبة

وذلك عند اجراء التغذية 153.8%كفاءة حيوية بو 0م كغم/ 30.06وكان اعلى حاصل

من الوزن الجاف للوسط الزرعي فوسفات الصوديوم 6.25%بالمواد البطيئة التحرر مع

.105.7%وكفاءة حيوية 0م /كغم 20.67في حين بلغ انتاج الحاصل في معاملة المقارنة

زيادة في انتاجية فطر االزرار البيضاء عندما تم إضافة كل (2002) حسن واخرون جدو

من الوزن %4,1,0,3 تيةبالنسب اال من كسب فول الصويا وبذور القطن وزهرة الشمس

من كسبة فول الصويا %0نسبة االضافة ان في حينللوسط عند مرحلة التغطية الرطب

في دراسة اجراها و كغم وسط رطب. 322كغم/15.71مقدارها ن وكااعلى انتاجية سجلت

Vijay تضمنت تجربتين توضح دور مركب الفورملديهايد (2003) واخرون

ضافة كسبة فول الصويا للوسط لزيادة في تأثيره في كفاءة ا Formaldehyd)الفورمالين(

افة والتغطية بنسبة اض اللقاح الفطريانتاج فطر االزرار البيضاء عند مرحلتي إضافة

ففي التجربة االولى وجد ان المعاملة بمركب من الوزن الرطب للوسط الزرعي, %1

لمليون واضافتها جزء با 7000و 6000و 5000و 4000و 3000الفورملديهايد بتركيز

لصويا ا كسبة فول معاملةلفطر باالخص عند لهذا االنتاجادت الى زيادة عند مرحلة التلقيح

بالتراكيز العالية من مركب الفورملديهايد اذ كان اعلى حاصل قبل اضافتها الى الوسط

كغم وسط زرعي 100كغم/ 21.00جزء بالمليون والذي بلغ 6000عند المعاملة بتركيز

في حين كان معدل انتاج معاملتي المقارنة والتي احداهما كانت من دون اضافة لطحين

مراجعة المصادر 19

واالخرى من دون اضافة (Unruffled)ومن دون تقليب للوسط الزرعي الصويافول

كغم وسط زرعي 100كغم/ 14.60و 13.00 (Ruffled)ولكن مع تقليب للوسط الزرعي

على التوالي. اما المواد المضافة من دون معاملة او المعاملة بالتراكيز الواطئ فانها فشلت

انية اما عن نتائج التجربة الث .ن معاملتي المقارنةلى انتاج أي مفي زيادة االنتاج بالنسبة ا

بعد االضافة عند مرحلة التغطية لكسبة فول الصويا ومعاملتها بمركب الفورملديهايد

فكانت مقاربة للتجربة االولى اذ ادت 5000و 4000و 3000و 2000و 1000بتركيز

لواطئة لهذا المركب الى اضافة كسبة فول الصويا من دون معاملة او معاملتها بالتراكيز ا

خفض الحاصل على عكس من المعاملة بالتراكيز العالية التي ادت الى زيادة الحاصل

19.90جزء بالمليون والذي بلغ 4000والذي كان أقصاه في المعاملة بتركيز

كغم وسط زرعي, في حين كان معدل انتاج معاملتي المقارنة لهذه التجربة من 100كغم/

دون تقليب للوسط الزرعي او من دون اضافة مع تقليب للوسط الزرعي دون اضافة ومن

Gargوفي دراسة اجراها كغم وسط زرعي على التوالي.100كغم/ 14.66و 13.00

ويوعض تم فيها اختبار كفاءة كسبة زهرة الشمس كمصدر نيتروجيني طبيعي( 2004)

اثناء ي فاذ تمت االضافة البيضاءسين انتاج فطر االزرار تحبديل عن مخلفات الدواجن ل

وكان اعلى 25%و 22و 18تحضير الوسط الزرعي مع تبن الحنطة وبثالث نسب هي

طن وسط زرعي بينما ادت نسبة االضافة كغم/ 226وهو 22%انتاج عند االضافة بنسبة

%5 ةبنسب عند مرحلة التغطية اضافة كسبة فول الصويا وان الى خفض الحاصل. %25

لفطر االزرار الجنية األولىحاصل أدت الى زيادة على أساس الوزن الجافالى الوسط

في الحاصل الكلي من مجموع تقريبا %21الى هذه الجنية ةنسب من زاد مما البيضاء،

.(2002، )القةسي %25معاملة المقارنة حوالي حين كانت نسبة الجنية االولى من

فطر االزرار ةةفي انتاج (البروتةن الحةوي) الكتلة الحةويةتأثةر : 3.7.2

البةضاء

المكونة من خليط ان كتلة االحياء المجهرية Wood (0220)و Fermorذكر

ودة في جالمو سمن االحياء المجهرية والتي تضم البكتريا والفطريات واالكتينومايسيت

يث حكاربون والعناصر المعدنية لنتروجين والغنية با در غذائيةار مصالوسط الزرعي توف

مات افراز االنزيفادة منها في نموه من خالل مواد الغذائية ويقوم الفطر بااللهذه ال اتعد خازن

عد من المصادر ي compostوان وجود الكتلة الحيوية في الوسط الزرعي الالزمة لتحللها

لعنصري الكاربون والنتروجين وبعض العناصر المعدنية المغذية لفطر االزرار البيضاء

مراجعة المصادر 20

هذه الكتلة الحيوية بكل من الفطريات واالكتيونومايسيتس وتكون نسبتها ةحيث تكون متمثل

وتكون النسبة األعظم للفطريات المحبة للحرارة من الوزن الجاف %1.5حوالي

Theromophlic الفطر مجموعة منها وعلى الخصوص تم تشخيص Humicola

insolens var. therrnoide .له القابلية على هضم هذه وجد ان فطر االزرار البيضاء

وتوصل الى ان ،تحطيمهاالكتلة الحيوية وذلك من خالل افرازها انزيمات لها القدرة على

Fermor) 3:0.9الى البكتريا تمثل يتنومايسيكتلة الحيوية من الفطريات واالكتنسبة ال

فطريات ال من ان الكتلة الحيوية Wiegant (0222) بينما ذكر .(Grant ،0222و

د ووان ج. تابععلى الت 3:0 كانت بنسبة (compost) وسطال الموجود فيوبدائية النواة

على مثل للنمو هذا الفطرل ةمفضلال العوامل منتعد (compost)وسط الالكتلة الحيوية في

.(0220، واخرون Derikx)تلك األوساط

لوسط الزرعي في ل C/N Ratio تأثةر نسبة الكاربون الى النتروجةن :4.7.2

إنتاجةة فطر االزرار البةضاء

كمية تحديد في ارئيس ا( دورC/N Ratioلنسبة الكاربون الى النتروجين ) ان

تحضير الوسط في الطور االول والثاني اذ تكون النسبة مدة خالل االنتاج وهي تتغير

الطور االول تعدل هذه النسبة بفعل االحياء المجهرية في بداية 32/1-40/1حوالي

وقد عندها يصبح الوسط اختياريا 22/1الى 16/1الموجودة في الوسط حتى تصل بين

اعطت هذه النسبة افضل انتاج فضال عن انخفاض في نسبة االصابة باالحياء المجهرية

واخرون Ziedاما (.Kilpatric ،2000و Sharma)المنافسة خالل دورة االنتاج

رة خمير والبستطرق مختلفة من حيث مدة الت الوسط الزرعي بثالث واحضرفقد (2000)

16.5/1و 18.8/1و 18.4/1في الوسط وكانت C/N Ratio نسب الـ تونتيجة لذلك تفاوت

في ااينتبكانت النتائج ع سالالت من فطر االزرار البيضاءفي هذه الدراسة ارب تواختبر

مدة تقلكمية اإلنتاج ومدة التبكير بين السالالت ولكن في معظمها زادت كمية اإلنتاج و

على فطر ( 2002واخرون ) Chuوفي دراسة اجراها .18.8/1التبكير عند النسبة

Agaricus blazei في نسبة اوجد اختالفC/N Ratio استخدم فيها تبن الرز عندما

وصلت الى كمصدر رئيس للكاربون الوسط الزرعي ونشارة الخشب في تحضير

النسبة المرتفعة في الحالة الثانية جاءت نتيجة وان تابععلى الت 17.80/1و 16.80/1

در النتيجة تفوق تبن الرز كمص كانتو ن المرتفعة في الخشب عن تبن الرزكمية الكاربو

.للكاربون عن نشارة الخشب في االنتاج

مراجعة المصادر 21

Breeding & Improvement strains:السالالتوتحسةن تربةة :8.2

من اهداف تربية وتحسين الفطر الزراعي هي زيادة اإلنتاج وتحسين النوعية ان

ديدها يتم انتاج السالالت تجاريا وتج (.Kothe ،2000) فضال عن مقاومتها لالمراض

بوغ العزل المفرد لل للعزالت الناتجة مناالنتخاب ىاألول ثالث طرقاجراءها عموما ب

يتم اخذها multispore بواغخليط من االو single spore isolationويطلق عليها

اخذ قطعة بتم ت Tissue culture والزراعة النسيجية spores print بواغمن بصمة اال

ت تغايرا احداثو. والطريقة الثانية النتاج السالالت الجسم الثمرينسيج صغيرة من

لثالثةاالطريقة و اوالكيميائية. للمطفرات الفيزيائية عن طريق تعريضها يدجد وراثية

او بين سالالت األنواع المختلفة (intracrossing) نفسه لنوعبين السالالت ل التهجين

intercrossing الدمج البروتوبالزمي من خالل (protoplast fusion) (Apcaem ،

من المسوغات الرئيسة في افتقار قطاع برامج تربية وتحسين اان واحدو .(2000

من نوع والتي هي دورة حياته الشائعة تعود الىالالت وإنتاج الهجن لهذا الفطر الس

secondary homothalic (Khush 0220، واخرون.) ويبدو ان التربية الفعالة لهذا

مها الى الصدفة ظتخضع في مع همية االقتصادية كانتالفطر وإنتاج السالالت ذات األ

اول هجينين في انتاج وكان (.0222، واخرون Sonnenberg) 3822حتى أواخر سنة

( بين صنفين تجاريين األول Horst U3و Horst U1اطلق عليهما ) 3892العالم سنة

( off whiteطلق عليه )اوالثاني مائل الى اللون األصفر (white) ذو لون ابيض

(Fritsche ،0221) كانت معظم السالالت الزراعية في 3892لذلك حتى أواخر سنة

وأكدت (.0222، واخرون Loftus)العالم هي مطابقة لهذين الهجينين او مشتقة منهما

Yadav ( 2000واخرون) بين سالالت هذا الفطر ان يمكن من خالل عملية التهجين انه

زيادة كمية الحاصل وبعض صفاته مثل معدل وزن الجسم الثمري. علىنعمل

Mutation طفراتال: 1.8.2

توفر الطفرات مصدرا للتغاير الوراثي الى جانب التكاثر الجنسي في االحياء

ي تغير مفاجئ ودائم في صفة والطفرة ه .الحقيقية النواة ومنها اغلب أنواع الفطريات

( فيزيائية مثل االشعة Mutagensتحصل الطفرات نتيجة تأثير عوامل مطفرة ) مورثة

فوق البنفسجية واالشعة السينية واالشعاعات النووية او الكيميائية مثل نتريت الصوديوم

تتعرض لها الخاليا في الطبيعة والحداث طفرات او استحثاثها تستعمل هذه المطفرات

ل على تغيرات وحصال تمولقد (.b2002، )شريف ختلفةبشدات او تراكيز معلومة لمدد م

مراجعة المصادر 22

المطفر الكيميائيب عد معاملتهب Hypsizygus marmoreusوانتاجية للفطر مظهرية

methyl methanesulfonic acid في %3الى %2بين تراوحت ةبتراكيز مختلف

اما .(2002، واخرون Lee) oم04درجة حرارة تحتلساعة واحدة يبوغالمعلق ال

sharma وsharma (2014) المطفر الكيميائي افقد استخدم ethyl

methanesulfonic acid ( 0.001,0.002,0.003,0.004,0.005بالتراكيز المئوية )

ددبالم pleurotus ostereatusاالشعة فوق البنفسجية على الفطر ب ريطفتفضال عن ال

لتحسين بعض الصفات النوعية للفطر سم 32و 5( دقيقة بمسافة 25,20,15,10,5التالية )

على لوحصجسام الثمرية التي تسبب الحساسية او الوهي تقليل نسبة االبواع في اال

.spore less ابواغالالت التنتج س

تاثةر الكولشسةن في احداث الطفرات: 1.1.8.2

معاملة الخاليا الطفرات ان من الوسائل المتبعة الحداث (0222) ذكر المختار

(0كما موضح تركيبها بالشكل ) ( وهي مادة قلويةColchicineسين )شبمادة الكول

ان هذه و، autumn crocus (Colchicum autmnale)تستخرج من نبات اللحالح

في منع تكوين خيوط المغزلمن خالل التضاعف الكرموسومي تعمل على احداث المادة

مات بعد االنشطار دون تكوين جدار خلوي اثناء االنقسام االعتيادي فتعيق حركة الكرموسو

وبذلك نحصل على ضعف العدد من الكرموسومات في الخلية ذاتها ويسمى هذا جديد

.Autopolyploidsالنوع من التضاعف التضاعف الذاتي

حقيقية النواة في كائنات Polyploidيعد حدوث صيغة التضاعف الكرموسومي

، تم وصفها بصورة خاصة في النباتات، وإلى حد أقل في الحيوانات، ةعملية تطورية رئيس

وليس من المفاجئ ان نرى حدوث حد كبير قليل الىالفطريات فقد ظل البحث فيها اما في

Pezizomycotinaالتضاعف الكرموموسومي في مدى واسع من شعب الفطريات مثل

و Saccharomyces. وعلى وجه الخصوص في جنس Saccharomycotinaو

Candida وامكن احداث التضاعف الكرموسومي عن طريق التهجين بين االجناس

و Albertin)سين شطة معاملتها بمادة الكولواالنواع او عن طريق التحفيز بواس

Marullo ،2002) طر للف الذي حدث في الطبيعة التضاعف الكرموسومي تم تحديدوقد

التابع dung-loving bird’s nestاالسم الشائع له stercoreus Cyathusالغذائي

، tetraploid (Luوكان التضاعف من النوع الرباعي Basidiomycotaالى شعبة

الطفرات اعنوا كأحد التضاعف الكرموسومي (2002ووضع شكارة ) .(0222

مراجعة المصادر 23

ة مجموعيجة تغير في عدد الكرموسومات من خالل إضافة تنتحدث التي الكرموسومية و

او اكثر 4xاو 3xاو اكثر الى المجموعة الكرمومسومية لكي تصبح كروموسومية

منع تكون المغزل وبقاء الكولجسين في احداث التضاعف من خالل عادة ويستعمل

الكرموسومات في مركز الخلية.

سين في احداث التضاعف شمادة الكول (2002واخرون ) Hosseiniاستعمل

0.1, 0.05وكانت التراكيز ) Pleurotus ostreatus الزراعي الكرموسومي للفطر

Toyama (2010) وتمكن .%92 اإلنتاج بنسبةفي كمية وحصل على زيادة (% 0.3,

shiitake (lentinula edodes)لفطر الزراعي لاحداث التضاعف الكرموموسومي من

وسجلت %0.1سين والتي تمت بمعاملة الغزل الفطري بتركيز شوذلك بأستعمال مادة الكول

ان ( 2002واخرون ) Rauf وقد ذكر .كطريقة للتربية يمكن تطبيقها واالستفادة منها

عند معاملته Allele Frequencies والـ DNAالكولشسين قد يحدث تغايرات في تتابع الـ

للنبات.

التركيب الكيميائي لمركب الكولشسين. 2شكل

مراجعة المصادر 24

في تربةة وتحسةن والمؤشرات الجزيئةة حةائةةاال التقانات دور: 2.8.2

فطر االزرار البةضاءل السالالت

من قاتهاةوتطب electrophoresis : تقانة الترحةل الكهربائي1.2.8.2

المؤشرات الجزيئةة

فطر االزرار البيضاء برامج تربية في االحيائية التقانات استعمل من اول ما

والتي كان لها دور في isozyme نزيمات المتناظرةمؤشرات اال هيواالستفادة منها

ات فيما حدوث التضريب د منسالالت للنوع الواحد والتأكبين ال الوراثي تحليل التباين

بعدها تقانة ثم طبق (Royse،0222و May ؛May ،0222و Royse)بينها

allozymes ية يفها في برامج تربوالتي استعملت للكشف عن التنوع الوراثي وتوظ

التي ادخلت اما اول البحوث .(Ross ،0222و Kerrigan)فطر االزرار البيضاء

Restriction fragment( RFLP) تقانة حسبب كانتف DNAالـتقانة مؤشرات

length polymorphism كشف عن والتي نجحت في تحديد التنوع الوراثي و ال

، واخرون Castle) أداة فعالة في برامج تربية هذا الفطر عدهاالسالالت فضال عن

(0222، واخرون Summerbell ؛0222، واخرون Loftus ؛0222

ة الترحيل الكهربائي في الكشف عن الكثير من المعلومات انتققد تم توظيف ل

كان الكرموسومات والتي على وجه الخصوص ومنها للفطريات المجهولةاثية الور

تاستخدم )التصبيغ(, لذا من خالل التقانات الخلوية وعدها وبة مشاهدتهامن الصع

Pulsed-field gel(PFGE) والتي تدعى كرموسوماتالفصل تقانة

electrophoresis ب( حسب نظامCHEF )Clamped Homogeneous

Electric Fields توصيف الهيئة الكرموسومية في انها فعالة والتي وجد

(Karyotype) ان فطر من خالل هذه التقانة لهذا الفطر وباقي الفطريات وقد اثبت

هذه . ولكن ما يعاب علىاتكرموسوممن ال ازوج 31يحتوي على االزرار البيضاء

Lodder) أيامعدة الى تمتد ومستمرةللترحيل ى مدة طويلحتاج الا تالطريقة انه

واستعملت هذه التقانة فيما بعد .(0222، واخرون Sonnenberg؛ 0221، واخرون

ووجد Pleurotus ostreatusمن الكشف عن الهيئة الكرموسومية للفطر المحاري

.(0222، واخرون Larraya) من الكرموسومات ازوج 33انه يحتوي على

مراجعة المصادر 25

DNAلسلسلة التفاعل العشوائي متعدد االشكال : تقانة 2.2.8.2

:قاتها من المؤشرات الجزيئةةةوتطب

هذه التقانة بأنها عبارة عن تفاعل انزيمي خارج خلوي يتم من خالله يمكن وصف

الى ماليين النسخ خالل ساعات قليلة وبأستخدام DNAمضاعفة قطعة صغيرة من

الذي يوفر درجات الحرارة الالزمة لكل Thermocyclerجهاز المبلمر الحراري

الثابت في Taq DNA Polymeraseفضال عن انزيم بلمرة مرحلة من التضاعف

والمحلول المنظم الذي dNTPsية والقواعد النتروجينية األربع درجات الحرارة العال

وتتلخص .(2002، واخرون snniI)الالزم لعمل انزيم البلمرة. 2MgClيتضمن ملح

مراحل: البلمرة بثالثعملةة

Denaturationالمسخ -0

DNAتحويل شةةةةةةريط تفكيك ووهي اول مرحلةة من مراحل التفاعل يتم خاللها

الى شةةةةةةريط مفرد Doubble-Stranded DNAمزدوج حلزوني من شةةةةةةريط

Stranded DNA-single 84عن طريق معاملته بدرجات حرارة عالية تصل الى

ولعدة دقائق يتم خاللها تكسةةير االواصةةر الهيدروجينية التي تربط كال الشةةريطين oم

مع بعضهما, والغرض من هذه الخطوة ان نجعل كل شريط مفرد يسلك سلوك القالب

Template .(Eckert وKankel ،0220؛ Brown ،0222).

Annealingاالرتباط -2

DNAط شريب سلسلة من تتابعات القواعد النتروجينية لكونهالبادئ رتبط ي

1-اية عند النه لتلك التتابعات من القواعد النتروجينية المناظرة اقالب لكونهالمفرد

DNAعمل إنزيم بلمرة ءالضرورية لبد OHالمحتوية على مجموعة الهيدروكسيل

(Zaid 0222، وآخرون.) لطول البادئ االرتباط حرارةوتختلف درجة تبعا

≡ C Gالمستخدم ونوع القواعد النتروجينية المكونة للبادئ ففي حالة زيادة نسبة

يستلزم رفع درجة الحرارة الالزمة لإلرتباط ، ويتم تحديد درجة حرارة األرتباط )

Annealing بتقدير درجة اإلنصهار أو التفكك للبادئ ويرمز لها بالرمز )Tm

(Melting Temperature) وهي درجة الحرارة المناسبة لحدوث اإلرتباط بين

Tm ({ =T -وفق المعادلة اآلتية : على وتحسب DNA -Templateالبادئ و

+ A × )0 ({ + } مC + G × )4 م} Newton) وGraham ،0222.)

رتباط البادئات ثانية يتم آ 42-02لمدة °م 25 -52بخفض درجة الحرارة بحدود و

.المفرد DNA بشريط

مراجعة المصادر 26

:Extensionاالستطالة -1

منقوصة االوكسجين ثالثية الفسفور إضافة القواعد النتروجينيةهي مرحلة

(dNTPs) DeoxynucleosideTriphosphate عند منطقة ارتباط البادئ بقالب

DNA ون وفي هذه المرحلة تك ة شريط مزدوج بفعل انزيم البلمرةليتم اكماله على هيئ

لكي يعمل بأعلى كفاءة النها الدرجة المثلى لعمل انزيم البلمرة. oم 20درجة الحرارة

DNA وناتج هذه الدورة من PCRهذه المرحلة تنتهي اول دورة لتفاعالت وبانتهاء

فهي ،القواعد النتروجينية ستطالة السلسلة الجديدة بضضافةآل المزدوج سوف يستخدم

DNA تمام عمل البادئ بمساعدة أنزيم بمثابة أحجار البناء الفردية الالزمة إل

polymerase) Taq م 25 -22( عند درجة حرارة° .

-: نوع القاعدة النتروجةنةة حسببالى أربعة انواع (dNTPs )وتقسم

Deoxy Adenosine Triphosphate (dATP )

Deoxy Thymosine Triphosphate (dTTP )

Deoxy Guanosine Triphosphate (dGTP )

Deoxy Cytosine Triphosphate (dCTP )

( بدءا من نقطة آرتباط البادئ بالقالب بواسطة OH -3التي تضاف الى النهاية )

( المضاف الى التفاعل على تركيز (dNTPsإذ يعتمد تركيز DNAأنزيم بلمرة

+2Mg جاهزية الثاني الالزم لفعالية أنزيم بلمرة ألن زيادة أالول تؤثر في DNA

Innis) و Gelfand، 0222.)

من المكونات آهتمام كبير من المختصين لكونهب DNA أنزيم بلمرة حظى

إال إن هذا األنزيم يفقد قدرته على DNAاألساسية في تفاعالت التضاعف لسلسلة

البناء عند تعرضه الى درجات الحرارة العالية مما يستلزم إضافة كميات أخرى منه

(.0222وآخرون، Chien) في كل دورة

( و هو سلسلة مفردة من الببتيد المتعدد Taq Polymeraseلذا تم آستنباط أنزيم )

الحارة رة التي تعيش في الينابيعالبكتريا المحبة للحراالثابت حراريا والمستخلص من

Thermophallic Eubacterium (Thermus aqueticus) التي تبقى في أوج

(. 0222وآخرون، Saiki)°م 25-22فعاليتها حتى عند رفع درجة الحرارة بين

زيم و نولتنظيم عمل ونشاط أنزيم البلمرة البد من توفيروسط كيميائي مالئم لنشاط اال

( الخاص بعمل األنزيم الذي Bufferاستقراره عن طريق إضافة المحلول المنظم )

مراجعة المصادر 27

عند إضافة كميات قليلة من الحوامض أو القواعد إليه pHيقاوم التغير في

Raymond) ،2002.) ولربط حلقات سلسلة التفاعل التضاعفي (PCR مع بعضها )

( وهو الجهاز Thermocyclerالبعض البد من توافر جهاز التدوير الحراري)

،رجات الحرارة وخفضها بشكل متناوبعن طريق رفع د DNAالمستخدم لمضاعفة

عند درجات الحرارة العالية ثم ترتبط البادئات بالشريط DNAإذ يفصل شريطي

المفرد عند تخفيض درجة الحرارة وعند رفع درجة الحرارة مرة اخرى درجة معينة

دنا تؤدي الى آستمرار استطالة الشريط مما ينتج منه ماليين مع وجود انزيم بلمرة ال

المتضاعفة أسيا DNAمن النسخ المضاعفة الناتجة من قطعة واحدة من

(Sambrook وRussell ،2000 ).

-وفوائدمها: ( (PCRتقانة ممةزات استخدام

صادية.االقتستخدام التقانه في برامج التربية والتحسين وإنتاج الهجن للمحاصيل ا -

.DNAلة جدا من آستخدام التقانة في تقدير ودراسة كميات قلي -

أستخدمت في تشخيص بعض األمراض الوراثية عن طريق تشخيص المورث أو -

الجين المسوؤل عن ظهور المرض وفي تشخيص الطفرات واألمراض الطفيلية

والفايروسية.

ن ودان للنوع نفسه أو لنوعيتستخدم عند إجراء المقارنة بين تركيبين وراثيين يع -

مختلفين يمكن المقارنة بينهما عن طريق آستخدام بادئات عشوائية .

cDNAبعد تحويل االخير الى دنا تكميلي مفرد RNAتستخدم لمضاعفة

Complementary DNA)) بآستخدام انزيم النسخ العكسيreverse

transcriptase بأستخدام تقانة(R T – PCR ) (2002، )وصفي .

اف ابة والبعد أسهل بعد آكتشوأصبح التمييز بين العالقات الوراثية من حيث القر

SSR)و AFLP و RAPD) ( مما أدى الى ظهور تقنيات حديثة مثل(PCR ةتقان

(Powell ،0222 وآخرون .)من تطبيقات مؤشرات قد أجريت كثيروDNA-

Marker بيق الـ تط تم من القرن السابق التسعيناتففي على فطر االزرار البيضاء

PCR-RAPD لناتج ا لسالالت فطر االزرار البيضاءالتنوع الوراثية مدىفي تحديد

.(0222 ،واخرون Khush؛ 0220، واخرون Khush) التضريبات فيما بينهامن

استعمالبساللة تجارية من هذا الفطر ةعشر اثنتي التمييز بين تمفي القرن الحالي و

أظهرت Inter Simple Sequence Repeat-Markers(ISSR)من ابادئ 02

مراجعة المصادر 28

ستة والتي تعود الى حزمة 304وصل مجموعها الى (bandمن الحزم ) اخاللها عدد

لى ا عد الوراثي بين السالالت لتقسمب الباحسوتمكن من خالل هذه التقنية .فقط بوادئ

رسم ورصد االختالف الوراثي اجراء .(2002، واخرون Guan)مجموعتين

ساللة من ن لثمانية وعشري SSRالتحليل العنقودي عن طريق المؤشرات الجزيئية للـ

برية العشرون ساللة الباقيةهجن و تجارية واثنتانكانت منها ست هذا الفطر

(Foulongne-Oriol 0228، واخرون). استخدم ومؤخرا قدDNA المايتوكندريا

(mtDNA في )ظهار ال البحوث الحديثة للدرسات الجزيئية لفطر االزرار البيضاء

واالستفادة منها ضمن برامج التربية لنوع الواحدلضمن السالالت التباين

(Jalalzadeh 2002، واخرون).

