zona hambat penicillium dengan berbagai macam medium biakan[1]

Upload: praditya-langgeng

Post on 06-Jul-2018

215 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    1/16

    ZONA HAMBAT PENICILLIUM DENGAN BERBAGAI MACAM

    MEDIUM BIAKAN

    LAPORAN

    Disusun untuk Memenuhi Tugas Mata Kuliah Mikrobilogi Industri yang

    dibimbing oleh Dr. Endang Suarsini, M.ked dan Sitoresmi Prabaningtyas, S.si,

    M.si

    Disusun Oleh:

    Kelompok :

    Afifah Nur Aini !

    Erni !

    I"raditya #anggeng P $%&%'()$*%(+!

     

    UNI!ER"ITA" NEGERI MALANG

    #AKULTA" MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

    $URU"AN BIOLOGI

    Mei %&'

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    2/16

    BAB I

    PENDAHULUAN

    ( L)*)+ Bel)k)n,

    Antibiotik didefiniskan sebagai suatu senyaa biologi "ada konsentrasi

    yang sedikit da"at menghambat "ertumbuhan dari mikroorganisme Pres-ott dan

    Dunn, $*!. Daya hambat "enisilin beru"a "enghambat "ertumbuhan

    bakteriostatik! dan aksi mematikan efek bakteriosidal! yang menghasilkan

     "enurunan bakteri "ada "erhitungan langsung S-hlegel, $+)!.

    Penisilin di"roduksi oleh galur Peni-illium notatum atau Peni-illium

    -hrysogenum yang diinokulasikan "ada medium dengan nutrien yang sesuai.

    /ermentasi "ada fase inisiasi melibatkan "ertumbuhan dari 0amur. Ketika

     "ertumbuhan "ada fase stationer ter0adilah "roduksi "enisilin. #a0u "roduksi

    antibiotik meru"akan hasil dari sintesis selama "roses fermentasi Demain, $*!.

    Proses utama fermentasi di"engaruhi oleh suhu, "1 dan konsentrasi nutrisi

    sumber karbon, sumber nitrogen, termasuk oksigen 2aden, (&&&!. Peni-illium

    -hrysogenum da"at menggunakan laktosa, maltose dan dekstrosa sebagai sumber 

    nutrisi untuk "ertumbuhannya, teta"i belum ada "enelitian yang membahas

    tentang medium biakan untuk Penicillium yang "aling baik dalam menghambat

     bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. sehingg "eneliti tertari untuk 

    melakukan "enelitian tentang 34ona 1ambat Penicillium Pada 5erbagai Medium

    5iakan Terhada" 5akteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

    (% Rumus)n M)s)l)h

    5erdasarkan latar belakang di atas, rumusan masalahnya sebagai berikut.

    $. A"akah terda"at "engaruh "emberian ma-am medium biakan terhada"

    6ona hambat  Penicillium  "ada bakteri  Escherichia coli  danStaphylococcus aureus7

    (- Tu.u)n

    5erdasarkan rumusan masalah di atas, tu0uan dari "enelitian ini sebagai

     berikut.

    $. 8ntuk mengetahui "engaruh ma-am medium biakan terhada" 6ona

    hambat Penicillium  "ada bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus

    aureus.

    (/ Hipo*esis Peneli*i)n

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    3/16

    5erdasarkan tu0uan di atas, hi"otesis dari "enelitian ini sebagai berikut.

    $. Ada "engaruh "emberian ma-am medium biakan terhada" 6ona

    hambat  Penicillium dalam menghambat bakteri  Escherichia coli  dan

    Staphylococcus aureus.

    (0 M)n1))*

    (0( M)s2)+)k)*

    Penelitian ini dihara"kan da"at memberikan informasi  se-ara ilmiah

    tentang  Penicillium  yang da"at menghambat bakteri  Escherichia coli  dan

    Staphylococcus aureus.

