1

Actualización en el Diagnóstico de las enfermedades parasitarias

VIII Jornadas de Laboratorio Clínico

Hotel Enjoy Viña del Mar, 9 de Noviembre de 2009

M. Sc. L.B. Patricia Neira O (cPhD).

Cátedra de Parasitología Departamento de Preclínicas

Escuela de Medicina Facultad de Medicina

Universidad de Valparaíso

2

Dogma Central de la Biología Molecular

El ADN se traduce a ARN y este dirige la producción de proteínas

3

CTTGTGGAGGTGGGTGCTCT

TTTATCCTCCGTTGGCATAGT

TTATGGTTAAGACTACGACGG

TATCTGATCGTCTTCGATCCC

CTAACTTTCGTTCTTGATTAAT

GAAAACATCCTTGGCAAATGC

TTTCGCATTAGTTTGTCTTTAA

CAAATCTAAGAATTTCACCTC

TGACTGTTAAATACAAATGCC

CCCAACTGTCCCTATTAATCA

TTATTCTTATCTTAGAACCAAT

AAAAAAGATAAAAATCTTTAA

4

Métodos de detección de ADN

Diagnóstico por detección de secuencias de nucleótidos

específicas que son propias para cada especie del patógeno.

Amplificación de secuencia blanco: PCR

(Polymerase Chain Reaction).

5

Esquema de amplificación de un fragmento de ADN por PCR

Ciclo N°

N° copias de ADN blanco

1 2

2 4

3 8

4 16

5 32

6 64

20 1.048.576

30 1.073.741.824

Denaturación

Templado

Extensión

6

- Parasitosis con escasos parásitos

- Parasitosis transplacentarias

- Confirmación diagnóstica

- Estudio de especies y cepas parasitarias

- Estudio en vectores y hospedadores intermediarios

- Control post terapia

Aplicación en Parasitología

7

CHILE:

- Tripanosomiasis

- Hidatidosis

- Fasciolosis

- Amebiasis

- Toxoplasmosis

- Criptosporidiosis

- Isosporosis

8

Enfermedad de Chagas

67 niños menores de 10 años con Chagas determinado por

serología convencional, PCR 97% de (+).

79 donantes de sangre serológicamente (+) para T. cruzi,

del área Metropolitana, sensibilidad del PCR fue de 69,3%.

9

GARCIA A, BAHAMONDE MI, VERDUGO S et al. Infección transplacentaria por Trypanosoma cruzi: Situación

en Chile. Rev. Méd. Chile 2001: 129; 330-2.

26 R.N. : PCR, xenodiagnóstico, microstrout

RIFI y ELISA anti IgG y anti IgM

PCR: Primer’s 121 y 122

Minicírculo de DNA de

kinetoplasto (kDNA)

10

26 R.N. : 14 (54%) resultaron positivos por PCR,

4 (15%) xenodiagnóstico

2 ( 8%) por microstrout

RIFI y ELISA anti IgG: 100% (+)

RIFI y ELISA anti IgM: (-)

Banda de 330 pb

PCR surge como una alternativa más sensible, específica y rápida para el

diagnóstico de la enfermedad connatal por Trypanosoma cruzi

Minicírculo de

DNA de

kinetoplasto

dbbm.fiocruz.br/genoma/tcruzi/t.cruzi.html

11

GARCIA A, BAHAMONDE MI, VERDUGO S et al. Infección transplacentaria por Trypanosoma cruzi: Situación en

Chile. Rev. Méd. Chile 2001: 129; 330-2

12

Genotipos clonales de T cruzi en RN con Enfermedad de Chagas

transplacentaria en dos comunas de endemia Chagásica en Chile

Clon 39: zonas de alta endemia, transmisión es menos

frecuente y los RN mayoritariamente sanos al nacer

Clon 19/20: zonas de baja endemia, transmisión es más

frecuente y afecta con mayor severidad a los niños

GARCIA A, BAHAMONDE MI, VERDUGO S et al. Infección transplacentaria por Trypanosoma cruzi: Situación en Chile.

