pengaruh air rebusan daun insulin (tithonia · pdf fileselama perkuliahan, penelitian, dan...
TRANSCRIPT
PENGARUH AIR REBUSAN DAUN INSULIN (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS
JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI GLUKOSA
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Mila Karmila Sri Setiomulyo
NIM: 128114039
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2016
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
i
PENGARUH AIR REBUSAN DAUN INSULIN (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS
JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI GLUKOSA
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Mila Karmila Sri Setiomulyo
NIM: 128114039
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2016
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
Persetujuan Pembimbing
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
Pengesahan Skripsi Berjudul
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
PERSEMBAHAN
Karya ini kupersembahkan untuk
Keluargaku tercinta
Teman-temanku
Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH
UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas
berkat dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “Pengaruh Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) Terhadap Kadar Glukosa Tikus Jantan Galur Wistar yang Terbebani
Glukosa”. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Farmasi (S.Farm).
Selama perkuliahan, penelitian, dan penyusunan skripsi, penulis banyak
mendapat bantuan dari berbagai pihak berupa bimbingan, sarana, dukungan,
semangat, doa, kritik dan saran. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Yunita Linawati, S.Si., M.Sc., Apt. selaku Dosen Pembimbing yang
telah banyak meluangkan waktu, membimbing, dan memberi masukan,
solusi, nasehat serta semangat kepada penulis selama penelitian dan
penyusunan skripsi. Terima kasih untuk pengetahuan, pengalaman, dan
berbagai hal yang dibagikan kepada penulis.
2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Apt., Ph.D. selaku Dosen Penguji yang telah
bersedia meluangkan waktu untuk menguji, memberikan masukan, kritik
dan saran kepada penulis.
3. Bapak Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt. Selaku Dosen Penguji yang
telah bersedia meluangkan waktu untuk menguji, memberikan kritik dan
saran yang membangun.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
4. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt. selaku Kepala Laboratorium Farmasi
yang telah memberikan ijin penggunaan semua fasilitas laboratorium guna
penelitian skripsi ini.
5. Bapak Enade Perdana Istyastono, Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing
Akademik atas bimbingan dan semangat selama perkuliahan hingga
penyusunan skripsi ini.
6. Segenap dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma atas segala
bimbingan selama perkuliahan.
7. Bapak Heru, Bapak Kayat, Bapak Parjiman dan semua staf laboratorium
yang telah bersedia membantu selama penelitian ini berlangsung.
8. Papa dan Mama tercinta yang telah memberikan pehatian, semangat,
dukungan, dan doa selama penyusunan skripsi ini.
9. Lia Natalia Setiomulyo, S.Farm., Apt dan Nia Aprinia Setiomulyo atas
dukungan,semangat, dan masukan yang telah diberikan kepada penulis.
10. Bapak Sie Mun Ding yang telah memberikan informasi adanya daun
Insulin.
11. Bapak Ir. Tjahjono Indrawan dan Ibu drh. Lianasari, atas masukan yang
telah diberikan kepada penulis.
12. Maria Magdalena Lita atas semangat dan waktu yang selalu ada untuk
mendengarkan curahan hati penulis.
13. Januaritha Dara Nastiandari dan Ludwina Dearesthea Onevita sebagai
teman satu tim, atas bantuan dan kerjasamanya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
14. Eunike Lystia Florentein Kelana Jeversoon, Paulina Nugraheni Ageng
Prihanti, Christina Ari Listyani, Dewi Anugerah Fitriyani atas semangat
yang telah diberikan selama penyusunan skripsi ini.
15. Teman-teman FST 2012, Kelas A 2012, dan KKN L kelompok 16.
Terimakasih atas kebersamaan yang tidak akan terlupakan dan suka duka
yang pernah kita alami.
16. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu, terima kasih atas
semua bantuan yang telah diberikan kepada penulis.
Penulis menyadari bahwa penelitian dan penulisan skripsi ini masih
banyak kekurangan,mengingat keterbatasan pengetahuan dan kemampuan penulis.
Oleh karena itu, penulis mengharapkan saran dan kritik membangun dari berbagai
pihak. Akhir kata, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu
pengetahuan.
Yogyakarta,
penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ............................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................... iv
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ..................... v
PERNYATAAN KEASLIAN PENELITIAN ........................................... vi
PRAKATA .............................................................................................. vii
DAFTAR ISI ........................................................................................... x
DAFTAR TABEL ................................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR ............................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xvi
INTISARI ................................................................................................ xvii
ABSTRACT .............................................................................................. xviii
BAB I PENGANTAR .............................................................................. 1
A. Latar Belakang................................................................................. 1
1. Permasalahan............................................................................... 3
2. Keaslian Penelitian...................................................................... 3
3. Manfaat Penelitian....................................................................... 4
B. Tujuan Penelitian.............................................................................. 4
BAB II PENELAAHAN PUSTAKA.......................................................... 6
A. Diabetes Mellitus.............................................................................. 6
1. Definisi......................................................................................... 6
2. Klasifikasi..................................................................................... 6
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
3. Tanda dan Gejala.......................................................................... 8
4. Diagnosa....................................................................................... 9
B. Metabolisme Karbohidrat................................................................. 9
C. Glibenklamid.................................................................................... 13
D. Metode Uji Efek Antidiabetes.......................................................... 14
1. Metode Uji Toleransi Glukosa Oral............................................. 14
2. Metode Uji dengan Merusak Pankreas......................................... 14
E. Metode Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah..................................... 15
1. Metode Reduksi-Oksidasi............................................................ 15
2. Metode Kondensasi....................................................................... 15
3. Metode Enzimatik......................................................................... 15
F. Daun Insulin ..................................................................................... 16
1. Uraian Tanaman............................................................................ 16
2. Taksonomi.................................................................................... 17
3. Kandungan Tanaman.................................................................... 17
G. Landasan Teori.................................................................................. 18
H. Hipotesis............................................................................................ 18
BAB III METODE PENELITIAN............................................................... 19
A. Jenis dan Rancangan Penelitian......................................................... 19
B. Variabel dan Definisi Operasional..................................................... 19
1. Variabel Utama.............................................................................. 19
2. Variabel Pengacau......................................................................... 20
3. Definisi Operasional........................................................................... 20
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
C. Bahan dan Alat Penelitian....................................................................... 21
1. Bahan Penelitian................................................................................. 21
2. Alat Penelitian.................................................................................... 22
D. Tata Cara Penelitian................................................................................ 23
1. Determinasi Tanaman.......................................................................... 23
2. Pengumpulan Bahan Uji...................................................................... 23
3. Pembuatan Air Rebusan Daun Insulin................................................. 23
4. Perhitungan Dosis Pemberian Air Rebusan Daun Insulin................... 23
5. Preparasi Bahan................................................................................... 24
6. Orientasi Waktu Pemberian Glibenklamid.......................................... 25
7. Orientasi Dosis Pemberian Air Rebusan Daun Insulin....................... 26
8. Penetapan Waktu Pemberian Air Rebusan Daun Insulin.................... 27
9. Tahap Percobaan................................................................................. 27
10. Penetapan Kadar Glukosa Darah dengan Metode GOD-PAP......... 29
E. Tata Cara Analisis Hasil.......................................................................... 30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................ 31
A. Hasil Determinasi Tanaman..................................................................... 31
B. Hasil Percobaan Pendahuluan.................................................................. 31
1. Penetapan Waktu Pemberian Glibenklamid........................................ 31
2. Penetapan Dosis Sediaan Air Rebusan Daun Insulin.......................... 33
C. Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Air Rebusan Daun Insulin......... 34
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN............................................................. 43
A. Kesimpulan.............................................................................................. 43
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
B. Saran........................................................................................................ 43
DAFTAR PUSTAKA......................................................................................... 44
LAMPIRAN....................................................................................................... 48
BIOGRAFI PENULIS....................................................................................... 70
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Kadar Glukosa Darah Sewaktu dan Puasa sebagai Patokan Penyaring
dan Diagnosis Diabetes Mellitus (mg/dL) ...................................... 9
Tabel II. Isi Pereaksi Enzim Glucose GOD-PAP ......................................... 21
Tabel III. Volume Pengukuran Kadar Glukosa Darah.................................. 29
Tabel IV. Perhitungan Selisih LDDK0-240
Suspensi Glibenklamid Sebelum
UTGO dengan Kontrol CMC ........................................................ 32
Tabel V. Rerata Kadar Glukosa Darah dan LDDK0-240
Setiap Perlakuan...... 36
Tabel VI. Hasil Post Hoc Scheffe LDDK0-240
Kadar Glukosa ..................... 39
Darah Tikus Terbebani Glukosa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Mekanisme Sekresi Insulin ........................................................ 11
Gambar 2. Struktur Glibenklamid ............................................................... 13
Gambar 3. Tanaman Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) ......... 16
Gambar 4. Skema Penelitian ....................................................................... 27
Gambar 5. Diagram LDDK0-240
Glibenklamid Sebelum UTGO ................... 33
Gambar 6. Reaksi Enzimatik Antara Glukosa dengan Reagen GOD-PAP ... 35
Gambar 7. Kurva Hubungan Antara Waktu dengan Kadar Glukosa Darah .. 37
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance) ................. 49
Lampiran 2. Surat Pengesahan Determinasi .................................................. 50
Lampiran 3. Foto Tanaman Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) . 51
Lampiran 4. Foto Hewan Uji Tikus Jantan Galur Wistar ............................... 52
Lampiran 5. Foto Alat Penelitian................................................................... 53
Lampiran 6. Preparasi Bahan Perlakuan ........................................................ 54
Lampiran 7. Perhitungan Penetapan Peringkat Dosis Air Rebusan Daun
Insulin pada Kelompok Perlakuan ............................................ 56
Lampiran 8. Analisis Statistik Data LDDK0-240
Penetapan Waktu Pemberian
Glibenklamida Menggunakan SPSS 15 ..................................... 58
Lampiran 9. Analisis Statistik Data LDDK0-240
Orientasi Dosis Pemberian
Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) Menggunakan SPSS 15.................................................. 60
Lampiran 10. Analisis Statistik Data LDDK0-240
Efek Penurunan Kadar
Glukosa Darah Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) Menggunakan SPSS 15 .............................. 63
Lampiran 11. Leaflet Glibenklamid............................................................... 66
Lampiran 12. GOD-PAP ............................................................................... 68
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
INTISARI
Diabetes mellitus (DM) adalah penyakit metabolik dengan karakteristik
hiperglikemia karena kelainan insulin. Penderita DM setiap tahun terus
meningkat. Pengobatan secara tradisional banyak ditempuh, salah satunya dengan
menggunakan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) untuk
menurunkan kadar glukosa darah. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui
pengaruh air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
terhadap kadar glukosa tikus jantan galur wistar yang terbebani glukosa.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni rancangan acak
lengkap pola searah dengan menggunakan 30 ekor tikus jantan galur Wistar dan
dibagi menjadi enam kelompok. Kelompok I (kontrol normal) CMC 1%,
kelompok II (kontrol positif) glibenklamid 0,45mg/kgBB, kelompok III (kontrol
negatif) glukosa 15% b/v; 1,75g/kgBB, kelompok IV, V, dan VI (perlakuan) air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 630, 1373,
dan 3000 mg/kgBB. Pemberian pada tikus secara oral dan diuji dengan metode
Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO). Kadar glukosa darah ditetapkan pada menit
ke - 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, dan 240 dengan metode enzimatis GOD-PAP.
