CUESTIONARIO LABORATORIO 101. SEALE LOS FACTORES DE RIESGO PARA INFLUENCIAR LOS NIVELES ELEVADOS DE BILIRRUBINA.

Un exceso de bilirrubina en la sangre se manifiesta en un estado conocido como ictericia, siendo la principal caracterstica de este proceso el que la piel adopte un tono amarillento o plido.Existen causas diversas para el aumento de bilirrubina, dependiendo de si se trata de la forma directa o la forma indirecta de este compuesto. As tenemos:

Factores y enfermedades que generan aumento de niveles de bilirrubina directa (conjugada): Este tipo de hiperbilirrubinemia se da por procesos patolgicos que no permiten se realice una excrecin normal de la bilirrubina.El aumento de la bilirrubina directa puede indicar: Obstruccin de la va biliar: Ya sea por clculos, tumores de la va biliar o pncreas. Enfermedades hepticas colestsicas: Cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante primaria o secundaria, toxicidad por medicamentos y txicos, etc.

Hepatitis agudas: Una inflamacin aguda del hgado puede producir elevaciones importantes de la bilirrubina por falla de la excrecin a nivel de la clula heptica. En estos casos la elevacin de bilirrubina es de predominio directo y se acompaa de elevaciones importantes de aminotransferasas (transaminasas, SGPT y SGOT). Las hepatitis virales (virus hepatitis A, hepatitis B), hepatitis por toxicidad de medicamentos (toxicidad por paracetamol) o txicos (p. ej. toxicidad por hongos) pueden producir dao heptico e ictericia.

Cirrosis: La cirrosis heptica puede acompaarse de elevaciones progresivas de la bilirrubina. Es importante destacar que la elevacin de bilirrubina es un fenmeno relativamente tardo en las enfermedades hepticas crnicas y refleja un dao importante de la funcin heptica.

Elevaciones aisladas de bilirrubina directa: Algunas enfermedades genticas poco frecuentes se caracterizan por elevaciones aisladas de bilirrubina directa, con el resto de las pruebas hepticas normales. Estos cuadros incluyen el sndrome de Rotor y Dubin-Johnson. El aumento de la bilirrubina indirecta o bilirrubina total pueden ser un signo de: Sndrome de Crigler-Najjar Eritoblastosis fetal Enfermedad de Gilbert Cicatrizacin de un hematoma grande (moretn o sangrado bajo la piel) Anemia hemoltica Enfermedad hemoltica del recin nacido Hepatitis Ictericia fisiolgica (normal en los recin nacidos) Anemia drepanoctica Reaccin a una transfusin Anemia perniciosa 1. SEALE DIETAS ESPECIALES PARA CONTROLAR LOS NIVELES DE BILIRRUBINA.

Dieta rica en fibras Ingerir verduras y frutas El principio bsico: no comer comidas que contienen almidn Es muy importante beber varios litros de agua por da, para ayudar a detoxificar el hgado.

REMEDIOS NATURALES:Tomar tres tazas de Eufrasia (Euphrasia officinalis L.), prepare una infusin con media cucharada de planta en una taza con agua hirviendo y tmesela despus de un reposo de 20 minutos.Tambin pueden ser til las tisanas de Genciana amarga (Genciana lutea L.). Hacer una infusin de la planta entera dejndola reposar 20 minutos. Tomar 3 tacitas al da.El zumo de limn en ayunas ayuda a limpiar el hgado, su consumo todos los das puede ayudar a bajar los niveles de bilirrubina.

Para evitar los vmitos se puede preparar una infusin de Manzanilla (Matricaria chamomilla L.) con Jengibre (Zingiber officinale R.).Prepare una ensalada de hojas de Diente de Len (Taraxacum officinale W.) con aceite de oliva de primera presin en fro.

OLIGOTERAPIA:

Tomar suplementos de Vitamina C para fortificar el sistema inmunolgico, 1000 mg diarios es la dosis recomendada.Para proteger el hgado se puede consumir estos aminocidos, que se encuentran en farmacias o en herbolarios, Glutation, L-cistena y L-metionina a razn de 500 mg diarios. Precaucin:No se deben tomar con leche, porque se dificulta su absorcin.Es recomendable tomar 60 mg diarios de Coenzima Q10 para aumentar la oxigenacin celular. Tambin es til tomar 1.200 mg de Lecitina de soja, tres veces al da, para proteger las clulas hepticas.

ALIMENTOS RECOMENDADOS: Frutas Verduras Hortalizas Cereales integrales Pastas integrales Frutos secos Melazas de cereales Aceites de primera presin en fro

ALIMENTOS PROHIBIDOS: Huevos Lcteos y derivados Fritos Comidas grasas y procesadas Azcar refinada Embutidos Carnes rojas Carnes blancas Embutidos

OLIGOTERAPIA, VITAMINAS Y MINERALES: Vitamina B6 Vitamina C Vitamina E Glutation L-cistena L-metionina Coenzima Q10 Comprimidos de Lecitina

Cuestionario de soluciones Buffer

1. Seala las sustancias de uso clnico que usan como sustancia hidroelectrolticas.

Las sustancias utilizadas como sustancias hidroelectrolticas son: Salina NaCl 0.9% (hipertnica) Na =154 mEq/l Cl = 154 mEq/l Osm = 308 mOsm/l pH= 5.5 Normalizacin de la Volemia. Permanece 20 30% despus de 1 h de ser infundido

Salina al 7.5% (hipertnica) Na =342 mEq/l Cl = 342 mEq/l Osm = 684 mOsm/l pH= 5.5 Agente expansor en el choque hipovolmico. Aumenta la tensin arterial

Ringer Lactato Na =130 mEq/l K = 4 mEq/l Ca = 0.75 mEq/l Cl = 109 mEq/l C2H2(OH)COO =28mOsm/l) pH = 6 Normaliza la volemia. Al ser menos cida reduce la posibilidad de inducir acidosis.