Rev. Méd. Chile 2001: 129; 330-2

13

Cepas de T. cruzi

T. cruzi I (TcI) T. cruzi II (TcII)

Ciclo silvestre Ciclo domiciliario

Clon 19/20 Clon 39 Clon 32/33

Elevada infección de Triatoma.

Baja frecuencia en humanos

Cuadros encefálicos

Músculo esquelético y tejido cardíaco (20%)

Infección moderada de Triatoma.

Alta frecuencia en humanos

Músculo esquelético y tejido cardíaco (83%)

Hígado y Bazo

Baja infección de Triatoma.

Baja frecuencia en humanos

¿ Infección transplacentaria ?

La cepa del parásito influye en transmisión y formas de presentación clínica de

Enf. de Chagas transplacentaria en diferentes zonas geográficas del país

14

Enfermedad de Chagas Transplacentaria

- PCR es más sensible que el xenodiagnóstico para detección de infección transplacentaria por T cruzi .

- Permite evaluar evolución y desaparición de parasitemias, post terapia médica.

- Permite establecer las cepas involucradas en la infección transplacentaria

- Genotipo clonal presente en RN chilenos es Clon 39 seguido por Clon 19/20, no se ha encontrado el clon 32/33

- Diferentes clones según áreas geográficas estudiadas y diferentes grados de transmisión

GARCIA A, BAHAMONDE MI, VERDUGO S et al. Infección transplacentaria por Trypanosoma cruzi:

Situación en Chile. Rev. Méd. Chile 2001: 129; 330-2.

15

Evaluación de los programas de

control Vectorial

Requiere:

- Conocer prevalencia de triatominos que persisten.

- Conocer cuantos están infectados por T. cruzi

- Establecer el Indice Tripano-Triatomino

Comparación de PCR con análisis directo de intestino y deyecciones de T. infestans y obtención del índice tripano – triatomino.

Tesis Pregrado Medicina Veterinaria, 2002

Esquema PCR para establecer el índice

tripano/triatomínico en los triatomas

Triatoma infestans

Identificación de estado ninfal y sexo en adultos

Extracción de alas, patas y cabeza

T. infestans vivos T. infestansmuertos

Fecas e intestino Maceración de Intestino

Extracción de ADN

Amplificación de ADN (PCR)

Electroforesis

Revelado y Fotografía

Comparación de PCR con análisis directo de intestino y deyecciones de T. infestans y obtención del índice tripano – triatomino. Tesis

Pregrado Medicina Veterinaria, 2002

17

Indice tripano/triatomino establecido por PCR para

Triatoma infestans y Mepraia spinolaiI a VI Región Chile (Abril 1.999 – Agosto 2.001)

Especie Total analizado

(+) PCR Indice T/T % de (+)

321 69 21,5

232 89 38,4

Comparación de PCR con análisis directo de intestino y deyecciones de T. infestans y obtención del índice tripano – triatomino. Tesis

Pregrado Medicina Veterinaria, 2002

Triatoma infestans

(Asociado a Chaguales y pedregales)

44 18 40,9

18

Indice tripano/triatomino establecido por PCR

para Mepraia spinolai y Triatoma infestans

Calera de Tango, Til Til (Noviembre 2.003 – Marzo 2004)

Especie Total analizado

(+) PCR Indice T/T % de (+)

Mepraia spinolai(Asociado a Puya sp Bromeliaceae)

225 96 42,7

19

Evidencia molecular y microscópica de T. cruzi en

Mepraia spinolai (Reserva Nacional Las Chinchillas- 2002)

Botto-Mahan C, Ortiz S, Rozas M, Cattan P, Solari A. DNA evidence of Trypanosoma cruzi in the Chilean wild

vector Mepraia spinolai (Hemiptera: Reduviidae). Mem Inst Oswaldo Cruz 2005; 100(3): 237-9.

