유전자공학:편집과조절

2 Life Technologies | Genome editing 3Life Technologies | Genome editing

Table of contents

유전체 공학에 대한 소개 :편집과 조작

2 유전체 공학 워크플로워

4 유전체 공학의 잠재력

6 유전체 공학의솔루션

8 기술 선택 가이드

게놈 편집과 조작 기술

10 mirVana™ miRNA mimic과 inhibitor 12 Ambion® siRNA 16 Jump-In™ targeted integration kits 18 Flp-In™ system 20 GeneArt® CRISPR Nuclease Vector 24 GeneArt® Custom CRISPR 26 GeneArt® Precision TALs

Transfection and analysis 32 Plasmid DNA transfection 36 RNAi transfection 38 GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit Stem cell engineering

Stem cell engineering 40 줄기 세포 공학

42 줄기 세포 공학에 대한 자료

Plant genome engineering

44 정확한 식물의 게놈 편집과 진보된 작물 공학

Custom cell line engineering services 46 TALs stable cell line service 48 CellModel™ Services stem cell engineering

유전체 공학 워크플로워:편집과조절

라이프 테크놀로지스에서는 유전체 공학 워크플로워에사용되는 완벽한 제품군들을 개발해왔습니다. 세포배양과 샘플준비 에서유전체조작, 그리고유전적변이를 확인하고분석하는 그 모든 과정에 대한 제품군을 보유하고 있습니다.Flp-in과 Jump-In 단백질 발현 시스템, 유전자 조절을 위한 siRNA와 miRNA와 같은 RNAi 제품과 그리고 최신 기술을 GeneArt® Precision TALs과 CRISPR(8 페이지의 선택 가이드를 참고 )과 같은 주요 제품이 있습니다.

판별: Ion Proton® 시스템은 판별 시에 믿고 사용할 수 있는 염기서열 분석기이며 이는 암의 유전- 그것이 멘델의 법칙을 따르거나 아니면 복잡한 형태일지라도 -에서 변이의 중요성을 설명해 줄것입니다. 또한 우리가 제공하는 생물정보학 묶음 제품인 Ion Reporter™ Server System은 하드웨어와 소프트웨어가 결합시켜 인간의 염기서열의 변이를 자동적으로 분석하는 솔루션을 제공해 드립니다.

탐색과 분석 : 다양한 기능의 변이를 판별하기 위해서는 변이를 이용한 세포 모델을 만들고 이에 대한 유전자 정량 분석을TaqMan®과 SYBR® 시약을 이용하여 수행하게 되며 이는 믿을 수 있는 real time PCR 장비를 이용해야 합니다. 이러한 과정을 통해 기능 변이를 확인할 수 있으며 단백질 발현양은 이후에 웨스턴블롯과 시약 을 이용하여 확인하게 됩니다.

유전체 공학과 모델의 제작 : 변이의 기능적인 면을 더 자세히 이해하고자 한다면RNAi, GeneArt® CRISPR vectors, GeneArt® Precision TALs 와 세포 모델의 제작과 같은 전체 공학 도구와 서비스를 이용할 수 있습ㄴ다. 추가적으로 특정 locus의 유전체 편집의 절단 효율을 평가하기 위해GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit를 이용이 가능합니다. 또한 더 나아가 고객의 디자인한 세포주를 개발하고 제공하는 서비스를 제공하고 있으며 이를 통해 여러분의 원하는 것들을 모두 얻으실 수 있을 것입니다.

4 Life Technologies | Genome editing 5Life Technologies | Genome editing

유전체 공학의 잠재력

HR or NHEJ

Tag

Chromosome+single engineered nuclease pair (CRIPSR or TAL)

Gene-specific double-strand break

Mutation or small change

Endogenous tag addition

Disease-resistanttransgenic plants

Stem cell engineering &gene therapy

Tissue & animal disease models

Gene deletions, insertions, or inversions

Stable integration for heritable modifcation

Promoter mutation Promoter addition

(DSB)

조절 안됨낮은정확성

Random mutagenesis and integration

RNAi-mediated gene knockdown

Targeted integrations via homologous recombination

First-generation genome editing tool

Next-generation genome editing tools

높은 정확성과

조절 능력

• No control on where the edits are made

• Post-transcriptional, hence a temporary effect on gene function

• Low efficiency and laborious downstream screening methods

• Zinc finger technology: One ZnF repeat per 3 bases requires screening and selection

• Engineered to edit specific DNA sequence and allow targeted gene manipulation

• TAL effector technology: Simple to design DNA binding domain with one repeat per base

• CRISPR/Cas technology: Small noncoding RNA– guided DNA editing

최근의 기술 진보가 조절과 편집에서 정확성을 향상시켰습니다

게놈편집 - 정확하고 특이적인 DNA 수정이 이제 clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPRs)에서 유래된 기술과 transcription activator-like (TAL) effector등을 이용하여 손쉽게 이용할 수 있습니다. CRISPR sequences과 TAL effector는 유전체의 특정 염기서열을 인식하여 잘라내어 원하는 부위에 double-strand breaks (DSBs) 를 형성 시킵니다.

세포의 고유 복구 기작이 이렇게 절단된 부위를homologous recombination (HR) 혹은 non-homologous end-joining (NHEJ)의 형태로 복구 시킵니다. HR은 template를 이용하므로 더욱 정확하고 대상 유전자에 새로운 DNA를 삽입할 수 있습니다. DSB는 NHEJ에 의해 복구 될때 특정 염기서열의 삽입 혹은 삭제(insertion or deltions-indels)가 나타나기 쉬워지며 이것이 유전자의 기능을 잃어 버리게 하는 역할을 합니다.

잠재적으로 적용이 가능한 분야

Disease-resistant transgenic plants

Stem cell engineering and gene therapy

Tissue and animal disease models

6 Life Technologies | Genome editing 7Life Technologies | Genome editing

유전체 공학의솔루션

20년 동안 동종 산업에서 혁신을 이끈 경험을 바탕으로 개발된 자사의 포괄적인 유전체 공학의 포트폴리오는 여러분의 연구에 필요한 것들을 만족시킬 수 있습니다.

간편하고 널리 사용되는 RNAi 부터 유래 없이 정확한GeneArt® Precision TALs까지 제공하는 자사의 제품 라인들은 타사에서 비교할 수 없는 여러분들의 실험을 더욱 다양하고 규모 있게 하며 높은 품질의 성능을 제공할 것입니다. 자사는 모든 실험실 및 예산상황, 다양한 실험에 대한 다양한 유전체 편집 및 조절 도구를 제공하고 있습니다.

다음 페이지에서 각각의 비교 선택 가이드를 보실 수 있습니다.