    (0(% Ilmu Pen,e*)hu)n

    Memberikan sumbangan "engetahuan melalui "enelitian  denganadanya medium yang "aling baik terhada" 6ona hambat dalam menghambat

     bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

    (' De1inisi Ope+)sion)l

    Definisi o"erasional dari "enelitian ini sebagai berikut.

    $. 4ona hambat Penicillium adalah dengan mengukur diameter 6ona hambat

    dari  Penicillium  terhada" bakteri  Escherichia coli  dan Staphylococcus

    aureus.(.  Escherichia coli meru"akan bakteri gram negatif yang tersebar sangat luas

    dan da"et menyebabkan berbagai "enyakit yang umum di 0uma"ai "ad

    manusia. Se"erti diare, sakit "erut, dll

    %. Staphylococcus aureus meru"akan bakteri gram "ositif yang bnayak 

    menyebabkan "enyakit "ada manusia. Khususnya "ada "enyakit kulit dan

     "ernafasan

    '.  Penicillium meru"akan bakteri dari antibiotik "eni-illin yang digunakan

    untuk menghambat bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.*. Medium biakan adalah medium yang digunakan sebagai nutrisi untuk 

     Penicillium. Medium yang digunakan yaitu laktosa, maltosa dan de9trosa.

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    4/16

    BAB II

    KA$IAN PU"TAKA

    %( Penicillium

    %(( T)ksonomi Penicillium spp(

    Taksonomi dari Penicillium s"". sebagai berikut.

    Kingdom : /ungi

    Di;isi : As-omy-ota 

    Kelas : Eurotiomy-etes 

    iri?-iri s"esifik  Penicillium  adalah hifa bersekat atau berse"ta,

    miselium ber-abang, biasanya tidak berarna, konidiofora bersekat dan

    mun-ul di atas "ermukaan, berasal dari hifa di baah "ermukaan, ber-abang

    atau tidak bar-abang, ke"ala yang membaa s"ora berbentuk se"erti sa"u

    dengan sterigmata mun-ul di dalam kelom"ok, konidium membetuk rantai

    karena mun-ul satu "er satu dari sterigmata. Konidium "ada aktu masih

    http://en.wikipedia.org/wiki/Ascomycotahttp://en.wikipedia.org/wiki/Eurotiomyceteshttp://en.wikipedia.org/wiki/Eurotialeshttp://en.wikipedia.org/wiki/Trichocomaceaehttp://en.wikipedia.org/wiki/Eurotiomyceteshttp://en.wikipedia.org/wiki/Eurotialeshttp://en.wikipedia.org/wiki/Trichocomaceaehttp://en.wikipedia.org/wiki/Ascomycota

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    5/16

    muda berarna hi0au, kemudian berubah men0adi kebiruan atau ke-oklatan

    /ardia6, $(!.

    Menurut Pitt dan 1o-king $@!, koloni  Penicillium chrysogenum

    tumbuh -e"at di atas medium standar "ada suhu (*o

    >, sedangkan "ada

    medium >6a"eks Beast Agar >BA! menghasilkan blue?green konidium.

     Penicillium chrysogenum  bersifat mesofilik, tumbuh "ada suhu yang

    minimum "ada suhu 'o>, o"timum "ada suhu (%o>, dan maksimum "ada suhu

    %@o>. Dera0at keasaman "1! o"timum untuk "ertumbuhan  Penicillium

    chrysogenum antara '?). Koloni Penicillium chrysogenum tumbuh baik "ada

    medium >6a"eks Do9, berdiameter sekitar ' -m dalam aktu $& hari "ada

    suhu (*

    o

    >, memiliki "ermukaan se"erti ka"as, dan berarna hi0au kekuninganatau hi0au agak biru "u-at, 0ika telah tua akan berarna semakin gela"

    2and0ar dkk., $!.