Estado Ninfal PCR (%) Microscopía (%) Tamaño muestra (N)

I – II 48,2 3,6 56

III 45,2 11,9 42

IV 38,3 10,6 47

V 54,1 16,2 37

20Zulantay I. Enfermedad de Chagas crónica. Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR) Aplicada al diagnóstico y evaluación

quimioterapéutica. Tesis Doctorado en Biotecnología, 2005

Enfermedad de Chagas crónica

21

Zulantay I. Enfermedad de Chagas crónica. Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR) Aplicada al diagnóstico y evaluación

quimioterapéutica. Tesis Doctorado en Biotecnología, 2005

- Sensibilidad de PCR en chagásicos crónicos tratados. Hibridación de

productos de PCR con sonda de kDNA de T. cruzi marcada con P32

- Correlacionar 7 años post terapia, presencia o ausencia de T. cruzi,

determinada por PCR, XD.

- Comparar sensibilidad y precocidad entre microscopía y PCR aplicada a

deyecciones de triatominos alimentados sobre chagásicos crónicos

mediante XD y complementariedad de ambas técnicas

- Determinar 10 años post terapia, si existe asociación entre la positividad

de XD y PCR

22

Zulantay I. Enfermedad de Chagas crónica. Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR) Aplicada al diagnóstico y

evaluación quimioterapéutica. Tesis Doctoral 2005

A= Banda 330pb kDNA T. cruzi (primers 121-122)

B= Membrana de nylon con DNA transferido mediante Southern Blot.

Banda 330pb detectada mediante sonda de kDNA total del parásito

marcada con P32

23

Zulantay I. Enfermedad de Chagas crónica. Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR) Aplicada al diagnóstico y evaluación

quimioterapéutica. Tesis Doctorado en Biotecnología, 2005

- Se evidenció banda de 330 bp de kDNA de T. cruzi en el 60% y 53% de

chagásicos crónicos tratados con Itraconazol y Alopurinol, con XD (-).

- Siete años post terapia se demostró independencia entre presencia o

ausencia de T. cruzi determinada por XD y PCR.

- En XD (+), la PCR mostró mayor precocidad que la microscopía al

detectar kDNA de T. cruzi en el 92 y 100% de los casos a los 30 y 60 ds

de incubación en los triatominos. El XD demostró positividad en el 44% y

84% en los mismos periodos.

- PCR fue más sensible al detectar el 36% de casos XD (-).

- Ambas técnicas muestran complementariedad, a los 30 ds el 48% de las

PCR fue (+) y los XD (-)

52 pacientes chagásicos crónicos

24

Zulantay I. Enfermedad de Chagas crónica. Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR) Aplicada al diagnóstico y

evaluación quimioterapéutica. Tesis Doctoral 2005

A y B= Banda 330pb de kDNA de T. cruzi mediante PCR en deyecciones

de triatominos usados en XD a pacientes chagásicos crónicos.

Enfermedad de Chagas crónica

25Coronado X, Zulantay I, Albrecht H et al. Variation in Trypanosoma cruzi Clonal Composition Detected in Blood Patients and

Xenodiagnosis Triatomines: Implications in the Molecular Epidemiology of Chile. Am J Trop Med Hyg 2006; 74(6):1008-12.

Clon Sangre paciente Fecas triatomas alimentados por paciente (XD)

19 26,3 7,0

32 17,5 0,0

39 8,8 19,0

Mixto 45,5 54,2

1 paciente (19)Vinchuca (32, 39 y 43)

11

1 paciente (32)Vinchuca (43)

11

5% de los pacientes presentó infección por solo 1 clon, detectada en paciente y Triatoma

La mayoría de los pacientes se infectan con varios clones de T. cruzi:

1)Una infección por un vector que contiene una infección mixta

2) Una reinfección con un clon distinto

27

HIDATIDOSIS

Neira P. Identificación de las cepas de Echinococcus granulosus causante de la hidatidosis humana en algunas zonas de Chile.