8 Life Technologies | Genome editing 9Life Technologies | Genome editing

Ambion® miRNA mimics and inhibitors

Silencer® siRNA Jump-In™ Targeted Integration Kits

Flp-In™ System GeneArt® CRISPR Nuclease Vector GeneArt® Precision TAL

Transient knockdown of multiple transcripts

Transient knockdown with lower off-target effects

Targeted integration of genetic material into specific integration sites

Stable integration of your gene of interest

Rapid and efficient editing with multiplexing capabilities

Precise and flexible editing; targeting to any gene in any cell

Benefits Medium-potency targeting of multiple transcripts with shared seed sequence

High-potency, transient knockdown of target transcript with lower off-target effects

Jump-In™ Fast kits enable rapid, high-efficiency, nonisogenic integration into wild type host cells

Jump-In™ TI™ kits enable rapid engineering of host cells for isogenic integration of genes into user-selected sites

Production of Flp-In™ cell lines expressing the gene(s) of interest is rapid and efficient. The system allows the generation of isogenic stable cell lines and permits polyclonal selection of stable expression cell lines.

Easy-to-design genome engineering systemAffordable ready-to-use cloning vectorsEnrichment for hard-to-transfect or difficult-to-modify cell linesMultiplexing and screening capable at low cost and with ease of construction

Precise—technology that recognizes the DNA sequence you specifyFlexible—you choose the effectors and Gateway®-compatible vector that meet your needsReliable—the final clone contains a verified, optimized sequence for improved expressionFast—receive your clone typically within 2 weeks after your order has been confirmed

Modification options

Downregulation (knockdown) Downregulation (knockdown) Integration (knock-in) Integration (knock-in) Gene deletion (knockout)Downregulation (knockdown)Integration (knock-in)

Gene deletion (knockout)Downregulation (knockdown)Integration (knock-in) Gene activation

Ease of use Predesigned constructs available for transfection in cell culture

Predesigned constructs available for transfection in cell culture

Low effort in vector construction, transfection, and clone identification

Low effort in vector construction, transfection, and clone identification

Simple and fast design process Difficult to design (except when using the GeneArt® Precision TALs online design tool)

Type of recognition

RNA-RNA RNA-RNA DNA-DNA DNA-DNA RNA-DNA Protein-DNA

Issues in recognition

Seed region, which is the recognition element, is just 7 nt

Seed region could play a role Multiple integration sites may be targeted by PhiC31 in the Jump-In™ Fast System

FRT site (34 bp) in genome is needed for gene integration; this is provided in the Flp-In™ cell line

PAM site (NGG at the end of the 20 bp target sequence)

Active range of spacing needed for activity

Cell types Mammalian Mammalian Mammalian Mammalian Mammalian • Mammalian• Bacterial• Yeast• Plant• Insect• Stem cells• Zebrafish

Areas of application

• Gene function• Gene-based therapeutic

development• Gene modulation• Pathway analysis• Systems biology

• Gene function• Gene-based therapeutic

development• Gene modulation• Pathway analysis• Systems biology

• Protein production• Antibody production

• Protein production• Antibody production

• Gene function• Gene modulation• Gene tagging• Pathway engineering• Metabolic engineering• Protein production

• Gene function• Gene modulation• Gene tagging• Pathway engineering• Metabolic engineering• Protein production

Limitations Only for transient inhibition of translation

Only for mRNA cleavage; degradation of mRNA is transient

Only for integration Only for integration • Off-target effects• Sensitive to methylation

• Difficult to design• Blocked by CpG methylation• Inhibited by chromatin structure• Large size for delivery

Off-target effects High Moderate Low Low Moderate Low

Multiplexing Capable Capable No No Capable Rarely used

10 Life Technologies | Genome editing 11Life Technologies | Genome editing

mirVana™ mimic과 inhibitor는 화학적으로 변형된 형태이며 합성된 핵산을 mature miRNA에 동일한 효과를 유도하거나 혹은 세포에서 자연적으로 생성되는 miRNA를 억제하기 위한 목적으로 디자인되었습니다. 이러한 mirVana™ 제품군은 세포내에서 특정 miRNA의 기능 연구에 사용되거나 혹은 miRNA가 어떠한 대상 유전자를 조절하는지 확인하기 위해 사용됩니다. mirVana™ miRNA mimic과 inhibitor는 in vitro 와 in vivo 에서 모두 사용이 세포 기반의 시스템에서는 가능하며Lipofectamine® RNAiMAX Transfection Reagent 로 유전자 전달 효과가 증명되었습니다.• 다양성—특정 miRNA의 기능 연구를in vitro 와 in vivo 에서 모두 사용이 가능

• 강력한 도구—miRNA의 유전자 발현 조절 확인 • 높은 처리율—여러개의 miRNA를 동시에 탐색이 가능한 라이브러리가 가능libraries are available for effective screening of multiple miRNAs simultaneously• 동시성—Sanger의 miRBase 염기서열 데이터 베이스를 기반으로 주기적인 업데이트

mirVana™ miRNA mimic과 inhibitor 인위적인 대상 mRNA의 번역 조절

완벽한 mirVana™ libraries—인간과 쥐의 모든 miRNA mimic과 inhibiotr를 포함—가 지금 구매 가능합니다. 이미 제작된 라이브러리 혹은 주문형 miRNA 라이브러리에 대해 알고 싶으시다면 RNAiLibraries@lifetech.com으로 연락 주세요.

Product ordering information

For more information, go to lifetechnologies.com/miRNA

mirVana™ miRNA inhibitors effectively suppress miRNA in vivo. miR122 or Negative Control #1 mirVana™ miRNA inhibitors were complexed with Invivofectamine® 2.0 Reagent and delivered to BALB/c mouse liver via tail vein injection on three consecutive days at a dose of 7 mg/kg body weight. Expression of four mRNA targets (AldoA, Hfe2, Slc35a4, and Lass6), natural targets of miR122, were measured in transfected livers of mice injected with miR122 miRNA inhibitor or Negative Contol #1 (Neg1) and livers of mice that were not transfected (NT) using TaqMan® MicroRNA Assays. This indicates that mirVana™ miRNA inhibitors are efficiently delivered to the liver with Invivofectamine® 2.0 Reagent, leading to upregulation of genes naturally suppressed by miR122.

