Daftar isiMonografi Curcuminoid (Inna)Monografi Rhei Radix dan Curcuma domestica (Gaby Inna)Penapisan Rhei radix dan Curcuma domestica (Panji)Ekstraksi (Anek)Fraksinasi (Desi)Isolasi Metode Kromatografi (Gaby Inna)Khasiat (Hanifa)

I. Monografi CurcuminoidKurkuminoid merupakan senyawa fenol yang berasal dari rimpang kunyit (Curcuma longa) atau Curcuma sp. Lainnya. senyawa-senyawa yang termasuk dalam golongan kurkuminoid meliputi kurkumin, demetoksikurkumin dan bisdemetoksikurkumin. Senyawa-senyawa tersebut banyak terdapat dalam rimpang Curcuma sp. Kurkumin, demetoksikurkumin, dan bisdemetoksikurkumin berbeda dalam hal polaritasnya. Hal ini disebabkan karena perbedaan struktur yaitu pada jumlah gugus hidroksi.

R1=R2=OCH3: KurkuminR1=OCH3, R2=H: DemetoksikurkuminR1=R2=H: Bisdemotoksikurkumin Kurkumin mempunyai rumus molekul C21H20O6 dan berat molekul 368, 38. Demetoksikurkumin mempunyai rumus molekul C20 H18O5 dan berat molekul 338, 35. Bisdemotoksikurkumin memiliki rumus molekul C19H16O4 dan berat molekul 308, 33.II. Curcuma DomesticaKlasifikasi Divisi : SpermatophytaSub divisi : AngiospermaeKelas : Monocotyledoneae Bangsa : ZingiberalesSuku : ZingiberaceaeMarga : CurcumaJenis : Curcuma domestica Val.

Pemerian Simplisia:Berupa kepingan ringan, rapuh, warna kuning jingga, kuning jingga kemerahan sampai kuning jingga kecoklatan; bau khas, rasa agak pahit, agak pedas, lama kelamaan menimbulkan rasa tebal; bentuk hampir bundar sampai bulat panjang, kadang-kadang bercabang; lebar 0.5-3 cm, panjang 2-6 cm, tebal 1-5 mm; umumnya melengkung tidak beraturan, kadang-kadang terdapat pangkal upih daun dan pangkal akar. Batas korteks dan silinder pusat kadang-kadang jelas. Berkas patahan agak rata, berdebu, warna kuning jingga sampai cokelat kemerahan.Mikroskopik:Fragmen pengenal adalah jaringan gabus; sel parenkim berisi bahan berwarna kuning, berkas pengangkut, rambut penutup, butir amilum, dan sel parenkim berisi amilum.

KandunganKomponen utama yang terpenting dalam rimpang kunyit adalah kurkuminoid dan minyak atsiri. Berdasarkan hasil penelitian Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (Balittro) bahwa kandungan kurkumin rimpang kunyit rata-rata 10,92 %. Selain kunyit, ada juga beberapa tanaman yang mengandung kurkumin, misalnya temulawak dan temu hitam. Rumus bangun kurkumin adalah sebagai berikut :

III. Rhei RadixAkar kelembak adalah akar rheum officinale Baillon, suku polygonaceae, mengandung 1,8-dihidroksiantrakuinon tidak kurang dari 0,7%

Klasifikasi Kingdom: PlantaeDivisi: MagnoliophytaKelas: MagnoliopsidaOrdo: PoligonalesFamili: PoligonaceaeGenus: RheumSpesies: Rheum officinale

Identitas simplisiaPemerian potongan padat, keras, bentuk hampir silindris, pipih atau tidak beraturan, kadang berongga, panjang 5-15 cm, lebar 3-10 cm, permukaan yang terkelupas agak bersudut-sudut, umumnya diliputi serbuk berwarna kuning kecoklatan terang, bagian dalam berwarna kuning putih keabuan dengan garis-garis coklat kemerahan, bau khas, rasa agak pahit, agak kelat.

