spektrofotodensitometri - sinta.unud.ac.id · spektrofotodensitometri. kromatogram dipindai pada...
TRANSCRIPT
i
PENGEMBANGAN SIDIK JARI KROMATOGRAFI
FITOKIMIA KULIT BUAH JERUK NIPIS (Citrus
aurantifolia (Christm.) Swingle) DENGAN KLT-
SPEKTROFOTODENSITOMETRI
Skripsi
I PUTU KRISNANTARA WIJANA PUTRA
1108505017
JURUSAN FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS UDAYANA
2015
ii
Lembar Pengesahan
PENGEMBANGAN SIDIK JARI KROMATOGRAFI
FITOKIMIA KULIT BUAH JERUK NIPIS (Citrus
aurantifolia (Christm.) Swingle) DENGAN KLT-
SPEKTROFOTODENSITOMETRI
Skripsi
Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm)
di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana
Oleh
I PUTU KRISNANTARA WIJANA PUTRA
NIM. 1108505017
Menyetujui:
Pembimbing I Pembimbing II
Ni Putu Linda Laksmiani, S.Farm., M.Sc., Apt. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 198509012008122003 NIP. 196804201994021001
Mengesahkan:
Ketua Jurusan Farmasi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 196804201994021001
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena
atas berkat rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Pengembangan Sidik Jari Kromatografi Fitokimia Kulit Buah Jeruk Nipis
(Citrus aurantifolia (Christm.) Swingle) Dengan KLT-
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.
Penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari dukungan, saran, dan bimbingan
dari berbagai pihak. Maka dari itu, pada kesempatan ini penulis ingin
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ni Putu Linda Laksmiani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing
I yang dengan penuh perhatian telah memberikan motivasi, semangat,
bimbingan dan saran dengan sabar selama penulis mengikuti pendidikan di
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Udayana, khususnya dalam penyusunan skripsi ini.
2. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku dosen
pembimbing II yang dengan penuh perhatian telah memberikan motivasi,
semangat, bimbingan dan saran selama penulis mengikuti pendidikan di
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Udayana, khususnya dalam penyusunan skripsi ini.
3. Ir. Anak Agung Gde Raka Dalem, M.Sc. (Hons), selaku Dekan Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
iv
4. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt., selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Udayana.
5. Seluruh dosen dan staf pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas MIPA
Universitas Udayana yang telah memberikan bantuan kepada penulis
selama penyusunan skripsi ini.
6. Ir. I Wayan Wijana dan Ni Wayan Krisnawati, selaku ayah dan ibu tercinta
yang telah mengasuh dan membesarkan penulis, membimbing,
memberikan doa, cinta, dan motivasi kepada penulis, adik kandung penulis
yaitu Ni Made Rismayanti, serta sanak saudara penulis di Desa Peliatan,
Kota Gianyar, dan Kota Denpasar yang selalu memberikan motivasi dan
dukungan dalam penyusunan skripsi ini.
7. Ketut Alit Adi Krisna sekeluarga yang telah mendukung penulis
khususnya telah menyediakan tempat tinggal bagi penulis sejak awal
perkuliahan di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
8. Seluruh teman-teman farmasi angkatan 2011 (Lumiere Onze Vauquelin)
atas segala dukungan dan motivasi, Tim Riset Analisis Angkatan 2011
(Rapid Isocratic) yang tak pernah lelah memberikan semangat dan
dukungan, sahabat seperjuangan yang selalu menemani di saat suka
maupun duka, dan staf Laboratorium Forensik Lembaga Sains dan
Kriminologi Universitas Udayana yang saya hormati atas semangat dan
motivasinya kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.
v
9. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
tugas akhir I ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
memerlukan.
