nataliadebisubani, effectofskinextractmangosteen(garcinia

Natalia Debi Subani, Effect of Skin Extract Mangosteen (GarciniaMangostana L.) Against Spenrm Quality and Malondialdehyde Levels of Mice

(Mus Musculus) Exposured With 2-Methoxyethanol

670

ABSTRACT

Effect of Skin Extract Mangosteen (Garcinia mangostana L.)Against Sperm Quality And Malondialdehyde Levels of Mice (Musmusculus) Exposured With 2-Methoxyethanol

Natalia Debi Subani

Levels of Reactive Oxygen Species a high negative impact on spermquality and lead to increased levels of malondialdehyde. To overcome thisuse of mangosteen peel extract as an antioxidant. This study using miceexposed to the compound 2-Methohyethanol for 5 days and thentreated with mangosteen peel extract at a dose of 25, 50 and 100 mg / kgfor 35 in the sub cutaneous, while the control group only exposed to 2-Methoxyethanol. Analysis of quality (motility, morphology, viability,membrane integrity), and levels of malondialdehyde spermatozoa usingsperm derived from the cauda epididymis. The results showed a dose of25 mg / kg body weight more effectively improve the speed of motility,normal morphology and viability of spermatozoa that had been exposed to2-Methoxyethanol, a dose of 50 mg / kg increased sperm membraneintegrity and reduce levels of malondialdehyde, whereas a dose of 100 mg/ kg body weight and reduce sperm quality increased levels ofmalondialdehyde. The conclusion is mangosteen rind extract improvesperm quality and reduce levels of malondialdehyde mice that had beenexposed to 2-Methoxyethanol.

Keywords: mangosteen rind extract, motility, morphology, viability,membrane integrity, levels of malondialdehyde, 2-Methoxyethanol

PENDAHULUAN

Infertilitas merupakanmasalah di seluruh dunia (Naher,et al., 2011) dan dialami oleh 10-15% pasangan suami istri (Fritzdan Speroff, 2011). World HealthOrganization mendefinisikaninfertilitas sebagaiketidakmampuan pasangan suamiistri untuk menghasilkan konsepsiatau kehamilan setelah satu

tahun atau lebih melakukanhubungan seks secara teraturtanpa penggunaan kontrasepsi(Kefer, et al., 2009) dan faktorpria sebagai penyebabnyasebesar 20% dari seluruh kasusinfertilitas (Fritz dan Speroff,2011).

Ada empat kategoripenyebab utama infertilitas padapria, yaitu 1) gangguan fungsi

*) Dosen Jurusan Kesehatan Lingkungan - Poltekkes Kemenkes Kupang

671 JURNAL INFO KESEHATAN, VOL. 12, NOMOR 1, JUNI 2014

hipotalamus-pituitari (1-2%); 2)gangguan gonad primer (30-40%);3) gangguan transportasispermatozoa (10-20%); serta 4)idiopatik (40-50%) (Fritz danSperoff, 2011). Beberapa tahunterakhir, banyak peneliti yangjuga mempelajari penyebab-penyebab infertilitas pria yangdifokuskan pada perananreactive oxygen species (ROS)atau radikal bebas (Darmawan,2007). Dalam jumlah sedikit ROSdibutuhkan untuk mendukungterjadinya proses kapasitasi,hiperaktifasi, dan reaksi fusiantara oosit dan spermatozoa.Namun jumlah ROS yang terlalutinggi dapat berdampak negatifterhadap kualitas spermatozoa(Kefer, et al., 2009). MenurutTremellen (2012), kerusakanspermatozoa oleh ROS ditemukansebanyak 30% - 80% dari kasusinfertilitas pria.

Sumber ROS yang merusakspermatozoa dapat berasal darispermatozoa itu sendiri maupundari luar, seperti aktivitasberlebihan, peningkatantemperatur skrotum, adanyainfeksi, rokok, alkohol, polusi dankomponen industri. Produkindustri berdampak sangat luasterhadap manusia dan kesehatanlingkungan, dimana komponenyang berdampak pada fertilitasada beberapa kelompok. Sebagaicontoh adalah komponen phtalate(Kefer, et al., 2009), khususnyakelompok senyawa ester ftalat(Hayati, et al., 2006).

Ester ftalat seringdigunakan sebagai bahanpelentur dalam industri plastikserta pelarut cat, vernis, pewarna,tinta, dan kosmetik, serta sebagaibahan anti mogok pada bahanbakar kendaraan bermotor. Salahsatu senyawa ester ftalat yangpaling berbahaya adalah 2-Methoxyethyl Phthalate (DMEP).Senyawa DMEP dalam tubuhmanusia dihidrolisis menjadi 2-Methoxyethanol (2-ME) yangselanjutnya akan dioksidasi olehalkohol dehidrogenase menjadi 2-Methoxyacetaldehid (MALD),kemudian oleh aldehiddehidrogenase diubah menjadiMethoxyacetic Acid (MAA), yangmerupakan bahan toksik,khususnya bagi organ reproduksi(Hayati, et al., 2006).