Data LDDK0-240
tiap kelompok dianalisis secara statistik menggunakan metode
One Way ANOVA dan uji Post-Hoc Scheffe bertaraf kepercayaan 95%.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus
yang terbebani glukosa. Dosis air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) yang dapat menurunkan kadar glukosa darah yaitu 1373
mg/KgBB dan 3000 mg/KgBB.
Kata Kunci : air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray),
glukosa darah, UTGO, GOD-PAP.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
ABSTRAK
Diabetes mellitus (DM) is a metabolic diseases with characteristic
hyperglycemia due to insulin abnormalities. Patients DM continues to increase
every year. Traditional medicine widely taken, one of which is by using insulin
leaves (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) to lower blood glucose levels.
This study was conducted to determine the effect of boiled water of the leaves
insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) against glucose levels Wistar
strain male rats burdened glucose.
This study is a purely experimental randomized complete design with a
unidirectional pattern using 30 Wistar male rats and divided into six groups.
Group I (normal control) CMC 1%, group II (positive control) glibenclamide
0.45mg/kgBW, group III (negative control) Glucose 15% w/v; 1.75g/KgBW,
group IV, V, and VI (treated) boiled water of the leaves insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dose of 630, 1373, and 3000 mg/kgBW. Giving the
rats administered orally and tested methods Oral Glucose Tolerance Test
(UTGO). Blood glucose levels are set in minutes - 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180,
and 240 by the enzymatic method GOD-PAP. LDDK0-240
each group were
statistically analyzed using One Way ANOVA and Post-Hoc Scheffe 95%
confidence level.
The results showed that the boiled water of the leaves insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) can lower blood glucose levels on rats in burdened
glucose. Dosage boiled water leaves insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) to lower blood glucose levels are 1373 mg/KgBW and 3000 mg/KgBW.
Keywords: boiled water of the leaves insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray), blood glucose, UTGO, GOD-PAP.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Diabetes mellitus (DM) merupakan permasalahan kesehatan serius di
seluruh dunia. Jumlah penduduk di dunia yang menderita DM cenderung
meningkat dari tahun ke tahun. Menurut WHO (2014), 347 juta orang di seluruh
dunia mengidap DM. DM merupakan penyebab langsung dari 1,5 juta kematian di
tahun 2012. Lebih dari 80% kematian karena DM terjadi di negara berpenghasilan
rendah dan menengah. WHO memproyeksikan bahwa DM akan menjadi 7
penyebab kematian utama pada tahun 2030. Di Indonesia, kekerapan DM berkisar
antara 1,4 - 1,6%, prevalensi DM diperkirakan mencapai 21,3 juta orang pada
tahun 2030.
DM adalah suatu kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik
hiperglikemia yang terjadi karena kelainan sekresi insulin, kerja insulin, atau
kedua-duanya. DM dibagi menjadi 4 jenis yaitu DM tipe 1, DM tipe 2, DM tipe
lain, dan DM gestasional. Penatalaksanaan DM yaitu latihan jasmani dan terapi
farmakologis. Terapi farmakologis terdiri dari obat oral dan bentuk suntikan
(American Diabetes Association, 2011).
Kekurangan dari terapi obat oral maupun suntikan yaitu harga obat yang
tidak murah dan memiliki efek samping. Oleh karena itu, banyak digunakan obat
tradisional untuk mengobati DM. Obat tradisional adalah obat yang dibuat dengan
menggunakan bahan-bahan alami seperti tumbuhan sebagai bahan dasar obat.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
Biasanya obat tradisional diolah dengan cara direbus, ditumbuk, atau dicampur
sesama bahan tradisional dengan komposisi tertentu (Rahmawati, 2013). Obat
tradisional banyak digunakan oleh masyarakat Indonesia dalam pengobatan,
contohnya yaitu air rebusan daun insulin yang digunakan untuk mengobati DM.
Tanaman ini memiliki nama ilmiah Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray.
Berasal dari Meksiko, daun insulin di kalangan orang Jawa dikenal dengan rondo
semoyo, kembang bulan atau kayu paik, kipait dan harsaga (Didik dan
Sulistijowati, 2001). Menurut penelitian yang dilakukan oleh Miura et al. (2005)
diketahui bahwa ekstrak etanol 80% daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.)
A. Gray) dosis 100, 500, dan 1500 mg/kgBB dapat menurunkan kadar glukosa
darah pada tikus model DM tipe 2 secara signifikan setelah 7 jam pemberian.
Berdasarkan penelitian oleh Thongsom et al. (2013) menunjukkan bahwa ekstrak
air daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 500mg/kgBB dapat
menurunkan kadar glukosa darah pada tikus dengan metode Uji Toleransi
Glukosa Oral (UTGO) dan metode induksi aloksan. Menurut Prasetyo (2016)
penelitian infusa daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 250,
500, dan 750 mg/kgBB dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus yang
diinduksi aloksan.
Daun insulin memiliki kandungan flavonoid, glikosida, saponin, dan tanin
(Purba, 2003). Mekanisme kerja saponin yaitu dengan menghambat GLUT-1
sehingga menurunkan absorbsi glukosa (Blasiak et al., 2003). Flavonoid pada DM
dapat menghindari absorpsi gula, menstimulasi pengambilan glukosa pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
jaringan perifer, juga dapat bertindak seperti insulin dengan cara mempengaruhi
mekanisme insulin signaling (Getha, 2010). Tanin dapat memacu metabolisme
glukosa dan lemak, sehingga timbunan dari kedua sumber kalori ini dapat
dihindari. Tanin juga memiliki aktivitas hipoglikemik dengan meningkatkan
glikogenesis (Dalimartha, 2005).
1. Permasalahan
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka dapat dirumuskan masalah
sebagai berikut :
a. Apakah air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang
terbebani glukosa?
b. Berapakah dosis air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) yang dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur
Wistar yang terbebani glukosa?
2. Keaslian Penelitian
Penelitian tentang daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
yang pernah dilakukan yaitu oleh Miura et al. (2005) yang berjudul “Antidiabetic
effect of Nitobegiku, the herb Tithonia diversifolia, in KK-Ay diabetic mice”,
Thongsom et al. (2013) yang berjudul “Antioxidant and Hypoglycemic Effect of
Tithonia diversifolia Aqueous Leaves Extract in Alloxan-Induced Diabetic Mice”,
dan Prasetyo (2016) yang berjudul “Perbandingan Efek Hipoglikemik Infusa
Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dan Metformin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
pada Tikus yang Diinduksi Aloksan”. Perbedaan dengan penelitian ini adalah
bentuk sediaan yang digunakan, yaitu menggunakan air rebusan daun insulin.
Sejauh ini penelusuran pustaka terkait dengan penelitian mengenai
pengaruh air rebusan daun insulin belum pernah dilakukan.
3. Manfaat Penelitian
a. Manfaat Teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) sebagai obat
tradisional yang berkhasiat menurunkan kadar glukosa darah.
b. Manfaat Praktis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan menambah
wawasan kepada masyarakat pada umumnya dan khususnya bagi penderita DM
mengenai penggunaan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) untuk menurunkan kadar glukosa darah.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan Umum
Tujuan penelitian ini secara umum yaitu mengetahui pengaruh pemberian air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) terhadap kadar
glukosa darah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
2. Tujuan Khusus
Tujuan khusus dari penelitian ini, yaitu :
a. Mengetahui pengaruh pemberian air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) terhadap penurunan kadar glukosa tikus jantan
galur Wistar yang terbebani glukosa.
b. Mengetahui dosis air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.)
A. Gray) yang dapat menurunkan kadar glukosa tikus jantan galur Wistar yang
terbebani glukosa.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Diabetes Mellitus
1. Definisi
Diabetes Mellitus (DM) adalah suatu kelompok penyakit metabolik
dengan karakteristik hiperglikemia yang terjadi karena kelainan sekresi insulin,
gangguan kerja insulin, atau keduanya, yang menimbulkan berbagai komplikasi
kronik pada mata, ginjal, saraf, dan pembuluh darah (PERKENI, 2011). Menurut
American Diabetes Association (2015), DM merupakan suatu penyakit kronis
kompleks yang membutuhkan perawatan medis yang lama atau terus menerus
dengan cara mengendalikan kadar gula darah untuk mengurangi risiko
multifaktoral.
