uji konsentrasi substrat.docx

LAPORANPRAKTIKUM BIOKIMIA PANGAN

ENZIM IUJI KONSENTRASI SUBSTRAT

Diajukan untuk Memenuhi PersyaratanPraktikum Biokimia Pangan

Oleh :

Nama : Siti ArmilahNRP : 133020265Kelompok/Meja : J/6Asisten : Rini Nurcahyawati STgl. Percobaan : 07 April 2015Tgl. Pengumpulan : 13 April 2015

LABORATORIUM BIOKIMIA PANGANPROGRAM STUDI TEKNOLOGI PANGAN

FAKULTAS TEKNIKUNIVERSITAS PASUNDAN

BANDUNG2015

Laboratorium Biokimia Pangan Enzim I (Uji Konsentrasi Substrat)

I PENDAHULUANBab ini akan menguraikan mengenai : (1) Latar Belakang

Percobaan, (2) Tujuan Percobaan, (3) Prinsip Percobaan, dan (4) Reaksi Percobaan.

1.1. Latar Belakang PercobaanEnzim dikenal untuk pertama kalinya sebagai protein

oleh Sumner pada tahun 1926 yang telah berhasil mengisolasi urease dari ‘kara pedang’ (jack bean). Ureasi adalah enzim yang dapat menguraikan urea menjadi CO2 dan NH3. Beberapa tahun kemudian Northrop dan Kuintiz dapat mengisolasi pepsin, tripsin, kimotripsin. Selanjutnya makin banyak enzim yang telah dapat diisolasi dan telah dibuktikan bahwa enzim tersebut ialah suatu protein (Poedjiadi, 2009).

Fungsi suatu enzim ialah sebagai katalis untuk proses biokimia yang terjadi dalam sel maupun diluar sel. Enzim dapat berfungsi sebagai katalis yang sangat efisien, disamping itu mempunyai derajat kekhasan yang tinggi (Poedjiadi, 2009).

Substrat merupakan senyawa yang bereaksi dengan bantuan enzim. Sebagai contoh enzim yang menguraikan urea (substrat) dinamakan urease. Kelompok enzim yang mempunyai fungsi sejenis diberi nama menurut fungsinya, misalnya hidrolase adalah kelompok enzim yang mempunyai fungsi sebagai katalis dalam reaksi hidrolisis. (Poedjiadi, 2009).

Pengaruh konsentrasi substrat pada laju aktivasi enzim, mula-mula laju naik dengan pesat dengan naiknya konsentrasi substrat. Kenaikan konsentrasi substrat selanjutnya tidak berpengaruh pada laju, laju menjadi tidak bergantung pada konsentrasi substrat (Pelczar, 1986).

Semakin tinggi konsentrasi substrat, semakin cepat kerja enzim, tapi jika kerja enzim telah mencapai titik maksimal, maka kerja enzim berikutnya akan konstan (Safitri, 2010).

1.2. Tujuan Percobaan


Untuk mengetahui pengaruh konsentrasi substrat terhadap kecepatan reaksi.

1.3. Prinsip PercobaanBerdasarkan konsentrasi substrat yang dapat

mempengaruhi kecepatan reaksi.

1.4. Reaksi Percobaan

Gambar 1. Reaksi Percobaan Uji Konsentrasi Substrat


II METODE PERCOBAANBab ini akan menguraikan mengenai : (1) Bahan yang

Digunakan, (2) Pereaksi yang Digunakan, (3) Alat yang Digunakan, dan (4) Metode Percobaan.

2.1. Bahan yang DigunakanBahan yang digunakan dalam Uji Konsentrasi Substrat

adalah Kacang Kedelai, Apel, dan Kentang.

2.2. Pereaksi yang Digunakan Pereaksi atau substrat yang digunakan dalam Uji

Konsentrasi Substrat adalah urea, dan katekol.

