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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLINICO EHISTOPATOLOGICO

CTEDRA DE TCNICAS HISTOLGICAS

INFORME N 1

TTULO: CONTROL DE CALIDAD Y BIOSEGURIDAD

EN HISTOTECNOLOGA

TEMA: RECONOCIMIENTO DE UN LABORATORIO DEANATOMA PATOLGICA

INTEGRANTE:

BONIFAZ HIDALGO ANDREA FERNANDA

DOCENTE: LIC. IVAN PEAFIEL

FECHA DE ENTREGA: 04 DE OCTUBRE DEL 2015

PERODO ACADMICO: OCTUBRE 2015- FEBRERO 2016

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TEMA: RECONOCIMIENTO DE UN LABORATORIO DEANATOMA PATOLGICA

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Identificar el rea de Anatomia patolgica

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Realizar reconocimiento del rea total requerida y distribucin para un

laboratorio de anatomia patolgica Observar los equipos y materiales necesarios en cada rea de trabajo en un

laboratorio de anatomia patolgica

Clasificar cada uno de los desechos generados dentro del rea de anatomia

patolgica

FUNDAMENTO TERICO O CONTENIDO CIENTFICO

Las tcnicas histolgicas realizadas en los centros de anatoma patolgica, vamos a

describir los procesos experimentales necesarios para obtener secciones teidas y listas

para observar al microscopio partiendo de tejidos obtenidos por biopsia o autopsia. Por

tanto, dedicaremos espacios a la obtencin, fijacin, inclusin, corte y tincin de lostejidos. (1)

Obtencin del tejido: Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas: Biopsia

Autopsia

Fijacin: En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar

los cambios post-mortem.

Unos de los fijadores ms usado es el Formol al 10% (Formaldehido) formol

Inclusin: Se debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador, luego se deshidrata y se

pasa por un lquido intermediario que es miscible con la parafina. (2)

Infiltracin En este paso la muestra se coloca en parafina liquida, de manera que se

impregne con ella. (1)

Inclusin Aqu se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques estn las

muestras a estudiar. Se deja enfriar para que adquiera dureza.

Corte: Tallado Previo al corte, se debe tallar el bloque para el obtener secciones

adecuadas en el micrtomo.

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El micrtomo es un instrumento que permite obtener cortes muy delgados de muestra

(5m). micrtomo

Los cortes se obtienen seriados, uno tras otro, obteniendo una cinta.

Luego se echan a un bao de flotacin para que se estiren y se rescatan con un

portaobjetos, que luego se calienta para evaporar el agua y que los cortes queden

adheridos.

Tincin: Las placas se tien con la tcnica de hematoxilina/eosina u otra especial.

La muestra debe desparasitarse y pasar por una serie de soluciones.

Finalmente, las muestras se deshidratan y se montan para ser vistas al microscopio.

Observacin: El patlogo observa la muestra al microscopio y consigna el diagnstico.

(3)

FIJACIN

La fijacin es el paso ms importante al llevar a cabo las tcnicas de preparacin de

muestras histolgicas. No importa el cuidado con el que procese y seccione las muestras

de tejido, los detalles morfolgicos esenciales solo se mostraran si el tejido se fija de

manera adecuada y rpida

Casi siempre es ms difcil seccionar las muestras mal fijadas que aquellas que

estn bien fijadas

Los tejidos mal fijados siempre mostraran menos caractersticas morfolgicas,aunque se hayan procesado de manera ptima y con cuidado

PROCESAMIENTO DE TEJIDOS

Los tres pasos del procesamiento de tejidos (deshidratacin, aclaramiento e infiltracin)

son pasos secuenciales designados para remover toda el agua que se puede extraer de

los mismos y reemplazarla con un medio que se solidifique. (4)

A) DESHIDRATACIN

Es necesario que se quite el agua de las muestras para que luego se puedan cortar con el

micrtomo. La deshidratacin se obtiene con alcohol etlico de graduacin creciente,

comenzando por el alcohol 70, luego tres alcoholes 96 (para completar las 24hs.).

Luego tres alcoholes de 100 (durante 24hs aproximadamente).