Tesis de Magister en Ciencias Biológicas mención Parasitología, 2001 .

Neira P; Subercaseaux B, De La Rosa A, Rusowski L.Hidatidosis hepatopulmonar en una preescolar, caso clínico: case

report. Rev Chil Pediatr 2006; 77(2):169-76.

28

HIDATIDOSIS

Cepa Hospedadores

G1 Oveja doméstica, animales domésticos, humanos

G2 Oveja de Tasmania, Humanos Tucumán

G3 Búfalos

G4 Caballos y perros

G5 Bovinos

G6 Camellos, perros, humanos

G7 Cerdos

G8 Cepa del Norte

G9 Cerdos

G10 Ciervos y Roedores de Finlandia

Pacientes= 21

Muestras= 30 quistes hidatídicos y/o hidátides (hepáticos,

pulmonares, óseos)

Procedencia: Hosp. San Juan de Dios – Stgo

Hosp. del Tórax – Stgo

Hosp. del Profesor – Stgo.

Hosp. Carlos van Buren – Valpso.

Exámenes: RIFI

Directos: Fertilidad y Vitalidad de Protoescólices, PCR-RFLP.

Primers PCR: BD1 y 4S (hibridizan la región ITS-1 de E. granulosus).

Enzimas de Restricción: AluI, CfoI, MspI, RsaI, TaqI

Neira P. Identificación de las cepas de Echinococcus granulosus causante de la hidatidosis humana en algunas zonas de Chile.

Tesis de Magister en Ciencias Biológicas mención Parasitología, 2001.

Neira P; Subercaseaux B, De La Rosa A, Rusowski L. Hidatidosis hepatopulmonar en una preescolar, caso clínico: case

report. Rev Chil Pediatr 2006; 77(2):169-76.

30

Fértiles 25/30 (83,3%) vs Infértiles 5/30 (16,7%)

Elisa IgG (+): 12/16 (75%) vs 2/3 (66%)

Hepáticos (+): 3/6 (50%)

Pulmonares (+): 7/9 (78%)

Banda de 0.9 - 1 KbITS-1

Neira P. Identificación de las cepas de Echinococcus granulosus causante de la hidatidosis humana en algunas zonas de Chile.

Tesis de Magister en Ciencias Biológicas mención Parasitología, 2001

Rsa-I

ITS-1

Cepa oveja - G1

Alu-I

Cfo-I

Msp-I

Echinococcus granulosus

CHILE

Taq-I

32

Región Localidad N° Pacientes (*)

IV Alcanes alto, Punitaqui, Ovalle

3

V Cabildo 1

Metropolitana Lonquén, Melipilla (2), Renca

4

VI Doñihue, Matanzas, Requinoa

3

VII Sn Javier, Vichufquen

2

VIII Nahueltoro, Chillán 2

IX Cherquenco, Temuco, Villarica

2

XII Pta. Arenas 1

* 2 pacientes procedencia desconocida

Procedencia de 19 hospedadores humanos de

E. granulosus cepa oveja o G1

33

Echinococcus granulosus - CHILE

M'rad S, Filisetti D, Oudni M, Mekki M, Belguith M,

Nouri A. et al. Molecular evidence of ovine (G1)

and camel (G6) strains of Echinococcus

granulosus in Tunisia and putative role of cattle in

human contamination. Vet Parasitol 2005; 129:

267-72.

34

Hidatidosis N° casos cepa

Humana 21 Oveja

Ovina 20 Oveja

La cepa detectada mediante PCR-RFLP en quistes hidatídicos:

fértiles e infértiles de humanos, fértiles de ovejas, de diferente

procedencia de Chile, es cepa oveja o G1.