Bukit Jimbaran, Juli 2015
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN ......................................................................... ii
KATA PENGANTAR ................................................................................. iii
DAFTAR ISI ................................................................................................ vi
DAFTAR TABEL ........................................................................................ ix
DAFTAR GAMBAR ................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................. xii
DAFTAR ISTILAH ...................................................................................... xiii
ABSTRAK .................................................................................................... xv
ABSTRACT .................................................................................................. xvi
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................. 1
1.1 Latar Belakang .......................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ..................................................................... 4
1.3 Tujuan Penelitian ...................................................................... 4
1.4 Manfaat Penelitian .................................................................... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................ 6
2.1 Kulit Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia (Christm.)
Swingle).................................................................. ................... 6
2.1.1. Klasifikasi tanaman jeruk nipis..................................... .. 6
2.1.2. Deskripsi simplisia kulit buah jeruk nipis ....................... 6
2.1.3. Kandungan kimia ............................................................. 7
vii
2.1.4. Khasiat tanaman .............................................................. 7
2.1.5. Senyawa penanda dan identitas ....................................... 8
2.1.5.1. Rutin .................................................................... 8
2.1.5.2. Hesperidin ............................................................ 9
2.1.6. Pola kromatografi ............................................................ 10
2.2 Ekstraksi .................................................................................... 11
2.3 Kromatografi Sidik Jari ............................................................. 11
2.4 KLT-Spektrofotodensitometri ................................................... 12
2.5 Parameter Kromatografi ............................................................ 15
2.6 Analisis Data dengan Fungsi Korelasi Silang ........................... 17
2.7 Analisis Data dengan Fungsi Kosinus ....................................... 17
BAB III METODE PENELITIAN .............................................................. 19
3.1 Rancangan Penelitian ............................................................... 19
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ................................................... 19
3.3 Bahan Penelitian ....................................................................... 20
3.4 Alat Penelitian .......................................................................... 20
3.5 Prosedur Penelitian ................................................................... 20
3.5.1 Determinasi sampel buah jeruk nipis .............................. 20
3.5.2 Pengumpulan dan preparasi sampel ............................... 21
3.5.3 Penetapan susut pengeringan ......................................... 21
3.5.4 Ekstraksi sampel ............................................................. 22
3.5.5 Penyiapan sistem Kromatografi Lapis Tipis .................. 22
3.5.6 Optimasi volume penotolan ............................................ 22
viii
3.5.7 Pengembangan kromatografi fingerprint dengan
metode KLT-Spektrofotodensitometri ........................... 23
3.5.8 Analisis fungsi korelasi silang ........................................ 24
3.5.9 Analisis data dengan fungsi kosinus ............................... 24
3.6 Skema Penelitian ...................................................................... 25
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................... 26
4.1 Pengambilan Sampel Buah Jeruk Nipis .................................... 26
4.2 Determinasi Sampel Buah Jeruk Nipis ...................................... 26
4.3 Penetapan Susut Pengeringan .................................................... 26
4.4 Identifikasi Senyawa Identitas dan Penanda ............................. 27
4.5 Optimasi Volume Penotolan ...................................................... 29
4.6 Analisis Sidik Jari Ekstrak Kulit Buah Jeruk Nipis dengan
Metode KLT-Spektrofotodensitometri ....................................... 33
4.7 Analisis Data dengan Fungsi Korelasi Silang ........................... 35
4.8 Analisis Data dengan Fungsi Kosinus ....................................... 36
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................... 38
5.1 Kesimpulan ............................................................................... 38