Recordando que la deshidratacin incompleta perjudica la inclusin y, en cambio, la

permanencia prolongada en alcohol absoluto no altera las piezas, es preferible emplear

el tiempo de permanencia en el bao de deshidratacin. (4)

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Los procesadores automticos de tejidos perfeccionan el procesamiento mediante el uso

de calor, vaco, presin, y agitacin, tambin logran que tengan lugar durante la noche

sin la presencia del personal, ste mtodo es el utilizado en el laboratorio. (4)

B) ACLARACIN.

Terminada la deshidratacin las muestras se hallan embebidas en alcohol absoluto. La

parafina, que debe penetrarlos, es insoluble en el alcohol, de ah la necesidad de un

lquido intermediario que sea miscible al mismo tiempo en el alcohol 100 y la

parafina.

Se utiliza para este fin el xilol. Cuando las muestras se hallan impregnadas en solvente,

adquieren una acentuada transparencia, considerndose a esta como ndice de

penetracin.

C) IMPREGNACIN EN PARAFINA (IMBIBICION)

Es necesario mantener tres recipientes con parafina de 58C-60C de punto fusin, en

forma lquida. El tiempo total de procesamiento est estimado en un mnimo de 3-4hs a

24hs, segn el tamao de la muestra. (4)

Un bloque de parafina ser difcil de seccionar, a no ser que una muestra bien fijada sea

procesada de la manera adecuada utilizando un programa apropiado

Las muestras pueden estar poco procesadas( muestras demasiado grande,

programa demasiado breve) o demasiados procesadas (programa demasiado

largo para el tamao y la naturaleza de la muestra). En ambos casos, pueden ser

difcil o imposible realizar un corte.

Existen varias tcnicas que se pueden utilizar para obtener secciones de bloques

difciles.

Si es difcil seccionar el bloque porque el tejido es duro, la superficie expuesta

puede empaparse en agua fra o en un agente reblandecedor, como una solucin

de detergente blando, suavizante.

Para muestras calcificadas, pueden aplicar un agente decalcificador, durante

10min o ms, en el tejido expuesto, ello le permitir obtener varias secciones.

Enjuague bien los bloques antes de montarlos en el porta muestras del

micrtomo y de volver a cortarlos, ya que los restos del agente de

descalcificacin daara la placa de presin del porta cuclillas.

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Evitar aquellas secciones de bloques difciles en los que la fijacin, el

procesamiento o la infiltracin puede ser errnea y los mtodos de cortes

normales no se realizan con xito.

Cuando es imposible obtener secciones de un bloque porque la muestras ha sido

incorrectamente procesada en primera instancia, puede ser posible reprocesarlo

INCLUSIN DE TEJIDOS EN PARAFINA

Realice la inclusin de las muestras con cuidado

La inclusin es un paso importante que precisa una aproximacin cuidadosa, una

inclusin poco cuidadosa puede hacer la microtoma mucho ms difcil

No llenar lo suficiente el molde de inclusin puede dar lugar a una sujecin

inestable en el micrtomo y originar cortes de distintos espesor uno grueso y

despus otro fino y otros problemas

Evitar llenar excesivamente los moldes de inclusin, porque esto puede interferir

con la alineacin correcta de la cara del bloque durante el corte

Cualquier exceso de parafina en la parte exterior del molde de inclusin debera

der eliminado antes de sujetarlo, para asegurarse de que el bloque esta sujeto con

firmeza durante el seccionamiento

MICROTOMA

La posicin del micrtomo en el laboratorio es importante

Coloque el micrtomo en un lugar estable, lejos de rfagas de aire, puertas y

puntos de paso. Cualquier movimiento del aire debido a los equipos de aire

acondicionando u otras causas pueden hacer que el tratamiento de la seccin sea

muy difcil

Es preferible utilizar un banco ajustable en altura y una silla ergonmica

Es muy importante que el personal no este distrado al usar en micrtomo por los

riesgos de lesionarse con el cuchillo afilado. Al colocar los micrtomos en un

laboratorio debera considerarse el potencial para interactuar con otros miembros

del personal.

Es preferible tener un sueldo antideslizante en las inmediaciones de los

micrtomos porque, inevitablemente, los fragmentos de parafina caern al suelo

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y pueden originar una superficie resbaladiza. Muchos laboratorios usan esterillas

antideslizantes para que el entorno sea ms seguro.

