UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALAFACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIALABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Pardo Leiva Yasmani CarlosCurso: Quinto Año Paralelo: “B” Grupo N°: 3

Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 24 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 1 de Julio del 2014

PRÁCTICA N° 4

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Intraperitonial.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Etanol puro.

2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el Etanol.

3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Etanol.

MATERIALES

Jeringuilla de 10cc Probeta Cronómetro Equipo de disección Bisturí Vaso de precipitación Erlenmeyer Equipo de destilación. Tubos de ensayo Pipetas Bata de Laboratorio Guantes de látex Mascarilla Gorro Zapatones

PROCEDIMIENTO

1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo.2. La bioseguridad: colocarse la mascarilla, bata de laboratorio, gorro, zapatones y los guantes.

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SUSTANCIAS

Etanol Puro. Lámina de Cobre Solución de Ácido tartárico. NaOH 0.1 N Permanganato de potasio al 1% Ácido sulfúrico puro Ácido oxálico Fushina bisulfatada Cloruro de fenilhidracina al 4% Nitroprusiato de sodio al 2.5 % Ácido clorhídrico Cloruro de fenil hidracina Ferricianuro de potasio al 5%, Ácido cromotrópico..

3. Disponer y medir la sustancia que se va a administrar (Etanol). 4. Administrar 10ml de Etanol puro por vía intraperitoneal.5. Colocar el cobayo en la panema.6. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo muere.7. Amarramos al cobayo en la tabla de disección. 8. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.9. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir al cobayo.10. Observamos los cambios que presentan sus órganos.11. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente

adecuado (Vaso de precipitación). 12. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de ácido tartárico. Esto lo llevamos a un balón.13. Procedemos a destilar.14. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor, se practican las

diferentes reacciones de reconocimiento.

Reacciones y Conducta Post-Administración

Tiempo de muerte: 1 minuto 20 segundos (7:52 – 7:53)

Síntomas: Picazón, Convulsión, Presencia de Orina.

7.52 Se inyectó la dosis al cobayo. Le presenta picazón.

7:53 Cae al suelo presentando convulsión, y a los 20 segundos Muere.

GRAFICOS

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Administrando la sustancia toxica por vía Intraperitonial

Colocamos el cobayoEn la panema y observamos

sus manifestaciones

Rasurando al cobayo.

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN LA MUESTRA

Reconocimiento en Medios Biológicos

Reacción de SchiffReacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial.

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Disección del cobayo Colocando las vísceras y fluidos (picadas lo más finas posibles)

Acidificando con ácido tartárico.

Destilamos colocando con 50 perlas de vidrio

Realizando las reacciones en el destilado que obtuvimos.

Armamos el equipo de destilación.

7 8 9

10 11

Reacción de RiminiReacción Positivo Característico Coloración azul intenso

Reacción con la fenil hidracina.

Reacción Positivo no característico Coloración roja

Reacción de Marquis.

Reacción Positivo Característico Coloración violeta.

Reacción con ácido Cromotrópico.

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Reacción Reacción Negativa No se produjo Coloración roja.

Reacción de Hehner Reacción Reacción Negativa No se produjo Coloración violeta

OBSERVACIONES

Pude observar que al administrar Etanol puro por vía intraperitoneal al cobayo, éste presentó picazón, convulsiones, se orinó, y por ultimo presentó necropsia de la gran parte de las vísceras al momento de abrirlo.

Observar con que sustancia se va a trabajar, en este caso: tóxicos volátiles y por lo tanto debido a su toxicidad se debe usar guantes y mascarilla.

CONCLUSIONES

Al final de esta práctica la reacción que presenta el cobayo ante la intoxicación con etanol puro, aprendimos como el metanol en una sustancia que puede provocar grandes daños en los organismos vivos, observamos lo que provoca internamente el etanol y los signos que presento el cobayo cuando a este se le administro la sustancia, cabe mencionar que la dosis depende del peso del ser vivo en este caso del cobayo.

RECOMENDACIONES

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Realizar las reacciones de identificación en la Sorbona. No pipetear las sustancias con la boca. Preparar correctamente las sustancias a la concentración que se requiere. Tener mucho cuidado con el líquido y vísceras ya que contienen concentraciones del etanol.