2. Klasifikasi
Klasifikasi DM yaitu DM tipe 1, DM tipe 2, DM tipe lain, dan DM
gestasional (American Diabetes Association, 2015).
a. DM tipe 1
DM tipe 1 terjadi karena adanya destruksi sel beta pankreas yang
disebabkan oleh autoimun. DM tipe ini terdapat sedikit atau tidak sama sekali
sekresi insulin yang dapat ditentukan dengan level protein c-peptida yang
jumlahnya sedikit atau tidak terdeteksi sama sekali. Manifestasi klinik pertama
dari penyakit ini yaitu ketoasidosis (American Diabetes Association, 2015).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
Adanya gangguan katabolisme pada penderita DM tipe 1, dimana tidak
terdapatnya insulin dalam sirkulasi, meningkatnya glukagon plasma, dan gagalnya
sel-sel beta pankreas merespon semua stimulus insulinogenik, maka diperlukan
terapi dengan menggunakan insulin untuk mencegah ketosis dan menurunkan
peningkatan kadar glukosa darah (Katzung, 2002).
b. DM tipe 2
DM tipe ini terjadi hiperinsulinemia namun insulin tidak dapat membawa
glukosa masuk ke dalam jaringan karena terjadi resistensi insulin yang merupakan
turunnya kemampuan insulin untuk merangsang pengambilan glukosa oleh
jaringan perifer dan untuk menghambat produksi glukosa oleh hati. Oleh karena
terjadinya resistensi insulin maka mengakibatkan defisiensi relatif insulin. Hal ini
dapat mengakibatkan berkurangnya sekresi insulin sehingga sel beta pankreas
akan mengalami desensitisasi terhadap adanya glukosa. Onset DM tipe 2 terjadi
secara perlahan karena merupakan gejala asimtomatik. Adanya resistensi perlahan
akan mengakibatkan sensitivitas reseptor terhadap glukosa berkurang. DM tipe ini
biasanya terdiagnosis setelah terjadinya komplikasi (American Diabetes
Association, 2015).
c. DM tipe lain
DM tipe lain berkaitan dengan penyakit lain seperti, penyakit eksokrin
pankreas, defek genetik fungsi sel beta, defek genetik fungsi insulin,
endokrinopati, infeksi, imunologi, dan sindrom genetik (American Diabetes
Association, 2015).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
d. DM Gestasional
DM tipe ini terjadi selama masa kehamilan, dimana intoleransi glukosa
didapati pertama kali pada masa kehamilan, biasanya pada trimester kedua dan
ketiga. DM gestasional berhubungan dengan meningkatnya komplikasi perinatal.
Penderita DM gestasional memiliki risiko lebih besar untuk menderita DM yang
menetap dalam jangka waktu 5-10 tahun setelah melahirkan (American Diabetes
Association, 2015).
3. Tanda dan Gejala
DM merupakan suatu sindrom yang ditandai oleh poliuria, polidipsia, dan
polifagia. Kondisi hiperglikemia dalam waktu lama akan terjadi glukosuria,
dimana reabsorbsi glukosa pada tubulus ginjal melebihi batas maksimal dan
glukosa diekskresikan dalam urin. Poliuria (volume urine meningkat) karena
terjadinya diuresis osmotik yang menyebabkan dehidrasi pada penderita DM,
sehingga tubuh berusaha mengatasi dengan banyak minum (polidipsia). Polifagia
(banyak makan) karena katabolisme protein dan lemak. Selain menyebabkan
polifagia, hal ini dapat menyebabkan kelemahan otot dan rasa lelah (Corwin,
2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
4. Diagnosa
Berdasarkan PERKENI (2011), seseorang dinyatakan DM apabila
memiliki kadar glukosa darah seperti pada Tabel I.
Tabel I. Kadar Glukosa Darah Sewaktu dan Puasa Sebagai Patokan
Penyaring dan Diagnosis Diabetes Melitus (mg/dL) (PERKENI, 2011)
Bukan DM Belum pasti DM DM
Kadar glukosa
darah sewaktu
(mg/dL)
<100 100-199 ≥200
Kadar glukosa
darah puasa
(mg/dL)
<100 100-125 ≥126
B. Metabolisme Karbohidrat
Sumber energi terbesar pada manusia berasal dari karbohidrat. Karbohidrat
dari makanan dirombak diusus halus dan diubah menjadi glukosa, kemudian
dilepaskan ke aliran darah dan diangkut ke sel tubuh (Tjay dan Raharja, 2002).
Karbohidrat merupakan komponen utama dalam makanan yang menjadi sumber
energi utama bagi tubuh. Karbohidrat mengalami proses hidrolisis baik di mulut,
lambung, ataupun usus saat proses pencernaan. Hasil akhir dari pencernaan
tersebut yakni glukosa, fruktosa, galaktosa, dan manosa serta monosakarida
lainnya. Senyawa ini diabsorbsi melalui dinding usus lalu dibawa ke hati oleh
darah (Poedjiadi, 2006).
Glukosa hasil dari pencernaan tubuh merupakan bahan untuk proses
glikolisis, karena glukosa terdapat dalam jumlah banyak dibandingkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
monosakarida yang lain. Apabila jumlah glukosa berlebih maka akan disimpan
dengan diubah menjadi glukagon dalam hati dan jaringan otot, proses ini disebut
dengan glikogenesis. Glikogen juga dapat dibentuk dari asam laktat yang
dihasilkan pada proses glikolisis (Poedjiadi,2006).
Melalui proses kimiawi glukosa dan glikogen diubah menjadi asam
piruvat. Asam piruvat yaitu zat yang penting dalam metabolisme karbohidrat.
Asam piruvat selanjutnya akan diproses dalam siklus krebs dan dihasilkan CO2
dan H2O serta energi dalam ATP (Adenosine Triphosphate) yang juga berubah
menjadi ADP (Adenosin Diphosphate). Beberapa dari asam piruvat akan diubah
menjadi asam laktat dan akan masuk ke dalam hepar. Dalam hepar asam laktat
akan kembali berubah menjadi asam piruvat lalu menghasilkan energi
(Hutagalung, 2004).
Metabolisme karbohidrat selain dipengaruhi oleh enzim juga dipengaruhi
oleh hormon yaitu hormon insulin. Hormon insulin dihasilkan oleh pulau
langerhans dan berperan mempercepat oksidasi glukosa dalam jaringan,
merangsang perubahan glukosa menjadi glikogen dalam sel hepar dan otot. Hal
ini terjadi apabila kadar glukosa darah meninggi. Insulin juga merangsang
glukoneogenesis yaitu mengubah lemak atau protein menjadi glukosa
(Hutagalung, 2004).
Sekresi insulin (Gambar 1) oleh sel beta tergantung oleh 3 faktor utama
yaitu kadar glukosa darah, ATP-sensitive K-channels dan Voltage-sensitive
Calcium Channels sel beta pankreas. Kadar glukosa darah akan meningkat setelah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
makan dan kemudian ditangkap oleh sel beta melalui glucose transporter 2
(GLUT 2) dan dibawa ke dalam sel. Di dalam sel, glukosa akan mengalami
fosforilase menjadi glukosa-6-fosfat (G6P) dengan bantuan enzim glukokinase.
Glukosa-6-fosfat kemudian mengalami glikolisis menjadi asam piruvat. Proses
glikolisis menghasilkan produk 6-8 ATP. Penambahan ATP meningkatkan rasio
ATP/ADP dan menutup kanal kalium. Penumpukan kalium dalam sel
mengakibatkan depolarisasi membran sel sehingga membuka kanal kalsium dan
kalsium akan masuk ke dalam sel dan insulin dilepaskan ke dalam sel (Marentek,
2006).
Gambar 1. Mekanisme Sekresi Insulin (Kasper et al., 2005)
Tanpa adanya hormon insulin, setelah makan kadar glukosa akan
meningkat dan sebaliknya kadar glukosa darah bisa sangat rendah, untuk
mencegah perubahan-perubahan tersebut maka tubuh meregulasi glukosa dengan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
menggunakan hormon insulin dan glukagon. Setelah makan homon insulin akan
disekresikan oleh sel β pulau langerhans pankreas. Sekresi insulin ini berlangsung
dalam 2 fase. Fase I kadar insulin sangat tinggi terjadi 10 menit setelah kenaikan
glukosa darah dan dimungkinkan adanya insulin dalam granula. Fase II
berlangsung lebih dari 10 menit sampai 2 jam. Satu jam pertama setelah makan
kadar glukosa darah meningkat, namun setelah 2 jam kadar glukosa darah kembali
normal karena pengaruh insulin ( Hutagalung, 2004).
Hormon insulin meningkatkan glikolisis sel hati dengan meningkatkan
aktivitas enzim glukokinase, fosfofruktokinase, dan piruvat kinase. Meningkatnya
glikolisis akan meningkatkan penggunaan glukosa sehingga glukosa yang terlepas
ke plasma darah menurun. Insulin juga menurunkan aktivitas glukosa-6-fosfat
untuk mencegah penumpukan glukosa-6-fosfat yang memicu DM (King, 2007).
Konsentrasi glukosa darah manusia normal yaitu antara 80 dan
100mg/100ml, setelah makan sumber karbohidrat dapat meningkat menjadi 120-
130mg/100ml, lalu turun kembali dalam keadaan normal. Namun dalam keadaan
puasa konsentrasi glukosa dapat menurun hingga 60-70mg/100ml. Kondisi
dimana kadar glukosa darah lebih tinggi dari normal disebut hiperglikemia dan
kondisi dimana glukosa darah lebih rendah dari normal disebut hipoglikemia.
Dalam kondisi hiperglikemia maka sebagian glukosa akan dikeluarkan melalui
urin (Poedjiadi, 2006).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
C. Glibenklamid
Gambar 2. Struktur glibenklamid (Departemen Kesehatan RI, 1995)
Glibenklamid (Gambar 2) merupakan obat antidiabetik golongan
sulfonilurea yang sukar larut dalam air dan mudah larut dalam alkohol.
Glibenklamid dapat terabsorbsi dengan cepat dan baik setelah diberikan secara
oral. Glibenklamid diberikan dalam dosis tunggal, dosis sehari 5-20 mg
(Ganiswarna, 1995).
Glibenklamid adalah obat hipoglikemik oral untuk mengobati DM tipe 2.
Mekanisme kerja glibenklamid yaitu merangsang sekresi hormon insulin pada sel
beta pankreas. Interaksi dengan ATP-sensitive K channel pada sel beta
menyebabkan depolarisasi membran sehingga kanal Ca akan terbuka. Terbukanya
kanal Ca, menyebabkan ion Ca2+
masuk ke dalam sel beta yang kemudian
merangsang granula yang berisi insulin dan akan terjadi sekresi insulin
(Suherman, 2007). Glibenklamid dimetabolisme dalam hati menjadi produk yang
memiliki aktifitas rendah, hanya 25% metabolit disekresi dan sisanya diekskresi
melalui empedu dan tinja (Handoko dan Suharto, 2003).
Glibenklamid efektif jika diminum 30 menit sebelum makan. Obat ini
mudah diserap dalam saluran pencernaan dan memiliki waktu paruh sekitar 4 jam.
Meskipun waktu paruhnya pendek hanya sekitar 4 jam, namun efek
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
hipoglikemiknya dapat mencapai 12 hingga 24 jam sehingga cukup diberikan satu
kali sehari. Penggunaan glibenklamid pada dosis besar atau pada jangka waktu
yang panjang dapat menyebabkan hipoglikemia (Suherman, 2007).