1

Región Localidad N° Pacientes (*)

IV Alcanes alto, Punitaqui, Ovalle

3

V Cabildo 1

Metropolitana Lonquén, Melipilla (2), Renca

4

VI Doñihue, Matanzas, Requinoa

3

VII Sn Javier, Vichufquen

2

VIII Nahueltoro, Chillán 2

IX Cherquenco, Temuco, Villarica

2

XII Pta. Arenas 1

* 2 pacientes procedencia desconocida

Procedencia de 19 hospedadores humanos de

E. granulosus cepa oveja o G1

2

Echinococcus granulosus - CHILE

M'rad S, Filisetti D, Oudni M, Mekki M, Belguith M,

Nouri A. et al. Molecular evidence of ovine (G1)

and camel (G6) strains of Echinococcus

granulosus in Tunisia and putative role of cattle in

human contamination. Vet Parasitol 2005; 129:

267-72.

3

Hidatidosis N° casos cepa

Humana 21 Oveja

Ovina 20 Oveja

La cepa detectada mediante PCR-RFLP en quistes hidatídicos:

fértiles e infértiles de humanos, fértiles de ovejas, de diferente

procedencia de Chile, es cepa oveja o G1.

4

Fértiles Hepáticos y Pulmonares:

Banda de 0.9 - 1 Kb ITS-1

Alvarez C. Caracterización de cepas de Echinococcus granulosus en bovinos de Chile por Reacción en Cadena de la Polimerasa

(PCR) y Polimorfismo en el Tamaño de los Fragmentos de Restricción (RFLP) . Tesis de Pregrado Medicina Veterinaria, 2002.

5

Rsa-I

ITS-1

Cepa oveja – G1

Alu-I

Cfo-I

Msp-I

Taq-I

Echinococcus granulosus

CHILE

6

Echinococcus granulosus – Temuco CHILE

Manterola C; Melo A; Vial M; Roa JC; Mora J. Descripción de genotipos de Echinococcus granulosus obtenidos de especímenes de

hidatidosis humana. Rev Chil Cir 2006; 58(6):441-6.

PCR (+): 22/25 aislados

3 Genotipos: G1,G4,G7

21: G1 o G7

1: G4 o G7

G1:oveja

G4: caballo-perro

G7: cerdo

7

Echinococcus granulosus

G1: de alta fertilidad y preferente en ovejas

G4: sin preferencia de hospedadores y de localización exclusiva en el

hígado de los animales parasitados

G7: de preferencia en cerdos, de > fertilidad en quistes hepáticos que

pulmonares

Variabilidad de genotipos en distintos hospedadores y en diferentes áreas del planeta.

Importante conocer genotipos que afectan a nuestros pacientes (podrían ser diferentes

en distintas áreas geográficas del territorio nacional).

8

Echinococcus granulosus CHILE

PCR Eg9. Detección de ADN de Eg en muestras

de hidatidosis humana.

PCR Eg16. Detección de ADN de Eg en muestras

de hidatidosis humana.

Digestión de productos PCR Eg9 con la enzima RSA I.

Carril 1: no corta.

Carriles 2 a 5: muestras positivas digeridas con RSA I con

fragmentos de aproximadamente 400 y 100 pb.

Digestión de productos PCR Eg16 con la enzima RSA I.

Carriles 1a 5: muestras positivas para Eg no digeridas

con la enzima RSAI

FASCIOLOSIS

Caracterización molecular de Fasciola hepatica obtenidas

de bovino, equino y ovino (RAPDs-PCR).

Se evidenció variabilidad genética de F. hepatica intra e

interespecie (polimorfismo).

Fragmentos de amplificación: 135 y 741 pb.

Vargas D, Vega M, González CG. Aproximación a una caracterización molecular de Fasciola hepatica por la técnica RAPDs – PCR.

Parasitol Latinoam 2003; 58: 11-6.

FASCIOLOSISbovino equino ovino

Vargas D, Vega M, González CG. Aproximación a una caracterización molecular de Fasciola hepatica por la técnica RAPDs – PCR.

Parasitol Latinoam 2003; 58: 11-6.

