skripsi - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/53882/9/pendahuluan.pdfkata pengantar segala puji...
TRANSCRIPT
SKRIPSI
KHADIFA DWI SEKARANI
STUDI VIABILITAS BAKTERI di FESES Mus musculusPADA
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL Myrmecodia spyang DIINFEKSI
Shigella dysenteriae
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2019
ii
Lembar Pengesahan
iii
Lembar Pengujian
85
Lampiran 10 Surat pernyataan hak bebas royalti non eksklusif
iv
KATA PENGANTAR
Segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan
hidayah serta karunia Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “STUDI VIABILITAS BAKTERI di FESES Mus musculus pada
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL Myrmecodia sp yang DIINFEKSI
Shigella dysenteriae” sebagai salah satu syarat memperoleh gelar sarjana farmasi
di Universitas Muhammadiyah Malang.
Dalam penulisan skripsi ini tentunya banyak pihak yang telah memberikan
bantuan baik moral maupun materil. Penulis menyadari bahwa terwujudnya
skripsi ini bukan semata-mata karena penulis, melainkan penulisan ini tidak lepas
dari dukungan, bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,
Pada kesempatan yang berharga ini, penulis mengucapkan terima kasih
sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. selaku dosen pembimbing I yang
disela kesibukan beliau masih dapat meluangkan waktu untuk
membimbing, memberi pengarahan dan dorongan motivasi hingga penulis
dapat menyelesaikan skripsi ini
2. Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP. selaku dosen pembimbing II
yang disela kesibukan beliau masih dapat meluangkan waktu untuk
membimbing, memberi pengarahan dan dorongan motivasi hingga penulis
dapat menyelesaikan skripsi ini
3. Ibu Engrid Juni Astuti, S.Farm., M.Farm., Apt selaku dosen penguji I dan
Ibu Amaliyah Dina A., M.Farm., Apt. selaku dosen penguji II yang telah
banyak memberikan saran dan masukan dalam skripsi ini
4. Bapak Faqih Ruhyanuddin, Sp.Kep., M.Kep., M.B selaku Dekan Fakultas
Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang
5. Ibu Dian Ermawati, S.Farm., M.Farm., Apt. selaku Ketua Program Studi
Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang
6. Ibu Raditya Weka Nugraheni, S.Farm., M.Farm., Apt. selaku ketua
Laboratorium Farmasi yang telah memberikan fasilitas kepada penulis
sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian di Laboratorium Farmasi
v
7. Bapak dan Ibu dosen Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah
Malang yang telah mengajarkan ilmunya
8. Orang tua yaitu Bapak Agus Lukito dan Ibu Tuti Mugi Lestari, yang
senantiasa mendoakan dan mendukung serta memotivasi kepada putrinya
sehingga penulis dapat menyelesaikan studi dengan baik, dan semangat
kepada penulis
9. Teman sekelompok skripsi Rofida, Neneng, dan Khairil yang senantiasa
memotivasi, memberi masukan, kritik, saran, kerja sama, dan bantuan
dalam penyusunan skripsi ini
10. Teman teman seperjuangan HIMFA PARACELSUS yang mengatas
namakan Power Ranger yang tidak pernah bosan mencari solusi dari
masalah masalah yang ada
11. Teman-teman KELUARGA BAHAGIA (Salma, Olfi, Dika, Dicky, Abid)
Ayu, dan Raisa yang selalu mengingatkan dan memberi semangat
12. Teman-teman Farmasi Awesome angkatan 2015 atas kebersamannya
selama kuliah di UMM
13. Pihak-pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah
memberikan banyak bantuan dan motivasi sehingga skripsi ini dapat
terselesaikan.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat pada
skripsi. Oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat
membangun dari berbagai pihak untuk kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi
ini bermanfaat bagi semua pihak, khususnya bagi penulis dan para pembaca pada
umumnya.