D. Metode Uji Efek Antidiabetes
Uji efek anti diabetes dapat dilakukan dengan dua metode yaitu :
a. Metode Uji Toleransi Glukosa Oral
Prinsip uji toleransi glukosa oral yaitu hewan uji dipuasakan selama 16-20
jam dan tetap diberi minum, kemudian diambil cuplikan darah sebagai kadar
glukosa awal dan dilanjutkan dengan diberikan sediaan obat secara oral. Hewan
uji diberikan larutan glukosa secara oral 30 menit setelah pemberian sediaan obat.
Pengambilan cuplikan darah diulangi pada waktu-waktu yang telah ditentukan
(Etuk, 2010).
b. Metode Uji dengan Merusak Pankreas
Metode ini dilakukan dengan pemberian diabetogen yang dapat merusak
pankreas hewan uji sehingga pankreas rusak, tidak dapat menghasilkan hormon
insulin dan memiliki kondisi sama seperti penderita DM (Permatasari, 2008).
Prinsip metode ini yaitu dengan memberikan diabetogen seperti aloksan secara
parenteral. Pemberian zat uji dilakukan delapan hari setelah pemberian aloksan
(Szkudelski, 2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
E. Metode Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah
Pemeriksaan kadar glukosa darah dapat ditentukan dengan tiga macam
metode, yakni :
a. Metode reduksi-oksidasi
Pengukuran glukosa berdasarkan pada sifatnya sebagai zat pereduksi
dalam larutan alkali panas. Metode ini kurang spesifik karena adanya zat-zat non
glukosa lainnya yang bersifat mereduksi (Roche, 2009).
b. Metode kondensasi
Prinsip dari metode ini yaitu protein yang terdapat dalam darah
diendapkan dengan asam trikloroasetat terlebih dahulu, kemudian di sentrifugasi
untuk memisahkan antara supernatan dengan endapan. Glukosa yang terdapat
dalam supernatan direaksikan dengan o-toluidin (Dubowsky, 2008).
c. Metode enzimatik
Dasar dari metode GOD-PAP yaitu glukosa dioksidasi oleh oksigen
dengan katalis enzim glukosa oksidase (GOD) yang kemudian akan membentuk
asam glukonik dan hidrogen peroksida (H2O2). Hidrogen peroksida akan bereaksi
dengan 4-aminoantipirin dan fenol dengan katalis peroksidase (POD) membentuk
quinonimin dan air. Quinonimin inilah yang menjadi indikator menunjukkan
kadar glukosa dalam darah (Barham dan Trinder, 1972).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
F. Daun Insulin
Gambar 3. Tanaman insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
1. Uraian Tanaman
Tanaman insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) (Gambar 3) atau
yang sering dikenal dengan nama rondo semoyo, harsaga, kirinyu, atau kayu paik
(Didik dan Sulistijowati, 2001). Tanaman insulin merupakan tumbuhan perdu
tegak dan memiliki tinggi lebih kurang ± 5 meter. Batang dari tumbuhan ini
berkayu hijau, daunnya tunggal, dan warna daun berwarna hijau. Bunga tumbuhan
ini merupakan bunga majemuk (Hutapea, 1994).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
2. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Sub Divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Asterales
Famili : Asteraceae
Genus : Tithonia
Spesies : Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray (Hutapea, 1994).
3. Kandungan Tanaman
Daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) mengandung
flavonoid, glikosida, saponin, tanin dan steroid menurut hasil skrining fitokimia
oleh Purba (2003). Menurut Taofik et al. (2010), ekstrak air daun insulin
mengandung flavonoid, alkaloid, dan tanin. Tanin memiliki aktivitas
hipoglikemik dengan meningkatkan glikogenesis (Dalimartha, 2005). Saponin
mampu menghambat GLUT-1 sehingga menurunkan absorbsi glukosa (Blasiak et
al., 2003). Flavonoid sebagai antioksidan dapat melindungi kerusakan progresif
sel β pankreas karena stress oksidatif sehingga dapat menurunkan DM tipe 2
(Song et al., 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
G. Landasan teori
DM yaitu penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yang
disebabkan kelainan sekresi insulin. Gejala DM yaitu polidipsia, poliurea, dan
polifagia menurut Parmar et al. (2011). Penelitian yang telah dilakukan oleh
Miura et al. (2005), menunjukan bahwa ekstrak etanol daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dapat menurunkan kadar glukosa darah. Menurut
Purba (2003), daun insulin memiliki kandungan saponin, tanin, dan flavonoid.
Adanya saponin dapat menghambat absorpsi glukosa, tanin memiliki aktivitas
hipoglikemik dengan meningkatkan glikogenesis, dan flavonoid dapat
menghindari absorpsi gula. Dalam penelitian ini menggunakan bentuk air rebusan
daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) karena penggunaan daun
insulin oleh masyarakat yaitu dengan cara direbus.
H. Hipotesis
Air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dapat
menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani
glukosa.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
BAB III
Metode Penelitian
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis penelitian yang digunakan yaitu jenis penelitian eksperimental
murni, yaitu penelitian terhadap kelompok perlakuan yang kemudian
dibandingkan dengan kelompok kontrol yang tidak diberikan perlakuan.
Penelitian dilakukan dengan rancangan acak lengkap pola searah yaitu
menetapkan sampel dengan pengacakan untuk kelompok perlakuan dan tanpa
perlakuan. Pengacakan sampel dimaksudkan agar setiap sampel memiliki
kesempatan yang sama untuk masuk dalam kelompok perlakuan maupun
kelompok tanpa perlakuan. Penelitian lengkap yaitu dalam menggunakan
kelompok positif, kelompok negatif, dan kelompok perlakuan. Pola searah artinya
adanya perlakuan yang sama untuk kelompok perlakuan yaitu dengan
memberikan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray).
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel Utama
a. Variabel Bebas yaitu dosis pemberian air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray).
b. Variabel Tergantung yaitu kadar glukosa darah tikus jantan galur wistar.
2. Variabel Pengacau
a. Variabel Pengacau Terkendali
1) Subjek Uji : tikus putih
2) Jenis Kelamin : jantan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
3) Galur Spesies subjek uji : galur Wistar
4) Berat Badan subjek uji : 150-200 gram
5) Umur subjek uji : 2-3 bulan
6) Jalur Pemberian : peroral
b. Variabel Pengacau Tak Terkendali
1) Kondisi patologis hewan uji
3. Definisi Operasional
a. Air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
merupakan daun insulin segar yang direbus dalam 400 mL air hingga
menjadi 200 mL.
b. Dosis air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
merupakan sejumlah volume air rebusan daun insulin tiap berat badan
hewan uji dengan satuan ml/kgBB.
c. Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO) yaitu metode penetapan kadar
glukosa darah dengan membebankan glukosa pada tikus mengunakan
larutan glukosa secara oral dengan dosis 15% b/v;1,75g/kgBB.
d. LDDK0-240
kadar glukosa darah yaitu besaran yang menggambarkan
jumlah kadar glukosa dalam darah pada rentang waktu menit ke- 0 sampai
dengan menit ke -240 menggunakan metode trapezoid.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
C. Bahan dan Alat Penelitian
1. Bahan Penelitian
a. Hewan uji
Tikus putih jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan, berat badan 150-
200 gram diperoleh dari daerah Bantul.
b. Bahan uji
Daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) diambil dari
daerah kelurahan Jagalan, Surakarta.
c. Senyawa pembanding
Glibenklamid dari PT. Indofarma.
d. Pereaksi untuk pengukuran kadar glukosa
Enzim Glucose GOD FS*(Diaysis®, Germany), dengan komposisi
terlihat pada Tabel II.
Tabel II. Isi Pereaksi Enzim Glucose GOD-PAP
Reagen
Phospat buffer pH 7,5 250 mmol/l
Phenol 5 mmol/l
4-aminoantipyrine 0,5 mmol/l
Glukosa oksidase (GOD) ≥ 10 kU/l
Phenol Amino
Antipirin Peroksidase
(PAP) ≤ 1 kU/l
Glukosa standar 100 mg/dl (5,5 mmol/dl)
e. Lain-lain
1) Aquadest
2) Aquabidest
3) EDTA sebagai antikoagulan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
4) Glukosa monohidrat dosis 15% b/v; 1,75g/kgBB sebagai larutan untuk
uji toleransi glukosa oral
5) CMC 1% sebagai kontrol normal dan pelarut glibenklamid
2. Alat Penelitian
a. Alat gelas (Beker glass, pengaduk, gelas ukur, tabung reaksi) merk pyrex®
b. Jarum suntik per oral (p.o)
c. Pipa kapiler
d. Tabung effendorf
e. Tabung reaksi
f. Mikropipet
g. Sentrifuge
h. Vortex
i. Microlab-200
j. Stopwatch
k. Alat timbang elektrik
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
D. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi Tanaman
Determinasi dilakukan di Unit II Fakultas Farmasi UGM Yogyakarta,
Bagian Biologi Farmasi.
2. Pengumpulan Bahan Uji
Daun Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) yang digunakan
adalah daun segar yang berasal dari tanaman daun insulin dari daerah kelurahan
Jagalan, Surakarta.
3. Pembuatan Air Rebusan Daun Insulin
Berdasarkan dari yang digunakan masyarakat pada umumnya yakni
sebanyak 7 gram daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) di rebus
dalam 400 ml aquadest sampai menjadi 200 ml.
4. Perhitungan Dosis Pemberian Air Rebusan Daun Insulin
Dosis pemakaian air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.)
A. Gray) untuk manusia dewasa (70 kg) adalah 7 gram daun insulin. Konversi
dosis manusia (70kg) ke tikus (200g) yaitu 0,018, sehingga dosis untuk tikus 200
gram sebagai berikut :
0,018 x 7 gram = 0,126 gram/200gBB
Dosis untuk 1 kg tikus : x 0,126 gram
= 0,63 gram/kgBB
= 630 mg/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
Peringkat dosis tertinggi air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) dihitung dengan menggunakan konsentrasi 40 gram/200mL.