Variación intraindividuo: Hígado de bovino

11

PCR como método de diferenciación entre

E. histolytica y E. dispar

PCR en secuencias altamente repetitivas de ADN circular extracromosomal.

Amplificación de regiones únicas de SSUrRNA a partir de quistes en heces.

Tesis Doctoral aún sin resultados

AMEBIASIS

12

ToxoplasmosisImplementación PCR en Sangre y Tejido de Ratones

Toxoplasmosis Connatal:

Caso Clínico: Estudio binomio madre-hijo para

detección de infección por Toxoplasma con PCR (gen

B1) logra demostrar positividad de ambos.

Sensibilidad PCR en líquido amniótico: 97%

Valor predictivo (+) 99,7% y (-) 98,7%.Hohfeld P, Daffos F, Costa JM y cols: Prenatal diagnosis of congenital toxoplasmosis with a polymerase-chain reaction

test on amnioic fluid. N Engl J Med 1994; 331(11): 695-9.

Valdés E, Quiroz L, Parra M. Hallazgos ultrasonografico prenatales atipicos asociados a toxoplasmosis connatal. Rev Chil Obstet

Ginecol 2003; 68(4): 318-321

13

Toxoplasmosis

Fuentes I , Rodriguez M , Domingo CJ, del Castillo F , Juncosa T , Alvar J. Urine sample used for congenital toxoplasmosis diagnosis

by PCR. J Clin Microbiol 1996;34: 2368–71.

Reporte de caso: Una niña de 27 días de edad, baja de peso; con hidrocefalia, lesiones

isquémicas en corteza cerebral, desprendimiento de retina. La madre no había sido probado

para la toxoplasmosis durante el embarazo

Criptosporidiosis

1 2 3 4 5 6

7

CTTGTGGAGGTGGGTGCTCTTTTAT

CCTCCGTTGGCATAGTTTATGGTTAA

GACTACGACGGTATCTGATCGTCTT

CGATCCCCTAACTTTCGTTCTTGATT

AATGAAAACATCCTTGGCAAATGCTT

TCGCATTAGTTTGTCTTTAACAAATC

TAAGAATTTCACCTCTGACTGTTAAA

TACAAATGCCCCCAACTGTCCCTATT

AATCATTATTCTTATCTTAGAACCAAT

AAAAAAGATAAAAATCTTTAA

Especie Hospedador tipo

Cryptosporidium andersoni Bos taurus (vacuno)

Cryptosporidium baileyi Gallus gallus (pollo)

Cryptosporidium bovis Bos taurus (vacuno)

Cryptosporidium canis Canis familiaris (perro doméstico)

Cryptosporidium fayeri Macropus rufus (canguro rojo)

Cryptosporidium felis Felis catis (gato doméstico)

Cryptosporidium galli Gallus gallus (pollo)

Cryptosporidium hominis Homo sapiens (humano)

Cryptosporidium macropodum Macropus giganteus (canguro gris)

Cryptosporidium meleagridis Meleagris gallopavo (pavo)

Cryptosporidium molnari Sparus aurata (besugo)

Dicentrarchus labrax (lubina europea)

Cryptosporidium muris Mus musculus (ratón casero)

Cryptosporidium parvum Mus musculus (ratón casero)

Cryptosporidium ryanae n. sp. Bos taurus (vacuno)

Cryptosporidium scophthalmi Scophthalmi maximus (rodaballo)

Cryptosporidium serpentis Elaphe guttata (serpiente maicera)

Elaphe subocularis (serpiente ratera)Sanzinia madagascarensis (boa de Madagascar)

Cryptosporidium suis Sus scrofa (cerdo doméstico)

Cryptosporidium varani Varanus prasinus (monitor verde)

Cryptosporidium wrairi Cavia porcellus (cuy)

Cryptosporidium xiaoi n. sp Ovis aries (oveja)