CUESTIONARIO

¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas del etanol?

Propiedades Físicas: Estado de agregación Líquido

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Apariencia Incoloro Densidad 810 kg/m3; (0,810 g/cm3) Masa molecular 46,07 uma Punto de fusión 158,9 K (-114,1 °C) Punto de ebullición 351,6 K (78,6 °C) Temperatura crítica 514 K (241 °C) Presión crítica 63 atm. Propiedades Químicas

Acidez (pKa) 15,9 Solubilidad en agua Miscible KPS n/d Momento dipolar n/d D Termoquímica ΔfH0gas -235.3 kJ/mol ΔfH0líquido -277.6 kJ/mol S0líquido, 1 bar 161.21 J•mol-1•K-1

¿Cuáles son las aplicaciones del etanol?

Es muy utilizado en la realización de bebidas alcohólicas, en los sectores farmacéuticos e industriales, la industria química lo utiliza como compuesto de partida en la síntesis de diversos productos, como el acetato de etilo, el éter dietílico también se utiliza en la elaboración de perfumes y ambientadores. Se emplea como combustible industrial y doméstico.

¿Qué toxicología presenta el etanol?

Impide la coordinación correcta de los miembros, pérdida temporal de la visión. Puede afectar al sistema nervioso central provocando mareos, somnolencia, confusión, estados de euforia, pérdida temporal de la visión.

En ciertos casos se produce un incremento en la irritabilidad del sujeto intoxicado como también en la agresividad; en otra cierta cantidad de individuos se ve afectada la zona que controla los impulsos, volviéndose impulsivamente descontrolados y frenéticos. Finalmente, conduce al coma y puede provocar la muerte.

WEBGRAFÍA:

Toxicidad   por   etanol   y su efecto sobre las vías visuales [Web en línea]Disponible en: vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3373.pdf

Etanol   4.19 [Web en línea]Disponible en: www.minambiente.gov.co/documentos/Guia19.pdf

Etanol - EcuRed [Web en línea]http://www.ecured.cu/index.php/Etanol

RevisadoDía Mes Año

Machala, 24 de Julio del 2014

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Yasmani Pardo Leiva Bioq. Carlos García. Mg. Sc. Estudiante Catedrático

GLOSARIO

AZEOTRÓPICA: Es una mezcla líquida de dos o más compuestos químicos que hierven a

temperatura constante y que se comportan como si estuviesen formadas por un solo componente. Un

azeótropo, puede hervir a una temperatura superior, intermedia o inferior a la de los constituyentes de

la mezcla, permaneciendo el líquido con la misma composición inicial, al igual que el vapor, por lo

que no es posible separarlos por destilación simple o por extracción líquido-vapor utilizando líquidos

iónicos.

ETANOL: conocido como alcohol etílico, es un alcohol que se presenta en condiciones normales

de presióny temperatura como un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78,4 °C.

Mezclable con agua en cualquier proporción; a la concentración de 95 % en peso se forma una mezcla

azeotrópica.

EUFORIA: La euforia está medicamente reconocida como un estado mental y emocional en la que

una persona experimenta sentimientos intensos de bienestar, felicidad, excitación y júbilo.

Técnicamente la euforia puede considerarse como un afecto, pero coloquialmente es usado para

definir la emoción como un estado intenso de felicidad trascendente con una sensación inmensa

de satisfacción.

PSICOMOTOR: El desarrollo psicomotor es el movimiento corporal de manos, piernas brazos etc.

así como diferentes músculos del cuerpo. Que está relacionado con los factores psicológicos que

intervienen en la movilidad.

RALENTIZAR: Hacer más lento un proceso o una actividad, lentificar.

ANEXOS:

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ETANOL

Formula estructural de la molécula de etanol.

El compuesto químico etanol es un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78 °C. Se mezcla con agua en cualquier proporción y da una mezcla azeotrópica con un contenido de aproximadamente el 96 % de etanol.

Su fórmula química es C2H5OH. El metanol es el alcohol que se encuentra en las bebidas alcohólicas.