D x BB = C x V
D x 200 gram = 0,2 gram/mL x 3 mL
D = 0,6 gram/200gBB
D = 3 gram/kgBB
D = 3000 mg/kgBB
Dari kedua dosis tersebut kemudian ditentukan faktor pengali untuk
peringkat dosis :
F =
=
= 2,18
Peringkat dosis yang diperoleh berdasarkan faktor pengali :
Dosis I = 630 mg/kgBB
Dosis II = 1373 mg/kgBB
Dosis III = 3000 mg/kgBB
5. Preparasi Bahan
a. Pembuatan larutan stok glukosa monohidrat p.a 15,0 % b/v
Glukosa monohidrat p.a ditimbang sebanyak 3,75 gram dilarutkan dalam
aquadest panas dalam labu takar 25,0 mL sampai tanda batas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
b. Pembuatan larutan CMC 1% b/v
CMC ditimbang sebanyak 1 gram kemudian dilarutkan dalam 100 mL
aquadest dalam labu takar.
c. Penentuan dosis glibenklamid
Dosis glibenklamid untuk manusia 70 kgBB yaitu 5 mg, sehingga dosis
untuk 200 g tikus yaitu
5 mg glibenklamid x 0,018 = 0,09 mg glibenklamid / 200 gBB
= 0,45 mg glibenklamid / kgBB
d. Penetapan Konsentrasi Glibenklamid
Volume pemberian glibenklamid ditetapkan sebesar 0,8 mL, sehingga
diperoleh konsentrasi sebagai berikut :
Dosis x Berat Badan = Konsentrasi (C) x Volume
0,45 mg/kgBB x 0,200 kgBB = C x 0,8 mL
C =
C = 0,1125 mg/mL
6. Orientasi Waktu Pemberian Glibenklamid
Orientasi menggunakan dua belas ekor tikus yang dibagi menjadi 3
kelompok yaitu kelompok menit ke-15 sebelum UTGO, menit ke-30 sebelum
UTGO, dan menit ke-45 sebelum UTGO. Masing-masing kelompok mendapat
perlakuan kontrol positif dan negatif. Semua pemberian dilakukan dilakukan
secara peroral kemudian dilakukan UTGO dengan memberikan larutan glukosa
monohidrat dosis 15% b/v, 1,75 g/kgBB. Pengambilan darah dilakukan sesaat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
sebelum UTGO sebagai menit ke-0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120,
180, dan 240 setelah UTGO. Selanjutnya dilakukan pengukuran kadar glukosa
darah dengan metode GOD-PAP dan dibuat kurva UTGO serta perhitungan harga
LDDK0-240
. Penentuan waktu pemberian glibenklamid berdasarkan pada nilai
LDDK0-240
kontrol positif terkecil.
7. Orientasi Dosis Pemberian Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
Dosis pemakaian air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.)
A. Gray) untuk manusia dewasa (70 kg) adalah 7 gram daun insulin. Konversi
dosis manusia (70kg) ke tikus (200g) yaitu 0,018, sehingga dosis untuk tikus 200
gram sebagai berikut :
0,018 x 7 gram = 0,126 gram/200gBB
Dosis untuk 1 kg tikus : x 0,126 gram
= 0,63 gram/kgBB
= 630 mg/kgBB
Dosis diatas digunakan sebagai dosis tertinggi, kemudian dibuat peringkat
dosis dengan menurunkan 1,5 kali. Sehingga diperoleh dosis tengah sebesar 420
mg/kgBB dan dosis terendah 280 mg/kgBB. Berdasarkan hasil orientasi, dosis
tersebut tidak menunjukkan hasil penurunan kadar glukosa darah yang berarti
sehingga ditetapkan dosis baru untuk digunakan dalam penelitian.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
8. Penetapan Waktu Pemberian Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
Waktu pemberian air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.)
A. Gray) ditetapkan berdasarkan waktu pemberian glibenklamid.
9. Tahap Percobaan
Gambar 4. Skema Penelitian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
a. Pengelompokan hewan uji
Penelitian ini menggunakan 30 ekor tikus dibagi secara acak menjadi 6
kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Tiap hewan uji
diadaptasikan dalam laboratorium selama 7 hari diberi pakan dan minum ad
libitum. Sebelum mendapat perlakuan masing-masing kelompok dipuasakan 10-
16 jam namun diberi minum ad libitum, kemudian setiap kelompok diberi
perlakuan sesuai kelompok seperti berikut :
1) Kelompok 1 : Kontrol normal, hewan uji diberi CMC 1% 20 ml/kgBB
tanpa dibebani glukosa
2) Kelompok 2 : Kontrol positif, hewan uji diberi glibenklamid dengan
dosis 0,45 mg/kgBB dan dibebani glukosa dengan dosis 15%
b/v;1,75g/kgBB
3) Kelompok 3 : Kontrol negatif, hewan uji diberi CMC 1% 20 ml/kgBB
dan dibebani glukosa dengan dosis 15% b/v;1,75g/kgBB
4) Kelompok 4 : Perlakuan, hewan uji diberikan air rebusan daun insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 630 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15% b/v;1,75g/kgBB
5) Kelompok 5 : Perlakuan, hewan uji diberikan air rebusan daun insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 1373 mg/kgBB dan
dibebani glukosa dosis 15% b/v;1,75g/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
6) Kelompok 6 : Perlakuan, hewan uji diberikan air rebusan daun insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 3000 mg/kgBB dan
dibebani glukosa dosis 15% b/v;1,75g/kgBB
Setiap kelompok diberi perlakuan sesuai dengan kelompoknya secara per
oral. Lalu setelah beberapa menit berdasarkan hasil orientasi glibenklamid,
diambil cuplikan darah sebelum UTGO sebagai menit ke-0 dan dilanjutkan
UTGO dengan memberikan larutan glukosa monohidrat dosis 15%
b/v;1,75g/kgBB. Pengambilan cuplikan darah dilakukan pada menit ke – 15, 30,
45, 60, 90, 120, 180, 240 setelah UTGO. Pengukuran kadar glukosa darah
dilakukan dengan metode GOD-PAP, lalu dibuat kurva UTGO dan perhitungan
harga LDDK0-240
.
10. Penetapan kadar glukosa darah dengan metode GOD-PAP
Darah tikus diambil melalui mata tikus (vena orbitalis) sebanyak 0,5ml
ditampung dalam effendorf, lalu disentrifuge 30 menit 3000 rpm. Plasma diambil
kemudian dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambahkan reagen lalu divortex
dan diukur absorbansinya menggunakan microlab-200 dengan λ 500 nm. Kadar
glukosa dinyatakan dalam mg/dL. Pengukuran kadar glukosa dilakukan di
laboratorium Fisiologi-Biokimia Fakultas Farmasi USD, Yogyakarta.
Tabel III. Volume Pengukuran Kadar Glukosa Darah
Bahan Sampel (ml) Standar (ml) Blanko (ml)
Supernatan 0,01 - -
Larutan baku glukosa - 0,01 -
Pereaksi GOD-PAP 1,00 1,00 1,00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
E. Analisis Hasil
Nilai LDDK0-240
glukosa darah dari setiap kelompok diuji distribusi
menggunakan uji Kolmogrov Smirnov kemudian apabila distribusi termasuk
normal maka dilanjutkan dengan analisis One Way ANOVA dan Post Hoc Test
Scheffe dengan tingkat kepercayaan 95%. Apabila nilai LDDK0-240
memiliki
variansi yang berbeda maka dilakukan uji Kruskal Wallis dan dilanjutkan uji
Mann Whitney dengan tingkat kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan tiap
kelompok apakah bermakna (p<0,005) atau tidak bermakna (p>0,005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Determinasi Tanaman
Sebelum melakukan pengujian efek penurunan kadar glukosa darah dari
daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray), dilakukan determinasi
tanaman dengan tujuan untuk memastikan bahwa tanaman yang digunakan telah
benar dan dapat dipastikan tidak terjadi kesalahan dalam pengambilan bahan
tanaman uji.
Determinasi dilakukan di Unit II Fakultas Farmasi UGM Yogyakarta
Bagian Biologi Farmasi. Hasil determinasi menunjukkan bahwa tanaman yang
dideterminasi benar tanaman daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) (Lampiran 2).
B. Hasil Percobaan Pendahuluan
Percobaan pendahuluan dilakukan untuk menentukan langkah penelitian
selanjutnya. Percobaan pendahuluan yang dilakukan antara lain penetapan waktu
pemberian glibenklamid dan penetapan dosis sediaan air rebusan daun insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray).
1. Penetapan Waktu Pemberian Glibenklamid
Penetapan waktu pemberian glibenklamid dilakukan agar memperoleh
waktu optimum yang dapat menghasilkan presentase penurunan kadar glukosa
darah terbesar berdasarkan penurunan harga luas daerah dibawah kurva dari menit
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
ke-0 hingga menit ke-240 (LDDK0-240
). Penetapan waktu pemberian glibenklamid
sebelum UTGO berdasarkan dari nilai LDDK0-240
kontrol positif terkecil.
Tabel IV. Nilai LDDK0-240
Suspensi Glibenklamid Sebelum UTGO
Waktu pemberian
suspensi glibenklamid
sebelum UTGO
LDDK0-240
(mg.menit/dL)
Kontrol Negatif
(CMC)
Kontrol Positif
(Glibenklamid)
15 33000,0 21701,5
30 32951,5 17783,0
45 33907,5 20483,0
Berdasarkan Tabel IV waktu pemberian suspensi glibenklamid pada menit
ke-30 sebelum UTGO memberikan nilai LDDK0-240
terkecil (17783,0)
dibandingkan menit ke-15 (21701,5) dan menit ke-45 (20483,0). Hal ini
menunjukkan bahwa menit ke-30 mempunyai kemampuan untuk menurunkan
kadar glukosa darah paling tinggi dibandingkan menit ke-15 dan menit ke-45.
Berdasarkan hasil tersebut maka waktu pemberian glibenklamid yang digunakan
adalah 30 menit sebelum UTGO.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
Gambar 5. Diagram LDDK0-240 Glibenklamid Sebelum UTGO
2. Penetapan Dosis Sediaan Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
Penetapan dosis pemberian air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) bertujuan untuk menentukan tingkatan dosis yang akan
digunakan pada penelitian. Penetapan dosis tertinggi menggunakan konversi dosis
manusia (70kg) ke dosis tikus (200gram) yaitu 630mg/KgBB, kemudian dibuat
tingkatan dosis dengan menurunkan 1,5 kali peringkat dosis. Didapatkan dosis
tengah sebesar 420 mg/KgBB dan dosis terendah sebesar 280 mg/KgBB. Hasil
dari ketiga dosis tersebut tidak menunjukkan hasil penurunan kadar glukosa darah
yang berarti, sehingga ditetapkan dosis baru dengan menaikkan peringkat dosis.