DNA متعدد االشكال لسلسلة العشوائي تقانة التفاعل تطبةق : 1.2.2.8.2

RAPD-PCR:

معهد بحوث الفطريات الغذائية التابع الى اكاديمية درس باحثون من الصين في

يعملون في معهد بحوث محاصيل الخضر ومعهد االعلوم الزراعية وباحثين من بولند

بحوث تربية النبات التنوع الوراثي بين السالالت الموجودة في الصين والسالالت

وتوصلوا الى نتيجة ان ليس هناك RAPD مؤشرات وتم استعمال االموجود في بولند

ةبينها مجتمعلة من الصين وفيما سال 34و ساللة من بولندا 30واسع بين تباين وراثي

U3و U1 جود في العالم هي من اصل الساللةمعللين ذلك ان معظم السالالت المو

(Staniaszek 2002، واخرون). استعماالت أخرى لمؤشرات وكان هناكDNA

(Homokaryons) في تحديد الغزل الفطري احادي النواة RAPD حسب مؤشرات

الدخاله في برنامج التضريبات (Heterokaryons) عن الغزل الفطري ثنائي النواة

.(YinBing ،2000 و Nazrul) بين السالالت النتاج الهجن

لفطر االزرار البةضاء العالجةة الطبةة ذات التأثةرات المركبات :9.2

الى وجود مضادات اكسدة فطر االزرار البيضاءتعود االهمية الطبية ل

antioxidant (مثل الفينوالتphenols )( والفالفونويدflavonoid)

(. Abah ،2000 و Abah؛ 2002 ،واخرون Jagadish) ergothioneineوالـ

يساعد في خفض ضغط الدم الغذائي وأكدت الدراسات ان استهالك الفطر

والتي تدعى Sterolsوالكوليسترول وذلك الحتوائه على نسبة من الستيروالت

مراجعة المصادر 29

ergosterol ( وهي عبارة عنprovitamin D2ومركب الـ )statin والذي له دور

ر يين كما يحتوي هذا فطفي اعاقة امتصاص الكوليسترول مما يمنع تراكمه في الشرا

في تثبيط االورام والخاليا السرطانية مثل ةالفعال الكيمياويةت من المركبا كثيرعلى

والتي تعد من مركبات سكرية Chitinوالـ B-glucanالـ

ما ةحيث ترتبط هذه المركبات مع البروتينات مكون Polysaccharidesةمتعدد

كثيرتوصل و (2000، واخرون Takaku) Polysaccharide-Peptideيسمى

من الباحثين الى وجود مركبات فعالة ذات تأثير مضادة لنمو الخاليا السرطانية

(Xiong ،2000) كما يحتوي الفطر على مركبات اخرى مثل .Iso-flavones

الذي يعمل مع هرمون Aromataseتعمل على تثبيط انزيم Flavonesو

Estrogen 50%في تحفيز تكاثر الخاليا السرطانية ولقد وصلت نسبة التثبيط الى

(Grube 2000، واخرون). وقد قدمت الفطريات الطبيةMedcinal)

mushrooms )النشطة هي آمنة للبشر مركباتهامن المركبات ذات ميزة في أن كثير

و terpenoidsو heteropolyscharidesو B-glucanومن هذه المركبات

glycoproteins وlectines ولهذه الفطريات البازيدية فاعلية على تثبيط خاليا

بكتريا السالبة والموجبة لصبغة كرام التي تصيب الاألورام واالحياء المجهرية من

فعالية مضادة للفطريات التي تصيب االنسان والنبات ولبعض الفطريات االنسان،

(Robles-Hernández 2002، واخرون.) يتميز فطر االزرار البيضاء وهو

ادة بأمتالكه القابلية المض كثر شعبية في جميع أنحاء العالمالفطر الصالح لألكل اال

والكلسترول ( hypoglycemicوسكر الدم ) (anti-inflammatoryلاللتهابات )

(hypocholesterolemicبسبب وجود كميات ذ )من السكريات مستوى عال ات

و المواد المضادة ( واأللياف الغذائية acidic olysaccharides)الحامضية المتعددة

والفينوالت أركوثيونين و حامض الفوليك( وC ،B12 ، D)مثل الفيتامينات لالكسدة

؛ 2000، وآخرون Mattila ؛2000، وآخرون Fukushima)المتعددة

Koyyalamudi وآخرون، a2002 ؛Koyyalamudi وآخرون، b2002؛

Geosel التمثيل فييجابي إ اثركان لهذا الفطر وة على ذلكعال (.2000،وآخرون

ظيفة الكبد. على الرغم من أن األلياف الغذائية القابلة للذوبان هوالغذائي للدهون وو

المرشح االكثر احتمالية في خفض مستويات السكر في الدم والكوليسترول اما

، و C، فيتامين ادة للتأكسد )الفينوالت المتعددةخرى، مثل المواد المضاألمكونات ال

مراجعة المصادر 30

De Silva)ا هممريات المتعددة أيضا تلعب دورا والسك أركوثيونين( والبروتينات

(.2002، واخرون

Antioxidant activity القابلةة المضادة لالكسدة : 1.9.2

اثنةاء التفةاعالت تحدث سةةةةةةلسةةةةةةلة من في ان الجةذور الحرة التي تنتجهةا الخاليةا

العمليات الضةةةةارة لذلك وجدت مضةةةةادات األكسةةةةدة للعمل على الحد منها عن طريق

األخرىء أو منع أكسدة الجزيئات ألكسدة هو جزيء قادر على إبطامضةاد او ازالتها

بشكل رئيسمضادات األكسدة لذلك استعملت .(Sies،0222) سدة نفسهاكمن خالل

اآللية المقترح ان المواد المضادة و وعالج مجموعة متنوعة من األمراض في الوقاية

خالل نظافتها من الجذور الحرة، لالكسةةةدة تحمي الخاليا من جهد االكسةةةدة وذلك من

المواد المضادة فضال عن ان لدهون,عمليات اكسدة اإيقاف وب المعادن المحفزة خلو

على نطاق واسةةةع كاحد المكمالت الغذائية أمال في الحفاظ على اسةةةتخدمتلالكسةةةدة

.(2002، واخرون Nikolova)األمراض من الصحة والوقاية

دا يمكنه أن إن الجذر الهيدروكسةةةةةةيلي الحر هو عبارة عن إلكترون مفرد فعال ج

, Polypeptidesالببتيةةدات ومتعةةدد الببيتيةةدات والسةةةةةةكريةات ويتفةاعةةل مع الةدهون

و thiamine( والحوامض العضةةةةةوية خصةةةةةوصةةةةةا Nucleotidesنيوكليوتيدات )

quanosin ويسةةةةةةبةةب تحطم الخاليةةا (Ashok وAli ،0222) إن هةةذه الجةةذور.

مع بيروكسةةةةةةيد 2Cu+أو 2Fe+الهيدروكسةةةةةةيلية يمكن أن تنشةةةةةةأ من تفاعل الحديد

( و Polyphenole( و الفينوالت المتعةةددة )Tanninsو التةةانينةةات )الهيةةدروجين

هي مركبةةات طبيعيةةة فعةةالةةة جةةدا في قنص الجةةذور (Flavonoidsالفالفونويةةدات )

ضةةد األكسةةدة وتزداد فعالية هذا الفطر (.2002، واخرون Gupta) الهيدروكسةةيلية

الةةةةةةةـو( MC ،2002)الحةةةةةةةتةةةةةةةوائةةةةةةةه عةةةةةةةلةةةةةةةى السةةةةةةةةةةةةةلةةةةةةةيةةةةةةةنةةةةةةةيةةةةةةةوم

Ergothionine الةذي ال يتحطم بالحرارة أو الطهو (Dubost 2002، واخرون .)

لمقارنة مسةةتخلصةةات االجسةةام (2002) واخرون Jagadishفي دراسةةة اجراها و

قبل وبعد سةةةةةةلقها بالماء وجد انها ذات فعالية Agaricus bisporusالثمرية للفطر

ة النشةةةط ألكسةةةدةا اتمضةةةاد احد واعتبارهفي قابليتها على كبح الجذور الحرة عالية

.يةوالفالفونويد يةالفينولالمركبات وجود ب وعلل ذلك ةالالفع

مراجعة المصادر 31

المركبات الفةنولةة: 2.9.2

ثانوياليض الل العمليات الحيوية ناتجة منمركبات اروماتية المركبات الفينولية

(kähkönen 1999،وآخرون .) ومجموعة حلقة اروماتية واحدة أو اكثر تتميز بامتلكها

نوع من 8000اكتشف حتى اآلن اكثر من (.1كما في الشكل) اكثرهيدروكسيل واحدة أو

المركبات الفينولية تتراوح بين الجزيئات الصغيرة مثل الحوامض الفينولية والمركبات

المركبات كما صنفت (، 2007وآخرون ، D`Archivio)العالية البلمرة مثل التانينات

الى فينوالت بسيطة وفينوالت متعددة اعتمادا على عدد وحدات الفينول في الفينولية

coumarinمثل الكومارين البيئة، إذ تنتشر عدة انواع من الفينوالت في واحدةالجزيئة ال

والتانين Condensed Tannin والتانين المكثف lignanواللكنان ligninنين واللك

phenolic acidsوالحوامض الفينولية Hydrolysable Tanninالقابل للتحلل

ت الفينولية تقسم المركبا .( 2012،وآخرون Soto-Vaca) flavonoidsوالفالفونويدات

benzoic acidو cinnamice acid، الحوامض الفينولية مثل بشكل رئيس الى قسمين

Hydroxy الكلي من المجموع 60% والفالفونويدات وبنسبة 30%والتي تبلغ نسبتها

. (2010، وآخرون Garcia-Salas) للفينوالت

الوقاية من أمراض القلبة إذ أنها تعمل على مركبات الفينولية فوائد صحية عدلل

، وآخرون Jung ؛2005، وآخرون Tsanga)والسرطان

كما (2007، و آخرون God ؛2007، وآخرون Shanmuganayagam؛2006

، وآخرون Sato)تعمل على خفض األجهاد التأكسدي لبالزما الدم وتؤخر الشيخوخة

فضال عن فعاليتها المضادة لالحياء المجهرية (1997، وآخرون Meyer ؛1996

benzenoidولالكسدة ، إذ ان المركبات الفينولية تتفاعل مع البروتينات نتيجة وجود حلقة

(ROO,.RO,.R.)( في كبح الجذور الحرة والتي رمز لها AHالية عمل مضادات االكسدة والتي رمز لها )

مراجعة المصادر 32

الكارهة للماء واالواصر الهيدروجينية وبذلك فضن للمركبات الفينولية القدرة على تثبيط

Lipoxygenaseاالنزيمات التي تعمل على توليد الجذور الحرة مثل انزيمات

ينوالت القدرة على العمل مما يعطي للف Xanthine Oxidaseو Cyclooxygenaseو

وقد حظيت (Bolwell ،2002و Parr ؛ 1988وآخرون ، Cos)لألكسدة مضادات

لنباتية غذية االمركبات الفينولية باهتمام كبير لوجودها المطلق في تشكيلة واسعة من اال

من العوامل الوقائية ضد السرطان وامراض القلب بسبب خصائصها المستهلكة ولكونها

.( 2011وآخرون، Cartea)المضادة لالكسدة

إذ انها تتألف phenyl benzopyranتتميز الفالفونويدات بالتركيب الكيميائي

( تشترك في تكوين هيكل C6-C3-C6ذرة كاربون موزعة على ثالث حلقات ) 15من

( وهي عبارة عن benzopyran) Chromonالفالفونويدات باندماج حلقة الكرومون

وكذلك مع الجزء الفينولي االساسي A مع الحلقة االروماتية Cتركيب حلقي يسمى بالحلقة

اعتمادا على عدد مجاميع الهيدروكسيل الى مجموعة A، يمكن تقسيم الحلقة Bالحلقة

Phloroglucinol إذا احتوت الحلقة على ثالث مجاميع هيدروكسيلMeta-

trihydroxylat اوresorcinol إذا احتوت الحلقة على مجموعتين من

Haslam ؛meta-dihydroxylated (Ribereau–Gayon ،1972الهيدروكسيل

تنقسم الى عدة انواع اعتمادا على عدد واسلوب ترتيب مجاميع Bالحلقة و (1998،

الهيدروكسيل فضما ان تحتوي الحلقة على مجموعتين من الهيدروكسيل وبشكل مستقيم

ortho-dihydroxylated او ثالث مجاميع من الهيدروكسيل المتجاورةvicinal-

trihydroxylated اماالحلقة ،C فتوجد بأحد االشكال االتيةpyran اوPyrilium او

γ-Pyrone Aron) وKennedy ،2008) تقسم الفالفونويدات الى عدة اقسام منها

iso-flavonolواآليزوفالفونول flavonolوالفالفونول flavoneالفالفون

والبروانثوسيانيدين Anthocyanidinوسيانيدين واالنث Anthocyaninواالنثوسيانيين

Proanthocyanidin والكاتكينcatechin (Rong ،2010 ؛ Ferreira وPinho

حيث تختلف فيما بينها بدرجة البلمرة وعدد واسلوب ترتيب مجاميع (2012،

فضال عن اسلوب اضافة مجاميع الميثوكسيل والجزء الهيدروكسيل وموقعها على الجزيئة

مما يعطي للفالفونويدات ( 2007واخرون، D`Archivio)السكري في مواقع مختلفة

خصائص مميزة إذ انها تعد مضادات لاللتهابات والحساسية واالورام فضال عن فعاليتها

Lamb ،2005 ; D'Archivioو Cushnie)ادة لالكسدة ولالحياء المجهرية المض

.(2007وآخرون ،

مراجعة المصادر 33

حتواء الفطر على مجموعة من المركبات الفينولية مثل النظرا

(Catechin,Caffeic acid, gallic acid, Rutin جعله يمتلك خاصية مضادة )

لالحياء المجهرية وقابليته كمضاد للسرطان ة( ومضادAntioxidant activityاالكسدة )

(Potential as anticancer )(Abah وAbah ،2000).

β-glucan مركب الكلوكان :3.9.2

من السكريات المتعددة نوع b-D-Glucans المركبيعد

homopolysaccharides الكلوكوز جزيئة وحدات سلسلة مترابطة من من امكون

منه في نظام مناعة الجسم وباقي التأثيرات الطبية والموجود في والنوع الفعال

2002، واخرون β-(3 →1 )- (3 →2 )(Byeon من نوع الفطريات هو

وقد تم (.2002، واخرون Satitmanwiwat؛ 2002، واخرون Carbonero؛

اله خصائص مضادة لالكسدة وتأثيروجد ان من الفطريات الغذائية و كثيرتحديده في

ةدايزمن أنواع األورام السرطانية فضال عن فعاليته في كثيرفي منع نمو امباشر

ووجد في اختبارات .(Wasser ،2002 ؛Mizuno ،0222) الجهاز المناعي للجسم

الموجود في الفطر المحاري له تأثير الكلوكان بمركعلى الفئران ان اجريت أخرى

لمركبات الفينوليةل التقسيم الرئيس -1 3شكل

تركيب المركبات الفينولية الشائعة -2

1-General Classification of Phenolic Compounds

2-Structures of common Phenolic Compounds

مراجعة المصادر 34

Kanagasabapathy) لدم عند اضافته مع عالئق التغذيةفعال في خفض سكر ا

(.2002 ،واخرون

Lectin اللكتةنمركب : 4.9.2

سكريات مرتبطة بالبروتينات بروابط خاصة يطلق عليها هذه كتين يعد الل

. وقد وجد من خالل الدراسات السابقة ان بعض األنواع glycoproteinsالمركبات

Agaricus sp., Polyporus sp., Agrocybeالتابعة للفطريات البازيدية مثل

sp. تحتوي على اللكتين (Griffin ،0222؛ Wasser وWeis ،0222) وعزل

اوقد شوهد ان له تأثير Agrocybe aegerita اللكتين من الفطريات الغذائية التابعة لـ

وفي دراسة (2001، واخرون Zhao) على تثبيط الخاليا السرطانية البشرية اقوي

شوهد ان Polyporus adustaأخرى لباحثين اخرين عند عزل اللكتين من الفطر

وفعالية انقسام لخطوط خاليا األورام و (antiproliferative activity againstله )

ان كما (2001، واخرون Wang) mitogenic activityالخاليا اللمفاوية

في منع انتشار خاليا السرطان تساعد( Lectinكتين )حوي على اللالفطريات التي ت

Parslewوالحظ .(Halpern،2002) الطالئية لإلنسان من غير أي تأثير سام

المستخلص من فطر االزرار اللكتين مركب الى جانب تأثير (0222) واخرون

inhibitsشار الخاليا او ما يسمى )تمنع انفي فاعلية وجد له األورام فانه في البيضاء

cell proliferationالخاصية قد تنفع في عالج هذه يعتقد ان ( و

(.psoriasis)الصدفية

(β-glucanالتركيب البنائي للبيتا كلوكان )

مراجعة المصادر 35

لثمرية تحسةن الصفات النوعةة لالجسام ا: 10.2

ضاءلفطر االزرار البي الجودة بعد الحصاد سارة التي تساهم في خالعمليات الرئيس

الى الهش المتماسكالمفتوح و الى الشكل المغلق و االسمرارالى تغيير اللون هي

هناك و (.Noble،0221و Burton) الملمس في التغيرات و الى النقصان الوزنو

االولى عن طريق اضافة مغذيات سام الثمريةن لتحسين الصفات النوعية لالجااتجاه

إنتاج والسالالت تحسين التربية و اتباع برامج رعي والثانية عن طريقللوسط الز

من ان الصفات النوعية (2000واخرون ) Yadav وهذا ما تم دراسته من قبل الهجن

بين السالالت المختلفة, اذ ادخل في هذه يمكن تحسينها من خالل اجراء التهجين

-Zawirskaوقد ذكر سالالت من فطر االزرار البيضاء. سبع الدراسة

Wojtasiak من الجافة لالجسام الثمرية هي واحدة ان المادة (2002ن )واخري

محتوى االجسام الثمرية زيادة عد يو اكثر المؤشرات المهمة لتسويق الفطر الزراعي.

لسالالت النوعية الجيدة صفات المن ( والبروتينcrude fiberااللياف الخام ) من

وذلك بسبب انعكاس هذه الصفات على القيمة التسويقية والغذائيةفطر االزرار البيضاء

(Andrade 2002، واخرون.)

المواد وطرائق العمل 36

المواد وطرائق العمل:: 3

طر الف مشروع انتاجفي التجربة األولى لدراسة تجربتين نفذتهذه ا تضمنت

-2102للسنة عة بغداد جام-كلية الزراعة –والعطرية التابعة الى وحدة النباتات الطبية

لسنةتكريت ل جامعة-في مزرعة الفطر التابعة الى كلية الزراعة الثانيةوالتجربة 2103

2103-2102.

تأثير إضافة بعض المغذيات العضوية والبروتين الحيوي في التجربة األولى: : 1.3

إنتاجية فطر االزرار البيضاء

الثالثة االولى كانت ستة مصادر مختلفة من المغذيات إضافة هذه التجربة شملت

كسبة فول وونخالة الطحين )صنف زهدي(نوى التمر بمسحوقتمثلت عضوية مصادر

طر لفتنمية كتلة ا ة األخرى كانت نفس المخلفات الثالثة االولى معالثالثوالصويا

Aspergillus oryzae الجاف الوزنأساس على %2و %0. أضيفت بنسبة يهاعل

:اعطيت الرموز االتية الزرعي والتي للوسط

0T بدون اضافة( القياس معاملة(

2 T 0 التمر نوى مسحوق %

3 T 2 التمر نوى مسحوق %

2 T 0 الطحين نخالة%

5 T 2 الطحين نخالة%

6 T 0 الصويا فول كسبة%

7 T 2 الصويا فول كسبة%

8 T 0 بالبروتين الحيوي معزز تمر نوى مسحوق%

9 T 2 بالبروتين الحيوي معزز تمر نوى مسحوق%

01 T 0 بالبروتين الحيوي ةالمعزز الطحين نخالة%

00 T 2 بالبروتين الحيوي ةالمعزز الطحين نخاله%

02 T 0 بالبروتين الحيوي ةالمعزز الصويا فول كسبة%

03 T 2 بالبروتين الحيوي ةالمعزز الصويا فول كسبة%

المواد وطرائق العمل 37

لموجود ا حسب طبيعة البروتينبتم تقسيم المغذيات الى قسمين : تحضير المغذيات: 1.1.3

فيها وكاالتي:

ة فول الصويا ونخالة الطحين ومسحوقكسب شملت البروتين العضوي:مصادر : 1.1.1.3

لمدة %2يهايد بنسبة عليها عملية التعقيم الكيميائي بمادة الفورمولد تاجري ،نوى التمر

ي لحين وصولها الى الحالة الجافة.ساعة ثم وضعت في الفرن الحرار 22

تم تحضير البروتين الحيوي (:Bioprotien) البروتين االحيائية مصادر: 2.1.1.3

ة فول لألوساط الثالثة )كسب solid state fermintationحسب نظام الحالة الصلبة ب

وبعد 0:0نوى التمر( بأضافة الماء المقطر اليها بنسبة الصويا, نخالة الطحين, مسحوق

1.5وضغط 020احدة تحت درجة حرارة لمدة ساعة و ذلك أدخلت الى جهاز الموصدة

Aspergillusبإضافة االبواغ الكونيدية للفطر ولقحتوبعدها تركت لتبرد 2سم/ كغم

oryzae جهاز تحت الظروف المعقمة )جامعة الموصل( -)مصدر العزلة كلية العلوم

بتاريخ غرام وسطبوغ/ 0X701( بمعدل Laminair flowدفع الهواء المعقم

وتنمو الخيوط الفطرية لتنبت االبواغ لمدة أسبوع oم31ثم حضنت بدرجة 22/02/2102

عقمت و مع الوسط التي نمت عليه ثم جمعت كتلة الفطر االحيائيةكافة على اجزاء الوسط

جففت داخل الفرن الكهربائي بعدها وساعة 22لمدة %2بمادة الفورمالديهايد بتركيز

لمدة ثالثة ايام. مo 25تحت درجة حرارة

قبل المعاملة بالفطر تحليل الكيميائي للمغذيات العضوية والحيويةال أ جدول

Aspergillus oryzae هاوبعد

% نسبة البروتين ات المضافةنوع المغذي ت

38.60 كسبة فول الصويا 0

41.32 بالبروتين الحيوي المعززة كسبة فول الصويا 2

18.95 نخالة الطحين 3

21.05 المعززة بالبروتين الحيوي نخالة الطحين 2 8.52 نوى التمر مسحوق 5

8.42 بالبروتين الحيوي المعززنوى التمر مسحوق 6

Spawn اللقاح الفطري: 2.1.3

الفطر في منطقة كة الحميدية النتاجتم الحصول على اللقاح الفطري من شر

sylvan (www.sylvaninc.com ) االنبار والمنتج من قبل شركة محافظة-الرمادي

( spawn productionنتاج اللقاح الفطري )االمتخصصة ب A15(409)الرمز ذات

لفطر االزرار البيضاء في الواليات المتحدة.

المواد وطرائق العمل 38

compostingتحضير الوسط الزرعي :3.1.3

او outdoorحسب الطريقة المفتوحة والتي تسمى بسط الزرعي تم تحضير الو

(windrown) والتي تكون على مرحلتين:

تم فيها ترطيب وخلط مكونات أرضية كونكريتية نفذت على :Phase 1 األولىالمرحلة

نتاج اللحم()المعدة ال ومخلفات الدواجن %51التي تمثلت بتبن الحنطة بنسبة ، الوسط

والتي تم اضافتها على دفعتين متناصفتين كانت األولى بعد عملية ترطيب التبن 51%

التقليب وتقريبا كان خالل هذه المدة الزمنية تجرى عملية الترطيب بعد سبعة أيام ةوالثاني

تم إضافة الجبس بعد مدة اسبوعين لغرض المحافظ على عملية التخمر الهوائي.

(4CaSO )25 ثالثة أسابيع تم قياس المعايير التي تدل على ان الوسط بعد للطن كغم

إمكانية الوسط العالية،الزرعي وصل الى نهاية هذه المرحلة وهي نسبة االمونيا

الوسط او تحوله الى اللون البني. اسمرار ،%74بامتصاص الماء بنسبة رطوبة

بسترة الوسط الزرعيتم فيها ي مرحلة البسترة والتلطيف والتي وه المرحلة الثانية:

درجة الحرارة تدريجيا لمدة بعدها خفضتساعة 02لمدة ةمئوي 61تحت درجة حرارة

oم25ت الى خفضاليوم الثالث oم25-28وم الثاني الي oم55- 50اليوم األول أيام،ثالثة

يا والتين انخفاض مستوى االمونالقياسات الفيزيائية والكيميائية والتي تتضم بعدها اخذت

. نسبة الرطوبة %2.0-2.3بين كانالنتروجين والذي وقدر الشم.طريق حاسة عن قدرت

(.SWM ،2012) % 68-65بين

التحليل الكيميائي للوسط الزرعي بجدول

مرحلة التحضير نوع التحليل

بعد البسترة قبل التحضير

12.88 21.54 نسبة االلياف 28.43 27.00 الرماد

71.57 73.00 *المادة العضوية 41.08 41.90 *الكاربون

2.37 1.96 النتروجين

C/N Ratio 1/21.40 1/17.33

وحسب المعادالت االتية: المادة و الرماد نسبة باالعتماد على المادة العضوية والكاربون العضوي قدرت*

النسبة المئوية للرماد -1(= Organic Matterالمادة العضوية )

1.742/المادة العضوية (= Organic Carbon) العضوي الكاربون

؛ 0222، واخرون x 0.58 (Chen(OM(= المادة العضوية )Organic Carbonاو الكاربون العضوي )

Chu 0200، واخرون).

المواد وطرائق العمل 39

spawningمرحلة إضافة اللقاح الفطري : 4.1.3

( compostمن الوزن الرطب للوسط الزرعي ) %0.75تم إضافة اللقاح الفطري بنسبة

تم بعدها كغم01نايلون وزن كل كيس أكياس فيالمعبأ على الطبقة السطحية للوسط بوضعها

بعدها تم تغطية الوسط خلط الثلث العلوي من الوسط مع اللقاح الفطري جيدا لغرض التجانس

درجة 25. وتم ضبط درجة حرارة القاعة على درجة حرارة نفسه جزئيا بالكيس

.(0990واخرون، Straatsma)مئوية

واضافتها طبقة التغطيةتحضير مرحلة : 5.1.3

بعد ان تم اجراء عملية 0:0 بنسبة رملالبيت موس والتم تحضير طبقة التغطية من

كاربونات ضافةاب 7.5الى pHالـوعدل من االمالح بماء الحنفية لعدة مرات لكل منهما الغسل

ووضع عليه غطاء من %2التجاري بتركيز الفورملديهايدبواسطة عقمت ثم بعد ذلكالكالسيوم

خالل الوسط %91بما يقارب النسيج الفطري بعد ان نمى وانتشر ساعة. 22النايلون لمدة

درجة 25 تم ضبط درجة الحرارة علىسم على سطح الكيس. 2طبقة التغطية بسمك اضيفت

ايوم 20لمرطاب. وبعد وبعد مدة بواسطة ا %95-91مئوية وتوفير رطوبة نسبية بما يقارب

درجة 08-06 الى انتشر مرة أخرى النسيج الفطري على طبقة التغطية. تم خفض درجة الحرارة

-91قارب بما ي والحفاظ على نسبة الرطوبة الجوية مئوية لغرض تشجيع تكوين االجسام الثمرية

95%.

ة في الصفات اإلنتاجية والنوعي تأثير الساللة والكولشسين التجربة الثانية: :2.3

وبعض الخصائص الطبية لفطر االزرار البيضاء.

هي و من فطر االزرار البيضاء ثالث سالالت تضمنت هذه التجربة زراعة

(Brown,X20, B62) تم تم الحصول عليها من مختبر مزرعة كلية الزراعة/جامعة تكريت

Himedia. Co. -olchecineC)سين بمادة الكولش عوملت .( بالتتابع1S,2S,3S) وزها الرماعطاؤ

, cons 99.8%) وزواعطيت الرم %1.5 ،%1.3 ،%0.1 ،%1 بالتراكيز االتية

(0C,1C,2C,3C بالتتابع ) الحداث تطفير من نوع التضاعف الكروموسومي الذاتي

(Autopolyploid اذ تم إضافة ) مل تحتوي على 21هذه التراكيز الى انابيب زجاجية حجم

مل لكل 0حجم اإلضافة بواقع لسالالت الثالث وكانالغزل الفطري لمنمى عليه PDAوسط

(.Hosseini ،0229 )ساعة 22تركت لمدة و أنبوب

المواد وطرائق العمل 21

: مرحلة االنتخاب1.2.3

ري الى اطباق بت سينزء من المستعمرة المعاملة بالكولشج نقل معاملة الكولشسينبعد

لمدة أسبوعين تم فيها مراقبة االطباق يوميا م°25على درجة وحضنت PDAحاوية على الوسط

لتحديد النمو المظهري المختلف عن العزلة االصلية غير المعاملة بالكولشسين وانتخبت

.(Toyama ،4112) االكثفالمستعمرات االسرع نموا وذات الغزل الفطري

الفطري اللقاح تحضيرمرحلة : 2.2.3

وكما ةالحنط حبوبعلى الحيوية من الغزل الفطري حضر اللقاح الفطري بتنمية الكتلة

تومن ثم وضع م°011 درجة الغليان رفع درجة حرارته الىغلي الماء أوال وذلك بتم ي:يأت

وتقدر المدة الزمنية الى مركبات كربوهيدراتية ابسط من النشأ 50%تم تحويل الحبوب فيه الى ان

%51-25رطوبتها تصبحاالى ان خفضتمن الماء و الحبوب ترفعبعد ذلك .دقيقة 05بـ

على %2و %2بنسبة ( 4CaSO)وكبريتات الكالسيوم (3CaCO) كاربونات الكالسيوممع خلطت

غم لكل 211مل بواقع 511م دوارق حجفي تعبأ لوزن الجاف لحبوب الحنطة ومن االتوالي

من كل توضع ، polyproleneفوهاتها بالقطن او في اكياس بالستيكية تغلقرق بعدها دو

لمدة 2كغم/سم 1.5وضغط م 121درجة في Autoclave الموصدة في جهاز واالكياس دوارقال

قمة تبرد في غرف معل الحرارية تم اخراج الزجاجات او االكياس البالستيكية . بعد ذلكساعتين

الجل م°30اقل من الى حرارة الحبوب ( الى حين وصول درجةLAF) معقمة كابينات او تحت

غزل ال ر منمى عليهاوضع قطعة من االكاتم لقيح حبوب الحنطة بالغزل الفطري اجراء عملية ت

رجة د ضنة فيغرفة الحا في توضع بعدهابالسدادة القطنية تغلقاالفطري في داخل الزجاجة و

وبعد اكتمال انتشار بعد مرور اسبوع مرتين مرة او خاللها الزجاجات ترجم. 25±2حرارة

عند برادفي ال تخزنسابيع أسبوعين الى ثالثة أببمدة تقدر الغزل الفطري على حبوب الحنطة

2oلحين استعمالها م(Hadwan Habi-Al ،0991؛ Shalee ،1992).