Toxicología:

El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de euforia. Al mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas ralentiza los movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc. Finalmente conduce al coma y puede provocar la muerte.

Una elevada parte de los accidentes de tráfico está relacionada con la ingesta de etanol.

La resistencia al alcohol parece aumentar en las personas adultas mientras que los niños son especialmente vulnerables. Se han reportado casos de bebés que murieron por intoxicación debido a la inhalación de vapores de etanol tras haberles aplicado trapos impregnados de alcohol.

También es un desinfectante. Su mayor potencial bactericida tiene a una concentración de aproximadamente el 70 %

Analítica:

Un método de determinar la concentración aproximada del etanol en la sangre aprovecha el hecho que en los pulmones se forma un equilibrio que relaciona esta concentración con la concentración de vapor de etanol en el aire expirado. Este aire se pasa por un tubo donde se halla sílica gel impregnado con una mezcla de dicromato y ácido sulfúrico. El dicromato de color rojo-naranja oxida el etanol a

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acetaldehído y es reducido a su vez a cromo (III) de color verde. La longitud de la zona que ha cambiado de color indica la cantidad de etanol presente en el aire si se hace pasar un determinado volumen por el tubo.

CONCENTRACION DEL ALCOHOL EN LA SANGRE 

El alcohol es una sustancia depresiva que incide directamente en  el funcionamiento del sistema nervioso. 

Al incorporarse a la sangre comienza a afectar a la persona inmediatamente. 

El alcohol entra al torrente sanguíneo desde: 

El estómago, en donde se absorbe una cantidad pequeña.   El intestino delgado, donde se absorbe la mayoría del alcohol.  

La sangre transporta el alcohol a todo el cuerpo. 

En el hígado El alcohol se convierte en agua, dióxido de carbono y energía, a la razón de 15 miligramos de alcohol puro por hora. 

En el cerebro El proceso de razonamiento se disminuye conforme el alcohol afecta a las neuronas. Entre más alta sea la concentración del alcohol, mayor será el número de neuronas afectadas. 

Los efectos duran hasta que TODO el alcohol ha sido procesado. Esto tarda aproximadamente una hora y media por 1/3 de cerveza, un vaso de vino o 1 cóctel en una persona de 75 kg. 

EFECTOS DEL ALCOHOLISMO 

Podemos considerar que existen dos tipos de intoxicación debida al consumo de alcohol cada una con características diferentes: INTOXICACIÓN AGUDA e INTOXICACIÓN CRÓNICA  

INTOXICACIÓN AGUDA: 

Es la ocasionada por la ingestión masiva de alcohol. La absorción de este alcohol por el organismo está determinada por: 

La graduación: concentración de alcohol en la bebida. La composición química de las bebidas: puede favorecer la absorción del alcohol. La presencia de comida en el estómago. El peso del sujeto: menos peso, más absorción. El sexo: las mujeres son más sensibles. La habituación: estados avanzados de alcoholismo reducen la tolerancia al alcohol. 

Una vez absorbido el alcohol, es metabolizado en una compleja serie de reacciones.

 Los efectos, según la cantidad, pasan por: 

FASE PRODRÓMICA

( 0,25 gr./l -0,3 gr./l ) Cuando el individuo percibe un cambio en su estado mental. Determinados tests psicomotores y aptitud revelan ALTERACIONES que afectan la percepción de los sentidos y una disminución de los reflejos. 

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EXCITACIÓN

( 0,3 gr. / 1,5 gr./l ) Perdida de la inhibición y perdida del autocontrol con parálisis progresiva de  los procesos mentales más complejos. Este es el primer estado que puede comportar cambios de personalidad. 

INCOORDINACIÓN

(1,5 gr. /l - 3 gr./l) : Temblor, confusión mental, incoordinación motriz: generalmente, la persona acaba durmiéndose. 

COMA Y MUERTE (+3 gr./l).

Intoxicación Crónica 

Provocada por intoxicaciones agudas repetidas o excesivas y continuadas consumo de alcohol. La enfermedad dependerá del hábito de beber de cada individuo.