Senyawa 2-ME merupakanpelarut tidak berwarna yangdapat masuk ke dalam tubuhmelalui sistem pernapasan, kulit,dan sistem pencernaan(Wahyuningsih, 2008). Senyawa2-ME akan tersebar luas danmasuk ke dalam sirkulasi darahkemudian menuju organ yangsensitif terhadap zat tersebutyaitu testis, limpa dan timus(Marulyananda, 2012). Paparansenyawa 2-ME 200 mg/kgBBmenyebabkan rusaknya tubulusseminiferus, penurunan jumlahspermatogonium dan spermatidserta merusak morfologispermatozoa (Hayati, et al., 2004).Senyawa ini dapat menyebabkanstres oksidasi pada spermatozoayang merupakan penyebab utama



672

disfungsi spermatozoa denganmenghambat proses oksidasifosforilasi. Oksidasi fosforilasiyang terganggu menyebabkanpeningkatan ROS spermatozoa.Kadar ROS yang tinggi dalam seldapat mengoksidasi lipid, protein,dan DNA. Lipid membran plasmaspermatozoa memiliki fosfolipiddengan kadar yang tinggisehingga menyebabkanspermatozoa sangat rentanterhadap ROS. Oksidasi lipid padamembran spermatozoamenghasilkan senyawaMalondialdehyde (MDA), yangmenyebabkan kerusakanmembran spermatozoa (Hayati,2007).

Terdapat korelasi negatifantara kadar MDA spermatozoadan integritas membranspermatozoa sehingga dapatdijelaskan bahwa tingginya kadarMDA akan menurunkan integritasmembran sel. Kerusakanspermatozoa ini menyebabkanterjadinya penurunan kualitasspermatozoa (Hayati, et al., 2006).

Untuk mencegah efek darireaksi oksidasi oleh 2-MEdiperlukan antioksidan yang dapatmenangkal radikal bebas dandiharapkan dapat meningkatkankualitas spermatozoa (Showell, etal., 2012). Antioksidan merupakanscavenger dan menekan efek dariROS dan peroksidasi lipid. Sumberantioksidan antara lain berasaldari tumbuh-tumbuhan(Marulyananda, 2012). Salahsatunya adalah menggunakan

kulit buah manggis. Kulit buahmanggis yang biasanya dibuangternyata dapat dikembangkansebagai obat (Nugroho, 2012).

Ekstrak kulit buah manggisberpotensi sebagai antioksidan.Antioksidan dari beberapa jenisekstrak kulit buah manggis(ekstrak air, etanol, dan etil asetat)berpotensi sebagai penangkalradikal bebas. Hasil dari ekstrakair dan etanol mempunyai potensiantioksidan yang lebih besar dariekstrak etil asetat. Sampai saat inibelum ada penelitian tentangpemanfaatan kulit buah manggisterhadap kualitas spermatozoa(motilitas,morfologi, viabilitas,dan integritas membran) dankadar MDA yang telah terpapar 2-ME. Dengan demikian maka perludilakukan penelitian untukmengetahui manfaat ekstrakkulit buah manggis terhadapkualitas spermatozoa dan kadarMDA mencit yang terpapar 2-ME.

Penelitian ini bertujuanuntuk membandingkan pengaruhekstrak kulit buah manggisdengan dosis bertingkat terhadapkualitas spermatozoa dan kadarMDA mencit yang terpapar 2-ME.

METODE

Jenis penelitian ini adalaheksperimental murni (trueexperimental) laboratorik denganpendekatan post test only controlgroup design.

Hewan coba menggunakanmencit (Mus musculus) strain


Balb/c dengan berat badan rata-rata 25 gram per ekor sebanyak30 ekor yang dibagi menjadiempat kelompok terdiri atas satukelompok kontrol dan tigakelompok perlakuan. Semuakelompok diberi paparan 2-ME200 mg/kgBB selama 5 hari,selanjutnya hari ke 6-40 kelompokperlakuan (P1, P2, P3) diberikanekstrak kulit buah manggisdengan dosis 25, 50 dan 100mg/kgBB yang dilarutkan denganCMC 0,5% sedangkan kelompokkontrol (K0) hanya diberikan CMC0,5%. Semuanya diberikanmelalui injeksi sub kutan.

Penelitian dilakukan diRumah Hewan dan LaboratoriumGenetika Molekuler Fakultas Sainsdan Teknologi UniversitasAirlangga Surabaya selama bulanMei – Juni 2013.

1. Pembuatan Ekstrak Kulit BuahManggis

Kulit buah manggis ditimbangsebanyak 1 kg dan dikeringanginkan sampai kering. Kulit buahmanggis yang kering dihaluskan,lalu direndam dengan etanol 96 %sebanyak 1 L selama satu malam.Fraksi etanol dipisahkan dari serbukkulit buah manggis yang telahdirendam dengan cara disaring.Dilakukan evaporasi etanol denganmenggunakan rotary evaporatorselama 2 hari,selanjutnya dilakukanpengeringan dengan freeze dryhasilnya berupa ekstrak etanolikkulit buah manggis.2. Pengambilan Spermatozoa

Mencit

Mencit (Mus musculus)jantan dewasa galur BALB/cberumur 35 hari dengan beratbadan rata-rata 25gram/ekor .Mencit-mencittersebut diadaptasikan dengansuasana tempat penelitian selamatujuh hari . Perlakuan dilakukanselama 40 hari. Setelah diberikanperlakuan, pada hari ke 41 mencitdikorbankan dengan kloroformdan dibedah di bagian bawahabdomen untuk diambil epididimisbagian cauda. Kemudian caudaepididimis sepanjang 0,5 cmdicacah dalam 1 ml larutan NaCl0,9% dengan menggunakangunting dan scalpel sampaiterbentuk suspensi sperma.3. Pengukuran Kecepatan Motilitas