5.2 Saran .......................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 39
LAMPIRAN .................................................................................................. 42
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Hasil susut pengeringan serbuk kulit buah jeruk nipis ................ 27
Tabel 4.2 Nilai resolusi dan tailling factor puncak yang diduga hesperidin 31
Tabel 4.3 Nilai fungsi korelasi silang (r) spektrum hesperidin sampel kulit
kulit buah jeruk nipis dari tiga daerah. ........................................ 35
Tabel 4.4 Nilai fungsi kosinus (C) sampel kulit kulit buah jeruk nipis dari
tiga daerah. ................................................................................... 36
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Buah jeruk nipis dan simplisia kulit buah jeruk nipis ........... 7
Gambar 2.2 Struktur kimia rutin ............................................................... 8
Gambar 2.3 Spektrum rutin pada rentang panjang gelombang
200-400 nm ........................................................................... 9
Gambar 2.4 Struktur kimia hesperidin ...................................................... 9
Gambar 2.5 Spektrum hesperidin pada rentang panjang gelombang
200-380 nm ........................................................................... 10
Gambar 2.6 Pola KLT kulit buah jeruk nipis ............................................ 11
Gambar 2.7 Perhitungan Tailing factor (Tf) .............................................. 16
Gambar 3.1 Skema penelitian ................................................................... 25
Gambar 4.1. Tampilan plat dan kromatogram ekstrak kulit buah jeruk
nipis dengan sistem kromatografi fase diam silika gel F254
dan fase gerak etil asetat-asam format-air (100:15:17 v/v) .. 28
Gambar 4.2 Kromatogram ekstrak larutan uji ekstrak metanol kulit buah
jeruk nipis sistem kromatografi fase diam silika gel F254
dan fase gerak etil asetat-asam format-air (100:15:17 v/v)
dengan 4 variasi volume penotolan ...................................... 30
xi
Gambar 4.3 Tampilan visual plat hasil elusi ekstrak kulit buah jeruk nipis
dengan sistem kromatografi fase diam silika gel F254 dan
fase gerak etil asetat-asam format-air (100:15:17 v/v)
dari 3 daerah berbeda. ........................................................... 33
Gambar 4.4 Kromatogram ekstrak larutan uji ekstrak metanol kulit buah
jeruk nipis dengan sistem kromatografi fase diam silika
gel F254 dan fase gerak etil asetat-asam format-air
(100:15:17 v/v) dari 3 daerah berbeda ................................. 34
xii
DAFTAR SINGKATAN
AUC : Area Under Curve
C : Cosinus
FHI : Farmakope Herbal Indonesia
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
Rf : Retardation factor
Rs : Resolusi
Tf : Tailing Factor
UV : Ultraviolet
WHO : World Health Organization
xiii
DAFTAR ISTILAH
Agen Kemopreventif : Zat yang dapat bertindak sebagai penghambat dan
atau melindungi tubuh dari perkembangan sel kanker.
Anti osteoporosis : Aktivitas yang dapat mencegah terjadinya gangguan
pada tulang akibat menurunnya kualitas dan
kepadatan tulang.
Antibakteri : Aktivitas yang dapat mengganggu pertumbuhan atau
bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu
metabolismenya.
Antifungi : Aktivitas yang dapat mengganggu pertumbuhan atau
bahkan mematikan fungi dengan cara mengganggu
metabolismenya.
Antioksidan : Merupakan zat yang mampu memperlambat atau
mencegah proses oksidasi.
Antikolinesterase : Aktivitas atau agen yang dapat menghalangi aksi dari
asetilkolinesterase.
Antispasmodik : Aktivitas yang dapat membantu mengurangi atau
menghentikan kejang otot di saluran cerna.
Determinasi Tumbuhan : Suatu proses untuk mengetahui kebenaran atau
menetapkan identitas tanaman dengan
membandingkan ciri tanaman dengan pustaka.
xiv
Fingerprint : Seluruh informasi yang merupakan karakteristik dari
tanaman meliputi warna bercak pada UV-visibel,
kromatogram dan spektrum.
Radiasi Elektromagnetik : Kombinasi medan magnet dan medan listrik yang
berosilasi dan merambat lewat ruang dan membawa
energi dari satu tempat ke tempat yang lain.
Simplisia : Bahan alamiah yang digunakan sebagai obat yang
belum mengalami pengolahan apapun juga dan
kecuali dinyatakan lain simplisia merupakan bahan
yang dikeringkan.
xv
ABSTRAK
Kulit buah jeruk nipis (Citrus aurantifolia (Christm) Swingle) merupakan
bagian dari buah jeruk nipis yang sangat berpotensi digunakan sebagai bahan baku
atau obat herbal di Indonesia. Standardisasi diperlukan sebagai kontrol kualitas
dan menjamin mutu dari ekstrak kulit buah jeruk nipis yang digunakan. WHO
telah menetapkan standardisasi fitokimia suatu tanaman dilakukan dengan
kromatografi sidik jari. Namun, kromatografi sidik jari belum dicantumkan dalam
Farmakope Herbal Indonesia sebagai kontrol kualitas obat herbal Indonesia. Oleh
karena itu dalam penelitian ini dilakukan penetapan sidik jari kromatografi dan
melihat hubungan kedekatan sidik jari ekstrak metanol kulit buah jeruk nipis dari
beberapa daerah dengan KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel buah jeruk nipis dikumpulkan dari 3 daerah di Jawa Timur yaitu
Desa Kalibaru Banyuwangi, Desa Umbulsari Jember, dan Desa Selorejo Malang.
