laporan resmi analisis farmasi

LAPORAN RESMI ANALISIS FARMASI

“VALIDASI METODE PENETAPAN KADAR KAFEIN DENGAN

SPEKTROFOTOMETRI METODE RASIO ABSORBANSI”

Disusun oleh :

Kelompok : G.7

Anggota : Dihaz Putriningtyas NIM. K100100135 Pujik Hartatik NIM. K100100144 Zia Najibah NIM. K100100154

Korektor : I Nyoman Upa W

LABORATORIUM ANALISIS FARMASIFAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAHSURAKARTA

2012

A. Tujuan Praktikum

Setelah mengikuti praktikum Analisis Farmasi mahasiswa mampu melakukan

Validasi Metode Analisis.

Setelah mengikuti praktikum Analisis Farmasi mahasiswa mampu menganalisis

bagaimana penetapan kadar suatu obat dengan metode Rasio Absorbansi.

B. Dasar Teori

Metode rasio absorbansi menggunakan dua panjang gelombang yang ditetapkan.

Satu obat mempunyai panjang gelombang maksimal dan mempunyai panjang gelombang

yang lain yang juga menunjukan absorbansi yang cukup besar, yang disebut sebagai titik

isobestik. Titik isobestik merupakan absorbansi yang diukur pada dua panjang

gelombang, satu titik isobestik terbentuk oleh dua komponen dan panjang gelombang

yang lain pada absorbansi maksimal dari salah satu kedua komponen. Absorbansi dan

angka absorbsifitas dapat diukur pada panjang gelombang tertentu dijumlah dan

disubstitusi mengikuti persamaan berikut :

Cx = (Qm-Qy)xA1/(Qx-Qy)x ax1

Cy = (Qm-Qy)xA1/(Qy-Qx)x ay1

(Neha A.Jain et al, 2011)

Tujuan dari metode rasio absorbansi adalah untuk mengaktifkan dengan

memperhitungkan konsentrasi obat-obat menggunakan penyerapan UV. Faktor yang

mempengaruhi hasil akurasi pada pengukuran absorbansi antara lain : konsentrasi relatif

zat aktif, obat-obat alam, dan karakteristik spektrum dari campuran komponen. Untuk

perhitungan metode ini, dibutuhkan dua panjang gelombang yang mempunyai

absobsifitas maksimum dan digunakan panjang gelombang isobestik. Panjang gelombang

yang dipilih sebaiknya tidak bertepatan dengan slope pada kurva spektrum dari masing-

masing komponen. Keuntungan dari metode ini adalah perhitungannya berdasarkan pada

UV langsung yang mana dapat di tampilkan dengan sederhana menggunakan

spektrofotometer UV.

(Yu Cesoy, 2000)

Pada penentuan titik isobestik UV spektrum dari kedua obat dicatat pada grafik

yang sama untuk memperoleh titk isobestik. Kedua obat memiliki absorbansi pada

panjang gelombang yang sama, ini mengakibatkan adanya titik yang berpotongan yang di

sebut sebagai titik isobestik.

Masalah pada spectrum overlapping dari komponen yang berbeda sering terjadi

pada spektrofotometri. Untuk campuran dua komponen spektrum absorbansi diukur dan

absorbansi pada panjang gelombang dipisahkan oleh amplitudo yang sesuai pada

penyerapan spectrum larutan standar dari satu komponen spectrum rasio derivative sisa

proporsional dengan konsentrasi komponen lain.

(Lin et al, 2001)

C. Alat dan Bahan

Alat :

1. Kuvet

2. Spektrofotometer

3. Mikropipet

4. Pipet tetes

5. Gelas ukur

6. Beker glass

7. Labu ukur 10 mL

8. Labu ukur 50 mL

9. Labu ukur 100 mL

10. Blue tip

11. Corong

12. Kertas saring

13. Mortir dan stamper

14. Neraca analitik

Bahan :

1. Tablet Oskadon

2. Etanol

3. Methanol

4. Aquadest

D. Prosedur Resmi

Stuktur Kafein :

Sensitive, ketepatan, akurat, dan pengembangan metode spektrofotometri UV

untuk estimasi simultan Paracetamol (PARA) dan Kafein (CAF) secara simultan dalam

bidang farmasi. Metode B melibatkan persamaan pengembangan absorbansi-Q pada titik

isobastic (259,5 nm). Liniearitas diamati pada konsentrasi antara 2-16 mcg/mL untuk

Paracetamol dan 2-32 mcg/mL untuk Kafein dengan metode ini. Metode yang diusulkan

telah berhasil di terapkan untuk menganalisis obat dalam bidang farmasi. Study lanjutan

telah dilakukan untuk memisahkan kecepatan metode ini. Metode ini telah divalidasi

sebagai pedoman ICH.

Cx = (Qm-Qy)xA1/(Qx-Qy)x ax1

Cy = (Qm-Qy)xA1/(Qy-Qx)x ay1

Dimana :

Qm = A2/A1

Qx = ax2/ax1

Qy = ay2/ay1

A2 = Absorbansi dari larutan pada 273 nm

A1 = Absorbansi dari larutan pada 259,5 nm

ax1 = Absorbansi dari PARA pada 259,5 nm (39)

ay1 = Absorbansi dari CAF pada 259,5 nm (38)

ax2 = Absorbansi dari PARA pada 273 nm (15)

ay2 = Absorbansi dari CAF pada 273 nm (51)

20 tablet ditimbang dan digerus menjadi bubuk dengan sempurna. Bubuk

kemudiaan ditimbang setara dengan 500mg Paracetamol dan 32mg Kafein, kemudian

dipindahkan ke dalam labu volumetri berukuran 100mL yang berisi 10mL methanol dan

50mL air suling dan diultrasonifikasi sekitar 15 menit. Air suling ditambahkan hingga

mencapai tanda pada labu volumetric. Larutan kemudian disaring dengan kertas saring

Whatman no.41. Hasil saringan kemudian digunakan pada metode A dan B. Kadar

PARA dan CAF ditentukan.

Metode B Penyerapan Rasio (Metode Q)

Larutan PARA dan CAF (10mcg/mL) diamati pada range antara 200-400nm

dengan air suling sebagai blanko. Untuk metode Q 259,5nm (titik isobastik) dan 273nm

(lamda makas Kafein) telah dipilih sebagai panjang gelombang pengukuran. Kadar

PARA dan CAF kemudian ditentukan dengan persamaan diatas.