Spermatozoa MencitPengukuran kecepatan

motilitas spermatozoa mencitberbeda dengan pengukurankecepatan motilitas spermatozoamanusia maupun hewan ternak.Motilitas spermatozoa mencitditentukan dari banyaknya jumlahspermatozoa yang bergerakhiperaktif maju ke depan dancepat. Motilitas permatozoamenggunakan mikroskop cahayadengan pembesaran 40x per 100spermatozoa denganpengulangan sebanyak 6x danhasilnya dicatat dengan satuanµm/detik.4. Pengamatan Morfologi

Spermatozoa MencitPengamatan persentase

morfologi spermatozoa dilakukandengan membuat hapusansuspensi spermatozoa pada kaca



674

obyek. Satu tetes spermatozoaditeteskan di satu ujung gelasobyek, kemudian diberi 1 tetesEosin 1% dan 1 tetes Nigrosin10%, kemudian dihomogenkandan dibuat hapusan dan dikeringanginkan selama 2-4 menit.Sebanyak 100 sel spermatozoadiamati morfologinya (%) dibawahmikroskop cahaya denganpembesaran 40x. Morfologi yangbaik adalah bila kepala dan leherutuh, serta ekornya lurus.5. Pengamatan Viabilitas

Spermatozoa MencitPersentase spermatozoa

yang hidup ditentukanberdasarkan penyerapan zatwarna Eosin 1 % dan Negrosin10% yang dicampurkan padaspermatozoa. Apabilaspermatozoa mati, akanmenyerap zat warna yang adadisekitarnya sehingga warnanyamenjadi merah sedangkan yanghidup tidak menyerap zat warnadan warnanya bening.Pengamatan menggunakanmikroskop cahaya denganpembesaran 40x.6. Pengamatan Integritas

Membran SpermatozoaPengamatan integritas

membran spermatozoa dilakukandengan uji HOS tes. Suspensisperma 0,5 ml ditambah 4,5 mllarutan pengembang (0,735 gramsodium citrat dihydrate(Na3C6H5O7,2H2O) dan 1,351gram fruktosa dalam 100 ml airdestilasi) dicampur dengan hati–hati menggunakan pipet,kemudian diinkubasi di dalam

inkubator CO2 pada suhu 37 °Cselama 60 menit. Setelahdiinkubasi larutan tersebutdiambil satu tetes dan diletakkanpada gelas objek selanjutnyaditambahkan satu tetes larutanEosin 1% dan Negrosin 10%.Kemudian dibuat preparat ulasdan diamati di bawah mikroskopcahaya dengan pembesaran 40×.Integritas spermatozoa dihitungdari jumlah spermatozoa yangekornya menggembung danmelingkar setiap 100spermatozoa (%).7. Pengukuran kadar MDA

Spermatozoa MencitPengukuran kadar MDA

dilakukan dengan pemeriksaanspermatozoa yang didapatkandari kauda epididimis.Spermatozoa dipisahkan dariprotein yang ada di sekitarnyadengan penambahan 0,5 ml asamtrikloroasetat 20% kemudiandisentrifugasi selama 10 menitpada 5000 rpm untukmempercepat pengendapanprotein. Supernatan spermatozoasebanyak 1000 µl ditambah 200µl natrium thiobarbiturat 1% dan8,8 ml asam klorida 1 N pada labuukur. Larutan tersebut kemudiandiinkubasi di atas penangas airselama 135 menit dengan suhu50 °C. Setelah itu larutanberwarna yang mengandung MDAtersebut diamati denganspektrofotometer pada panjanggelombang 531,4 nm.


8. Analisis DataAnalisis data menggunakan

Multivariat Analisis Of Varian(MANOVA).

HASIL PENELITIAN

Data hasil penelitian diujistatistik menggunakan SPSS, hasiluji non parametrik One SampleKolmogrov-Smirnov menunjukkandata terdistribusi normal dengannilai Z > 0,05. Selanjutnyadilakukan uji Multivariate Analyzeof Variance dengan nilai p < 0,05pada variabel motilitas, morfologi,viabilitas dan integritas membransedangkan pada kadar MDAbernilai > 0.05. Untuk variabeldengan nilai p < 0,05 dilakukanuji Post Hoc Fisher’s LSD untukmenganalisis varians signifikanantar kelompok perlakuan.

1. Pengaruh Ekstrak Kulit BuahManggis Terhadap PeningkatanMotilitas Spermatozoa MencitYang Terpapar 2-ME

Hasil pengukuran terhadapkecepatan motilitas spermatozoapada berbagai perlakuan dapatdilihat pada gambar di bawah.Pada gambar tersebut tampakbahwa rata-rata kecepatanmotilitas spermatozoa padakelompok kontrol sebesar3,60±0,255 µm/det, sedangkanuntuk kelompok perlakuan (P1, P2,dan P3) berturut-turut kecepatanmotilitasnya adalah 5,94±2,090;

5,17±1,404; dan 3,50±0,077µm/det.