El beber consistentemente y en forma sostenida puede con el transcurso del tiempo causar síntomas de supresión durante los períodos de no tomar y un sentido de dependencia, pero esta  dependencia física no es la única causa del alcoholismo. Estudios sobre las personas con enfermedades crónicas quiénes han tomado medicamentos para el dolor durante mucho tiempo han encontrado que una vez que estas personas resisten el proceso de retiro físico, a menudo pierden todo deseo para los medicamentos que habían estado tomando. Para desarrollar alcoholismo, otros factores generalmente juegan un rol, incluyendo la biología y la genética, la cultura y la psicología. 

Efectos Físicos  

El alcohol no está expuesto a ningún proceso de digestión por lo que en su mayoría pasa primero al intestino delgado para después ser absorbido por el torrente sanguíneo. Sólo una pequeña parte llega directamente a la sangre a través de las paredes estomacales. En la sangre el alcohol es metabolizado (descompuesto para ser eliminado o aprovechado por el organismo) mediante el proceso de oxidación. Es decir, se fusiona con el oxígeno y se descompone de modo que sus elementos básicos abandonan el cuerpo de forma de bióxido de carbono y agua. El primer lugar de oxidación es el hígado, el cual descompone aproximadamente el 50% del alcohol ingerido en una hora. El resto permanece en el torrente sanguíneo hasta ser eliminado lentamente. 

Efectos Psicológicos  

El alcohol afecta en primer lugar al Sistema Nervioso Central y su ingerencia excesiva y prolongada puede provocar daño cerebral. Popularmente se cree que el alcohol incrementa la excitación, pero en realidad deprime muchos centros cerebrales. La sensación de excitación se debe precisamente a que al deprimirse algunos centros cerebrales se reducen las tensiones y las inhibiciones y la persona experimenta sensaciones expandidas de sociabilidad o euforia. Por eso se dice, que el alcohol “anestesia la censura interna”.

Sin embargo, si la concentración de alcohol excede ciertos niveles en la sangre interfiere con los procesos mentales superiores de modo que la percepción visual es distorsionada, la coordinación motora, el balance, el lenguaje y la visión sufren también fuertes deterioros.

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Fuertes cantidades de alcohol reducen el dolor y molestias corporales e inducen al sueño. Pero su uso continuo irrita las paredes estomacales llegando incluso a desarrollarse úlceras. 

Adicionalmente tiende a acumularse grasa en el hígado, interfiriendo con su funcionamiento.

En alcohólicos crónicos se provocan graves trastornos cerebrales, hepáticos (cirrosis) y cardiovasculares (aumenta la presión sanguínea y con ello el riesgo de un infarto). Incluso, está demostrado que el alcohol incrementa el nivel de los triglicéridos (grasa no saturada o vegetal en las arterias) y con ello también el riesgo de un infarto.  

Finalmente, como es ampliamente conocido, el alcohol provoca adicción física y dependencia psicológica.

 ¿Qué daños provoca el alcohol en el organismo?

En un momento dado depender de su concentración en la sangre que a su vez es determinada por los siguientes factores:

Cantidad ingerida en un periodo de tiempo. Presencia o ausencia de alimentos en el estómago que retengan el alcohol y reduzcan su tasa

de absorción. Peso corporal, y Eficiencia del hígado de la persona que lo ingiere.

RECONOCIMIENTO DE ETANOL

b) Reconocimiento en medio biológico

Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una destilación con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas anteriormente.

Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega a una solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico puro en condiciones que se formen 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las dos capas.

Las demás reacciones de identificación del alcohol etílico, solo pueden realizárselas oxidándolo a aldehído etílico. La oxidación se efectúa con la mezcla sulfo – crómica y se realiza de la siguiente manera:

Al balón que contiene el destilado del alcohol se le agregan 10 g de dicromato de potasio, se le deja caer lentamente 10 – 20 ml de ácido sulfúrico concentrado hasta observar que la mezcla que tenía color amarillo del dicromato se vuelve negra, lo que significa que el etanol ha sido oxidado a etanal.

De esta forma, las reacciones que se practican para el alcohol etílico, son las mismas que se hicieron para el metanal.

En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de formaldehído, así:

1. Reacción de Schiff.- Se produce color violeta2. Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso.

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3. Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella.4. Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta.5. Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo.6. Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.

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