Glucosado 5% (isotnica) C2H12O6= 5g/100g Cal = 400 Kcal/l Osm = 278 mOsm/l Ph = 4 Rehidratacin y aporte de energa, protector heptico y nutricin parenteral

Glucosado 10% (hipertnica) C2H12O6= 10g/100g Cal = 400 Kcal/l Osm = 555 mOsm/l Ph = 4 Tratamiento de edema cerebral y pulmonar, colapso respiratorio

Glucosalina C2H12O6= 139 mEq/l Na = 77mEq/l Cl = 77 mEq/l Osm = 280 mOsm/l Rehidratacin y aporte de energa, tratamiento de edema cerebral pulmonar y colapso circulatorio

Albmina (coloidal natural) Albumina 5% =5g/100g Albumina 25% = 25g/100g pH =6,9 Mejor agente expansor. Se distribuye aprox 2 min en el espacio intravascular y permanece 2 horas tras la administracin para ser metabolizada

Dextrano Coloidal artificial Dextrano 40= 40 kDa Dextrano 70 = 70kDa Son hiperoncoticas

2. Qu es una solucin buffer cmo se regula el pH?

Un tampn o buffer es una o varias sustancias qumicas que afectan a la concentracin de los iones de hidrgenos en el agua. Cuando un buffer es aadido al agua, el primer cambio que se produce es que el pH del agua se vuelve constante, as, cidos o bases adicionales no podrn tener algn efecto. Estas soluciones buffer estn constituidas por el ion comn de un cido dbil o base dbil y el mismo ion comn en una sal conjugada. Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual depender de la constante de equilibrio del cido o base empleado.

Mecanismo de accin Ejemplo: El tampn ms importante en el organismo para evitar cambios significativos de pH, el del bicarbonato y el cido carbnico. 1) Como producto del metabolismo se produce CO2 que al reaccionar con las molculas de agua produce cido carbnico, un compuesto inestable que se disocia parcialmente y pasa a ser bicarbonato segn el siguiente equilibrio.

CO2 + H2O H2CO3 HCO3- + H+ 2) Entonces, el bicarbonato resultante se combina con los cationes libres presentes en la clula, como el sodio, formando as bicarbonato sdico (NaHCO3), que actuar como tampn cido. Supongamos que entra en la clula un cido fuerte, por ejemplo, cido clorhdrico (HCl):

HCl + NaHCO3 NaCl + CO2 + H2O Como se puede ver en la anterior reaccin el efecto cido clorhdrico queda neutralizado por el bicarbonato de sodio y resultan como productos sustancias que no provocan cambios en el pH celular y lo mantienen en su valor normal, que es 7,4.3. Qu sustancias de uso clnico se utilizan como indicadores de pH?

Se utilizan como indicador sustancias qumicas que cambian su color al cambiar el pH de la disolucin, este cambio de color se ve explicado por el cambio estructural inducido por la protonacion o desprotonacion de la especie. Los indicadores cido base tienen un intervalo de viraje de unas unidades de pH, en la que cambian la disolucin en las que se encuentran de un color a otro, o de una incolora a una coloreada.

Tenemos: Azul de bromofenol 3,0 - 4,6 Amarillo Prpura

Anaranjado de metilo 3.1-4.4 Rojo Amarillo

Rojo de metilo 4.2-6.2 Rojo Amarillo

Azul de bromotimol 6.0-7.6 Amarillo Azul

Tornasol 5.8-8.0 Rojo Azul

Fenolftalena 8.0-9.8 Incoloro Rojo Violeta

Amarillo de alizarina 10.1-12.0

La fenolftalena Es un componente frecuente de los medicamentos utilizados como laxantes, aunque se tiende a restringir su uso por sus posibles efectos cancergenos. Se utiliza en investigaciones forenses, para detectar manchas de sangre, de cualquier especie; simplemente, se recoge la muestra con un hisopo baado de solucin salina, se agregan 2 gotas de fenolftalena y posteriormente agua oxigenada, si el color se torn de rosa a violeta, hay trazas de sangre. Rojo de metilo

El rojo de metilo es un indicador de pH. Acta entre pH 4,2 y 6,3 variando desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Por lo tanto, permite determinar la formacin de cidos que se producen durante la fermentacin de un carbohidrato.

4. Cmo influye la concentracin molar total de un buffer y la concentracin de cada una de sus especies?

La concentracin del tampn es de principal importancia pues esta caracterstica de la solucin determina su Capacidad Amortiguadora. Capacidad amortiguadora: es la cantidad de cido (H+) o de base (OH-) que una solucin tampn puede neutralizar antes de que el pH del medio ambiente que est siendo regulado cambie apreciablemente. Esta capacidad depende de la cantidad de cido y de sal que componen la solucin amortiguadora. Asimismo es tambin importante conocer la concentracin total de la solucin amortiguadora a preparar, se sabe que la concentracin total de estas soluciones corresponde a la suma de las concentraciones del cido (o base) y su sal derivada.

[Sal] + [cido] = [Tampn][Sal] + [Base] = [Tampn]

Los amortiguadores tienen mxima eficiencia para neutralizar los cidos y las bases que se aaden, cuando las concentraciones del cido dbil (o de la base) y de la sal son iguales. Podremos preparar una solucin amortiguadora de casi cualquier pH, si escogemos el cido (o base) dbil correcto. Existe un ion comn entre el electrolito dbil y su sal. Cuando la concentracin del cido es igual al de la sal, el pH es igual al pKa. Estas soluciones presentan dos propiedades interesantes, que las distinguen de otras: 1) La dilucin moderada de estas soluciones no afecta al pH. La expresin de pH as lo indica, si se diluye la solucin de tal forma que las concentraciones bajan a la mitad de su valor original, la relacin entre las concentraciones permanece constante, y por lo tanto, el pH permanece invariable.

2) La adicin moderada de cidos y bases a estas soluciones, no afectan el pH de las mismas en forma significativa. Tiene su capacidad amortiguadora al mximo.