MikroskopikPada penampang melintang akar tampak jaringan gabus, berdinding tipis, bentuk segi empat memanjang letaknya teratur. Sel parenkim korteks berdinding tipis, berisi butir pati, bentuk bundar atau setengah bundar mempunyai hilus, tunggal, atau berkelompok juga terdapat kristal kalsium oksalat berbentuk roset besar dan tersebar. Floem terdiri dari sel parenkim floem dan lebih kecil dari sel parenkim korteks, jari-jari empulur terdiri dari 1 sampai 2 sel. Endodermis terdiri dari 1 sampai beberapa lapis sel berdinding tipis, pada parenkim floem juga terdapat butir pati dan kristal kalsium oksalat bentuk roset besar. Xilem terdiri dari sel parenkim xilem berdinding tipis, berisi butir pati dan kristal kalsium oksalat besar, trakea besar bernoktah, jari-jari empulur terdiri dari 1 sampai 2 baris.

Fragmen serbuk simplisia akar kelembakSenyawa identitas 1,8-dihidroksiantrakuinonStruktur kimia

KandunganDari berbagai penelitian dapat diketahui bahwa kandungan dari akar kelembak ini diantaranya adalah 3-12% derivate hidroksiantrasena, 3,5,4-trihidroksistilbene-4-o-beta-d-glukopiranosi, 4-9p-hidroksifenil)-2-butanone-beta-d-glukosid, aloe-emodin, krisofanol, asam sinamat, d-katekol, emodin, asam gallat, hiperin, fiskion-8-o-beta-d-gentiobioside, fiskion-diglukosid, Quersetrin, Rhein, Rheinosid, rheosmin, sennosid a, sennosid b, tannin, tetrarin.