2.3. Alat yang DigunakanAlat-alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah

pipet tetes, tabung reaksi, dan rak tabung reaksi.


2.4. Metode Percobaan


5 tetes 20 tts 15 tetes

10 tts

25 tetes Aquadest

SubstratBiarkan 1’

A A A

Simpan di suhu kamar Masing-masing 1 ml

Ekstrak

A A A

Segera Tuangkan 1 1 1

Untuk ureaLakukan tambahkan pp 1 tetesBersamaan A A A

Amati warna tiap tabungGambar 2. Metode Percobaan Uji Konsentrasi Substrat


III HASIL PENGAMATAN

Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Hasil Pengamatan, dan (2) Pembahasan.

3.1. Hasil Pengamatan

Tabel 1. Hasil Pengamatan Uji Konsentrasi Substrat

SubstratKonsentrasi

Substrat Substrat Warna Hasil1

Hasil2Substrat Aquad

est

Urea

25 tetes -

Kacang Kedelai

Ungu + +++

15 tetes 10 tetes

Ungu +++ ++

5 tetes 20 tetes

Ungu ++ +

Katekol

25 tetes -

Apel

Bening Kekuningan

+++ +++

15 tetes 10 tetes

Bening Kekuningan

++ ++

5 tetes 20 tetes

Bening Kekuningan

+ +

Katekol

25 tetes -Kentang

Coklat +++ +++15 tetes 10

tetesCoklat ++ ++

5 tetes 20 tetes

Coklat + +

Sumber : Hasil I : Siti Armilah dan Kania Bunga, Kelompok J, Meja 6, 2015. Hasil II : Laboratorium Biokimia Pangan, 2015.

Keterangan : (+++) Enzim aktif bekerja ( ++ ) Enzim kurang aktif bekerja


( + ) Enzim tidak bekerja

Gambar 3. Hasil Pengamatan Uji Konsentrasi Substrat

3.2. PembahasanBerdasarkan hasil pengamatan dapat diketahui pada

sampel kacang kedelai hasil yang seharusnya enzim aktif bekerja pada substrat urea dengan substrat sebanyak 25 tetes, sedangkan pada sampel apel dan kentang enzim aktif bekerja pada substrat katekol dengan substrat sebanyak 25 tetes.

Substrat merupakan senyawa yang bereaksi dengan bantuan enzim. Sebagai contoh enzim yang menguraikan urea (substrat) dinamakan urease. Kelompok enzim yang mempunyai fungsi sejenis diberi nama menurut fungsinya, misalnya hidrolase adalah kelompok enzim yang mempunyai fungsi sebagai katalis dalam reaksi hidrolisis. (Poedjiadi, 2009).

Konsentrasi enzim yang tetap, konsentrasi substrat akan menaikkan kecepatan reaksi. Akan tetapi pada batas konsentrasi tertentu, tidak terjadi kenaikan kecepatan reaksi walaupun konsentrasi substrat diperbesar. Agar dapat terjadi kompleks enzim substrat, diperlukan adanya kontak antara


enzim dengan substrat. Kontak ini terjadi pada suatu tempat atau bagian enzim yang disebut bagian aktif. Pada konsentrasi substrat rendah, bagian aktif enzim ini hanya menampung substrat sedikit. Bila konsentrasi substrat diperbesar, makin banyak substrat yang dapat berhubungan dengan enzim pada bagian aktif tersebut. Dengan demikian, konsentrasi kompleks enzim substrat makin besar pada hal ini menyebabkan makin besarnya kecepatan reaksi. Pada suatu batas konsentrasi substrat tertentu, semua bagian aktif telah dipenuhi oleh substrat atau telah jenuh dengan substrat. Dalam keadaan ini, bertambah besarnya konsentrasi kompleks enzim substrat sehingga jumlah hasil reaksi-reaksi pun tidak bertambah besar (Poedjiadi, 2009).

