Nama : Muhammad Aly FirdausNIM : 141710101075Kelas : CKel : 5BAB 3. METODOLOGI PRAKTIKUM

3.1 Bahan dan Alat3.1.1 Pembuatan Medium Nutrien Agar a. Bahan : 1. Pepton 3 gram2. Ektrak daging 2 gram3. Agar agar 10 gram4. Aquadest 500 cc b. Alat:1. Beaker glass 1000 cc2. Timbangan analitis3. Corong4. Kapas saring5. Erlenmeyer6. Tabung reaksi7. Kompor

3.1.2 Pembuatan Medium Natrien Cair a. Bahan : 1. Ekstrak daging 2. Pepton 3. NaCl4. Aquadest5. Larutan BTB (bromothymol blue 0,04 %)6. Larutan NaOH 0,1 N 7. Larutan HCl 0,1 N dan 1 N b. Alat:1. Erlenmeyer 2. Tabung reaksi3. Beaker glass4. Corong 5. Kapas6. Kompor7. Timbangan 8. Komparator blok9. Penangas air

3.1.3 Pembuatan Medium Kentang Dekstrosa Agar (PDA) a. Bahan : 1. Kentang 2. Dekstrosa 3. Agar 4. aquadest b. Alat:1. Beaker glas 2. Tabung reaksi3. Erlenmeyer 4. Corong 5. Kapas 6. Kompor7. Timbangan analitis

3.2 Skema Kerja3.2.1 Pembuatan Medium Nutrien Agar

Ekstrak daging

Pepton dilarutkan dalam aquades 500cc

Didihkan selama 5 menit

Masukkan agar kedalam sedikit demi sedikit kedalam

Di aduk sampai homogen

Saringlah dengan kapas ke dalam erlenmeyer

Masukan ke dalam tabung reaksi 5 cc dan 10 cc

Sumbat dengan kapas steril

Sterilkan otoklaf (121,15 lbs) selama 15 menit

Buat medium miring untuk tabung 5cc dan medium tegak untuk 10 cc

Sterilkan otoklaf (121c 15 lbs)15 menit3.2.2 Pembuatan medium nutrien cair

Ektrak daging

Timbang ekstrak daging 3 gram dan Pepton 5 gram

Larutkan dalam 1000 ml aquades hingga homogen

Panaskan hingga mendidih dengan penanganas

Didinginkan dan Jadikan volumenya menjadi 1000 ml dengan tambah aquadest

Stel pH dengan komparator blok

Pipet 10 ml medium,

masukkan kedalam tabung reaksi (2 buah)salah satu tabung ditambahkan indicator BTB (0,04 %)

sterilkan pada otoklaf 2 atm Temperature 121C selama 20 menitSaring dengan kapas Masukkan tabung kelubang komporator blokMedium yang ditambahkan indikator bewarna kuning dinetralkan HCl 0,1 N

3.2.3 Pembuatan Medium Kentang Dekstrosa Agar (PDA)

Kentang

Timbang 200 g dicuci sampai bersihcuci sampai bersih

kupas dan iris kecil-kecil

Didihkan dengan 1 liter aquadest selama 1 jam

Saring dan pisahkan ampas dari filtratnya

Masukkan 10 g dekstrosedan 15 g agar kedalam filtrat

Media miring untuk 5cc dan media tegak untuk 10ccSumbat dengan kapas dan sterilkan dalam otoklaf (121) selama 15 menitMasukkan dalam tabung reaksi masing masing 5cc dan 10ccAduk diatas penangas air hingga homogen