IV. Fraksinasi Curcuma dan RheiCurcuma Domestica

Pada dasarnya, curcumin banyak terdapat pada kunyit sehingga dapat dipastikan dari setiap fraksi yang diperoleh memiliki kandungan curcumin. Untuk menguji keberadaan curcumin maka dilakukan metode pemisahan dengan kromatografi lapistipis (KLT). Pada percobaan ini digunakan dua kromatografi, yaitu kromatografi kolom cepat dan kromatografilapis tipis. Mekanisme kerja dari kromatografi kolom adalah pemisahan suatu senyawa dalam kolom kromatografi dengan silica gel sebagai fasa diam dan campuran pelarut polar-non polar sebagai fasa gerak yang akan mengeluasi sampel, eluen bergerak turundan mengeluasi sampel digerakkan oleh daya gravitasi bumi. Eluen yang digunakanpada percobaan ini adalah n-heksana dan etil asetat. N-heksana bersifat non polar dan etil asetat bersifat polar. Eluen akan mengeluasi sampel kunyit menuju bawah (keluar kolom menuju vial). Fasa diam (silica gel) memiliki daya absorbsi yang cukup besar sehingga ketika eluen yang membawa sampel melewati fasa diam akan terbentuk fraksi-fraksi warna yang berbeda. Semakin pekat warna fraksi maka semakin banyak senyawa atau zat aktifyang dipisahkan dalam fraksi tersebut.Alat-alat yang akan digunakan yaitu seperangkat alat vakum, kromatografi kolom, timbangan analitik, vial,kertas perkamen, spektrofotometri UV, chamber, pipa kapiler, pipet tetes, gelas ukur,gelas beaker, gelas arloji, batang pengaduk, pinset, kertas saring, lempeng KLT, tissue,pensil, penggaris dan cawan porselen. bahan yang digunakan yaitu ekstrakkunyit (Curcuma domestica), silica gel 60 GF254, n- heksana, etil asetat dan metanol. Ekstrak kunyit (Curcuma domestica) merupakan ekstrak yang akan difraksinasi, silicagel merupakan fase diam yang digunakan pada kromatografi kolom. Silica gel 60GF254 dengan G melambangkan Gypsum (CaSO4), F melambangkan floroscene danangka 254 menunjukkan besarnya panjang gelombang, yaitu 254 nm. metanoldigunakan untuk melarutkan ekstrak, sedangkan n- heksana dan etil asetat merupakankomposisi dari eluen yang akan digunakan (fase gerak).Silica gel ditimbang sebanyak 15 gram dalam cawan porselen menggunakantimbangan digital (neraca analitik). Kemudian disiapkan alat kolom cepat denganmenghubungkan antara vakum dengan labu fitrat lalu alat dihubungkan dengan sumberlistrik. Setelah alat terangkai, silica gel sebanyak 3 spatula dimasukkan ke dalam kolomlalu dipasangkan pada labu filtrat. Vakum dinyalakan dan silica gel ditekanmenggunakan tabung reaksi secara perlahan hingga merata di dalam kolom. Vakumdimatikan kemudian langkah diatas diulangi hingga ketinggian silica mencapai tinggikolom. Setelah itu ditambahkan n-heksana sebanyak 20 ml ke dalam kolom danditunggu hingga turun. Hal ini dilakukan untuk pengkondisian kromatografi kolomsebelum dilakukan fraksinasi ekstrak.Ekstrak kunyit (Curcuma domestica) ditimbang sebanyak 0,13 gram di dalam cawanporselen menggunakan timbangan digital dan metanol diukur sebanyak 3 ml menggunakan gelas ukur. Silica gel ditimbang sebanyak 4 gram dalam cawan porselenmenggunakan timbangandigital.Kemudian ekstrak dilarutkandalam metanol padacawan poselen dan diaguk hingga homogen menggunakan batang pengaduk. Ekstrak tersebut ditambahkan serbuk silica kering dan diaduk hingga homogen dan ekstrakmenjadi kering kembali. Sebelum dilakukan fraksinasi, disiapkan 11macam eluen yang akan digunakan.Ekstrak kering dimasukkan ke dalam kolom hingga rata dengan dinyalakanvakum. Kemudian ditambahkan satu lapis fase diam dan dinyalakan vakum. Eluenpertama yaitu n-heksana sebanyak 20 ml dimasukkan ke dalam kolom, dinyalakanvakum dan ditampung tetesan n-heksana pada vial 1 sampai habis. Setelah ituditambahkan eluen kedua yaitu n heksana:etil asetat (9:1), dinyalakan vakum danditampung tetesan pada vial 2 hingga habis. Kemudian dikondisikan kembali dengan n-heksana, hal ini diulangi setiap akan dilakukan pergantian eluen pada kolom. Hal yangsama dilakukan pada eluen ketiga hingga kesebelas dan masing-masing hasilditampungpada masing masing vial (vial 1-11). Dalam proses pemisahan dengan kromatografikolom, adsorben silica gel harus senantiasa basah karena jika dibiarkan kering, kolomyang terbentuk bisa retak sehingga proses pemisahan zat tidak berjalan optimal. Selain itu, adsorben yang senantiasa basah berperan untuk memudahkan proses eluasi dalamkolom.Setelah didapatkan 11 fraksi eluen, dilakukan identifikasi senyawa menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT). Eluen yang digunakan adalah kloroform:ethanol:asam asetat glacial dengan perbandingan 95:5:1 sebanyak 20ml. Eluen yang telah dibuat kemudian dimasukkan ke dalam chamber . Setelah itu, kertas saring disiapkan dengan ukuran 2 cm x 10 cm. Kertas saring ini dimasukkan ke dalam chamber lalu ditutup dan dibiarkan hingga jenuh (eluen naik dalam seluruh bagiankertas saring).Dalam waktu yang bersamaan, dilakukan penotolan masing-masing fraksi pada lempeng KLT. Namun sebelumnya, pipa kapiler dicuci terlebih dahulu dengan metanol dengan cara menotolkan metanol pada tissue. Kemudian disiapkan 2 buah lempengKLT, diberi tanda batas bawah (1,5cm) dan batas atas(0,5 cm). Fraksi 1-5ditotolkanpada lempengKLT pertama sebanyak 6 L (6 kali penotolan) menggunakan pipakapiler. Sedangkan fraksi 6-11 ditotolkan pada lempeng KLT kedua sebanyak 4 L (4 kali penotolan) menggunakan pipa kapiler. Masing-masing lempeng KLT dimasukkanke dalam chamber dan diamati totolan tersebut hingga naik mencapai tanda batas atas.Setelah sampai tanda batas atas, lempeng KLT diambil menggunakan pinset dandibiarkan kering pada lemari asam. Noda yang tampak diamati secara visual, kemudian menggunakan UV 254 dan366 nm untuk melihatnoda lebih jelas.Rhei radixRhei radix mengandung senyawa aktif turunan dari senyawa antrakuinon (emolin, aloe-emolin, rhein, krisofanol, fision). Pemisahan antrakuinon yang baik dapat dicapai pada pelat silika gelasam tartrat memakai pengembang kloroformmetanol (99:1). Pelat disiapkan dari bubur silika gel yang dibuat dengan menggunakan larutan asam tartrat 3,75% dalam air: 5 pelat memerlukan 28g silika gel GF dan 72ml larutan asam tartrat. Antrakuinon dapat dideteksi pada pelat kromatografi dengan cahaya biasa dan sinar UV yang menghasilkan bercak berwarna. Dengan menyemprot pelat memakai larutan KOH 10% dalam metanol, warna yang semula kuning dan coklat kuning berubah menjadi merah, ungu, hijau, atau lembayung. Secara spektrofotometri antrakuionon dapat dibedakan dari 5 kelas kuinon lainnya karena mempunyai 4 atau 5 pita serapan di daerah UV dan daerah tampak. Sekurang-kurangnya 3 dari pita serapan tersebut terletak antara 215 dan 300 nm, dan serapan yang satu lagi di atas 430 nm.V. Isolasi Metode KromatografiCurcumaMikrodestilasikan 20 mg serbuk rimpang pada suhu 240oC selama 90 detik menggunakan tanur TAS, tempatkan hasil mikrodestilasi pada titik pertama dari lempeng KLT silica gel GF 254 P. Timbang 300 mg serbuk rimpang, campur dengan 5 ml methanol P dan panaskan dalam penangas air selama 2 menit, dinginkan, saring, cuci endapan dengan matanol P secukupnya sehingga diperoleh 5 ml filtrat. Pada titik kedua dari lempeng KLT totolkan 20 L filtrate dan pada titik ketiga totolkan 20 L zat warna I LP. Eluasi dengan dikloroetana P dengan jarak rambat 15 cm, keringkan lempeng di udara selama 10 menit, eluasi lagi dengan benzene P dengan arah eluasi dan jarak rambat yang sama. Amati dengan sinar biasa dan dengan sinar ultraviolet 366 nm. Semprot lempeng dengan anisaldehida-asam sulfat LP, panaskan pada suhu 110oC selama 10 menit, amati dengan sinar biasa dan dengan sinar ultraviolet 366 nm. Pada kromatogram tampak bercak-bercak dengan warna dan hRx sebagai berikut:

NohRxDengan sinar biasaDengan sinar UV 366 nm

Tanpa pereaksiDengan pereaksiTanpa pereaksiDengan pereaksi

1.4-8-Merah jambu-Lembayung

2.17-23-Merah jambu lembayung-Lembayung

3.24-30-Coklat tua-Lembayung

4.31-37-Lembayung-Lembayung

5.46-52-Merah jambu-Lembayung

6.55-61-Merah jambu-Lembayung

7.66-80-Merah jambu lembayung-Lembayung

8.84-88-Merah jambu lembayung-Lembayung

9.93-100-Lembayung -Lembayung

10.106-117-Biru lembayung-Lembayung

11.117-134-lembayung-Lembayung

12.172-177-Merah jambu-Lembayung

13.179-183-Merah jambu-Lembayung

Catatan : Harga hRx dihitung terhadap bercak merah jambu.Kadar abu. Tidak lebih dari 9%Kadar abu yang tidak larut dalam asam. Tidak lebih dari 1.6%Kadar sari yang larut dalam air. Tidak kurang dari 15%.Kadar sari yang larut dalm etanol. Tidak kurang dari 10%.Bahan organic asing. Tidak lebih dari 2%.Penyimpanan. Dalam wadah tertutup baik.Penggunaan. Kholagogum.Rhei RadixTimbang 300 mg serbuk akar campur dengan 5 ml metanol P, panaskan dalam penangas air selama 2 menit, dinginkan, saring, cuci endapan dengan metanol P secukupnya hingga diperoleh 5 ml filtrat. Pada titik pertama dan kedua lempeng KLT tutulkan 25 uL filtrat dan pada titik ketiga tutulkan 10 uL dari pembanding aloe emodin. Elusi dengan etil asetat P-metanol P-air (100+13,5+10) dengan jarak rambat 15 cm keringkan lempeng di udara selama 10 menit. Amati dengan sinar biasa dan sinar ultraviolet 366 nm. Semprot lempeng dengan kalium hidroksida 10% dalam etanol P, panaskan pada suhu 110C selama 10 menit, amati dengan sinar biasa dan sinar ultraviolet 366 nm. Pada kromatogram tampak bercak dengan warna dan hRx sebagai berikut :