5. Cules son los buffer orgnicos e inorgnicos en el organismo y de qu dependen?

Dentro del organismo tenemos dos tipos de buffer: orgnicos e inorgnicos, dentro de los inorgnicos tenemos el tampn bicarbonato y fosfato. Y dentro de los orgnicos tenemos al tampn de hemoglobina y el de las protenas. Si hablamos de sistemas primarios para la regulacin de los H+ en lo lquidos orgnicos encontraremos que existen: a) Los sistemas amortiguadores qumicos de los lquidos orgnicos b) El centro respiratorio, que regula la eliminacin de CO2 y de H2CO3 del lquido extracelular. (TAMPON BICARBONATO) c) Los riones que pueden excretar tanto sustancias cidas como alcalinas para as normalizar la concentracin de pH

Sistema de amortiguador de bicarbonato

En nuestro organismo, y en el de los seres vivos con pulmones, este sistema resulta especialmente efectivo. El ion bicarbonato H2CO-3 del plasma sanguneo se encuentra en equilibrio con el CO2 gaseoso presente en el espacio areo de los pulmones. Por otro lado los cambios los cambios en la [HCO3] tambin se puede regular a nivel de los riones, que pueden eliminar el bicarbonato por la orina o reabsorberlo, segn las necesidades. En este sistema amortiguador, la forma cido es la suma de la [CO2] disuelto en el plasma y de la [H2CO3], y la forma sal es la [HC O-3]. El equilibrio se desarrolla segn la siguiente reaccin: CO2 + H2O H2CO3 HCO-3 + H+ El H2CO3 es un cido moderadamente fuerte, con un pK aproximado de 3,1. Sin embargo, como slo una milsima parte del CO2 disuelto en agua se transforma en cido carbnico, y como la [CO2] participa en el equilibrio de disociacin, resulta un pK de 6,1 (una constante de equilibrio mil veces menor). Por lo tanto, el pK de este sistema amortiguador, tomando en consideracin la totalidad de las formas cido, es de 6,1. La [H2CO3] puede considerarse como despreciable frente a la [CO2]. Por lo tanto, sern los cambios en la proporcin H2CO3 / CO2 los que darn lugar a una variacin del pH

Sistema amortiguador del fosfato El sistema amortiguador de fosfato interviene sobre todo en el amortiguamiento del lquido de los tbulos renales y de los lquidos intracelulares. Los elementos principales de este sistema son H2PO4- (anin fosfato dicido) y HPO4+ (catin fosfato monocido). Cuando se aade a una mezcla de estas sustancias un cido fuerte, se produce lo siguiente: HCl + Na2HPO4 NaH2PO4 + NaCl El sistema amortiguador del fosfato es especialmente importante en los lquidos tubulares de los riones porque el fsforo suele concentrarse mucho en esos tbulos. Adems es importante para el amortiguamiento de los lquidos intracelulares, ya que la concentracin de fosfato en estos lquidos es muy superior a la que existe en los extracelulares.

Las protenas son amortiguadores intracelulares importantes

Gracias a sus elevadas concentraciones, sobre todo en el interior de las clulas, las protenas son uno de los amortiguadores ms importantes del organismo. Constituyen el amortiguador ms abundante en el LIC y en el plasma. La hemoglobina es una protena que resulta especialmente eficaz como amortiguador dentro de los eritrocitos, en tanto que la albmina constituye la principal protena amortiguadora en el plasma. Como las protenas se componen de aminocidos, contienen al menos un grupo carboxilo (-COOH) y al menos un grupo amino (-NH2); estos grupos son los elementos funcionales del sistema amortiguador protenico. El grupo carboxilo libre en un extremo de la protena acta como cido al liberar H+ cuando se eleva el pH. En esta forma el H+ puede reaccionar con cualquier exceso de OH- que hay en la solucin para formar agua. El grupo amino libre que se encuentra en el otro extremo de la protena puede actuar como base y combinarse con H+ cuando disminuye el pH. Por consiguiente, las protenas pueden amortiguar tanto los cidos como las bases. Adems de los grupos terminales carboxilo y amino, siete de los 20 aminocidos tienen cadenas laterales que pueden amortiguar el H+.

6. Cmo se elimina el amoniaco a nivel renal y por qu se intercambia?

El metabolismo de los aminocidos y de los otros compuestos nitrogenados de bajo peso molecular origina cantidades apreciables de amoniaco. Este compuesto puede ser incorporado al metabolismo nuevamente mediante la sntesis de protenas no esenciales y otros procesos, pero cuando las cantidades de este exceden, el amoniaco debe ser eliminado, pues su aumento en la sangre y los tejidos puede causar lesiones en el tejido nervioso Existen dos tipos de mecanismos en el humano para la excrecin del amoniaco: la excrecin renal y la sntesis y excrecin de la urea. El rin es capaz de eliminar amoniaco por la orina formando sales de amonio, en este rgano el amoniaco se combina con iones H+ formando amonio que se excreta con otros aniones. Como la excrecin urinaria del amonio consume iones h, estas reacciones estn en dependencia de los mecanismos renales de regulacin de pH sanguneo, lo cual impone un lmite a las cantidades de amonio que pueden ser excretadas. Aunque el amoniaco excretado en la orina se produce a partir de las reaccione metablicas del rin, este proceso puede contribuir a la eliminacin del amoniaco que se produce en otros rganos mediante un mecanismo de transporte en el que interviene la glutamina, la cual puede ser sintetizada a partir del cido glutmico y el amoniaco. La glutamina que llega a los riones es transportada a las clulas epiteliales de los tbulos proximales, la rama ascendente gruesa del asa de Henle y los tbulos distales. Una vez dentro de la clula, cada molcula de glutamina se metaboliza a travs de una serie de reacciones para formar al final dos tipos de iones NH+4 y dos HCO3- . El NH+4 se secreta hacia la luz tubular mediante un mecanismo de contra transporte que lo intercambia por sodio, que es reabsorbido. El HCO3- es transportado a travs de la membrana baso lateral, junto al Na+ reabsorbido, al lquido intersticial y es captado por los capilares peritubulares. Por tanto, por cada molcula de glutamina metabolizada en los tbulos proximales se secretan dos iones NH+4 en la orina y se reabsorben dos HCO3- hacia la sangre. El HCO3- generado por este proceso corresponde a bicarbonato nuevo.En los tbulos colectores, la adicin de NH+4 al lquido tubular se produce por un mecanismo distinto. Aqu, el H+ es secretado por la membrana tubular a la luz, donde se combina con NH3 para formar NH+4, Que se excreta. Los conductos colectores son permeables al NH3 , que se puede difundir fcilmente hacia la luz tubular. Sin embargo, la membrana luminal de esta porcin de los tbulos es mucho menos permeable al NH+4 por lo que, una vez que el hidrogeno ha reaccionado con el NH3 para formar NH+4 , este queda atrapado en las luces tubulares y es eliminado por la orina. Por cada NH+4 excretado, se genera un nuevo HCO3- que se aade a la sangre.