المواد وطرائق العمل 20

تحضير الوسط الزرعي مرحلة : 3.2.3

ترطيب ( لتحضير الوسط الزرعي والتي تم فيهاindoorالطريقة المغلقة )تم استعمال

لى ع )المخصصة النتاج اللحم( تم إضافة مخلفات الدواجنبعد ذلك ثم أيامتبن الحنطة لمدة ثالثة

مخلفات 0.75: 0تبن الى نصفين بحيث تكون الكمية الكلية المضافة بنسبة اذ قسمت مرحلتين

وهي عبارة عن نفق او غرفة (Bunker)انفاق خاصة تدعى الى وادخلتت جيدا خلطودواجن

دفع الهواء ل مغلقة بواسطة جدران ذات عزل حراري وارضية كونكريتية تحتوي على نظام

درجة رفع مالى نفق البسترة ت ثم بعدها نقللمدة عشرة أيام ترك الوسط األسفل.بسرعة عالية من

درجة مئوية لمدة 51-28الى تخفضساعات ثم بعدها 9جة مئوية لمدة در 61-58الحرارة الى

ة درج تصلبعد ان و الفطري اللقاح الوسط جاهز للتلقيح او إضافة ام عندها اصبحأربعة أي

بحيث يصعب تحسسها عن طريق منخفضةفيه نسبة االمونيا و .درجة مئوية 25حرارته

(.SWM ،2012االنف)

اللقاح الفطريمرحلة إضافة : 4.2.3

( compostمن الوزن الرطب للوسط الزرعي ) % 0.5تم إضافة اللقاح الفطري بنسبة

كغم تم 5بوضعها على الطبقة السطحية للوسط في أكياس من نايلون وزن كل كيس من الوسط

بعدها خلط الثلث العلوي من الوسط مع اللقاح الفطري جيدا لغرض التجانس بعدها تم تغطية

درجة مئوية 25جزئيا بالكيس نفسه. وتم ضبط درجة حرارة القاعة على درجة حرارة الوسط

(Straatsma ،0990واخرون.)

واضافتها تحضير طبقة التغطيةمرحلة : 5.2.3

بعد ان تم اجراء عملية 0:0 بنسبة رملالبيت موس والتم تحضير طبقة التغطية من

7الى pHوعدل لعدة مرات اديتيعمن االمالح بالماء اال والرمل البيت موسلكل من الغسل

درجة مئوية لمدة 61البخار تحت درجة حرارة بواسطة كاربونات الكالسيوم وعقمت بعد إضافة

خالل % 91بعد ان نمى وانتشر النسيج الفطري بما يقارب أضيفت طبقة التغطية ساعات. 2

ح الكيس. تم ضبط درجة الحرارة سم على سط 2الوسط الزراعي وضعت طبقة التغطية بسمك

انتشر مرة ايوم 20. وبعد % 95-91درجة مئوية وتوفير رطوبة نسبية بما يقارب 25 على

درجة مئوية 08-06 الى خفض درجة الحرارة فيها أخرى النسيج الفطري على طبقة التغطية تم

% 95-91بما يقارب الجوية والحفاظ على نسبة الرطوبة لغرض تشجيع تكوين االجسام الثمرية

(MacCanna ،0991).

المواد وطرائق العمل 22

المدروسة قياساتال: 3.3

:)التجربة األولى والثانية( ومكوناته الحاصل صفات : 1.3.3

ايام( 01-7من خالل جمع حاصل القطفات لمدة )تم حسابهاحاصل الجنية الواحدة: 1.1.3.3

بداية اإلنتاج حتى نهايته.تم حساب العدد من : 0/ معدد االجسام الثمرية: 2.1.3.3

تم حسابه بحسب المعادلة االتية :معدل وزن الجسم الثمري: 3.1.3.3

حاصل الوحدة التجريبية الكلي )غم(

-------------------------------= معدل وزن الجسم الثمري

عدد االجسام الثمرية للوحدة التجريبة

(الثالث جنياتلل التراكمي حاصلالمن خالل جمع )تم حسابه الحاصل الكلي: 4.1.3.3

حسابها من خالل المعادلة االتية تم :النسبة المئوية للكفاءة الحيوية: 5.1.3.3

(Beyer وMuthersbaugh، 1991)

:)التجربة الثانية( الصفات المظهرية: 2.3.3

fullالمفتوحة كليا والتي تسمى باختيار جسام الثمريةرية لالهتم قياس الصفات المظ

open القدمة الرقمية باستعمال (digital vernia.)

سمك قبعة الجسم الثمري( عرض قبعة الجسم الثمري، الساق،، سمك طول الساق)

:)التجربة الثانية(: الصفات النوعية3.3.3

:للكربوهيدراتتقدير النسبة المئوية : 1.3.3.3مل كحول 8وأضيف له االجسام الثمريةألنموذج المجفف المطحون من غم من ا 2.0أخذ

دقيقة ثم سحب السائل 02لمدة ° م 02ثم وضع في حمام مائي بدرجة حرارة % 82أثيلي بتركيز

دقيقة ، كررت هذه 51دورة/ ثانية لمدة 0222الرائق بعد أجراء عملية الطرد المركزي بسرعة

افة الكحول األثيلي مل باض 01( وأكمل الحجم الى 8+ 8+ 8العملية ثالث مرات وجمع الراشح )

مل من حامض الكبرتيك المركز 1و % 1مل فينول بتركيز 5مل وأضيف له 5وأخذ منه

لقياس األمتصاص الضوئي للسكريات الذائبة بطول Spectrophotometer أستعمل جهاز

ربت بعد أن ضثم سقطت القراءات فوق المنحنى القياسي لسكر الكلوكوز نانوميتر، 102موجي

)وزن العينة(. تم قياس السكريات غير الذائبة 2.0)الحجم النهائي للعينة( وقسمت على 01×م القي

مل حامض البركلوريك )بدال 8بأخذ الراسب المتبقي من أستخالص السكريات الذائبة وأضيف له

(.Joslyn ،0992)من الكحول االثيلي( ثم أجريت بقية الخطوات تماما كما في السكريات الذائبة

=%الكفاءة الحيوية 011× لطري لألجسام الثمرية الوزن ا

لجاف للوسط الزرعي عند مرحلة إضافة اللقاحالوزن ا

المواد وطرائق العمل 23

:لبروتينالنسبة المئوية ل تقدير: 2.3.3.3قدير بصورة غير مباشرة عن طريق ت الجافة تم تقدير نسبة البروتين في االجسام الثمرية

.وذلك بهضم العينة باستعمال حامض الكبريتك حسب طريقة كلدالبالنتروجين الكلي

واتبعت المعادلة االتية:

، واخرون pardo) كما جاء في х 4.38النسبة المئوية للبروتين= النسبة المئوية للنتروجين

0202).

ن:ولدهل تقدير النسبة المئوية: .33.3.3وباستعمال جهـــــاز AOAC (1980)وفق ما جاء في ن على والده تقدر

من األنموذج غم 1، إذ وضع Soxhlet apparatus الســـــــــوكســـــــــــليــــــــــــــــــــــــت

م 02-02ذو درجة حرارة غليان الهكسانواستعمل Thimbleاالستخالص السليلوزي في جفنة

ساعات، بعدها بخر المذيب بجهاز المبخر الدوار 8– 0في عملية االستخالص التي استغرقت

Rotary evaporator ثم وزنت كمية الدهون .م 02تحت ضغط مخلخل في درجة حرارة

.وقدرت النسبة المئوية نسبة الى وزن االنموذج

تقدير النسبة المئوية لاللياف الخام: :4.3.3.3

, اولا والتي تتلخص بازالة الدهن من النموذج AOAC (1980) اتبعت الطريقة الواردة في دقيقة ثم يرشح ويغلى ثانية مع 31مدة %0.2لى مع حامض الكبريتيك بتركيز يغثم بعدها

دقيقة ثم يرشح مرة اخرى بعدها يجفف بالفرن 31مدة %0.25هيدروكسيد الصوديوم بتركيز الحراري ويوزن ثم يحرق ويوزن والفرق بالوزن يمثل كمية اللياف.

لرماد:للنسبة المئوية اتقدير : 5.3.3.3

وضعت النماذج المجففة في فرن الترميد إذ AOAC (1980) اتبعت الطريقة الواردة في Muffle Furnace الجفنة تركت ذلك وبعد وزن ثابتلحين الحصول على م 551بدرجة حرارة

.الجاف الوزن أساس على رمادلل يةئو الم النسبة وقدرت وزنت ثم بردت حتى زجاجي مجفف في

:لمادة الجافةالنسبة المئوية لتقدير : 6.3.3.3

حسبت النسبة المئوية لهذه الصفة من خالل استخراج الوزن الجاف لالجسام الثمرية الى

م تقطيع االجسام الثمرية الى قطع صغيرة ثالوزن الرطب. والطريقة التي اتبعت بالتجفيف هي

رارة تحت درجة ح في الفرن الكهربائي لمدة ثالثة أيام وتركت لتجف وضعها في أكياس ورقية

(.0203، واخرون Mami )ية درجة مئو 25

:)" T.S.STotal Soluble Solids"( الكلية المواد الصلبة الذائبةتقدير :7.3.3.3عد تقطيع ب باستعمال جهاز رقمي وذلك الكلية تم قياس النسبة المئوية للمواد الصلبة الذائبة

تم مل وبواسطة الضغط 5طبية حجم حقنةماجزاء صغيرة ثم وضعت في االجسام الثمرية الى

مباشرة على متحسس الجهاز ت عدة قطرات بشكلالحصول على مستخلص الفطر ووضع

(.4113،واخرون Mami ) وسجلت القراءة

المواد وطرائق العمل 22

:)التجربة الثانية( الصفات الطبية : 4.3.3

(:Antioxidant activity)لمئوية للفعالية المضادة لالكسدةالنسبة ا : 1.4.3.3

سب طريقة حالجافة لالجسام الثمرية للمستخلص الكحولي تم تقدير قابلية المضادة لالكسدة

(DPPH) التي تعتمد علىradical scavenging activity غم من االجسام الثمرية 5, اخذ وزن

تركت % 81من المحلول الكحولي للميثانول بتركيز مل011الجافة المطحونة ووضعت في

ساعة وبعدها تم تصفية المحلول بواسطة الطرد المركزي لتركيز الراشح في اسفل 22لمدة

.0.45االنبوب وبعدها تم تنقية المحلول مرة أخرى بواسطة المرشحات الغشائية ذات مسامية

ايثانول، % 95في Mm DPPH 0.15من ml 1.5من العينة ويضاف اليها ml 1.5يؤخذ

دقيقة في درجة حرارة الغرفة بعيدا عن الضوء , يتم قراءة 30يمزج بصورة جيدة ثم يترك لمدة

( Blankيتم تحضير العينة الضابطة ) nm 517االمتصاص الضوئي على طول موجي

لص من االجسام خدام الماء المقطر بدال من المحلول المستخنفسها عدا استبالخطوات السابقة

:االتيةمن المعادلة scavenging effectيتم حساب ،الثمرية الجافة المطحونة

قراءة المتصاصية لألنموذج - قراءة المتصاصية للعينة الضابطة

100[ × ــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ الفعالية المضادة لالكسدة % = ]

قراءة المتصاصية للعينة الضابطة

(0227،واخرون Barros ؛Abah،0252 و Abah ؛0250واخرون، Reis) كما جاء في

:والكشف عنها تقدير المركبات الفعالة: 2.4.3.3

: الفينوالت -1

طريقة تحضير العينة:

اليه تضيفافي انبوبة اختبار ثم ت( من العينة الجافة وضعغم100أخذ )

لمدة Ultrasonic bath( من الميثانول ونضعها في حمام فوق صوتي مل200)

( دقيقة لغرض إتمام عملية االستخالص.45)

الكشف عن الفينوالت:

:كاشف فولن -0

Sodium Tangstateالصوديوم ( من تنكســــتاتغم100حضر من إضافة )

( من مولبيدات الفســـفور غم20( الماء المقطر ثم نضيف )مل750الى )

Phosphomolybidate (من حامض الفسفوريك المركز مل50و )ويترك %85

( مل1000( ثم يبرد ويكمل الحجم الى )ساعة 2الخليط على حمام مائي ليغلي لمدة )

بالماء المقطر ثم ترطب ورقة ترشيح بالمستخلص )العينة( وتضاف اليها قطرات من

المواد وطرائق العمل 25

كاشف فولن ومن ثم تعرض الورقة الى بخار األمونيا ليظهر اللون األزرق . دليال

.على وجود الفينوالت

كاشف كلوريد الحديديك : -0

. ثم ترطب ( ماء مقطر مل100( كلوريد الحديديك في )غم1يحضر من إذابة )

ورقة ترشــــــــــــيح بالمستخلص )العينة( وتضاف اليها قطرات من كلوريد الحديديك

على ومن ثم تعرض الورقة الى بخـــــــــار األمونيا ليظهر اللون األزرق . دليال

وجود الفينوالت.

حسب الطريقة اللونية بجهاز المطياف الضوئي:بتقدير الفينوالت - ( من الماء المقطر مل5( من المستخلص ونضيف اليه )مايكروليتر 100أخذ )

.Folin-Ciocalteau( من كاشف فولن مل500و)

محلول كاربونات ل منم1.5دقائق وبعد يضاف 8ثانية الى 02ترك لمدة من

درجة مئوية. 02دقيقة بدرجة حرارة 02ثم يترك لمدة %02الصوديوم بتركيز

في خلية زجاجية ويتم قياس الفينوالت بجهاز مل5أخذ بعدهاspectrophotometer

.نانوميتر765بطول موجي

حضر منحنى القياسيstandard curve ستة تراكيز متسلسلة من المركب الفينولي ب

.Gallic Acid (50.0, 40.0, 30.0 20.0, 10.0, 0.0 mg/g)النقي

الكايتين باستخدام جهاز و كلوكانوبيتا ستاتيناالو اللكتين مركباتتقدير -2

performance liquid chromatography-High (HPLC)الكرموتوكرافي عالي االداء

:تحضير العينات

تذخأمحافظة القادسية. -تم تحضير العينات وتقديرها في مختبرات وزارة البيئة

خالت االثل من (مل30) نموذج ووضعت في دورق حجمي مضاف اليه( من االغم3)

Ethylacetate ( م40( بدرجة حرارة )دقيقة 15لمدةoاعيدت ) العملية ثالث مرات لجمع أكبر

ـ ) غسل المرشح .مل(100في دورق حجمي )من المستخلص بعدها رشح المحلول كمية (مل10ب

غسل بالماء بعدها .العملية ثالث مرات تتكرر %1تركيزالالمائي هيدروكسيد البوتاسيوم من

المبخر الدوار الى أن (Rotary Evaporatorفي جهاز الـ ) ضع المحلولو .مل(02)المقطر

أخذ ( rpm for 10 minutes 6000المركزي ) ضعه في جهاز النبذثم تم و مل(.02)يصل لـ

ذوب المتبقي بـ التبخير الى حد الجفاف ثم التخلص من المذيب عن طريق .الراسب

Methylene chloride. (.0202) عبد الهادي، كما جاء في

المواد وطرائق العمل 26

(HPLC)كرموتوكرافي عالي األداء ظروف الجهاز -

Methanol HPLC grade( Fluka) نوع المذيب

Injector Rheodye( 7125) الحاقن

Automatic system controller( S11-6A) جهاز السيطرة

Injection Loop( L 20 µ) كمية النموذج المستخدم بالحقن

Two shimadzu model( LC-6A Pumps) نوع وعدد المضخات

( T1( م لمدة دقيقتان ) 35) درجة حرارة العمود االبتدائية

( T2( م لمدة دقيقتان ) 126) درجة حرارة العمود النهائية

( م / دقيقة 18) معدل ارتفاع درجة الحرارة

Injector temperature( م 164) درجة حرارة الحاقن

Detector temperature( م 178) درجة حرارة الكاشف

Carrier gasدقيقة /( مل 1) النتروجين الحاملمعدل جريان غاز

( cm x 0.32 mm 0.25 µm porsize supelco 30) ابعاد العمود

On column injectionn حقن مباشر للعمود

ml Methanol 94 الطور السائل

5 ml Deionized Water

1 ml Tetrahydrofuran

Solid phase C .18 shim ( ODS) الصلبالطور

Attenuation( 310× 213) حساسية الجهاز

( min/1 cm) سرعة ورقة التسجيل

Uv- visible detector SPd-6AV Equipped with fliw cell 8m نوع الكاشف

المواد وطرائق العمل 27

المعاملة بالكولشسين حسب مؤشرات للسالالت ةالوراثي اتالتغاير تقدير: 5.3.3

RAPD:)التجربة الثانية(

معامالت من( من انسجة االجسام الثمرية الجافة بعد طحنها DNAعزلت المادة الوراثية )

كانت هاثة منثالتمثلت باثني عشر تركيب وراثي قدو تأثير الكولشسين والتي انتخبت مظهريا

./الحارثيةالتقدم العلميفي مختبرات نفذ .(X20,Brown B62,)للسالالت المدخلة في الدراسة

extraction and isolation)وعزله DNAاستخالص الـ: 1.5.3.3

Genomic DNA)

i-genomic BYF DNA) الجينوم DNAوتنقية ستخالصاستعملت محاليل ا

Extraction Mini Kit) شركة من قبل ةالمنتجiNtRON Biotechnology,Inc. اجراء مع

فيها استعمال بعض االنزيمات المذكورة خالل خطوات العزل د بعض التحويرات التي استبع

ركة ل الشالمذكوره من قب االستخالص محاليلبعض كمية تعفاضمب والتنقية واستعاض عنها

(5والتي ارفقت في الملحق )

:والعزل خطوات االستخالص

ملغرام من االجسام الثمرية المطحونة )مطحنة القهوة( ووضعت في انابيب 60اخذ -0

مايكروليتر من 200مل واضيف اليها 1.5سعة Ependrof tubeبالستيكية

Vortex( رجت لمدة دقيقة واحدة بجهاز الرجاج )MP) محلول االستخالص

Mixer مئوية.درجة 37دقيقة عند درجة الحرارة 15( وحضنت العينات لمدة

13000المركزي بسرعة بيب من الحاضنة ووضعت بجهاز النبذاستخرجت االنا -2

دورة لدقيقتين لفصل الراسب عن محلول االستخالص.

سحب الرائق )الطبقة العليا( واهمل الراسب, وضع في أنبوب اختبار جديد واضيف -3

5, 21, 200 بالكميات االتية RNaseو Proteinaseو MGاليه محلول

( وحضنت Vortex Mixerالجهاز الرجاج ) بواسطة امايكروليتر بالتتابع. رجت جيد

.مئوية 65دقيقة تحت درجة حرارة 31بالحمام المائي لمدة

مايكروليتر من 250بعد ان استخرجت االنابيب من الحمام المائي أضيفت اليها -2

واسطة الماصة ت مكونات الخطوة السابقة مع هذا المحلول جيد ب( ومزجMBمحلول )

spindownالمركزي لعمل ( وبعدها وضعت داخل جهاز النبذpipetingالدقيقة )

لجمع السائل العالق بالجدران مع المكونات الموجودة باالنبوب.

ت مكونات الخطوة جزم %80مايكروليتر من الكحول االثيلي تركيز 250يتم إضافة -5

( وبعدها وضعت pipetingالدقيقة ) السابقة مع الكحول االثيلي جيد بواسطة الماصة

لجمع السائل العالق بالجدران مع spindownداخل جهاز الطرد المركزي لعمل

مرة أخرى. المكونات الموجودة باالنبوب

من خالل ب االختبار ومررمايكروليتر من المحلول الموجود في انابي 751تم سحب -6

DNAيمسك جزيئات الـ( يحمل شحنات موجبة لspin columسمى )يفلتر خاص

Ependrofداخل انابيب اختبار بالستيكية spin columثبت ذات الشحنات السالبة.

tupe دورة لمدة 13000مل ومن ثم توضع في جهاز النبذ المركزي 1.5سعة

ثالث دقائق.

المواد وطرائق العمل 28

من انابيب االختبار نضيف spin colum بعد اكمال عملية النبذ المركزي نستخرج ال -7

توضع االنابيب buffer (WM)مايكروليتر محلول الغسل 711اليها مرة أخرى

لحين مرور هذا المحلول داخل جهاز النبذ المركزي spin columالتي تحتوي على

خالل الفلتر ونراه متجمع في اسفل أنبوب االختبار.

spin columالى Elution solutionمايكرو ليتر من محلول االذابة 50نضيف -8

ونضع االنابيب مرة أخرى داخل spin columالممسوك في فلتر ال DNAالذابة الـ

المذاب في DNAدورة/دقيقة( لحين ترسيب جميع الـ 13000جهاز النبذ المركزي )

.وعزله DNAاستخالص الـ ةهذا المحلول وعند هذه الخطوة تنتهي عملي

:DNAالـ قياس نقاوة وتركيز: 2.5.3.3مايكروليتر 091المستخلص( باضافة DNAبعد ان خففت العينة ) DNA تم قياس تركيز

مايكروليتر من العينة وقراءة مقدار امتصاص العينة لألشعة فوق البنفسجية 1من الماء المقطر إلى

( عن الطولين O.D) الذي يستعمل في قياس الكثافة الضوئية Spectrophotometer بجهاز

-: نانوميتر وتطبق حسب القانون االتي 002، 082بيين الموج

نانوميتر لمل واحد من 260مقدار االمتصاصية عند الطول الموجي DNA (mg/ml=)تركيز

X 50مقلوب التخفيف Xالعينة المخففة

مقدار االمتصاصية عند الطول /نانوميتر 260مقدار االمتصاصية عند الطول الموجي النقاوة=

(1994واخرون، Maniatisكما جاء في ) نانوميتر 280الموجي

Primersالبوادئ : 3.5.3.3

Lyophilized Primers( للبوادئ Stock Solution) حضر المحلول الرئيس

RAPD بأذابتها بالماء ( الحرNuclase Free Waterللحصول ) 100تركيز على µM.

مايكروليتر من البادئ المذاب 01تم تحضيره بإضافة (Work solution) محلول العمل

(Stock Solution) مايكروليتر من الماء الحر للوصول الى تركيز 91الى µM 01.

Mw (g/mol) تسلسل القواعد رقم البادئ

1 TGGCGCAGTG 3084.1

4 CAGCACCGCA 2982.0

3 CCCGGCATAA 2997.0

2 TGGCCCTCAC 2964.0

5 GACTGCACAC 2997.0

1 GAGGGAAGAG 3166.2

7 ACGATGAGCC 3037.0

9 GGGCGGTACT 3084.1

9 AAGAGAGGGG 3166.2

11 AGGTTGCAGG 3108.1

المواد وطرائق العمل 29

DNA: تقانة التضاعف العشوائي المتعدد االشكال لسلسلة 4.5.3.3

Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD)

حسب الجدول االتي:ب PCRجهاز حضرت نسب المحاليل التي وضعت داخل. 1

الكمية )مايكروليتر( التركيز المحلول ت

0 Master mix. Go Taq Green* 1X 12.5

2 10 البادئ المذاب 0

3 DNA 250 المعزولng 4

25يكمل الى Free water الماء الحر 1

25 المجموع 2MgClملح -3(SdNTP)القواعد النتروجينية -2( Taq DNA Polymeraseانزيم ) -0يتكون من *

(3mM) 2- بفر التفاعلBuffer Reaction PH (8.5).

: تيآلالبرنامج ا وفقعلى PCR جهازبرمجة توتم .4

رقم

المرحلة

درجة اسم المرحلة

الحرارة

عدد الوقت

الدورات

5 Denaturation1 initial

DNAالمرحلة االبتدائية لمسخ ال

Co94 5 min

1cy

cle

0 ` Denaturation

Co94

1 min

40

cy

cle

0 Annealing

االرتباط اوالتحام البادئ

Co44 1:50

min

0 Extension

المرحلة األولى الستطالة الشريط

الجديد

Co72 2 min

1 Extension Final

المرحلة النهائية الستطالة الشريط

الجديد

Co72 7 min

1 c

ycl

e

0

Holding

التحضين

Co4 ∞

المواد وطرائق العمل 51

وطافراتها( Brown ،X20 ،B62عينة )السالالت 00. نواتج الترحيل الكهربائي لـ1شكل

0للبادئ رقم RAPDبأستعمال تقانة

تحضير هالم االكروز: 5.5.3.3

مل من 10ملغم من االكروز في 1.5وذلك بأذابة %1.5حضر هالم االكروز بتركيز

مل بالماء المقطر وسخن بجهاز 522واكمل الحجم الى 52Xبقوة TBE-Bufferمحلول

Microwaves م 11-12مع التحريك المستمر بعدها خفضت درجة الحرارة بينo 1اضيف فيها

مل ماء مقطر صبت في لوح 522:5مايكروليتر من صبغة بروميد االثيديوم المحضر مسبقا بنسبة

التحميل المعد )لوح بالستيكي شفاف ذي ابعاد مالئمة لحوض الترحيل الكهربائي( ثبت المشط

عند احد اطراف الهالم. Wellsالخاص لتكوين الحفر

Electrophoresisالترحيل الكهربائي : 6.5.3.3

. وزعت العينات على الحفر 1xقوة TBEغمر الهالم بعد تصلبه ورفع المشط بمحلول

مع مراعاة الدقة في عدم خروج العينة عن الحفرة. وكان Micropipetteباستخدام الماصة الدقيقة

ل من (. هيئت األقطاب وتم توصيلها وتم الترحي100bp-1000( بحجم )ladderالدليل الحجمي )

تم إيقاف دقيقة 522فولت وبعد مضي 522القطب السالب الى القطب الموجب بفولتية مقدارها

نهاية الهالم. فحصت الحزم المتحركة خالل وصلت الى ماقبلالترحيل والتي عندها كانت الصبغة

المجهز لطول موجي UV-Cleanerالهالم عند تعريضها لالشعة فوق البنفسجية باستعمال جهاز

( نانوميتر.260-280بين )

وظهور الحزم ضمن هالم RAPDنواتج الترحيل الكهربائي لمؤشراتي اتوفيما ي

االكروز:

1500bp

1000

900

800

500

011

M B62C3 2B62C 1B62C B62 3X20C 2X20C 1X20C X20 3BC 2BC 1BC B M

المواد وطرائق العمل 50

وطافراتها( Brown ،X20 ،B62عينة )السالالت 00. نواتج الترحيل الكهربائي لـ5شكل

1للبادئ رقم RAPDبأستعمال تقانة

ومطفراتها( Brown ،X20 ،B62عينة )السالالت 00. نواتج الترحيل الكهربائي لـ6شكل

5للبادئ رقم RAPDبأستعمال تقانة

M B62C3 2B62C 1B62C B62 3X20C 2X20C 1X20C X20 3BC 2BC 1BC B M

M B62C3 2B62C 1B62C B62 3X20C 2X20C 1X20C X20 3BC 2BC 1BC B M

المواد وطرائق العمل 52

ومطفراتها( Brown ،X20 ،B62عينة )السالالت 00. نواتج الترحيل الكهربائي لـ9شكل

5للبادئ رقم RAPDبأستعمال تقانة

وطافراتها( Brown ،X20 ،B62عينة )السالالت 00. نواتج الترحيل الكهربائي لـ9شكل

9للبادئ رقم RAPDبأستعمال تقانة

M B62C3 2B62C 1B62C B62 3X20C 2X20C 1X20C X20 3BC 2BC 1BC B M

M 3B62C 2B62C 1B62C B62 3X20C 2X20C 1X20C X20 3BC 2BC 1BC B M

المواد وطرائق العمل 53

وطافراتها( Brown ،X20 ،B62عينة )السالالت 00. نواتج الترحيل الكهربائي لـ9شكل

02للبادئ رقم RAPDبأستعمال تقانة

احصائيا RAPD تحليل نتائج مؤشرات : 5.3.3.7

وذلك لتحويل عدم ظهورهاعند ( 2) و ( 0) برقم ت الحزم الظاهر في الهالمفوص

العزالت االص لي ة والمع امل ة الوراثي ة بين يج اد العالق ة ا نت ائجه ا الى ج داول يتم من خالله ا

Average similarity المقدرة تش ابهلقيم اب هذه بيانات التوص يف وقد عبر عن بالكولش س ين.

coeficient آس تن ادا الى مع ادل ةNei وLei (0999) ثم الى قيم االختالف Genetic

Variation وحسب المعادلة االتيةبرامج التحليل االحصائيبآستخدام , :-

bNa+N/ab2N Average similarity coeficient =

%GD=(1- Average similarity coeficient)×100

:اذ ان

abN نموذجين = الحزم المشتركة بين االa وb

aN نموذج في اال الكلية = الحزمa

bN =في االنموذج الحزم الكليةb

GD البعد الوراثي =Genetic Distance االختالف الوراثي او Genetic Variation

االص لية والمنتخبة بعد المعاملة بالكولش س ين عزالتمخطط البعد الوراثي بين الرس م

The un-weighted pair group method for the arithmeticب آس تخ دام طريق ة

average (UPGMA) .