Dari gambar tersebuttampak bahwa dosis ekstrak kulitbuah manggis yang paling baikuntuk meningkatkan motilitasspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME adalah 25 mg/kgBB,tetapi semakin tinggi dosis (50dan 100 mg/kgBB) semakinmenurunkan kecepatan motilitasspermatozoa.2. Pengaruh Ekstrak Kulit Buah

Manggis Terhadap PeningkatanProsentase Morfologi NormalSpermatozoa Mencit YangTerpapar 2-ME

Gambar ini mewakilimacam-macam morfologispermatozoa. Spermatozoa tanpakepala, leher yang patah dan ekormelingkar sangat sering dijumpaiselama pengamatan.



676

Gambar : Morfologi spermatozoamencit (a. Normal; b. Cacatkepala; c. Cacat leher;d. Cacat ekor)

Gambar berikut yangmemuat hasil penelitian inimenunjukkan rata-rataprosentase morfologispermatozoa. Prosentasemorfologi spermatozoa normalpada kelompok kontrol40,00±6,693; kelompokperlakuan dengan dosis ekstrakbertingkat (25, 50 , 100 mg/kgBB)61,00±4,899; 54,33±5,820;31,00±7,321% sedangkanprosentase morfologispermatozoa yang cacat dapatdilihat pada gambar tersebut.

Gambar: Pengaruh ekstrak kulitbuah manggis terhadapprosentase morfologispermatozoa mencityang terpapar 2-ME

Berdasarkan gambar di atasterlihat bahwa ekstrak kulit buahmanggis dosis 25 mg/kgBBmeningkatkan prosentasemorfologi normal spermatozoanamun saat dosis ekstrakditingkatkan (50 dan 100mg/kgBB), prosentasespermatozoa yang normalmorfologinya semakin menurunterutama dosis 100 mg/kgBB.Dosis ini meningkatkan angkakecacatan spermatozoadibandingkan kelompok kontrol.3. Pengaruh Ekstrak Kulit Buah

Manggis Terhadap ProsentaseViabilitas Spermatozoa MencitYang Terpapar 2-ME

Spermatozoa di dalamgambar berikut ini mewakiligambaran spermatozoa yanghidup dan yang mati.Spermatozoa yang hidup (kiri)tidak menyerap warna sehinggaterlihat bening sedangkan

a b

c d


spermatozoa yang mati berwarmaungu karena menyerap warna.

Gambar 5.4 Viabilitasspermatozoa mencit (a. Hidup;b. Mati)

Prosentase viabilitasspermatozoa tertera dalamgambar berikut dan menunjukkanprosentase rata-rata spermatozoayang hidup pada kelompokkontrol adalah 42,83±7,414;kelompok perlakuan dengan dosisekstrak 25, 50 dan 100 mg/kgBBadalah 72,17±3,545;48,33±6,439 dan 47,00±4,858%.

Gambar: pengaruh ekstrak kulitbuah manggis terhadapprosentase viabilitas spermatozoamencit yang terpapar 2-ME

Gambar ini memperlihatkanbahwa dosis ekstrak kulit buahmanggis 25 mg/kgBBmenyebabkan peningkatanprosentase spermatozoa yanghidup sedangkan denganpeningkatan dosis ekstrakmenjadi 50 dan 100 mg/kgBBjumlah spermatozoa yang hidupdan yang mati hampir setaradengan kelompok kontrol.

4. Pengaruh Ekstrak Kulit BuahManggis Terhadap ProsentaseIntegritas Spermatozoa MencitYang Terpapar 2-ME

Gambar berikut inimenggambarkan keadaanintegritas membran spermatozoayang baik dengan pembengkakandi bagian ekor (kiri) danspermatozoa yang mengalamikerusakan integritas membran(kanan).

a b



678

Gambar 5.6 Integritas membranspermatozoa mencit(a,b,c : Integritasmembran baik; d.Integritas membranburuk)

Hasil penelitian yang terterapada gambar di bawah inimenunjukkan rata-rataprosentase integritas membranspermatozoa yang baik padakelompok kontrol sebanyak3,83±0,983; kelompok perlakuan(P1, P2, P3) sebanyak 6,00±1,673;11,00±1,517 dan 4,33±1,211%.

Gambar: pengaruh ekstrak kulitbuah manggis terhadapprosentase integritas membranspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME

Gambar di atasmenunjukkan bahwa dosis 50mg/kgBB ekstrak kulit buahmanggis meningkatkanprosentase integritas membranspermatozoa yang baik padamencit yang terpapar 2-ME.

5. Pengaruh Ekstrak Kulit BuahManggis Terhadap PenurunanKadar MDA Spermatozoa MencitYang Terpapar 2-ME

Hasil penelitian dapat dilihatpada gambar dibawah yangmenggambarkan nilai rata-ratakadar MDA spermatozoa yangbaik pada kelompok kontrolsebesar 19,61±5,569. Padakelompok perlakuan dengan dosisekstrak 25 mg/kgBB kadarMDAnya 19,56±2,207; kelompokperlakuan (P2 dan P3)12,36±12,034 dan 20,22±16,662nmol/mg.

a

d

b

c


Gambar : pengaruh ekstrak kulitbuah manggis terhadappenurunan kadar mdaspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME

Gambar ini menunjukkanadanya penurunan kadar MDAspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME terdapat padapemberian ekstrak kulit buahmanggis dengan dosis 50mg/kgBB.