Grafik 1. Pengaruh Konsentrasi Substrat Terhadap Kecepatan Reaksi

Pengaruh konsentrasi substrat pada laju aktivasi enzim, mula-mula laju naik dengan pesat dengan naiknya konsentrasi substrat. Kenaikan konsentrasi substrat selanjutnya tidak berpengaruh pada laju, laju menjadi tidak bergantung pada konsentrasi substrat (Pelczar, 1986).

Dalam suatu reaksi enzimatik, enzim akan mengikat substrat membentuk kompleks enzim-substrat, kemudian kompleks ini akan terurai menjadi enzim dan produk. Makin banyak kompleks terbentuk, makin cepat reaksi berlangsung


sampai batas kejenuhan. Pada konsentrasi substrat melampaui batas kejenuhan kecepatan reaksi akan konstan. Dalam keadaan itu seluruh enzim sudah berada dalam bentuk kompleks. Penambahan jumlah substrat tidak menambah jumlah kompleks (Fauziah, 2011).

Semakin tinggi konsentrasi substrat, semakin cepat kerja enzim, tapi jika kerja enzim telah mencapai titik maksimal, maka kerja enzim berikutnya akan konstan (Safitri, 2010).

Faktor-faktor yang mempengaruhi kerja enzim antara lain; konsentrasi enzim, konsentrasi substrat, pengaruh suhu, pengaruh pH, dan pengaruh inhibitor (Poedjiadi, 2009).

Faktor kesalahan yang dapat terjadi yaitu kurang telitinya dalam melihat perubahan warna yang terjadi dan konsentrasi dalam penambahan ekstrak yang tidak merata, serta tidak menjaga kebersihan pada alat yang akan digunakan.


IV KESIMPULAN DAN SARANBab ini akan menguraikan mengenai : (1) Kesimpulan

dan (2) Saran.

4.1. KesimpulanBerdasarkan hasil pengamatan dapat diketahui pada

sampel kacang kedelai hasil yang seharusnya enzim aktif bekerja pada substrat urea dengan substrat sebanyak 25 tetes, sedangkan pada sampel apel dan kentang enzim aktif bekerja pada substrat katekol dengan substrat sebanyak 25 tetes.

4.2. SaranDalam melakukan percobaan ini sebaiknya alat yang

akan digunakan harus dalam keadaan bersih sehingga tidak ada komponen lain yang ikut bereaksi dan meminimalisir faktor kesalahan.


DAFTAR PUSTAKA.

Fauziah, Lisna. 2011. Pengaruh Konsentrasi TerhadapKecepatan Reaksi Enzimatis.http://purplepharmachy.blogspot.com. Diakses 11April 2015.

Pelczar, Michael. J. 1986. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta:Penerbit Universitas Indonesia.

Poedjiadi, Anna., 2009, Dasar-dasar Biokimia, Jakarta:Penerbit Universitas Indonesia.

Safitri, Merina. 2010. Pengaruh Kadar Enzim TerhadapKecepatan Reaksi. Merinasafitri-knowledge.blogspot.com. diakses 11 April 2015..

http://purplepharmachy.blogspot.com/


LAMPIRAN

Hasil Pengamatan Laboratorium Biokimia Pangan

Uji Konsentrasi Substrat

SubstratKonsentrasi Substrat

Substrat HasilSubstrat Aquadest

Urea

25 tetes -

Kacang Kedelai

+++

15 tetes 10 tetes ++

5 tetes 20 tetes +

Katekol

25 tetes -

Apel

+++

15 tetes 10 tetes ++

5 tetes 20 tetes +

Katekol

25 tetes -Kentang

+++15 tetes 10 tetes ++

5 tetes 20 tetes +Sumber : Laboratorium Biokimia Pangan, 2015.Keterangan : (+++) Enzim aktif bekerja

( ++ ) Enzim kurang aktif bekerja ( + ) Enzim tidak bekerja

uji konsentrasi substrat.docx

Documents