M B62C3 2B62C 1B62C B62 3X20C 2X20C 1X20C X20 3BC 2BC 1BC B M

المواد وطرائق العمل 52

:اليجاد افضلها من خالل البادئاتقيمت

ع دد حزم الن اتجة من كل البادئ/ عدد الحزم الكلي (=Primer efficiencyكفااءة الباادئ ) -

X 522للبادئات

طريق خط تم تحديدها عن :(number of Polymorphic Bands) شااااكليةالعددية الت -

تب اين في الحزم عن األخرت تم حس ابه ا االفقي لك ل العين ات للب ادئ الواح د ف ان وج د النظر

كحزمة ذات تعددية شكلية

عدد الحزم ذات =(% (Polymorphism النسااااااباة المئوية للحزم ذات التعدد الشااااااكلي -

X 522لكل بادئ/عدد الحزم الكلية للبادئ )المتباينة( التعددية الشكلية

عدد الحزم ذات= (discriminatory power) لقدر التميزية لكل بادئالنساااابة المئوية ل -

كل البوادئ ل التعددية الش كلية )المتباينة( لكل بادئ/ عدد الحزم ذات التعددية الش كلية )المتباينة(

X 522

AL-Assie؛ Bian ،0202و Mahmudul ؛ 0229 ،واخرون Yadavكماااا جااااء في )

.(0200واخرون،

التصميم التجريبي : 6.3.3

اما (RCBDعات العشوائية الكاملة )وفق تصميم القطاعلى التجربة األولى صممت

. تم ات لكل معاملةراتكر ةوبواقع اربع ولكن بعاملين نفسه التصميم السابقفكانت ب التجربة الثانية

Genstat Discovery الجاهزباستعمال البرنامج االحصائي تحليل النتائج احصائيا

Edition4. حسب اختبار برنت المتوسطات ووقLSD الساهوكي %5وعلى مستوى احتمال(

(.0991، ووهيب

النتائج والمناقشة 55

النتائج والمناقشة: 4

: التجربة األولى1.4

إنتاجية فطر االزرار البيضاء المغذيات فيإضافة تأثير

:والحاصل الكلي : التأثير في إنتاجية حاصل الجنية الواحدة1.1.4

زيادة تالمغذيات الغنية بالبروتين الى الوسط احدث ان إضافة (1)ائج الجدول تنتبين

المعززة بالبروتين نخالة الطحينمن %2إضافة نسبة اذ امتازت ،الجنية األولى في حاصل ةمعنوي

يع جم لىا عبتفوقه بالبروتين الحيوي المعززةنوى التمر من مسحوق %2و %1نسبة و الحيوي

،بالتتابع 2/مكغم 19.7و 19.1و 8.59 حاصل وصل الىا اعلى مبأعطائه اإلضافة وذلك معامالت

نوى التمر عند معاملة اإلضافة لمسحوق 2/مكغم 54.9الى الجنية في حين انخفض حاصل هذه

SchislerوSinden (1962 )و Schisler منوهذا يتفق مع ما توصل اليه كل 9%1بنسبة

غالبا Spawning إضافة اللقاحفي مرحلة ان اجراء التدعيم بالمواد الغنية بالبروتينات (1964)

لى اوصل اعلى حاصل فيها فقد الجنية الثانيةاما .ىلواال ةيؤدي الى زيادة االنتاج في الجنيما

معاملة القياس علىمعنويا تتفوقوبذلك %1بنسبة كسبة فول الصويا اضافة عند 2/مكغم7.36

%2إضافة نسبة عند 2/مكغم 3.01 كان حاصل وجد ان ادنىو9 2/مكغم 5.76التي بلغ حاصلها

ارتفاع حاصل هذه المعاملة الى هذا االنخفاض في الحاصل يعزىقد و حيويا،نخالة الحنطة المدعمة

Vijayو Guptaكل من وهذا يتفق مع النتائج التي اجراها 9 اعاله في كما ذكر في الجنية األولى

1-2%ان تدعيم الوسط الزرعي بكل من كسبة فول الصويا وطحين بذور القطن بنسبة ( 1992)

النتيجة وهذه 209-30%بنسبة فطر االزرار البيضاءبعد معاملتها بالفورملديهايد زادت من حاصل

فة تلالمخ اختبار تاثير سبعة انواع من المصادرفي ( 2002واخرون ) Upadhyayتتفق مع ذكره

وهي Pleurotus ostreatusتاثيرها في حاصل الفطر المحاري للتعرف على مدى للنيتروجين

وكـسبة Soybean flourوطحين فول الصويا Rice branوالرز Wheat branنخالة الطحين

وطحين بذور القطن Mustard cakeوكسبة الخردل De-oiled soybean cakeفـول الصويا

Cotton seed meal ن وكسبة بذور القطCotton seed cake ضافة هذه المواد عند اذ تم ا

من الوزن الجاف للوسط وكانت افضل نسبة من % 10و 1,2.5,5,7.5بنسبة تلقيحمرحلة ال

في .قياسمعاملة ال لىع 21%اذ حققت زيادة بنسبة 1%كسبة فول الصويا في زيادة االنتاج هي

كل من لالجنية الثالثة في حاصل بالبروتين الى الوسط المعززةذيات إضافة المغ معنويا اثر حين

وصل حاصلها الى لتينال %2بنسبة نوى التمر مسحوقو %1بنسبة نخالة الطحينافة إض معاملة

29/مكغم 0.46بلغ حاصلها التي قياسمعاملة الب اذا ما قورنت بالتتابع 2م /كغم 2.63و 2.65

النتائج والمناقشة 56

تأثير إضافة المغذيات الى الوسط في إنتاجية فطر االزرار البيضاء 1جدول

والحاصل الكلي لكل جنية من الجنيات الثالثو( 2)كغم/م

حاصل الجنية المعاملة 2االولى كغم/ م

حاصل الجنية 2الثانية كغم/ م

حاصل الجنية 2الثالثة كغم/ م

كمية الحاصل 2كغم/م

1T 12.03 0.46 5.76 5.81 معاملة القياس

2 T التمر نوى مسحوق

1% 4.95 4.96 2.12 12.03

3 T التمر نوى مسحوق

2% 5.17 6.82 0.64 12.63

4 T 12.49 0 6.77 5.72 %1 الطحين نخالة

5 T 11.45 0.81 5.20 5.44 %2 الطحين نخالة

6 T فول الصويا كسبة

1% 5.14 7.36 1.27 13.77

7 T الصويا فول كسبة

2% 5.94 3.60 1.36 10.90

8 T تمر نوى مسحوق

بالبروتين الحيوي معزز

1%

7.91 4.88 1.63 14.42

9 T تمر نوى مسحوق

بالبروتين الحيوي معزز2%

7.80 4.31 2.63 14.73

11 T الطحين نخالة

بالبروتين الحيوي ةالمعزز1%

6.43 5.01 2.65 14.09

11 T الطحين نخاله

الحيويبالبروتين ةالمعزز2%

8.59 3.01 1.72 13.32

12 T الصويا فول كسبة

بالبروتين الحيوي ةالمعزز1%

5.55 7.07 1.73 14.35

13 T الصويا فول كسبة

بالبروتين الحيوي ةالمعزز2%

7.04 4.68 0.00 11.72

L.S.D 1.23 2.74 2.06 2.37

قد أحدثت ف ،الحاصل الكلي في ان إضافة المغذيات المعززة بالبروتين الحيوي اثرت معنويا

أساس الوزن الجاف الوسط علىالى %1و %2نوى التمر المدعم حيويا بنسبة إضافة مسحوق

بالتتابع وهو بذلك يتفوق معنويا 2/مكغم 14941و 14.73للوسط زيادة في الحاصل الكلي والذي بلغ

نوى يعزى تفوق اضافة مسحوق9 وقد 2/مكغم 12.02 قياس البالغال الكلي لمعاملةالحاصل لىع

النتائج والمناقشة 57

الفطر التمر المعزز بالبروتين الحيوي في زيادة انتاج فطر االزرار البيضاء الى دور

Aspergillus oryzae في رفع القيمة البروتينية كما ونوعا للوسط النامي عليه لما له من فعالية

لمكونات نزيمات مفرزة محللةمن البروتينات والتي هي عبارة عن ا امن خالل انتاجه مدى واسع

( تعمل هذه االنزيمات على تحليل المركبات extracellular enzymes)الوسط والتي تدعى

Ravinder ؛2009 ،واخرون Dacheva) المعقدة التركيب الى مركبات ابسط

.(3002 ،واخرون Rudravaram ؛3002،واخرون

االزرار الثمرية لفطرتأثير إضافة المغذيات الى الوسط في عدد االجسام : 2.1.4

:والحاصل الكلي لكل جنية من الجنيات الثالث البيضاء

عدد االجسام معنوية بين المعامالت في االى ان هناك فروق (2)تشير نتائج الجدول

نوى التمر المعزز مسحوقفقد أدت إضافة المغذيات الى الوسط من األولى،الجنية الثمرية عند

210.00الى زيادة عدد االجسام الثمرية الى أقصاه والذي وصل الى %1بنسبة الحيوي بالبروتين

الى خفض عدد االجسام %2كسبة فول الصويا بنسبة في حين أدت إضافة 2م ثمري لكلجسم

29ملكل 0.009الثمرية الى

د بين المعامالت عن معنوية اتظهر فروق فلمالثانية الجنية الثمرية فياما عدد االجسام

ين المعزز بالبروتنوى التمر مسحوقمن اإلضافةتميزت معاملة الوسط9 وقداضافة المغذيات الى

والذي تفوق معنويا 2م لكل اثمري اجسم 60زيادة وصلت عند الجنية الثالثة الى %2بنسبة الحيوي

29م /جسم ثمري 676.البالغ عددها ة القياسمعامل على

الى الوسط %1بنسبة الحيوي التمر المعزز بالبروتين نوى اضافة مسحوق سجلت معاملة

على أساس الوزن الجاف للوسط اكبر زيادة معنوية في عدد االجسام الثمرية للحاصل الكلي والتي

المعنوي علىنها لم تصل الى التفوق بعض المعامالت ولك عن 2مجسم ثمري لكل 390.00بلغت

9 في حين أدت إضافة جسم ثمري 360.00معاملة القياس التي وصل عدد االجسام الثمرية الى

الى الوسط على أساس الوزن الجاف الى خفض عدد االجسام الثمرية %2كسبة فول الصويا بنسبة

ة إضاف جسم ثمري9 ويمكن تفسير زيادة عدد االجسام الثمرية وانخفاضها الى 210.00 فيها الى

الى الوسط فمنها من كان مصدر غذائي مالئم لهذا الفطر ومنها من كان غير مالئم مما المغذيات

عدد االجسام الثمرية بين االيجابية في عالقة االرتباط كما موضح انعكس على كمية الحاصل

9(1في الملحق )كمية الحاصل و

النتائج والمناقشة 58

لفطر 2لكل م تأثير إضافة المغذيات الى الوسط في عدد االجسام الثمرية 2جدول

والحاصل الكلي االزرار البيضاء لكل جنية من الجنيات الثالث

عدد االجسام المعاملة

الثمرية للجنية

األولى

عدد االجسام

الثمرية للجنية

الثانية

عدد االجسام

الثمرية للجنية

الثالثة

عدد االجسام

للحاصل الثمرية

الكلي

1T 360.01 6.67 183.34 170.00 معاملة القياس

2 T 273.34 46.67 120.00 106.67 % 1 التمر نوى مسحوق

3 T 290.01 6.67 180.00 103.34 % 2 التمر نوى مسحوق

4 T 273.34 0.00 153.34 120.00 %1 الطحين نخالة

5 T 270.00 3.34 130.00 136.67 %2 الطحين نخالة

6 T 263.35 26.67 123.34 113.34 %1 فول الصويا كسبة

7 T 210.01 13.34 106.67 90.00 %2 الصويا فول كسبة

8 T معزز تمر نوى مسحوق

%1 بالبروتين الحيوي

210.00 150.00 30.00 390.00

9 T معزز تمر نوى مسحوق

%2 بالبروتين الحيوي

160.00 106.67 60.00 326.68

11 T ةالمعزز الطحين نخالة

%1 بالبروتين الحيوي

133.34 106.67 46.67 286.67

11 T ةالمعزز الطحين نخاله

%2 بالبروتين الحيوي

186.65 63.34 50.00 299.99

12 T الصويا فول كسبة

%1 بالبروتين الحيوي ةالمعزز

150.00 176.67 30.00 356.67

13 T الصويا فول كسبة

%2 بالبروتين الحيوي ةالمعزز

163.34 90.00 0.00 253.34

L.S.D 95.45 N.S 45.26 159.70

النتائج والمناقشة 59

لفطر وزن الجسم الثمري تأثير إضافة المغذيات الى الوسط في معدل: 3.1.4

:والحاصل الكلي لكل جنية من الجنيات الثالثاالزرار البيضاء

فقد احدثت لمعامالت،اوزن الجسم الثمري بين في معدل الى التباين (3)يشير الجدول

وزن الجسم لجاف للوسط زيادة معنوية في معدلالوزن ا من %2إضافة كسبة فول الصويا بنسبة

وزن الجسم الثمري الى التي انخفض فيها معدلغم عن معاملة المقارنة 88.18 الثمري بلغ

فيها إضافة كسبة فول معاملة المقارنة التي تم معنويا على T6تميزت المعاملة قد و. غم35.67

الجسم الثمري الى في الجنية الثانية في وصول معدل وزن من الجاف للوسط %1الصويا بنسبة

فروق معنوية بين المعامالت وكانت إضافة نخالة تالجنية الثالثة فقد وجدفي اما غم.144.83

لجسم الثمري وزن ا الوسط اكبر زيادة في معدل على أساس الوزن الجاف الى %2الحنطة بنسبة

غم. 81.31صل الى الذي و

1بة بنسكسبة فول الصويا عند إضافة وزن الجسم الثمري للحاصل الكلي معدلسجل

في بالتتابع غم 60.75و 62.23 بلغ في معدل وزن الجسم الثمري زيادة معنويةاكبر %2و

وى ن معاملة القياس ومعاملة إضافة مسحوقحين انخفض معدل وزن الجسم الثمري الى ادناه عند

.بالتتابع جسم غم 37.47و 34.48الى %1التمر المعزز بالبروتين الحيوي

الى الزيادة واالنخفاضالسابقة وزن االجسام الثمرية للمعامالت يعزى التباين في معدل

في رة المذكو فيما بينهما اليه من خالل استخراج قيمة االرتباط تم اإلشارةكمية الحاصل كما في

يكون التنافس على مكونات الوسط الغذائية كبير في حين الحاصلففي حالة زيادة (.1) ملحقال

9يؤدي االنخفاض الى تقليل التنافس مما ينعكس على الزيادة والنقصان في معدل وزن الجسم الثمري

من ان انخفاض الحاصل يؤدي الى زيادة معدل ( 3003الزبيدي )وهذا ال يتفق مع ما توصلت اليه

.ريةوزن االجسام الثم

النتائج والمناقشة 60

)غم( جسم الثمريالوزن في معدل تأثير إضافة المغذيات الى الوسط 3جدول

لكل جنية من الجنيات الثالث والحاصل الكلياالزرار البيضاء لفطر

معدل وزن المعاملةم الثمري اجساال

لجنية ل الثمرية األولى )غم(

معدل وزن االجسام الثمرية للجنية الثانية

)غم(

معدل وزن االجسام الثمرية للجنية الثالثة

)غم(

معدل وزن االجسام الثمرية للحاصل الكلي

)غم(

1T 35.67 معاملة القياس

32.11

22.80

34.48

2 T التمر نوى مسحوق

1%

47.62

42.95

47.22

44.99

3 T التمر نوى مسحوق

2%

61.63

54.10

32.02

47.05

4 T 49.66 %1 الطحين نخالة

44.00

0.00 46.06

5 T 39.84 %2 الطحين نخالة

42.14

81.31

42.99

6 T فول الصويا كسبة

1%

47.62

144.83

31.25

62.23

7 T الصويا فول كسبة

2%

88.18

35.50

22.61

60.75

8 T تمر نوى مسحوق

بالبروتين الحيوي معزز1%

46.44

34.77

38.19

37.47

9 T تمر نوى مسحوق

بالبروتين الحيوي معزز2%

51.52

40.71

42.24

46.34

11 T الطحين نخالة

بالبروتين المعزز

%1 الحيوي

48.24

45.79

61.83

49.48

11 T الطحين نخالة

بالبروتين ةالمعزز %2 الحيوي

53.93

48.41

26.61

51.79

12 T الصويا فول كسبة

بالبروتين ةالمعزز %1 الحيوي

36.68

44.11

64.47

40.94

13 T الصويا فول كسبة

بالبروتين ةالمعزز

%2 الحيوي

44.14

54.31

0.00 47.41

L.S.D 34.88 82.88 80.09 22.17

النتائج والمناقشة 61

مية وكلوزن الجاف تأثير إضافة المغذيات الى الوسط في النسبة المئوية ل: 4.1.4

:الحاصل الكلي على أساس الوزن الجاف والكفاءة الحيوية

ة المئوية النسب ان إضافة المغذيات الغنية بالبروتين اثرت معنويا في (4)يتضح من الجدول

نوى التمر ونخالة الطحين معنويا في هذه الصفة من مسحوق %92 فقد اثرت إضافة للوزن الجاف

بمعاملة القياس التي انخفضت فيها النسبة الى ادناه اذ بلغت مقارنة %15.96و 14.63والتي بلغت

Colak؛ Han، 1999)لمادة الجافة للدراسات السابقة وهذه النتيجة التتفق مع نسب ا 13.12%9

من ان النسبة (3002واخرون ) Mamiولكن تتفق مع نتائج الدراسة للباحث (3002،واخرون

ذ فسر سبب الزيادة ا ،تقريبا %11-9.5تراوحت بين لفطر االزرار البيضاء المئوية للمادة الجافة

9الى إضافة المغذيات الغنية بالبروتين عند مرحلة التغطية للمادة الجافة

المادة الجافة في االجسام الثمرية لفطر ان نسبة (2111واخرون ) Van Loonذكر

-7المادة الجافه تتراوح بين نسبة وأشار الى ان البيضاء مؤشر من مؤشرات النوعية، االزرار

مكها غطية وسوالكالسيوم ونوع طبقة الت موتتأثر بعدة عوامل منها امالح كلوريد الصوديو 11%

على عالقة عكسية مع كمية الحاصل.فضال عن كمية الحاصل فان المادة الجافة

تميزت كل من 9 اذ لى أساس الوزن الجافالحاصل الكلي ع اثرت المعامالت معنويا في

ومعاملة اإلضافة %2و 1نوى التمر المعزز بالبروتين الحيوي بنسبة معاملة اإلضافة لمسحوق

فرق معنوي وصل الى لهم اعلى يجبتس %1 لكسبة فول الصويا المعززة بالبروتين الحيوي بنسبة

9 ويعزى هذا التباين الى تباين كمية الحاصل والنسب المئوية للوزن 2/مكغم 2971و 2.01و 2.09

الجاف9

الى وجود فروق معنوية بين المعامالت للنسب المئوية للكفاءة الحيوية9 اذ 4يشير الجدول

نوى التمر المعزز بالبروتين الحيوي على اعلى نسبة من مسحوق % 2و 1حصلت نسبة اإلضافة

لتين المعامويمكن تفسير زيادة الكفاءة الحيوية في هذه 9بالتتابع %42.10و 41.22وصلت الى

نواخري Andradeمع وتتفق هذه النسب (1) مية الحاصل كما ذكر في الجدولبسبب زيادة ك

9%58.3 – 24.4والتي كانت بين (8002)

النتائج والمناقشة 62

كمية ولوزن الجاف النسبة المئوية ل . تأثير إضافة المغذيات الى الوسط في4الجدول

لكفاءة الحيوية والنسبة المئوية لعلى أساس الوزن الجاف (2)كغم/م الحاصل الكلي

فطر االزرار البيضاءل

الوزن المعامالت

الجاف%

الحاصل الكلي

على أساس الوزن

2الجاف كغم/م

الكفاءة

الحيوية %

1T 34.34 1.576 13.12 معاملة القياس

2 T 31.14 1.486 13.82 % 1 التمر نوى مسحوق

3 T 39.33 1.904 14.63 % 2 التمر نوى مسحوق

4 T 32.71 1.828 13.69 %1 الطحين نخالة

5 T 35.67 1.705 15.96 %2 الطحين نخالة

6 T 36.09 1.851 13.89 %1 فول الصويا كسبة

7 T 34.74 1.677 13.64 %2 الصويا فول كسبة

8 T معزز تمر نوى مسحوق

%1 بالبروتين الحيوي

13.64

1.968 41.22

9 T معزز تمر نوى مسحوق

%2 بالبروتين الحيوي

14.21 2.092 42.10

11 T ةالمعزز الطحين نخالة

%1 بالبروتين الحيوي

14.23 2.011 40.25

11 T ةالمعزز الطحين نخاله

%2 الحيويبالبروتين

13.86 1.838 38.05

12 T ةالمعزز الصويا فول كسبة

%1 بالبروتين الحيوي

14.41 2.068 41.00

13 T المعزز الصويا فول كسبة

%2 بالبروتين الحيوي

14.13 1.656 33.49

L.S.D 1.358 0.3518 6.763

النتائج والمناقشة 63

ية )الجن المبكر: تأثير إضافة المغذيات الى الوسط في زيادة نسبة الحاصل 5.1.4

:االولى(

لها دور في زيادة نسبة الى الوسط ان إضافة بعض المغذيات (10)يتضح من الشكل

الحاصل المبكر المتمثل بالجنية األولى نسبة الى اإلنتاج النهائي او الحاصل الكلي الناتج من عدد

ورة دفي تقصير ،اقتصاديةمن أهمية ولما لهذه الصفة الجنيات التراكمية خالل دورة اإلنتاج

T9و T8فقد تميزت كل من معاملة استعراضها.تم نوعية عالية اإلنتاج والحصول على منتج ذي

نسبة الى الحاصل الكلي فضال عن حاصل بزيادة حاصل الجنية األولى T13و T11و T10و

.الجنية األولى لمعاملة القياس

0

10

20

30

40

50

60

70

12345678910111213

ة نيجل

كصل

حاة

سبن

%

رقم المعاملة

الجنية االولى

الجنية الثانية

الجنية الثالثة

في زيادة نسبة الحاصل المبكر )الجنية تأثير إضافة المغذيات الى الوسط 11الشكل

االزرار البيضاء لفطر االولى(

النتائج والمناقشة 61

التجربة الثانية:: 2.4

عية ه النوصفاتإنتاجية فطر االزرار البيضاء و والكولشسين فيالساللة تأثير

الطبيةخصائصه و

: صفات الحاصل ومكوناته1.2.4

ية حاصل الجنفي إنتاجية الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما تأثير: 1.1.2.4

االولى

في حاصل الجنية األولى اذ امعنوي الساللة تأثيران ل( 5)من نتائج الجدول يتضح

وبذلك تفوقت معنويا على 2كغم/م 8.38اعلى حاصل والذي بلغ B62سجلت الساللة

. اما تأثير تركيز الكولشسين فكان 2كغم/م 6.17الذي وصل حاصلها الى X20الساللة

الذي % 0.3تفوق معنوي على جميع المعامالت ما عدا معاملة التركيز % 0.5للتركيز

. وكان بالتتابع 2/مكغم 7772و 74.8لم يصل الى المعنوية والذي بلغ الحاصل لكل منهما

ز التداخل فقد امتا ولشسين اثر معنوي في كمية الحاصل،للتداخل بين الساللة وتركيز الك

10.38حاصل الجنية األولى الى بزيادة % 0.5وتركيز الكولشسين B62بين الساللة

وتركيز Brownالتداخل بين الساللة ميع المعامالت معنويا عدا معاملتيج على 2كغم/م

والذي بلغ الحاصل لكل منهما %0.0وتركيز الكولشسين B62الساللة و % 0.5الكولشسين

. في حين انخفض حاصل الجنية األولى الى ادناه عند معاملة بالتتابع 2كغم/م 9.14و 9.45

2كغم/م 23.5 الى % 0.3الكولشسينوتركيز X20الساللة التداخل بين.

ولى األبينهما في إنتاجية حاصل الجنية والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 5جدول

لفطر االزرار البيضاء( 2كغم/م)

الساللة

تراكيز الكولشسين

كيزامتوسط التر 2كغم/ م حاصل الجنية االولى

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 5.12 7.38 9.14 7.21

1C (%0.1) 6.72 3.52 6.28 5.51

2C (%0.3) 8.07 7.38 7.72 7.72

3C (%0.5) 9.45 6.39 10.38 8.74

8.38 6.17 7.34 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة الكولشسين

1.05 1.21 2.10

النتائج والمناقشة 65

ية حاصل الجن: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في إنتاجية 2.1.2.4

ةالثاني

معنويا B62الساللة ن حاصل الجنية الثانية تفوقت فيهاالى (6)تشير نتائج الجدول

لكن لم تصل الزيادة في حاصل هذه الجنية الى التفوق المعنوي عن Brownالساللة على

بالتتابع. 2/مكغم 3.22و 8.26و 9.93 والذي بلغ الحاصل لها X20الساللة

0.1تركيز فقد امتاز ال الثانية،في حاصل الجنية مستوى تراكيز الكولشسيندرجة تأثير اما

%0.5التركيز وبذلك تفوق معنويا على 2كغم/م 8.89بوصوله الى اعلى حاصل بلغ %

. 2كغم/م 5.54الذي وصل حاصلها الى

كما اثر التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين معنويا في حاصل الجنية

%0.1وتركيز الكولشسين بمستوى B62فقد أعطت معاملة التداخل بين الساللة الثانية،

وبذلك تفوقت على جميع المعامالت معنويا. في حين أدت 2كغم/م 15.11اعلى حاصل بلغ

الى انعدام %0.5وتركيز الكولشسين بمستوى Brownبين الساللة معاملة التداخل

الحاصل في هذه الجنية.

ةبينهما في إنتاجية حاصل الجنية الثاني والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 2جدول

لفطر االزرار البيضاء (2كغم/م)

الساللة

تراكيز الكولشسين

كيزامتوسط التر 2كغم/م حاصل الجنية الثانية

S1

Brown

S2

X20

S3

B62

0C (%0.0) 3.20 9.14 8.59 6.98

1C (%0.1) 2.86 8.69 15.11 8.89

2C (%0.3) 6.81 6.61 7.97 7.13

3C (%0.5) 0.00 8.59 8.03 5.54

9.93 8.26 3.22 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

2.45 2.83 4.91

النتائج والمناقشة 66

: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في إنتاجية حاصل الجنية 3.1.2.4

الثالثة

لساللة في حاصل الجنية الثالثة اذ تفوقت الساللة لوجود تأثير معنوي (1)يظهر من الجدول

Brown وكان لمستوى تراكيز الكولشسين دور 29كغم/م 4.61على جميع السالالت والتي بلغت

على جميع المعامالت9 %0.1عند التركيز 2كغم/م 3.10في زيادة حاصل هذه الجنية معنويا الى

لحفاظ على في ا امعنوي اوجد ان له تأثيرفقد شسين اما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكول

%0.5وتركيز كل من Brownزيادة حاصل الجنية الثالثة عند معاملة التداخل بين الساللة

بالتتابع9 في 2/مكغم 3.74و 6.00و 6.97والذي وصل حاصل هذه الجنية الى % 0.0و %791و

( %0.5و %0.0والتركيزين ) X20حين انعدم حاصل هذه الجنية عند معاملتي التداخل بين الساللة

(9%0.5و %0.0والتركيزين ) B62ومعاملتي التداخل بين الساللة

تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في إنتاجية حاصل الجنية الثالثة 2جدول

االزرار البيضاءلفطر ( 2كغم/م)

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزاالتر متوسط 2كغم/م حاصل الجنية الثالثة

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 3.74 0.00 0.00 1.25

1C (%0.1) 6.00 1.65 1.66 3.10

2C (%0.3) 1.73 0.58 0.87 1.06

3C (%0.5) 6.97 0.00 0.00 2.32

0.63 0.56 4.61 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة

الكولشسين

1.15 1.33 2.31

الحاصل الكلي : تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في 4.1.2.4

ازت فقد امت الكلي،في زيادة الحاصل امعنوي الساللة تأثيران ل (8)أظهرت نتائج الجدول

كل من الساللة وبذلك تتفوق معنويا على 2كغم/م 18.94بوصول حاصلها الى B62الساللة

Brown وX20 بالتتابع. وتتفق هذه النتائج 2/مكغم 11798و 15.17بلغ حاصلهما الكلي واللتين

عند اختبار ثالثة أنواع من السالالت أعطت حاصال (2111واخرون ) Pardoمع ما توصل اليه

وقد يعزى هذا التباين في كمية الحاصل بين الجنيات .2كغم/م 21760-14.10بين ا تراوحمتباين

النتائج والمناقشة 67

والحاصل الكلي الى االختالف الوراثي بين السالالت وبالتالي فان كل ساللة تختلف في الثالثة

الت كما موضح بين السال اواسع اوراثي اتحليل الوراثي ان هناك اختالفالمتطلباتها البيئية كما اثبت

بين تحقق أي تأثير معنوييتأثير مستوى تراكيز الكولشسين فلم عن اما .11والشكل 31بالجدول

المعامالت للحاصل الكلي لهذا الفطر.

بينت نتائج التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين أثرا معنويا في الحاصل

على جميع المعامالت %0.1والتركيز B62والذي تفوقت بها معاملة التداخل بين الساللة الكلي،

لكل منها الكلي بلغ الحاصل والذي %0.5والتركيز B62ما عدا معاملة التداخل بين الساللة

عند معاملة 2كغم/م12.06الى بالتتابع. في حين انخفض الحاصل الكلي 2/مكغم18.41و 23.06

اان بعض تراكيز الكولشسين احدث تغايربويمكن تفسير ذلك . Brownتابعة للساللة ال القياس

مما انعكس إيجابيا .11والشكل (31يتضح من الجدول) كما ب الوراثي للساللةفي التركي اوراثي

وقد اثبت احداث التغاير الوراثي الكلي. الجنيات والحاصلى كمية الحاصل عند كل جنية من عل

الذي RABDمؤشرات الجزيئية لل كولشسين من خالل التحليل الوراثيعن طريق المعاملة بمادة ال

.عن طريق قياس البعد الوراثي اظهر بشكل واضح هذا التغاير

لفطر ( 2كغم/م) بينهما في الحاصل الكلي والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 8جدول

االزرار البيضاء

الساللة

تراكيز

الكولشسين

التركيز متوسط 2مكغم/ الحاصل الكلي

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 12.06 16.52 17.74 15.44

1C (%0.1) 15.58 13.86 23.06 17.50

2C (%0.3) 16.60 14.57 16.56 15.91

3C (%0.5) 16.42 14.99 18.41 16.61

18.94 14.98 15.17 الساللةمتوسط

L.S.D وتركيز التداخل بين الساللة تركيز الكولشسين الساللة

الكولشسين

2.39 n.s 4.77

النتائج والمناقشة 68

لكفاءة ل النسبة المئوية: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في 5.1.2.4 الحيوية

الى ان المعامالت كان لها اثر في احداث فروق معنوية فيما (9)تشير نتائج الجدول

عن B62ساللة التفوقت فقد الحيوية،في زيادة الكفاءة امعنوي اللساللة تاثير بينها. اذ يتضح ان

13730و 54.10النسبة المئوية للكفاءة الحيوية والتي بلغت في X20و Brownتين كل من السالل

سالالت لفطر أربععند اختيار (3008ن )واخري Andradeوهذا يتفق مع بالتتابع. %12780و

ة بالكولشسين اما المعامل االزرار البيضاء وجد تباين فيما بينها في النسبة المئوية للكفاءة الحيوية.