PEMBAHASAN

1. MotilitasHasil penelitian ini

menyatakan bahwa dosis ekstrak25 mg/kgBB meningkatkankecepatan motilitas yangmenunjukkan adanya perbaikanfungsi mitokondria sebagaipenghasil ATP untukmenggerakkan flagela. Hal inisejalan dengan teori yangmenyatakan bahwa sehingga jikaterjadi gangguan padamitokondria maka motilitas akanterganggu (Susmiarsih, 2010).Fungsi mitokondria dapat berjalandengan baik jika integritas

membrannya baik (Bucak, et al,2010).

Pernyataan tersebutmendukung hasil penelitian yangmengindikasikan banyaknyaspermatozoa yang mengalamikerusakan membran dan faktaselama pengamatan banyaknyaspermatozoa yang immotil.Namun karena tujuan dalampenelitian ini adalah mengukurkecepatan motilitas spermatozoasehingga hal itu tetap dapatdilakukan pada spermatozoa yangmotil.

Peningkatan kecepatanmotilitas spermatozoa pada dosisektrak 25 mg/kgBB dapatdisebabkan karena terciptanyakeseimbangan antioksidanenzimatik dan non enzimatik didalam sel spermatozoa.Kandungan antioksidan di dalamekstrak kulit buah manggisterutama xanthone dapatmenetralkan radikal bebas(Pasaribu, et al, 2012) namunantioksidan tersebut tampaknyatidak bekerja secara efektif padadosis 50 dan 100 mg/kgBB. Hal inimenimbulkan dugaan bahwa adazat aktif lain yang terkandungdalam ekstrak kulit buah manggisdan tidak mendukung fungsiantioksidannya.

2. MorfologiMorfologi spermatozoa

normal pada dosis ekstrak 25mg/kgBB lebih banyak dari dosis50 dan 100 mg/kgBB. Keadaan inidapat disebabkan karenaantioksidan yang terkandung di



680

dalam ekstrak mencegahterjadinya peroksidasi lipid danmelindungi keutuhan membranspermatozoa.

Tingginya angka kecacatanbaik kepala, leher maupun ekoryang terjadi pada dosis ektrak100 mg/kgBB mengindikasikantidak efektifnya kerja antioksidandalam menetralisir ROS. Kejadianini juga menimbulkan dugaanbahwa dosis ekstrak tersebutjustru bersifat toksik danmeningkatkan kadar ROS yangtidak dapat ditolerir olehantioksidan yang secara fisiologisterdapat pada spermatozoa. Halini sejalan dengan pernyataantentang adanya korelasi negatifantara kadar ROS dengan proporsispermatozoa normal namunberkorelasi positif dengan jumlahspermatozoa yang cacat kepala(amorphous, kerusakan akrosom),midpece defect, cyto-plasmicretention, tail defects, dan spermdeformity index (SDI) scores(Darmawan, 2007).

Adanya peningkatanmaupun penurunan prosentasemorfologi spermatozoa normalmaupun cacat menunjukkanbagaimana efektifitas kerjaantioksidan yang terkandung didalam ekstrak kulit buah manggisselama proses spermatogenesisterutama pada prosesspermiogenesis dan maturasispermatozoa. Kondisi ini jugadapat diakibatkan karenapemberian 2-ME. Pernyataan inididukung oleh hasil penelitianterdahulu yang menyatakan

bahwa paparan senyawa 2-ME200 mg/kgBB menyebabkanrusaknya tubulus seminiferus,penurunan jumlahspermatogonium dan spermatidserta merusak morfologispermatozoa (Hayati, et al., 2004).3. Viabilitas

Dalam penelitianpeningkatan jumlah spermatozoayang hidup hanya terjadi padadosis ekstrak 25 mg/kgBBsedangkan dengan peningkatandosis (50 dan 100 mg/kgBB)jumlah spermatozoa yang hidupdan mati hampir setara dengankelompok kontrol yang tidakmendapatkan ekstrak. Hal inidapat disebabkan karena kondisikeseimbangan antara antioksidanyang ada di dalam sel (Bucak, etal, 2010) pada dosis 25 mg/kgBBlebih baik dibandingkan dosislainnya.

Antioksidan enzimatik dannon enzimatik berfungsi sebagaiscavenger terhadap radikal bebas(Kefer, Agarwal, Sabanegh, 2009).Dalam penelitian ini dosismanggis 50 dan 100 mg/kgBBtidak mampu memperbaiki angkaviabilitas spermatozoa. Hal inimungkin disebabkan karena dosisini berperan sebagai ROS karenatelah bersifat toksik jika diberikandalam waktu lama terlebihdengan kemungkinan adanyainteraksi antara ekstrak dan 2-MEyang merupakan oksidan. ROSmenyebabkan peroksidasi lipidmembran plasma spermatozoasehingga menyebabkan


banyaknya spermatozoa yangmati.4. Integritas membran

Integritas membranspermatozoa dalam penelitian ini,baik itu pada kelompok kontrolmaupun kelompok perlakuanmemiliki angka kerusakan yangsangat tinggi. Akan tetapi, tetapada perbedaan pengaruhpemberian ekstrak kulit buahmanggis terhadap peningkatanintegritas membran padakelompok perlakuan dibandingkandengan kelompok kontrol yanghanya mendapatkan 2-ME.Peningkatan prosentase integritasmembran yang baik tampak padadosis ekstrak 50 mg/kgBB.