Malang, 03Juni2019
Penulis
Khadifa Dwi Sekarani
x
DAFTAR ISI
Lembar Pengesahan ......................................................................................... ii
Lembar Pengujian ............................................................................................ iii
Kata Pengantar ................................................................................................. iv
Ringkasan ......................................................................................................... vi
Abstrak ............................................................................................................. viii
Abstract ............................................................................................................ ix
Daftar Singkatan............................................................................................... xvi
Bab I Pendahuluan ........................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ........................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................................... 5
1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................................... 5
1.4 Hipotesis ..................................................................................................... 5
1.5 Manfaat Penelitian ..................................................................................... 5
Bab II Tinjauan Pustaka ................................................................................... 7
2.1 Tinjauan Tanaman Sarang Semut (Myrmecodia sp) .................................. 7
2.1.1 Klasifikasi Tanaman ........................................................................... 7
2.1.2 Nama Daerah ...................................................................................... 8
2.1.3 Morfologi ............................................................................................ 8
2.1.4 Penyebaran ......................................................................................... 9
2.1.5 Kandungan Fitokimia ......................................................................... 9
2.1.6 Manfaat Tanaman Sarang Semut Sebagai Herbal Medicine .............. 10
2.1.7 Mekanisme Tanaman Sarang Semut Sebagai Antibakteri ................. 11
2.2 Disentri ....................................................................................................... 11
2.2.1 Definisi Disentri ................................................................................. 12
2.2.2 Epidemiologi ...................................................................................... 13
2.2.3 Etiologi Disentri ................................................................................. 13
2.2.4 Patogenesis dan Faktor Infeksi ........................................................... 14
2.2.5 Pengobatan Disentri ........................................................................... 15
2.3 Tinjauan Shigella dysenteriae .................................................................... 17
2.3.1 Morfologi dan Sifat ............................................................................ 17
2.3.2 Patogenesis ......................................................................................... 18
xi
2.3.3 Struktur Antigen ................................................................................ 19
2.4 Mencit ........................................................................................................ 20
2.5 Tinjauan Simplisia ..................................................................................... 21
2.5.1 Cara Pembuatan Simplisia .................................................................. 21
2.5.2 Pembuatan Serbuk Simplisia dan Klasifikasi ..................................... 22
2.6 Tinjauan Tentang Ekstrak .......................................................................... 23
2.6.1 Pengertian Ekstrak .............................................................................. 23
2.6.2 Metode Ekstraksi ................................................................................ 23
2.6.2.1 Cara Dingin ................................................................................. 23
2.6.2.2 Cara Panas .................................................................................. 24
2.7 Tinjauan Tentang Pelarut (Etanol) ............................................................. 24
2.7.1 Etanol .................................................................................................. 25
Bab III Kerangka Konseptual........................................................................... 26
3.1 Skema Kerangka Konseptual ..................................................................... 26
3.2 Uraian Kerangka Konseptual ..................................................................... 27
Bab IV Metode Penelitian ................................................................................ 29
4.1 Jenis Penelitian ........................................................................................... 29
4.2 Tempat Penelitian....................................................................................... 29
4.3 Populasi dan Sampel Penelitian ................................................................. 30
4,3,1 Populasi .............................................................................................. 30
4.3.2 Sampel dan Besar Sampel .................................................................. 30
4.4 Kriteria Inklusi ........................................................................................... 31
4.4.1 Kriteria Ekslusi ................................................................................... 31
4.5 Variabel Penelitian ..................................................................................... 31
4.6 Alat dan Bahan .......................................................................................... 32
4.6.1 Alat ..................................................................................................... 32
4.6.2 Bahan .................................................................................................. 33
4.7 Pengumpulan Data ..................................................................................... 33
4.7.1 Uji Etik ............................................................................................... 33
4.7.2 Persiapan Hewan Coba ....................................................................... 33
4.7.3 Persiapan ekstrak ................................................................................ 34
4.7.4 Skrining Fitokimia .............................................................................. 34
xii
4.7.4.1 Pemeriksaan Alkaloid ................................................................. 34
4.7.4.2 Pemeriksaan Flavonoid ............................................................... 34
4.7.4.3 Pemeriksaan Tanin...................................................................... 35
4.7.4.4 Pemeriksaan Saponin .................................................................. 35
4.7.5 Pembuatan Media ............................................................................... 35
4.7.5.1 Peremajaan dan Suspensi Bakteri Shigella dysentriae ............... 35
4.7.5 Uji invivo Induksi Bakteri Shigella dysenteriae ................................. 35
4.7.6 Pemberian Bahan Uji .......................................................................... 36
4.7.7 Perhitungan Jumlah Bakteri Shigella dysentria pada Feces Mencit ... 36
4.7.8 Pemberian Bahan Uji .......................................................................... 37
4.7.8.1 Metode Postest ............................................................................ 37
4.7.9 Pengamatan Feses ............................................................................... 38
4.7.10 Analisis Data .................................................................................... 38
Bab V Hasil Penelitian ..................................................................................... 40
5.1 Skrining Fitokimia ..................................................................................... 40
5.1.1 Skrining Fitokimia Tanin ................................................................... 40
5.1.2 Skrining Fitokimia Alkaloid ............................................................... 40
5.1.3 Skrining Fitokimia Saponin ................................................................ 41
5.1.4 Skrining Fitokimia Flavonoid ............................................................ 41
5.2 Hasil Pembuatan Ekstrak Umbi Sarang Semut (Myrmecodia sp) ............. 42
5.3 Hasil Adaptasi Hewan Coba ...................................................................... 43
5.4 Hasil Pembuatan Standar Mc. Farland ....................................................... 43
5.5 Hasil Pembuatan Suspensi Bakteri Shigella dysenteriae ........................... 43
5.6 Hasi Pengujian Ekstrak Etanol Tanaman Sarang Semut (Myrmecodia sp)
terhadap viabilitas bakteri yang ada pada Feses (Mus Musculus) ................... 44
5.7 Data Statistik .............................................................................................. 47
Bab VI Pembahasan ......................................................................................... 48
Bab VII Kesimpulan dan Saran ....................................................................... 53
7.1 Kesimpulan ................................................................................................ 53
7.2 Saran ........................................................................................................... 53
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel II. 1Sifat Fisik dan Komposisi Kimia Umbi dua Spesies
Myrmecodia Asal Papua .................................................................................. 9
Tabel II. 2 2005 WHO Guidelines: Antimicrobials for treatment of
Shigellosis ....................................................................................................... 16
Tabel II. 3 Antimicrobials highlighted as inappropriate for treatment of
Shigellosis in the 2005 WHO Guidelines ........................................................ 16
Tabel II. 4 Klasifikasi Shigella berdasarkan karakteristik
biokimiawinya dan antigennya ...................................................................... 19
Tabel V.1 Rata-rata Viabilitas bakteri Shigella dysenteriae pada feses
mencit setelah pemberian Ekstrak Etanol Myrmecodia sp ............................. 45
Tabel V.2 Ringkasan LSD viabilitas bakteri Shigella dysenteriae
pada feses mencit pengenceran 3 ..................................................................... 47
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2. 1. Sarang semut (Myrmecodia peudans) ........................................ 7
Gambar 2. 2 Bakteri Shigella dysenteriae........................................................ 18
Gambar 2. 3. . Mencit (Mus musculus) ............................................................ 20
Gambar 3.1 Skema Kerangka Konseptual ....................................................... 26
Gambar 4. 1 Alur Penilaian .............................................................................. 39
Gambar 5.1 Hasil pengujian skrining senyawa alkaloid dengan
metode uji Mayer dan Wagner pada ekstrak myrmecodia sp .......................... 40
Gambar 5.2 Hasil pengujian skrining fitokimia senyawa Flavonoid
pada ekstrak myrmecodia sp ............................................................................ 41
Gambar 5.3 Hasil pengujian skrining fitokimia senyawa tanin pada
ekstrak myrmecodia sp ..................................................................................... 41
Gambar 5.4 Hasil pengujian skrining fitokimia senyawa saponin pada
ekstrak myrmecodia sp ..................................................................................... 41
Gambar 5.5Pembuatan serbuk simplisia dan ekstrak etanol
Myrmecodia Sp................................................................................................. 42
Gambar 5.6 Hasil Pembuatan suspensi bakteri setara dengan kekeruhan
Larutan Standart Mc Farland ........................................................................... 43
Gambar 5.7 Proses pengambilan sampel feses mencit putih galur wistar
proses terminasi mencit dengan cara dislocatio servicali ............................... 44
Gambar 5.8 Hasil pengenceran ditanamkan pada media SSA ........................ 45
Gambar 5.9 Hasil pengujian rata-rata jumlah viabilitas bakteri
Shigella dysenteriae dengan kombinasi perlakuan ekstrak
myrmecodia sp ................................................................................................. 46
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Daftar Riwayat Hidup ................................................................... 58
Lampiran 2 Berat badan mencit sebelum dan sesudah diinduksi bakteri ........ 59
Lampiran 3 Perhitungan Konversi Pemberian Dosis ....................................... 60
Lampiran 4 Gambar Media Setelah Inkubasi................................................... 66
Lampiran 5 Jumlah Koloni Bakteri pada Pengenceran 3,4,5 ........................... 76
Lampiran 6 Hasil SPSS Pengenceran 3 ........................................................... 78
Lampiran 7 Surat Tugas ................................................................................... 82
Lampiran 8 Kode Etik ...................................................................................... 83
Lampiran 9 Determasi Tanaman Sarang Semut............................................... 84
Lampiran 10 Surat pernyataan hak bebas royalti non eksklusif ..................... 85
Lampiran 11 Tahapan Penelitian ..................................................................... 86
xvi
DAFTAR SINGKATAN
Bb : Berat Badan
Cl : Klorida
C : Celcius
CFU : Colony Forming Unit
Cm : centimeter
Dll : dan lain-lain
Depkes : Departemen Kesehatan
g : Gram
HIV : Human Immunodeficiency Virus
IACUC : Institutional Animal Care and Use Committee
ISPA : Infeksi Saluran Pernapasan Atas
KHM : Konsentrasi Hambat Minimal
Kg : Kilogram
L : Liter
LD50 : Lethal Dose 50%
Mg : Miligram
NaCl : Natrium Klorida
Ppm : Part Per Million
SSA : Salmonella-Shigella Agar
Sp : Spesies
WHO :World Health Organization
54
DAFTAR PUSTAKA
Ahmadu AA, Zezi AA, Yano AH. 2007. Anti-Diarrheal Activity of the Leaf
Extracts of Daniellia Oliveri Hutch and Dalz (Fabaceae) and Ficus
Sycomorus Miq (Moraceae). African: African Journal;
Ainurrochmah, Anis. Ratnasari, Evie. Lisdiana, Lisa. 2013. Efektivitas Ekstrak
Daun Binahong (Anredera cordifolia) terhadap Penghambatan
Pertumbuhan Bakteri Shigella flexneri dengan Metode
Sumuran.Lentera Bio Vol. 2 No. 3;
Amin L.Z. 2015. Tatalaksana Diare Akut, Continuing Medical Education, 42
(7), 504–508;
Amin, Hardi. 2013. Asuhan Keperawatan Berdasarkan Diagnosa Medis &
Nanda NIC – NOC. Yogyakarta: Medication;
Arthasari, D.A.A. 2015. Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanol Biji
Dan Batang Pepaya (Carica Papaya L.) Terhadap Bakteri Shigella
Dysenteriae Dan Streptococcus Pyogenes Serta Bioautografinya,
Surakarta;
Arthur A. 2012. Thompson, A.J. Strickland, and Gamble, JCrafting and
Executing Strategy, 18th
E: McGrawHill;
Artanti, D. 2018. Perbedaan Pertumbuhan Bakteri Shigella dysentriae Pada
Berbagai Konsentrasi Perasan Kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill)
Secara In Vitro.The Journal of Muhammadiyah Medical Laboratory
Technologist,1(2), 1;
Bangkele Yane Elli, et al. 2015. Efek Anti Bakteri Dari Ekstrak Lengkuas Putih
(Alpinia galangal [L] Swartz) Terhadap Shigella dysenteriae. Jurnal
kesehatan tadulako. 1 (2) : 1–78;
Berkley, d. P. 2016. Dysentery (Shigellosis) Current WHO Guidelines and The
WHO Essential Medicine List For Children. WHO;
CDC. 2012. Centers for Disease Control and Prevention Principles of Epidemiology
in Public Health Practice, Third Edition, Atlanta:
Clinton C, ND. 2009. Plant tannins: A novel approach to the treatment of
ulcerative colitis, USA: Natural Medicine Journal, vol 2. P. 1-3
Depkes. Dirjen POM, Direktorat Pengawasan Obat Tradisional. Pedoman
Pelaksanaan Uji Klinik Obat Tradisional;
Dipiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Wells, B.G., Posey, L.M.
2008.
55
Pharmacotherapy : A Pathophysiologic Approach. 17th Ed. Mc Graw
Hill P.2038;
Dwi Setyadi, Aditya. 2006. Organ Reproduksi dan Kualitas Sperma Mencit
(Musmusculus) yang mendapat Pakan Tambahan Kemangi (Ocimum
basilicum) Segar. Bogor: Program Studi Teknologi Produksi Ternak
Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor;
Evans, C.W. 2009. Pharmacognosy Trease and Evans 16th Ed. London. Saunders
Elsevier. Pages :263, 356.
Ernis G. 2013. Pengaruh ekstrak umbi “Simbagh utak” (Hydnophytum sp.)
terhadap kadar asam urat Mus musculus jantan dan karakterisasi hasil
isolasi menggunakan FTIR. Bengkulu (ID): Universitas Bengkulu; \
Crisnaningtyas, F. 2010. PEMANFAATAN SARANG SEMUT (Myrmecodia
pendens) ASAL. Jurnal Riset Industri Hasil Hutan Vol.2, No.2, , 31-35;
Fransius, P.S., Mangaratua. 2008. Penampilan Reproduksi Mencit (Mus
musculus) yang Diberi Daun Torbangun Kering. Program Studi
Teknologi Produksi Ternak Fakultas Peternakan. Bogor: Institut Pertanian
Bogor;
Hale T. L., Keusch G. T. 1996. Shigella.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK8038/#A1269. 20 Febrari 2019
Hertiani, T., E. Sasmito, Sumardi and M. Ulfah. 2010. Preliminary study on
immunomodulatory effect of sarang semut tubers Myrmecodia tuberosa and
Myrmecodia pendens. OnLine J. Biol. Sci. 10: 136-141;
Jawetz, E., J.L. Melnick, and E.A. Adelberg. 1996. Mikrobiologi Kedokteran.
Edisi 20,Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC; 228-231;
Jawetz, E., Melnick, J.L. & Adelberg, E.A. 2005. Mikrobiologi Kedokteran,
diterjemahkan oleh Mudihardi, E., Kuntaman, Wasito, E. B., Mertaniasih,
N. M., Harsono, S., Alimsardjono, L., Edisi XXII, 327-335, 362-363,
Penerbit Salemba Medika, Jakarta;
Juffrie, M., Soenarto S.S.Y, Oswary H, Arief S, Rosalina I, Mulyani N.S. 2010.
Gastroenterohepatologi. Jakarta: Badan Penerbit IDAI., P. 87: 233–237;
Kusumawati, D. 2004. Bersahabat Dengan Hewan Coba. Gadjah Mada
University Press, Yogyakarta;
Murtiningrum et al.,Sifat Fisik dan Komposisi Kimia Umbi dua Spesies
Sarang Semut (Myrmecodia) Asal Papua. UNIPA Surabaya; 2018
Mukhopadhyay, M 2002. Natural Ekstracts Using Supercritical Carbon
Dioxide.CRC Press. London. New York: Woshington DC;
56
Munfaati, P.N., Ratnasari, E and G. Trimulyono. 2015. Aktivitas Senyawa
Antibakteri Ekstrak Herba Meniran (Phyllanthus Niruri) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Shigella Dysenteriae Secara In Vitro. Jurnal Lentera
Bio, 4 (1) : 64-71;
Priyambodo, S. 2003. Pengendalian Hama Tikus Terpadu. Ed ke-3. Penebar
Swadaya. Jakarta;
Robinson, T. Kandungan Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi. 1991. Bandung:
Penerbit ITB.
