IMUNOGENÉTICAProf. Dr. Cristiano José da Silva

A imunogenética encarrega de estudar os aspectos genéticos dos anticorpos, antígenos e suas interações. Em ciências biomédicas algumas áreas da imunogenética são muito importantes, dentre elas podemos citar:Estudo das doenças auto-imunes;Estudo das deficiências imunológicas;Estudo dos mecanismos de transplantes;

Estudo dos grupos sangüíneosLimitaremos a discorrer sobre alguns aspectos relacionados ao sistema sangüíneo ABO e sistema Rh.

Conta-se que, na Grécia antiga, os nobres bebiam o sangue de gladiadores mortos na arena, a fim de obterem a cura de diversos males, entre eles a epilepsia. Em 1492, no Século XV, para se curar de grave enfermidade, o papa Inocêncio VIII foi convencido a ingerir o sangue de três jovens que acabaram morrendo anêmicos, sem que se conseguisse restabelecer a saúde do pontífice. A primeira transfusão, com sangue humano é atribuída a James Blundell, em 1818 que, após realizar com sucesso experimentos em animais, transfundiu sangue humano em mulheres com hemorragia pós-parto.

retirado de: purosangue.wordpress.com

A descobertado sistema de grupo sangüíneo ABO ocorreu em 1900, final do Século XIX , o imunologista austríaco, Karl Landsteiner, observou que o soro do sangue de uma pessoa muitas vezes coagula ao ser misturado com o de outra, descobrindo o primeiro e mais importante sistema de grupo sangüíneo existente no organismo: o ABO.

Karl LandsteinerRetirado de: http://nobelprize.org/

A primeira transfusão, precedida de exame de compatibilidade ABO, foi realizada em 1907 por Reuben Ottenberg. No entanto, esse procedimento só passou a ser utilizado em larga escala a partir da Primeira Guerra Mundial (1914 - 1918).

O Locus ABO codifica especificamente glicosiltransferases que sintetizam antígenos A e B em hemácias. Para acontecer à síntese de antígeno A ou B um precursor denominado antígeno H tem que estar presente. Nas hemácias a enzima que sintetiza o antígeno H é codificada pelo locus H (FUT1). Na saliva e outras secreções corporais, a enzima que sintetiza o antígeno H é codificado pelo locus Se (FUT2).

Bactérias comuns no intestino humano possuem antígenos que são similares ou idênticos aos antígenos do grupo sangüíneo ABO. Estes estimulam a formação de anticorpos para antígenos em indivíduos que não possuem o correspondente antígeno em suas próprias hemácias, desta forma os indivíduos do tipo O, que não possui antígeno A e B, têm ambos os anticorpos anti-A e anti-B enquanto que indivíduos do tipo AB não têm nenhum.

O locus ABO está localizado no cromossomo 9 no 9q34.1-q34.2. ele contem 7 exons que ocupa mais de 18 kb DNA genômico. O alelo A e B difere um do outro devido a 7 substituições de nucleotídeos. Os resíduos de aminoácidos da posição 266 e 268 determinam a especificidade A ou B da glicosiltransferase codificada. O alelo O difere do A pela deleção da uma guanina na posição 261. A deleção causa a tradução de uma proteína sem atividade enzimática.

O locus H (FUT1) está localizado no cromossomo 19 na 19q13.3. ele contêm três exons que ocupa mais de 5 kb DNA genômico, e codifica uma fucosiltransferase que produze antígeno H em hemácias. Indivíduos que são recessivos para este alelo (hh) não produzem o antígeno H, e como o antígeno H é precursor essencial dos antígenos do grupo ABO, eles não produzirão antígenos A e B, entretanto, seus soros contem anti-A e anti-B junto com o anti-H. Este fenótipo raro (Bombay) de hemácias deficientes em H e denominado de fenótipo (Oh). Indivíduos com o fenótipo Bombay são saudáveis, mas se eles necessitarem de transfusão de sangue, os anticorpos em seu soro desencadeará reações

Grupo Sanguíneo

A B AB O

GlóbulosVermelhos

Na membrana Antígeno A Antígeno B Antígenos AB

Sem antígenos

No plasma Anti-A Anti-B Sem Anticorpos

Anti-A e Anti-B

hemolíticas agudas. Eles só podem receber produtos sangüíneos de pessoas com fenótipo Bombay.

O locus Se (FUT2) está localizado no cromossomo 19 na 19q13.3. ele contém dois éxons que ocupa 25 kb do DNA genômico. O locus Se codifica uma fucosiltransferase que é expressa no epitélio de tecidos secretores, como as glândulas salivares, trato gastrintestinal, e o trato respiratório. A enzima codificada catalisa a produção de antígenos H em secreções corporais. Indivíduos não secretores são recessivos (se se) para o locus Se. Eles não são capazes de produzir o antígeno H na forma solúvel e conseqüentemente não produzem o antígeno A e B.