Keadaan ini dapatdisebabkan karena tingginyakadar MDA yang mengindikasikanproses peroksidasi lipid juga tinggisehingga merusak membranplasma dan menandakan kecilnyaefektifitas antioksidan yangterkandung dalam buah manggisuntuk memperbaiki integritasmembran yang telah dirusak oleh2-ME. Selain itu ada kemungkinanbahwa pemberian ekstrak kulitbuah manggis pada dosis tertentudalam jangka waktu yang lamajustru berperan sebagai oksidanyang menyebabkan kerusakanintegritas membran spermatozoajuga ikut meningkat.5. Kadar MDA

Dalam penelitian ini, hanyakelompok perlakuan dengan dosisekstrak 50 mg/kgBB yang efektifmenurunkan kadar MDAspermatozoa. Hal ini menandakan

kemampuan antioksidan yangterkandung dalam ekstrak kulitbuah manggis untuk menurunkankadar MDA spermatozoa yangtelah terpapar 2-ME kurang baikdan diduga ada zat aktif lain yangterkandung di dalam ekstraktersebut yang mekanismekerjanya berlawanan denganfungsi antioksidannya. Namun jikadibandingkan dengan kelompokkontrol yang tidak mendapatkanterapi ekstrak terlihat bahwatetap ada penurunan kadar MDAterutama pada dosis 50 mg/kgBB.

Kejadian ini menimbulkandugaan bahwa pemberian ekstrakkulit buah manggis dalam waktuyang lama dengan caradiijeksikan juga meningkatkankadar ROS. Selain itu denganpemberian 2-ME yang bersifattoksik serta banyaknya jumlahspermatozoa yang mati jugamenyebabkan peningkatankejadian stres oksidatif yangditunjukkan oleh peningkatankadar MDA. Peningkatan produksiROS dan kadar MDA inidihubungkan dengan penurunanpotensial membran mitokondriayang merupakan indikator pentinguntuk integritas fungsionalspermatozoa (Darmawan, 2007).Hal ini turut mendukung hasilpenelitian yang menunjukkantingginya angka kerusakanintegritas membran, abnormalitasmorfologi dan kematianspermatozoa.

Kualitas spermatozoamenentukan keberhasilan dalamproses fertilisasi dan motilitas



682

merupakan faktor yang palingpenting. Motilitas dapatdipengaruhi oleh integritasmembran dan morfologispermatozoa. Jika integritasmembran dan morfologi normalspermatozoa tinggi makamotilitas juga tinggi, demikiansebaliknya.

Motilitas dan morfologi jugadipengaruhi oleh integritasmembran karena jika integritasmembran buruk akanmenurunkan motilitas danmorfologi normal darispermatozoa. Akan tetapi,motilitas tidak dipengaruhi olehviabilitas karena belum tentuspermatozoa yang hidup memilikimotilitas yang baik.

Viabilitas dipengaruhi olehintegritas membran karena jikaintegritas membran buruk makaspermatozoa yang mati jugameningkat. Demikian juga denganintegritas membran yang sangatdipengaruhi oleh kadar MDAkarena jika kadar MDA tinggimaka integritas membranspermatozoa juga buruk.

Untuk menjaga kualitasspermatozoa tetap baik makadiperlukan adanya keseimbanganantara antioksidan enzimatikdengan antioksidan nonenzimatik (Kefer, Agarwal danSabanegh, 2009). Pemberianekstrak kulit buah manggisdengan dosis bertingkat dalampenelitian diharapkan dapatmeningkatkan kualitasspermatozoa dan menurunkankadar MDA yang disebabkan oleh

paparan senyawa 2-ME.Penentuan dosis tersebutberlandaskan pada hasilpenelitian toksisitas akut maupunsub kronis ekstrak etanol kulitbuah manggis selama 28 haritidak menunjukkan efek toksikyang berarti (Nugroho, 2012).

Peningkatan dosis obatseharusnya akan meningkatkanrespon yang sebanding dengandosis yang ditingkatkan, namundengan meningkatnya dosispeningkatan respon padaakhirnya akan menurun, karenasudah tercapai dosis yang sudahtidak dapat meningkatkan responlagi. Hal ini sering terjadi padaobat bahan alam, karenakomponen senyawa yangdikandungnya tidak tunggalmelainkan terdiri dari berbagaimacam senyawa kimia, dimanakomponen-komponen tersebutsaling bekerjasama untukmenimbulkan efek. Namundengan peningkatan dosis, jumlahsenyawa kimia yang dikandungsemakin banyak, sehingga terjadiinteraksi merugikan yangmenyebabkan penurunan efek(Pasaribu, Sitorus dan Basri, 2012).