NohRxDengan sinar biasaDengan sinar UV 366 nm

Tanpa pereaksiDengan pereaksiTanpa pereaksiDengan pereaksi

127-29KuningKuningCoklat jinggaJingga

240-44--Floresensi ungu kebiruanFloresensi ungu

344-48Kuning kecoklatanKuning kecoklatanCoklatCoklat jingga

451-54-Coklat-Coklat

559-62KuningKuning-Coklat

669-73-CoklatFloresensi ungu terangCoklat

775-79KuningMerah kecoklatanFloresensi kuning jinggaFloresensi jingga

Pola kromatografiLakukan kromatografi lapis tipis dengan parameter sebagai berikut :Fase gerak : n-Heksan P-kloroform P-etil asetat(20:1:1)Fase diam : silika gel 60 F254Larutan uji: 5% dalam metanol P, gunakan larutan uji KLT seperti yang tertera pada kromatografiLarutan pembanding : 1,8 dihidroksiantrakuinon 0,1% dalam metanol PVolume penotolan: totolkan 50 uL larutan uji dan 5 uL larutan pembandingDeteksi : kalium hidroksida etanol LP

Keterangan :S : simplisia akar kelembakP : pembanding 1,8-dihidroksiantrakuinonRf : pembanding 1,8-dihidroksiantrakuinon 0,60Rf 10,10Rf 20,20Rf 30,30Rf 40,40Rf 50,45Rf 60,60Rf 70,85Rf 80,95

Susut pengeringan Tidak lebih dari 10%Abu total Tidak lebih 11,6%Abu tidak larut asam Tidak lebih dari 0,5%Sari larut air Tidak kurang 17,1%Sari larut etanol Tidak kurang dari 13,7%

VI. KhasiatKhasiat Rhei RadixBerkat kandungan antrasena dan tannin yang dipunyainya maka berdasarkan dosis, akar kelembak dapat mempunyai kegunaan sebagai obat mempermudah buang air besar dengan dosis 1-2 g. Sebaliknya, akar kelembak bisa juga berkhasiat sebagai anti diare dan mengatasi nyeri lambung apabila dipakai dalam doses 0,1 0,2 g. Namun demikian khasiat utama dari tanaman ini adalah sebagai pencahar untuk sembelit terutama dalam hal hal yang berkaitan dengan penyakit ambeien, adanya luka pada daerah dubur dan juga setelah operasi yang berkaitan dengan dubur.Khasiat Curcuma DomesticaPolifenol ini merupakan bahan penting dari kari, juga digunakan sebagai zat warna kuning (E100) dalam industry makanan (a.l. mustard, keju, margarin). Pada tahun tahun terakhir telah dibuktikan khasiat anti oksidansnya yang sangat kuat terhadap radikal-hidroksil, superoksida dan proses-proses peroksidasi. Juga berkhasiat anti-radang yang menyerupai efek NSAID dan juga diperkirakan berfungsi menurunkan dengan kuat pembentukan plak di pembuluh dan sel-sel otak. Telah diketahui pula bahwa di negara negara di mana banyak digunakan curcuma prevalensi demensia jauh lebih jarang. Selain itu curcumin menghambat penggumpalan pelat darah (antiagregasi) dan menurunkan kolesterol plasma dengan menstimulasi pengubahannya menjadi asam empedu di samping meningkatkan kelarutan empedu dan dengan melawan pembentukan batu empedu. Berdasarkan efek antioksidansnya curcumin dapat menghambat proliferasi sel sel tumor dari kanker usus besar dan payudara. Maka kini sering digunakan pada terapi alternative dari jenis kanker ini. Lagipula sifat ini melindingi saraf otak terhadap lipida-peroksidasi dan produknya (amiloid-beta), yang bertanggungjawab bagi terjadinya demensia Alzheimer. Akhirnya berkat efek protektifnya terhadap hati, curcumin juga digunakan pada gangguan gangguan hati dan empedu.