Distribuição dos fenótipos sangüíneos na população dos EstadosUnidos da América

Grupo ABO% População

branca% População negra

O 45 49

A 40 27

B 11 20

AB 4 4

O locus Rh está localizado no braço longo do cromossomo 1 ( 1p36-p34). Ele contem genes RHD e RHCE. Os genes RHD e RHCE são estruturalmente homólogos e resultaram de uma duplicação de um gene ancestral comum. Cada gene RHD ou RHCE contêm 10 exons e ocupa uma seqüência de DNA de 75-kb. O gene RHD é flanqueado por duas seqüências altamente homólogas de 9-kb, chamadas de "Rhesus boxes". Acredita-se que uma recombinação desigual entre o Rhesus boxes dos homólogos é uma causa comum de deleção do gene RHD que é encontrada em aproximadamente 40% da população.

Os genes RHD e RHCE codificam uma proteína transmembrana com 400 resíduos de aminoácidos que atravessam a membrana da hemácia 12 vezes. A proteína RhD só difere da forma comum da proteína RhCE em 35 aminoácidos. O grupo sanguíneo Rh é um dos mais complexos grupos sangüíneos conhecidos em humanos. Ele é de primeira importância em obstetrícia sendo causador da eritroblastose fetal ou doença hemolítica do recém-nascido (DHRN).

A complexidade dos antígenos do grupo sangüíneo Rh é devido ao elevado polimorfismo dos genes que os codificam. Os genes RHD e RHCE que são rearranjados entre si produzindo híbridos de Rh codificadores de diferentes antígenos Rh. Até o presente são conhecidos aproximadamente 49 antígenos Rh.

DETERMINAÇÃO DOS FENÓTIPOS SANGUÍNEOS ABO E Rh

Nome:..................................................................................................data: / 20....

Objetivos:Determinar os fenótipos sangüíneos do sistema ABO e Rh;Explicar sobre alelos múltiplos;Explicar sobre codominância e dominância completa;Explicar sobre genética forense;Explicar sobre transfusão sangüínea;Explicar sobre reação antígeno-anticorpoExplicar sobre doença hemolítica do recém-nascido (DHRN).

Material:Lanceta descartávelSoros: anti-A e anti-BSoro anti-DÁlcool 70%Hipoclorito de sódio 1%Algodão estérilLâminas

Procedimento prático:1. Fazer a assepsia da polpa digital, normalmente do dedo mínimo, com álcool

70%;2. Usando lanceta estéril fazer a perfuração da polpa digital através de um

golpe rápido e firme;3. Pingar três gotas de sangue sobre uma lâmina limpa em locais diferentes;4. Sobre a primeira gota de sangue pingar uma gota de soro anti-A, sobre a

segunda gota pingar uma gota de soro anti-D e sobre a terceira gota de sangue pingar uma gota de soro anti-B;

5. Através de movimentos brandos, com a lamina, misturar o sangue com o soro e proceder a leitura do resultado.

Anti-A anti-D anti-B

Gotas de sangue

Interpretação:

1. Primeira possibilidade:Coagula somente a gota azul: Fenótipo A Rh negativo

2. Segunda possibilidade:Coagula somente a gota amarela: Fenótipo B Rh negativo

3. Terceira possibilidade:Coagula a gota amarela e a azul: Fenótipo AB Rh negativo

4. Quarta possibilidade: não coagula nenhuma gota: Fenótipo O Rh negativo

Obs: em qualquer uma das possibilidades anterior se houver coagulação da gota central o individuo será Rh positivo

Seu resultado:...................................................................................................

Atividade:Determine os possíveis fenótipos e genótipos de seus pais em relação aos Sistemas ABO e Rh. (em casos de pessoas casadas determine os possíveis fenótipos dos filhos)

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Borges-Osório, M.R. e Robinson, W.M. Genética Humana. 2ª Ed. 2001, Artmed.

Daniels G. Human Blood Groups, Second Ed. 2002, Blackwell Science. http://www.arrakis.es/~rfluengo/gruposanguineo.html

http://www.hemonline.com.br/

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=Books&cmd=search&doptcmdl=TOCView&term=blood+abo+being+AND+rbcantigen%5Bbook%5D

www.diagnosticosdaamerica.com.br/exames/grupo_sanguineo.html

Yamamoto F, Clausen H, White T, Marken J, Hakomori S. Molecular genetic basis of the histo-blood group ABO system. Nature 1990; 345:229-33.