(Vichare V.etal.2010,simultaneous

spectrophotometric Determination of

Paracetamol and Caffein in tablet

formulation, Inf.S.Pharmatech

Reserch vol 2.no4)

E. Skema Tahapan Tekhnik Kerja

1. Cara pembuatan stok dan kurva baku

Pembuatan larutan stok 0,2%

Ditimbang 200mg sampel dengan seksama

Ditambahkan aquadest ad 100mL ke dalam labu takar 100mL

Pencarian absorsivitas molar

Larutan standar dengan konsentrasi 10µg/mL

Ditambahkan aquadest ad 10mL

Diukur pada maks

Dihitung kadar Kafein dengan menggunakan metode determinasi simultan

Cx = (A2.ay1 – A1.ay2) / (ay2.ay1 – ax1.ay2)

Cy = (A1.ax2 – A2.ax1) / (ax2.ay1 – ax1.ay2)

Ditambah aquadest ad 10,0 mL

Diambil 100µL dimasukan dalam kuvet, dan dibaca absorbansinya pada panjang

gelombang 200-300nm

Paracetamol = 243nm

Kaffein = 273nm

Pencarian kadar sampel dengan Rasio absorbansi

Ditentukan konsentrasi untuk mencari panjang gelombang maksimalnya

Ditentukan panjang gelombang maksimal dari masing-masing komponen

maksimal PCT = 259,5nm dan 234nm

Kaffein = 259,5nm dan 273nm

Diukur absorbansi sampel pada panjang gelombang yang berbeda

Dihitung kadar Paracetamol dan Kaffein dengan menggunakan metode Rasio Absorbansi

2. Cara kerja parameter akurasi

Ditimbang 705,9 mg tablet Oskadon (sebanyak 4 kali untuk 4 kelompok)

Ditambahkan methanol 10 mL

Ditambahkan aquadest ad 100 mL

Ditambahkan dengan aquadest ad 10mL

Disaring, diambil 40µL dan di adkan 10mL dengan aquadest

Dibaca absorbansinya pada maks dari kaffein dan isobastik

Dihitung kadar kaffein dalam sampel

Dihiung % recovery nya

Masing-masing %recovery dari ketiga sampel penambahan zat aktif dibuat nilai RSD nya

Kriteria keberterimaan adalah RSD <1% dan angka recovery nya antara 98%-102

Diambil 5 mL

tanpa penambahan zat

aktif

penambahan 80% zat aktif (+1ml larutan stok PCT 2% dan 0,7 mL larutan stok

Kafein 0,2%)

penambahan 100% zat aktif

(+1,25 mL lar.stok PCT

dan 0,875 mL lar. Stok Kaffein)

penambahan 120% zat aktif

(+1,5 mL lar.stok PCT dan 1,05 mL

lar.stok Kaffein).

3. Cara kerja parameter linearitas

Ditimbang sampel dengan range 70%-130%

(494,13 mg; 564,72 mg; 635,31 mg; 705,9 mg; 776,49 mg; 847,08 mg; 917,67 mg)

Diambil metanol 10mL dan ditambah aquadest ad 50mL

Diambil 5mL dan di tambahkan aquadest ad 10mL

Diambil 100µL dan ditambah aquadest ad 10mL dalam labu takar 10mL

Dibaca absorbansinya pada λ maks dan ditentukan kadarnya menggunakan persamaan rasio

absorbansi

Data kadar dihitung menggunakan regresi linier antara kadar hitung vs absorbansi

Diperoleh nilai r dengan keberterimaannya >0,98

4. Cara kerja parameter ripitabilitas

Ditimbang 705,9 mg tablet oskadon sebanyak 7 kali

Masing-masing sampel diperlakukan sama

Ditambah methanol 10 mL dan aquadest ad 10mL

Diambil 5 mL

Tanpa zat aktif dan ditambah aquades ad 10 mL

Diambil 100 µL

Ditambah aquadest ad 10 mL

Dibaca absorbansinya pada maks

Data kadar dihitung dengan menggunakan regresi linear antara kadar terhitung VS

absorbansi

Dihitung nilai RSD nya, kriteria keberterimaan jika nilai RSD <2%

5. Cara kerja parameter presisi antara

Ditimbang….mg tablet oskadon sebanyak 7 kali

Masing-masing sampel diperlakukan sama

Ditambah methanol 10mL dan aquadest ad 50 mL

Diambil 5mL

Tanpa zat aktif dan ditambahkan aquadest ad 10mL

Diambil 100 µL

Ditambah aquadest ad 10 mL

Dibaca absorbansinya pada maks

Data kadar dihitung dengan menggunakan regresi linear antara kadar terhitung VS

absorbansi

Dihitung nilai RSD nya, criteria keberterimaannya jika nilai RSD nya <2%

Dilakukan pada hari yang berbeda

F. Hasil dan Perhitungan

AKURASI

DATA PENIMBANGAN

1. Berat kertas kosong : 259,3 mg

Berat kertas + zat : 965,5 mg

Berat kertas + sisa : 259,5 mg

Berat zat : 706 mg




Berat zat : 706 mg




Berat zat : 706 mg




Berat zat : 706,1 mg

DATA ABSORBANSI

1. Orientasi

( nm ) Tanpa zat aktif + zat aktif 80 % + zat aktif 100% + zat aktif 120 %

261,6 0,345 0,565 0,619 0,730

272 0,225 0,315 0,340 0,413

2. Replikasi I


261,6 0,346 0,550 0,602 0,762

272 0,221 0,309 0,346 0,443

3. Replikasi II


261,6 0,336 0,572 0,608 0,702

272 0,206 0,328 0,350 0,448

4. Replikasi III


261,6 0,339 0,571 0,610 0,775

272 0,208 0,326 0,352 0,457

PERHITUNGAN

a. Tanpa penambahan zat aktif

a. Orientasi

Qm= A 2A 1

=0,2250,345

=0,652

Cy=(Qm−Qx ) . A 1(Qy−Qx ) . ay 1

=(0,652−0,512 ) .0,345

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00025

Cy=0,00025 x500=0,125 %bv=0,125 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100%=17 , 71 %b /b

b. Replikasi I

Qm= A 2A 1

=0,2110,346

=0,609


=(0,609−0,512 ) .0,346

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00017

Cy=0,00017 x500=0,087 %bv=0,087 g /100 ml

0,706 g /100 mlx 100 %=12, 32 %b /b

c. Replikasi II

Qm= A 2A 1

=0,2060,336

=0,613


=(0,613−0,512 ) .0,336

(1,021−0,512 ) .378,67=0,000176

Cy=0,000176 x500=0,088 %bv=0,088 g /100 ml

0,706 g /100 mlx100 %=12 ,46 %b /b

d. Replikasi III

Qm= A 2A 1

=0,2080,339

=0,614


=(0,614−0,512 ) .0,339

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00018

Cy=0,00018 x500=0,09 %bv= 0,09 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100 %=12 , 75 %b /b

Kadar rata−rata=

17,71 %bb+12,32 %

bb+12,46 %

bb+12,75 %

bb

4=13,81 %

bb

b. Penambahan zat aktif 80 %

a. Orientasi

Qm= A 2A 1

=0,3150,565

=0,557


=(0,557−0,512 ) .0,565

(1,021−0,512 ) .378,67=0,000132

Cy=0,000132 x500=0,066 %bv=0,066 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100 %=9,35 %b /b

Hasil teoritis = 0,2 g/100ml

= 0,0014 g/0,7ml

= 0,0014 % b/v = 0,0014

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,198 % b/b = 0,20 % b/b

% Recovery = Hasil analisisHasil teoritis

x100 %

= 9,35 %

bb−13,81 %

bb

0,20 %bb

x 100 %

= - 2230 %

b. Replikasi I

Qm= A 2A 1

=0,3090,550

=0,562


=(0,562−0,512 ) .0,550

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00014

Cy=0,00014 x 500=0,070 %bv=0,070 g /100 ml

0,706 g /100 mlx 100 %=9,92 %b /b


= 0,0014 g/0,7ml

= 0,0014 % b/v = 0,0014

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,198 % b/b = 0,20 % b/b


x100 %

= 9,92%

bb−13,81%

bb

0,20%bb

x100%

= - 1945 %

c. Replikasi II

Qm= A 2A 1

=0,3280,372

=0,881


=(0,881−0,512 ) .0,572

(1,021−0,512 ) .378,67=0,0011

Cy=0,0011 x500=0,55 %bv= 0,55 g /100 ml

0,706 g /100 mlx100 %=77,90 %b/b


= 0,0014 g/0,7ml

= 0,0014 % b/v = 0,0014

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,198 % b/b = 0,20 % b/b


x100 %

= 77,90 %

bb−13,81 %

bb

0,20%bb

x100 %

= 32045 %

d. Replikasi III

Qm= A 2A 1

=0,3260,571

=0,571


=(0,571−0,512 ) .0,571

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00017

Cy=0,00017 x500=0,085 %bv=0,085 g /100 ml

0,706 g /100 mlx100 %=12 , 04 %b/b


= 0,0014 g/0,7ml

= 0,0014 % b/v = 0,0014

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,198 % b/b = 0,20 % b/b


x100 %

= 12,04 %

bb−13,81 %

bb

0,20%bb

x 100 %

= -885 %

Kadar rata−rata=−2230 %

bb+(−1945 ) % b

b+32045 %

bb+(−885)% b

b4

=6746,25 %bb

c. Penambahan zat aktif 100 %

a. Orientasi

Qm= A 2A 1

=0,3400,615

=0,549


=(0,549−0,512 ) .0,615

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00012

Cy=0,00012 x500=0,059 %bv=0,059 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100 %=8,35 % b/b


= 0,001175 g/0,875ml

= 0,00175 % b/v = 0,00175

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,248 % b/b = 0,25 % b/b


x100 %

= 8,35 %

bb−13,81 %

bb

0,25 %bb

x100 %

= - 2184 %

b. Replikasi I

Qm= A 2A 1

=0,3460,602

=0,575


=(0,575−0,512 ) .0,602

(1,021−0,512 ) .378,67=0,000197

Cy=0,000197 x500=0,098 %bv=0,098 g /100 ml

0,706 g /100 mlx100 %=13,88 % b/b


= 0,001175 g/0,875ml

= 0,00175 % b/v = 0,00175

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,248 % b/b = 0,25 % b/b


x100 %

= 13,88 %

bb−13,81 %

bb

0,25%bb

x100 %

= 28 %

c. Replikasi II

Qm= A 2A 1

=0,3500,608

=0,576


=(0,576−0,512 ) .0,608

(1,021−0,512 ) .378,67=0,000202

Cy=0,000202 x500=0,101 %bv=0,101 g /100 ml

0,706 g/100 mlx 100 %=14,31 %b /b


= 0,001175 g/0,875ml

= 0,00175 % b/v = 0,00175

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,248 % b/b = 0,25 % b/b


x100 %

= 14,31%

bb−13,81 %

bb

0,25%bb

x100 %

= 200 %

d. Replikasi III

Qm= A 2A 1

=0,3520,610

=0,577


=(0,577−0,512 ) .0,610

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00021

Cy=0,00021 x500=0,105 %bv=0,105 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100 %=14,87 % b/b


= 0,001175 g/0,875ml

= 0,00175 % b/v = 0,00175

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,248 % b/b = 0,25 % b/b


x100 %

= 14,87%

bb−13,81%

bb

0,25%bb

x100%

= 424 %

Kadar rata−rata=

−2184 %bb+28 %

bb+200 %

bb+424 %

bb

4=−383 %

bb

d. Penambahan zat aktif 120 %

a. Orientasi

Qm= A 2A 1

=0,4130,730

=0,566


=(0,566−0,512 ) .0,730

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00023

Cy=0,00023 x500=0,101 %bv=0,10 1 g /100 ml

0,706 g /100 mlx 100 %=14,30 %b /b


= 0,0021 g/1,05ml

= 0,0021 % b/v = 0,0021

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,297 % b/b = 0,30 % b/b


x100 %

= 14,30%

bb−13,81%

bb

0,30%bb

x100%

= 163,33%

b. Replikasi I

Qm= A 2A 1

=0,4430,762

=0,581


=(0,581−0,512 ) .0,762

(1,021−0,512 ) .378,67=0,0027

Cy=0,000197 x500=1,35 %bv= 1,35 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100 %=191,22 %b /b


= 0,0021 g/1,05ml

= 0,0021 % b/v = 0,0021

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,297 % b/b = 0,30 % b/b


x100 %

= 191,22%

bb−13,81 %

bb

0,30 %bb

x100 %

= 59136,67%

c. Replikasi II

Qm= A 2A 1

=0,4480,772

=0,580


=(0,580−0,512 ) .0,772

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00046

Cy=0,00046 x500=0,23 %bv= 0,23 g /100 ml

0,706 g /100 mlx100 %=32,57 %b /b


= 0,0021 g/1,05ml

= 0,0021 % b/v = 0,0021

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,297 % b/b = 0,30 % b/b


x100 %

= 32,57%

bb−13,81%

bb

0,30%bb

x100 %

= 6253,33 %

d. Replikasi III

Qm= A 2A 1

=0,4570,775

=0,577


=(0,577−0,512 ) .0,775

(1,021−0,512 ) .378,67=0,00031

Cy=0,00031 x500=0,155 %bv=0,155 g/100 ml

0,706 g/100 mlx100 %=21,95 % b/b


= 0,0021 g/1,05ml

= 0,0021 % b/v = 0,0021

0,706g

100 ml

x100 %

= 0,297 % b/b = 0,30 % b/b


x100 %

= 21,95 %

bb−13,81 %

bb

0,30%bb

x100 %

= 2713,33 %

Kadar rata−rata=

−2184 %bb+0,28%

bb+200 %

bb+424 %

bb

4=−389,93 %

bb

LINIERITAS

705,9mg 0,035% →kadar kafein 100%

a. Kadar 70%

70100

X 0,035% =0,0245%b/v

b. Kadar 80%

80100

X 0,035% = 0,028%b/v

c. Kadar 90%

90100

X 0,035% = 0,0315%b/v

d. Kadar 100%

100100

X 0,035% = 0,035%b/v

e. Kadar 110%

110100

X 0,035% = 0,0385%b/v

f. Kadar 120%

120100

X 0,035% = 0,042%b/v

g. Kadar 130%

130100

X 0,035% = 0,0455%b/v

Seri kadar (70%) Berat Sampel (mg) Kadar (%b/v)

70 494,13 0,024

80 564,72 0,028

90 635,31 0,0315

100 705,9 0,035

110 776,49 0,0385

120 847,08 0,042

130 917,67 0,0455

Data Penimbangan

70%

Berat Kertas : 0,2546

Berat Kertas +zat :0,7503

Berat Kertas + sisa :0,2558

Berat sampel :0,4945

80%




Berat sampel :0,565

90%





100%




Berat sampel :0,705

110%





120%





130%





Hasil Percobaan

ORIENTASI

Seri

Kadar

(%)

ABSORBANSI Qm Cy

(konsentrasi

kafein)

Linieritas (koefisien

korelasi)

244 nm 272 nm 261,6 nm 244

nm

272

nm

261,6

nm

70 1,306 0,378 0,682 0,554 9,394x10-5 0,958 0,961 0,959

80 1,379 0,394 0,712 0,553 9,223x10-5

90 1,487 0,427 0,771 0,554 1,017x10-4

100 1,628 0,469 0,846 0,554 1,116x10-4

110 1,775 0,509 0,915 0,556 1,251x10-4

120 1,849 0,536 0,962 0,557 1,338x10-4

130 2,291 0,657 1,182 0,556 1,616x10-4

Persamaan regresi linier : y= a +bx

Pada 244 nm Pada 272 nm Pada 261,6 nm

a= 0,180 a= 0,052 a= 0,101

b= 0,015 b= 0,004 b= 0,007

r= 0,958 r= 0,961 r= 0,959

REPLIKASI I

Seri Kadar

ABSORBANSI Qm Cy ( konsentrasi kafein)

Linieritas ( koefisien korelasi)

244 nm 272 nm 261,6 nm

244 nm

272 nm

261,6 nm

70% 1,206 0,342 0,624 0,548 7,355x10-5 0,989 0,996 0,99680% 1,339 0,381 0,693 0,550 8,478x10-5

90% 1,452 0,412 0,752 0,548 8,839x10-5

100% 1,505 0,431 0,782 0,551 9,755x10-4

110% 1,649 0,475 0,853 0,557 1,187x10-4

120% 1,734 0,494 0,893 0,553 1,157x10-4

130% 1,762 0,520 0,935 0,562 1,358x10-4

Persamaan regresi linier : y= a +bxPada 244 nm= Pada 272 nm Pada 261,6 nma= 0,573 a= 0,143 a= 0,278

b= 0,009 b= 0,003 b= 0,005r= 0,989 r= 0,996 r= 0,996

REPLIKASI II

Seri Kadar

ABSORBANSI Qm Cy ( konsentrasi

kafein)

Linieritas ( koefisien korelasi )

244 nm 272 nm 261,6 nm 244 nm

272 nm

261,6 nm

70% 1,177 0,333 0,609 0,547 7,012x10-5 0,975 0,978 0,97880% 1,224 0,347 0,634 0,544 6,844x10-5

90% 1,381 0,390 0,712 0,548 8,369x10-5

100% 1,455 0,412 0,750 0,549 8,996x10-5

110% 1,700 0,482 0,873 0,552 1,109x10-4

120% 1,708 0,481 0,877 0,548 1,031x10-4

130% 1,760 0,505 0,912 0,554 1,203x10-4



a= 0,402 a= 0,109 a= 0,211

b= 0,011 b= 0,003 b= 0,006

r= 0,975 r= 0,978 r= 0,978

REPLIKASI III

Seri Kadar

ABSORBANSI Qm Cy (konsentrasi

kafein )

Linieritas ( koefisien korelasi)

244 nm 272 nm 261,6 nm 244 nm

272 nm

261,6 nm

70% 1,146 0,322 0,592 0,544 6,391x10-5 0,979

0,978 0,98080% 1,253 0,354 0,647 0,547 7,450x10-5

90% 1,324 0,372 0,682 0,545 7,526x10-5

100% 1,405 0,398 0,727 0,547 8,371x10-5

110% 1,653 0,470 0,853 0,551 1,064x10-4

120% 1,733 0,490 0,889 0,551 1,109x10-4

130% 1,758 0,497 0,905 0,549 1,1086x10-

4



a= 0,351 a= 0,095 a= 0,187

b= 0,011 b= 0,003 b= 0,006

r= 0,979 r= 0,978 r= 0,980

Perhitungan

λ PARASETAMOL = 244 nm

λ KAFEIN = 272 nm ( A2)

λISOBESTIK = 261,6 nm ( A1)

A = .b.c (b =1cm)

1. Kafein

Pada 244 nm → = 0,253 x5001 x .0,2 %

= 632,5

Pada 272 nm → = 0,312 x 500

1 x0,2 % = 780

Pada 261,6 nm → = 0,291 x 500

1 x0,2 % = 727,5

2. Parasetamol

Pada 244 nm → = 1,589x 1000

1 x2 % = 794,5

Pada 272 nm → = 0,389 x1000

2 x2 % = 194,5

Pada 261,6 → = 0,779 x1000

1 x2 % = 289,5

MENENTUKAN NILAI Qx DAN Qy

Qx = ax2ax1

= 194,5389,5

= 0,499

Qy = ay 2ay 1

= 780

727,5 = 1,072

Perhitungan kadar kafein dalam sampel :

Cy = (Qm−Qx ) A 1(Qy−Qx ) Ay1

1. ORIENTASI

a. Seri kadar 70 %

Cy = (0,554−0,499 ) 0,682(1,072−0,499 )727,5

= 9,394x10-5

b. Seri kadar 80%

Cy = (0,553−0,499 )0,712(1,072−0,499 )727,5

= 9,223x10-5

c. Seri kadar 90%

Cy = (0,554−0,499 ) 0,771(1,072−0,499 )727,5

= 1,017x10-4

d. Seri kadar 100%

Cy = (0,554−0,499 ) 0,846(1,072−0,499 )727,5

= 1,16x10-4

e. Seri kadar 110%

Cy = (0,556−0,499 ) 0,915(1,072−0,499 )727,5

= 1,251x10-4

f. Seri kadar 120%

Cy = (0,557−0,499 ) 0,962(1,072−0,499 )727,5

= 1,338x10-4

g. Seri kadar 130%

Cy = (0,556−0,499 )1,182(1,072−0,499 )727,5

= 1,616x10-4

2. REPLIKASI I

a. Seri kadar 70%

Cy = (0,548−0,499 )0,624(1,072−0,499 )727,5

= 8,478x10-5

b. Seri kadar 80%

Cy = (0,550−0,499 )0,693(1,072−0,499 )727,5

= 8,478x10-5

c. Seri kadar 90%

Cy = (0,548−0,499 )0,752(1,072−0,499 )727,5

= 8,839x10-5

d. Seri kadar 100%

Cy = (0,551−0,499 )0,782(1,072−0,499 )727,5

= 9,755x10-5

e. Seri kadar 110%

Cy = (0,557−0,499 ) 0,853(1,072−0,499 )727,5

= 1,187x10-4

f. Seri kadar 120%

Cy = (0,553−0,499 )0,893(1,072−0,499 )727,5

= 1,157x10-4

g. Seri kadar 130%

Cy = (0,562−0,499 )0,925(1,072−0,499 )727,5

= 1,398x10-4

3. REPLIKASI II

a. Seri kadar 70%

Cy = (0,547−0,499 ) 0,609(1,072−0,499 )727,5

= 7,012x10-5

b. Seri kadar 80%

Cy = (0,544−0,499 ) 0,634(1,072−0,499 ) 727,5

= 6,844x10-5

c. Seri kadar 90%

Cy = (0,548−0,499 )0,712(1,072−0,499 )727,5

= 8,369x10-5

d. Seri kadar 100%

Cy = (0,549−0,499 )0,750(1,072−0,499 )727,5

= 8,996x10-5

e. Seri kadar 110%

Cy = (0,552−0,499 )0,873(1,072−0,499 )727,5

= 1,109x10-4

f. Seri kadar 120%

Cy = (0,548−0,499 )0,877(1,072−0,499 )727,5

= 1,031x10-4

g. Seri kadar 130%

Cy = (0,554−0,499 ) 0,912(1,072−0,499 )727,5

= 1,203x10-4

4. REPLIKASI III

a. Seri kadar 70%

Cy = (0,544−0,499 ) 0,592(1,072−0,499 )727,5

= 6,391x10-5

b. Seri kadar 80%

Cy = (0,547−0,499 ) 0,647(1,072−0,499 )727,5

= 7,450x10-5

c. Seri kadar 90%

Cy = (0,545−0,499 )0,682(1,072−0,499 )727,5

= 7,526x10-5

d. Seri kadar 100%

Cy = (0,547−0,499 ) 0,727(1,072−0,499 )727,5

= 8,371x10-5

e. Seri kadar 110%

Cy = (0,551−0,499 )0,853(1,072−0,499 )727,5

= 1,064x10-4

f. Seri kadar 120%

Cy = (0,551−0,499 )0,889(1,072−0,499 )727,5

= 1,109x10-4

g. Seri kadar 130%

Cy = (0,549−0,499 )0,905(1,072−0,499 )727,5

= 1,086x10-4

RIPITABILITAS

Seri Kadar Berat Sampel Kadar

70% 177,22 mg 0,01715 % b/v

80% 202,53 mg 0,0196 % b/v

90% 227,85 mg 0,02205 % b/v

100% 253,17 mg 0,0245 % b/v

110% 278,48 mg 0,02695 % b/v

120% 303,80 mg 0,0294 % b/v

130% 392,12 mg 0,03185 % b/v

Perhitungan Ripitabilitas

Tablet yang ditimbang = berat total 20 tablet

20=14,118 gram

20=705,9 mg

Kadar kafein

705,9 mg ~ 35 mg kafein ad 100 mL aquadest

Kadar kafein =

35 mg100 mL = 0,035% g/ 100 mL = 0,035% b/v

Absorbansi

Abs = 244,0

(Parasetamol) = 272,0 (kafein)

= 261,6 (isobestik)

I 0 2,217 0,417 0,745

R1 1,424 0,417 0,743

R2 1,418 0,409 0,741

R3 1,428 0,413 0,746

II 0 1,945 0,575 1,019

R1 1,948 0,577 1,021

R2 1,946 0,573 1,016

R3 1,949 0,571 1,018

III 0 2,208 0,666 1,167

R1 2,208 0,659 1,159

R2 2,208 0,658 1,159

R3 2,210 0,662 1,163

IV 0 2,011 0,596 1,047

R1 2,002 0,580 1,025

R2 2,029 0,601 1,041

R3 2,018 0,590 1,035

V 0 2,320 0,880 1,539

R1 2,320 0,868 1,515

R2 2,322 0,868 1,517

R3 2,324 0,862 1,519

VI 0 2,423 1,316 2,394

R1 2,427 1,434 2,426

R2 2,424 1,417 2,392

R3 2,420 1,422 2,412

VII 0 2,444 1,100 1,900

R1 2,422 1,097 1,899

R2 2,422 1,103 1,899

R3 2,424 1,105 1,894

Penimbangan Bahan (mg)

N B.K BK + zat BK + zat B.

o sisa zat

1259,0 964,5 259,8

704,7

2260,2 968,3 260,6

707,7

3260,9 967,0 261,0

706,0

4261,1 967,7 258,3

706,6

5260,8 968,0 261,0

707,0

6260,9 967,1 257,1

710,0

7261,1 966,5 260,1

706,4

8259,5 965,0 259,8

705,2

9260,3 968,9 260,9

708,0

10261,2 967,5 261,6

705,9

11261,5 968,0 261,9

706,1

12261,0 968,5 261,2

707,3

13261,1 967,3 261,5

705,8

14261,3 967,0 261,5

705,5

15259,4 964,9 259,7

705,2

16260,5 968,7 261,0

707,7

17261,0 967,3 261,3

706,0

18261,3 968,2 261,7

706,5

19261,7 968,7 262,0

706,7

20261,4 967,6 261,8

705,8

21261,8 967,4 262,0

705,4

22259,1 964,7 259,5

705,2

23260,8 968,5 261,1

707,4

24261,4 967,0 261,9

705,1

25260,9 967,6 261,4

706,2

26261,1 967,7 261,6

706,1

27260,7 967,2 261,3

705,9

28260,8 968,8 261,7

707,1

Perhitungan kadar standar

A = b. c

a. kaff =

Ab .c

244 =

0,253 x FP1 x 0,2 %

=

0,253 x 500 0,2

= 632,5 244

b. kaff 273

kaff =

0,312 x 5001. 0,2

= 780

c. kaff 261,6

kaff =

291 x 5001. 0,2

= 272,5

Rumus kadar kaffein dengan metode rasio abs =

Cy = (Qm – Qx) . A1 / (Qy – Qx) . ay1

Ket :

Qm = A2/ A1

Qx = ax2 / ax1

Qy = ay2 / ay1

Ket :

A2 = absorbansi (sampel) campuran caffeine pada 272 nm (caff)

A1 = absorbansi (sampel) campuran caffeine pada 261,6 nm (PCT)

ax1 = absorbansi PARA 261,6 nm

ay1 = absorbansi CAF 261,6 nm

ax2 = absorbansi PARA 273 nm

ay2 = absorbansi CAF 273 nm

PCT standar :

PCT =

1,589 x 10001 x 2% = 794,5 244

PCT =

0,389 x 10001 x 2% = 194,5 272

PCT =

0,779 x 10001 x 2% = 389,5 261,6

Perhitungan Qm

1. Qm =

A2

A1

=0 , 4170 , 745 = 0,559

2. Qm =

0 ,4170 ,743 = 0,561

3. Qm =

0 ,4090 ,741 = 0,551

4. Qm =

0 ,4130 ,746 = 0,553

5. Qm =

0 ,5751 ,019 = 0,564

6. Qm =

0 ,5771 ,021 = 0,565

7. Qm =

0 ,5731, 016 = 0,563

8. Qm =

0 ,5711, 018 = 0,560

9. Qm =

0 ,6661 ,167 = 0,570

10. Qm =

0 ,6591 ,167 = 0,568

11. Qm =

0 ,6581 ,159 = 0,567

12. Qm =

0 ,6621 ,163 = 0,569

13. Qm =

0 ,5961 ,047 = 0,569

14. Qm =

0 ,5801 ,025 = 0,565

15. Qm =

0 ,6011 ,041 = 0,577

16. Qm =

0 ,5901 ,035 = 0,570

17. Qm =

0 ,8801 ,539 = 0,572

18. Qm =

0 ,8681 ,515 = 0,573

19. Qm =

0 ,8681 ,517 = 0,572

20. Qm =

0 ,8621 ,519 = 0,567

21. Qm =

1 ,3162 ,394 = 0,549

22. Qm =

1, 4342 ,426 = 0,591

23. Qm =

1, 4172 ,392 = 0,592

24. Qm =

1, 4222 ,412 = 0,589

25. Qm =

1 ,1001,900 = 0,579

26. Qm =

1, 0971 ,899 = 0,578

27. Qm =

1 ,1031,899 = 0,581

28. Qm =

1 ,1051, 894 = 0,583

Qx =

ax2

ax1

=194 ,5389 , 5

= 0,499

Qy =

ay2

ay1

=780272 , 5 = 2,862

Kadar Ck =

(Qm - Qx ) . A1

(Qy - Qx ) ay1

1. C =

(0,559 - 0,499 ) . 0,745(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 6,94 x 10-5

Kadar = 6,94 x 10-5 x 200 / 0,7047 x 100%

= 1,97 % b/b

2. C =

(0,561 - 0,499 ) . 0,743(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 6,97 x 10-5

Kadar = 6,97 x 10-5 x 200 / 0,7077 x 100%

= 1,97 % b/b

3. C =

(0,551 - 0,499 ) . 0,741(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 5,98 x 10-5

K adar = 65,98 x 10-5 x 200 / 0,706 x 100%

= 1,69 % b/b

4. C =

(0,553 - 0,499 ) . 0,746(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 6,26 x 10-5

K adar = 6,26 x 10-5 x 200 / 0,7066 x 100%

= 1,77 % b/b

5. C =

(0,564 - 0,499 ). 1,019(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,03 x 10-4

Kadar = 1,03 x 10-4 x 200 / 0,703 x 100%

= 2,93 % b/b

6. C =

(0,565 - 0,499 ) . 1,021(2,862 - 0,499) . 272,5 = 1,05 x 10-4

K adar = 1,05 x 10-4 x 200 / 0,710 x 100%

= 2,96 % b/b

7. C =

(0,563 - 0,499 ) . 1,016(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,01 x 10-4

K adar = 1,01 x 10-4 x 200 / 0,7064 x 100%

= 2,86 % b/b

8. C =

(0,560 - 0,499 ) . 1,018(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 9,643 x 10-5

K adar = 9,643 x 10-5 x 200 / 0,7052 x 100%

= 2,73 % b/b

9. C =

(0,570 - 0,499 ) . 1,167(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,29 x 10-4

K adar = 1,29 x 10-4 x 200 / 0,708 x 100%

= 3,64% b/b

10. C =

(0,568 - 0,499 ) . 1,159(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,24 x 10-4

Kadar = 1,24 x 10-4 x 200 / 0,7159 x 100%

= 3,51% b/b

11. C =

(0,567 - 0,499 ) . 1,159(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,22 x 10-4

K dar = 1,22 x 10-4 x 200 / 0,7061 x 100%

= 3,46 % b/b

12. C =

(0,569 - 0,499 ) . 1,163(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,26 x 10-4

Kadar = 1,26 x 10-4 x 200 / 0,7073 x 100%

= 3,563 % b/b

13. C =

(0,569 - 0,499 ) . 1,047(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,138 x 10-4

K = 1,138 x 10-4 x 200 / 0,7058 x 100%

= 3,910 % b/b

14. C =

(0,565 - 0,499 ) . 1,025(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,05 x 10-4

K adar = 1,05 x 10-4 x 200 / 0,705,5 x 100%

= 2,98 % b/b

15. C =

(0,577 - 0,499 ) . 1,041(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,26 x 10-4

Kadar = 1,26 x 10-4 x 200 / 0,7052 x 100%

= 3,57 % b/b

16. C =

(0,570 - 0,499 ) . 1,035(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,14 x 10-4

Kadar = 1,14 x 10-4 x 200 / 0,7077 x 100%

= 3,22 % b/b

17. C =

(0,572 - 0,499 ) . 1,539(2,862 - 0,499) . 272,5 = 1,745 x 10-4

Kadar = 1,745 x 10-4 x 200 / 0,706 x 100%

= 4,94 % b/b

18. C =

(0,573 - 0,499 ) . 1,515(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,741 x 10-4

K adar = 1,741 x 10-4 x 200 / 0,7065 x 100%

= 4,93 % b/b

19. C =

(0,572 - 0,499 ) . 1,517(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,719 x 10-4

Kadar = 1,79 x 10-4 x 200 / 0,7067 x 100%

= 4,86 % b/b

20. C =

(0,549 - 0,499 ) . 1,519(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,179 x 10-4

Kadar = 1,179 x 10-4 x 200 / 0,7058 x 100%

= 3,34 % b/b

21. C =

(0,549 - 0,499 ) . 2,394(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 1,86 x 10-4

Kadar = 1,86 x 10-4 x 200 / 0,7054 x 100%

= 5,27 % b/b

22. C =

(0,591 - 0,499 ) . 2,426(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 3,47 x 10-4

Kadar = 3,47 x 10-4 x 200 / 0,7052 x 100%

= 9,84 % b/b

23. C =

(0,592 - 0,499 ) . 2,392(2,862 - 0,499 ) . 272,5 = 3,45 x 10-4

Kadar = 3,45 x 10-4 x 200 / 0,7074 x 100%

= 9,75 % b/b

24. C =

(0,589 - 0,499 ) . 2,412(2,862 - 0,499) . 272,5 = 3,37 x 10-4

Kadar = 3,37 x 10-4 x 200 / 0,7051 x 100%

= 9,56 % b/b

25. C =

(0,579 - 0,499 ) . 1,900(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 2,36 x 10-4

Kadar = 2,36 x 10-4 x 200 / 0,7062 x 100%

= 6,69 % b/b

26. C =

(0,578 - 0,499 ) . 1,899(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 2,33 x 10-4

Kadar = 2,33 x 10-4 x 200 / 0,7061 x 100%

= 6,59 % b/b

27. C =

(0,585 - 0,499 ) . 1,899(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 2,42 x 10-4

Kadar = 2,42 x 10-4 x 200 / 0,7059 x 100%

= 6,86 % b/b

28. C =

(0,583 - 0,499 ) . 1,894(2,862 - 0,499 ). 272,5 = 2,47 x 10-4

Kadar = 2,47 x 10-4 x 200 / 0,7071 x 100%

= 6,99 % b/b

SD = 2,38

RSD =

2,384,52

x 100%

= 53% > 2 % Tidak terima

No Abs

X + SD

Kadar (%)

X + SD

1

2

3

4

5

6

7

0,413 + 0,004

0,576 + 0,002

0,660 + 0,002

0,590 + 0,011

0,866 + 0,003

1,424 + 0,009

1,102 + 0,004

1,81 + 0,144

2,85 + 0,115

3,51 + 0,052

3,26 + 0,297

4,38 + 0,898

9,72 + 0,143

6,81 + 0,204

RSD 0,6% 5,73%

RSD abs =

(0,04 + 0,02 + 0,002 + 0,011 + 0,002+ 0,009 + 0,004 )(0,413 + 0,576+0,660+0,590+0,866+1,424+1,102)

x 100%

=

0,0355,631

x 100%

= 0,6 % < 2 % diterima

RSD kadar =

(0,144 + 0,115 + 0,052 + 0,297 + 0,898+ 0,143 + 0,204 )(1,81 + 2,85+3,51+3,26 +4,38+9,72+6,81 )

x 100%

=

1,85332,34

x 100%

= 5,73 % < 2 % tidak diterima

PRESISI ANTARA

DATA PENIMBANGAN

Orientasi

1 2 3 4 5 6 7

Berat kertas kosong 0,2509 0,2498 0,2474 0,2489 0,2528 0,2609 0,2510

Berat kertas + zat 0,9475 0,9455 0,9551 0,9463 0,9630 0,9675 0,9528

Berat kertas +zat sisa 0,2517 0,2500 0,2467 0,2490 0,2531 0,2610 0,2517

Berat zat 0,6958 0,6955 0,7075 0,6973 0,7089 0,7069 0,7011

Replikasi

1 2 3 4 5 6 7

Berat kertas kosong 0,2520 0,2525 0,2493 0,2510 0,2346 0,2410 0,2407

Berat kertas + zat 0,9610 0,9518 0,9525 0,9534 0,9450 0,9450 0,9458

Berat kertas +zat sisa 0,2552 0,2557 0,2517 0,2518 0,2415 0,2415 0,2410

Berat zat 0,7049 0,6961 0,7008 0,7016 0,7035 0,7035 0,7048

DATA ABSORBANSI

Orientasi Replikasi I

272 244 251,6 272 244 261,6

I 0,530 1,708 0,920 0,572 1,913 1,063

II 0,484 1,558 0,854 0,529 1,804 0,966

III 0,488 1,631 0,881 0,563 1,900 1,021

IV 0,682 1,979 1,126 0,572 1,921 1,032

V 0,440 1,479 0,800 0,568 1,902 1,028

VI 0,417 1,422 0,759 0,581 1,814 1,001

VII 0,485 1,648 0,883 0,601 1,898 1,041

PERHITUNGAN

a. Orientasi

1. Qm=0,5300,920

=0,576

Caff =(0,576−0,499 ) .0,920(2,862−0,499 ) .272,5

=0,07084643,918

=1,100 x 10−4 x 200=0,022bv

Kadarbb=

0,022g

100 ml

0,698g

100 ml

x100 %=3,151 %bb

2. Qm=0,4840,854

=0,567

Caff =(0,567−0,499 ) .0,854(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0581643,918

=9.023 x 10−5 x200=0,018bv

Kadarbb=

0,018g

100 ml

0,6955g

100ml

x100 %=2,588 %bb

3. Qm=0,4880,881

=0,554

Caff =(0,554−0,499 ) .0,881(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0485643,918

=7,532 x10−5 x200=0,0151bv

Kadarbb=

0,0151g

100 ml

0,7075g

100ml

x100 %=2,134 %bb

4. Qm=0,6821,126

=0,606

Caff =(0,606−0,499 ) .1,126(2,862−0,499 ) .272,5

=0,12048643,918

=1,871 x10−4 x200=0,0374bv

Kadarbb=

0,0374g

100ml

0,698g

100 ml

x 100 %=5,364 %bb

5. Qm=0,4400,800

=0,55

Caff =(0,550−0,499 ) .0,800(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0408643,918

=6,336 x10−5 x 200=0,0127bv

Kadarbb=

0,0127g

100ml

0,7089g

100ml

x100 %=1,792 %bb

6. Qm=0,4170,759

=0,549

Caff =(0,549−0,499 ) .0,759(2,862−0,499 ) .272,5

=0,04795643,918

=5,984 x10−5 x 200=0,01179bv

Kadarbb=

0,01179g

100 ml

0,7065g

100 ml

x 100 %=1,669 %bb

7. Qm=0,4850,885

=0,549

Caff =(0,549−0,499 ) .0,885(2,862−0,499 ) .272,5

=0,04415643,918

=6,856 x10−5 x 200=0,0137bv

Kadarbb=

0,0137g

100ml

0,7011g

100 ml

x100 %=1,954 %bb

b. Replikasi I

1. Qm=0,5721,036

=0,552

Caff =(0,552−0,499 ) .1,036(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0549643,918