Product Quantity Cat. No.

mirVana™ Predesigned miRNA Mimic 5 nmol 4464066

mirVana™ Predesigned miRNA Mimic, in vivo use 250 nmol 4464070

mirVana™ Predesigned miRNA Inhibitor 5 nmol 4464084

mirVana™ Predesigned miRNA Inhibitor, in vivo use 250 nmol 4464088

mirVana™ miRNA Mimic, Negative Control #1 5 nmol 4464058

mirVana™ miRNA Inhibitor, Negative Control #1 5 nmol 4464076

mirVana™ miRNA Mimic, miR-1 Positive Control 5 nmol 4464062

mirVana™ miRNA Inhibitor, let-7c Positive Control 5 nmol 4464080

0

50

100

150

200

250

300

350

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miR122

NT Neg1 miR122

NT Neg1 miR122

NT Neg1 miR122

NT Neg1

AldoA Hfe2 Slc35a4 Lass6m

RNA

upre

gula

tion

%

miR122 = miR122 miRNA inhibitorNT = Not transfectedNeg1 = Negative Control #1

PLAY

12 Life Technologies | Genome editing 13Life Technologies | Genome editing

RNA interference (RNAi)는 다양한 세포에서 단백질의 기능을 연구하기 위한 유전자 knock down을 효과적으로 할 수 있는 가장 좋은 방법입니다. 포유류 세포에서 유전자 knock down을 위한 전통적인 RNAi 방법으로는 21mer 정도의 핵산을 합성하여 이를 결합하여small interfering RNAs (siRNAs)로 제작하여 사용하는 것입니다. 오직 Silencer® Select siRNA만이locked nucleic acid (LNA) 변형을 통해 특이성을 높였습니다. 20 년이 넘는 경험과 미래 지향적인 R&D, 그리고 수 많은 테스트를 거친Ambion® siRNA 제품군은 여러분의 연구에 그 무엇보다 도움이 되기 위해 디자인 되었습니다.

• 다른 상용화된 siRNA 보다 높은 효과

• off-target effect(false positives와 false negatives)를LNA 화학적 변형을 도입하여 감소

• 100% 유전자 발현 감소 보장* — 동종업계에서 최고의 보증 제도

제품 주문 정보 보러가기>

*For more information on the siRNA guarantee, go to lifetechnologies.com/sirna

Ambion® siRNAin vitro 실험에서 최고의 siRNA

자세한 내용은 lifetechnologies.com/sirna에서 확인해 보세요

Which siRNA is right for you? Find this interactive table online at lifetechnologies.com/siRNA

Cost-effective Good knockdown, low off-target

Highest knockdown, lowest off-target

Silencer® siRNA Stealth RNAi® siRNA Silencer® Select siRNA

Potency 100 nMrecommended concentration

20 nMrecommended concentration

5 nMrecommended concentration

Efficacy (>70% knockdown)

2 of 3 siRNA guaranteed 2 of 3 siRNA guaranteed 2 of 2 siRNA guaranteed

Specificity Moderate High Highest

Coverage Coding RNA Coding RNA Coding and noncoding RNA

Target species Human, mouse, rat (use custom tool for other species)

Human, mouse, rat (use custom tool for other species)

Human, mouse, rat (use custom tool for other species)

14 Life Technologies | Genome editing 15Life Technologies | Genome editing

개발자를 만나보세요: Susan Magdaleno 이 Silencer® Select siRNA 기술에 대해 이야기 합니다,

Dr. Gavin Robertson가 Silencer® Select siRNA 기술이 어떻게 흑색종 연구에 기여했는지 이야기 해 줍니다

in vivo RNAi를 위한 성공적인 해결방법In vivo RNAi 실험은 in vitro 보다 많은 RNA 가수 분해 효소로 인해 극복할 사항이 많습니다. 이러한 것들을 극복하고 재현성 있는 결과를 얻고자 한다며RNA 가수 분해 효소에 저항성을 가진 Ambion® in vivo siRNA가 반드시 필요합니다. Ambion® in vivo siRNA는 기존의 Silencer® Select siRNA가 가지고 있는 효능 및 효율성을 그대로 가지고 있으며 동물 실험에서 안정성과 안전성을 향샹 시켜 줄 것입니다.

Ambion® siRNA

PLAY

PLAY

16 Life Technologies | Genome editing 17Life Technologies | Genome editing

여러분의 세포 공학에 경험이 있다던가 혹은 여러분의 프로젝트를 위해 세포주를 제작해야 한다면Jump-In™ cell engineering platform이 기존 방식보다 더 짧은 시간안에 세포주를 제작할 수 있도록 도와줄 것입니다. Jump-In™ 기술은 PhiC31 integrase를 이용하여 특이적인 부위에 삽입될 수 있도록 제작되어 있어 세포주 개발을 가속화 할 수 있게 도움을 줄 것입니다

Cre, Flp와 같은 기존에 잘 알려진 recombinase와는 다르게PhiC31 integrase 서로 다른 염기서열 부위간의 재조합을 촉매합니다. 이에 대한 제거 효소(excision enzyme)가 없으므로 단일 방향으로만 삽입이 일어나며 또한 반응 자체가 비가역적입니다. 또한, R4 integrase와PhiC31를 결합하게 되면 정해준 유전체 부위에서 동일한 발현이 이루어져 유전자 패밀리, 동형 단백질 혹은ortholog를 분석하는데 좋은 해결 방법입니다. 여러분이 원하는 것과 경험에 따라 우리는 다양한 형태의Jump-In™을 제공하고 있으며 이를 통해 여러분에게 맞는 최선의 방법을 이용하여 여러분이 원하는 시간안에 그리고 여러분이 가진 자원을 최대 활용할 수 있습니다.

Jump-In™ targeted integration kit효과적으로 높은 발현률의 포유류 세포주를 제작해 낼수 있습니다

Product ordering information

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Find out more at lifetechnologies.com/jumpin

Product Quantity Cat. No.

Jump-In™ Fast Gateway® System 20 reactions A10893

Jump-In™ Fast Gateway® Core Kit 1 kit A10894

Jump-In™ TI™ Gateway® System 20 reactions A10895

Jump-In™ TI™ Gateway® Vector Kit 1 kit A10896

Jump-In™ TI™ Platform Kit 1 kit A10897

Jump In™ T-REx™ CHO-K1 Kit 1 kit A15007

Jump In™ T-REx™ HEK293 Kit 1 kit A15008

Jump In™ Custom Services discoveryservices@lifetech.com

Product Jump-In™ Fast Gateway® System

Jump-In™ T1™ Gateway® System

Jump-In™ Parental Cell Line Kits

Jump-In™ Custom Services

Helps save time and effort compared to traditional cell engineering methods

Yes Yes Yes Yes

Engineered cell line is isogenic

No Yes Yes Choice

Can use your preferred cell background

Yes Yes Limited to parental cell lines in catalog

Choice

Requires generation of platform/parental cell line (with R4 sites)

No Yes No Choice

Requires clonal selection Optional Yes Optional Choice

Ideal when you need: Faster stable cell lines in your preferred cell background

Isogenic cell lines in your preferred cell background

Isogenic cell lines created with less hands-on time

Experts who can meet your project specifications and timelines

18 Life Technologies | Genome editing 19Life Technologies | Genome editing

Gene of interest

+ pOG44(Flp recombinase)

ATG

SV40

pA

BG

H p

A

SV40

pA

FRT FRTPSV40 PCMV goi IacZ-ZeocinTMhygropUC ori Amp Amp pUC ori

Flp-InTM expression cell line (hygromycin-resistant, ZeocinTM-sensitive)

pcDNATM 5/FRTgoi = gene of interest cloned

into pcDNATM 5/FRT

Flp-InTM

ExpressionVector

BGH pA

SV40 pA

puc ori

Am

picillin

P CMV

Hygrom

ycin

FRT

Flp-In™ 시스템은 여러분의 유전자를 안정적으로 삽입하여 발현 시켜주는 single-copy의 동일한 세포주를 제작할 수 있게 해줍니다. Flp-In™ 발현 시스템은Flp recombination target (FRT) 를 여러분의 원하는 세포주의 유전체의 특정 부위에 삽입을 하여야 합니다. 이 후 여러분이 원하고자 하는 유전자를 가진 발현 벡터를 Flp recombinase가 촉매하는 DNA의 재조합 현상을 통해 FRT 부위로 삽입하게 됩니다.

우리는 다양한 형태의Flp-In™ 제품군을 판매하고 있으며 여기에는 발현 벡터 뿐만 아니라 FRT가 삽입된 모 세포주 역시 포함됩니다. 빠르고 안정적인 세포주를 제작하기 위해 우리의 제품들은 Flp-In™ 발현 벡터를 이용하여 여러분의 유전자의 높은 단백질 발현을 보여 줄 것입니다.

Flp-In™ system특정 유전체 부위에 효율적인 유전자 삽입 Product ordering information

Product Quantity Cat. No.

Flp-In™ Complete System 1 kit K601001

Flp-In™ Core System 1 kit K601002

Flp-In™ T-REx™ Core Kit 1 kit K650001

Flp-In™ T-REx™ 293 Cell Line 1 mL R78007

Flp-In™-293 Cell Line 1 mL R75007

Flp-In™-BHK Cell Line 1 mL R76007

Flp-In™-CHO Cell Line 1 mL R75807

Flp-In™-CV-1 Cell Line 1 mL R75207

Flp-In™-Jurkat Cell Line 1 mL R76207

Flp-In™-3T3 Cell Line 1 mL R76107

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Generating a Flp-In™ expression cell line

20 Life Technologies | Genome editing 21Life Technologies | Genome editing

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector Kit을 사용하여 이입, 강화, 선별, 출판을 수행하십시오. CRISPR (clustered regulatory interspaced short palindromic repeats) Nuclease 시스템은 표적 특이적 crRNA의 신속하고 효율적인 클로닝을 위한 Cas9 nuclease 발현 카세트와 유도 RNA 클로닝 카세트로 구성된 간단하고, 바로 사용할 수 있는 all-in-one 발현벡터 시스템입니다. 이 시스템으로 단일 plasmid로부터 서열 특이적으로 선택한 게놈 locus를 편집 및 가공할 수 있습니다. GeneArt® CRISPR로 적절한 표적을 확인한 후, 생물학적으로 적절한 돌연변이를 GeneArt® Precision TALs로 검증하여 잠재적인 표적

이탈을 줄일 수 있습니다.

• 게놈 편집을 위한 대상 염기서열에 대해 디자인하기 쉽다

• 바로 사용이 가능한 클로닝 벡터로 제공합니다

• 변형이 어렵거나 혹은 유전자 이입이 어려운 세포주의 농축이 가능합니다

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector KitsEfficient cloning, streamlined workflow, faster results

어떻게 작동하는가?세포의 게놈 편집에서는 유전 조작된 핵산 가수 분해효소와 자체적인 복구 시스템을 이용하여 DNA에 변화를 일이크게 됩니다. CRISPR/Cas 시스템은 짧은 gDNA를 이용하여 Cas9 endonuclease를 특정한 유전체 위치를 목표로 작용할 수 있다는 장점을 가지고 있습니다. 때문에 gDNA는 특이적이며 gDNA를 발현하는 염기서열의 변화로만으로도 다른 유전자를 대상으로 이러한 게놈편집을 일으킬 수 있다는 장점이 있습니다.

게놈 편집에 사용되는 CRISPR/Cas 시스템은 3가지로 구성되어 있습니다 : Cas nuclease Cas9 (a double-stranded DNA endonuclease), 대상 염기서열에 상보적인

crRNA, 보조적으로 전사를 촉진하는crRNA (tracrRNA). GeneArt® CRISPR nuclease vector에서 crRNA과 tracrRNA 는 자연사으이 미생물에서 발현되는 crRNA/tracrRNA의 키메라의 유사형태로 발현됩니다. 여러분이 이후에 해야할 일은 원하고자 하는 염기서열을 가진 이중 가닥의 핵산을 crRNA 부위에 넣어 주는 일만 하시면 됩니다.

For detailed design strategy and target specificity guidelines, refer to our technical product bulletin at lifetechnologies.com/crispr

Image MARS Tactic ID CO28372

CRISPR/Cas9 targeted double-strand break. Cleavage occurs on both strands, 3 base pairs upstream of the NGG proto-spacer adjacent motif (PAM) sequence on the 3’ end of the target sequence.

Target-specific crRNA

Target genomic loci PAM

C G T A A A G C C A T A C G T A T A C T A C C

G C A T T T C G G T A T G C A T A T G A N G G

G G GGC C CA A

A

AU U U UG

AA UU U GA U

tracrRNAA A A A A A

AAAAA

A

A

AAAAA

A AA

G

G

GG

G

G

G G G

G

G

GG

GGG

G

G

G C C C CC

C

C

C

CC

CC

UU

U U U

UU

U

U

UUUU

U

U U

UUU

AA

A AA

U

UU

U

Cas9

22 Life Technologies | Genome editing 23Life Technologies | Genome editing

TK pA

U6 promoterCACCG

CAAAAPol IIIterm

tracrRNA

F1 origin

OFP

2A

Cas9 (with NLS1 and NLS2)

PCMV

Ampicillin

pUC origin

CRISPR Nuclease OFP Reporter 9,219 bp

TK pA

U6 promoterCACCG

F1 origin

CD4

2A

Cas9 (with NLS1 and NLS2)

PCMV

Ampicillin

CRISPR Nuclease CD4 Enrichment 9,822 bp

pUC origin

CAAAAPol IIIterm

tracrRNAGeneArt® CRISPR Nuclease Vector Kit reporter vector system으로 포유 동물 세포에서 게놈 편집에 필요한 CRISPR/Cas9 을 발현합니다. 현재 2 가지 형태의 서로 다른 reporter를 제공하고 있습니다 : GeneArt® CRISPR nuclease vectors with orange fluorescent protein (OFP) 제품은 Cas9과 gRNA를 발현하는 세포들을 FACs를 통해 분리할 수 있으며GeneArt® CRISPR nuclease vectors with CD4는 bead 기반의 형태로 Cas9과 gRNA를 발현하는 세포를 분리 해 낼 수 있습니다. 선형의

GeneArt® CRISPR nuclease vector는 빠르고 높은 효율을 보여 주며 손쉬게 이중 나선 구조의 crRNA를 발현하는 클론을 만들수 있으며 이 클론은 특정 염기서열에 특이적으로 반응하는 Ca9 핵산가수분해효소를 발현하여 특정 염기서열에서 게놈편집을 일으킬 수 있게 됩니다.

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector Kits

Product ordering information

Product Quantity Cat. No.

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector: OFP Reporter 10 reactions A21174

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector: OFP Reporter with Competent Cells (Combo) 10 reactions A21178

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector: CD4 Enrichment 10 reactions A21175

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector: CD4 Enrichment with Competent Cells (Combo) 10 reactions A11277

GeneArt® CRISPR Nuclease Vector maps. The vector is prelinearized with 5 base pair overhangs for easy cloning of your double-stranded DNA oligo that encodes a target-specific crRNA. Maps are shown of the vectors with (A) OFP reporter and (B) CD4 reporter. The gRNA, Cas9, and reporter are expressed from the same vector. Cas9 is directed to the nucleus by nuclear localization signals (NLS1 and NLS2).

A B

24 Life Technologies | Genome editing 25Life Technologies | Genome editing

이 웨비나를 시청해 보세요. 이 웨비나에서는CRISPR/Cas9에 의해 이루어지는 게놈편집에 대한 전반적인 내용과 GeneArt® CRISPR Nuclease System에 대해 배워볼 수 있습니다. 발표자인Namritha Ravinder는 Synthetic Biology 부서의 Genetic Circuits and Cell Engineering 팀의 연구자 입니다.

여러분이 원하는 염기서열을 디자인하고 클론은 얻고 싶으신가요?

Let us know at CRISPR@lifetech.com로 연락을 주세요. 우리가 직접 염기서열을 디자인하고 100ug의 transfection이 가능한 수준의 DNA를 제공해 드립니다.

자세한 내용 및 주문에 대한 문의는 lifetechnologies.com/crispr에서 확인해 보세요.

GeneArt® Custom CRISPR

A new era of genome editing

26 Life Technologies | Genome editing 27Life Technologies | Genome editing

정확한 게놈편집

GeneArt® Precision TALs는 정확한 DNA 표적화 및 정밀한 게놈 편집을 위한 맞춤 DNA 결합 단백질을 제공합니다. 표적 선택을 제한하거나 모호한 결과를 제공하는 다른 기술과 달리, GeneArt® Precision TALs 는 모든 게놈 locus의 표적화를 가능하게 합니다.

모든 유전자의 편집이 여러분이 원하는 대로 이루어집니다

GeneArt® Precision TALs는 뛰어난 결과를 보여줍니다.

• 정밀성—특정 DNA 염기서열을 인식합니다

• 활용성—필요에 부합하는effector 및 Gateway® 기술에 적합한 벡터를 선택할 수 있습니다

• 신뢰성—최종 클론에 발현 개선을 위해 검증되고, 최적화된 서열이 포함됩니다

• 신속성—주문 확인 후 보통 2주만에 (주문한)클론을 받습니다

GeneArt® Precision TALs

R&D 연구원이자 리더인 Dr. Jon Chesnut 이 이야기 해주는 온라의 튜터리얼을 시청해 보세요. 이 비디오에서 여러분은 GeneArt® Precision TALs 기술에 대해 배워보실 수 있습니다.

DNA binding domainFunctionaldomain

Fok1

Fok1

An MCS version of the GeneArt® Precision TAL vector allows you to customize the resulting TAL fusion protein with an effector domain of your choice.

Precision TALs fused to a Fok1 nuclease allow sequence-specific, double-stranded DNA breaks to be introduced.

Precision TALs fused to a vp16/KRAB functional domain allow specific activation/repression of gene expression.

Gene targeting (Fok1 nuclease pair) • Silencing

• Incorporation of exogenous DNA

Activation of transcription (Activator vp16

or vp64)

• Increasing the expression level of endogenous gene isoforms

Epigenetic repression of transcription

(KRAB)

• Heritable knockdown of gene expression

Steric repression and custom design

(MCS vector)

• Transient knockdown of gene expression

• Target any locus in the genome with the effector domain of your choice (multiple cloning site vector)

Available effector domains

PLAY

28 Life Technologies | Genome editing 29Life Technologies | Genome editing

GeneArt® Precision TALs을 디자인하고 주문하여 게놈 편집을 시작하세요

디자인, 편집, 최적화 그리고 주문하는 가장 빠르고 편리한 방법은 lifetechnologies.com/tals 에서GeneArt® 포탈을 이용하시는 방법입니다.

다른 방법으로는 온라인에서 주문양식을 다운받아 이를 작성하여 geneartsupport@lifetech.com으로 제출하실 수 있습니다. 주문 이후 생산이 완료되면 Gateway® entry clone 형태(동결 건조 형태)로 제공되며 이후 다양한 발현 벡터에 삽입하여 실험에 적용할 수 있습니다.

Find out more or place an order at lifetechnologies.com/tals

Time course of repression on endogenous genes Sox2 in 293FT cells. TAL repressors epigenetically repress genes in a heritable and persistent manner. 293FT cells were transfected with the indicated plasmids. Cells were harvested at different time points and mRNA levels of the target genes were quantitated by qRT-PCR and normalized to β-actin.

Cleavage products

DNA size

stan

dard

sIL

2RG TA

L

Contro

l TAL

1 2 3

Cleavage of an in vitro–expressed TAL demonstrated on a PCR-amplified target. Specific cleavage is observed using a GeneArt® Precision TAL targeting IL2RG.

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이 웨비나를 시청해보세요. 파키슨씨 병 샘플에서 유래된 iPSC의 유전적 변형을 통해 우리는 이전에는 불가능하였던 질병 기작의 모델을 구출 할 수 있었습니다.

이 웨비나를 시청해 보세요. 이 웨비나는 “TAL effectors tool box for precision genome editing,”라는 주제로 특정 염기서열을 대상으로 하는 유전자 편집과 그리고 TAL effectors의 디자인 방법을 소개해 드립니다.

Precise Genome Editing

Unlocking the potential of genome editing in stem cells

GeneArt® Precision TALs

32 Life Technologies | Genome editing 33Life Technologies | Genome editing

Plasmid DNA를 지질 기반의 transfection 시약 혹은 electroporation 과 같은 물리적 방법으로 세포의 핵 내에 효과적으로 전달할 수 있습니다. 이러한 방법은 원하는 유전자의 발현을 하고자 한다면 필수적인 과정입니다. plasmid DNA를 포유세포에 전달하는 그 과정을 plasmid transfection이라고 합니다. Lipofectamine® reagent들은 가장 많이 인용되고 신뢰받고 있는 transfection 시약이며 지금까지 50,000 건이 넘게 인용되었습니다.새롭게 Lipofectamine® reagent의 포트폴리오에 추가된

Lipofectamine® 3000 reagent는 기존의 유전자 전달에 대한 한계를 극복하고 유전체 공학과 새로운 기술을 가지고 연구하신 분들의 연구를 촉진하고자 개발되었습니다.

Which plasmid DNA transfection reagent product is right for you?

Plasmid DNA transfection

High-efficiency, versatile reagent

for a wide range of common cell types

(most cited)

Most efficient and versatile reagent for

delivery into the widest range of cell types,

including difficult-to-transfect cells

High-efficiency electroporation for all cell types, including difficult-to-transfect

primary and stem cells

Lipofectamine® 2000 reagent

Lipofectamine® 3000 reagent

Neon® Transfection System

Sample type DNA, RNA, and cotransfection

DNA, RNA, and cotransfection

DNA, RNA, protein, and cotransfection

Transfection efficiency High Superior Maximal

Cell viability High Superior High

“ 우리 연구팀은 우리가 연구하는 Transfection이 어려운 세포 주에서 기존보다 10 배 높은 효율을 보여주는 Lipofectamine® 3000의 성능에 대해 놀랍기도 하고 또한 기쁘기도 합니다. 세포 사멸까지 줄어 들었으니 정말 놀라운 결과 아닙니까?

— Rui Eduardo Castro, PhD, University of Lisbon

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34 Life Technologies | Genome editing 35Life Technologies | Genome editing

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Cleavage efficiency of GeneArt® Precision TALs and CRISPR vectors. The TALs and CRISPRs targeted the AAVS1 locus in (A) U2OS and (B) HepG2 cell lines. Cleavage was assayed using a GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit.

Transfection efficiency and protein expression using a CRISPR vector. The vector contained an OFP reporter gene and was transfected with Lipofectamine® 2000 or Lipofectamine® 3000 into (A) U2OS and (B) HepG2 cell lines. Bar graphs show reporter gene expression; images show fluorescence of corresponding cells expressing OFP.

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A pcDNA™3.3 control

pcDNA™3.3 control

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A pcDNA™3.3 control

pcDNA™3.3 control

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Lipofectamine® RNAiMAX reagent으로 여러분의 유전자 knockdown 연구에서 높은 유전자 전달 효율을 경험해 보세요 Lipofectamine® RNAiMAX reagent는 특허 받은RNAi에 사용되는 전용 lipid nanoparticle 시약으로 다양한 세포에서 siRNA와 miRNA를 전달하기 위해 디자인되었습니다. 그 어떠한 RNAi 전용 transfection reagent도 일반적인 세포 형태, 줄기 세포, 초대 배양 세포 및 기존의 유전자 전달이 어려웠던 세포주에서도 이렇게 쉽고 높은 효과의 유전자 전달 효과를 보여주지 못합니다..

Invivofectamine® 2.0 Reagent는 in vivo RNAi 전달의 새로운 해결책을 제시합니다

Invivofectamine® 2.0 Reagent는 라이프 테크놀로지스에서 개발의 최신의 in vivo siRNA 전달 시약입니다. Invivofectamine® 2.0 Reagent는 개체의 전신에서 in vivo에서 높은 siRNA 전달 효율을 보여줍니다. 이를 통해 효율적인 mRNA, 단백질 및 기능의 억제하는 효과를 보여줍니다. 이 시약은 낮은 독성 효과를 보여주며 사용하기가 상당히 간단합니다.

PublicationsLin28A and Lin28B Inhibit let-7 MicroRNA Biogenesis by Distinct Mechanisms- Supplemental protocol for tumor delivery, using Invivofectamine® 2.0 Reagent and Ambion® siRNA

Find out more at lifetechnologies.com/transfection

RNAi transfection

개발자를 만나보세요: Invivofectamine® 2.0 transfection

라이프 테크놀로지스의 Dr. Xavier de Mollerat du Jeu와의 인터뷰를 시청해 보세요.라이프 테크놀로지스에서 어떻게 과학적인 발견을 하고 이를 제품 개발에 이용하는지에 대해 알아보실 수 있습니다.

siRNA transfection protocol. View the video to see the steps needed to perform siRNA transfection with Lipofectamine® RNAiMAX reagent.

PLAY

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38 Life Technologies | Genome editing 39Life Technologies | Genome editing

GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit는 유전자의 특정 위치에 발생한 double-strand break를 검출하는 간편하고 믿을수 있고 빠른 방법을 제공합니다. 게놈 편집을 이용할때 대상 돌연변이를 얻었다면 손도 많이 가고 비용이 많이 소비 되는 세포주 확립 과정과 시퀀싱 과정 이전에 핵산 가수분해 효소가 대상 염기서열에 효과적으로 작용하였는지에 대한 평가가 필요합니다.GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit는 기존 방식보다 빠르고 간단하며 믿을 수 있는 분석법으로 특정 지역의 게놈 편집의 효율을 평가하는데 사용됩니다. 편집이 이루어진 샘플이 PCR의 주형으로 사용되며 여기에는 대상 염기서열 지역에 특이적인 프라이머를 사용하여 증폭하게 됩니다. PCR 산물들은 다시 denature와 reannealing 과정을 거쳐 double strand break 이후에 발생되는 indel을 포함한 heteroduplex의 mismatch 부위를 생성하게 됩니다. 이러한 mismatch들은 검색 효속에 의해 인식되어 잘리게 됩니다. 이를 겔 전기영동을 이용하여 그 효율과 정량등을동시에 손쉽게 확인할 수 있습니다.

• 쉽다—PCR 증폭이 곧장 이루어 지므로 별도의 genomic DNA 추출이불 필요

• 빠르다—5 시간이면 모든 실험이 완료

• 정량이가능—겔 벤드의 밀도를 통해 대상 indel에 대한 정량이 가능

유전자의 특정 위치에 발생한 double-strand break를 검출하는 간편하고 믿을수 있고 빠른 방법을 제공합니다

Indel in genomic DNA

Transfected cells with GeneArt® Precision TAL or GeneArt® CRISPR nuclease vector

Indel

Mismatch

+ - + - + - + -

10.8 21.1 38.9

Target 1 Target 2Negativecontrol

Positivecontrol

Enzyme:

Genemodification (%)

Cell lysis (no purification needed)

PCR amplification (no purification)

Denaturation and reannealing

Mismatch detection and cleavage

Agarose gel electrophoresis

Product ordering information

Product Quantity Cat. No.

GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit 20 reactions A24372

GeneArt® Genomic Cleavage Detection Kit

40 Life Technologies | Genome editing 41Life Technologies | Genome editing

세포 재프로그램 솔루션여러분의 연구에 적합한 재프로그램 기술을 선택해 보세요. 사용하기 쉽고 높은 효율의

CytoTune®-iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit부터 episomal reprogramming 도구와 그리고

CellModel™ Service를 선택하실 수 있습니다. 라이프 테크놀로지스가 제공하는 줄기 세포 재프로그램 선택사항에 대해 확인해 보세요.

Jump-In™ Targeted Integration KitJump-In™ Targeted Integration (TI™) 기술은 PhiC31 integrase가 촉매하는 재조합을 통해 attP라 부르는 동물세포 유전체의 특정 지역에 원하는 DNA를 안정적으로 삽입하는 기술입니다. Jump-In™ Fast Gateway® System는MultiSite Gateway® Pro Plus 클로닝 기술과 결합되어 있으며 Jump-In™ TI™ 기술은 여러분의 원하는 유전자를 포유 동물의 세포에서 효율적으로 발현할 수 있게 만들어 줍니다.

GeneArt® Precision TALs 질병에 연관된 유전자를 편집하여 야생형이나 반대의 형질로 제작하여 강력하고 유전적으로 맞는 질병과 야생형 모델을 확립할 수 있습니다. GeneArt® Precision TALs는 대상 유전자의 발현을 조절하거나 혹은 특정 유전자를 reporter와 결합하거나 혹은 분화나 질병의 발생 기작등을 연구하는데 사용할 수 있습니다.

BacMam 기술Baculovirus의 전달 시스템을 이용하여 초대 배양 세포나 혹은 줄기세포에서 안정적인 유전자 전달이 가능합니다. baculovirus 자체가 세포내에서 복제가 이루어 지지 않으므로 세포에서 뛰어난 안정성을 보여줍니다. 우리는 다양한 BacMam 기술 기반으로 형광을 이용한 세포 내 마커, 바이오센서등을 제공하며 또한 고객이 원하는 유전자를 BacMam 기술을 이용하여 전달할 수 있도록 해주는 서비스를 제공하고 있습니다

줄기 세포 공학

조작된 줄기 세포— 후속 연구 및 적용을 위해 세포를 조작할 수 있다

줄기 세포 공학은 체세포를 induced pluripotent stem cell (iPSC)로 혹은 다른 세포 형태로 재프로그램할 때 사용할 수 있습니다. 이러한 기술들은 유전자 삽입이 이루어지지 않는 바이러스 혹은 episomal plasmid로 유전자를 전달하여 이룰 수 있습니다. 세포가 한번 재프로그램 되면 iPSC의 게놈 편집과 조작은 다른 세포 형태로 분화되어 세포 모델을 제공하여 다양한 의문점을 해결해 주는데 사용할 수 있습니다.

42 Life Technologies | Genome editing 43Life Technologies | Genome editing

줄기 세포 공학에 대한 자료

최근의 성과를 읽어보세요:Parkinson’s disease cell models—part 1: generation and characterization of iPSCs from Parkinson’s disease donor fibroblasts

Parkinson’s disease cell models—part 2: generation and characterization of neural stem cells from Parkinson’s disease donor-derived iPSC lines

줄기 세포 공학에 대한 웨비나를 시청해 보세요

Genome editing of Parkinson’s disease iPSCs using GeneArt® Precision TALs technology

Unlocking the potential of genome editing in stem cells

줄기 세포 재프로그램에 대한 웨비나를 확인해 보세요

Considerations for reprogramming pluripotent stem cells

CytoTune® -iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit

Life Technologies and The Parkinson’s Institute collaborate to understand the molecular basis for Parkinson’s disease.

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44 Life Technologies | Genome editing 45Life Technologies | Genome editing

DNA binding domainFunctionaldomain

Fok1

Fok1

이 웨비나를 시청해 보세요. Dr. Neal Stewart는Tennessee Plant Research Center의 교수이자 책임자입니다. 이 웨비나에서는 유전자 변형 식물에서 대상 유전자를 활성화 시키는합성된 TAL effector의 잠재적 가능성에 대한 새로운 시각을 말해 줍니다.

Dr. Jon Chesnut의 발표를 들어 보세요. 라이프 테크놀로지스의 연구원이자 리더인 Dr. Jon Chesnut가 식물과학의 연구자들에게 최신의 게놈 편집 기술에 대해 이야기 해줍니다.

정확한 식물의 게놈 편집과 진보된 작물 공학

유전자 변형이 된 식물은 새로운 작물 특성과 유전자의 연구를 위한 중요한 열쇠이며 새로운 발견과 응용 분야를 이끌어 낼수 있습니다. 이러한 유전자 변형 식물의 개발은 최적의 발현을 실현하기 위해서는 복잡한 DNA 요소의 디자인을 요구합니다.

최근 연구 논문 보러가기 >

Precise Plant Genome Editing

Plant Genome Engineering

46 Life Technologies | Genome editing 47Life Technologies | Genome editing

세포주 개발은 많은 시간이 소요되고 복잡한 업무입니다. 많은 경험의 믿을 수 있는

GeneArt® Precision TALs의 개발자들이 여러분이 원하는 세포주를 시장에서 최신의 믿을 수 있는 기술을 기반으로 제작해 드립니다. 모든 과정에서 높은 품질의 Gibco®의 세포 배양 배지 및 시약등이 사용되며 세포 활성을 확인합니다. 또한 차세대 염기서열 분석기인 Ion Torrent™ sequencer를 이용합니다. 우리의 과학자들이 여러분이 원하는 세포주를 디자인하고 이에 대한 검증까지 확인하여 여러분이 만족할 만한 품질의 세포주를 제작하여 줍니다.

이 서비스에는 다음과 같은 항목이 포함됩니다

우리의 전문가가 세포주의 디자인과 개발, 그리고 검증의 모든 과정에 참여합니다. 이 모든 과정은GeneArt® Precision TALs를 이용하여 검증하고 또한 여러분이 제공한 세포주 역시 서비스가 가능합니다

• Transfection 최적화 서비스와 이에 대한 프로토콜 전달

• 맞춤형 GeneArt® Precision TALs 생산

• 맞춤형 GeneArt® Precision TALs 의 효율 검증

• 세포주 개발

• 세포주 품질 검증

고객 맞춤형 세포주 개발 서비스 GeneArt® Precision TALs 세포주 개발 서비스

세포주 개발 과정과 소요 시간

세포주를 개발하여 제공하는 기간은 개별의 세포주의 성장 특성과 조건에 따라 다릅니다. 일반적으로 23에서 30 주 내에 완료됩니다.