    %(% Me4ium Bi)k)n

    Mikroorganisme da"at dibiakan dalam air yang sudah ditambah dengan

    nutrien yang sesuai. Medium biakan adalah larutan en-er yang mengandung

    nutrien "enting, yang menyediakan kebutuhan bagi sel mikroba su"aya da"at

    tumbuh dan menghasilkan banyak sel yang seru"a. Di sam"ing sumber energi

     beru"a senyaa organik dan anorganik atau -ahaya, medium biakan harus

    memiliki sumber karbon, nitrogen dan nutrien "enting lainnya. Medium biakan

    da"at disia"kan dalam keadaan -air mau"un gel semi "adat!. Dari -air da"at

    diubah men0adi "adat dengan "enambahan agar. Medium biakan yang

    mengandung agar da"at disim"an dalam bentuk lem"eng "ada -aan Petri

    tertutu", dimana sel mikroba da"at tumbuh dan membentuk massa yang terlihat

    sebagai koloni sel. Disam"ing itu medium biakan yang mengandung agar da"at

     "ula disim"an dalam tabung reaksi dengan kemiringan tertentu, dimana sel

    mikroba da"at tumbuh dengan memberikan karakteristik "ertumbuhan yang khas.

    %(- Mik+oo+,)nisme U.i

    Mikroorganisme u0i digunakan untuk mengetahui adanya akti;itas

    antibiotik "enisilin yang dihasilkan oleh  Penicillium chrysogenum.

    Mikroorganisme da"at digunakan sebagai mikroorganisme u0i 0ika bersifat

     "atogen bagi manusia, sehingga di"erlukan suatu usaha untuk menghambat

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    6/16

     "ertumbuhannya. Mikrobia u0i yang digunakan da"at dari kelom"ok bakteri

    2ram?"ositif, mau"un 2ram negatif untuk mengu0i kemam"uan antibiotik 

     "enisilin yang di"roduksi oleh  Penicillium chrysogenum, misalnya

    Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.

    %(-(  Escherichia coli 

     Escherichia coli meru"akan bakteri "enghuni saluran "en-ernaan manusia

    dan hean berdarah "anas lainnya, biasanya tidak berifat "atogen. Calau"un

     Escherichia coli meru"akan bagian dari mikroflora normal di dalam saluran

     "en-ernaan, galur?galur tertentu dari bakteri tersebut kini telah terbukti mam"u

    menyebabkan gastroenteritis taraf sedang hingga "arah "ada manusia dan

    hean Pel-6ar dan >han, $+)!. Klasifikasi dari bakteri  Escherichia coliadalah sebagai berikut:

    Kera0aan : 5a-teria

    /ilum : Proteoba-teria

    Kelas : 2amma"roteoba-teria

    5angsa : Enteroba-teriales

    Suku : Enteroba-teria-eae

    Marga : Escherichia

    S"esies : Escherichia coli

    Sumber: Anonim, (&$$ -!.

    5reed dkk. (&&$!,  Escherichia coli meru"akan bakteri berbentuk batang

    dengan ukuran &,*?$,& m, kadang berbentuk agak bulatcoccus, membentuk 

    rantai "endek atau ber"asang?"asangan, bersifat 2ram?negatif, ada yang bersifat

    motil memiliki flagelum! dan ada yang bersifat non?motil, dan tidak membentuk 

    s"ora. Koloni  Escherichia coli  "ada medium agar berarna "utih dan kadang

    kekuningan, lembab, dan mengkila". Escherichia coli mam"u membentuk asam

    dan gas dari glukosa, fruktosa, galaktosa, laktosa, maltosa, arabinosa, 9ilosa,

    rhamnosa, dan manitol. 5akteri tersebut mam"u mereduksi nitrat men0adi nitrit

    dan mam"u membentuk indol.

