outbreaks of multidrug-resistant pseudomonas aeruginosa in community hospitals japan
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Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan. Andréa Lanzara Ianni Daniela Soares Mariana Lemos Verônica Boeira Reina. Pseudomonas aeruginosa. -bactéria gram negativa, aeróbia, baciliforme -patógeno oportunista -infecções nosocomiais - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
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Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community
Hospitals Japan
Andréa Lanzara IanniDaniela SoaresMariana Lemos
Verônica Boeira Reina
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Pseudomonas aeruginosa
-bactéria gram negativa, aeróbia, baciliforme-patógeno oportunista-infecções nosocomiais-sobrevive em muitos ambientes-resistência a muitos antibióticos e antisépticos
-beta-lactamicos-aminoglicosideos-quinolonas
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Introdução
-infecção no trato urinário envolvendo P. aeruginosa (cepa IMCJ2.S1) resistente a vários medicamentos em um hospital do Japão
-possui novo integron classe 1(In113) contendo 3 genes cassetes:
Gene Metalo-β-lactamase(MBL) blaIMP-1
Gene aminoglicosídeo 6’-acetiltransferase aac(6’)-Iae Gene aminoglicosídeo 3’-adneliltransferase aadA1
- mutação nos genes gyrA e parC (substituição de aminoácidos) resistência a fluoroquinolonas
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Material e Métodos - 13 hospitais do Japão - outubro de 2003 a setembro de 2004 - 284 isolados clínicos de P. aeruginosa
-214 isolados clínicos - MDR
214 isolados - MDR
70 isolados - não MDR
72 – urina 55 - cateter urinário
18 – trato respiratório
5 – fezes
2 – ponta de cateter
2 – feridas
99/214
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Material e MétodosTeste bioquímico - confirmação da identidade das espécies através de métodos colorimétricos com kit API20NESorotipagem – teste de aglutinação Suscetibilidade antimicrobiana – através do MIC50 e MIC90
Screening para produção de MBL (multiresistência a β-lactâmicos)Detecção imunológica de AAC(´6) – Iae – através da aglutinação com Ac conjugadoPCR de integron classe 1 (já foi descrito previamente e a identificação do mesmo, na estrutura, caracteriza a multiresistência a drogas)PCR de QRDRs - identifica regiões determinantes de resistência a quinolonasLAMP (amplificação isotérmica de DNA)Sequenciamento de DNAEletroforese em gel de campo pulsátil - PFGE
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Resultados
Sorotipagem
-10 sorotipos identificados - O11, O1, O10, B, M, O4, O3, O6, O9, C
-214 MDR 212 O11 (99%)
-70 não MDR – variável O1, O3, O4, O6, O9, O10, O11, B, C, M
- O11 – predominante para MDR P. aeruginosa nesta população
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Resultados Suscetibilidade Microbiana
MDR P. aeruginosa
- Resistência - maioria dos isolados MDR P.aeruginosa apresentou resistência a todos os antimicrobianos
- Sensibilidade
Não MDR P. aeruginosa
-Resistência – menos de 63%, exceto para STR ( 98,6%)
Gentamicina (GEN) – 57,5% de resistência
Polimixina B ( PL-B) – 28,0% de resistência
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Resultados Screening para verificação de produção de MBL - 214 MDR – 212 produziram MBL
Detecção imunológica de AAC(6´)Iae
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Resultados Detecção de integrons classe 1 (PCR) - 230/284 – positivo para integron classe1 - 212/230 – apresentaram mesmo tamanho de banda comparado
ao integron classe 1 In113
Resistência a fluorquinolonas GyrA -254/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParC -244/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido GyrB -70/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParE -30/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido
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Resultados Análise do gene aac(6’)-Iae (Método de LAMP)
-Laranja para verde = amplificação positiva
-212/284 positivo
-Concordância com os resultados de PCR
-presença de gene aac (6’)-Iae – MDR cepas
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Resultados PCR=LAMP
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Resultados Genotipagem por PFGE
MDR P.aeruginosa 211/214 – cluster A – associação com a resistência a múltiplas
drogas
Não MDR P.aeruginosa genótipos variáveis
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Discussão Demonstrou expansão clonal de MDR P. areuginosa em
hospitais no Japão.
Esta é a primeira descrição de um surto em larga escala de infecção nosocomial causada por um único clone de P. aeruginosa, com alto nível de resistência a um grande número de antibióticos.
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Discussão A maioria dos isolados MDR testados (205 de 214)
apresentavam sorotipo O11.
Os sorotipos O11 e O12 tem sido mais associados com surtos de P. aeruginosa.
Surtos de P. aeruginosa, sorotipo O11:- 1980 – Estados Unidos;- 1994 e 1995 – Grécia;- Recentemente: Bélgica e Japão
Não se sabe porque estes dois sorotipos específicos estão envolvidos em mais surtos de P. aeruginosa.
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Discussão
Aac(6’)-Iae - bom candidato para marcador de infecção por MDR P. aeruginosa, já que 99% das MDR isoladas apresentaram o gene aac(6’)-Iae.
Detecção de aac(6’)-Iae e seu produto: - LAMP (amplificação isotérmica do DNA): método simples e com
alta especificidade; - Aglutinação com Ac-conjugado: menos específico, mas
suficientemente preciso para detectar MDR de P. areuginosa.
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Discussão MDR P. aeruginosa pode ter se espalhado no Japão devido
ao crescente uso de carbapenemos, aminoglicosídeos e fluoroquinolonas.
Vigilância nacional para MDR P. aeruginosa está sendo planejada.
Medidas consideradas eficazes na prevenção de infecção nosocomial por P. aeruginosa em hospitais:• Monitorar fontes ambientais de bactérias;• Limpeza de locais contaminados;• Revisão das medidas de controle de infecções no
tratamento da urina.
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Discussão
Modo de transmissão de MDR P. areuginosa entre hospitais – desconhecido
Transferência de pacientes infectados entre hospitais pode ser uma causa.
31 pacientes infectados com MDR P. areuginosa foram transferidos de outros hospitais para os hospitais participantes do estudo.
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Análise Crítica Trabalho com uma quantidade grande de informações
Vários métodos de identificação e caracterização foram utilizados - estão dispostos de maneira ordenada na descrição de Materiais e Métodos;- em Resultados as informações ficaram um pouco dispersas, às vezes, trazendo confusão para o entendimento.
Na discussão não houve aprofundamento dos assuntos abordados e não há uma conclusão finalizando esta discussão.