CADENA RESPIRATORIA

CUESTIONARIO DE INTERPRETACIN DE LA PRCTICA

1. Qu interpretacin le da a los tubos 1, 2, 3, 4, 5 Y 6 del primer experimento?

Tubo 1: Tiene el dador de electrones (2,6 diclorofenolindofenol), pero no est presente el homogenizado heptico entonces no se producir la reaccin. No hay cambio de color, porque no se encuentran las enzimas necesarias para la cadena respiratoria. Tubo 2: Si est el dador de electrones, el homogenizado heptico, pero no el succinato, que es el sustrato, entonces no se produce reaccin. Ya que la cadena respiratoria es imposible sin succinato. No hay cambio de color. Tubo 3: Esta el dador de electrones, el sustrato, el homogenizado heptico, entonces se completara la reaccin y se colore de azul cumplindose completamente el recorrido de la cadena respiratoria. Entonces de esta manera tenemos presente las mitocondrias (proporcionado por el homogeneizado), el donador de electrones (succinato), el aceptor de electrones (2,6 diclorofenolindofenol) y el sistema enzimtico Tubo 4: Esta el dador de electrones, el sustrato, el homogenizado heptico, pero hay un inhibidor de la cadena respiratoria que es el malonato (bloquea al inicio de la cadena respiratoria ya que impide el paso de los electrones procedentes del succinato hacia la flavoproteina y de esta a la coenzima Q), no permite que se lleve a cabo el ciclo. No hay cambio de color. Tubo 5: Est el dador de electrones, el sustrato, el homogenizado heptico, pero hay un inhibidor que es el cianuro de sodio, este bloquea al final de la cadena respiratoria (se opone a que haya transporte de electrones a nivel de citocromo a, de esta forma el 2,6 diclorofenolindofenol no recibe ningn flujo de electrones). No hay cambio de color Tubo 6: Est el dador de electrones, el sustrato, el homogenizado heptico, pero hay un inhibidor que es el barbiturato de sodio, que inhibe a nivel de FAD, impide que se lleve a cabo el ciclo, y no se produce reaccin. No hay cambio de color.

2. Qu interpretacin le da a los tubos 1, 2, 3, 4 Y 5 del segundo experimento?

Tubo 1: Esta presente la p fenilendiamina (dador de hidrgenos), pero no hay homogenizado heptico entonces no hay reaccin. Tubo 2: Est la p fenilendiamina, y el homogenizado heptico en consecuencia si reacciona y se colorea de color rojo. Si se observar finalmente la cadena respiratoria. Tubo 3: Est la p fenilendiamina y el homogenizado, pero hay un inhibidor que es el cianuro de sodio (interviene a nivel del citocromo impidiendo el flujo de electrones hacia el aceptor final que es el oxgeno) entonces no se producir la reaccin. Tubo 4: Est la p fenilendiamina y el homogenizado, pero hay un inhibidor que es el malonato. Se aprecia un cambio de color en la solucin a pesar de la presencia del malonato. Tubo 5: Est la p fenilendiamina y el homogenizado, pero hay un inhibidor que es el barbiturato, que inhibe la cadena respiratoria, entonces no se produce la reaccin.3. Cmo Ud. separara Mitocondrias puras? El proceso habitual para conseguirlo se llama fraccionamiento subcelular que es un conjunto de mtodos y tcnicas que tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en un determinado componente celular, ya sea ste un orgnulo (mitocondrias, ncleos, peroxisomas,..) una fraccin de membrana (membrana total, plasmtica, dominio basolateral, dominio apical,...), complejos multiproteicos (citoesqueleto de actina, microtbulos, poros nucleares, etc.), etc. Por lo general comprende tres procedimientos: extraccin, homogeneizacin y centrifugacin.

Extraccin.- consiste en aislamiento de un organelo especfico extrayndolo de las clulas en que se localiza. Se realiza en condiciones poco agresivas, usando solucionas acuosas adecuadas.

Homogeneizado.- consiste en girar dentro de un tubo de vidrio de dimensiones adecudas que contiene los fragmentosdesmenuzados del rgano en estudio (en este caso de hgado), con un medio homogeneizante apropiado como el STKM (del ingls Sucrosa, Tris, Kalium y Magnesium). La fuerza mecnica ejercida, rompe las clulas liberando sus constituyentes en la sacarosa.

Centrifugacin.- utiliza una serie de pasos de centrifugacin diferencial, con velocidades sucesivamente mayores y cada uno produce un sedimento y un sobrenadante, que es centrifugado seguidamente. La centrifugacin se basa en hacer girar el tubo a gran velocidad de forma que se produzca la acumulacin en el fondo del mismo de las partculas que tienden a hundirse por tener una densidad mayor que la del medio en que se encuentran. As, despus de la centrifugacin la muestra, homognea, se habr separado en dos fracciones: sobrenadante ('supernatant'), fraccin homognea que no ha sedimentado, y el sedimento ('pellet') que ha quedado adherida al fondo del tubo.

4. Cul es la finalidad del homogenizado heptico?

La finalidad del homogeneizado heptico es obtener mitocondrias puras, que puedan realizar la cadena respiratoria y que brinden el sistema enzimtico necesario para ello (NAD, FAD, CITOCROMOS).

5. Que otros inhibidores existen de 3 ejemplos y en que sitios actan Sobre la NADH-deshidrogenasa, bloqueando la transferencia de electrones entre la flavina y la ubiquinona. (Inhibidores del sitio I) Barbitricos, como el amobarbital Piericidina A (antibitico) Rotenona (insecticida) Acta bloqueando la transferencia de electrones entre el citocromo b y el citocromo c1. (inhibidores de sitio II) Antimicina Actan sobre el Hemo a3 de la citocromooxidasa impidiendo su interaccin con el oxgeno (inhibidores de sitio III) Cianuro Monxido de carbono H2S6. Que son dadores y aceptores artificiales y cules y para que se usaron en prctica especifique el sistema.