    %(-(%  Staphylococcus aureus

    Menurut Faet6 $)!, Staphylococcus aureus da"at ditemukan "ada

    kulit dan hidung manusia, yang kadang da"at menyebabkan infeksi. Klasifikasi

    dari Staphylococcus aureus adalah sebagai berikut:

    Kera0aan : 5a-teria

    /ilum : /irmi-utes

    Kelas : 5a-illi

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    7/16

    5angsa : 5a-illales

    Suku : Sta"hylo-o--a-eae

    Marga : Staphylococcus

    S"esies : Staphylococcus aureus

    Sumber: Anonim, (&$$ b!Menurut 5reed dkk. (&&$!,  Staphylococcus aureus  berbentuk bulat

    dengan diameter sekitar &,+?$ m, kadang tersusun dalam kelom"ok tidak 

    teratur dan kadang 0uga berbentuk rantai "endek, non?motil, bersifat aerobik 

    dan kadang anaerobik fakultatif, 2ram?"ositif, dan katalase "ositif. Koloni

    Staphylococcus aureus  "ada medium agar berbentuk bulat, halus, berarna

     0ingga ke"utihan, mengkila", dan butyrous. Staphylococcus aureus mam"u

    mem"roduksi asam dari glukosa, laktosa, sukrosa, manitol, dan gliserol.

    5akteri tersebut tidak mam"u menghidrolisis "ati, serta mam"u mereduksi

    nitrat men0adi nitrit, dan mem"e"tonisasi susu.

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    8/16

    BAB III

    METODE PENELITIAN

    0( R)n5)n,)n Peneli*i)n

    Dalam "enelitian ini metode yang digunakan yaitu metode kuantitatif 

    eks"erimental. Gan-angan "ada "enelitian ini menggunakan Gan-angan A-ak 

    Kelom"ok GAK!, dengan % "erlakuan yang masing?masing ' ulangan. Ada"un

     "embagian kelom"ok "erlakuan sebagai berikut:

    P$ : medium biakan laktosa

    P( : medium biakan maltosa

    P% : medium biakan de9trose

    Pada "enelitian ini menggunakan % ;ariabel, sebagai berikut:

    a. =ariabel bebas : ma-am medium biakan laktosa, maltose dan de9trose!

     b. =ariabel terikat : 6ona hambat Penicillium

    -. =ariabel -ontrol : bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus

    0(% Temp)* 4)n 6)k*u Pel)ks)n))n

    Penelitian ini akan dilaksanakan selama kurun aktu selama ( minggu

     "ada bulan A"ril (&$) di laboratorium Mikrobiologi 8ni;ersitas Negeri Malang

    8M!.

    0(- Al)* 4)n B)h)n

    Alat yang digunakan dalam "enelitian ini adalah timbangan analitik,

     beaker glass, s"atula, gelas ukur, kom"or, "engaduk, enlenmeyer, auto-la;e,

    lemari "endingin, #aminar Air /lo, shaker, -aan "etri, 0arum inokulasi, -otton

     bud, in-ubator.

    5ahan yang digunakan dalam "enelitian ini adalah asam asetat glasial,

     N1'P

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    9/16

    •  N1'PuS

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    10/16

    0(0 An)lisis D)*)

    Data dianalisis dengan menggunakan ANA=A tunggal, a"abila signifikan

    maka diu0i lan0ut dengan menggunakan u0i 5NT. Semua data di"roses dengan

    menggunakan SPSS ;ersi $).

    BAB I!

    HA"IL DAN PEMBAHA"AN

    /( D)*)

    T)3el Zon) H)m3)* Penicillium Te+h)4)p B)k*e+i E. coli 

    NO MEDIUM ZONA HAMBAT

    7MM8

    $ ( % '

    ( #aktosa & & ( '

    %( Maltosa ( & $ )

    -( De9trosa ) @ ' )

    T)3el Zon) H)m3)* Penicillium Te+h)4)p B)k*e+i S. aureus

    NO MEDIUM ZONA HAMBAT7CM8

    $ ( % '

    ( #aktosa % ( @ )

    %( Maltosa & ( $ $

    -( De9trosa & ( $ $

    /(% An)lis) D)*)

    Pada "enelitian ini digunakan % medium biakan yaitu laktosa, maltose

    daan dekstrosa.

