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Partie 2 du programme : Biologie des organismes
3. 1.2. Quelques modalités du développement des vertébrés.
I. L'induction et la structuration du mésoderme
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L'expérience historique de Niewkoop 1969
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Expérience de recombinaison ecto-endodermique réalisée avec un marquage préliminaire de l'ectoderme à l'aide d'un traceur de lignage cellulaire fluorescent en rouge (RLDx). Les résultats montrent que le mésoderme induit est marqué par le RLDx. Le mésoderme provient donc de l'ectoderme après induction par l'endoderme.
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Recombinaisons effectuées entre les blastomères animaux de la rangée A avec un blastomère végétatif (d'après Dale et Slack, 1987).
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A gauche, un embryon totalement ventralisé, sans aucune structure dorsale.A droite, un embryon partiellement ventralisé montrant des rudiments de structures dorsales postérieures.
Exemples de ventralisation chez le xénope
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Expérience de Spemann
Greffe de lèvre dorsale
Double gastrulation
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Induction de l'organisateur de Spemann (O) par le centre de Nieuwkoop (CN).
L'un des mécanismes de la dorsalisation.
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La βcaténine, un facteur de transcription (activateur du gène siamois)
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http://www.sciencebio.com/FacBio/Endocrino/CMembryo.pdf
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Domaine d'expression de Brachyury (flèches) au stade blastula chez le xénope (d'après Lemaire et al. 1995).
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Wolpert
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II. La régionalisation des somites
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Le Moigne
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Expression régionalisée des gènes Pax exprimés dans le tube neural ainsi que les somites de l'embryon de poulet. En jaune et en bleu sont représentées respectivement l'expression de Pax3et Pax1.
http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/homeotique/homeo5.html
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Homéodomaine uni à sa séquence spécifique d'ADN. La partie contenant les hélices 2 et 3 ressemble fortement à la conformation hélice-coude-hélice des protéines régulatrices de procaryotes
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Mutante antennapedia
normale
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Observation de drosophiles mutantes
Mutante bithorax
normale mutante
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Un ensemble de gènes homéotiques
4 ensembles = 4 complexes de gènes homéotiques
Des ensembles de gènes très ressemblants
Gènes paralogues de la même couleur
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Comparaison des séquences de 2 gènes homéotiques
Conclusion : Ces 2 gènes homéotiques appartenant à la drosophile et à la souris se ressemblent beaucoup.
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La première étape du knock out. La recombinaison homologue dans des cellules souches embryonnaire permet de remplacer un gène Hox par une séquence dont on peut suivre l'expression.
Consulter pour les détails http://www.snv.jussieu.fr/vie/documents/KO/KO.htm#exbcd8
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La deuxième étape : l'intégration de cellules mutantes dans des embryons permettant d'obtenir des individus mosaïques
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3ème étape : des croisements permettent d'obtenir des souris « knock out »
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c = Mutant HoxC8
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b = Mutant Hoxa3 Hoxd3
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III. La différenciation de la cellule musculaire squelettique
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Les différentes catégories de cellules musculaires
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Coupe longitudinale faisant apparaître un tronçon de 3 fibres (ou cellules) musculaires
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Évolution de myoblastes en culture
(A)
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Tubules T et réticulum sarcoplasmique
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Myofibrilles de muscle squelettique (C. Long.)
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DOC 6 : Immunofluorescence sur coupes consécutives du même secteur de muscle de poulet grâce à deux anticorps spécifiques d’une forme différente de la myosine.
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Autoradiographie d’une fibre musculaire associée à des cellules satellites (cf. flèches) en présence d’un extrait de muscle endommagé.
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IV. La croissance d'un os long
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Organisation d'un os long
Moelleosseusejaune
Artèresnourricières
périoste
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Marieb
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Matrice cartilagineuse
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Zone de mitoses des chondrocytes
Petits chondrocytes
Zone d'hypertrophie des chondrocytes
Mort des chondrocytes
Gros chondrocytes
Zone de remplacement du cartilage par l'os
Ostéoclastes digérant le cartilage et ostéoblastes déposant la matrice osseuse
Capillaires sanguins
Matrice osseuse