ESTUDIE LAS CARACTERTICAS DEL DISEO DE SU MICROTOMO Y

APRENDA A UTILIZARLAS

Los micrtomos con retraccin estn diseados para que la muestras se retire de la

cuchilla en la carrera ascendente. Es importante saber si su micrtomo tiene esta

prestacin.

La posicin retrada es una caracterstica de diseo que proporciona distintas

ventajas durante el corte y prolonga la vida de la cuchilla

Al usas un micrtomo de retraccin, el alineamiento de la cara del bloque alborde de la cuchilla deber ser efectuad con el bloque en la carrera

descendente ( en la posicin avanza- no retrada)

Si un bloque est alineado cerca del borde de la cuchilla mientras el brazo de

la muestras est en la posicin retrada mas el grosor de la seccin

seleccionada. Esto provocara que se cortara un trozo grueso que podra

daar tanto la muestras como la cuchilla

Los micrtomos tambin pueden ser manuales, semimotorizados o

completamente motorizados.

Los equipos motorizados reducen los movimientos repetitivos que pueden

contribuir a desarrollar enfermedades msculos- esqueltico.

GENERADORES DE RESIDUOS

Los generadores de residuos producen residuos slidos y lquidos de naturaleza

infecciosa y no infecciosa, como consecuencia de sus actividades docentes,

administrativas, asistenciales y de investigacin. Los diferentes tipos de residuos pueden

ser colectados separadamente y consolidados por tipo hasta el momento del retiro,

llevndose a cabo las manipulaciones pertinentes para asegurar su correcto

almacenamiento y reducir el impacto sanitario o de seguridad que puedan producir. (5)

El uso de bolsas de distinto color establece la naturaleza del contenido de las mismas,

por consiguiente se debe descartar los materiales en bolsas de color adecuado de

acuerdo a las convenciones de identificacin de riesgo a saber:

Bolsas negras: residuos de tipo no infeccioso o riesgoso Bolsas rojas: residuos patognicos

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Bolsas amarillas: residuos especiales

Bolsas negras: Contiene residuos producidos en dependencias administrativas, reas sin

restriccin, depsitos, talleres y sitios de actividades auxiliares y generales, que no

representan peligro para la salud, propios de la actividad cotidiana (envases descartables

plsticos, papeles, etc.), sin embargo al proceder de una institucin pblica se debe

evitar o minimizar el contacto de los mismos con terceros que los manipulen. Para eso

se separan las bolsas negras y se depositan en contenedores en la va pblica

inmediatamente antes de la recoleccin, evitando que las bolsas queden expuestas.

Bolsas rojas; Contiene residuos peligrosos para la salud humana tales como:

1. Materiales provenientes de actividad asistencial: Algodn, gasas, vendas, guantes,

tela adhesiva, apsitos, compresas, campos descartables, provenientes de intervenciones

quirrgicas menores (curaciones, por ejemplo), pipetas para nebulizaciones, envases de

vacunas a virus vivos atenuados (BCG, Sabin, triple viral, varicela), espculos, hisopos,

esptulas y todo material descartable utilizado en la consulta y toma de muestras en

tocoginecologa, tejidos removidos por curaciones o intervenciones quirrgicas

menores, jeringas descartables. (5)

2. Materiales provenientes de actividad docente o de investigacin: cadveres de

animales de experimentacin, sus camas y excretas, materiales biolgicos y de toma de

muestra provenientes de los servicios asistenciales de microbiologa, cultivos

bacterianos, sueros animales o humanos, materiales genticos recombinantes.

Bolsas amarillas: Se utilizaran solamente para el descarte de residuos especiales que

por sus caractersticas -corrosividad, explosividad, inflamabilidad, toxicidad,

radioactividad, reactividad - constituyen un peligro para la salud, aun sin haber sido

usados.

Entran dentro de esta categora de Residuos Especiales:

las sustancias inflamables,d iluyentes, o corrosivos.

los materiales radiactivos o contaminados con radioistopos de baja actividad,

provenientes de los servicios de radiologa, radioterapia y otros usuarios de

radionucleidos.

Estos materiales son normalmente slidos o lquidos (jeringas, papel absorbente,

frascos, lquidos derramados, orina, heces),

las drogas quimioteraputicas, antineoplsicas, plaguicidas fuera de

especificacin, solventes, mercurio de termmetros rotos, soluciones de reveladode radiografas, bateras usadas, aceites y lubricantes usados, entre otros.