    T)3el Zon) H)m3)* Penicillium Te+h)4)p B)k*e+i E. coli 

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    11/16

    NO MEDIUM

    ZONA HAMBAT

    7MM8 TOTAL RERATA

    $ ( % '

    ( #aktosa & & ( ' ) $,*

    %( Maltosa ( & $ ) (,(*-( De9trosa ) @ ' ) (% *,@*

    TOTAL + @ @ $) -9

    T)3el Zon) H)m3)* Penicillium Te+h)4)p B)k*e+i S. aureus

    NO MEDIUM

    ZONA

    HAMBAT 7CM8 TOTAL RERATA

    $ ( % '

    ( #aktosa % ( @ ) $+ ',*%( Maltosa & ( $ $ ' $

    -( De9trosa & ( $ $ ' $

    TOTAL % ) + ()

    G+)1ik Zon) H)m3)* Penicillium Te+h)4)p B)k*e+i E. coli 

    la kto s a m a l to s a de ks tro s a

    1.5

    2.25

    5.75

    zona hambat

    Zona Hambat Penicillium

    Medium Biakan

    5erdasarkan grafik di atas medium biakan yang "aling tinggi untuk 6ona

    hambat Penicillium terhada" bakteri E. coli yaitu dektrosa dengan rata?rata 6ona

    hambatnya yaitu *, @* mm. Kemudian matosa (,(* mm dan laktosa $,* mm.

    G+)1ik Zon) H)m3)* Penicillium Te+h)4)p B)k*e+i S. aureus

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    12/16

    la kto s a m a l to s a de ks tro s a

    4.5

    1 1

    zona hambat

    Zona Hambat Penicillium

    Medium Biakan

    5erdasarkan grafik di atas medium biakan yang "aling tinggi untuk 6ona

    hambat Penicillium terhada" bakteri S. aureus yaitu laktosa dengan rata?rata 6ona

    hambatnya yaitu ',* mm. Sedangkan maltosa dan dekstrosa sama yaitu $ mm.

    Selan0utnya dianalisis dengan menggunakan ANA=A tunggal

    • 4ona 1ambat Penicillium Terhada" 5akteri Escherichia coli

    /K J(38 )2

    12  J $(&,%%%%

    Fk Total J &(&((('(L.)(  /K 

    J $+ $(&,%%%% J @@,))@

    Fk 8langan J82+7

    2+7

    2+16

    2

    3   /K 

    J $%,%%%% $(&,%%%% J $

    Fk Perlakuan J6

    2+9

    2+23

    2

    4   /K 

    J $)$,* $(&,%%%% J '$,$))@

    Fk 2alat J Fk Total Fk 8langan Fk PerlakuanJ @@,))@ $ '$,$))@ J $@,*&&%

    Tabel AN

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    13/16

    5NT&,&* J t&,&* 9√ 2 KT Galat 

    4

    J (,''@ 9

    √ 2  x2,9167

    4 J (,**

    Tabel Notasi

    Pe+l)ku)n Re+)*) No*)si

    #aktosa $,* a

    Maltosa (,(* a

    Dekstrosa *,@* b

    • 4ona 1ambat Penicillium Terhada" 5akteri S. aureus

    /K J(26 )2

    12  J *),%%%%

    Fk Total J %(((@()(L.+(  /K 

    J $$& *),%%%% J *%,)))@

    Fk 8langan J32+6

    2+9

    2+8

    2

    3   /K 

    J )%,%%%% *),%%%% J @

    Fk Perlakuan J18

    2+4

    2+4

    2

    4   /K 

    J + *),%%%% J %(,)))@

    Fk 2alat J Fk Total Fk 8langan Fk PerlakuanJ *%,)))@ @ %(,)))@ J $'

    Tabel AN

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    14/16

    Maltosa $ A

    Dekstrosa ',* 5

    /(- Pem3)h)s)n

    Pada "enelitian ini dilakukan u0i agar untuk mengetahui akti;itas  Penicillium

    dalam menghambat "ertumbuhan E. coli dan S . aureus.