Los donadores o aceptores electrnicos son los que pueden ceder o aceptar electrones de la cadena respiratoria en reacciones espontaneas no enzimticas.Las utilizadas en la prctica de laboratorio fueron 2,6 diclorofenolindofenol, fenilendiamina.

NUTRICION E NDICE DE MASA CORPORAL

1. Para que se usa el ndice de masa corporal?

La verdadera utilidad del IMC no es la de diagnosticar un trastorno del peso en una persona, sino ms bien la de clasificarla en base a parmetros poblacionales. Adems, como hemos visto antes, los baremos slo son vlidos para pacientes con composiciones corporales medias, y perderan su utilidad en personas muy musculadas, en las edades extremas de la vida (nios y ancianos), en casos de estructuras seas muy pesadas e, incluso, hay quien asegura que no son comparables entre mujeres y hombres.

Debido a estas limitaciones, se han hecho distribuciones de IMC para nios y en los atletas se usan otras medidas antropomtricas como las que se basan en la cantidad de grasa corporal. El uso clnico ms relevante del BMI es para diagnosticar los casos de bajo peso corporal en situaciones de anorexia nerviosa y otros desrdenes alimenticios, donde el IMC inferior a 17,5 constituye uno de los criterios diagnsticos aceptados por la OMS.

1. Qu aplicacin tiene en la evaluacin de dietas?

Es de vital importancia conocer el IMC para poder evaluar la dieta que viene siguiendo el paciente. Si su IMC esta en valores muy altos indicando altos grados de obesidad, entonces su dieta esta siendo muy alta en carbohidratos, grasas, por lo que se recomendara cambiar la dieta a una dieta MBC (muy baja en caloras). Por otro lado, si el paciente muestra un IMC con valores muy bajos sealando desnutricin, se aconseja cambiar inmediatamente la dieta que viene tomando por una dieta que le brinde mucha mas caloras.

1. Para la evaluacin de tratamiento del paciente diabtico cmo cree que se le usa, tiene importancia en el control del diabtico, por qu?

Claro, pues los pacientes diabticos tienden a perder peso por lo que conocer su IMC durante el tratamiento es de mucha importancia pues nos indicara que tal va el paciente en ese sentido y si es que necesita muchas mas caloras en caso de que su IMC este cercano a valores bajos.

1. Tiene utilizacin en el seguimiento de otras enfermedades agobiantes, por qu?

Bsicamente s, pues as como en la diabetes, las dems enfermedades mayormente van a implicar una disminucin progresiva del peso y mientras tengamos dicha enfermedad estamos propensos a caer en desnutricin. Por lo que el llevar un registro del IMC durante el tratamiento es de mucha importancia, pues nos ayudara a conocer el grado de nutricin del paciente.

CUESTONARIO1. Qu entiende por cromatografa?La cromatografa agrupa un importante y diverso conjunto de mtodos que permiten separar componentes que estn estrechamente relacionados en muestras complejas; la muestra a trabajar se disuelve en FM (fase mvil) que puede ser gas o lquido y este FM se hace pasar a travs de FE (fase estacionaria) que est incluida en un soporte que puede ser una columna o una superficie solida; las 2 fases (FM y FE) se eligen de manera que los componentes de la muestra se distribuyen de forma distinta entre ambas; los componentes que se unan fuertemente a la FE se mueven (+) lentamente con el flujo de la FM; los componentes de la muestra dbilmente unidos a la FE se movern rpidamente al ser arrastrados por la FM; en conclusin, la diferente movilidad de los diferentes componentes de la muestra hacen posible la separacin de los mismos y esto permite un estudio tanto cualitativo como cuantitativo de la muestra.Hay una MUESTRA (diferentes componentes), disuelto en FM (fase mvil) de forma gas o lquido que al pasar por FE (fase estacionaria) con soporte (columna o superficie solida) presenta una SEPARACIN: componentes con (-) afinidad (movilidad RPIDA) y componentes con (+) afinidad (movilidad LENTA). Resultado en BANDAS para su anlisis cualitativo y cuantitativo de la MUESTRA.2. Diga tres aplicaciones de la cromatografa en muestras biolgicas

I. Determinacin de cobre en muestras biolgicas. aplicacin de los mtodos de extraccin con fluidos supercrticos y cromatografa liquida de alta resolucinII. Tratamiento trmico. Algunas protenas son ms termoestables que otras; si ste es el caso, un buen mtodo para purificarlas es el tratamiento trmico. Las protenas desnaturalizadas tienden a agregarse; una centrifugacin diferencial ayudar a eliminarlas por sedimentacin.

III. Determinacin de concentracin de alcohol benclico, en un producto inyectado en una fbrica de medicamentos.

IV. Eliminacin de clulas procariotas en caldos de cultivo: Una manera bastante empleada en Bioqumica para obtener enzimas es el cultivo de bacterias en medios lquidos. Independientemente de que el enzima sea intra o extracelular, el primer problema con el que nos encontramos es la presencia de bacterias en el medio.

V. Precipitacin de protenas con sulfato amnico. La precipitacin salina es una tcnica muy empleada en purificacin enzimtica; presenta un alto rendimiento pero muy poca selectividad, por lo que suele ser utilizada en las etapas iniciales del proceso. Las protenas son polielectrolitos de superficie, por lo que al aadir al medio una sal, los iones de sta neutralizan las cargas de las protenas, llegndose a una situacin en la que, por no presentar carga neta, las protenas floculan.