SIMPULAN1. Ekstrak kulit buah manggis

dosis 25 mg/kgBBmeningkatkan sedangkan dosis50 dan 100 mg/kgBBmenurunkan kecepatanmotilitas spermatozoa mencityang terpapar 2-ME

2. Dosis ekstrak kulit buahmanggis yang efektif


meningkatkan prosentasemorfologi normal spermatozoamencit yang terpapar 2-MEadalah 25 mg/kgBB sedangkandosis 50 dan 100 mg/kgBBmeningkatkan angkakecacatan spermatozoa

3. Ekstrak kulit buah manggisdosis 25 mg/kgBB paling efektifuntuk meningkatkanprosentase viabilitasspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME

4. Ada pengaruh ekstrak kulitbuah manggis terhadappeningkatan prosentaseintegritas membranspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME terutama dosis50 mg/kgBB

5. Dosis ekstrak kulit buahmanggis yang mampumenurunkan kadar MDAspermatozoa mencit yangterpapar 2-ME adalah 50mg/kgBB

SARAN1. Perlu dilakukan penelitian

lebih lanjut tentang jenisekstrak yang paling baik darikulit buah manggis sehinggadapat dimanfaatkan olehmanusia

2. Perlu adanya penelitian lebihlanjut keefektifan kandunganantioksidan pada kulit buahmanggis dengan mengisolasizat-zat aktifnya

3. Perlu dilakukan penelitianlebih lanjut tentang toksisitasekstrak kulit buah manggis.

DAFTAR PUSTAKA

Adriani, Sri. 2012. PengaruhPemberian Pakan DenganTambahan Bekatul TerhadapSpermatogenesis Mencit(Mus musculus L.) GalurSwiss Webster. Skripsi.Universitas Indonesia :Jakarta

Arkhaesi, Nahwa. 2008. KadarMalondialdehyde (MDA)Serum Sebagai IndikatorPrognosis Keluaran PadaSepsis Neonatorum (SerumLevel Of Malondialdehyde(MDA) As A PrognosticIndicator For The Outcome InNeonatal Sepsis). Tesis.UNDIP : Semarang.

Bucak, M.N., Sariozkana, S.,Tuncera, P.B., Ulutas, P.A.,Akcadag, H.I. 2009. Effect ofantioxidants on microscopicsemen parameters, lipidperoxidation and antioxidantactivities in Angora goatsemen followingcryopreservation. SmallRuminant Research 81, 90–95

Choy, J.T., Ellsworth, P. 2012.Overview Of CurrentApproaches To TheEvaluation and Managementof Male Infertility. US NationalLibrary of Medicine NationalInstitutes of Health.32(6):286-94, 304 quiz 295.

Comhaire, F., Decleer, W. 2011.Quantifying The EffectivenessAnd Cost-Efficiency Of FoodSupplementation WithAntioxidants For Male

http://www.nlm.nih.gov/

http://www.nlm.nih.gov/

http://www.nih.gov/

http://www.nih.gov/



684

Infertility. ReproductiveBioMedicine Online Volume23, Issue 3 , Pages 361-362

Darmawan, H. 2007. ProductionOf ROS And Its Effects OnMitochondrial And NuclearDNA, Human Spermatozoa,And Sperm Function. Med JIndones. Vol 16, No 2.

Eisenberg, M.L., Lathi, R.B., Baker,V.L., Westphal, L.M., Milki,A.A., Nangia, A.K. 2013.Frequency of the MaleInfertility Evaluation: Datafrom the National Survey ofFamily Growth. The Journal ofUrology.Volume 189, Issue 3 ,Pages 1030-1034

Fritz, M.A., Speroff., L. 2011.Clinical GynecologicEndocrinology and Infertility.Eigth Edition, Vol.2. LippincotWilliams & Wilkins :Philadelphia.

Hadriyono, K.R.P. 2011. KarakterKulit Manggis, Kadar PolifenolDan Potensi Antioksidan KulitManggis (Garciniamangostana l.) PadaBerbagai Umur Buah DanSetelah Buah Dipanen.Skripsi. IPB : Bogor.

Hasanah, I.W. 2009. PengaruhEkstrak Daun Pegagan(Centella asiatica) TerhadapSpermatogenesis Mencit(Mus musculus). Skripsi. UINMaulana Malik Ibrahim :Malang.

Hayati, A. 2011. Spermatologi.LPP Unair : Surabaya.

Hayati, A., Yunaida, B., Rai Pidada,I.B., Darmanto, W., Winarni,D. 2004. Efek 2-Methoxyethanol TerhadapStruktur Histologi TestisMencit (Mus musculus). Berk.Penel. Hayati: 10 (7–12).

Hayati, A., Mangkoewidjojo, S.,Hinting, A., Moeljopawiro, S.2006. Hubungan Kadar MDASperma Dengan IntegritasMembran Spermatozoa Tikus(Rattus norvegicus) SetelahPemaparan 2–Methoxyethanol. Berk. Penel.Hayati: 11 (151–154).

Hayati, A. 2007. Kajian Kualitasdan Protein MembranSpermatozoa (Rattusnovergicus) AkibatPemaparan 2-Methoxyethanol. Disertasi.UGM : Yogyakarta.

Johnson, J.J., Petiwala, S.M., SyedD.N., Rasmussen, J.T.,Adhami, V.M., Siddiqui, I.A.,Kohl, A.M., Mukhtar, H. 2012.Alpha Mangostin, A XanthoneFrom Mangosteen Fruit,Promotes Cell Cycle Arrest InProstate Cancer AndDecreases Xenograft TumorGrowth. JournalCarcinogenesis Vol.33 No.2Pp.413–419.

Kefer, J.C., Agarwal, A.,Sabanegh,E. 2009. Role Of AntioxidantsIn The Treatment Of MaleInfertility. InternationalJournal of Urology Volume 16,Issue 5, pages 449–457.