Sari, K. 2006. Pemanfaatan Obat Tradisional Dengan Pertimbangan Manfaat Dan
Keamanannya,Majalah Ilmu Kefarmasian;
Schroeder, G.N., Hilbi, H. 2008. Molecular Pathogenesis of Shigella spp. :
Controling Host Cell Signaling, Invasion, and Death by Type III
Secretion. Clin Microbiol Rev. 21 (1) : 134-156 ;
Seftiono, H. 2017. Penentuan aktivitas enzim mananase dari berbagai
mikroorganisme di indonesia dan peranannya dalam bidang pangan:
kajian pustaka. Agrointek Volume 11;
Smith, B. J. dan S. Mangkoewidjojo. 1988. Pemeliharaan, Pembiakandan
Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis Indonesia. Jakarta:
University Press;
Shrotriya, A. 2015. An Introduction To Shigellosis And Strategies Against Potent
Drug. International Journal Of Pharmacy & Life Sciences. 6 : 8-9;
Soeksmanto, A., M.A. Subroto, H. Wijaya and P. Simanjuntak. 2010. Anticancer
activity for extracts of sarang semut plant (Myrmecodia pendens) to
HeLa and MCM-B2 Cells. Pakistan J. Biol. Sci. 13: 148-151;
Subroto, M. A. dan H. Saputro. 2008. Gempur Sarang Semut (Myrmecodia
pendens.).Penerbit Swadaya. Jakarta;
Subroto, A.; & Saputro, H. 2009. Kandungan Sarang Semut. Analycal Chem
[serial online]. Diakses tanggal 27 Maret 2019;
Sukandar, E.Y., Andrajati, R., Sigit, J.I., Adnyana, I.K., Setiadi, A.A.P.,
Kusnandar. Infeksi Saluran Cerna dalam ISO Farmakoterapi (3rd
Ed), 680-682. ISFI Penerbitan : Jakarta
Sureshbabu, J. 2018. Shigella Infection. Diakses tanggal 3 Februari 2019;
Tjokroprawiro, Askandar. 2007. ILMU PENYAKIT DALAM Surabaya :
Airlangga University Press;
Tjay, T.H., Rahardja, K.. 2013 ,Obat-Obat Diare, Obat-Obat Penting, 3rd
Ed.,
288-289, PT. Elex Media Komputindo : Jakarta;
57
Tjaniadi, P., Lesmana, M., Subekti, D., Machpud, N., Komalarini, S., Santoso,
W., … Oyofo, B. A. 2003. Antimicrobial resistance of bacterial pathogens
associated with diarrheal patients in Indonesia. American Journal of
Tropical Medicine and Hygiene, 68(6), 666–670.;
Tiwari, Kumar, Kaur Mandeep, Kaur Gurpreet & Kaur Harleem. 2011.
Phytochemical Screening and Extraction: A review. Internationale
Pharmaceutical Sciencia. Vol. 1: issue 1;
Winarno, F. G. D. dkk. 1973. Ekstraksi Kromatografi dan Elektroforesis.
Fakultas Teknologi Pertanian IPB. Bogor;
WHO. 2016. Dysenterie (Shigellosis). Diakses Senin, 29April 2019;
Zinner SH, Mayer KH. 2000. Sulfonamides and trimethoprim. Dalam: Mandell
GL, Bennet JE, penyunting. Dolin R. Principles and practice of infectious
disease. Edisi ke-5. Bagian pertama. New York: Churchill Livingstone . P.
394-401.
Sertifikat Plagiasi