والمعاملة ةالسالل التداخل بينأدى وقد بين مستويات التركيز المختلفة. امعنوي اقفلم تحدث فر

عند االى وصول النسبة المئوية للكفاءة الحيوية الى أقصاه مختلفة من الكولشسين بمستويات

كان ادنى في حين. %65.90والتي كانت %0.1والتركيز B62معاملة التداخل بين الساللة

. %0.0وتركيز Brownنسبة مئوية للكفاءة الحيوية عند معاملة التداخل للساللة

حيويةلكفاءة الل النسبة المئويةبينهما في والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 9جدول

لفطر االزرار البيضاء

الساللة

تراكيز الكولشسين

متوسط التراكيز الكفاءة الحيوية %

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 34.4 47.2 50.7 44.1

1C (%0.1) 44.5 39.6 65.9 50.0

2C (%0.3) 47.4 41.6 47.3 45.5

3C (%0.5) 46.9 42.8 52.6 47.4

54.1 42.8 43.3 متوسط الساللة

L.S.D وتركيز التداخل بين الساللة تركيز الكولشسين الساللة الكولشسين

6.82 n.s 13.63

قد يعود سبب زيادة الكفاءة الحيوية الى كفاءة الساللة وطافراتها المعاملة بالكولشسين من

Royseو Mamiroاستنفاذ الوسط الزرعي من المغذيات. وهذه النتائج تتفق مع ما توصل اليه

.%42.0-67.3من النسبة المئوية للكفاءة الحيوية لفطر االزرار البيضاء تراوحت بين (2118)

النتائج والمناقشة 69

بينهما في عدد االجسام الثمرية والكولشسين والتداخلتأثير الساللة : 6.1.2.4

لحاصل الجنية االولى

عدم وجود فروق معنوية بين السالالت لعدد االجسام (10)يظهر من نتائج الجدول

الثمرية لحاصل الجنية األولى. في حين كان لمستوى تراكيز الكولشسين أثر معنوي في زيادة

جميع المعامالت عدا معاملة على %0.5اذ تفوق التركيز الجنية،جسام الثمرية لهذه عدد اال

جسم ثمري. 152.50و 165.00القياس والذي بلغ العدد لكل منهما

اما نتائج التداخل بين الساللة وتركيز الكولشسين لعدد االجسام الثمرية لحاصل الجنية

ت معنويا علىتفوق %0.5والتركيز Brownقد أظهرت ان معاملة التداخلة بين الساللة ف األولى،

225.00وكان عددهما %0.0والتركيز B62جميع المعامالت عدا معاملة التداخل بين الساللة

الى خفض %0.1والتركيز X20بالتتابع. في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة 157750و

جسم ثمري. 75.00ثمرية الى عدد االجسام ال

بينهما في عدد االجسام الثمرية لحاصل والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 00جدول

األولى لفطر االزرار البيضاءالجنية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر األولىللجنية عدد االجسام الثمرية

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 150.0 150.0 157.5 152.5

1C (%0.1) 135.0 75.0 135.0 115.0

2C (%0.3) 90.0 95.0 120.0 101.7

3C (%0.5) 225.0 135.0 135.0 165.0

136.9 113.8 150.0 متوسط الساللة

L.S.D وتركيز التداخل بين الساللة تركيز الكولشسين الساللة

الكولشسين

n.s 42.42 73.47

النتائج والمناقشة 70

جسام الثمرية : تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في عدد اال7.1.2.4

لحاصل الجنية الثانية

في زيادة عدد االجسام الثمرية امعنوي الساللة تأثيرل انالى (11)تشير نتائج الجدول

241.00اعلى عدد لالجسام الثمرية وصل الى X20اذ سجلت الساللة الثانية،لحاصل الجنية

الذي بلغ عدد االجسام Brownو B62كل من الساللة م ثمري وبذلك يتفوق معنويا علىجس

جسم ثمري بالتتابع. اما مستوى تراكيز الكولشسين فقد كان 79.00و 188.00الثمرية لكل منها

على جميع %0.3فقد تفوقت معاملة التركيز الجنية،في عدد االجسام الثمرية لهذه له اثر معنوي

الى خفض %0.5أدت معاملة التركيز حين جسم ثمري. في 219.00المعامالت والتي بلغت

جسم ثمري. 105.00عدد االجسام الثمرية الى

بينهما في عدد االجسام الثمرية لحاصل والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 00جدول

لفطر االزرار البيضاء الجنية الثانية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر للجنية الثانية االجسام الثمريةعدد

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 45.00 375.00 180.00 200.00

1C (%0.1) 90.00 210.00 158.00 153.00

2C (%0.3) 180.00 200.00 278.00 219.00

3C (%0.5) 0.00 180.00 135.00 105.00

188.00 241.00 79.00 الساللةمتوسط

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

11.16 12.88 22.31

كان للتداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين اثر معنوي في زيادة عدد االجسام

و % 0.0و التركيز X20اذ احدثت كل من معاملة التداخل بين الساللة الجنية،الثمرية عند هذه

و 375.00فرق معنوي عن جميع المعامالت بلغا اعلى %0.3والتركيز B62بين الساللة

%070التركيز و Brownجسم ثمري بالتتابع. في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة 278.00

جسم ثمري بينما لم يتم تسجيل أي جسم ثمري لمعاملة 45.00ى الى خفض عدد االجسام الثمرية ال

.%0.5التركيز و Brownالتداخل بين الساللة

النتائج والمناقشة 71

: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في عدد االجسام الثمرية 8.1.2.4

لحاصل الجنية الثالثة

اذ الثالثة،لساللة على عدد االجسام الثمرية للجنية وجود اثر معنوي ل (12) يبين الجدول

جسم ثمري. اما مستوى تراكيز 86.20جميع السالالت والتي بلغت على Brownتفوقت الساللة

دور في زيادة عدد االجسام الثمرية لهذه الجنية الى %0.1الكولشسين فكان لمعاملة التركيز

وصل عدد فوق معنويا على معاملة القياس التيجسم ثمري وبذلك يت 57.50أقصاه والذي بلغ

. اثمري اجسم 20االجسام الثمرية فيها الى

بينهما في عدد االجسام الثمرية لحاصل والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 03جدول

لفطر االزرار البيضاء الجنية الثالثة

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر للجنية الثالثة جسام الثمريةعدد اال

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 60.00 0.00 0.00 20.00

1C (%0.1) 105.00 45.00 22.50 57.50

2C (%0.3) 45.00 15.00 22.50 27.50

3C (%0.5) 135.00 0.00 0.00 45.00

11.20 15.00 86.20 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة

الكولشسين

25.47 29.41 50.94

مرية لحاصل ام الثاالجس معنويا لعددحقق التداخل بين الساللة وتركيز الكولشسين تأثيرا

جميع على بتفوقها %0.5والتركيز Brownاذ امتازت معاملة التداخل بين الساللة الجنية الثالثة،

والذي بلغ عدد االجسام %0.1التركيز و Brownالمعامالت عدا معاملة التداخل بين الساللة

جسم ثمري. 105.00و 135.00الثمرية لكل منهما

النتائج والمناقشة 72

: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في عدد االجسام الثمرية 9.1.2.4

للحاصل الكلي

ر لم يكن لها تأثي لساللة ومستوى تراكيز الكولشسينان ل (13)تضح من نتائج الجدول ي

في عدد االجسام الثمرية للحاصل الكلي لفطر االزرار البيضاء. معنوي

ة دد االجسام الثمريفي ع التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسينتأثير اما

ساللة ولكن بين المعامالت مجتمعة كانتفلم يكن هناك فروق معنوية ضمن نفس ال للحاصل الكلي

جسم 525.00 سجلت اكبر عدد وصل الى %0.0والتركيز X20بين الساللة التداخل معاملة

و %0.0والتركيز Brownالساللة التداخل بينعن معاملتي امعنوي اثمري محدثة بذلك فرق

B62 جسم 270.00و 255.00بلغ عدد االجسام الثمري لكل منهما والذي %0.5والتركيز

وقد يعود هذا التباين بين السالالت في عدد االجسام الثمرية للجنيات الثالث .بالتتابع ثمري

والحاصل الكلي الى اختالف المتطلبات البيئية لكل ساللة والذي يعود الى البعد الوراثي بين

(.11الالت الشكل )السالالت كما تم توضيحه في التحليل العنقودي للبعد الوراثي بين الس

بينهما في عدد االجسام الثمرية للحاصل والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 02جدول

لفطر االزرار البيضاء الكلي

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر للحاصل الكلي عدد االجسام الثمرية

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 255.00 525.00 338.00 372.00

1C (%0.1) 330.00 330.00 315.00 325.00

2C (%0.3) 315.00 310.00 420.00 348.00

3C (%0.5) 360.00 315.00 270.00 315.00

336.00 370.00 315.00 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة

الكولشسين

n.s n.s 245.0

النتائج والمناقشة 73

معدل وزن الجسم : تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في 10.1.2.4

لحاصل الجنية االولى الثمري

عدم وجود فروق معنوية بين السالالت لمعدل وزن الجسم (11)تبين نتائج الجدول

ي زيادة ف امعنوي االثمري لحاصل الجنية األولى. في حين حقق مستوى تراكيز الكولشسين أثر

في التأثير في معدل وزن الجسم %0.3اذ امتاز التركيز الجنية،معدل وزن الجسم الثمري لهذه

غم.84.40الثمري للجنية األولى معنويا عن جميع المعامالت والذي بلغ

X20 الساللة بينالتداخل اما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين فقد أعطت معاملة

اعلى زيادة معنوية في معدل وزن الجسم الثمري للجنية األولى %0.3 الكولشسينوتركيز

الى %070التركيز و Brownغم. في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة 95.90وصل الى

غم.38.70خفض معدل وزن الجسم الثمري لهذه الجنية والذي بلغ

غم() بينهما في معدل وزن الجسم الثمري والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 01جدول

األولى لفطر االزرار البيضاءلحاصل الجنية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر األولى )غم(معدل وزن الجسم الثمري للجنية

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 38.70 52.10 64.20 51.70

1C (%0.1) 54.20 55.10 49.70 53.00

2C (%0.3) 89.60 95.90 67.70 84.40

3C (%0.5) 42.00 47.30 76.90 55.40

64.60 62.60 56.10 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

n.s 20.25 35.08

النتائج والمناقشة 71

: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في معدل وزن الجسم 11.1.2.4

لحاصل الجنية الثانيةالثمري

في زيادة معدل وزن الجسم الثمري امعنوي الساللة تأثيران ل (15)تشير نتائج الجدول

غم.63.40 تعلى جميع السالالت والتي بلغ B62اذ تفوقت الساللة الثانية،لحاصل الجنية

اما مستوى تراكيز الكولسشين فقد اثرت معنويا في زيادة معدل وزن الجسم الثمري عند

خفض في %0.5غم في حين أدت معاملة التركيز 60.80الى أقصاه والذي بلغ %0.1التركيز

غم. 35.70معدل وزن الجسم الثمري الى

عدل وزن زيادة مفي ة ومستوى تراكيز الكولشسين تأثير معنويكان للتداخل بين السالل

اعلى معدل لوزن %0.1والتركيز B62اذ اعطت معاملة التداخل بين الساللة الثمري،الجسم

في حين أدت معاملة التداخل بين المعامالت،جميع جسم الثمري وبذلك تتفوق معنويا علىال

غم. 16.50خفض معدل وزن الجسم الثمري الى الى %0.0والتركيز X20الساللة

بينهما في معدل وزن الجسم الثمري والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 01جدول

لفطر االزرار البيضاء لحاصل الجنية الثانية)غم(

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر )غم( للجنية الثانية معدل وزن الجسم الثمري

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 71.10 16.50 52.50 46.70

1C (%0.1) 22.40 48.50 111.50 60.80

2C (%0.3) 37.80 49.50 30.30 39.20

3C (%0.5) 0.00 47.70 59.50 35.70

63.40 40.60 32.90 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

18.90 21.83 37.81

النتائج والمناقشة 75

الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في معدل وزن الجسم تأثير : 12.1.2.4

لفطر االزرار البيضاء الثمري لحاصل الجنية الثالثة

معدل وزن الجسم الثمري لحاصل في وجود تأثير معنوي الساللة (16)يتضح من الجدول

وزن الجسم عدل في الزيادة المعنوية لم Brownالساللة اذ تشير النتائج الى تفوق الثالثة،الجنية

وقد أعطى مستوى تراكيز الكولشسين غم عن باقي السالالت. 54.60الذي وصل الى الثمري

%0.1اثرا معنويا في معدل وزن الجسم الثمري لحاصل هذه الجنية والذي كان لمعاملة التركيز

الى %0.5غم. في حين أدت معاملة التركيز 40.50اعلى معدل لوزن الجسم الثمري لوصل الى

غم.17.20خفض معدل وزن الجسم الثمري الى ادناه والذي بلغ

وزن معدلفي قد اثرت معنويا فاما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين

اذ وصلت الزيادة المعنوية عند معاملة التداخل بين الساللة الثالثة،الجسم الثمري لحاصل الجنية

Brown م. في حين انخفض معدل وزن الجسم الثمري لحاصل غ68.10الى %070التركيز و

.%0.1والتركيز X20غم عند معاملة التداخل بين الساللة 12.2هذه الجنية الى

بينهما في معدل وزن الجسم الثمري والكولشسين والتداخلتأثير الساللة 02جدول

لفطر االزرار البيضاء لحاصل الجنية الثالثة)غم(

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر )غم( للجنية الثالثة معدل وزن الجسم الثمري

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 68.1 0.0 0.0 22.7

1C (%0.1) 60.0 12.2 49.3 40.5

2C (%0.3) 38.4 12.8 25.6 25.6

3C (%0.5) 51.7 0.0 0.0 17.2

18.7 6.3 54.6 متوسط الساللة

L.S.D تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

16.28 18.79 32.55

النتائج والمناقشة 76

: تأثير الساللة و الكولشسين والتداخل بينهما في معدل وزن الجسم 13.1.2.4

للحاصل الكليالثمري

وجود فروق معنوية بالنسبة عدم (17)أظهرت نتائج التحليل االحصائي لنتائج الجدول

ن الساللة تداخل بيالساللة فضال عن مستوى تراكيز الكولشسين. بينما أظهرت نتائج اللتأثير

ذ امتازت ا الكلي،معدل وزن الجسم الثمري للحاصل في الكولشسين اثرا معنويا ومستوى تراكيز

بحصولها اعلى معدل لوزن الجسم الثمري بلغ %0.1 والتركيز B62معاملة التداخل بين الساللة

في خفض معدل %0.0والتركيز X20غم. في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة 73.20

غم.40.30وزن الجسم الثمري الى ادناه والذي بلغ

غم( )الكولشسين والتداخل بينهما في معدل وزن الجسم الثمري تأثير الساللة و 02جدول

لفطر االزرار البيضاء للحاصل الكلي

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر )غم( للحاصل الكلي معدل وزن الجسم الثمري

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 50.8 40.3 52.6 47.9

1C (%0.1) 46.8 47.9 73.2 56.0

2C (%0.3) 52.7 67.3 41.2 53.7

3C (%0.5) 45.6 47.6 68.2 53.8

58.8 50.8 49.0 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

تركيز التداخل بين الساللة و

الكولشسين

n.s n.s 29.04

: الصفات المظهرية2.2.4

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في طول ساق الجسم الثمري1.2.2.4

في تباين طول ساق الجسم الثمري معنويا9 اذ اان للساللة دور (.1)يتضح من الجدول

عن باقي سم 6.41في وصول طول ساق الجسم الثمري الى معنويا Brown الساللة تفوقت

في زيادة طول ساق الجسم %90.5 اما المعاملة بالكولشسين فقد تميزت معاملة التركيز السالالتين

معنويا عن معاملة القياس الى %0.3في حين قل طول الساق عند التركيز سم9 6.07الى الثمري

النتائج والمناقشة 77

باين طول ساق في ت لساللة والمعاملة بالكولشسين اثروكان للتداخل بين ا بالتتابع9 سم 3971و 5.52

طول الساق للجسم الثمري الى أقصاه عند معاملة التداخلة بين معدل فقد زاد معنويا،الجسم الثمري

ن واخري Gulerوهذه النتائج تتفق مع نتائج سم9 7.29الى %0.5والتركيز Brownالساللة

(3002.)

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في سمك ساق الجسم الثمري2.2.2.4انه لم تكن هناك فروق معنوية بين السالالت في معدل سمك ساق (18)يبين الجدول

الى زيادة معنوية في %0.5الجسم الثمري. اما المعاملة بالكولشسين فقد أدت معاملة التركيز

كان للتداخل بين الساللة والمعاملة .سم 2.30معدل سمك ساق الجسم الثمري والتي بلغت

قت كل اذ تفو ،في معدل سمك ساق الجسم الثمري معنوي بمستويات مختلفة من الكولشسين اثر

والتركيز X20ومعاملة التداخل بين الساللة %0.1والتركيز B62من معاملة التداخل بين الساللة

سم. في حين انخفض معدل سمك ساق الجسم 2.42و 2.43جميع المعامالت بسمك على 0.5%

.سم1.71الى %0.3والتركيز B62 الساللةالى ادناه عند معاملة التداخل بين الثمري

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في عرض قبعة الجسم الثمري3.2.2.4معنويا في معدل عرض ان الساللة والكولشسين لم تؤثرا الى (19) تشير نتائج الجدول

را معنوياتراكيز الكولشسين اثفي حين وجد ان للتداخل بين الساللة ومستوى ،قبعة الجسم الثمري

%0.3والتركيز Brownاذ وصلت معاملة التداخل بين الثمري،في معدل عرض قبعة الجسم

%0.0والتركيز Brownتفوق معنويا عن معاملة التداخل سم والذي9.76الى اقصى عرض بلغ

قد أدت الى تقليل عرض ف %0.3والتركيز B62بين الساللة سم. اما معاملة التداخل 8.29البالغة

واخرون Zawirska-Wojtasiakوأشار سم. 7.49قبعة الجسم الثمري الى ادناه حيث بلغ

ىتدع تين مختلفتين األولىقبعة الجسم الثمري المغلق لسالل ان معدل عرضالى (8002)

Korona7 وEuromycel12 سم.3.5-3و 2-2.5كان بين

والتداخل بينهما في سمك قبعة الجسم الثمريتأثير الساللة والكولشسين : 4.2.2.4

في معدل سمك فروق معنوية بين السالالت توجدانه ال (.1) يتضح من خالل الجدول

معنويا في زيادة معدل سمك %0.5قبعة الجسم الثمري9 في حين اثر تركيز الكولشسين ذو التركيز

الى تقليل سمك قبعة الجسم %0.3سم9 بينما أدى التركيز 2.29قبعة الجسم الثمري والذي بلغ

عاملة فقد اثرت م الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين اما التداخل بين سم1.969الثمري معنويا الى

2.43وذلك ببلوغ سمك قبعة الجسم الثمري الى معنويا %0.1والتركيز B62الساللة التداخل بين

النتائج والمناقشة 78

سم9 2.14مقداره اسمكوالتي سجلت %0.0مع التركيز نفسها لساللةسم مقارنة بمعاملة التداخل ل

(2014ن )واخري Lee وتتفق نتائج الشكل المظهري من سمك الساق وعرض القبعة وسمكها مع

ين ب ويعزى التباين في الشكل المظهري فق مع معدالت طول الساق.تين ولم تتساللمعدالت ل

الى وجود المعامالت من طول ساق الجسم الثمري وعرضه وعرض قبعة الجسم الثمري وسمكها

ن م ما نتج عنها من عزالت طافرة اثبت حدوثهابين السالالت االصلية و حدث تغايرات وراثية

( 31( و)33وإيجاد البعد الوراثي فيما بينها وكما موضح في الجدول ) RAPDخالل مؤشرات

.(11والشكل )

ريالجسم الثم وسمك تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في طول ساق 08جدول

لفطر االزرار البيضاء )سم(

الساللة

تراكيز الكولشسين

متوسط معدل طول ساق الجسم الثمري )سم( 1S كيزاالتر

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 5.96 6.21 5.92 6.03

1C (%0.1) 6.52 5.48 5.26 5.75

2C (%0.3) 5.87 5.61 5.10 5.52

3C (%0.5) 7.29 5.54 5.39 6.07

5.42 5.71 6.41 متوسط الساللة

L.S.D

التداخل بين الساللة و تركيز تركيز الكولشسين الساللة الكولشسين

0.42 0.48 0.83

الساللة

تراكيز الكولشسين

متوسط معدل سمك ساق الجسم الثمري )سم( 1S كيزاالتر

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 2.03 2.20 2.14 2.12

1C (%0.1) 2.03 2.07 2.43 2.18

2C (%0.3) 2.38 1.78 1.71 1.96

3C (%0.5) 2.10 2.42 2.37 2.30

2.16 2.12 2.13 متوسط الساللة

L.S.D

التداخل بين الساللة و تركيز تركيز الكولشسين الساللة الكولشسين

n.s 0.13 0.22

النتائج والمناقشة 79

مريقبعة الجسم الث وسمك تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في عرض 09جدول

لفطر االزرار البيضاء )سم(

الساللة

تراكيز الكولشسين

كيزامتوسط التر معدل عرض قبعة الجسم الثمري )سم(

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 8.290 9.370 8.985 8.882

1C (%0.1) 8.500 8.185 9.465 8.717

2C (%0.3) 9.755 8.625 7.490 8.623

3C (%0.5) 9.325 8.765 8.870 8.987

8.702 8.736 8.967 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز الكولشسين

n.s n.s 0.824 الساللة

تراكيز الكولشسين

متوسط التركيز معدل سمك قبعة الجسم الثمري )سم(

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 2.03 2.20 2.14 2.12

1C (%0.1) 2.03 2.07 2.43 2.18

2C (%0.3) 2.38 1.78 1.71 1.96

3C (%0.5) 2.09 2.42 2.37 2.29

2.16 2.12 2.13 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز الكولشسين

n.s 0.13 0.22

: الصفات النوعية3.2.4

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للوزن 1.3.2.4

الجاف لالجسام الثمرية

المادة الجافة لالجسام الثمرية، ان الساللة كان لها دور في تباين نسبة (27)يبين الجدول

X20و B62ثم تبعتها الساللة %10.98اعلى فرق معنوي وصل الى Brownاذ سجلت الساللة

ما توصل اليه وتتفق هذه النتائج مع 9بالتتابع %9.45و 10.48بلغت النسبة لكل منهما والتي

Sobieralski ( 3000واخرون) سالالت مختلفة من فطر االزرار دراسة لستعندما اجرى

9%11.2 – 6.8 الثمرية بينلالجسام ت فيها نسبة المواد الجافةالبيضاء تباين

النتائج والمناقشة 80

اذ ة،الثمرينسبة المادة الجافة لالجسام قد أعطت المعاملة بالكولشسين اثرا معنويا في

وصلت عن جميع المعامالت اعلى نسبة معنويةباعطائها % 0.3امتازت المعاملة ذات التركيز

ة سبن في معنوية افقد وجد ان هناك فروق اما التداخل بين الكولشسين والساللة 9%11.14الى

وصلت الى اعلى نسبة %0.1التركيز و Brown حققت الساللة اذ المادة الجافة لالجسام الثمرية،

والتي تم فيها اختبار نوعين من ( 3002ن )واخري Colak وهذه النتائج تتفق مع %9 13.47

االوساط الزرعية اذ وجد ان الوسط الذي يحتوي على نسبة نتروجين اكثر اعطى نسبة اعلى من

والثاني %11736-7.90األول كانت نسبة المادة الجافة بين الثمرية9 الوسطالمادة الجافة لالجسام

لفطر من االجسام الثمرية الجافة ان نسبة المادة Han (1999). وقد وجد %11.46 – 7.74بين

ان نسبة المادة الجافة الى Oei (2113) واشار .%9.14 – 7.19كانت بين االزرار البيضاء

ويمكن تفسير هذا التباين في نسب المادة الجاف .%12 – 6لفطر االزرار البيضاء تتراوح بين

الى ان احد العوامل الرئيسة بعيدا عن العوامل البيئية هي التركيب الوراثي الخاص بكل ساللة

وبما انه قد ظهر هناك بعد وراثي متباين بين السالالت الثالثة وبين طافراتها فقد يعزى السبب

(.11الى ذلك كما مشار اليه في الشكل )

لجاف ابينهما في النسبة المئوية للمادة تأثير الساللة والكولشسين والتداخل 30جدول

لفطر االزرار البيضاء لالجسام الثمرية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

متوسط التراكيز ةالجاف النسبة المئوية للمادة

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 10.80 9.51 11.45 10.60

1C (%0.1) 13.47 8.01 8.03 9.84

2C (%0.3) 10.64 10.86 11.90 11.14

3C (%0.5) 9.01 9.36 10.56 9.65

10.48 9.45 10.98 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

0.0010 0.0012 0.0020

النتائج والمناقشة 81

والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية الساللة تأثير : 2.3.2.4

للكربوهيدرات لالجسام الثمرية

النسبة المئوية للكربوهيدرات معنوية في اان هناك فروق (21)أظهرت نتائج الجدول

زيادة معنوية في هذه الصفة عن X20الساللة فقد أعطت الساللة،بين السالالت نتيجة لتأثير

معنويا فيلم تؤثر ال ف. اما مستوى تراكيز الكولشسين %54.38جميع السالالت بلغت نسبتها

.النسبة المئوية للكربوهيدرات

مئوية صفة النسبة المعنويا في الساللة ومستوى تراكيز الكولشسينالتداخل بين اثر

افضل بتسجيلها %0.5 والتركيز X20معاملة التداخل بين الساللة اذ امتازت للكربوهيدرات،

وقد يعزى زيادة .%57.05نسبة معنوية عن جميع معامالت التداخل والتي وصلت الى

ين ب طبيعة التركيب الوراثي المختلفوانخفاض كمية الكربوهيدرات لالجسام الثمرية الى

( والشكل 34السالالت وما احدثه الكولشسين من تغايرات وراثية جديدة كما موضح في الجدول)

(11.)

الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية تأثير 30جدول

للكربوهيدرات لالجسام الثمرية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزاالترمتوسط النسبة المئوية للكربوهيدرات

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 51.76 57.05 52.04 53.62

1C (%0.1) 50.52 51.67 51.87 51.35

2C (%0.3) 51.76 51.76 52.04 51.85

3C (%0.5) 51.80 57.05 51.97 53.61

51.98 54.38 51.46 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

الساللة و تركيز التداخل بين

الكولشسين

2.03 n.s 4.05

النتائج والمناقشة 82

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للبروتين 3.3.2.4

لالجسام الثمرية

نويا في النسبة لساللة تأثيرا معان ل (22)يتضح من خالل التحليل االحصائي للجدول

. %32.26على افضل نسبة معنوية وصلت الى B62وقد حصلت الساللة المئوية للبروتين،

من ان الساللة لها تأثير في اختالف نسبة البروتين ( 2111) واخرون Pardoوهذا يتفق مع

الى 20.63لبروتين االجسام الثمرية بين النسبة المئويةلفطر االزرار البيضاء اذ تراوحت

لم تكن هناك فروق معنوية لمستوى تراكيز الكولشسين في النسبة المئوية للبروتين. . 24.59%

الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين تأثيرا معنويا في النسبة المئوية اعطى التداخل بينقد

افضل نسبة وصلت الى %0.1والتركيز B62اذ حققت معاملة التداخل بين الساللة للبروتين،

عود هذا التباين في المحتوى البروتيني لالجسام الثمرية الى التغاير الوراثي بين وقد ي .34.25%

( والشكل 34السالالت وما احدثه الكولشسين من تغايرات وراثية جديدة كما موضح في الجدول)

(11.)