Lavenia, A. 2010. PenghambatanPeroksidasi Lipid Oleh EkstrakKulit Batang Mahoni

http://www.rbmojournal.com/issues?issue_key=S1472-6483%2811%29X0011-1

http://www.rbmojournal.com/issues?issue_key=S1472-6483%2811%29X0011-1

http://www.jurology.com/issues?issue_key=S0022-5347%2813%29X0002-3

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/iju.2009.16.issue-5/issuetoc

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/iju.2009.16.issue-5/issuetoc


(Swietenia macrophylla king)Pada Tikus Hiperurisemia.Skripsi. IPB : Bogor.

Marulyananda, C., Hayati, A., RaiPidada, I.B. 2012. PengaruhEkstrak Etanolik KecambahKacang Hijau (Phaseolusradiatus) Terhadap Jumlahdan Morfologi SpermatozoaMencit Yang Terpapar 2-Methoxyethanol .Skripsi.UNAIR : Surabaya.

Naroputra.2011.http://naroputra.wordpress.com/2011/12/16/teman-baru-cerita-tentang-dia/(Diakses : 19 April 2013).

Naher,Z.U., Biswas, S.K., Molah,F.H., Ali, M., Arslan, M.I. 2011.Role of Glutathione in MaleInfertility. Bangladesh Journalof Medical Biochemistry. 2011;4(2): 20-25

Nugroho, A.E. 2012. Manggis(Garcinia mangostana l.) :Dari Kulit Buah YangTerbuang Hingga MenjadiKandidat Suatu Obat. UGM :Yogyakarta.

Obolskiy, D., Pischel, I.,Siriwatanametanon, S.,Heinrich, M. 2009. GarciniaMangostana L.: APhytochemical AndPharmacological Review.Phytotherapy ResearchVolume 23, Issue 8, pages1047–1065.

Pasaribu, F., Sitorus, P., Bahri, S.2012. Uji Ekstrak EtanolKulit Buah Manggis (Garciniamangostana l.) TerhadapPenurunan Kadar GlukosaDarah. Journal of

Pharmaceutics andPharmacology, Vol.1 (1): 1-8

Putra, I.N.K.2010. AktivitasAntibakteri Ekstrak Kulit BuahManggis (Garciniamangostana l.) SertaKandungan Senyawa Aktifnya.UNUD Bali. J. Teknol. DanIndustri Pangan, Vol.XXI No.1.

Retno, T., Widyastuti, S.K.,Suarsana, N. 2012. PengaruhPemberian Isoflavonterhadap Peroksidasi Lipidpada Hati Tikus Normal.Indonesia Medicus Veterinus2012 1(4) : 483 – 491

Salihoglu, E.M., Akaydin, G., Can,E.C., Akaydin, S.Y. 2010.Evaluation of AntioxidantActivity of Various HerbalFolk Medicine. FABAD J.Pharm. Sci., 35, 59-67

Shamsi, M.B., Venkatesh, S.,Kumar, R., Gupta. N.P.,Malhotra, N., Singh, N., Mittal,S., Arora, S., Arya, D.S.,Talwar, P., Sharma, R.K.,Dada, R. 2010. AntioxidantLevels in Blood and SeminalPlasma and Their Impact onSperm Parameters in InfertileMen. Indian Journal ofBiochemistry & Biophysics.Vol.47. pp 38-43

Sherwood, Lauralee.2011.Fisiologi Manusia : Dari Sel KeSistem (Human Physiology :From Cell to Systems). Edisi 6.EGC : Jakarta.

Shibata, M.A., Linuma, M.,Morimoto, J., Kurose, H.,Akamatsu, K., Okuno, Y.,Akao, Y., Otsuki, Y. 2011.Alpha-Mangostin Extracted

http://www.banglajol.info/index.php/BJMB

http://www.banglajol.info/index.php/BJMB

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ptr.v23:8/issuetoc



686

From The Pericarp Of TheMangosteen (Garciniamangostana linn) ReducesTumor Growth And LymphNode Metastasis In AnImmunocompetent XenograftModel Of MetastaticMammary Cancer Carrying AP53 Mutation. BioMedCentralMedicine, 9:69

Sumiarsih, T. 2010. Peran GenetikDNA Mitokondria (mtDNA)Pada Motilitas Spermatozoa.Majalah KesehatanPharmaMedika, 2010 Vol,2,No,2.

Umami, H.M. 2009. PengaruhPemberian Minyak JintanHitam (Nigella sativa)Terhadap JumlahSpermatozoa MencitHiperlipidemia. Karya TulisIlmiah. Undip : Semarang.

Wahyuningsih , S.P.A. 2008.Pemanfaatan Ekstrak JamurCoriolus versicolor UntukMeningkatkan Jumlah TotalLeukosit Dan Makrofag PadaTikus Putih Wistar SetelahPemaparan 2-Methoxyethanol. Berk. Penel.Hayati: 13 (173–177).

Zribi, N., Chakroun, N.F., Elleuch,H., Abdallah, F.B., BenHamida, A.S., Gargouri, J.,Fakhfakh, F., Keskes, L.A.2011. Sperm DNAFragmentation And OxidationAre Independent OfMalondialdheyde.Reproductive Biology andEndocrinology 9:47.

nataliadebisubani, effectofskinextractmangosteen(garcinia

Documents