3. Diga el fundamento de dos tipos de cromatografas

I. Cromatografia en columna La muestra se volatiza y luego se inyecta en una columna cromatogrfica; este proceso se lleva a cabo por la accin de un gas inerte (FM) cuya funcin es la de transportar la muestra a travs de la columna; la ms utilizada es la cromatografa de gas-liquido (GLC) con FM gaseosa y FE liquida retenida sobre la superficie de un slido inerte.Componentes bsicos:a) Gas portador (FM): qumicamente ha de ser inerte, a la presin adecuada y sin agua e impurezas (He, N, H, CO2)b) Sistema de inyeccin de la muestra: volatiliza la muestra; el sistema ms utilizado para la inyeccin de la muestra es con una micro-jeringa aplicada en la cabeza de la columnac) Columnas de desarrollo: hay 2 tipos de relleno (empaquetadas) y capilares (tubulares abiertas); hoy en da se utilizan las capilares por su gran rapidez y eficaciad) Sistema de deteccin: el detector ideal debera tener adecuada sensibilidad, buena estabilidad, gran reproductibilidad, amplio margen de temperaturas, reducido tiempo de respuestas, alta fiabilidad, fcil manejo, no destruir la muestra; los ms usados, ionizacin de llama, conductividad trmica, termoinicos, captura electrnica, emisin atmica.Aplicacin: para anlisis cualitativo, recurrir a los tiempos o volmenes de retencin de las sustancias analizadas; para el cuantitativo, se utilizan los picos o reas del cromatograma obtenido; las aplicaciones ms importantes son: mtodo de separacin inmejorable para muestras orgnicas complejas, compuestos rgano-metlicos y sistemas bioqumicos; proporcionar un medio adecuado que puede llevar a cabo anlisis ms complejos.II. cromatografa de columna.se realiza el transporte de una sustancia a travs de una columna por la adicin continuada de FM (puede ser liquido o gas); el desplazamiento (por presin o por gravedad) de los distintos componentes de la muestra es decir, su velocidad de migracin, depende del tiempo que permanezcan en la FM; el primer eluyente que sale de la columna es el que tiene (-) afinidad con la FE; FE se encuentra en el interior de la columna; la diferencia de velocidad de los distintos componentes al atravesar la columna permite su separacin; el tiempo que pasa desde que se inyecta la muestra en la columna hasta que el pico alcanza el detector, tiempo de retencin (tR); el proceso ser ms efectivo cuanto ms separadas aparezcan unas bandas de otras; ensanchamiento de bandas, este efecto no deseable se puede producir durante la separacin cromatogrfica, lo que disminuye la resolucin de la tcnica que es la capacidad de una columna para separar 2 sustancias; se produce una difuminacin (solapamiento), se mezclan los componentes de las bandas; para evitar, se utiliza columnas de desarrollo suficientemente largas que van a incrementar el grado de resolucin cromatogrfica y as obtener el mximo rendimiento del proceso (optimizacin: conseguir que los distintos componentes de una mezcla se separen totalmente y en el menor tiempo posible); Tcnica (1)- se inyecta la muestra en la columna(2)- adicin continuada de FM(3)- desplazamiento de los distintos componentes de la muestra(4)- aislamiento de las distintas sustancias que hayan podido separadas (pasar suficientemente FM a travs de la columna) hasta que las diferentes fracciones individuales salgan y detectadas por el detector o recogidas(5)- a la salida de la columna, un detector identificara cada una de las fracciones(6)- con la seal recogida por el detector se obtiene una grfica donde aparecen una serie de picos (cromatogrfico) que se utiliza para el anlisis cualitativo y cuantitativo.Aplicacin Determinacin de Hb-glicosilada; separacin de sustancia en orina, en BQ separacin de amino cidos, pptidos, protenas, nucletidos, Hb, isoenzimas, polisacridos; purificacin de sustancias, muestras orgnicas complejas, compuestos rgano-metlico.

III. Cromatografa de ADSORCIN Es la ms antigua (la que se hizo); FE es slida, FM es liquido o gas; la separacin depende de la polaridad (segn las cargas +/- de las molculas) de las molculas de la muestra (soluto); se suelen hacer en columna; las sustancias a separar (muestra) se colocan disueltas en la parte superior de la columna; los distintos disolventes que van pasando por la columna, separar los componentes por la diferente solubilidad de cada uno en el lquido disolvente; tras la cromatografia cada componente eluye en momentos diferentes y as son separados y cuantificados; adsorbentes (FE), e.j. carbonato clcico; disolventes (FM) e.j. acetona, metanol, agua. Utilidad: se usa para la separacin de diversas sustancias en orina.

4. Diga dos importancias de la separacin de protenas desde el punto de vista de la aplicacin biolgica Para determinar una dieta especfica para un paciente que carece de ciertas protenas o aminocidos A travs del proceso de purificacin lograremos un estudio detallado de la funcin y de la actividad enzimtica que realiza.

La informacin estructural de la protena se podr tambin obtener de las protenas que han sido purificadas incluyendo las RMN de las cuales se obtendr informacin tridimensional como por ejemplo el proceso de cristalizacin a la cual se someten las protenas.

Para determinar las causas o niveles de desnutricin en el que se encuentra una poblacin.

5. Qu entiende por punto isoelctrico de las protenas?

Es el ph en el cual se carga una protena.El punto isoelctrico es el pH al que una sustancia anftera tiene carga neta cero. El concepto es particularmente interesante en los aminocidos y tambin en las protenas. A este valor de pH la solubilidad de la sustancia es casi nula. Para calcularlo se deben utilizar los pKa. pI = (pKa1 +pKa2)/2 Las molculas complejas, tales como las protenas, se combinan con los iones hidrgeno y con otros iones presentes en la disolucin, dando lugar a la carga neta de la molcula. A la concentracin de iones hidrgeno, o al pH, para el cual la concentracin del ion hbrido de una protena es mxima y el movimiento neto de las molculas de soluto en un campo elctrico es prcticamente nulo, se le denomina punto isoelctrico. Sustancias isoeletronicas: Son tomos o iones que poseen el mismo nmero de electrones e igual configuracin electrnica.Es el valor especfico de pH en que la carga neta de la protena es cero, de modo que no se desplaza al aplicar un campo elctrico. Cuando una mezcla de protenas es introducida en un gel con un gradiente de pH, tanto los extremos N y C terminal como las cadenas laterales ionizables de las protenas captan o liberan protones de acuerdo con el pH, de modo que la carga elctrica global de las protenas depender del pH del entorno. Todas las macromolculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una caracterstica de las protenas y otros biopolmeros es que la carga total que adquieren depende del pH del medio. As, todas las protenas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren y de los aminocidos que la componen, as como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre unido a la protena de forma covalente (irreversible). Debido a la composicin en aminocidos de la protena, los radicales libres pueden existir en tres formas dependiendo del pH del medio: catinicos, neutros y aninicos. Cualquier protena tendra una carga neta positiva si se encuentra en un medio lo suficientemente cido debido a que los grupos COOH de los aminocidos asprtico y glutmico estaran en su forma neutra pero los grupos amino de Arginina y lysina estaran protonados (-NH3+). De igual forma si la protena se encuentra en un medio con un pH muy alto estara cargada negativamente ya que en este caso los grupos carboxilo estaran desprotonados (COO-) y los grupos amino estaran en su forma neutra (NH2). De lo anterior se deduce que las protenas tienen un pH caracterstico al cual su carga neta es cero. A este pH se le denomina punto isoelctrico (pI). En el punto isoelctrico (pI), se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas por lo que la protena presenta su mxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su agregacin.Si suponemos una protena formada nicamente por aminocidos sin grupos laterales ionizables la carga neta de la protena dependera exclusivamente de la protonacin / desprotonacin de los grupos amino y carboxilo terminal. En la realidad las protenas estn formadas por multitud de aminocidos unidos mediante enlaces peptdicos y la carga va a depender de los grupos ionizables que poseen los aminocidos que la componen y del pH del medio.