Penetapan dosis baru menggunakan hasil konversi dosis manusia (70kg)
ke dosis tikus (200gram) sebagai dosis terendah yaitu 630 mg/KgBB, sedangkan
dosis tertinggi ditetapkan dari konsentrasi tertinggi yang dapat masuk dalam spuit
dan tidak toksik terhadap hewan uji yakni 0,2 gram/mL sehingga dosis tertinggi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
sebesar 3000mg/KgBB. Dari dosis terendah dan tertinggi dapat dihitung faktor
pengali untuk menentukan dosis tengah. Hasil faktor pengali yang didapatkan
yaitu 2,18, sehingga dosis tengah sebesar 1373 mg/KgBB.
C. Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Air Rebusan Daun Insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
Penelitian ini menggunakan metode Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO)
yaitu uji yang dapat menggambarkan kenaikan kadar glukosa darah dalam waktu
yang cepat setelah pemberian glukosa secara oral dan akan memberikan gambaran
kadar glukosa darah setelah pemberian senyawa obat secara cepat. Kekurangan
dari metode ini yaitu kadar glukosa yang digambarkan hanya untuk jangka waktu
yang pendek, oleh karena itu diperlukan metode lain untuk penelitian selanjutnya
seperti metode perusakan pankreas dengan menginduksi aloksan atau dengan
metode resistensi insulin.
Penetapan kadar glukosa darah menggunakan metode enzimatik yaitu
dengan menambahkan reagen GOD PAP. Prinsip reaksinya adalah GOD (glukosa
oksidase) akan mengkatalisis oksidasi glukosa menjadi asam glukonat dan
hidrogen peroksida. Glukosa akan bereaksi dengan reagen GOD-PAP dan
membentuk senyawa kuinonimin yang berwarna merah muda. Kadar glukosa
darah berbanding lurus dengan intensitas warna kompleks kuinonimin.
Pembentukan kompleks warna membutuhkan waktu inkubasi selama 20 menit
agar reaksi antara glukosa dengan enzim-enzim yang terdapat dalam reagen dapat
bereaksi sempurna kemudian diukur kadarnya dengan menggunakan micro
vitalab. Komposisi reagen GOD-PAP yaitu dapar fosfat 250 mmol/L, fenol 5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
mmol/L, 4-aminoantipirin 0,5 mmol/L, glukosa oksidase (GOD) ≥ 10ku/L, dan
peroksidase (POD) ≥ 1 ku/L.
Gambar 6. Reaksi enzimatik antara glukosa dengan reagen GOD PAP
(Barham dan Trinder, 1972).
Tujuan dari penelitian uji efek hipoglikemik ini adalah untuk melihat efek
penurunan kadar glukosa darah dari air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) dari 3 peringkat dosis yakni 630 mg/kgBB, 1373 mg/kgBB,
dan 3000 mg/kgBB.
Data rata-rata kadar glukosa darah tiap perlakuan untuk setiap waktu
pengambilan disajikan dalam Tabel V dan kurva hubungan antara waktu dengan
kadar glukosa darah disajikan dalam Gambar 7.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
Tabel V. Data Rata-Rata Kadar Glukosa Darah dan LDDK0-240
Setiap
Perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
Normal
Kontrol
Positif
Kontrol
Negatif
Perlakuan
I
Perlakuan
II
Perlakuan
III
Rata-
rata
kadar
glukosa
darah
(mg/dL)
0 79,8 79,6 81,6 79,8 80,0 80,0
15 81,4 110,4 127,8 108,0 104,4 100,2
30 81,4 115,4 138,2 125,2 118,0 119,6
45 80,6 104,6 132,2 111,2 104,8 100,6
60 81,0 101,2 126,8 108,6 99,4 95,8
90 81,4 92,0 122,6 102,0 93,0 90,0
120 81,4 84,0 118,0 93,6 87,4 84,2
180 81,6 76,0 111,8 84,2 80,0 78,0
240 81,0 64,4 102,4 71,4 68,6 64,4
LDDK0-240
±
SD
19503,0
±177,292
20862,0
±337,775
28206,0
±507,329
22674,0
±606,026
21325,5
±283,645
20662,5
±326,272
Keterangan :
Kontrol normal : CMC 1% 20 ml/kgBB tanpa dibebani glukosa
Kontrol positif : Glibenklamid 0,45 mg/kgBB dan dibebani glukosa dosis
15%b/v; 1,75g/kgBB
Kontrol negatif : CMC 1% 20 ml/kgBB dan dibebani glukosa dosis
15%b/v; 1,75g/kgBB
Perlakuan I : Air rebusan daun insulin 630 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15%b/v; 1,75g/kgBB
Perlakuan II : Air rebusan daun insulin 1373 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15%b/v; 1,75g/kgBB
Perlakuan III : Air rebusan daun insulin 3000 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15%b/v; 1,75g/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Gambar 7. Kurva hubungan antara waktu dengan kadar glukosa darah
Kelompok kontrol normal memiliki nilai LDDK0-240
paling rendah
(19503,0) dibandingkan kelompok kontrol positif (20862,0), kelompok kontrol
negatif (28206,0), dan semua kelompok perlakuan air rebusan daun insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) (22674,0; 21325,5; 20662,5). Hal ini
menunjukkan bahwa kadar glukosa darah hewan uji yang digunakan dalam
penelitian adalah normal dan penurunan kadar glukosa darah kontrol positif serta
semua kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) belum mencapai kadar glukosa normal.
Kelompok kontrol positif memiliki nilai LDDK0-240
lebih rendah (20862,0)
dibandingkan kontrol negatif (28206,0). Hal ini menunjukkan bahwa
glibenklamid dapat menurunkan kadar glukosa darah. Glibenklamid merupakan
obat antidiabetik oral golongan sulfonilurea yang mempunyai efek terapetik untuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
menurunkan kadar glukosa darah dengan merangsang sekresi insulin pada sel beta
pankreas.
Kelompok kontrol negatif memiliki nilai LDDK0-240
yang paling tinggi
(28206,0) dibandingkan dengan kelompok kontrol normal (19503,0), kelompok
kontrol positif (20862,0) dan semua kelompok perlakuan air rebusan daun insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) (22674,0; 21325,5; 20662,5). Hal ini
menunjukkan bahwa CMC 1% tidak dapat menurunkan kadar glukosa darah.
Nilai LDDK0-240
yang didapat kemudian diuji normalitas distribusi data
dengan Kolmogorov-Smirnof. Berdasarkan hasil uji Kolmogorov-Smirnof terlihat
data memiliki nilai p = 0,060 (p>0,05), artinya data memiliki distribusi normal
(Lampiran 10).
Analisis dilanjutkan dengan One Way ANOVA yang didahului dengan uji
Homogenity of Variance. Uji One Way ANOVA bertujuan untuk melihat apakah
terdapat perbedaan nilai LDDK0-240
yang bermakna dari setiap kelompok
perlakuan. Hasil uji Homogenity of Variance One Way ANOVA menunjukkan
bahwa variasi LDDK0-240
berbeda tidak bermakna dengan nilai p = 0,063 (p>0,05)
(Lampiran 10). Hasil uji One Way ANOVA memiliki nilai p = 0,000 (p<0,05),
artinya terdapat perbedaan nilai LDDK0-240
yang bermakna dari setiap kelompok
perlakuan (Lampiran 10). Analisis dilanjutkan dengan uji Post Hoc Scheffe untuk
melihat pasangan kelompok mana yang berbeda secara signifikan seperti terlihat
pada Tabel VI.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Tabel VI. Hasil Post Hoc Scheffe LDDK0-240
Kadar Glukosa Darah
Tikus Terbebani Glukosa
Kontrol
Normal
Kontrol
Positif
Kontrol
Negatif
Perlakuan
I
Perlakuan
II
Perlakuan
III
Kontrol
Normal
- BB BB BB BB BB
Kontrol
Positif
BB - BB BB BTB BTB
Kontrol
Negatif
BB BB - BB BB BB
Perlakuan
I
BB BB BB - BB BB
Perlakuan
II
BB BTB BB BB - BTB
Perlakuan
III
BB BTB BB BB BTB -
Keterangan :
Kontrol normal : CMC 1% 20 ml/kgBB tanpa dibebani glukosa
Kontrol positif : Glibenklamid 0,45 mg/kgBB dan dibebani glukosa dosis
15%b/v; 1,75g/kgBB
Kontrol negatif : CMC 1% 20 ml/kgBB dan dibebani glukosa dosis
15%b/v; 1,75g/kgBB
Perlakuan I : Air rebusan daun insulin 630 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15%b/v; 1,75g/kgBB
Perlakuan II : Air rebusan daun insulin 1373 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15%b/v; 1,75g/kgBB
Perlakuan III : Air rebusan daun insulin 3000 mg/kgBB dan dibebani
glukosa dosis 15%b/v; 1,75g/kgBB
BB : Berbeda Bermakna
BTB : Berbeda Tidak Bermakna
Hasil uji Post Hoc menunjukkan kelompok kontrol normal dengan
kelompok kontrol positif dan kelompok kontrol negatif memiliki perbedaan yang
bermakna. Artinya, kelompok kontrol positif dapat menurunkan kadar glukosa
darah tetapi tidak sampai pada kadar normal dan CMC tidak dapat menurunkan
kadar glukosa darah. Hasil analisis kontrol positif dengan kontrol negatif terdapat
perbedaan bermakna. Artinya kelompok kontrol positif dapat menurunkan kadar
glukosa darah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
Kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) dosis 630 mg/kgBB terhadap kontrol normal, kontrol positif,
kontrol negatif, kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 1373 mg/kgBB dan dosis 3000 mg/kgBB
terdapat perbedaan bermakna. Hal ini menunjukkan kelompok perlakuan air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 630 mg/kgBB
memiliki kemampuan untuk menurunkan kadar glukosa darah namun lebih rendah
dari kontrol positif, kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 1373 mg/kgBB dan dosis 3000 mg/kgBB
serta belum sampai pada kadar glukosa normal.
Kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) dosis 1373 mg/kgBB terhadap kelompok kontrol normal dan
kontrol negatif menunjukkan adanya perbedaan bermakna, sedangkan terhadap
kontrol positif dan kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 3000 mg/kgBB terdapat perbedaan tidak
bermakna. Artinya, kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia
diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 1373 mg/kgBB memiliki kemampuan untuk
menurunkan kadar glukosa darah sama dengan kontrol positif dan kelompok
perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis
3000 mg/kgBB tetapi belum mencapai pada kadar glukosa normal.
Kelompok perlakuan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) dosis 3000 mg/kgBB memiliki perbedaan bermakna terhadap
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
kontrol normal dan kontrol negatif. Sedangkan terhadap kelompok kontrol positif
terdapat perbedaan tidak bermakna. Hal ini menunjukkan kelompok perlakuan air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis 3000
mg/kgBB memiliki kemampuan untuk menurunkan kadar glukosa darah sama
dengan kelompok kontrol positif namun belum sampai pada kadar normal.
Berdasarkan hasil penelitian, dosis yang dapat menurunkan kadar glukosa
darah yaitu air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dosis
1373 dan dosis 3000 mg/kgBB. Air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) dosis 1373 mg/kgBB lebih dianjurkan untuk digunakan karena
dosis 1373 mg/kgBB sudah dapat menurunkan kadar glukosa darah. Penelitian
terkait uji toksisitas akut perlu dilakukan untuk mengetahui besar dosis yang
memiliki efek toksik atau lethal terhadap hewan uji.
Efek hipoglikemik daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
diduga berasal dari kandungan tanin, saponin, dan flavonoid yang terdapat dalam
daun insulin. Mekanisme tanin terhadap penurunan kadar glukosa darah yaitu
dengan menurunkan absorbsi nutrisi dengan menghambat penyerapan glukosa di
intestinal, selain itu menginduksi regenerasi sel β pankreas sehingga
meningkatkan sekresi insulin yang berefek pada peningkatkan trigliserida di sel
adipose dan glikogen dalam hati dan otot (Kumari, 2012). Mekanisme kerja
saponin yaitu menghambat GLUT-1 sehingga menurunkan absorbsi glukosa
(Blasiak et al., 2003). Flavonoid dapat menghambat GLUT-2 mukosa usus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
sehingga dapat menurunkan absorbsi glukosa, selain itu juga sebagai antioksidan
dapat mencegah kerusakan progresif sel β pankreas (Song et al., 2005).
Namun, kandungan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia
(Hemsl.) A. Gray) yang yang paling berpotensi terhadap penurunan kadar glukosa
darah belum diketahui, sehingga perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai
isolasi kandungan air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) yang paling berpotensi menurunkan kadar glukosa darah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa :
1. Air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dapat
menurunkan kadar glukosa darah pada tikus jantan galur Wistar yang
terbebani glukosa.
2. Dosis air rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
yang dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar
yang terbebani glukosa adalah dosis 1373 mg/KgBB dan dosis 3000
mg/KgBB.
B. Saran
1. Perlu dilakukan penelitian efek penurunan kadar glukosa darah dari air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) dengan
metode yang lain misal, perusakan pankreas.
2. Perlu dilakukan uji toksisitas akut.
3. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai isolasi kandungan air
rebusan daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) yang
paling berpotensi menurunkan kadar glukosa darah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
DAFTAR PUSTAKA
American Diabetes Association, 2015, Diagnosis and Classification Of Diabetes
Mellitus, Vol. 37, pp. 81-90.
American Diabetes Association, 2011, Diagnosis and Classification Of Diabetes
Mellitus, Vol. 34, pp. 62-69.
Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan RI, hal.
410.
Barham, D., and Trinder, D., 1972, An Improved Color Reagen for Determination
of Blood Glucose by the Oxydase System. Analist. pp. 97, 142-145.
Blasiak J., et al., 2003, Free Radical Scavengers Can Modulate the DNA-
Damaging Action of Alloxan, Acta Biocem, Pol. 50 (I), pp. 205-10.
Brahmachari, G., 2011, Bio-Flavonoids With Promising Antidiabetic Potentials:
A Critical Survey, Research Signpost, pp 187-212.
Corwin, E. J., 2008, Buku Saku Patofisiologi, Penerbit EGC, Jakarta, hal. 624-
630.
Dalimartha, S., 2005, Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Diabetes Mellitus,
Penerbit Penebar Swadaya, Bogor.
Departemen Kesehatan, 2005, Diabetes Mellitus Masalah Kesehatan Masyarakat
yang Serius, http://www.depkes.go.id/, diakses pada 10 September 2015.
Didik, G., dan Sulistijowati, A., 2001, Efek Ekstrak Daun Kembang Bulan
Terhadap candida albicans serta Profil Kromatogramnya Dalam Cermin
Dunia Kedokteran, UI Press, Jakarta, hal. 31-32, 35.
Dubowsky, K. M., 2008, An O-toluidine ethod for Body-Fluid Glucose
Determination, Clin Chem, 54 (11), pp. 1919-1920.
Etuk, E. U., 2010, Animals Models for Studying Diabetes Mellitus, Agric. Biol. J.
N. Am., Algiculture and Biological Journal of North America, 1 (2), pp.
130-134.
Ganiswarna, S. G, 1995, Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, Bagian Farmakologi
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, hal. 52.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
Geethaa, Saghal, Ramanathan, S., et al., 2010, Brine Shrimp Lethality and Acute
Oral Toxicity Studies on Swetenia Mahagoni (Linn) Jacq. Seed
Methanolic Extract, Pharmacognosy Research 2 (4), pp. 215-220.
Hutagalung, H., 2004, Karbohidrat, Universitas Sumatra Utara, Sumatra Utara,
hal. 7-8.
Handoko, T., dan Suharto, B., 2003, Insulin, Glukagon dan antidiabetik Oral,
Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta,
hal. 469, 471, 476- 477.
Hutapea, J. R., 1994, Inventaris Tanaman Obat Indonesia, Badan Penelitian dan
Pengembangan Kesehatan, Jakarta, hal. 297.
Kasper et al, 2005, Harrison’s Principles of Internal Medicine, Sixteenth Edition,
McGraw-Hill, USA, pp 1425-1433.
Katzung, B.G., 2002, Basic And Clinical Pharmacology (Farmakologi Dasar Dan
Klinik), Edisi III, EGC, Jakarta, hal. 585-587.
King M. W., 2007., Glycolysis : Process of Glucose Utilization and Homeostasis.
Kumari, M., 2012, Tannins : An Antinutrient with Positive Effect to Manage
Diabetes, Researh Journal of Recent Science, Vol. 1 (12), pp. 70-71.
Merentek, E., 2006, Resistensi Insulin Pada Diabetes Mellitus Tipe 2, Majalah
Cermin Dunia Kedokteran, No. 150, Jakarta, hal. 38-39.
Miura, T., Nosaka, K., Ishii,H., Ishida, T., 2005, Antidiabetic Effect of
Nitobegiku, the Herb Tithonia diversifolia, in KK-Ay Diabetic Mice, Biol.
Pharm. Bull.,28 (11), pp. 2152-2154.
Nugroho, B. A., 2004, Pengaruh Diet Ekstrak Rumput Laut (Euchema sp.)
Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Tikus Putih (Ratus Nuvegicus)
yang diinduksi Aloksan, Skripsi, Universitas Dipenogoro, Semarang.
Parmar, K., Patel, S., Patel, J., Patel, B., Patel. M.B., 2011, Effect of Bittergourd
(Momordica charantia) Fruit Juice on Glucose Tolerance and Lipid Profile
in Type-II Diabetic Rats, International Journal of Drug Development &
Researc, 3(2), pp.139-146.
Perkeni, 2011, Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Mellitus tipe 2
di Indonesia 2011, PB. Perkeni, Jakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Poedjiadi, A., Titin, S., 2006, Dasar-Dasar Biokimia, UI Press, Jakarta, 247,251-
260.
Prasetya A, dkk., 2016, Perbandingan Efek Hipoglikemik Infusa Daun Kembang
Bulan (Tithonia diversifolia (Hamsley) A. Gray) dan Metformin pada
Tikus yang Diinduksi Aloksan, Vol. 43, No. 2, Hal. 91-94.
Purba, E.D., 2003, Analisis Senyawa Kimia dan Uji Hipoglikemik Ekstrak Etanol
Daun Kembang Bulan ( Tithonia diversifolia (Hemsley) Gray) terhadap
Kelinci, Skripsi, 34, Universitas Sumatra Utara, Medan.
Rahmawati, S., 2013, Efektifitas Ekstrak Kulit Batang, Akar, dan Daun Sirsak
(Annona mucirata L.) Terhadap Kadar Glukosa Darah, Skripsi, 3,
Universitas Islam Negeri Sunan Kalijaga, Yogyakarta.
Roche Diagnostics, 2009, Accu-Chek Active; Test Strips, Mannheim, Germany.
Song, Y., Joann, E.M., Jullie E.B., Howard, D.S., Simin, L., 2005. Association of
Dietary Flavonoids with Risk of Type 2 Diabetes, and Markers of Insulin
Resistance and Systemic Inflammation in Women : A Prospective Study
and Cross-Sectional Analysis, Journal of the American College of
Nutrition, Volume 24, Issue 5.
Suherman, S. K., 2007, Insulin dan Antidiabetik Oral, Departemen Farmakologi
dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.
Szkudelski, T., 2008, The Mecanism of Alloxan and Streptozotocin Action in β
Cells of The Rat Pancreas, Physiology, Res 50, pp. 536-546.
Taofik, M., Yuianti, E., Barizi, A., Hayati, E.K., 2010, Isolasi dan Identifikasi
Senyawa Aktif Ekstrak Air Daun Paitan ( Tithonia diversifolia ) sebagai
Bahan Insektisida Botani untuk Pengendalian Hama Tungau Eriophydae,
Alchemi, 2(1), pp. 104-157.
Thonsom et al., 2013, Antioxidant and Hypoglycemic Effect of Tithonia
diversifolia Aqueous Leaves Extract in Alloxan-Induced Diabetic Mice,
Advances in Environmental Biology, 7(9), pp 2116-2125.
Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat Penggunaan
dan Efek Samping, Edisi IV, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan
Makanan, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal.567-
584.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
WHO, 2014, Diabetes Mellitus, http://www.who.int/diabetes/en/, diakses pada
tanggal 26 November 2014.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
Lampiran 1. Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Lampiran 2. Surat Pengesahan Determinasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Lampiran 3. Foto Tanaman Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray)
Gambar 1. Tanaman Daun Insulin
Gambar 2. Air Rebusan Daun Insulin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Lampiran 4. Foto Hewan Uji Tikus Jantan Galur Wistar
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
Lampiran 5. Foto Alat Penelitian
b. Timbangan Analitik a. Centrifuge
d. Vortex c. Microlab-200
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
Lampiran 6. Preparasi Bahan
a. Pembuatan Larutan Stok Glukosa monohidrat p.a 15,0 % b/v
Bobot kertas = 0,4008 gram
Bobot kertas + glukosa monohidrat = 4,1511 gram
Bobot kertas + sisa = 0,4010 gram
Bobot Glukosa monohidrat = 3,7501gram
Glukosa monohidrat sebanyak 3,75 gram dan dilarutkan dengan aquadest
panas dalam labu takar 25,0 mL sampai tanda.
b. Keseragaman bobot tablet
Tablet Ke- Berat (mg) Tablet Ke- Berat (mg)
1 202 11 203
2 201 12 193
3 203 13 200
4 200 14 202
5 206 15 205
6 201 16 198
7 202 17 198
8 201 18 198
9 200 19 196
10 204 20 200
Bobot rata-rata tablet glibenklamida = 200,65 mg. Berdasarkan Anonim
1979 tablet dengan bobot rata-rata 151 mg – 300 mg memiliki penyimpangan
rata-rata tablet pada kolom A = 7,5% dan kolom B = 15%.
Kolom A : 7,5% x 200,65 = 15,05 mg ± 200,65
Kolom B : 15% x 200,65 = 30,1 mg ± 200,65
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
Berdasarkan penimbangan 20 tablet, tidak ada tablet yang menyimpang
dari range 185,6 mg – 215,7 mg dan juga tidak ada yang menyimpang dari
range 170,55 mg - 230,75 mg. Hal ini menunjukkan bahwa semua tablet
memenuhi keseragaman bobot.
c. Pembuatan larutan Glibenklamida 0,1125 mg/mL
Bobot rata-rata tablet Glibenklamida = 200,65 mg
Tiap tablet mengandung 5 mg zat aktif Glibenklamida sehingga serbuk
yang harus ditimbang untuk mendapatkan 25 mg zat aktif yaitu
(25 mg : 5 mg) x 200,65 mg = 1003 mg
Sebanyak 1003 mg dilarutkan dalam labu ukur 10 mL sebagai larutan
induk dengan konsentrasi 0,25%. Untuk mendapatkan larutan Glibenklamida
dengan konsentrasi 0,1125 mg/mL dengan volume 10 mL, maka :
C1 . V1 = C2 . V2
2,5 mg/mL . x = 0,1125 mg/mL . 10 mL
x = 0,45 mL
Sebanyak 0,45 mL larutan induk dilarutkan dalam labu ukur 10 mL
dengan aquadest hingga tanda.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
Lampiran 7. Perhitungan Penetapan Peringkat Dosis Air Rebusan Daun
Insulin pada Kelompok Perlakuan
Dasar penetapan peringkat dosis :
1. Bobot tertinggi tikus = 200 gram
2. Konsentrasi = 0,2 gram/mL
3. Volume = 3 mL
Dengan dasar tersebut, maka dapat ditetapkan dosis tertinggi air rebusan
daun insulin
Dosis x Berat Badan = Konsentrasi x Volume pemberian
D x BB = C x V
D x 200 gramBB = 0,2 gram/mL x 3 mL
D = 0,6 gram/200 gramBB
= 3 gram/KgBB
= 3000 mg/KgBB
Dosis yang digunakan berdasarkan pengobatan pada masyarakat sehari
hari, dosis pada perlakuan ini yaitu 7 gram/ 70 KgBB manusia.
Konversi manusia (70 kg ke tikus 200 g) = 0,018
Dosis untuk 200 gram tikus = 0,018 x 7 gram
= 0,126 gram/ 200gBB
Dosis tikus 1 Kg = x 0,126 gram
= 0,63 gram/ KgBB
= 630 mg/ KgBB
Dosis terapi manusia yang telah dikonversi ke tikus dan dosis tertinggi
menjadi dasar mendapatkan faktor pengali untuk peringkat dosis perlakuan
F =
=
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
= 2,18
Peringkat dosis yang diperoleh berdasarkan faktor pengali :
Dosis I = 630 mg/kgBB
Dosis II = 1373 mg/kgBB
Dosis III = 3000 mg/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Lampiran 8. Analisis Statistik Data LDDK0-240
Penetapan Waktu Pemberian
Glibenklamida Menggunakan SPSS 15
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Lampiran 9. Analisis Statistik Data LDDK0-240
Orientasi Dosis Pemberian Air
Rebusan Daun Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) Menggunakan
SPSS 15
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Lampiran 10. Analisis Statistik Data LDDK0-240
Efek Penurunan Kadar
Glukosa Darah Air Rebusan Daun Insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.
Gray) Menggunakan SPSS 15
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
30
22205,50
2914,142
,242
,242
-,160
1,325
,060
N
Mean
Std. Deviation
Normal Parametersa,b
Absolute
Positive
Negative
Most Extreme
Differences
Kolmogorov-Smirnov Z
Asymp. Sig. (2-tailed)
LDDK
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
Oneway
Descriptives
LDDK
5 19503,00 177,292 79,287 19282,86 19723,14 19305 19695
5 20862,00 337,775 151,058 20442,60 21281,40 20565 21323
5 28206,00 507,329 226,885 27576,07 28835,93 27728 28815
5 22674,00 606,026 271,023 21921,52 23426,48 21938 23475
5 21325,50 283,645 126,850 20973,31 21677,69 21008 21653
5 20662,50 326,272 145,913 20257,38 21067,62 20400 21195
30 22205,50 2914,142 532,047 21117,34 23293,66 19305 28815
Kontrol Normal
Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis I
Dosis II
Dosis III
Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval for
Mean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances
LDDK
2,442 5 24 ,063
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
ANOVA
LDDK
2,4E+008 5 48489240,00 303,982 ,000
3828330 24 159513,750
2,5E+008 29
Between Groups
Within Groups
Total
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: LDDK
Scheffe
-1359,000* 252,598 ,001 -2273,36 -444,64
-8703,000* 252,598 ,000 -9617,36 -7788,64
-3171,000* 252,598 ,000 -4085,36 -2256,64
-1822,500* 252,598 ,000 -2736,86 -908,14
-1159,500* 252,598 ,007 -2073,86 -245,14
1359,000* 252,598 ,001 444,64 2273,36
-7344,000* 252,598 ,000 -8258,36 -6429,64
-1812,000* 252,598 ,000 -2726,36 -897,64
-463,500 252,598 ,648 -1377,86 450,86
199,500 252,598 ,985 -714,86 1113,86
8703,000* 252,598 ,000 7788,64 9617,36
7344,000* 252,598 ,000 6429,64 8258,36
5532,000* 252,598 ,000 4617,64 6446,36
6880,500* 252,598 ,000 5966,14 7794,86
7543,500* 252,598 ,000 6629,14 8457,86
3171,000* 252,598 ,000 2256,64 4085,36
1812,000* 252,598 ,000 897,64 2726,36
-5532,000* 252,598 ,000 -6446,36 -4617,64
1348,500* 252,598 ,001 434,14 2262,86
2011,500* 252,598 ,000 1097,14 2925,86
1822,500* 252,598 ,000 908,14 2736,86
463,500 252,598 ,648 -450,86 1377,86
-6880,500* 252,598 ,000 -7794,86 -5966,14
-1348,500* 252,598 ,001 -2262,86 -434,14
663,000 252,598 ,268 -251,36 1577,36
1159,500* 252,598 ,007 245,14 2073,86
-199,500 252,598 ,985 -1113,86 714,86
-7543,500* 252,598 ,000 -8457,86 -6629,14
-2011,500* 252,598 ,000 -2925,86 -1097,14
-663,000 252,598 ,268 -1577,36 251,36
(J) Perlakuan
Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis I
Dosis II
Dosis III
Kontrol Normal
Kontrol Negatif
Dosis I
Dosis II
Dosis III
Kontrol Normal
Kontrol Positif
Dosis I
Dosis II
Dosis III
Kontrol Normal
Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis II
Dosis III
Kontrol Normal
Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis I
Dosis III
Kontrol Normal
Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis I
Dosis II
(I) Perlakuan
Kontrol Normal
Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis I
Dosis II
Dosis III
Mean
Difference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
Homogeneous Subsets
LDDK
Scheffea
5 19503,00
5 20662,50
5 20862,00
5 21325,50
5 22674,00
5 28206,00
1,000 ,268 1,000 1,000
Perlakuan
Kontrol Normal
Dosis III
Kontrol Positif
Dosis II
Dosis I
Kontrol Negatif
Sig.
N 1 2 3 4
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.a.
Means Plots
Perlakuan
Dosis IIIDosis IIDosis IKontrol NegatifKontrol PositifKontrol Normal
Mean
of
LD
DK
30000
28000
26000
24000
22000
20000
18000
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Lampiran 11. Leaflet Glibenklamid
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Lampiran 12. GOD-PAP
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
BIOGRAFI PENULIS
Skripsi yang berjudul “Pengaruh Air Rebusan Daun Insulin
(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) Terhadap Kadar
Glukosa Darah Tikus Jantan Galur Wistar yang Terbebani
Glukosa“ ini ditulis oleh Mila Karmila Sri Setiomulyo. Penulis
merupakan anak kedua dari tiga bersaudara dari pasangan
Bapak Singgih Utomo Setiomulyo dan Ibu Setiowati
Setiodarmo, yang lahir di Surakarta pada tanggal 11 Juni 1994.
Penulis menempuh pendidikkan formal pada tahun 1997-2000
di TK Mesen Surakarta, pada tahun 2000-2006 di SD Kanisius Keprabon II
Surakarta, pada tahun 2006-2009 di SMP PL Bintang Laut Surakarta, dan pada
tahun 2009-2012 penulis menyelesaikan pendidikkan di SMA Negeri III
Surakarta. Pada tahun 2012 penulis mengawali pendidikkannya sebagai
mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Selama
masa kuliah, penulis pernah menjadi asisten praktikum biokimia pada tahun 2014
dan tahun 2015.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI