les staphylocoques -...
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LES STAPHYLOCOQUES
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FAMILLE GENRE
Staphylococcus
Micrococcaceae Micrococcus
Planococcus
Stomatococcus
1- CLASSIFICATION
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Les espèces retrouvées en pathologie humaine appartiennent presque exclusivement aux genres Micrococcus et Staphylococcus.
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Cocci à gram positif. Disposés en amas ou en grappe de raisin. Immobiles. Aéro-anaérobie. Catalase ( + )
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COLORTION DE GRAM
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LE GENRE MICROCOCCUS
Les souches du genre Micrococcus sont retrouvées dans l’environnement.
Leur pouvoir pathogène est très faible souvent considérées contaminants.
De rares cas d’infections à Microcoques ont été décrites (endocardites et septicémies)
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LE GENRE STAPHYLOCOCCUS
Comprend une trentaine d’espèce.
Chez l’homme les espèces les plus
couramment isolées sont :
A/- L’espèce Staphylococcus aureus : Produit une coagulase (enzyme capable de coaguler le plasma de lapin oxalaté) c’est la plus pathogène, agent d’infections pyogènes.
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COAGULASE
+
-
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B/- Les espèces à coagulase négatives: Staphylococcus épidermidis: souvent
considéré comme opportuniste. Staphylococcus saprophyticus:
responsable d’infections urinaires chez la femme jeune.
Et à une fréquence moindre: St.haemolyticus, St.hominis, St.capitis et St.auricularis.
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CARACTERES DIFFERENTIELS AUX GENRES MICROCOCCUS ET STAPHYLOCOCCUS
Micrococcus Staphylococcus
Type respiratoire Aérobie Aéro-anaérobie
Culture à 45°C - +
Fermentation du glucose - +
Fermentation du glycérol - +
Nitrofurantoine Résistant ≤ 15mm Sensible > 15 mm
Composé O/129 Sensible ≥ 15 mm Résistant < 15 mm
Bacitracine Sensible = 10-25 mm Résistant
Lysozyme Sensible Résistant
Lysostaphine Résistant Sensible
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STAPYLOCOCCUS AUREUS
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1 - HABITAT ET MODE DE TRANSMISSION
Germes ubiquitaires ( air, sol, eau )
St. aureus et St.épidermidis: commensaux de la peau et des muqueuses (30 à 50 % porteurs sains: oropharynx, fosses nasales, selles et aisselles)
St. aureus Infections nosocomiales.(flore
ou manuportées lors des soins)
Toxi-infection alimentaire collective (aliment contaminé, conservé à température ambiante multiplication de la bactérie et production d’enterotoxine)
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3 - POUVOIR PATHOGENE
A/-Les suppurations localisées: • Infections cutanées : Furoncle, anthrax, panaris,
impétigo, onyxis, staphylococcie maligne de la face, syndrome de la peau ébouillantée ou Lyell (Exfoliatine).
• Infections ORL: Otite, sinusite, phlegmon amygdalien.
• Infections des séreuses : Arthrite, pleurésie, péritonite.
• Infections osseuses : Ostéomyélite, infection sur prothèse.
• Infections viscérales : Abcès du poumon, abcès du cerveau et Pneumonie nécrosantes (PVL).
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FURONCLE ET ANTHRAX
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FURONCLE
ANTHRAX
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PANARIS
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CELLULITE
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IMPETIGO
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IMPETIGO BULLEUX
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SCARLATINE
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SYNDROME DE RITTER OU DE LA PEAU EBOUILLANTEE
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PNEUMONIE
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B/- Septicémie et endocardites :
C/- Manifestations digestives :
Les toxi-infections alimentaires (Enterotoxines)
Les entérocolites staphylococcique : Suite à un traitement antibiotique.
D/- Le syndrome du choc toxique: lié à la synthèse d’une toxine « TSST1 ». Associe hypotension, fièvre, éruption scarlatiniforme.
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TOXI-INFECTION ALIMENTAIRE
3 heures
Diarrhée vomissements
DESHYDRATATION
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2 - FACTEURS DE VIRULENCE ELABORES
PAR ST.AUREUS
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a-TOXINES
• Hémolysine : α, β, γ, δ .
• Leucocydine : perte de mobilité des PNN et leur
lyse formation de pus. Appelée également
protéine de Panton et Valentine (PVL).
• Exfoliatine : épidermolytique décollement intra-
épidermique impétigo bulleux, lyelle.
• Toxine pyogène : Au Nbre de 2 fièvre
scarlatiniforme.
• Toxines associées au choc toxique
staphylococcique(TSST 1).
• Enterotoxines : A, B, C1, C2, C3, D et E
toxi-infections alimentaires.
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HEMOLYSE
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b- ENZYMES
• Coagulase libre :Coagulation du plasma et formation de thrombophlébite suppurée.
• Coagulase liée (clumping factor ) • Hyaluronidase :hydrolyse l’acide hyaluronique
du tissu conjonctif diffusion de la bactérie .
• Fibrinolysine (Staphylokinase ) :Dissout les caillots formation de micro emboles.
• Dnase :destruction des noyaux cellulaires . • Autres enzymes : Lipase, protéase,
phosphatase, estérase.
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4 - DIAGNOSTIC BACTERIOLOGIQUE
Bactéries commensales d’où Difficulté d’interprétation * Asepsie rigoureuse.
* Répéter les prélèvements.
A/- prélèvement :
Fonction du tableau clinique (LCR, hémoculture, urine, pus, expectoration ..etc.)
Avant toute antibiothérapie.
Fiche de renseignements obligatoire.
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EXEMPLE :ISOLEMENT ET IDENTIFICATION DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Pus d’abcès
Examen microscopique
Coloration de Gram
Isolement en culture 24 h 37°c
Identification biochimique
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B/- Examen direct :
• Présence de cocci à gram positif disposés en:
Amas.
Grappe de raisin.
Diplocoque ou
Courtes chaînettes.
Immobiles.
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COLORATION DE GRAM
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3- Caractères culturaux : Les staphylocoques poussent sur milieu ordinaire en 18 à 24 h à une température de 37°C (entre 10 et 45°C) ils sont aéro-anaérobie facultatifs.
Pour les prélèvements polymicrobiens on utilise des milieux sélectifs comme :
• Le milieu Chapman qui contient du Mannitol et une forte concentration de Na cl (7,5 %)
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MILIEU CHAPMAN
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D/- Identification :
1- Identification du genre: Tests rapides d’orientation :
Aspect des colonies.
Présence de pigmentation.
Fermentation du Mannitol.
Coloration de gram, disposition du germe et mobilité.
Epreuves enzymatiques simples : Oxydase -, catalase +.
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PIGMENTATION
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FERMENTATION DU MANNITOL
+
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LA CATALASE
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2- Identification de l’espèce : • Coagulase libre : 0,5 ml de Sérum de lapin +
0,5 ml d’une suspension dense de la bactérie Incubation 24h à 37°C. (réaction observée chaque 2h car risque de redissolution du caillot par la fibrinolysine) NB : ce test peut être + chez S. intermedius ou S.hyicus.
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COAGULASE
+
-
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IDENTIFICATION BIOCHIMIQUE GALERIE API STAPH
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DIAGNOSTIC DIFFERENCIEL ENTRE S.AUREUS, S.EPIDERMIDIS ET
S.SAPROPHYTICUS Caractères S.aureus S.epidermidis S.saprophyticus
Pigment carotinoide
+ - -
Coagulase + - -
Dnase thermo R* + - -
Fermentation du Mannitol
+ - + parfois -
Clumping factor + - -
Hémolysine alpha + - -
S* à la novobiocine
+ + -
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E/- Antibiogramme :
Indispensable vue la fréquence de souches résistantes aux
antibiotiques.
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5 - RESISTANCE AUX ANTIBIOTIQUES
A/- Les Bétalactamines : 98 % des souches de staphylocoques synthétisent
une pénicillinase (d’origine plasmidique) d’ou R* à la pénicilline G,V, l’Ampicilline, Carboxy et Ureidopenicilline.
Les pénicillines M ne sont pas touchées. • La Pénicillinase est mise en évidence par : Cette Pénicillinase est inactivée par les inhibiteurs
de Bétalactamases: l’Acide Clavulanique + Amoxicilline
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Résistance aux Pénicillines M (Methicilline):
les souches résistantes à la Methicilline et à l’Oxacilline sont désignées « SAMR » (Staphylocoque aureus Methicillino-résistant)
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Cette R* d’origine chromosomique est due à l’acquisition d’un gène mec A qui entraîne la production d’une protéine liant la Pénicilline la PLP2’ ou PLP2a ayant une faible affinité pour la plupart des Bétalactamines d’ou résistance croisée à toutes les Bétalactamines.
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MECANISME DE RESISTANCE A L’OXACILLINE
GENE mec A
2a
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B/- Les Aminosides : on test en général la Kanamycine
(répond pour l’Amikacine), Tobramycine et Gentamycine (répond pour Nétilmicine) Phénotypes de résistance : KNm, KT et KTG.
C/- Les Glycopeptides : Apparition de souches de sensibilité diminuée aux Glycopeptides « GISA »
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D/- Fluoroquinolones : La Pefloxacine qui répond aux autres molécules (résistance croisée)
E/- Macrolides : On teste l’Erythromycine, la Spiramycine, la Lincomycine et la Pristinamycine.
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B/- Les souches résistantes à la Methicilline sont habituellement résistantes à de nombreux autres antibiotiques:
Aminosides.
Fluoroquinolones.
Erythromycine.
Rifampicine.
Tétracycline
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TRT de choix des infections à SAMS
Oxacilline + Aminosides En 2eme intention:
C1G et Pristinamycine Peuvent être utiles:
Macrolides, Lincosamides Acide fusidique
Rifampicine AMC, Fosfomycine
Aminosides en association.
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TRT de choix des infections à SAMR
Glycopeptides (Vancomycine)
seule ou en association.
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STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
S.epidermidis est constamment présent sur la peau et les muqueuses.
Pour affirmer son rôle pathogène il faut exiger certains critères :
Asepsie rigoureuse lors du prélèvement.
Présence de la même souche à plusieurs reprises dans le même type de prélèvements et absence d’autres espèces bactériennes.
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Les infections à S.epidermidis se développent dans des conditions bien particulières :
Aplasie.
Chirurgie difficile.
Présence de prothèse cardiaque.
Valves de dérivation du LCR chez les hydrocéphales.
Du fait de sa grande capacité d’adhérer aux biomatériaux.
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STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS
Responsable d’infections urinaires chez la femme jeune entre 15 et 40 ans.
Il est naturellement résistant à la fosfomycine critère d’identification.
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MERCI POUR VOTRE ATTENTION