6. Qu entiende por coagulacin, precipitacin y desnaturalizacin de protenas?

a) Coagulacin: Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y ocasiona la prdida de la actividad biolgica de la protena. Se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena, transformndose en filamentos lineales y delgados que se entrelazan hasta formar compuestos fibrosos e insolubles en agua la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria.

b) Precipitacin: La precipitacin suele ser consecuencia del fenmeno llamado desnaturalizacin. Cualquier factor que modifique la interaccin de la protena con el disolvente disminuir su estabilidad en disolucin y provocar la precipitacin. As, la desaparicin total o parcial de la envoltura acuosa, la neutralizacin de las cargas elctricas de tipo repulsivo o la ruptura de los puentes de hidrgeno facilitarn la agregacin intermolecular y provocar la precipitacin.

c) Desnaturalizacin: Consiste en la prdida de la estructura terciaria, por romperse los puentes que forman dicha estructura. Todas las protenas desnaturalizadas tienen la misma conformacin, muy abierta y con una interaccin mxima con el disolvente, por lo que una protena soluble en agua cuando se desnaturaliza se hace insoluble en agua y precipita.

7. Seale tres mtodos de fraccionamiento de las protenas y fundamentar.1. El tamao o dilisis. Es el primer proceso de una purificacin. No purificamos las protenas sino que las preparamos. La dilisis es un proceso en el que hacemos uso de una membrana semipermeable. En este proceso utilizamos una bolsa de dilisis en la que introducimos la mezcla de protenas, la metemos en una solucin acuosa que acta como tampn a pH 2, si cambiamos el pH provocamos una desnaturalizacin. Se produce osmosis en el que pasan a travs de la membrana. Si tiene un tamao grande la atraviesan todas pero si tiene un tamao pequeo, las protenas no podrn pasar y se quedarn en la bolsa de dilisis. Se utiliza para hacer una seleccin segn su tamao y cambiar la composicin de sal en la mezcla.

2. Cromatografa de intercambio inicoSe utilizan resinas con carga, catinicas (+) y aninicas (-).Resinas de intercambio catinico, estn cargadas negativamente y hacen que las cargas negativas se eluyan y las positivas queden adheridas. Si cambiamos la composicin del tampn conseguimos que se desprendas. CM-celulosa y CM-agarosa.Resinas de intercambio aninico, cargadas positivamente retienes protenas con carga negativas DEAE-celulosa y DEAE-agarosa.En el desarrollo de la cromatografa usamos un colector que determina en qu medida vamos a ir recogiendo las distintas protenas que eluyen para que cada una quede separada.3. El cromatoenfoqueEs una tcnica cromatogrfica til en la separacin de protenas atendiendo a sus puntos isoelctricos. Bsicamente se trata de crear un gradiente de pH utilizando la capacidad de tamponado de un intercambiador inico; si un tampn ajustado a un determinado pH se pasa a travs de un intercambiador inico equilibrado a diferente pH, se crea un gradiente de pH. Las protenas unidas al intercambiador sern eludas de acuerdo con sus puntos isoelctricos. La tcnica proporciona gran resolucin y concentra la muestra.

8. Cmo se clasifican las protenas?

Segn su forma

Fibrosas: presentan cadenas polipeptdicas largas y una estructura secundaria atpica. Son insolubles en agua y en disoluciones acuosas. Algunos ejemplos de stas son queratina, colgeno y fibrina.

Globulares: se caracterizan por doblar sus cadenas en una forma esfrica apretada o compacta dejando grupos hidrfobos hacia adentro de la protena y grupos hidrfilos hacia afuera, lo que hace que sean solubles en disolventes polares como el agua. La mayora de las enzimas, anticuerpos, algunas hormonas y protenas de transporte, son ejemplos de protenas globulares.

Mixtas: posee una parte fibrilar (comnmente en el centro de la protena) y otra parte globular (en los extremos).

Segn su composicin qumica

Simples: su hidrlisis slo produce aminocidos. Ejemplos de estas son la insulina y el colgeno (globulares y fibrosas). A su vez, las protenas se clasifican en:

a) Escleroprotenas: Son esencialmente insolubles, fibrosas, con un grado de cristalinidad relativamente alto. Son resistentes a la accin de muchas enzimas y desempean funciones estructurales en el reino animal. Los colgenos constituyen el principal agente de unin en el hueso, el cartlago y el tejido conectivo. Otros ejemplos son la queratina, la fibrona y la sericina.

b) Esferoprotenas: Contienen molculas de forma ms o menos esfrica. Se subdividen en cinco clases segn su solubilidad:

I.-Albminas: Solubles en agua y soluciones salinas diluidas. Ejemplos: la ovoalbmina y la lactalbmina.II.-Globulinas: Insolubles en agua pero solubles en soluciones salinas. Ejemplos: miosina, inmunoglobulinas, lactoglobulinas, glicinina y araquina.III.- Glutelinas: Insolubles en agua o soluciones salinas, pero solubles en medios cidos o bsicos. Ejemplos: oricenina y las glutelinas del trigo.IV.- Prolaminas: Solubles en etanol al 50%-80%. Ejemplos: gliadina del trigo y zena del maz.V.- Histonas son solubles en medios cidos.

Conjugadas o heteroprotenas: su hidrlisis produce aminocidos y otras sustancias no proteicas con un grupo prosttico.