Especies de Cryptosporidium validadas

Nested PCR - RFLP

N

E

S

T

E

D

Nested PCR – RFLP

parvum

hominis

felis

canis

meleagridis

Especies y Genotipos de Cryptosporidium en Chile

Productos

Nested PCR

Digestión SspI

Digestión AseI

1 2 3 4 5 6

71 y 2: infección C. parvum

3 y 4: infección C. hominis

5 y 6: C. parvum bovino Chile

7: C. parvum ternero

Granada España

4: C. hominis en paciente

pediátrico inmunocompetente

1 2 3 4 5 6

7

1 2 3 4 5 6

7

Nested PCR y RFLP para Cryptosporidium de procedencia humana

Carril 1y 4= PCR-2 Ooquistes de CryptosporidiumCarril 2 y 5 = SspI Ooquistes de CryptosporidiumCarril 3 = AseI Ooquistes de C. parvumCarril 6 = AseI Ooquistes de C. hominis

1 2 3 4 5 6

830 pb

625 pb

449 pb

254 pb

110 pb

561 pb

PCR 2

830 pb

RFLP

AseISsp I

Cryptosporidium449, 254 y 110 pb

parvum 625 pb

hominis 561 pb

Nested PCR - Secuenciación

Muestra

Coproparasitario

Seriado ZN

Lavado Shock Térmico

Extracción de ADN

PCR 1

PCR 2PurificaciónSecuenciación

Electroferograma Secuencia Nucleotídica

SEQUIN NCBISecuencia de consenso

Máxima

Identidad

BLAST

Cryptosporidium

parvum

hominis

felis

canis

meleagridis

N

E

S

T

E

D

(+)

Cryptosporidium sp

Nested PCR

510 pb

510 pb

BLAST (Basic Local Alignment Search Tool)

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/plinkcgi.cgi?CMD=Get&OPL=BlastHomeAd

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/

GATO

CRYPTOSPORIDIOSIS

Hallazgos de Cryptosporidium en mamíferos en cautiverio

Total animales Zoo= 777 131 muestras de mamíferos: 12 positivas (28,6%)

Hallazgos de Cryptosporidium en aves en cautiverio

Total animales Zoo= 777 84 muestras de aves: 6 positivas (7,14%)

Especies de Cryptosporidium en Chile

(N=3.741)

C. hominis

C. parvum

C. meleagridis

C. muris

18 secuencias en humanos

32 secuencias en animales

POTENCIALES RUTAS DE TRANSMISION DE OOQUISTES DE CRYPTOSPORIDIUM spp

CONTACTO

DIRECTOALIMENTOS

AGUA

Carne y

leche cruda

Alimentos

preparados

Verduras y

Frutas

frescas

Hielo para

bebida

Agua de Irrigación

contaminada

Aguas

Recreacionales

contaminadas

- Lagunas, Lagos

- Arroyos

- Estanques

-Ríos

- Vertientes

Piscinas

Fuente de Agua

Contaminada

Humanos

Infectados

Animales

infectados

-Pareja sexual

- Miembros del hogar

- Contacto Nosocomial

- Contacto en centros

de cuidado

- Mascotas

- Ganado

- Contacto veterinario

- Animales Silvestres

Mascotas Animales SilvestresGanado

Agua de bebida

contaminada

Falla en Planta

de Tratamiento

Humanos

Colector, Manipulador, Preparador

35

ISOSPOROSIS

100 1 2

pb

510

Carril 1: Marcador de PM

Carril 2: Muestra 1 Ooquiste de

Isospora spp

Carril 3: Muestra 2 Ooquiste de

Isospora spp.

- Identificación de fuentes y modos de transmisión

- Diagnóstico de infecciones leves

- Diagnóstico de infecciones extraintestinales

- Constatar erradicación del parásito post terapia

... Muchas Gracias

Cátedra de Parasitología Escuela de Medicina Universidad de Valparaíso

Hontaneda 2653 Valparaíso

patricia.neira@uv.cl Fono:32-2507349 Fax: 32-2507321