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los medicamentos vencidos, contaminados, desactualizados, no utilizados, etc.

Las sustancias cancergenas y todo material que haya estado en contacto con

ellas (tubos plsticos, paos absorbentes, etc) los animales de experimentacin

sometidos a tratamientos con sustancias cancergenas

Todo residuo patognico deber ser almacenado en bolsas de polietileno hasta su

tratamiento final, la cual deber contar con las siguientes caractersticas: espesor

mnimo 120 micrones, ser impermeable, de color rojo y doble costura, estar

debidamente rotulada en un tamao de letra no menor de tres (3) cm, un precinto

inviolable y combustible para cierre.

Se detallarn los contenidos en etiquetas adhesivas de la siguiente manera:

Fecha

Procedencia (generador identificado)

Descripcin breve del contenido

Riesgo del contenido e indicaciones para su manipulacin

Los residuos que contengan elementos punzantes o cortantes debern ser colocados en

recipientes resistentes a perforacin o golpe, previo su introduccin en la bolsa plstica.

En caso de residuos con alto contenido lquido deber colocarse en la bolsa material

absorbente, que impida su derrame. Las bolsas sern usadas hasta de su volumen para

facilitar el cierre (5)

MUESTRA: Instrumentos y equipos

MATERIALES, EQUIPOS

Macroscpica

Equipos o estacin de inclusin de tejidos en parafina

Plancha fra (5C)

Micrtomo

Bao de flotacin

Estufa de histopatologa

Batera de tincin

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PROCEIMIENTO

1. El estudiante recibir informacin sobre el rea, distribucin y elementos que

deben integrar el laboratorio de anatoma patolgica

2.

El estudiante observara, conocer y pondr en prctica los protocolos de

generacin y eliminacin de desechos

TCNICA

*El estudiante describir en su informe las reas, cada equipo que conforma la misma,

protocolos utilizados en la presente practica en lo que se refiere al reconocimiento del

rea de anatoma patolgica.

ANEXOS

En esta imagen se puede ver algunos

de los estudiantes y al docente dando

explicacin acerca del laboratorio

En la imagen se observa la colocacin

del material que pertenece a la

bioseguridad dentro del laboratorio

En la imagen se puede ver algunos

tipos de desechos como son los

comunes los infecciosos

En la imagen se puede ver la

colocacin correcta de los guantes

con respecto al uso del mandil

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Se observa la estacin de inclusin

de parafina y la plancha fra

En la imagen se puede ver las

respectivas explicaciones del

docente acerca de los cortes detejido

En la imagen se puede observar el

equipo del bao de frotacin

Se pueden observar las diferentes

cabinas de tincin

En la imagen se observa la

explicacin dirigida por el profesor

acerca del manejo del micrtomo

Se observa el equipo de micrtomo

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CONCLUSIONES

Como conclusin tememos que para un laboratorio de anatoma patolgica es

importante el reconocimiento del rea, el cual vayamos a trabajar.

Debemos conocer el uso adecuado de los equipos y materiales que se a utilizar,

ya que si no sabemos su uso correcto este puede alterar la muestra la cual

vayamos analizar.

RECOMENDACIONES

Como recomendacin tenemos que el personal o la persona que se encuentre en

el laboratorio utilice correctamente las normas de seguridad ya que dentro del l

tiene muchos bacterias

Es importante que el personal circule por el lado derecho para que asi no exista

ningn coque con las otra personas

Cada equipo elimina desechos y estos debemos colocarles en los envases

correspondientes

BIBLIOGRAFIA

Rolls GO, Farmer NJ, Hall JB, Artifacts in Histological and Cytological Preparations.

Melbourne; Leica Microsystems, 2008: pag 106

SITIO WEB

1. (s.f.)., http://es.slideshare.net/cosaparahacerunblog/procesamiento-de-muestras-para-

anatoma-patolgica-5969905.

2. http://es.slideshare.net/cosaparahacerunblog/procesamiento-de-muestras-para-

anatoma-patolgica-5969905.

3. http://es.slideshare.net/cosaparahacerunblog/procesamiento-de- muestras-para-

anatoma-patolgica-5969905.

4. http://www.scba.gov.ar/pericial/laboratorios/LabAP.pdf.

5. www.fcm.unr.edu.ar/files/webmaster/Manejo_de_RESIDUOS.pdf.