=8,527 x10−5 x 200=0,017bv

Kadarbb=

0,017g

100 ml

0,966g

100 ml

x100 %=2,149 %bb

2. Qm=0,5290,996

=0,548

Caff =(0,548−0,499 ) .0,996(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0469643,918

=7,294 x 10−5 x200=0,0145bv

Kadarbb=

0,0145g

100ml

0,6961g

100 ml

x100 %=2,096 %bb

3. Qm=0,5631,021

=0,551

Caff =(0,551−0,499 ) .1,021(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0535643,918

=8,312 x 10−5 x200=0,0166bv

Kadarbb=

0,0166g

100ml

0,7008g

100ml

x100 %=2,372 %bb

4. Qm=0,5721,032

=0,554

Caff =(0,554−0,499 ) .1,032(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,057643,918

=8,857 x 10−5 x200=0,0177bv

Kadarbb=

0,0177g

100ml

0,7016g

100ml

x100%=2,525 %bb

5. Qm=0,5681,028

=0,553

Caff =(0,553−0,499 ) .1,028(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0555643,918

=8,621 x10−5 x200=0,017bv

Kadarbb=

0,017g

100ml

0,7035g

100ml

x100%=2,451%bb

6. Qm=0,5811,001

=0,580

Caff =(0,580−0,499 ) .1,001(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0815643,918

=1,266 x10−4 x 200=0,025bv

Kadarbb=

0,025g

100ml

0,7035g

100ml

x100%=3,598%bb

7. Qm=0,6011,041

=0,577

Caff =(0,577−0,499 ) .1,041(2,862−0,499 ) .272,5

= 0,0815643,918

=1,266 x10−4 x200=0,025bv

Kadarbb=

0,025g

100ml

0,7048g

100ml

x100%=3,593%bb

PERHITUNGAN RSD KADAR

Orientasi (%bb) Replikasi (%

bb) x ± SD

3,151 2,419 2,785 ± 0,366

2,588 2,096 2,342 ± 0,3779

2,134 2,372 2,253 ± 0,1683

5,346 2,525 3,945 ± 2,007

1,792 2,451 2,1215 ± 0,3295

1,669 3,598 2,6335 ± 0,9645

1,954 3,593 2,7735 ± 0,8195

x 2,6934 ± 0,7147

RSD=SDx

x100 %

¿ 0,71472,6934

x 100 %

¿26,535% > 2 %

RSD tidak memenuhi

G. Pembahasan

Pada praktikum metode validasi penetapan kadar kafein dengan menggunakan

spektrofotometer metode rasio absorbansi, dilakukan dengan menentukan beberapa

parameter, yaitu parameter akurasi, parameter linearitas, parameter ripitabilitas, dan

parameter presisi antara. Validasi sendiri merupakan parameter yang digunakan untuk

mengetahui apakah metode yang digunakan sesuai dengan tujuan penggunaannya.

Metode rasio absorbansi merupakan metode yang menggunakan dua panjang

gelombang terpilih, satu titik isobestik ( titik perpotongan dua panjang gelombang) dan

lainnya merupakan panjang gelombang maksimal dari salah satu kedua senyawa

tersebut. Pada percobaan ini sampel yang diperoleh adalah kafein yang berkhasiat

sebagai stimulan saraf otak dan kardiotonikum. Dimana kafein ini terdapat dalam tablet

oskadon yang juga mengandung parasetamol. Sehingga metode ini dapat digunakan

untuk menetapkan kadar kafein sekaligus parasetamol.

Parameter akurasi merupakan parameter yang digunakan untuk melihat kedekatan

hasil uji dengan nilai yang sebenarnya. Syarat keberterimaannya adalah jika RSD <1%

dan Recoveri antara 98%-102%. Dalam percobaan ini dilakukan penimbangan 20 tablet

oskadon dan diperoleh bobot rata-rata sebesar ……mg. Kemudian hasil penimbangan di

bagi menjadi 4 kelompok (kelompok pertam dengan penambahan zat aktif 80%,

kelompok kedua dengan penambahan zat aktif 100%, kelompok ketiga dengan

penambahan zat aktif 120%, dan kelompok yang ke empat tanpa penambahan zat aktif).

Pada masing-masing kelompok dilakukan replikasi 3 kali. Pada percobaan ini

diperoleh…….

Parameter yang selanjutnya adalah parameter linearitas, parameter ini merupakan

parameter yang digunakan untuk melihat respon metode terhadap perubahan jumlah

sempel. Pada parameter ini akan terlihat apakah dengan kenaikan jumlah sampel akan

menaikkan respon ( dalam hal ini respon dalam bentuk absorbansi). Dimana syarat

keberterimaannya adalah jika r>0,98. Dalam pengerjaan parameter ini dengan membuat

sejumlah sempel range kadarnya antara 70%-130% didapatkan nilai r pada λ 244nm, 272

nm dan 261,6 nm untuk orientasi yaitu 0,958; 0,961; 0,959. Sedangkan untuk replikasi I

nilai r sebesar 0,989;0,996;0,996. Untuk replikasi II sebesar 0,975;0,978;0,978 dan untuk

replikasi III sebesar 0,979;0,978;0,980.

Parameter yang ketiga adalah parameter ripitabilitas, yaitu suatu parameter yang

digunakan untuk melihat tingkat kedekatan hasil uji pada hari yang sama atau pada

kondisi kerja yang normal dan bertujuan untuk memperoleh data keterulangan yang dapat

memenuhi syarat keberterimaan. Syarat keberterimaannya adalah jika RSD <2%. Dalam

percobaannya di peroleh hasil RSD untuk absorbansi sebesar 0,6 % (<2%) berarti

diterima sedangkan RSD untuk kadar sebesar 5,73% (>2%) berarti tidak diterima.

Parameter yang terakhir adalah presisi antara, yaitu suatu parameter yang di

gunakan untuk melihat tingkat kedekatan hasil uji pada kondisi percobaan yang berbeda.

Dalam praktiknya diperoleh hasil……………

H. Kesimpulan dan Saran

I. Daftar Pustaka

Jain, A. Neha et al., 2011, Spectrophotometric Determination of Naproxen and

Esomeprazole in a Laboratory Mixture by Simultaneous Equation, Absorption

Correction, Abrorbtion Rasio and Area Under Curve Method, IJPSR, 2(5), 130-

134.

Yu Cesoi, Cem., 2000, Simultaneous Spectrophotometric Determination of Estradiol

Vallerate and Cyproterone Acetate, J.Fac.Pharm, Ankara, 29, 9-19.

Lin, Zhenyu et al., 2001, A New Method of Fourier-transform Smoothing With Rasio

Spectra Derivative Spectrophotometry, Fresenius J Anal Chem, 370, 997-1002.

J. Lampiran (Fotocopy prosedur resmi)

laporan resmi analisis farmasi

Documents