Es un procedimiento analítico que se basa en la dispersión de la radiación queatraviesan las partículas de materia. Cuando la luz atraviesa un mediotransparente en el que existe una suspensión de partículas sólidas, se dispersaen todas direcciones y como consecuencia se observa turbia.

Se define como la detección de la energía lumínica dispersa o reflejada hacia undetector que no se encuentra en el camino directo del haz luminoso. Lasmediciones se realizan a menudo en un determinado ángulo en relación condicho haz. Las mediciones nefelométricas son más adecuadas para medirmuestras cuya concentración de partículas es baja, lo que da a lugar a una débildispersión de la luz.

La dispersión no supone la pérdida neta de potencia radiante, solo es afectada ladirección de la propagación, porque la intensidad de la radiación es la misma encualquier ángulo. La intensidad depende de: el número de partículas suspendidas,su tamaño, su forma, los índices refractivos de la partícula y del medio dispersante,y la longitud de onda de la radiación dispersada.

El procedimiento de la nefelometría generalmente es empírico y sólo se consideran 3 factores:

1. La concentración: Mayor sea el número de partículas, mayor es la dispersión.

2. Tamaño de la partícula: Factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla,concentración de los reactivos, duración del estado de reposo y la fuerza iónica.

3. Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero siestán coloreadas, se debe escoger una porción del espectro electromagnético en laque la absorción del medio se reduzca al mínimo.

El instrumento usado en la nefelometría, el nefelómetro. Es un tipo deinstrumento fotométrico, que puede o no ser automatizado para ladeterminación de proteínas específicas en diferentes fluidos biológicos.

Generalmente la nefelometría se utiliza en el análisis de la calidad química delagua para determinar la claridad y para el control de los procesos detratamiento.Este método pueden ser también apropiados para ensayos cuantitativos queusan complejos antígeno-anticuerpo o para medir la cantidad de proteínas enfluidos. Las medidas nefelométricas ocupan una posición destacada en loslaboratorios clínicos. Se han aplicado para la determinación deinmunoglobulinas, proteínas del complemento, proteínas de fase aguda,proteínas de coagulación entre otras.

Toda medición está sometida a un porcentaje de error, que principalmenteestá dado por:

• Cubetas sucias: La suciedad en las cubetas disminuye la luz en el trayecto dela luz radiante hacia el detector, de este modo se detectarán valoreserróneamente bajos de la intensidad de la dispersión.

• Interferentes: Su presencia dispersa la energía radiante, tendiendo a elevarla intensidad de la dispersión. (Contaminación microbiana, turbidez,muestras pueden no ser apropiadas para el nefelómetro)

• Compuestos fluorescentes: Aquellos compuestos que son fluorescentes sonexcitados por la radiación incidente por lo que se obtienen valoresfalsamente elevados de intensidad de dispersión

• Conservación de los reactivos: En este aspecto se debe tener principalmentecuidado con la temperatura y posibles condiciones adversas que puedenmodificarlos (Reactivos turbios o con precipitados).

• Fluctuaciones en la potencia eléctrica: Para evitar que este factor sea unafuente de error se recomienda utilizar estabilizadores de voltaje.

http://www.med.ufro.cl/Recursos/Bioquimica-offline/Apuntes/Nefelometria.pdf

http://elblogdeadepi.blogspot.mx/p/resumen-analisis-bioquimico-fundamentos.html

http://es.wikipedia.org/wiki/Nefelometr%C3%ADa