9. Diga ocho funciones de las protenas

Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolculas ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:

Estructural. Esta es la funcin ms importante de una protena (Ej: colgeno), Inmunolgica (anticuerpos), Enzimtica (Ej: sacarasa y pepsina), Contrctil (actina y miosina). Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actan como un tampn qumico), Transduccin de seales (Ej: rodopsina) Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibringeno) Funciones de reserva. Como la ovoalbmina en el huevo, o la casena de la leche.

10. en que se fundamenta la electroforesis?

Electroforesis es un proceso de la separacin de las especies cargadas de iones o partculas coloidales en funcin de su distinta velocidad de migracin, cuando estn sometidas a la accin de un campo elctrico; velocidad de migracin (movilidad electrofortica: unidad /tiempo) , la velocidad de desplazamiento de las diferentes sustancias durante el transcurso de la electroforesis; el desarrollo de la tcnica electrofortica, depende de la densidad de carga y condicionada por una serie de parmetros (pH, fuerza ionica, diferencia de potencial del campo elctrico aplicado, la naturaleza de la muestra, interacciones entre la muestra y soporte elegido); es una herramienta practica para el analisis de compuestos biologicos y un metodo analtico/preparativo , separa macromoleculas en una mezcla para la posterior tecnicas ms complejas; la sustancia se desplaza en funcin de su carga y que depende de: (1) la carga de la sustancia (2) el voltaje del campo elctrico creado (3) el coeficiente de friccion/rozamiento entre el soporte y la sustancia, sustancias (+) se dirigen hacia el polo negativo (ctodo) y las (-) hacia el polo positivo (nodo)

11. En que se fundamenta el mtodo cromatogrfico de intercambio ionico, ejemplo medico?

Cromatografa de INTERCAMBIO INICOLas sustancias se separan por el intercambio de iones; se basa en la interaccin inica del soluto con la FE (fase estacionaria) que tiene grupos funcionales cargados; FM (fase mvil) suele ser lquido y FE solido; se hacen en columna; el soporte (FE) suele ser una resina cargada positivamente o negativamente; si su carga (del soporte) es positiva, la elucin (lo que sale de la columna) cargada positivamente y si la columna es negativa, el eluyente ser negativo; para conseguir separar las otras cargas retenidas en la columna, se introduce un tampn de ph adecuado en la columna para que las cargas retenidas se eluyan. Utilidad: en BQ para separar amino cido, pptidos, protenas, nucletidos y todos los compuesto de naturaleza inica (Hb, isoenzimas).

APLICACIN:Hemoglobina Glicosilada:El porcentaje d protena unida a la glucosa es lo que se denomina hemoglobina glicosilada (HbA1). Cuanto mayor es la cantidad de glucosa en la sangre, ms se une a la protena y su porcentaje de unin indica cual ha sido la cantidad media de glucosa circulante durante el tiempo de vida de la hemoglobina.El mtodo de cromatografa de intercambio inico se basa en elusin diferencial de la hemoglobina glicosilada por el cambio de carga que produce en la molcula debido a la glicacin del grupo amino terminal de la cadena. Para realizar el procedimiento se utiliza la carboximetil celulosa cargada (-).La hemoglobina glicosilada A1c es el componente mayoritario (80%) de la hemoglobina A1. La HbA1c es el resultado de la condensacin de la glucosa con la valina N-terminal de la cadena de a hemoglobina. La incorporacin de glucosa es un proceso no enzimtico e irreversible. Por lo tanto el valor de HbA1c ha mostrado su utilidad para predecir el riesgo de muchas de las complicaciones crnicas de diabetes, para el grado de control glicmico.

12. En que se fundamenta la cromatografa liquida de alta precisin y aplicacin mdica?Cromatografia de lquidos de alta resolucin (HPLC)Las lmparas de deuterio Heraeus se utilizan como fuentes de luz en la cromatografa lquida de alta presin (HPLC).HPLC es una tcnica de anlisis moderna que se utiliza hoy para comprobar la pureza de las drogas farmacuticas y la contaminacin en los productos alimenticios. Las lmparas de deuterio Heraeus proporcionan las fuentes de luz para estos anlisis de alta sensibilidad y ayudan a determinar rastros de contaminacin no deseada, por ejemplo, la melamina en leche en polvo para bebs. Generan un espectro continuo con longitudes de onda que alcanzan desde los rayos UV hasta lo visible, lo que hace de ellas una fuente de luz idnea para mediciones de alta precisin de absorcin en el laboratorio.Para cumplir con los lmites de deteccin ms bajos y mayor resolucin de los instrumentos de anlisis modernos, la ltima generacin de lmparas de deuterio Heraeus alcanza valores de ruido que son de 2 a 3 veces inferiores en comparacin con las lmparas de deuterio convencionales, con aprox. 30% menos energa radiada. Esto las hace ideales para su uso en detectores UHPLC (cromatografa de lquidos de ultra alto rendimiento) que se utilizan, por ejemplo, en las pruebas de drogas de exmen mdico sanguneo.HPLC es una tcnica de separacin en la que se introduce una mezcla de muestra en una columna. Los diferentes compuestos de la mezcla pasan a travs de la columna a diferentes velocidades debido a las diferencias en su comportamiento de particin entre la fase mvil y la fase estacionaria. Al final de la columna se separa entonces la mezcla en sus componentes individuales y pueden ser detectados mediante un detector de UV-Vis para medir la absorcin de las sustancias en una longitud de onda determinada. El valor de absorcin es proporcional a la concentracin del compuesto (Ley Beer-Lambert).Aplicaciones tpicas:

Qumica alimentaria:Deteccin de conservantes en los alimentosDeteccin de vitaminas (A, C, etc.)Deteccin de hidratos de carbono (por ejemplo, azcar)El anlisis de elementos traza en alimentosTriglicridos: HPLC con ELSD permite la separacin y caracterizacin de todos los tipos detriglicridosQumica clnica:Deteccin de drogas para el control del xito teraputicoDeteccin de vitaminasDeteccin de drogas prohibidas en muestras de orinaMedio ambiente:Drogas en aguas residualesDrogas en aguas residualesPruebas forenses y de drogas:Deteccin de drogasToxocologa forense