    /(-( 4ona 1ambat Penicillium Terhada" 5akteri Escherichia coli

    1asil "engukuran 6ona hambat dari ketiga medium biakan untuk 6ona

    hambat Penicillium  "ada u0i akti;itas terhada"  E. coli da"at dilihat "ada tabel di

    atas. 4ona hambat tertinggi yang terbentuk yaitu "ada medium dekstrosa sebesar 

    *,@* mm. Menurut Ingold $@*!, medium dekstrosa mengandung karbohidrat

    kom"leks yang kaya akan sumber karbon dan nitrogen yang dibutuhkan oleh

    fungi untuk melangsungkan metabolisme "rimer dan sekunder. Selain itu medium

    ini mengandung berbagai senyaa anorganik, ;itamin dan faktor "ertumbuhan

    Ingold,$@*!. 5erdasarkan uraian tersebut, sehingga  Penicillium da"at

    menghambat "ertumbuhan  Escherichia coli se-ara maksimal "ada medium

     biakakan dekstrosa dibandingkan dengan medium biakan maltose dan laktosa.

    Selian itu faktor lain yang menyebbakn akti;itas  Penicillium hanya sedikit di

    karenakan Penicillium lebih berefek terhada" bakteri gram "ositif, sedangkan  E.

    Coli meru"akan bakteri gram negatif. Sehingga aktifitas anti bakteri dari "enisilin

    tidak terlalu terlihat.

    /(-(% 4ona 1ambat Penicillium Terhada" 5akteri S. aureus1asil "engukuran 6ona hambat dari ketiga medium biakan untuk 6ona

    hambat Penicillium  "ada u0i akti;itas terhada" S. aureus da"at dilihat "ada tabel

    di atas. 4ona hambat tertinggi yang terbentuk yaitu "ada medium lakosa sebesar 

    ',* mm. akti;itas anti mikroba dari  Penicillium di sebebkan karena  Penisilin

    merintangimenghambat "embentukan sintesa dinding sel bakteri sehingga bila sel

     bakteri tumbuh dengan dinding sel yang tidak sem"urna maka bertambahnya

     "lasma atau air yang tersera" dengan 0alan osmosis akan menyebabkan dinding

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    15/16

    sel "e-ah sehingga bakteri men0adi mati. Penisilin beker0a dengan menghambat

     "embentukan dinding sel bakteri, dengan menghambat digabungkannya asam N?

    asetilmuramat non esensial ke dalam struktur muko"e"tida yang biasanya

    membuat sel men0adi kaku dan kuat. >ara ker0a ini 0uga berarti baha "enisilin

    hanya akan aktif beker0a "ada satuan "atogen yang sedang tumbuh dengan aktif.

    D)1*)+ Ru.uk)n

    Anonim. (&$$b. Staphylococcus aureus. om"any. 5altimore.

    /ardia6, S. $(. Mikrobiologi Pangan !. Fakarta: PT. 2ramedia Pustaka 8tama.

    2and0ar, I., Samson, G.A., Teel?=ermeulen, K.=.D.,

  • 8/17/2019 Zona Hambat Penicillium Dengan Berbagai Macam Medium Biakan[1]

    16/16

    Ingold, >.T.$@*. The 5iology o Publisher. #ondon

    Faet6, E. $). Mikrobiologi "edokteran. Edisi (&. Fakarta: E2>.

    Pitt, F.I., dan 1o-king, A.D. $@.  %ungi and %ood Spoilage. Se-ond Edition.#ondon: 5la-kie A-ademi- and Professional an Im"rint of >ha"man O 1all.

    =olk, T.F. (&&%. Tom &olk’s %ungus of #he Month for 'oember ())*. han, E.>.S. $++. Dasar+dasar Mikrobiologi. Filid (. Fakarta:

    8I Press.

    http://botit.botany.wisc.edu/toms_fungi/nov2003.htmlhttp://botit.botany.wisc.edu/toms_fungi/nov2003.html