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للبروتين 22 جدول

لالجسام الثمرية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر النسبة المئوية للبروتين

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 33.25 30.44 30.65 31.45

1C (%0.1) 31.20 31.96 34.25 32.47

2C (%0.3) 33.25 31.20 30.65 31.70

3C (%0.5) 30.44 30.44 33.49 31.46

32.26 31.01 32.04 الساللةمتوسط

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

1.18 n.s 2.37

النتائج والمناقشة 83

لدهون لتأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية : 4.3.2.4

لالجسام الثمرية

معنوية لصفة النسبة المئوية للدهون افروق الساللة اعطتان الى ( 23)تشير نتائج الجدول

وهذا ما يجعلها %4.77والتي وصلت النسبة فيها الى X20والتي كانت افضلها عند الساللة

هون فيهمابلغت النسبة من الد التي Brown والساللة B62كل من الساللة تتفوق معنويا على

زيادة معنوية %0.1اما مستوى تراكيز الكولشسين فقد حقق التركيز بالتتابع. %3.55و 3.66

. %3.47و 3.62وصال الى اللذين %070و %0.5عن كل من التركيزين %4.63بلغت

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للدهون لالجسام 32جدول

لفطر االزرار البيضاء الثمرية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

متوسط التراكيز Fat النسبة المئوية للدهون

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 3.54 3.82 3.06 3.47

1C (%0.1) 3.45 5.27 5.15 4.63

2C (%0.3) 3.54 6.17 3.06 4.26

3C (%0.5) 3.67 3.82 3.37 3.62

3.66 4.77 3.55 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

0.91 1.05 1.82

اثر التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين معنويا في النسبة المئوية للدهون

0.3وتركيز الكولشسين X20الساللة عند معاملة التداخل بين % 6.17وكانت افضل نسبة هي

والتركيز X20معاملة التداخل بين الساللة التابعة لكل من %5.15و 5.27تالها النسبة %

ان من بالتتابع مما مكن هذه النسب %0.1والتركيز B62ومعاملة التداخل بين الساللة % 0.1

فيها كمية الدهون عند معاملتي التداخل بين تالتي انخفض %3.06تتفوق معنويا عن النسبة

. وهذه النتائج مقاربة الى نتائج %0.3والتركيز B62و الساللة %0.0والتركيز B62الساللة

Nasiri البيضاء. عندما تم تقدير الدهون في االجسام الثمرية لفطر االزرار (3003) واخرين

ان نسبة الدهون في فطر االزرار (3003واخرون ) Biswasهذه النتائج تتفق مع ما ذكره و

النتائج والمناقشة 81

وقد يعود هذا التباين في نسبة الدهون الى البعد الوراثي بين . %6.4-3.0البيضاء تتراوح بين

( 34احدثه الكولشسين من تغايرات وراثية جديدة كما موضح في الجدول) السالالت وما

(.11)والشكل

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية لاللياف 5.3.2.4

لالجسام الثمرية

اذ امتازت لاللياف،لساللة في النسبة المئوية لوجود تأثير معنوي (21)يبين الجدول

والتي تفوقت معنويا عن كل من الساللة %16.48بتسجيلها اعلى نسبة وصلت الى B62الساللة

X20 وBrown وى تراكيز . ولم يكن لمست%11.71و 13.50والذي بلغت النسبة فيهما الى

في النسبة المئوية لاللياف. الكولشسين تأثير معنوي

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية لاللياف 31جدول

لفطر االزرار البيضاء لالجسام الثمرية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر Fiber Crude النسبة المئوية لاللياف

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 12.19 14.23 17.03 14.48

1C (%0.1) 9.88 13.77 17.82 13.83

2C (%0.3) 12.19 11.75 17.03 13.66

3C (%0.5) 12.57 14.23 14.03 13.61

16.48 13.50 11.71 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

2.15 n.s 4.31

اما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين قد تميزت فيها معنويا معاملة التداخل بين

قلت النسبة. في حين %17.82النسبة المئوية لاللياف الى بزيادة %0.1 والتركيز B62الساللة

وقد يعزى زيادة . %071التركيز و Brownعند معاملة التداخل بين الساللة %9.88الى

وانخفاض نسبة االلياف لالجسام الثمرية الى طبيعة التركيب الوراثي المختلف بين السالالت وما

(.11( والشكل )34احدثه الكولشسين من تغايرات وراثية جديدة كما موضح في الجدول)

النتائج والمناقشة 85

ماد المئوية للر : تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة6.3.2.4

لالجسام الثمرية

ن اذ وجد ا للرماد،في النسبة المئوية اويمعن الساللة تأثيران ل (25)يتضح من الجدول

وبذلك تتفوق %11.99في الزيادة المعنوية للنسبة المئوية للرماد والذي بلغ ادور B62لساللة ل

%10.10و 10.31وصلت نسبتهما الى اللتين Brownو X20كل من الساللة معنويا على

تائج البحث الذي من خالل ن (3000) واخرون Pardoبالتتابع. وهذا يتفق مع ما توصل اليه

لنسبة لساللة دور في تباين افطر االزرار البيضاء من ان لمن السالالت تابعة ل اختبر فيها ثالث

.%12.71-10.36المئوية للرماد والتي كانت بين

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للرماد لالجسام 31جدول

لفطر االزرار البيضاء الثمرية

الساللة

تراكيز الكولشسين

كيزامتوسط التر Ash النسبة المئوية للرماد

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 9.44 10.72 11.30 10.49

1C (%0.1) 9.49 8.87 14.44 10.93

2C (%0.3) 9.44 10.91 11.30 10.55

3C (%0.5) 12.06 10.72 10.92 11.23

11.99 10.31 10.10 الساللةمتوسط

L.S.D

تركيز الساللة الكولشسين

وتركيز الساللة التداخل بين الكولشسين

0.89 n.s 1.78

ان لها دور في انه كالى اما استعمال المستويات المختلفة لتراكيز الكولشسين فتشير النتائج

زيادة النسبة المئوية للرماد لكنها لم تصل الى المعنوية. بينت النتائج ان للتداخل بين الساللة

ة التداخل لاذ امتازت معام للرماد،ومستوى تراكيز الكولشسين تأثيرا معنويا في النسبة المئوية

جميع المعامالت معنويا بحصولها على اعلى نسبة من على %0.1والتركيز B62بين الساللة

X20. في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة %14.44النسبة المئوية للرماد وصلت الى

. وهذا يتفق مع ما توصل اليه %8.87خفض النسبة المئوية للرماد الى الى %0.1والتركيز

Nasiri ( 2012واخرون) .عندما تم تقدير الرماد في االجسام الثمرية لفطر االزرار البيضاء

وقد يعزى تباين نسبة الرماد الى طبيعة التركيب الوراثي المختلف بين السالالت وما احدثه

(.11( والشكل )34) الكولشسين من تغايرات وراثية جديدة كما موضح في الجدول

النتائج والمناقشة 86

الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للمواد : تأثير 7.3.2.4

الجسام الثمريةلعصير ا الكلية الصلبة الذائبة

لساللة في قيمة المواد الصلبة الذائبة ل امعنوي اان هناك تأثيرالى (23)اشارت نتائج الجدول

TSS والتي تفوقت فيها الساللةX20 تراكيز اما 9%5.18بلغت قيمتها عن جميع السالالت اذ

%5.51معنوية لهذه الصفة والتي بلغت قيمتها زيادة % 0.3فقد حققت معاملة التركيز الكولشسين،

متفوقة بذلك عن باقي معامالت مستويات التراكيز من الكولشسين9

لصلبة اتأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في النسبة المئوية للمواد 32جدول

لفطر االزرار البيضاء الذائبة لعصير االجسام الثمرية

الساللة

تراكيز الكولشسين

التراكيزمتوسط (%) TSS الكلية المواد الصلبة الذائبة

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 5.100 4.567 4.233 4.633

1C (%0.1) 4.500 5.200 3.967 4.556

2C (%0.3) 5.333 6.233 4.967 5.511

3C (%0.5) 5.100 4.700 5.400 5.067

4.642 5.175 5.008 الساللة متوسط

L.S.D

تركيز الساللة الكولشسين

الساللة و تركيز التداخل بين الكولشسين

0.17 0.19 0.33

بة معنويا في قيمة المواد الصل التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسينقد اثر

معنويا % 0.3 وتركيز الكولشسين X20الساللة التداخل بينمعاملة اذ تميزت ، TSSالذائبة

معاملة . بينما أعطت TSS 6.23%عن جميع المعامالت اذ بلغت قيمة المواد الصلبة الذائبة

والتي بلغت TSSبة الذائبة ادنى قيمة للمواد الصل %0.1والتركيز B62التداخل بين الساللة

. وهذه النسب من المواد الصلبة الذائبة من مستخلص االجسام الثمرية تتفق مع كل من 3.97%

–4.7التي وصلت الى (2113) واخرون Mamiو( 2111واخرون ) Pardoماتوصل اليه

االجسام لعصيرة الذائبالصلبة المواد الزيادة في نسبة سببوقد يعود بالتتابع. % 6-5و 6.1

الى زيادة محتواها من الكربوهيدرات كما تم اإلشارة اليه في الجدول X20لساللة الثمرية التابعة ا

لتأكيد هذا ، ويةالكربوهيدرات المركبات الكلية الذائبةالصلبة ( اذ يعد الجزء الرئيس من المواد 21)

(.3نها عالقة إيجابية الملحق)التفسير نالحظ من خالل عالقة االرتباط بين هاتين الصفتين ا

النتائج والمناقشة 87

: الخصائص الطبية4.2.4

لقابلية ل النسبة المئوية الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في ر: تأثي1.4.2.4

المضادة لالكسدة لمستخلص االجسام الثمرية

الت لصفة قابلية مضادة االكسدة، وجود فروق معنوية بين السال (27)تبين نتائج الجدول

58.07وقد بلغت النسبة المئوية لكل منهما X20الساللة معنويا على Brownاذ تفوقت الساللة

جلت معاملة س معنويا اذ قابلية مضادة االكسدةتراكيز الكولشسين في بالتتابع. واثرت %55792و

معاملة القياس ومع ذلك لم تتفوق اال على %58.10اعلى نسبة مئوية وصلت الى %0.5التركيز

0.0%.

الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في القابلية المضادة لالكسدة تأثير 32جدول

لفطر االزرار البيضاء لمستخلص االجسام الثمرية

الساللة

تراكيز

الكولشسين

Antioxidant )%( قابلية مضادة االكسدة

Activity

متوسط التراكيز

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 58.22 54.94 53.42 55.52

1C (%0.1) 58.38 53.63 55.83 55.95

2C (%0.3) 57.69 56.84 57.79 57.44

3C (%0.5) 57.99 58.28 58.02 58.10

56.27 55.92 58.07 الساللة متوسط

L.S.D

كيز اتر الساللة

الكولشسين

الساللة و تركيز التداخل بين

الكولشسين

1.95 2.25 3.90

اما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين فقد أدى الى احداث فروق معنوية بين

%791والتركيز Brownاذ امتازت معاملة التداخل بين الساللة المعامالت لقابلية مضادة االكسدة،

9 في حين أدت معاملة التداخل بين الساللة %58.38بتسجيلها اعلى نسبة مئوية لهذه الصفة بلغت

B62 وقد 9%53.42خفض النسبة المئوية للقابلية المضادة لالكسدة الى الى %0.0والتركيز

عن باقي السالالت بهذه الصفة الى طبيعة ماتحملة من لون غامق Brownيعزى تفوق الساللة

ب هذه األلوان يعود الى مركبات ور الحرة على اعتبار ان تركيلو دور في كبح الجذ )بني(

من ان (2012واخرون ) Reis وهذا يتفق مع 9(3000، واخرون Procházková) الفالفونويد

الساللة السمراء لها قابلية مضادة لالكسدة اعلى من الساللة البيضاء9

النتائج والمناقشة 88

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز المركبات الفينولية 2.4.2.4

لفطر االزرار البيضاء لمستخلص االجسام الثمرية

الت في تركيز المركبات وجود فروق معنوية بين السالالى (28)تشير نتائج الجدول

باقي الساللتين بتسجيلها اعلى تركيز للمركبات الفينولية على B62اذ تفوقت الساللة الفينولية،

. اما تأثير مستوى تراكيز الكولسشين فقد احدث اثر معنويا بين 1-ملغم.غم 9.91وصل الى

من المركبات الفينولية افضل تركيز %0.1و %0.3اذ أعطت كل من معاملة التركيز المعامالت،

جميع المعامالت. في حين ادى مستوى بالتتابع متفوقتا بذلك على 1-ملغم.غم 8.63و 8.94بلغ

. 1-ملغم.غم 6.82ت الفينولية الى الى خفض المركبا % 0.0التركيز

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز المركبات الفينولية 82جدول

لمستخلص االجسام الثمرية( 1-ملغم.غم)

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر Phenols 1-ملغم.غم الفينوالت

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 5.676 6.612 8.158 6.815

1C (%0.1) 9.461 6.459 9.974 8.631

2C (%0.3) 9.310 7.594 9.909 8.938

3C (%0.5) 4.005 7.414 11.596 7.671

9.909 7.020 7.113 متوسط الساللة

L.S.D

كيز اتر الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

0.480 0.554 0.960

مركبات في كمية ال ة ومستوى تراكيز الكولشسين تأثير معنويكان للتداخل بين السالل

الى احداث اعلى فرق % 0.5والتركيز B62فقد أدت معاملة التداخل بين الساللة الفينولية،

. في حين سجلت معاملة التداخل بين 1-ملغم.غم 11.60جميع المعامالت والذي بلغ على معنوي

.1-ملغم.غم 5.68ادنى تركيز وصل الى % 0.0والتركيز Brownالساللة

النتائج والمناقشة 89

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب اللكتين 3.4.2.4

لمستخلص االجسام الثمرية

في تركيز امعنوي الساللة تأثيران ل (.2)ليل االحصائي للجدول يتضح من خالل التح

ةمتفوق1-ملغم9غم 9.38بتسجيلها اعلى تركيز معنوي وصل الى B62اذ امتازت الساللة اللكتين،

جميع السالالت9 وكان لتأثير مستوى تراكيز الكولسشين دور في احداث فروق معنوية لىبذلك ع

كتين لالجسام لزيادة تركيز مركب الب %0.3فقد تميز تأثير الكولسشين للمستوى المعامالت،بين

( ادنى تركيز لمركب %0.0أعطت معاملة القياس ) 9 بينما1-ملغم9غم 8.27الثمرية معنويا الى

19-ملغم9غم 5.01اللكتين وصل الى

1-ملغم.غم)تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب اللكتين 39جدول

لفطر االزرار البيضاء لمستخلص االجسام الثمرية(

الساللة

تراكيز

الكولشسين

متوسط التركيز 1-ملغم.غم (Lectin) اللكتينمركب

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 2.31 4.91 7.82 5.01

1C (%0.1) 10.27 2.85 8.61 7.24

2C (%0.3) 9.05 6.38 9.38 8.27

3C (%0.5) 0.96 5.77 11.70 6.14

9.38 4.98 5.65 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة

الكولشسين

1.35 1.56 2.71

للكتين،ااثر التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين معنويا في تركيز مركب

اذ بلغ محتوى %0.5والتركيز B62فقد كان افضل تركيز سجل عند معاملة التداخل بين الساللة

. في حين انخفض تركيز هذا المركب الى 1-ملغم.غم 11.70االجسام الثمرية من هذا المركب

النتائج والمناقشة 90

( x X20 0.1%)( و xBrown 0.0%( و)xBrown 0.5%ادناه عند كل من معاملة التداخل )

بالتتابع. 1-ملغم.غم 2.85و 2.31و 0.96الى

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب االستاتين 4.4.2.4

لثمريةلمستخلص االجسام ا

في تباين محتوى االجسام الثمرية من امعنوي الساللة اثران ل (30)تبين نتائج الجدول

6.46افضل تركيز لمركب االستاتين وصل الى B62اذ سجلت الساللة االستاتين،مركب

ين فكان لها دور معنوي في زيادة تركيز مركب االستاتين سشاما مستوى تراكيز الكول. 1-ملغم.غم

الى خفض (%0.0. في حين أدت معاملة القياس )(%0.3) عند المعاملة 1-ملغم.غم 5.75الى

.1-ملغم.غم 3.37محتوى االجسام الثمرية من مركب االستاتين الى

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب االستاتين 20جدول

لمستخلص االجسام الثمرية( 1-)ملغم.غم

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر Statin 1-ملغم.غم االستاتين

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 1.81 3.38 4.94 3.37

1C (%0.1) 6.96 2.50 6.04 5.17

2C (%0.3) 6.31 4.48 6.47 5.75

3C (%0.5) 1.18 3.89 8.42 4.50

6.47 3.56 4.07 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

التداخل بين الساللة و تركيز

الكولشسين

0.639 0.738 1.278

ان للتداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين تأثيرا نفسه يظهر من نتائج الجدول

اذ كانت افضل معاملة تفوقت االستاتين،معنويا في زيادة محتوى االجسام الثمرية من مركب

والتي وصل فيها %0.5والتركيز B62جميع المعامالت هي معاملة التداخل بين الساللة على

. في حين انخفض تركيز هذا المركب 1-ملغم.غم 8.42تركيز هذا المركب في االجسام الثمرية الى

النتائج والمناقشة 91

ئج تقع . وهذه النتا%0.5والتركيز Brownعند معاملة التداخل بين الساللة 1-ملغم.غم 1.18الى

(.2111) الهادي،عبد التي تم تقديرها من قبل مستويات تركيز االستاتين ضمن

وكان مركب بيتا كلتركيز : تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في 5.4.2.4

لمستخلص االجسام الثمرية

محتوى لساللة فيلوجود تأثير معنوي (31)أظهرت نتائج التحليل االحصائي للجدول

بحصولها على اعلى معنويا B62فقد تميزت الساللة كلوكان،مركب بيتا االجسام الثمرية من

فلم تكن . اما مستوى تراكيز الكولشسين1-ملغم.غم 19.29تركيز من هذا المركب وصل الى

.هناك فروق معنوية بين المعامالت بالرغم من تباين تركيز هذا المركب

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب بيتا كلوكان 20جدول

لفطر االزرار البيضاء لمستخلص االجسام الثمرية( 1-ملغم.غم)

الساللة

تراكيز

الكولشسين

متوسط التركيز Glucan-β 1-ملغم9غم بيتا كلوكان

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 12.03 14.08 17.61 14.57

1C (%0.1) 19.89 13.09 18.82 17.26

2C (%0.3) 17.16 15.36 19.29 17.27

3C (%0.5) 9.45 13.60 21.45 14.83

19.29 14.03 14.63 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة

الكولشسين

2.635 n.s 5.269

ركب م فروق معنوية في تركيز الى ومستوى تراكيز الكولشسين أدى التداخل بين الساللة

معنويا %0.5والتركيز B62اذ تفوقت معاملة التداخل بين الساللة بيتا كلوكان بين المعامالت،

. في حين انخفض محتوى االجسام الثمرية 1-ملغم.غم 21.45وذلك بحصولها على اعلى تركيز بلغ

.1-ملغم.غم 9.45لهذا المركب الى

النتائج والمناقشة 92

: تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب الكايتين 6.4.2.4

لمستخلص االجسام الثمرية

في محتوى امعنوي الساللة تأثيران ل (32)ليل االحصائي للجدول يتضح من خالل التح

تركيز ا اعلى مبتسجيله B62و Brown اذ امتازت الساللة مركب الكايتين،االجسام الثمرية من

عنويا م بالتتابع. وقد اثرت مستوى تراكيز الكولشسين 1-ملغم.غم .799و 6.58معنوي وصل الى

افضل تركيز معنوي (%0.3) اذ أعطت معاملة المركب،في محتوى االجسام الثمرية من هذا

اما التداخل بين الساللة ومستوى تراكيز الكولشسين فقد .1-ملغم.غم 8.75من هذا المركب بلغ

B62الساللة التداخل بيناذ أعطت كل من معاملة المركب،اثر معنويا في زيادة تركيز هذا

اعلى تركيز من هذا %0.1والتركيز Brownالتداخل بين الساللة ومعاملة %0.5والتركيز

.1-ملغم.غم 10.94و 12.50المركب بلغ

تأثير الساللة والكولشسين والتداخل بينهما في تركيز مركب الكايتين 23جدول

لفطر االزرار البيضاء لمستخلص االجسام الثمرية( 1-ملغم.غم)

الساللة

تراكيز

الكولشسين

كيزامتوسط التر Chitin 1-ملغم9غم كايتينمركب التركيز

1S

Brown

2S

X20

3S

B62

0C (%0.0) 3.00 4.95 8.01 5.32

1C (%0.1) 10.94 3.38 8.88 7.73

2C (%0.3) 10.72 5.74 9.79 8.75

3C (%0.5) 1.64 5.52 12.50 6.55

9.79 4.89 6.58 متوسط الساللة

L.S.D

تركيز الساللة

الكولشسين

وتركيز التداخل بين الساللة

الكولشسين

0.639 0.738 1.278

الىفي معظم تقدير كمية المركبات ذات الفاعلية الطبية B62يمكن تفسير تفوق الساللة

عن باقي السالالتين9 اما تأثير الكلوشسين فقد الذي تحمله هذه الساللة التركيب الوراثة اختالف

( 34)ول في الجديعود السبب الى التغايرات الوراثية الجديدة التي احدثتها تلك المادة وكما موضح

(.11والشكل )

النتائج والمناقشة 93

لسالالت فطر االزرار البيضاء المعاملة RAPD مؤشرات نتائج تحليل: 6.2.4

بتراكيز مختلفة من الكولشسين

. وقد يعزىمن اصل عشرة أظهرت حزم فقط ستة بوادئ ان (33)يتضح من الجدول

لى لقواعد النتروجية عت لتسلسال ها منالى عدم وجود ما يقابلعدم ارتباط باقي البوادئ االربعة

عدد من الحزم اكبر اعطى البادئ رقم خمسة . ووجد انالمعزول من هذا الفطر DNAشريط

كفاءة و بالتتابع %83.33حزمة و 5التعددية الشكلية وونسبتها الى وعليه ارتفعت 12وصل الى

البادئ رقم أربعة حزمة في حين اعطى بالتتابع 30.56و %27.27والقدرة التميزية الى البادئ

حزمة والذي اثر في التعددية الشكلية ونسبتها والنسبة المئوية 1اقل عدد من الحزم وصل الى

بالتتابع. %5.56و %9.09و %50حزمة و 2لكفاءة البادئ وقدرته التميزية اذ بلغت

لحزم الكلية ووتعدداتها الشكلية من حيث عدد ا RAPD مؤشرات تحليل نتائج 22جدول

والقدرة التميزية عددا ونسبة وكفاءة البادئ

رقم

البادئ

عدد

الحزم

الكلي

No. of

band

عدد الحزم ذات

التعددية الشكلية

no. of

polymorphism

التعددية الشكلية %

polymorphism%

% كفاءة البادئ

Primer

efficiency%

القدرة التميزية لكل

بادئ %

discriminatory

power%

1 6 5 83.33 13.63 13.89

4 4 2 50.00 9.09 5.56

5 12 11 91.66 27.27 30.56

7 8 7 87.50 18.18 19.44

8 9 9 100 20.45 25.00

10 5 2 40.00 11.36 5.56

.100 100 452.49 13 44 المجموع

16.67 16.67 75.42 6 7.33 المتوسط

تأثير الكولشسين في احداث التغايرات الوراثية لفطر االزرار البيضاء: 5.2.4

راثيا بين كل من السالالت الثالثان الكولشسين قد احدث تغايرا و (33)يتضح من الجدول

(Brown، X20، B62( ومستويات التراكيز األربعة التي عوملت بها )0.3 ،0.1 ،0.0،

والتي رمز Brown(. فكما موضح في هذا الجدول ان اقصى تباين وراثي بين الساللة 0.5%

في %55.6والذي وصلت نسبة التغاير الى ( CB3) % 0.5( وتاثير التركيز كان عند Bلها )

. اما الساللة %29.2( والذي بلغت قيمته CB2) %0.3تباعد وراثي كان عند التركيز حين اقل

X20 0.1فقد اثر الكولشسين في احداث تغايرات وراثية في جميع التراكيز وكان التركيز%

النتائج والمناقشة 91

واقل نسبة تغاير سجلت كانت % 33.3اكثر التراكيز فعالية في زيادة نسبة التغاير والتي كانت

عند معاملتها بالكولشسين ابتعدت عنها B62. ووجد ان الساللة %0.5عند التركيز 26.9%

عند %26.3و %0.1عند التركيز % 30.8 بحسب النسب االتيةووراثيا العزالت المعاملة

. %0.5 عند التركيز 26.1و %0.3التركيز

ةرعشبمجموعها االثنتي ان السالالت وعزالتها المعاملة بالكولشسين 11يتضح من الشكل

( تفرعت Bو Aفشكلت مجموعتين رئيستين ) ،وبعدهحسب القرب الوراثي بتم ترتيبها عنقوديا

Bللمجموعة نفرع منها على خمس عزالت بينما كااحتوى كل A2و A1الى Aالمجموعة

ويمكن تفسير القيم المتباينة من نسب البعد الوراثي والتي استدل عنها بمؤشرات .ساللتين فقط

RAPD ضاعف احتمالية حدوث التبين الساللة االصلية وطافراتها التي عوملت بالكولشسين الى

في RAPDمن ان استعمال تقانة (8002جنان ). وهذا يتفق مع ما توصل اليه الكروموسومي

من سينبالكولش لتهافي نباتات الكاسيا بعد معام حدوث تضاعف كروموسوميعن المبكرالكشف

موسومات رواء الفحص المختبري لعدد الكاجرنجاحها بدال من قد اثبتت خالل قياس البعد الوراثي

العالية. تهادقفضال عن الوقت نختصر ة وبذلك للجميع النباتات المعام

ومدى تاثير الكولشسين في احداث فطر االزرار البيضاءقيم التباعد الوراثي بين سالالت 21الجدول

التغايرات الوراثية

النتائج والمناقشة 95

A

B

A1

A

A2

لفطر االزرار البيضاء وعزالتها B62و X20و Brownالتحليل العنقودي للسالالت 00شكل

RAPDالطافرة اعتمادا على مؤشرات الـ

االستنتاجات والتوصيات 96

االستنتاجات:: 5

إضافة الفطر تاحدثAspergillus oryzae كمعزز للبروتين الحيوي للمغذيات

ي زيادة في كفاءة التدعيم مما المضافة وخصوصا طحين نوى التمر الى الوسط الزرع

الكلي.س على زيادة الحاصل كعان

ل الحاص ان إضافة المغذيات المعززة بالبروتين الحيوي عملت في الغالب على زيادة

.الجنية االولى

أعطت السالالتBrown وX20 وB62 وكانت الساللة ،حاصال متبايناB62 اكثر

.والحاصل الكلياألولى ت كفاءة في زيادة حاصل الجنية السالال

وزيادة لم تصل الى المعنوية في كمية دور في زيادة الجنية االولى كان للكولشسين

الحاصل الكلي.

.كان للتداخل بين كل من الساللة والكولشسين اثر واضح في زيادة الحاصل

اف ليواال المادة الجافة والكربوهيدرات فيلسالالت ل بينلصفات النوعية لتباين

زيادة نسبة ب B62الساللة تميز معلرماد والمواد الصلبة الذائبة والبروتين والدهون وا

.يافلالبروتين واال

تفوقت الساللةBrown الساللة تفي قابلية مضادة االكسدة وتفوقB62 باقي على

.تاكلوكان والكايتينيالسالالت في المركبات الطبية الفعالة من الفينوالت والب

تغايرا وراثيا لسالالت وتم اثبات ذلك من خالل تحليل مؤشرات احدث الكولشسين

DNA.

اثبتت تقانةRAPD .كفاءتها في الكشف المبكر عن التغايرات الوراثية

تم تحديد بادئات مميزة يمكن استخدامها كمؤشرات سريعة لمعرفة مدى وجود تغايرات

وراثية بين سالالت هذا الفطر.

التوصيات:: 6

ذات الكلفة االقتصادية الوسط الزرعي دراسات إضافية حول إضافة المغذياتجراء ا

الواطئة والكفوءه في زيادة االنتاج

دراسة استعمال مطفرات أخرى لها دور في احداث التغاير الوراثي لهذا الفطر

من خالل اجراء اجراء دراسات حول تحسين الصفات النوعية والتسويقية لهذا الفطر

التهجين

مثل مركبات فينولية أخرى وتربينات تقدير مركبات أخرى في هذا الفطر لها فاعلية طبية

حساب عدد الكرموسومات للسالالت المتغايرة وراثيا للتأكد من حصول التضاعف

المصادر 97

: المصادر7

: المصادر العربية7-1

(.دراسااااااية ويسيج ة عااااااطريج غطى الاالب ال ا ي ا وي 5991مثنى نوري محي.) الحبيب،

Agaricus bisporus (Lange) جيمعج و داد -كطيج الزراغج -عتيبرسيلج ميج-

العباق.

(. تأثيب مصدر الكيروون ةنوع تبوج الت اليج ي اإلنتيج 2152شيميء محمد جبيب ) الزويدي،

. رسيلج ميجعتيب. Agaricus bisporusةالقيوطيج الخزنيج لاالب ا زرار البيضيء

كطيج الزراغج. جيمعج و داد.

-(. تالبيقية ي تصميم ةتحطيل التريرب5991مدحت ةكبيمج محمد ةهيب.) ،العيهوكي

-دار الحكمج لطالبيغج ةالنشب -جيمعج و داد -ةزارة التعطيم العيلي ةالبحث العطمي

العباق.

(. تقويم كايءة وع المواد ي إنتيجيج الاالب الزراغي 2112مصالاى رشيد مريد ) القيعي،

كطيج الزراغج.ةقيوطيته الخزنيج. رسيلج ميجعتيب. Agaricus bisporusاألوي

جيمعج و داد.

(. ةراثج ةتبويج النبيتية البعتنيج. ةزارة التعطيم العيلي 5911 يصل غبد الهيدي.) المختير،

صاحج. 232و داد ويت الحكمج. العطمي،ةالبحث

(. تحعين الصاية 2112غبد هللا غبد الكبيم ةغيدل محعن ن يب ةغبيب رؤةف محمود.) حعن،

Agaricus bisporus Langeالزراغيج ةانتيجيج الاالب الببغمي ا وي

(Imbach) ويستخدام وع المصيدر العضويج. مرطج الزراغج العباقيج )غدد

.552-511(: 7) 3 .خيص(

الكشف المبكر عن التضاعف الكروموسومي الناتج عن تاثير (. 2152)قيسم. حعين، جنين

مقبول لطنشب: 2( 1) الزراغيج. لطعطوم دييلى مرطج .الكولشسين في نبات الكاسي

مشبةع تنميج المرتمع البياي ي جبل البعتيني،(. الاالب 2002جميل الدين ) رضوان،

الحص. ةزارة الزراغج ةاإلصالح الزراغي. مالبعج البباق. سوريي.

المصادر 98

، و داد ةالتوزيع، (. ويسج الاالبيية. ال اكبة لطنشب a2152 ييض محمد. ) شبيف،

صاحج. 211العباق.

،دو دا، لاالبيية. ال اكبة لطنشب ةالتوزيعاةراثج (. مدخل الى b2152 ييض محمد. ) ،شبيف

صاحج. 277العباق.

غمين،(. غطم الوراثج. دار الميعبة لطنشب ةالتوزيع ةالالبع. 2151مكبم ضييء. ) ،شكيرة

صاحج. 152األردن.

المدغم ةنوع التعقيم طبيقج تأثيب(. 2153).غبد ا له مخطف ة غيعى غواد حعن ،غبد الهيدي

دييلى التمب. مرطج نخطج مخطاية غطى المحيري لطاالب الخزنيج ةالقيوطيج ا نتيج ي

. ( 1 ) : 170 - 181 الزراغيج. لطعطوم

القيوطيج تحعين ي العوس غبق معحوق (. استخدام2151غبد ا له مخطف.) ،غبد الهيدي

. مرطج العطوم الزراغيج المحيري لطاالب ةالعالجيج ةالخزنيج اإلنتيجيج

.11-75(: 2)15.العباقيج

، الرزء الثيني الميكبةويج،. الهندسج الوراثيج ةالوراثج 2117 حعين.، غميد الدين ةصاي

مصب لطنشب.الدار العبويج ا ةلى.الالبعج

المصادر 99

: المصادر األجنبية7-2

A.O.A.C.(1980). Official Methods of Analysis of the Association of

Official Analytical Chemists,Washington,U.S.A.

Abah, S. E., and G. Abah. 2010. Antimicrobial and antioxidant

potentials of Agaricus bisporus. Advances in Biological

Research, 4(5): 277-282.

Adaniya, S., and D. Shirai. 2001. In vitro induction of tetraploid

ginger (Zingiber officinale Roscoe) and its pollen fertility and

germinability. Scientia horticulturae, 88(4): 277-287.

Adotey, G., A. Quarcoo, J. C. Holliday, S.Fofie, and B. Saaka. 2011.

Effect of Immunomodulating and Antiviral Agent of

Medicinal Mushrooms (Immune Assist 24/7 TM) on CD4+ T-

Lymphocyte Counts of HIV-Infected Patients.International

journal of medicinal mushrooms, 13(2):109-113.

Ahlawat, O. P., and B. Vijay. 2010. Potential of thermophilic bacteria

as microbial inoculant for commercial scale white button

mushroom (Agaricus bisporus) compost production. J Sci &

Ind Res, 69(12): 948-955.

Aime, M.C., P.B. Matheny and D.A. Henk. 2006. An overview of the

higher level classification of Pucciniomycotina based on

combined analyses of nuclear large and small subunit rDNA

sequences. Mycologia 98(6): 896-905.

Albertin, W., and P.Marullo. 2012. Polyploidy in fungi: evolution

after whole-genome duplication. Proceedings of the Royal

Society B: Biological Sciences, 279(1738): 2497-2509.

AL-Assie, A.H., A. F. Al-azawy, W.S. Al-Dori. 2012. Molecular

characterization of Pseudomonas aeruginosa Isolates Isolated

from Clinical Patients by Using RAPD-PCR Technique. J. of

university of anbar for pure science: Vol.6:NO.3: 2012

Andrade, N. D., D. C. Zied, M. A. Minhoni and J. Kopytowski

Filho.2008. Yield of four Agaricus bisporus strains in three

compost formulations and chemical composition analyses of

المصادر 100

the mushrooms. Brazilian Journal of Microbiology. 39(3):

593-598.

Andrade, M. C., J. P. Jesus, F. R. Vieira, S. R. Viana, M. H. Spoto,

and M. T. Minhoni. 2014. Effect of gamma irradiation on the

nutritional quality of Agaricus bisporus strains cultivated in

different composts. Anais da Academia Brasileira de

Ciências. 86(2): 897-906.

Apcaem, A. 2011.UNAPCAEM Promoting Innovative Agro-

technologies at the Kubuqi–Training Manual on Mushroom

Cultivation Technology. Proc. 7th Technical Committee of

UNAPCAEM. 27-28.

Aron, P.M. and J.A. Kennedy.2008. Flavan-3-ols: Nature, occurrence

and biological activity. Mol. Nutr. Food Res. 52: 79-104.

Ashok, B. T., and R.Ali.1999. Antigen binding characteristics of

experimentally-induced antibodies against hydroxyl radical

modified native DNA. Autoimmunity. 29(1): 11-19

Bando, H., H. Hisada, H. Ishida, Y. Hata, Y. Katakura, and A. Kondo.

2011. Isolation of a novel promoter for efficient protein

expression by Aspergillus oryzae in solid-state

culture. Applied microbiology and biotechnology, 92(3): 561-

569.

Barros, L., M. J Ferreira, B. Queiros, I. R. Ferreira and P. Baptista.

2007. Total phenols, ascorbic acid, β-carotene and lycopene

in Portuguese wild edible mushrooms and their antioxidant

activities. Food Chemistry 103: 413-419.

Begerow, D., M. Stoll, and R. Bauer. 2006. A phylogenetic

hypothesis of Ustilaginomycotina based on multiple gene

analyses and morphological data. Mycologia 98(6): 906-916.

Beyer,D.M and H. Muthersbaugh.1996.Nutrient supplement that

influence later break yield of Agaricus bisporus.Can.J.Plant

Sci.76:835-840.

Beyer.D.M.2003.Basic procedure for Agaricus mushroom growth.

The Pennsylvania State University. USA.

المصادر 101

Binder, M., D.S. Hibbett, K.H. Larsson, E. Larsson, E. Langer,

G.Langer. 2005. The phylogenetic distribution of resupinate

forms across the major clades of mushroom-forming

fungi(Homobasidiomycetes). Syst. Biodiv.3(2):113-157.

Biswas, S., M. Datta, and S. V. Ngachan. 2011. Mushrooms: a

Manual for Cultivation. PHI Learning Pvt. Ltd.pp.52.

Biswas, S., M. Datta, and S. V. Ngachan. V. 2012. Mushrooms: a

Manual for Cultivation. PHI Learning Pvt. Ltd..pp.14-17.

Bonnen, A. M., L. H. Anton and A. B.Orth .1994. Lignin-Degrading Enzymes of the Commercial Button Mushroom, Agaricus bisporus. Applied and Environmental Microbiology, 60(3):960-965.

Brown , T.A. 1997. Gene Cloning an Introduction . 3rd edition.

UMIST ,Manchester,UK. P: 334.

Burton, K. S. and R. Noble. 1993. The influence of flush number,

bruising and storage temperature on mushroom quality.

Postharvest Biology and Technology, 3:39-47.

Byeon, S.E., J. Lee, E. Lee, S.Y. Lee, E.K. Hong, Y.E. Kim and J.Y.

Cho.2009. Functional activation of macrophages, monocytes

and splenic lymphocytes by polysaccharide fraction from

Tricholoma matsutake. Archives of Pharmacal Research

32(11): 1565-1572.

Callac, P., C. Billette, M. Imbernon and R. W. Kerrigan.1993.

Morphological, genetic, and interfertility analyses reveal a

novel, tetrasporic variety of Agaricus bisporus from the

Sonoran Desert of California. Mycologia, 85:835-851.

Callac P, Haut , M. Imbernon and J .Guinberteau. 2003. A novel

homothallic variety of Agaricus bisporus comprises rare

tetrasporic isolates from Europe.mycologia.95(2): 222-231.

Calvo-Bado, L., R. Noble, M. Challen, A. Dobrovin-Pennington and

T.Elliott. 2000. Sexuality and Genetic Identity in the Agaricus

Section Arvenses.Applied and Environmental

Microbiology, 66(2): 728-734.

المصادر 102

Carbonero, E.R., A.C. Ruthes, C.S. Freitas, P. Utrilla, J. Galvez, E.V.

da Silva, G.L. Sassaki, P.A. Gorin and M. Iacomini. 2012.

Chemical and biological properties of a highly branched beta-

glucan from edible mushroom Pleurotus sajor-caju.

Carbohydrate Polymers. 90(2): 814-819.

Cartea, M.E., M. Francisco, P. Soengas and P. Velasco. 2011.

Phenolic Compounds in BrassicaVegetables

(Review).Molecules.16:251-280.

Castle A.J., P.A. Horgen and J.B.Anderson. 1987. Restriction

fragment length polymorphisms in the mushrooms Agaricus

brunnescens and Agaricus bitorquis. App.Environ. Microbiol.

53: 816-822.

Chang, S. T .2008. Training manual on mushroom cultivation

technology. Economic and social commission for Asia and the

Pacific Asian and Pacific Centre for agricultural engineering

and machinery, United Nations. Beijing.

Chang, S.T and P.G. Miles. 1989. Edible mushrooms and their

cultivation. Florida: CRC Press.

Chang, S.-T. and P. Miles. G.2004. Mushrooms Cultivation,

Nutritional Value, Medicinal Effect and Enviromental Impact,

2nd Ed. CRC Press LLC. USA. pp. 451.

Chen, Y., B. Chefetz, R. Rosario, J. D. H. Van Heemst, C. P. Romaine

and P. G. Hatcher. 2000. Chemical nature and composition of

compost during mushroom growth. Compost Science &

Utilization. 8(4): 347-359.

Chen, S., S. R. Oh, S. Phung, G. Hur, J. J. Ye, S. L. Kwok and D.

Williams. 2006. Anti-aromatase activity of phytochemicals in

white button mushrooms (Agaricus bisporus). Cancer

research. 66(24): 12026-12034.

Chien,A.,D.B.Edgar,J.M.Trela.1976. Deoxyribonucleic acid

polymerase from the extreme thermophile Thermus aquaticus.

J. Bacteriol. 174 (3):1550–1557.

Chu, J. N., C. C. Young, C. C. Tan, S. P. Wu and L. S. Young.2012.

Improvement of productivity and polysaccharide-protein

المصادر 103

complex in Agaricus blazei. Pesquisa Agropecuária

Brasileira. 47(1): 96-102.

Colak, M., E. Baysal, H. Simsek, H. Toker and F. Yilmaz.2007.

Cultivation of Agaricus bisporus on wheat straw and waste tea

leaves based composts and locally available casing materials

Part III: Dry matter, protein, and carbohydrate contents of

Agaricus bisporus. African Journal of Biotechnology. 6(24):

2855-2858.

Cos, P., L. Ying, M. Calomme, J.P. Hu, K. Cimanga, B.V. Poel, L.

Pieters, A.J. Vlietinck and D.V.Berghe. 1988. Structure-

activity relationship and classification of flavonoids as

inhibitors of xanthine oxidase and superoxide scavengers. J.

Nat. Prod. 61: 71-76.

Cushnie,T.P.T.and A.J. Lamb.2005.Antimicrobial activity of

flavonoids. Int. J. Antimicrob. Agents. 26: 343-356.

Dacheva, V., D. Galabova and A. Atev.2009. Optimization of

Nutrient Medium Composition for Alpha-Amylase

Biosynthesis by Aspergillus oryzae PP. Biotechnology &

Biotechnological Equipment. 23(sup1): 771-774.

D'Archivio, M., C., Filesi, R. Di Benedetto, R. Gargiulo, C.

Giovannini and R. Masella. 2007. Polyphenols, dietary

sources and bioavailability. Ann. Ist. Super. Sanita . 43:

348-361.

De Silva, D. D., S. Rapior, K. D. Hyde and A. H. Bahkali. 2012.

Medicinal mushrooms in prevention and control of diabetes

mellitus. Fungal Diversity. 56(1): 1-29.

Derikx, P. J., H. J. O. Den Camp, C. van der Drift, L. J. Van Griensven

and G. D.Vogels. 1990. Biomass and biological activity

during the production of compost used as a substrate in

mushroom cultivation. Applied and environmental

microbiology, 56(10). 3029-3034.

Dubost, N. J., R. B. Beelman, D. Peterson and D. J.Royse. 2006.

Identification and quantification of ergothioneine in cultivated

mushrooms by liquid chromatography-mass

المصادر 104

spectroscopy. International Journal of Medicinal

Mushrooms 8(3).

Durrant, A., D. Wood and R. Cain.1991. Lignocellulose

biodegradation by Agaricus bisporus during solid substrate

fermentation. Journal of General Microbiology 137(4): 751-

755.

Eckert, K.A. and T.A. Kankel. 1991. DNA polymerase fidelit and

the polymerase chain reaction. PCR Methods Appl.1:17–24.

Fell, J.W., T. Boekhout, A. Fonseca, G. Scorzetti, and A. Statzell-

Tallman. 2000. Biodiversity and systematics of

basidiomycetous yeasts as determined by large-subunit rDNA

D1/D2 domain sequence analysis. International Journal of

Systematic and Evolutionary Microbiology. 50: 1351-1371.

Fermor, T.R. and D.A. Wood. 1981. Degradation of bacteria by

Agaricus bisporus and other fungi. J. Gen. Microbiol. 126:

377–387.

Fermor, T. R. and W. D. Grant.1985. Degradation of fungal and

actinomycete mycelia by Agaricus bisporus. Journal of

general microbiology. 131(7): 1729-1734.

Ferreira, O. and S.P. Pinho.2012. Solubility of flavonoids in pure

solvents. Ind. Eng. Chem. Res. 51:6586-6590.

Foulongne-Oriol, M., C. Spataro and J. M. Savoie. 2009. Novel

microsatellite markers suitable for genetic studies in the white

button mushroom Agaricus bisporus. Applied Microbiology

and Biotechnology. 84(6): 1125-1135.

Fritsche G.1983. Breeding Agaricus bisporus at the Mushroom

Experimental Station, Horst. Mushroom J. 122:49–53.

Fukushima, M., M. Nakano, Y. Morii, T. Ohashi, Y. Fujiwara and K.

Sonoyama. 2000. Hepatic LDL receptor mRNA in rats is

increased by dietary mushroom (Agaricus bisporus) fiber and

sugar beet fiber. J Nutr.130:2151-6.

Garcia-Salas.P., A. Morales-Soto, A. Segura-Carretero and A.

Fernandez-Gutiérrez,.2010. phenolic compound extraction

المصادر 105

systems for fruit and vegetable samples,Molecules.15:8813-

8826 .

Garg, P. 2004. Use of sunflower meal (De-oiled cake) during

composting to bring down the cost of mushroom production.

Jawaharlai, Nehru University,New Delhi,India.

India.WWW.Mush- world.com.

Geosel A, L. Sipos, E. Stefanovits-Banyai, Z. Kokai, J. Gyorfi .2011.

Antioxidant, polyphenol, and sensory analysis of Agaricus

bisporus and Agaricus subrufescens Cultivars. Acta

Alimentaria. 40:33–40

God, J.M., P. Tate, and L.L. Larcom.2007. Anticancer effects of four

varieties of muscadine grape. J. Med. Food. 10: 54–59

.

Griffin, D. H. 1994. “Fungal Physiology.” Second Edition ed. Wiley-

Liss, New York.pp.425.

Grube B.J., E.T. Eng, Y.C. Kao, A. Kwon and S. Chen. 2001. White

button mushroom phytochemicals inhibit aromatase activity

and breast cancer cellproliferation. J. Nutr. 131: 3288–3293.

Guan, X. J., L. Xu, Y. C. Shao, Z. R. Wang, F. S. Chen, and X. C.

Luo. 2008. Differentiation of commercial strains of Agaricus

species in China with inter-simple sequence repeat marker.

World Journal of Microbiology and Biotechnology. 24(8):

1617-1622.

Guha, A. K. and A. B. Banerjee. 1970. Effect of Different nitrogenous

compounds on the submerged production of Agaricus

campestris mycelium.J.of Food Sci. and Technology.7:23-25

Guler, P., A. Ergene and S. Tan. 2006. Production of high

temperature-resistant strains of Agaricus bitorquis. Afr. J.

Biotechnol. 5(8): 615-619.

Gupta,Y. and B.Vijay . 1992. Post composting supplementation in Agaricus bisporus under seasonal growing condition.Mush. Res.1:115-117.

Hadwan, H.A. and M.N. Al-Habi. 1994. Mushroom Cultivation and

Spawn production in Iraq. Mush.Res.3:83.(Abst.)

المصادر 106

Halpern, G. M. 2007: Healing mushrooms.Square One Publishers,

Inc. pp. 186.

Han, J. 1999. The influence of photosynthetic bacteria treatments on

the crop yield, dry matter content, and protein content of the

mushroom Agaricus bisporus. Scientia horticulturae, 82(1):

171-178.

Haslam, E.1998. Practical Polyphenols: From structure to molecular

recognition and physiological action; Cambridge University

Press: Cambridge, UK.pp.425.

Hegde, V. L., J.R. Das and Y. P. Venkatesh. 2002.Anaphylaxis

Caused by the Ingestion of Cultivated Mushroom (Agaricus

bisporus): Identification of Allergen as Mannitol. Allergology

International. 51:121-129.

Hibbett, D. S., M.Binder, J. F.Bischoff, M. Blackwell, P. F. Cannon,

O. E. Eriksson.... and V. Reeb. 2007. A higher-level

phylogenetic classification of the Fungi. Mycological

research. 111(5): 509-547

Hilton, J. W. 1989. Antioxidants: function, types and necessity of

inclusion in pet foods. The Canadian Veterinary Journal. 30:

682-684.

Hosseini, S. Z., G. Karimzadeh and E.Mohammadi-Goltapeh. 2009.

Effect of Colchicine on Nuclei Diameter, Yield and Some

Morphological Characteristics of Oyster Mushroom

(Pleurotuse ostreatus). journal of dansh.Iran, 19(2):254-261.

Innis, M. A. and D.H .Gelfand . 1999. Optimization of PCR,Basic

Methdology , Part One . In: PCR Protocols, Innis, M. A. ; D.H

.Gelfand . ; Sinky, J.J and T .J. White. (Eds) Academic

Press.,Inc. London.. 566.pp.

Innis, M. A., D. H. Gelfand, J. J. Sninsky and T. J. White. (Eds.).

2012. PCR protocols: a guide to methods and applications.

Academic press.482.pp.

Jagadish, L. K., V. V. Krishnan, R. Shenbhagaraman and V.

Kaviyarasan. 2009. Comparitive study on the antioxidant,

المصادر 107

anticancer and antimicrobial property of Agaricus bisporus

(JE Lange) Imbach before and after boiling. African Journal

of Biotechnology. 8(4): 654-661

Jalalzadeh, B., I. C. Saré, C. Férandon, P. Callac, M. Farsi, J. M.

Savoie and G.Barroso. 2014. The intraspecific variability of

mitochondrial genes of Agaricus bisporus reveals an

extensive group I intron mobility combined with low

nucleotide substitution rates. Current genetics.61(1): 87-102

Jeong SC, Y.T Jeong, B.K. Yang, R. Islam, S.R. Koyyalamudi, G.

Pang, K.Y. Cho and C.H. Song .2010.White button mushroom

(Agaricus bisporus) lowers blood glucose and cholesterol

levels in diabetic an hypercholesterolemic rats. Nutr Res

30:49–56

Jia Lee, H.W. Kang, S.W. Kim, C.Y. Lee, and Hsro .2011. Breeding

of new strains of mushroom by basidiospore chemical

mutagenesis. Mycobiol. 39: 272-277.

Joslyn, M.A. 1970. Methods in Food Analysis, Physical, Chemical

and Instrumental Methods of Analysis. 2nd ed. Academic

Press, New York and London. 845.pp.

Jung, K.; M. Wallig and K.Singletary. 2006. Purple grape juice

inhibits 7,12-dimethylbenz-[a]anthracene (DMBA)-

inducedratmammary tumorigenesis and in vivo DMBA-DNA

adduct formation. Cancer Lett. 233: 279–288.

Kähkönen, M.P., A.I.Hopia, H.J. Vuorela, J.P. Rauha, K. Pihlaja, T.S

Kujala and M. Heinonen. 1999. Antioxidant activity of plant

extracts containing phenolic compounds . J. Agric. Food

Chem.47(10):3954 – 3962

Kamzolkina, O. V., V. N. Volkova, M. V. Kozlova, E. V. Pancheva,

Y. T. Dyakov and P.Callac. 2006. Karyological evidence for

meiosis in the three different types of life cycles existing in

Agaricus bisporus. Mycologia. 98(5): 763-770.

Kanagasabapathy, G., U. R. Kuppusamy, S. N. A. Malek, M. A.

Abdulla, K. H. Chua and V. Sabaratnam. 2012. Glucan-rich

polysaccharides from Pleurotus sajor-caju (Fr.) Singer

prevents glucose intolerance, insulin resistance and

المصادر 108

inflammation in C57BL/6J mice fed a high-fat diet. BMC

Complementary and Alternative Medicine. 12(1): 261.

Kariaga,M,G.2005. Important factors in composting for production of

high yields in button mushrooms and Agaricus

bitorquis(Quel) Saccardo. African Crop Science Conference

Proceedings. 7: 1273-1277

Kendrick, B., 2000. The Fifth Kingdom, 3rd Ed. Focus

Publishing,USA.373. pp.

Kerrigan, R. W., M. Imbernon, P. Callac, C. Billette and J. M.

Olivier.1994. The heterothallic life cycle of Agaricus bisporus

var. burnettii and the inheritance of its tetrasporic

trait. Experimental Mycology. 18(3): 193-210.

Kerrigan.W. and I. K. Ross. 1989. Allozymes of wild Agaricus

bisporus population: new alleles, new genotypes. Mycologia

81(3): 433-443.

Khush R., L. Morhan, E.Becker, M. Wach, L.J. Griensven. 1991. Use

of the polymerase chain reaction (PCR) in Agaricus bisporus.

Proc. 1st Intern. Seminar on Mushroom.

Khush R., E. Becker, M. Wach. 1992. DNAamplification

polymorphisms of the cultivated mushroom Agaricus

bisporus. Appl. Environ. Microbiol. 58: 2971-2977.

Kirk, P.M., P.F. Cannon, J.C. David and J.A. Stalpers.

2001.Dictionary of the Fungi, 9th Ed. CAB

International,London.

Kirk, P.M., P.F. Cannon, D.W. Minter, and J. A. Stalpers (eds.). 2008.

Ainsworth and Bisby's Dictionary of the Fungi, 10th edition.

CAB International, Oxon, UK.370. pp

Kothe, E., .2001. Mating-type genes for basidiomycete strain

improvement in mushroom farming. Applied Microbiology

and Biotechnology 56(5/6): 602-612

Koyyalamudi, S.R, S.C. Jeong, K.Y. Cho, G .Pang. 2009a. Vitamin

B12 is the active corrinoid produced in cultivated white button

المصادر 109

mushrooms (Agaricus bisporus). J Agric Food

Chem.57:6327–6333

Koyyalamudi, S.R, S.C. Jeong, C.H. Song, K.Y. Cho and G. Pang

.2009b. Vitamin D2 formation and bioavailability from

Agaricus bisporus button mushrooms treated with ultraviolet

irradiation. J Agric Food Chem. 57:3351–3355

Kües, U. and Y. Liu .2000. Fruiting body production in

basidioymcetes.Appl Microbiol Biotechnol. 54:141–152

Larraya, L. M., G. Pérez, M. M. Peñas, J. J. Baars, T. S. Mikosch, A.

G. Pisabarro and L. Ramírez. 1999. Molecular karyotype of

the white rot fungus Pleurotus ostreatus. Applied and

Environmental Microbiology. 65(8): 3413-3417.

Lee Byung-Joo, L. B. J., L. M. A. Lee Mi-Ae, K. Y. G. Kim Yong-

Gyun, L. K. W. Lee Kwang-Won, L. B. E. Lee Byung-Eui and

S. H. Y Song Ho-Yeon. 2014. Varietal characteristics of new

white button mushroom ‘Seolwon’in Agaricus bisporus.

Journal of Mushroom.12(2): 82-87.

Lodder, S., K. Gull and D. Wood. 1993. An electrophoretic karyotype

of the cultivated mushroom—Agaricus bisporus. Current

Genetics. 24(6): 496-499.

Loftus M.G., D. Moore and T.J. Elliot. 1988. DNA polymorphisms in

commercial and wild strains of the cultivated mushroom,

Agaricus bisporus. Theor. Appl. Genet. 76:712-718.

Lu, B.1964. Polyploidy in the Basidiomycete Cyathus stercoreus.

Am. J. Bot. 51: 343–347.

MacCanna,C.1984. Commercial mushroom production. Kinsealy

Research Center, Dublin. 367. pp.

Maheshwari S .2013. A Guide for White Button Mushroom

(Agaricus bisporus) Production. 2: 668.doi:10.4172/scientific

reports.668.

Mahmudul, I. N., and Y. B. Bian. 2010. Efficiency of RAPD and ISSR

markers in differentiation of homo-and heterokaryotic

المصادر 110

protoclones of Agaricus bisporus.Journal of microbiology and

biotechnology. 20(4): 683-692.

Mami, Y., G. Peyvast, M. Ghasemnezhad and F. Ziaie. 2013.

Supplementation at casing to improve yield and quality of

white button mushroom. Agricultural Sciences. 4( 1): 27-33.

Mamiro, D. P. and D. J. Royse. 2008. The influence of spawn type

and strain on yield, size and mushroom solids content of

Agaricus bisporus produced on non-composted and spent

mushroom compost. Bioresource technology. 99(8): 3205-

3212.

Maniatis, T. E. F. Fritsch and J. Sambrook. 1982. Molecular Cloning:

A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold

Spring Harbor. NY,143(426): 219-101.

Mattila, P., K. Könkö, M. Eurola, J. M.Pihlava, J. Astola, L.

Vahteristo and V. Piironen. 2001. Contents of vitamins,

mineral elements, and some phenolic compounds in cultivated

mushrooms. Journal of Agricultural and Food Chemistry.

49(5): 2343-2348.

Mattila P, K. Könkö, M. Eurola, J.M. Pihlava, J. Astola, L. Vahteristo,

P. G Miles and S. T. Chang. 2004. Mushrooms: cultivation,

nutritional value, medicinal effect, and environmental impact.

CRC press. 476. pp.

Mattila, P., P. Salo-Vaananen, K. Konko, H. Aro and T. Jalava. 2002.

Basic Composition and Amino Acid Contents of Mushrooms

Cultivated in Finland. J. Agri. Food Chem., 50:6419-6422.

May, B., D.J. Royse. 1982. Confirmation of crosses between lines of

Agaricus brunnescens by isozyme analysis. Exp. Mycol. 6:

238-292.

MC, Mushrooms Canada .2007. Health Sheet. Published by Data of

Mushrooms Canada. Canada. 1-3 pp.

Meyer, A.S., O.S. Yi, D.A. Pearson, A.L. Waterhouse. and E.N.

Frankel. 1997.Inhibition of human lowdensity lipoprotein

oxidation in relation to composition of phenolic antioxidants

المصادر 111

in grapes (Vitis vinifera). J. Agric. Food Chem. 45: 1638–

1643.

Millanes, A.M., P. Diederich and S. Ekman. 2011. Phylogeny and

character evolution in the jelly fungi (Tremellomycetes,

Basidiomycota, Fungi). Molecular Phylogenetics and

Evolution. 61(1): 12-28.

Mizuno, T. 1995. Bioactive molecules of mushrooms: Food function

and medicinal effect of mushroom fungi. Food. Rev. Intern.

11,7-21.

Mondal, T. 2013. Studies on antioxidant and antimicrobial properties

of some common mushrooms. Journal of Today’s Biological

Sciences: Research & Review. 2(1): 60-67.

Nair, N.G., F. Mitchell and K.Y. Cho.1993. An alternative method of

nutrient supplementation in the cultivation of the common

mushroom Agaricus bisporus .Australian. J of Experimental-

Agriculture.33(1):115-117.

Nasiri, F., B. G. Tarzi, A. Bassiri and S. E. Hoseini. 2012.

Comparative study on some chemical compounds of button

mushrooms (Agaricus Bisporus) cap and stipe during the first

to third flushes. Ann Biol Res. 3: 5677-80.

Nazrul, M. I. and B.YinBing. 2011. Differentiation of homokaryons

and heterokaryons of Agaricus bisporus with inter-simple

sequence repeat markers.. Microbiological research.166 (3):

226-236.

Nei, M. and W. H.Li.1979. Mathematical model for studying genetic

variation in terms of restriction endonucleases. Proceedings of

the National Academy of Sciences. 76(10): 5269-5273

Newton, C.A. and G.A. Graham. 1997. PCR. 2ndedn.Springer

Verlag,New York.192 pp.

Nikolova, D., G. Bjelakovic, L.L. Gluud, R.G. Simonetti and C.

Gluud. 2007. Mortality in randomized trials of antioxidant

supplements for primary and secondary prevention:

systematic review and meta-analysis”. The Journal of the

American Medical Association. 297 (8): 842–857.

المصادر 112

Noble,R. and R.H.Gaze.1996. Preparation of mushroom Agaricus

bisporus composts in controlled environments: Factor

influencing compost bulk density and productivity.

International Biodeterioration and Biodegradation.37(1-

2):93-100.

Oei P,. 2003.Mushroom Cultivation., Backhuys Publisher,Leiden,

Netherlands. 429.pp.

Oyetayo, V. O. 2009. Free radical scavenging and antimicrobial

properties of extracts of wild mushrooms. Brazilian Journal of

Microbiology 40(2): 380-386.

PAAF, Public Authority of Agriculture Affairs and Fish Resources. 2004. The Fungus Agaricus bisporus (Mushroom). 1st Ed.Published by PAAF. Kuwait. 19.pp.

Pardo, A., A. de Juan, M. Alvarez-Ortí and J. E. Pardo. 2010.

Screening of Agaricus bisporus (Lange, Imbach) strains and

the casing variables for quality mushroom production in

Spain. HortScience. 45(2): 231-235.

Parr, A.J. and J.P.Bolwell. 2002. Phenols in the plant and in man. The

potential for possible nutritional enhancement of the diet by

modifying the phenols content or profile. J. Sci. Food Agric.

80: 985-1012.

Parslew R, K.T. Jones, J.M. Rhodes and G.R. Sharpe.1999.The

antiproliferative effect of lectin from edible mushroom

(Agaricus bisporus) on human keratinocytes: preliminary

studies on its use in psoriasis. Br J Dermatol.140(1):56-60.

Patyshakuliyeva, A. and R. P. De Vries.2011. Biodegradation of

carbohydrates during the formation of Agaricus bisporus

compost. In Proceedings of the 7th International Conference

on Mushroom Biology and Mushroom Products (Vol.1).

Institut National de la recherche agronomique.

Patyshakuliyeva, A., E. Jurak, A. Kohler, A. Baker, E. Battaglia, W.

de Bruijn and R. P. De Vries. 2013. Carbohydrate utilization

and metabolism is highly differentiated in Agaricus

bisporus. BMC genomics. 14(1): 663.

المصادر 113

Procházková, D., I. Boušová, and N. Wilhelmová. 2011. Antioxidant

and prooxidant properties of

flavonoids. Fitoterapia. 82(4):513-523

Powell,W., M. Morgante, C.Andre, M.Hanafey, J.Vogel, S.Tingey

and A. Rafalski.1996. The comparison of RFLP, RAPD,

AFLP and SSR (microsatellite) markers for germplasm

analysis .Mol.Breed. 2: 225-238.

Raper, C. A., J. R. Raper and R. E. Miller. 1972. Genetic analysis of

the life cycle of Agaricus bisporus. Mycologia. 1088-1117.

Rauf, S., I. A. Khan and F. A. Khan. 2006. Colchicine-Induced

Tetraploidy and Changes in Allele Frequencies in Colchicine-

Treated Populations of Diploids Assessed with RAPD

Markers in Gossypium arboreum L. Turkish Journal of

Biology. 30(2): 93-100.

Ravinder, R., L. Venkateshwar Rao and P. Ravindra. 2003. Studies

on Aspergillus oryzae mutants for the production of single

cell proteins from deoiled rice bran. Food Technology and

Biotechnology. 41(3): 243-246.

Raymond , W. K. 2007.General , Organic and Biological Chemistry

an Integrated Approach . 2 nd Edition. wiley. 541. pp.

Ribereau-Gayon, P.1972. Plant Phenolics; Hafner Publishing

Company: New York. 254.pp.

Reis, F. S., A. Martins, L. Barros and I. C. Ferreira. 2012. Antioxidant

properties and phenolic profile of the most widely appreciated

cultivated mushrooms: a comparative study between in vivo

and in vitro samples. Food and Chemical Toxicology. 50(5):

1201-1207

Robles-Hernández, L., A. C. González-Franco, J. M. Soto-Parra and

F.E.O. Montes-Domínguez. 2008. Review of agricultural and

medicinal applications of basidiomycete mushrooms.

TechnoCiencia, Chihuaua, 2(2): 95-107. Science, 14-17 May

1991, Netherlands: 73-80.

Romaine, C.P. and B. Schlagnhaufer.1992.Characteristics of a hydra-

ted,Alginate-Based delivery system for Cultivation of the

المصادر 114

button mushroom. Appl. and Environmental Micro. 58(9):

3060-3066.

Rong, T.2010. Chemistry and biochemistry of dietary polyphenols,

Review. Nutrients, 2:1231-1246.

Royse D.J., B. May. 1982. Use of isozyme variation to identify classes

of Agaricus brunnescens. Mycologia 74: 93-102.

Rudravaram, R., A. K. Chandel, V. R. Linga and R. Pogaku. 2006.

Optimization of protein enrichment of deoiled rice bran by

solid state fermentation using Aspergillus oryzae MTCC

1846. International Journal of Food Engineering. 2(4):

Saiki, R.K., D.H.Gelfand, and S. Stoffel,. 1988. Primer directed

enzymatic amplification of DNA with a thermo stable DNA

polymerase. Science. 239: 487–491.

Sakae, H., T. Yutaka and T. Minoru. 2006. Mushroom Cultivation

Using Compost Produced in the Garbage Automatic

Decompose-Extinguisher (GADE). Eurasian J. For Res.

9(2):61-67.

Sambrook, J. and D.W. Russell. 2001.Molecular Cloning: A

Laboratory Manual; 3 Lab edition . Cold Spring Harbor

Laboratory Press.17 Chapter.

Sánchez, C .2004. Modern aspects of mushroom culture technology.

Applied Microbiology and Biotechnology. 64(6): 756-762.

Satitmanwiwat, S., K. Ratanakhanokchai, N. Laohakunjit, L.K. Chao,

S.T. Chen, P. Pason, C. Tachaapaikoon and K.L. Kyu. 2012.

Improved purity and immunostimulatory activity of beta-

(1→3)(1→6)-glucan from Pleurotus sajor-caju using cell

wall-degrading enzymes. Journal of Agricultural and Food

Chemistry. 60(21): 5423-5430.

Sato, M., N. Ramarathnam, Y. Suzuki, T. Ohkubo, M. Takeuchi and

H. Ochi. 1996. Varietal differences in the phenolic content and

superoxide radical scavenging potential of wines from

different sources. J. Agric. Food Chem. 44:37–41.

المصادر 115

Schisler, L.C and J.W.Sinden.1962. Nutrient supplementation of

mushroom compost at spawning. Mushroom Sci.5:150-164.

Schisler, L.C .1964.Nutrient Supplement of Compost during the

mushroom growth cycle. Mushroom Growers Assoc

Bull.197:503-541.

Schisler, L.C and J.W.Sinden.1966.Nutrient supplementation of

mushroom compost at casing-vegetable oil. Can. J. Botany.

44:1063-1069.

Schisler, L.C .1967.Stimulation of yield in the cultivated mush- room

by vegetable oils. Appl.MicroBiol.15:844-850.

Schisler, L.C .1982a.Biochemical and mycological aspects of

mushroom composting. In: Wuest,P.J.; G.D.Bengtson.

(Eds),Penn State Handbook for Commercial Mushroom

Growers.Special Publication,College of Agricultural Scie-

nce,The Pennsylvania State University. 129,pp.3-10.

Schisler, L. C. 1982b. Influence of cultural practices on mushroom

yield response to delayed-release nutrients. In: Wuest,P.J.;

G.D.Bengtson. (Eds),Penn. State Handbook for Commercial

Mushroom Growers.Special Publication,College of Agricul-

tural Science,The Penn. State University. 129.pp.49-53.

Schisler, L. C. 1982c. New innovations for efficient mushroom

growing. In: Wuest,P.J.; G. D. Bengtson. (Eds),Penn State

Handbook for Commercial Mushroom Growers.Special

Publication, College of Agricultural Science, The Pennsylv-

ania State University. 129.pp.49-53.

Schmidt, O. 2006. Wood and Tree Fungi, Biology, Damage,

Protection and Use. Springer. Germany. 334.pp.

Scorzetti, G., J.W. Fell, A. Fonseca, and A. Statzell-Tallman. 2002.

Systematics of basidiomycetous yeasts: a comparison of large

subunit D1/D2 and internal transcribed spacer rDNA regions.

FEMS Yeast Research. 2: 495-517.

Shalee, A. A. 1994. Studies about White bottun mushroom Agaricus

bisporus and Agaricus campestris.thesis. Biology

Department,Science College, Sulaimani University.

المصادر 116

Shanmuganayagam, D., T.F. Warner, C.G. Krueger, J.D. Reed and

J.D Folts.2007. Concord grape juice attenuates platelet

aggregation, serum cholesterol and development of atheroma

in hypercholesterolemic rabbits. Atherosclerosis.190: 135–

142.

Sharma, H. S. and M. Kilpatrick. 2000. Mushroom (Agaricus

bisporus) compost quality factors for predicting potential

yield of fruiting bodies. Canadian journal of

microbiology. 46(6): 515-519.

Sharma, R. and B. Sharma. M.2014. Strain improvement in Pleurotus

ostreatus using UV light and ethyl methyl sulfonate as

mutagens. African Journal of Microbiology Research. 8(5):

432-436.

Sharma, S. R., R. D. Rai, M. C. Yadav and S.Verma. 2007. NRCM-

Perspective Plan Vision-2025. Published by Tewari, R. P.,

Indian Council of Agricultural Research, India. 38.pp.

Sies, H. 1997. Oxidative stress: oxidants and antioxidants.

Experimental Physiology. 82(2): 291–295.

Sobieralski, K., M. Siwulski, J. Lisiecka, J. Szymański and A.

Jasińska. 2011. Carpophore Dry Matter Content of Several

Agaricus bisporus (Lange) Imbach and Agaricus bitorquis

(Quel) Sacc. Strains Found in Natural Habitats. Vegetable

Crops Research Bulletin, 75: 145-151.

Sonnenberg, A. S., P. W. de Groot, P. J. Schaap, J. J. Baars, J. Visser

and L. J. Van Griensven. 1996. Isolation of expressed

sequence tags of Agaricus bisporus and their assignment to

chromosomes. Applied and environmental microbiology.

62(12): 4542-4547.

Sonnenberg A,S,M. 2000. Genetics and breeding of Agaricus

bisporus. Mushroom Sci. 15: 25-39.

Soto-Vaca, A., J.N. Losso, Z. Xu and J.W. Finley. 2012. Review:

Evolution of phenolic compounds from color and flavor

problems to health benefits. J. Agric. Food Chem.

60(27):6658-6677.

المصادر 117

Staniaszek, M., W. Marczewski, K. Szudyga, J. Maszkiewicz, A.

Czaplicki and G. Qian .2002. Genetic relationship between

Polish and Chinese strains of the mushroom Agaricus

bisporus (Lange) Sing.,determined by the RAPD method.

43(1): 43-48.

Straatsma, G., J. P. Gerrits, T. M. Gerrits, H. J. Op den Camp and L.

J. van Griensven. 1991. Growth kinetics of Agaricus bisporus

mycelium on solid substrate (mushroom compost). Journal of

General Microbiology. 137(7): 1471-1477.

Summerbell, R. C., A. J. Castle, P. A. Horgen and J. B. Anderson.

1989. Inheritance of restriction fragment length

polymorphisms in Agaricus brunnescens. Genetics. 123(2):

293-300.

SWM. 2012 . Best practices for environmental protection in the

mushroom farm community. Chester County Planning

Commission West Chester, 254-5401-001/November 3 pp.57

Takaku T., Y. Kimura and H. Okuda.2001. Isolation of an antitumor

compound from Agaricus blazei Murill and its mechanism of

action. J Nutr. 131: 1409–1413.

Tautorus, T. E. and P. M. Townsley. 1984. Biotechnology in

commercial mushroom fermentation. Nature Biotechnology.

2(8): 696-701.

Thiansilakul, Y., S. Benjakul and F. Shahidi. 2007. Antioxidative

activity of protein hydrolysate from round scad muscle using

alcalase and flavourzyme. Journal of Food Biochemistry.

31(2): 266-287

Thomas, M. G. and D. R. Schumann. 1993. Income Opportunities in

Special Forest Products-Self-Help Suggestions for Rural

Entrepreneurs. Agriculture Information Bulletin AIB, U.S.

Department of Agriculture, Washington. 139. pp.

Toyama, H. 2010. Construction of higher growing mycelia of the

Shiitake mushroom, Lentinula edodes using a mitotic

arrester. Bulletin of Minamikyushu University. A, Natural

Science (Japan).40A:87-90.

المصادر 118

Toyama, H. 2014. Personal communication. Emails:

[email protected]. February, 17.

Tsanga, C., S. Higginsa, G.G. Duthiea, S.J., Duthiea, M. Howiea,

W. Mullena, M.E.J. Leana and A. Crozier. 2005.The

influence of moderate red wine consumption on

antioxidant status and indices of oxidative stress

associated with CHD in healthy volunteers. Br. J.

Nutr.93:233–240.

Upadhyay, R. C., R. N. Verma, S. K. Singh and M.C.Yadav. 2002.

Effect of organic nitrogen supplementation Pleurotus species.

The 4th ICMBMP.Solan-India.MushWorld.com.

USDA.2005. by the National Agricultural Statistics Service (NASS),

Agricultural Statistics Board, United States Department of

Agriculture .

USDA.2009. by the National Agricultural Statistics Service (NASS),

Agricultural Statistics Board, United States Department of

Agriculture.

USDA.2014. by the National Agricultural Statistics Service (NASS),

Agricultural Statistics Board, United States Department of

Agriculture.

Uzun, I.2004. Use of Spent Mushroom Compost in Sustainable Fruit

Production. Journal of Fruit and Omamental Plant Research.

Special Edition, 12:157-165.

Van Harten, A. M. 1998. Mutation breeding: theory and practical

applications. Cambridge University Press.pp.83

Van Loon P. C.C, Swinkels H. A. T. I., van Griensven L. J. L. D.

2000. Dry matter content in mushrooms (Agaricus bisporus)

as an indicator for mushroom quality. In: Science and

Cultivation of Edible Fungi, Van Griensven (ed.), Balkema,

Rotterdam: 507-513

Vijay,B.,S.R.Sharma and T.N.Lakhanpal. 2003.Effect of treating

post-composting supplements with different concentrations of

المصادر 119

formaldehyde on the yield of Agaricus bisporus.

India.Mushworld.com.

Volman, J.J., R.P. Mensink, L.J. van Griensven and J. Plat. 2010.

Effects of alpha-glucans from Agaricus bisporus on ex vivo

cytokine production by LPS and PHA-stimulated PBMCs; a

placebocontrolled study in slightly hypercholesterolemic

subjects. Eur. J. Clin. Nutr. 64:720–726.

Wang, H., T. B Ng and Q. Lui. 2003. A novel lectin from the wild

mushroom Polyporus adusta. Biochem. Biophysic.

Res.Commun. 307: 535-339.

Wasser, S. P. 2002. Medicinal mushrooms as a source of antitumor

and immunomodulating polysaccharides. Appl. Microbiol.

Biotechnol. 3: 258-274.

Wasser, S. P., and A. L. Weis. 1999. Therapeutic effects of medicinal

properties of substances occuring in higher basidiomycetes

mushrooms: a current perspective. Crit.Rev. Immunol. 19: 65-

96.

Wiegant, W.M. 1992. A simple method to estimate the biomass of

thermophilic fungi in composts. Biotechnology

Techniques 5:421–426.

Wu, D., M. Pae, Z. Ren, Z. Guo, D. Smith and S.N Meydani. 2007.

Dietary supplementation with white button mushroom

enhances natural killer cell activity in C57BL/6 mice. J. Nutr.,

137:1472-1477.

Xiong,L.2000.Extend shelf life of mushroom by using micro-

perforated film.A research proposal.Penn. State Univer-

sity.USA.

Yadav, M. C., B. L. Dhar, R. N. Verma and L. J. D. Van Griensven,.

2000. Breeding studies on development of high yielding and

quality hybrids of Agaricus bitorquis. Mushrooms Science.

XV. 1: 299-304.

Yadav, M. C., M. P. Challen, S. K. Singh and T. J. Elliott. 2007. DNA

analysis reveals genomic homogeneity and single nucleotide

polymorphism in 5.8 S ribosomal RNA gene spacer region

المصادر 120

among commercial cultivars of the button mushroom

Agaricus bisporus in India. Current Science-

Bangalore. 93(10): 1383.

Zaid, A. H., H. G. E. Porceddu and F. W. Nicolas.1999. Glossary of

biotechnology and genetic engineering. FAO Research and

Technology Paper 7. Food and Agriculture Organization of

the United Nations.Rome-Italy. M. 99.

Zawirska-Wojtasiak, R., M. Siwulski, E. Wasowicz and K.

Sobieralski. 2007. Volatile compounds of importance in the

aroma of cultivated mushrooms Agaricus bisporus at different

conditions of cultivation. Polish Journal of Food and Nutrition

Sciences. 57(3): 367-372.

Zhao, C., H. Sun, X. Tong and Y. Qi. 2003. An antitumor lectin from

the edible mushroom Agrocybe aegerita.Biochem. J. 374:

321-327.

Zied, D. C., A. Pardo-Gimenez, J. M. J. E. Savoie, Pardo-Gonzalez

and P. Callac. 2011. Indoor" method of composting and

genetic breeding of the strains to improve yield and quality of

the almond mushroom Agaricus subrufescens. Mushroom

Biology And Mushroom Products. 7: 424-432.

لمالحقا 122

: المالحق8 تجربة االولىلل لمكونات الحاصل صفات المدروسةال. معامل االرتباط البسيط بين 1ملحق

الحاصل الكلي

عدد االجسام الثمرية

معدل وزن الجسم الثمري

النسبة المئوية للوزن الجاف

الكليالحاصل -0.14775 0.3694

-0.20862 0.2025

0.14861 0.3666

عدد االجسام الثمرية

-0.14775 0.3694

0.60579 <.0001

-0.22667 0.1652

معدل وزن الجسم الثمري

-0.20862 0.2025

0.60579 <.0001

-0.85648 <.0001

لنسبة المئوية للوزن الجاف

0.14861 0.3666

-0.22667 0.1652

-0.85648 <.0001

تجربة الثانيةلل لمكونات الحاصل صفات المدروسةالمعامل االرتباط البسيط بين . 2ملحق

الحاصل الكليعدد االجسام

الثمريةمعدل وزن

الجسم الثمريالنسبة المئوية للوزن الجاف

الحاصل الكلي81444.0

8188.4 0.01929 0.9111

81244.0

81....

عدد االجسام الثمرية

81444.0

8188.4

8144444

818844 8188.08

816.0.

معدل وزن الجسم الثمري

0.01929 0.9111

8144444

818844

-81.....

.<888.

لنسبة المئوية للوزن الجاف

81244.0

81.... 8188.08

816.0. -81.....

.<888.

ةللتجربة الثاني للصفات النوعية .معامل االرتباط بين الصفات المدروسة .ملحق

tss بروتين الكربوهيدرات الياف دهن رماد الوزن الجاف

الوزن الجاف

-0.11104 814.6.

0.06651 81.666

0.11314 814..2

-0.10337 814404

-0.20816 8122..

0.19482 812446

رماد-0.11104 814.6.

-0.27417 81.84.

-0.36643 0.0279

-0.22602 81.048

-0.20858 812222

-0.15755 81.400

دهن818..4.

81.666

-0.27417 81.84.

0.18054 812628

0.58081 818882

0.14967 81.0..

0.09421 81404.

الياف81....4

814..2 -0.36643 0.0279

81.0844

812628

-0.13786 81422.

-0.12613 814..4

0.34180 8184..

الكربوهيدرات-0.10337 814404

-0.22602 81.048

814080.

818882 -0.13786 81422.

8144480

81884. 81....4

81424.

بروتين-0.20816 8122..

-8128040

812222 81.46..

81.0.. -0.12613 814..4

8144480

81884.

-0.19250 812.8.

tss 81.6402

812446 -81.4.44

81.400 818642.

81404. 81.4.08

8184.. 81....4

81424. -0.19250 812.8.

لمالحقا 123

. منحنيات التحليل للمركبات الفعاله 4ملحق

لمالحقا 124

لمالحقا 125

DNA. بروتوكول استخالص 5ملحق

لمالحقا 126

لمالحقا 127

لمالحقا 128

من قبل الشركة المنتجة .انموذج من المعلومات التفصيلية للبادئ رقم .6ملحق

الصور 129

صور التجربة األولى:

تحضير طبقة التغطية 2صور طيب تبن الحنطة قبل عملية التخميرعملية تر 1صورة

-وحدة النباتات الطبية/كلية الزراعة -اإلنتاجقاعة 4صورة (Spawnاللقاح الفطري ) 3صورة

جامعة بغداد

الصور 130

:التجربة الثانيةصور

الفروقات المظهرية بين العزالت المعاملة بالكولشسين والغزلة الغير معاملة 5صورة

اللقاح الفطري المحضر داخل المختبر 6صورة

تعبة االكياس بالوسط الزرعي 7صورة

الصور 131

كلية الزراعة/جامعة تكريت -اإلنتاج في مزرعة الفطرقاعة 8صورة

TSSقياس ل الرقمي جهازال 10صورة طريقة قياس الصفات المظهرية 9صورة

I

Abstract:

This study included two major Experiment, the first carried out in the

mushroom production project -the Medicinal Plants unit - College of

Agriculture, University of Baghdad for the year of 2012-2013 and the

second experiment carried out at the Mushroom farm of the Faculty of

Agriculture-University of Tikrit for the year of 2013-2014. The tow

experiments were designed according to (RCBD) design with four

replicates per treatment.

The results showed: that the addition of 2% wheat bran enriched by

bioprotein and 1%, 2% of date seeds flour enriched by bioprotein to the

compost on a dry weight basis increased first flush and their number of

fruit body to 8.59, 7.91, 7.80 kg/m2 and 186.65, 210.00, 160.00 fruit body

sequentially. Addition of 1% and 2% date seeds flour enriched with

bioprotein increase the total yield significantly to 14.73 and 14.43 kg/m2

sequentially compaired with 12.02 kg/m2 for the control and The maximum

number of fruiting bodies arrived to 390.00 fruit body. And reached the

rate of fruiting bodies weight for the total yield when add the date seeds

flour enriched by bioprotein at 1 and 2% to the biggest of significant

increase Which were 62.23 and 60.75g sequentially. And dropped to below

when the control treatment and treatment of date seeds flour enriched by

bioprotein 1% to 34.48 and 37.47g sequentially.

There were a significant differences between strains in total yield.

Yield of strain B62 increased to 18.94 kg/m2, while the strains Brown and

X20 has a total yield 15.17 and 14.98 kg/m2 sequentially. The interaction

between the strain and the concentration of colchicine has a significant

effect on the total yield, The interaction between the strain B62 and

concentrations 0.1% and 0.5% increased the total yield to 23.06 and 18.41

kg/m2 sequentially compaired with 17.74 kg/m2 for the same strain. The

interaction between the strain X20 and concentrate of 0.0% registered the

largest number of fruiting bodies arrived to 525.00 fruiting body. While

the results of the rate of fruiting bodies weight for the total yield showed

the interaction between the strain B62 and concentration of 0.1% was the

highest rate, which reached 73.20g, While the treatment of interaction

between strain X20 and concentrate of 0.0% to decrease to 40.30g.

II

Biology efficiency it has reached a maximum at the treatment of

interaction between the strain B62 and concentrate of 0.1% to 65.90%

while at the same strain for the control treatment it was 50.7% .

The Brown strain significantly increased of the rate of fruiting body

length to 6.41cm from the two strains. The treatment of 0.5% colchicine

increased the length of stem fruiting bodies to 6.07cm, While at 0.3%

colchicine concentration decreased length compaired with control

treatment to 5.52cm and 6.03cm sequentially. The interaction between the

strain and treatment, it has increased the rate of stem length of the fruiting

body when treatment between strain Brown and concentrate 0.5% to

7.29cm. The treatment of 0.5% colchicine has a significant increase in the

rate of stem thickness to 2.30 cm. The interaction between strain and

treatment of different levels of colchicine significant effect on the rate of

the stem thickness of the fruiting bodies, as it overtook all of the treatment

of interaction between the strain B62 and concentrate 0.1% and the strain

X20 and concentration of 0.5% on all treatment to 2.43 and 2.42 cm

sequentially. While the rate of stem thickness of fruiting body dropped to

below when the treatment of interaction between the strain B62 and

concentrate 0.3% to 1.71cm. It found that the interaction between strain

and the level of colchicine concentration a significant effect in the

presentation of the width rate of fruiting body cap, reaching the treatment

of interaction between Brown strain and concentration of 0.3% to the

maximum width was 9.76 cm, which significant about the 8.29cm at the

treatment of interaction Brown and concentrate 0.0%. The treatment of

interaction between the strain B62 and concentration of 0.3% has led to

reduce the width of fruiting body cap to below where it reached 7.49cm. It

found that the concentration of 0.5% achieved a significant increase in the

rate of the thickness of the fruiting body cap to 2.29cm. While the

concentration 0.3% to reduce the thickness of the fruiting body cap to

1.96cm. The interaction between the strain and the level of concentration

colchicine has significantly influenced, which was between the strain B62

and concentrate 0.1% to reach the thickness of the fruiting body cap to

2.43cm compared to the treatment of interaction for the same strain with

the 0.0% concentration, which recorded a rate of 2.14cm thicker.

The dry matter of Brown strain reached to 10.98% followed by B62 and

X20, which reached, to 10.48 and 9.45% sequentially. While X20 have the

III

best ratio of carbohydrates, fat and total soluble solid which reached to

54.38%, 4.77% and 5.18% sequentially. The B62 strain is the highest in

both protein, fiber and ash content which reached to 32.26%, 16.48% and

16.48% sequentially. The effect of colchicine on the percentage of dry

matter and total soluble solids was the best at concentration of 0.3% and

fat at concentration of 0.1% significantly. when the ratio was 11.14%,

5.51% and 4.63% sequentially, but it did not effect on the other of the

qualitative characteristics. The interaction between colchicine and strain it

has been found that there are significant differences in the dry matter of the

fruiting bodies, between the Brown strain and the concentration 0.1%

which reached to 13.47%. The interaction between the X20 strain and

concentration 0.5% is the best on all Treatment interaction, which reached to

57.05%. The interaction between the strain and the concentration of

colchicine significantly increased the percentage of the protein. the

interaction between the B62 strain and the concentration 0.1% better rate

reached to 34.25%. In the percentage of fat, the interaction between the

strain and the concentration of colchicine effected significantly, and the

best rate is 6.17% at the interaction between the X20 strain and

concentration of colchicine 0.3%. The interaction between the B62 strain

and concentration 0.1% increased The percentage of fibers to 17.82%. The

percentage of ash at the interaction between the strain B62 and

concentration 0.1% increased significantly at all treatments obtaining the

highest percentage reached to 14.44%. The value of total soluble solids at

the interaction between the strain X20 and concentration 0.3% was the

highest percentage of all treatments which reached to 6.23%. The ability

of antioxidants activity of the Brown strain was higher than X20 strain

which has the percentage of 58.07 and 55.92% sequentially. Treatment of

colchicine increased the ability of antioxidants activity to 58.10% at the

concentration of 0.5%, which is significantly higher than the control. The

interaction between the strain and the concentration of colchicine has led

to a significant difference between the treatments for ability of antioxidants

activity, The interaction between Brown strain and concentration of 0.1%

recorded the highest percentage of antioxidants which reached to 58.38%.

Excelled B62 strain from the other strains which the highest concentration

of phenolic compounds reached 9.91mg.g-1. In the B62 strain treated with

0.3% and 0.1% colchicine. The interaction between the strain and the

concentration of colchicine has a significant effect on the amount of

IV

phenolic compounds. The interaction between the B62 strain and

concentration of 0.5% gave the highest difference compaired with all the

other treatments, which reached to 11.60 mg.g-1.

The concentrations of lectin, statin, β-glucan and chitin were

significantly higher in the strain B62 and reached to 9.38 mg.g-1, 6.46 mg.g-

1, 19.29mg.g-1 and 9.79 mg.g-1 sequentially. The concentrations of

colchicine 0.3% increased the contents of lectin, statin and chitin

significantly to 8.27 mg.g-1 , 5.75 mg.g-1 and 8.75 mg.g-1 sequentially. The

interaction between B62 strain and 0.5% from colchicine increased the

contents of lectin, statin and β-glucan significantly to 11.70 mg.g-1, 8.42

mg.g-1 and 21.45 mg.g-1 sequentially. The interaction between B62 strain

and 0.5% from colchicine increased the content of chitin significantly to

12.50 mg.g-1 compaired with other strains.

There were a high variations in the strains due to the treatments with

colchicine according to DNA studies. Treatment of the Brown strain with

0.5% from colchicine due to genetic variation to 55.6%, while the highest

effect in genetic variation happened when treated X20 strain and B62

strains with 0.1% colchicine that reached to 33.3% and 30.8% sequentially.

Effect of bioprotein and genetic variation in the

characteristics of productivity, quality and medicinal

properties for some strains of the white buttons mushroom

Agaricus bisporus

A thesis submitted by

Mustafa Rashid Majeed Alqaisi

To the council of the college of agriculture

University of Baghdad in partial fulfillment of the

requirements of the degree of doctor of philosophy in

Agricultural Sciences-Horticulture & Landscape Design-

Organic Farming

Supervised by

Dr.Abdulilah M.Abdul-Hadi Dr. Abdulah A. Hasan

2015AD 1436 HD

University of Baghdad- Agriculture Collage