Sistem kromatografi mengacu pada FHI yaitu fase diam silika gel GF254 dan fase
gerak etil asetat-asam format-air (100:15:17). Sidik jari kromatografi ekstrak
metanol kulit buah jeruk nipis diperoleh dengan metode KLT-
Spektrofotodensitometri. Kromatogram dipindai pada 210 nm dan spektrum
senyawa identitas kulit buah jeruk nipis hesperidin dipindai pada 200-400 nm.
Analisis data dilakukan dengan korelasi silang dan fungsi kosinus.
Sidik jari kromatografi kulit buah jeruk nipis dari ketiga daerah berupa
susunan pola puncak dengan nilai Rf tiap puncak yaitu 0,06; 0,09; 0,25; 0,32;
0,37; 0,50; 0,63; dan 0,94. Senyawa identitas hesperidin berada pada Rf 0,37 dan
memiliki panjang gelombang maksimum pada 284 nm. Sidik jari kromatografi
ekstrak metanol kulit buah jeruk nipis dari tiga daerah yaitu Banyuwangi, Jember,
dan Malang tidak memiliki hubungan kedekatan satu sama lain dan memiliki
profil yang bervariasi karena menghasilkan nilai kosinus (C) dibawah 95 dan KV
diatas 2%.
Kata kunci: Kulit buah jeruk nipis, Citrus aurantifolia, standardisasi, kromatografi
sidik jari, KLT-Spektrofotodensitometri
xvi
ABSTRACT
Lime peel (Citrus aurantifolia (Christm) Swingle) is a part of lime that is
potentially used as a raw material or herbal medicine in Indonesia.
Standardization is necessary for the quality control and guarantee the quality of
lime peel extract. WHO has established phytochemical standardization of plants
performed by chromatographic fingerprint. However, the chromatographic
fingerprint method have not been included in the Indonesian Herbal
Pharmacopoeia as a quality control of Indonesian herbal medicines. Therefore, the
aim of this research is developing phytochemical chromatographic fingerprint for
lime peel from different regions and to investigate their similarity by TLC-
Spectrophotodensitometry.
Lime fruit samples were collected from three areas in East Java those are
Kalibaru Village, Banyuwangi, Umbulsari Village, Jember, and Selorejo Village,
Malang. The applied chromatography system refers to FHI using silica gel GF254
as the stationary phase and ethyl acetate-formic acid-water (100:15:17) as the
mobile phase. Chromatographic fingerprint of methanol extract of lime peel was
obtained by TLC-Spectrophotodensitometry. The chromatogram was scanned at
210 nm and the spectrum of identity compound of lime peel hesperidin was
scanned at 200-400 nm. Data was analyzed with cross-correlation and cosine
functions.
Chromatographic fingerprint of three lime peel samples showed similar
peaks at Rf 0,06; 0,09; 0,25; 0,32; 0,37; 0,50; 0,63; and 0,94. Hesperidin was
identified at Rf 0.37. Its spectrum gave maximum wavelength at 284 nm.
Chromatographic fingerprints of lime peel methanol extract from mentioned
regions have no similarity yet their profiles are varies. Their cosine values (C)
were below of 95 and the KV values were above 2%.
Kata kunci: Lime peel, Citrus aurantifolia, standardization, chromatographic
fingerprint, TLC-Spectrophotodensitometry
Dipindai # Kode Kode Eko IPS SA 42 # … · 2015-02-11 · Dipindai # Kode Kode Eko_IPS_SA_42 # Halaman 4
Dipindai # Kode Kode Eko IPS SA 39 # … · 2013-09-27 · Dipindai # Kode Kode Eko_IPS_SA_39 # Halaman 4