Process for creating GeneArt® Precision TALs stable cell lines.

주문 및 정보 요청

서비스를 원하고자 하거나 견적 및 주문에 대해서는 라이프 테크놀로지스의 Custom Service에 연락해 주시기 바랍니다.

Phone: 800 955 6288 x 4

Fax: 716 774 3157

Email: custom.services@lifetech.com

Find out more or place an order at lifetechnologies.com/talcellline

Step 1 Consultation and project design

Step 2 Protocol transfer and transfection optimization service

Step 3 Custom TAL production

Step 4 Validation of TAL efficacy

Step 5 Stable cell line generation

Step 6 Optional quality checks of stable cell line

Step 7 Delivery to customer

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지난 10년간의 라이프 테크놀로지스가 개발한 줄기 세포이 혁신적인 기술을 기반으로 제공되는 CellModel™ Service는 줄기 세포를 연구하는 과학자들이 원하고자 하는 결과를 더욱 빨리 얻을 수 있도록 도와 줍니다.

우리는 줄기 세포의 연구자의 다양한 선택을 제공하고 있습니다. 직접 제작을 하는 다양한 혁신적인 도구를 제공하거나 혹은 원하는 결과를 받아볼 수 있는 우리의 줄기 세포 전문가들을 이용하는 맞춤형 서비스도 제공하고 있습니다. 여러분의 실험실의 예산과 자원에 따라 가장 알맞는 방법을 조합하여 선택할 수 있습니다.

자사의 줄기 세포 서비스 이용 시의 장점은 아래와 같습니다:

• 프로젝트가 완료된 이후에 자세한 프로토콜에 대한 세세한 내용 및 결과 내용이 연구자에게 전달되어 이후에도 재현성 있는 실험을 직접 진행할 수 있습니다.

• 줄기 세포 서비스에 사용되는 모든 시약과 배지는 구매가 가능하며 이는 프로젝트 완료 후에도 여러분의 프로젝트의 속도를 더할 수 있습니다

• 여러분이 원하는 프로젝트 만을 선택할 수 있는 다양한 선택 사항이 있습니다

• 프로젝트에 관련된 계속적인 논의와 뛰어난 지원을 맞춤형 서비스를 제공하는 경험 많은 팀으로 부터 받아볼 수 있습니다

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CellModel™ Services stem cell engineering 줄기 세포로의 유로데서 부터 세포 탐색까지, 여러분이 원하는 과정만을 선택하실 수 있습니다

Scientists from our Custom Biology team, who have helped researchers with their cellular engineering and custom assay development projects for years, deliver our CellModel™ Services. Additionally, our Discovery Services project management team—responsible for the management of hundreds of cell line generation and assay development projects—is uniquely suited to manage your project milestones and proactively communicate updates from day one through project completion.

숙련된 서비스팀 연구원들

우리의 Custom Biology팀의 과학자들은 그들의 세포 공학과 맞춤형 분석법 개발 프로젝트를 통해 수 년간 연구자들을 도와 왔으며CellModel™ Service 역시 제공하고 있습니다.

여기에 수 백개의 세포주를 이용하여 다양한 분석법을 개발하는 업무를 맡고 있는 Discovery Services 관리팀이 여러분의 실험 전 과정과 프로젝트가 시작되고 끝ㅌ나는 그 모든 과정에서 여러분에게 관련 내용을 전달해 드릴 것입니다.

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CellModel™ Services stem cell engineering

CellModel™ Services—stem cell reprogramming

세포의 재프로그램에 사용되는 CytoTune®-iPS Sendai Reprogramming Kit를 이용하여 우리의 CellModel™ Service팀은 피부 세포에 혈액 세ㅍ포등을 4-6 개월 내에 만능 줄기 세포로 유도해 낼 수 있습니다.

우리의 CellModel™ Service팀이 이용하는 CytoTune®-iPS Sendai Reprogramming Kit의 장점은높은 재프로그램 효율로 인해 iPSCs를 한 번의 실험만으로 제작할 수 있다는 것입니다. 이러한 높은 효율로 인해 Lenti virus를 이용한 방식보다 더욱 빠른 시간안에 재프로그램된 세포를 얻을 수 있습니다.

비 바이러스성 재프로그램에 대한 선택 사항을 확인하고자 한다면 Cellular Dynamics International과 파트너 계약을 통해 제공하고 있는 episomal vector를 이용한 재프로그램 서비스에 대해 자세한 정보를 요청해 보세요—provided in partnership with Cellular Dynamics International.

세포주 개발 과정과 소요 시간

세포의 재프로그램 프로젝트는 일반적으로 16-24주 정도의 시간이 소요되나 정확한 소요 시간은 제공되는 세포의 형태와 그리고 특성 확인 서비스에 대한 추가적인 선택 및 다른 요소에 의해 따라 달라질 수 있습니다.

여러분의 세포 재프로그램 실험을 지금 시작해 보세요. lifetechnologies.com/cellmodels 에서 견적등을 요청할 수 있습니다.

Receive somatic cells

Reprogram with CytoTune®-IPS Sendai Reprogramming Kit

Generate seed bank/verify viral clearance

Expand top clone, cryopreserve, characterize

Deliver pluripotent stem cells

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Shaping discovery. Improving life.

GROUNDED IN SCIENCE

전문가로 구성된 Life Technologies는 연구원분들의 입장에서 직면하게 되는 고유한 문제점들을 이해하고 접근하려 합니다.

INNOVATING FOR THE FUTURE

Life Technologies에서는 필요할 때 원하는 것을 손쉽게 얻기 위하여 귀하와 함께 필요에 맞는 간편한 비즈니스 솔루션을 개발합니다.

MOST TRUSTED PRODUCT PORTFOLIO

계속해서 변화되는 니즈를 지원하기 위해 연구, 의학 진단, 응용 과학 전반에서 가장 많이 사용되는 제품 및 서비스 포트폴리오를 제공합니다

FLEXIBLE BUSINESS SOLUTIONS

귀하는 미래를 위한 문제를 해결하고 있습니다. 그렇기 때문에 Life Technologies는 항상 앞을 내다 보고 과학의 발전을 도모하는 새로운 솔루션을 위해 노력하고 있습니다.

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For more information about these genome engineering products for synthetic biology, go to lifetechnologies.com/genomeedit