histología y embriología

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Manual de Prcticas de Histologa y Embriologa

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia Subdireccin Acadmica rea de Docencia de Bsicas

MANUAL DE PRCTICAS DE HISTOLOGA Y EMBRIOLOGA

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I. CONTENIDO

Introduccin. 3

Presentacin 4

Prctica No.1 Estructura y manejo del microscopio ptico 11

Prctica No.2 Aparato reproductor del macho y de la hembra (Desarrollo y evolucin de los espermatozoides y de los vulos en tejido testicular y ovarios)

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Prctica No.3 Placentas 23

Prctica No.4 Recoleccin y envo de muestras para su estudio histolgico.. 25

Prctica No.5 Principios de la tcnica de histologa. 27

Prctica No.6 Epitelios.. 29

Prctica No.7 Tejido conjuntivo... 33

Prctica No.8 Sangre (tipo especial de tejido conectivo) 39

Prctica No.9 Msculo.. 41

Prctica No.10 Tejido seo. 43

Prctica No.11 Cartlago.. 45

Prctica No.12 Tejido nervioso 48

Prctica No.13 Identificacin microscpica de rganos parenquimatosos y tubulares 52

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Introduccin

El presente manual de prcticas de histologa y embriologa, se ha realizado con el

objetivo de que a travs de la observacin macroscpica y microscpica de los diferentes

tejidos que conforman el organismo de un mamfero (an antes de su nacimiento), los

discentes realicen las asociaciones cognitivas entre el conocimiento terico de los

fenmenos biolgicos como la meiosis, fecundacin sus consecuencias biolgicas, la

placentacin y la conformacin y origen de sus diferentes aparatos y sistemas, motivo de

estudio microscpico que en este manual abordaremos con la descripcin de la

arquitectura histolgica de los cuatro tejidos bsicos considerados en esta unidad de

aprendizaje: Tejido Epitelial; Tejido Conectivo; Tejido Muscular y Tejido Nervioso.

Finalmente integrando los conocimientos previos al reconocer, identificar y relacionar la

estructura microscpica de los dos tipos de rganos (organografa): rgano Tubular o

hueco y rgano compacto o parenquimatoso. Por otra parte, esperamos que este manual

guie al Docente en las diferentes prcticas a realizar y sea este documento la herramienta

necesaria para optimizar el tiempo dedicado a esta interesante y bsica actividad en la

vida del futuro Mdico Veterinario.

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PRESENTACIN

Cuanto mayor es el conocimiento de la estructura, la funcin y el desarrollo de los distintos organismos, ms se comprende que todos los procesos vitales exhiben notables similitudes, basadas en un sustrato celular comn. En la inmensa mayora de los casos, la clula no es observable a simple vista y es necesario utilizar sistemas de amplificacin para el estudio de su estructura. Es por ello, que el desarrollo de nuestra disciplina ha estado histricamente unido al descubrimiento y puesta a punto de nuevos aparatos y tcnicas de microscopa. Los primeros datos sobre la estructura fina de los organismos fueron obtenidos a partir de material no tratado, mediante la observacin directa realizada con la ayuda de aparatos de magnificacin. En este sentido, podramos situar el punto de partida de nuestra ciencia en la Grecia clsica con la observacin de plantas y animales mediante ampollas de cristal llenas de agua, diseadas por Euclides en el 390 a.C. y fabricadas por Aristteles (384-322 a.C.). En los primeros siglos de nuestra era destaca la figura de Galeno (131-200 d.C.), no solo recopila los conocimientos mdicos de su poca sino que realiza numerosos experimentos estableciendo nociones bsicas sobre la fisiologa del sistema circulatorio y del sistema nervioso. Estas observaciones y sus conclusiones en ocasiones errneas (se equivoca el cadver, no Galeno), se mantuvieron aceptadas durante muchos siglos, en parte por una aplicacin sesgada del principio de autoridad y por otra, por la ausencia de avances tcnicos significativos en nuestro campo conceptual. En la Edad Moderna se producen en Europa lentes de vidrio para mejorar la visin y comienza un lento desarrollo de instrumentos pticos. San Alberto Magno, considerado uno de los fundadores de la Escolstica al ser profesor de Toms de Aquino en la Sorbona, desarrolla la observacin y el estudio de fuentes de conocimiento directas frente a las indirectas (las recopilaciones de Aristteles y Galeno). En el Renacimiento se restaura el inters por el estudio del origen, composicin y desarrollo de animales y plantas. Es llamativo el avance en la morfologa, con las disecciones de personas y animales y que han quedado plasmadas en los maravillosos dibujos anatmicos de Leonardo da Vinci y en la impresionante obra de Andrs Vesalio De humani corporis fabrica. Aunque se ha atribuido a Galileo Galilei (1564-1642) el descubrimiento del microscopio compuesto, hay que esperar hasta finales del siglo XVI, concretamente a 1590, para un primer modelo comercial de microscopio compuesto, dedicado a los Gabinetes de Curiosidades y fabricado por los hermanos Jansen, Hans y Zacharias. Los Jansen asociaron en tubos telescpicos dos lentes convergentes llegando a obtener imgenes aumentadas hasta aproximadamente 150 veces, aunque mostraban imgenes defectuosas por las numerosas aberraciones pticas del sistema. Bacon von Verulam (1561-1630) y sus compaeros de la "Academia del Lince"Realizaron estudios sobre la naturaleza y desarrollo de los instrumentos pticos

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El nombre del nuevo instrumento microscopium, fue dado por esta organizacin de cientficos, an hoy activa, a un instrumento del taller de Cornelius Drebbel (1572-1633). Esta academia tuvo entre sus colaboradores a Galileo y a Stellutti (1577-1651), autor de trabajos al microscopio sobre la miel de las abejas y descripciones del ojo de los insectos. Anastasius Kircher (1602-1680) Acua el trmino "microscopio, en su libro "Ars Magna Lucis et Umbrae". Realiza una clasificacin somera de los microscopios conocidos en el siglo XVII. Realiz tambin observaciones en sistemas vivos que son recogidas en su obra "Scrutinium Pestes" (1658). Nacimiento de la Ciencia moderna. A pesar de los numerosos errores conceptuales, en estos primeros siglos de la Edad Moderna se van acumulando numerosas observaciones directas que influyen sobre las escuelas de pensamiento existentes. En el siglo XVII se publica El Discurso del Mtodo escrita por Ren Descartes hacia 1637. Con ella se separan definitivamente, y no solo en los anaqueles de las bibliotecas, la Fsica y la Metafsica. En la obra de Descartes se describen por primera vez los fenmenos naturales, incluyendo las respuestas de los seres vivos, como sucesos que responden a leyes generales, similares a las que rigen a los seres inanimados Robert Hooke (1635-1703). Es considerado como el descubridor de la clula. En su obra "Micrographia or some physiological descriptions of minute bodies made by magnifying glasses" (1665), Hooke describe las observaciones que realiz usando un microscopio compuesto cuyas lentes eran obtenidas por fusin de hilos de vidrio y se encontraban sujetas a un armazn de plomo. Realiz finos cortes en bloques de corcho y observ la existencia de una estructura en forma de panal y que denomin "cells" (o celdillas). No concibi esas clulas como unidades constitutivas de los seres vivos, para lo que habra que esperar casi doscientos aos ms hasta el establecimiento de Teora celular. Anton van Leeuwenhoek (1632-1723). Usaba un microscopio simple, de lentes por l pulidas y una mentalidad abierta, que le convirti en uno de los primeros corresponsales de la Royal Society fundada pocos aos antes en Londres. Realiz una descripcin detallada de numerosos tipos celulares tanto eucariticos como procariticos. En sus dibujos son fcilmente reconocibles mohos (1673), protozoos (1675) y bacterias (1683). Describi por primera vez los espermatozoides, los glbulos rojos, la estructura de la piel, la estriacin del msculo esqueltico y la estructura tubular de la dentina. Varios miembros de la Royal Society pudieron repetir sus observaciones y con ello se admiti la existencia de seres microscpicos, unicelulares, con vida independiente y que eran ubicuos en el agua, suelo, cuerpos, etc. Se le considera el primer usuario de un agente colorante histolgico, al emplear en 1714 una solucin de azafrn en vino para facilitar la observacin del msculo esqueltico. Nehemiah Grew (1691-1712). En su obra "Anatomy of plants" habla por primera vez de tejidos vegetales.

Marcello Malpighi (1628-1694). Describi los capilares sanguneos en el pulmn de la

rana, dando la prueba definitiva de la teora de la circulacin sangunea de Harvey. Es

tambin el primero que aplica el microscopio al estudio de embriones, describiendo

distintas fases del desarrollo en huevos de aves.

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De Graaf (1641-1673). Da a conocer los rganos reproductores de los mamferos,

describiendo los folculos que hoy llevan su nombre y postulando unas intuiciones

acertadas sobre su funcin.

Un ltimo microscopista clsico del siglo XVII. Frecuentemente ignorado en los libros de

Historia de la Ciencia, es el espaol Crisstomo Martnez, becado en Pars por su ciudad

natal, Valencia. Martnez investig el hueso con la ayuda del microscopio pero sus bellos

dibujos de la estructura interna de las trabculas seas permanecieron desconocidos a

sus contemporneos al no llegar a ser publicados.

Siglo XVIII, siglo de la Ilustracin. Hay una actitud optimista de crculos minoritarios

europeos sobre las posibilidades y frutos de la razn, la educacin y la ciencia, como

formas de resolver todos los problemas de la Humanidad. Mientras que los avances en la

Qumica o la Fsica son muy notables, no son tantos ni tan significativos en los estudios

biolgicos. Se avanza lentamente en la construccin de microscopios compuestos y se

logra la disminucin de las aberraciones cromtica y esfrica basndose en los

fundamentos tericos expuestos por Descartes y Newton.

Siglo XVIII, siglo de la Ilustracin. En este siglo slo hay casos aislados de investigadores

que acudan al uso del microscopio para una investigacin sistemtica y tengan en cuenta

sus enormes posibilidades. Uno de estos escasos microscopistas en este perodo es

Lieberkhn (1711-1756) quien desarrolla su trabajo en Berln.

Marie Francois Xavier Bichat. Xavier Bichat (1771) propone el trmino tejido para designar

las estructuras constituyentes de los organismos, observadas en las salas de diseccin

anatmica. Se manifiesta poco partidario del microscopio porque "da lugar a

interpretaciones subjetivas", aunque tuvo la intuicin de que en todos los rganos se

podan encontrar los mismos materiales bsicos, pero que stos se encontraban

agrupados de modo diverso en cada rgano.

Xavier Bichat propone: Todos los animales y el hombre son un conjunto de diversos

rganos, cada uno de los cuales desarrolla una funcin determinada. A su vez, cada

rgano estara constituido por varios tejidos o membranas, de los cuales llega a distinguir

21 tipos diferentes, atendiendo a sus caractersticas estructurales macroscpicas,

propiedades fsicas y alteraciones mrbidas. Por tanto, existe un primer concepto de tejido

bastante acertado, antes de que se plantee la Teora Celular y con ella el concepto

moderno de clula.

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Varias dcadas ms tarde, Meyer (1819, 1830), propone el trmino "Histologa" para

designar a la ciencia que estudia los tejidos descritos por Bichat y que anteriormente se

consideraba un apartado de la "Anatoma general".

Se escriben en estos aos grandes tratados que intentan recopilar y ordenar el

conocimiento cientfico universal en un rea determinada. Albrecht von Haller (1708-1777),

en su obra "Elementa physiologiae corporis humani", primera obra de Fisiologa, utiliza la

expresin tejido celuloso (conjuntivo laxo), y establece por primera vez la relacin entre

una funcin especfica y un tejido determinado.

En 1824 Chevalier construye un microscopio apocromtico y en 1840 el microscopio de

Plossl se difunde por distintas capitales europeas y es con el que trabajara, entre otros,

Purkinje

Purkinje. Profesor de Fisiologa y Patologa en Breslau, inventor del microtomo. Describe

en 1825 la vescula germinal del huevo de las aves y en 1836 las formaciones esfricas

del cerebro y del cerebelo que describi como estructuras homlogas. En las clulas del

cerebelo que ms tarde llevarn su nombre, observa y describe el nucleolo como un

grnulo central.

El perfeccionamiento de los microscopios hace que la observacin de los glbulos y

vesculas sea cada vez ms clara y patente. Una integracin de la Teora Fibrilar y la

Teora Globular se presenta con lo que Berg ha denominado Teora de la hilera de perlas,

que en el fondo lo que pretende es una persistencia de la teora fibrilar.

Dutrochet, 1824. El concepto de clula como unidad morfolgica y funcional bsica de los

seres vivos apareci en el siglo XIX, con un desarrollo especialmente significativo en las

cinco dcadas que van de 1830 a 1880. La clula es una entidad singular, aislable, que se

nutre por s misma, crece por s misma y elabora sus propios materiales.

Junto con Turpin, y ms explcitamente, un botnico Matthias Schleiden (1804-1881), y un

zologo Theodor Schwann (1810-1882), enuncian lo que se conoce universalmente como

Teora Celular.

El primer paso es dado por Schleiden al estudiar con el microscopio estructuras

meristemticas vegetales. En su libro Beitrge zur Phytogenesis, Schleiden determin

que las plantas eran estructuras multicelulares en las cuales las clulas eran sus unidades

morfolgicas y funcionales.

Theodor Schwann. El paralelismo estructural entre los tejidos animales y los vegetales fue

uno de los factores principales en el origen de la Teora Celular. Theodor Schwann en sus

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trabajos microscpicos sobre el desarrollo de anfibios y de los tejidos celulares

cartilaginosos publica un libro titulado Mikroskopische Untersuchungen ber die

bereinstimmung in der Struktur und dem Wachstum der Tiere und Pflanzen. Concluy

unos aos ms tarde Hemos derribado el gran muro de separacin entre los reinos

animal y vegetal.

Avances conceptuales fundamentales que se inician con la Teora Celular. La unidad

estructural de todos los seres vivos es la clula; las clulas se originan nicamente, y en

todos los casos, por divisin de otras clulas preexistentes; El control de la herencia

celular, que permite la invariancia general de la especie as como la variacin del

individuo, reside bsicamente en el ncleo o componentes nucleares de la clula.

Rudolf Virchow en 1856 afirma "la clula, como la forma ms simple de manifestacin vital

que, no obstante, representa totalmente la idea de vida, constituye la unidad orgnica, la

unidad viviente".La clula presupone la existencia de otra clula (omnis cellula e cellula),

al igual que la planta no puede proceder ms que de otra planta o el animal de otro

animal".

El abandono de la teora de la generacin espontnea gracias a los trabajos de Hermann

Hoffmann (1818-1891), y Louis Pasteur supuso un nuevo apoyo a la Teora Celular.

Bichat describi la existencia de veintin tejidos, entre los cuales distingua siete tejidos

generales y catorce tejidos especializados.

Schwann fue el primero en corregir esta clasificacin aplicando la nueva Teora Celular a

los tejidos animales.

As distingui slo cinco tipos de tejidos: 1) sangre, 2) piel, 3) tejidos calcificados en los

que incluy hueso y cartlago, 4) tejidos fibrosos que incluyen ligamentos y tendones, y 5)

tejidos sincitiales que abarcan a los tejidos muscular y nervioso.

La clasificacin de los tejidos vegetales corri a cargo de Von Mohl que distingui tejido

vascular, tejido cutneo y tejido parenquimtico.

Posteriormente Sachs en 1875 reclasific los tejidos vegetales en drmico, vascular y

fundamental, estableciendo adems que los tres tipos derivaban de los tejidos

meristemticos.

Lo ms importante de estos aos no es esta reclasificacin de los tejidos, sino la nueva

concepcin de los mismos.

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Empez a postularse la idea de que las diferencias entre unos tejidos y otros las marcaban

las clulas de cada uno de ellos, que estaban especializadas para realizar funciones

concretas.

Fue as como el estudio de los tejidos adquiri una nueva dimensin, entendindose su

estructura y su fisiologa a partir de la estructura y la funcin de las propias clulas

constituyentes. En definitiva, el tejido se entendi como la expresin del modo de

asociacin de los diferentes tipos celulares con el fin de realizar funciones especficas. Es

a partir de esta nueva concepcin cuando la Histologa adquiere la categora de ciencia tal

y como hoy la entendemos.

Los descubrimientos pticos, la mejora en la construccin de estativos y su exactitud,

unidos a una mayor facilidad de adquisicin suponen un apoyo considerable para la

difusin y uso del microscopio. A esta difusin contribuyen los descubrimientos de Amici

(1850), sobre el empleo de medios de inmersin como agua o aceite de ans, o el empleo

de la inmersin en aceite de cedro por Abbe y Zeiss.

En la segunda parte del siglo XIX se produce un gran avance de la tcnica histolgica,

especialmente en los aspectos de fijacin y tincin. Fijadores: bicromato potsico y el

yoduro de mercurio, formol (Blun, 1890), la mezcla de Bouin con cido pcrico, el diclorato

de mercurio (Lang, 1878), el cloruro de platino (Rabl, 1885), el formol-bromuro de Cajal, o

las mezclas de Zenker, Susa, Mller o Carnoy. Ramn y Cajal amplia y mejora el mtodo

de impregnacin argntica. La unin de un colorante bsico y otro cido (hematoxilina-

eosina), es utilizada por primera vez por Carl Busch (1877), siendo an en la actualidad la

tcnica electiva para la descripcin de una estructura a microscopa ptica. En 1889, Van

Gieson propone una tincin tricrmica con hematoxilina, fucsina cida y cido pcrico, que

desde entonces lleva su nombre. Numerosas otras tcnicas cuyo desarrollo hara

demasiado largo este apartado, tales como las de Mallory, Masson, Azan, Nissl, Gomori,

Bielschowsky, Bodian,... suponen tambin mejoras y la posibilidad de escoger el mtodo

ms adecuado al material objeto de estudio. El tejido se expresa la mayor parte de las

veces a travs de su tincin. No slo hay progresos en las tcnicas de tincin. En 1864,

Kleebs describe la inclusin en medios creos, que es mejorada por Paul Meyer (1848-

1923).

El microtomo tambin sufre una importante evolucin. Al proceder manual le ha sucedido una mecanizacin, con lo que se progresa desde los cortes irregulares y gruesos hacia el logro de una casi perfeccin en cortes seriados de aspecto uniforme y grosor constante. Todas estas mejoras tcnicas redundan en un aumento de los conocimientos tericos. Schleicher (1878), y Strasburger (1879), describen la divisin de las clulas vegetales, con

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el nombre de cariocinesis; y Fleming (1879, 1882), en clulas animales, denominndola mitosis, sealando sus diferentes fases. El microscopio de luz polarizada, construido gracias a los estudios sobre polarizacin de la luz de Nicol, permite la descripcin del msculo estriado por Brucke (1858), y los trabajos de Valentin (1810-1883), sobre rganos vegetales y tejidos animales. El siglo XX supone un cambio cualitativo en el cual la Biologa novecentista, basada en la tradicin descriptiva de la Historia Natural, se transforma en una ciencia experimental, rigurosa en sus anlisis e integradora en sus objetivos. El impresionante desarrollo industrial del siglo XX tiene un reflejo directo en la labor cientfica y en la mejora constante del instrumental disponible en el laboratorio. En la primera mitad del siglo XX surgen modificaciones que complementan el microscopio ptico y aumentan sus posibilidades de aplicacin. Por otro lado, se llevan a cabo estudios tericos que abrirn camino para el nacimiento de la microscopa electrnica. Nuevas variantes o complementos de la microscopa electrnica tales como el anlisis de difraccin de rayos X (Kendrew, 1963), y el anlisis de imagen (Perutz, 1963), son utilizadas por primera vez esos mismos aos. En 1965, la empresa Cambridge Instruments construye el primer modelo comercial de microscopio electrnico de barrido, diseado en 1948 por Datley. Con este aparato se consigue ya una visualizacin tridimensional de las estructuras a grandes aumentos. A lo largo del siglo XX se avanz considerablemente en la explicacin de los mecanismos de interaccin entre diferentes clulas y entre diferentes tejidos a lo largo del desarrollo pre y postnatal. Conclusin: La evolucin de los mtodos de investigacin, y los resultados obtenidos han ido cambiando la forma de entender los constituyentes de los seres vivos. Cada vez es ms claro que, al igual que el xito de un organismo depende del orden e integracin de un conjunto de tejidos y rganos especializados, dependientes a su vez de una perfecta organizacin y especializacin celular, las clulas son la expresin visible del perfecto orden y funcionamiento de molculas especficas.

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PRCTICAS

Prctica No. 1

Nombre:

Estructura y manejo del microscopio ptico.

Introduccin

A medida que transcurren los aos es mayor el nmero de mdicos veterinarios que

requieren del microscopio fotnico para desempear satisfactoriamente su trabajo. Por

esto resulta conveniente que desde el primer ao el discente se familiarice con el manejo

de este instrumento. Diversos aspectos prcticos de materias como histologa,

microbiologa, patologa y parasitologa se resuelven mediante el uso del microscopio. Por

tal motivo, el conocimiento de todas sus partes los mismo que la manera como cada una

de ellas contribuye a facilitar la observacin, son de utilidad para la formacin profesional.

El microscopio fotnico est constituido por una parte mecnica, una parte ptica y una

fuente de luz (Fig. 1)

Fig. 1. Microscopio ptico.

Parte mecnica. Esta parte est constituida por una base, un brazo, un cabezal o cabeza, un revlver, una platina, dos tornillos: a) uno macromtrico y b) uno micromtrico, un porta condensador y una cremallera. La base o pie generalmente tiene forma de herradura, adems de sostener todo el peso del microscoio, le da solidez y estabilidad al aparato. En un gran nmero de modelos de microscopios en esta parte se encuentra incorporada la fuente de luz. El brazo o columna sirve de asa para sujetar y transportar el microscopio. De preferencia, adems de tomarlo con una mano del brazo o columna, es recomendable tomar la base con la otra. En la columna estn contenidos los tornillos macromtrico y

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micromtrico que son los que elevan o descienden la platina, la cual se apoya a la columna. Tambin en la columna se apoyan el soporte del condensador diafragma as como el tornillo y la cremallera que regulan su movimiento. La cabeza o cabezal se encuentra hacia el extremo superior del microscopio; tiene la forma de una media esfera, su funcin es servir de sostn al prisma de cristal que forman parte del sistema ptico del microscopio. Del cabezal parten hacia arriba los tubos donde se apoyan los lentes oculares, hacia abajo se encuentra el revlver portaobjetivos. Se denomina revlver al disco giratorio colocado en la superficie plana e inferior del cabezal y gracias al movimiento giratorio es posible cambiar el objetivo, cuando se desee este cambio es necesario hacerlo en direccin de las manecillas del reloj y con la yema de los dedos sobre el borde estriado del revlver. Se debe evitar tomar el objetivo para girar el revlver ya que con este tipo de manejo al cabo del tiempo el aparato se desajusta. El revlver se gira hasta sentir un tope sutil, que ser fcilmente apreciado si el movimiento es lento y se realiza con la yema de los dedos. Cuando se aprecia este hecho tenemos la seguridad de tener el nuevo objetivo en posicin adecuada para llevar a cabo la observacin. La platina es la porcin del microscopio donde se coloca la preparacin histolgica para su observacin y se localiza por debajo de los objetivos. Es una superficie plana de forma cuadrangular, a travs de la cual pasa el haz de luz luminoso que atraviesa el corte histolgico y permite su observacin. En ocasiones los microscopios presentan un carro, se denomina as a una estructura que sujeta el portaobjetos por sus extremos mediante los tornillos que contiene hacia el borde lateral derecho de la platina, permite el movimiento de las preparaciones hacia adelante, atrs y hacia los lados. De acuerdo a la marca o modelo de microscopio pueden encontrarse diferencias, sin embargo, en trminos generales podemos decir que hay dos formas como los fabricantes de miscroscopios pueden resolver la construccin de los mismos. Unos prefieren colocar los tornillos macro y micromtricos en forma separada; otros en cambio, en un mismo accionador se presentan ambos; en estos casos y por lo general, el enfoque macromtrico se realiza con la perilla estriada de mayor dimetro, mientras que el enfoque micromtrico con la perilla estriada central ms pequea. El tornillo macromtrico hace subir o bajar la platina y como regla siempre deber enfocarse usando primeramente el tornillo macromtrico y con el objetivo de menor aumento. Cuando se procede de esta manera no es necesario usar el tornillo macromtrico cuando se cambia a otros lentes objetivos, solo es necesario hacer el enfoque fino con el micromtrico. El porta condensador es una estructura que consta de un aro que sujeta al condensador y lo una al brazo o columna, sobre este aro se encuentra un tornillo que permite liberar el condensador y de esta forma poder hacer la adecuada limpieza o ajuste sobre el mismo, esto ltimo deber realizarse con cuidado de manera espordica y slo por personal entrenado para ello. La funcin del porta condensador es sostener el complejo condensador diafragma. El tornillo para subir o bajar el porta condensador se encuentra por debajo y delante de los tornillos macro y micromtricos. El condensador (incluido o sostenido por el pota

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condensador) se sube y se baja con el objeto de que los haces luminosos coincidan exactamente con el objeto a observar y obtener as la mejor iluminacin. La cremallera es la placa de superficie dentada que se encuentra montada sobre la columna. A travs de los dientes o engranes se articula tanto el soporte del condensador-diafragma como la platina. Parte ptica. La parte ptica la constituyen en trminos generales los lentes: oculares, objetivos, del condensador. Oculares. Existen microscopios de un solo ocular, denominados monoculares; o bien los que presentan dos oculares denominados binoculares. En cualquier caso, los oculares se localizan en el extremo superior del cabezal y es en ellos donde se aplican los ojos del observador. Existen oculares de diferentes aumentos, stos por lo general pueden ser de 10X, de 15X y de 20X. El signo de X (por) se refiere a que el objeto observado, se ve tantas veces aumentado su tamao original como lo indica el nmero que lo antecede. Objetivos. Reciben este nombre por estar muy cerca del objeto a observar. Se localizan en la parte inferior del cabezal unidos a ste por medio del revlver, los objetivos reciben diversos nombres de acuerdo a los aumentos que tienen. MICROSCOPIO OLYMPUS MICROSCOPIO ZEISS

1. Objetivo panormico 4X 3, 2X

2. Seco dbil 10X 10X

3. Seco fuerte 40X 40X

4. De inmersin 100X 100X

El objetivo proyecta una imagen aumentada en direccin del ocular. Los objetivos presentan en la porcin metlica una serie de datos que a continuacin se describen (Fig. 2):

Fig. 2. Objetivos 4x, 10x, 40x, 100x.

La lectura de los objetivos se hace de izquierda a derecha y de arriba hacia abajo. El primer nmero se refiere al aumento del objetivo; la siguiente cifra se refiere a la abertura numrica (AN), su determinacin corresponde al fabricante y se refiere al menor ndice de refraccin correspondiente al lente del objetivo multiplicado por el seno del semingulo de abertura. En este caso AN=1.25 (en el ejemplo de la derecha de la figura 2. En el rengln de debajo de la cifra (160) se refiere a la longitud en mm del tubo del microscopio en el

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cual deben ser utilizados (algunos en lugar de 160 tienen 170). La ltima cifra (0.17) que no todos los objetivos la tienen anotada y aparece en un tercer rengln, se refiere al espesor en mm del cubreobjetos que debe emplearse. En los preparados histolgicos esta medida es importante para evitar el estrellar la laminilla con el objetivo. Para evitar esto es recomendable tener el cuidado de siempre, colocar la laminilla con el cubreobjetos dirigido hacia arriba, ya que la medida antes citada est calculada para que la laminilla vaya de esta forma. Es un hecho indudable que la calidad del microscopio viene dado esencialmente por la del objetivo, pues es ste el que produce la imagen aumentada del objeto y la calidad de sta en cuanto a sus detalles estructurales y aspecto general no puede ser mejorada por los dems elementos. Para clasificar y diferencias los objetivos algunos fabricantes utilizan el sistema de clasificacin por medio de colores. As un color suele corresponderse con un aumento dado. Cuadro 1. Cuadro 1.

1. Objetivo panormico Banda color caf 2. Seco dbil Banda color amarillo 3. Seco fuerte Banda color azul 4. De inmersin Banda color negro o blanco

a) Aumento nominal viene grabado en el cuerpo del objetivo y siempre se asocia con la

longitud del tubo del microscopio (o la distancia entre el objetivo y el ocular), para los microscopios americanos la distancia es de 160mm y para los europeos, japoneses y rusos es de 170mm.

b) Aumento total: es el que se observa al mirar por el ocular. Para calcularlo basta multiplicar el aumento primario del objetivo por el aumento del ocular. Ejemplo: Ocular 15X. Objetivo 40X= 15 X 40= 600X. El objeto observado est aumentado 600 veces su tamao natural.

c) El poder de resolucin es la capacidad que tiene un sistema ptico de separa los detalles. Al poder o lmite de resolucin se le asigna un valor numrico y equivale a la mnima distancia que debe existir entre dos puntos para que cada uno de ellos aparezca individualizado. El lmite de resolucin de los mejores lentes utilizados en los microscopios fotnicos comunes es de 0.2 micras (0.0002 mm). La riqueza de detalles de una imagen estar dada por el poder de resolucin. La parte del sistema ptico que determina el lmite de resolucin de un sistema ptico es el objetivo, aunque sin embargo ste puede ser modificado ligeramente por el complejo condensador-diafragma.

Condensador-diafragma. El complejo condensador diafragma en conjunto forma parte del sistema

ptico y lumnico. El condensador est formado por un lente convergente que favorece una

iluminacin ptima de la preparacin que de esta manera determina una riqueza de los detalles y

nitidez del objeto a observar, es decir aumenta el poder de resolucin para buscar la altura ptima

del condensador que permita el mximo de luz y resolucin se har mediante un tornillo que

permite el ascenso o descenso del complejo condensador-diafragma. El diafragma tiene la funcin

de regular la cantidad de rayos luminosos que sigan hacia el lente del condensador y

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posteriormente iluminen el objeto a conservar. El diafragma puede improvisarse con una pequea

lmina de metal o cualquier material opaco, perforado para permitir el paso de slo una

determinada cantidad de rayos luminosos.

Sistema de iluminacin (fuente de luz). Consta de las siguientes partes: Regulador de voltaje,

lmpara y el condensador.

Regulador de voltaje. Es un accesorio que en ocasiones puede venir separado del microscopio o

bien integrado en el mismo. Posee un interruptor a travs del cual se enciende o se apaga. Antes

de prender el regulador se debe asegurar que la perilla que regula la intensidad de corriente est

en lo ms bajo. Algunos reguladores presentan grabadas en letras o rayas rojas las zonas de alta

intensidad de corriente que puede poner en peligro la integridad del filamento del foco. Siempre se

deber procurar no llegar hasta esta zona pues la duracin del filamento del foco ser menor y l

aretina del observador tendr la posibilidad de sufrir un dao.

Lmpara. En algunos microscopios se encuentra integrada a la base del microscopio; en otros esta

lmpara no est integrada al microscopio sino que forma un accesorio. La lmpara integrada al

microscopio posee un diafragma que deber estar abierto siempre para permitir el paso de una

adecuada cantidad de luz.

Objetivos:

1. Manejar en forma adecuada un microscopio fotnico. 2. Identificar las partes pticas, mecnicas y de iluminacin de un microscopio fotnico. 3. Mencionar la funcin de los principales elementos de las partes mecnicas, pticas y de

iluminacin de un microscopio fotnico. 4. Mencionar los procedimientos de rutina para el manejo del microscopio fotnico 5. Hacer la iluminacin de Koheler. 6. Enfocar y observar en forma adecuada una preparacin histolgica

Duracin de la sesin: 2 horas.

Material: Microscopio fotnico, preparaciones histolgicas. Tcnica: Despus de leer todas las instrucciones que a continuacin se describen, maneja el microscopio para enfocar una laminilla o preparado histolgico. Iluminacin. Conecta la clavija al enchufe ya sea de la lmpara o del microscopio con luz integrada. Coloca el interruptor en encendido y procura que la perilla que est sobre su superficie est colocada en el punto ms bajo de la iluminacin, posteriormente aumentar paulatinamente la iluminacin girndola lentamente hacia la derecha sin llegar a la escala roja. Colocacin de la preparacin. Se coloca el portaobjetos sobre la platina, procurando siempre que el cubreobjetos quede hacia arriba pues la distancia entre el objetivo y la laminilla est calibrada de esta forma. Haciendo el procedimiento antes mencionado se evita romper la preparacin con alguno de los objetivos. Posteriormente el portaobjetos se

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fija, por medio de dos pinzas o con una pinza mvil. Esta pinza debe accionarse hacia atrs primeramente para permitir la entrada de la laminilla; posteriormente se suelta lentamente para permitir que la pinza aprisione el portaobjetos, el cual queda fijo de esta manera. Por medio de los tornillos del carro, se mueve el portaobjetos para que el objeto a observar quede exactamente arriba del condensador y pueda recibir el haz luminoso. Enfoque del objeto. En los microscopios binoculares es necesario regular la abertura de los oculares de tal forma que pueda observar cmodamente con ambos oculares. Cierre ligeramente el ojo izquierdo, enfoque la preparacin utilizando exclusivamente el tornillo macromtrico. En algunos microscopios binoculares se encuentra sobre el tubo del ocular izquierdo una escala grabada la cual se denomina tornillo diptrico y sirve para calibrar el microscopio a la agudeza visual en sus ojos. La observacin de ahora en adelante se har con ambos ojos. Una vez enfocado con el tornillo macromtrico proceda a enfocar la preparacin histolgica con el tornillo micromtrico. La observacin con el objetivo panormico sirve para dar una idea general del objeto observado, procure mirar siempre varios campos microscpicos y seguir el contorno del corte histolgico que observe. Gire el revlver colocando la yema de los dedos ndice y pulgar sobre la superficie dentada del mismo, de acuerdo a las manecillas del reloj hasta sentir un tope o pause suave, que de esta manera el siguiente objetivo (10X) estar en el sitio adecuado. Proceda a enfocar la preparacin nicamente con el tornillo micromtrico. Observe varios campos microscpicos antes de pasar al siguiente objetivo y realice el mismo procedimiento descrito. Despus de terminar una sesin de observacin, se coloca en posicin de observar el objetivo 4X, se quita la preparacin, se apaga el microscopio, se desenchufa la clavija y finalmente se cubre para evitar que se empolve. El polvo es el peor enemigo del microscopio. ILUMINACIN DE KOEHLER Este procedimiento slo puede hacerse en cierto tipo de microscopios. Estos siempre poseen condensador provisto de lentes y diafragma integrado, adems de un sistema de iluminacin que contenga lente y diafragma de la lmpara. Procedimiento

a) Conectar la clavija del regulador en el enchufe. b) Colocar el objetivo panormico en posicin de observar. c) Quitar la lentilla de la lmpara. La lmpara de ciertos microscopios tiene grabado por un

lado una letra H y una letra L; para quitar la lentilla de la lmpara se coloca la perilla en posicin H y para ponerla en posicin L.

d) Cerrar el diafragma del condensador, esto puede lograrse por medio de una palanca colocada en el borde derecho del mismo hacindola girar.

e) Quitar los filtros del condensador, stos son filtros de cristal montados en aros sobre la parte inferior del propio condensador.

f) Girar el tornillo del condensador hasta subir el porta condensador hasta el tope. g) Encender la lmpara colocando el interruptor del regulador en encendido. h) Enfocar con el tornillo macromtrico el filamento del foco procurando que la perilla del

regulador est en luz muy baja, esto se hace con el objeto de evitar una gran intensidad luminosa que pudiera daar la retina de los ojos.

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i) Centrar el filamento del foco, esto se logra en ciertos microscopios por medio de perillas laterales que estn sobre el extremo posterior de la lmpara.

j) Colocar nuevamente la lentilla de la lmpara. k) Cerrar el diafragma de la lmpara, en ciertos modelos de microscopios esto se logra con

una palanca que se encuentra en el extremo anterior de la lmpara. l) Centrar el halo luminoso que se aprecia ene l campo visual, en algunos modelos de

microscopios, esto puede hacerse por medio de unas perillas laterales situadas en el extremo anterior de la lmpara.

m) Cambiar el objetivo seco dbil (10) y enfocar el borde del diafragma. n) Abrir el diafragma hasta que desaparezcan los bordes oscuros de ste.

Estos dos ltimos pasos debern repetirse cuantas veces sea necesario para centrar el

diafragma.

La importancia de realizar la iluminacin de Koehler es el de obtener una iluminacin

adecuada del campo microscpico, de tal forma que dicha intensidad luminosa no sea

daina para le retina de los ojos del observador. Por otro lado, una ventaja secundaria es la

de alargar la vida del filamento del foco.

Interpretacin y observaciones: Con apoyo del docente, cada alumno identificar una parte del microscopio, mencionando su funcin y manejo. Y en grupo dirigidos por el docente se realizar la iluminacin de Koheler. Preguntas para discusin:

1. El microscopio fotnico est constituido por una parte ___________, una parte _________________ y _____________________.

2. Cita la funcin de los principales elementos de las partes mecnicas, pticas y de iluminacin de un microscopio fotnico.

3. Por qu es necesario realizar la iluminacin de Koehler?

Evaluacin: La prctica ser acreditada por asistencia, participacin y entrega de reporte escrito. Se llevar una lista de cotejo por parte del profesor. Lugar donde se llevar a cabo: Laboratorio de prcticas de la Facultad de Medicina Veterinaria

Bibliografa especfica: Manzalda Arce S.R., Tolosa Snchez J. (2001) Manual de prcticas de histologa Veterinaria. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Prophet E.B., Mills B., Arrington J.B., Sobin L.H. (1995) Mtodos Histotecnolgicos. Instituto de Patologa de las Fuerzas Armadas de los Estados Unidos de Amrica (AFIP). Washington, D.C. ISBN: 1-881041-21-2.

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http://www.joseacortes.com/practicas/microscopio.htm. Fecha de consulta 23 de mayo de 2011. http://amaina.com/shop/product_info.php?manufacturers_id=43&products_id=1098Fecha de consulta 23 de mayo de 2011.

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Prctica No. 2

Nombre: APARATO REPRODUCTOR DEL MACHO Y DE LA HEMBRA. (Desarrollo y evolucin de los espermatozoides y de los vulos en tejido testicular y ovarios). Introduccin: Histologa del aparato reproductor del macho Testculo Los testculos son las gnadas masculinas, son glndulas aficrinas pues tiene una secrecin exocrina (que corresponde a las clulas germinales o espermatozoides) y secrecin endcrina (produccin de hormonas esteroides). Cada testculo est envuelto por una cpsula de tejido conjuntivo denso irregular llamada tnica albugnea, esta cpsula est cubierta por un mesotelio (llamado tnica vaginal). La cpsula emite trabculas al interior del parnquima y lo divide en pequeos compartimientos llamados lobulillos testiculares, cada lobulillo est constituido por un nmero variable de estructuras llamadas tbulos seminferos que presentan en su interior diversos estratos de clulas que reciben el nombre de epitelio germinativo, este epitelio contiene diversos estadios celulares de la maduracin espermtica como son: espermatogonias, espermatocitos (primarios y secundarios), espermtides y espermatozoides, estos ltimos se reconocen en la porcin adyacente a la luz de los tbulos, presentan flagelos que se delinean tenuamente y que en conjunto dan una apariencia que se denomina penachos de espermatozoides. En la porcin basal se distinguen las clulas de sostn (o clulas de Sertoli) que se caracterizan por un ncleo esfrico y basal y con nuclolo prominente, su forma celular es piramidal pero generalmente no se aprecia con claridad ya que su citoplasma da cabida a los otros tipos celulares ya mencinados. Entre los tbulos semininferos se encuentran las clulas intersticiales o de Leydig, que se caracterizan por tener forma polidrica, citoplasma espumoso acidfilo, ncleo esfrico y grande (estas clulas son particularmente abundantes en bovinos y cerdos). Epiddimo El epiddimo es uno de los grandes conductos geniales del aparato reproductor masculino. Es el sitio donde se almacenan y terminan de madurar lo espermatozoides. Es un tubo delgado con gran longitud que tiene numerosos plegamientos sobre s mismo, al microscopio fotnico se observa una serie de estructuras circulares o poligonales que en realidad forman parte del mismo tubo que pasa multitud de veces a travs de la superficie de corte por lo que da la apariencia de que se trata de varios tubos. El epitelio de revestimiento es seudoestratificado cilndrico con esterocilios. El epitelio descansa sobre una capa de tejido conjuntivo laxo areolar muy vascularizada que corresponde a la lmina propia; despus existe una capa de clulas musculares lisas en direccin circular, la ltima capa corresponde a la adventicia de tejido conjuntivo laxo aerolar que lo relaciona con los numerosos dobleces del mismo rgano. En la luz se aprecia a los espermatozoides en

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nmero variable, la cantidad de stos indica el grado de actividad sexual antes de tomar la muestra de ste rgano. Conducto deferente Es un rgano tubular que corresponde a una prolongacin modificada del epiddimo. Entre sus caractersticas distintivas est el hecho de presentar una luz estrecha de forma estrellada y una pared extremadamente engrosada, la forma de la luz se debe a la contraccin de la musculatura lisa del rgano despus de la muerte del animal. Presenta un epitelio seudoestratificado cilndrico con esterocilios que se sustenta en una lmina propia escasa (la mucosa es sumamente delgada y en corte transversal se observa una luz estrellada), no se distingue muscular de la mucosa, ni una demarcacin con la submucosa. La capa muscular del rgano est muy engrosada, se considera dispuesta en tres capas: longitudinal, capa intermedia en espiral o circular y finalmente una capa longitudinal; por ltimo se observa una adventicia tpica que puede presentar tejido adiposo. En la luz pueden descubrirse algunos espermatozoides, sin embargo no es un rgano especializado en su almacenamiento, tan slo en su transporte. Prstata Es una glndula excrina, anexa al aparato reproductor masculino, est presente en todas las especies domsticas. Histolgicamente es una glndula tubuloalveolar ramificada. Tiene una cpsula de tejido conjuntivo denso irregular que enva septos o trabculas al interior del parnquima dividindola en lbulos, estas porciones del estroma estn entremezcladas con fibras musculares lisas, que al contraerse durante la eyaculacin favorecen a expulsin de la secrecin glandular. El epitelio glandular es cilndrico simple, las clulas se caracterizan por tener grnulos intensamente acidfilos en la porcin apical de su citoplasma. Son porciones secretas los alveolos y las glndulas tubulares revestidas por el mismo tipo de epitelio. Macroscpicamente de distinguen dos porciones: el cuerpo de la prstata y la porcin diseminada. La descripcin histolgica que se ha dado corresponde al cuerpo prosttico, mientras que la porcin diseminada tiene una cpsula de tejido conjuntivo laxo adems de que el epitelio glandular se contina con un epitelio modificable o de transicin al desembocar en la uretra. En equinos y carnvoros est desarrollado el cuerpo prosttico, mientras que en el resto de las especies domsticas lo es la porcin diseminada. Histologa del aparato reproductor de la hembra Ovario Los ovarios son glndulas anficrinas pues producen clulas germinales (vulos) adems de hormonas, se distinguen de otros rganos parenquimatosos porque en lugar de estar recubiertos por una cpsula representan un epitelio de revestimiento cbico simple denominado epitelio germinativo. El parnquima se divide en dos porciones: la corteza y la mdula. La zona cortical presenta diversas estructuras funcionales que son: folculos en diversos grados de maduracin, cuerpo hemorrgico, cuerpo lteo (o amarillo), cuerpos blancos (o albicans) y folculos atrsicos. En la zona medular encontramos: vasos sanguneos, linfticos y nervios unidos por tejido conectivo. Los folculos ovricos pueden ser primordiales, primarios, secundarios, terciarios y maduros. Los folculos primordiales tienen un ovocito en su interior y estn envueltos por clulas foliculares planas, los

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folculos primarios se diferencan de los anteriores porque las clulas foliculares (aquellas que rodean al ovocito) se transforman en cbicas y se multiplican por mitosis, los folculos secundarios adems, presentan la zona pelcida (engrosamiento que delimita al ovocito) y las tecas (organizacin de tejido conjuntivo ms externo del folculo); los folculos terciarios se caracterizan por presentar un espacio (antro folicular) lleno de un lquido homogneo en cuanto a su apariencia histolgica (llamado lquido folicular), este lquido se sita entre las clulas que rodean a la clula pelcida (granulosa interna) y el conjunto de clulas adyacentes a las tecas (granulosa externa), los folculos maduros (tambin llamados folculos de Graaf) tienen grandes dimensiones y pueden abarcar parte de la zona medular y protruir la superficie externa del ovario. Los folculos atrsicos se caracterizan por presentar clulas que han muerto (que presentan ncleos intensamente basfilos, bien con ncleos fragmentados o inexistentes). El cuerpo lteo presenta clulas polidricas, con citoplasma espumoso por contener vesculas con lpidos y ncleos esfricos y abundantes capilares entre las clulas glandulares. El cuerpo blanco (o corpus albicans) est formado por tejido conjuntivo ordinario que sustituye a un cuerpo amarillo, queda enmarcado por la abundancia de fibras colgenas y clulas. El ovario de la yegua se distingue de otras especies porque en la zona cortical se encuentran los vasos y nervios y en la zona medular los folculos y dems estructuras funcionales; adems presenta una regin en su superficie que se distingue por presentar una depresin, esta porcin es el nico sitio por donde se expulsa el vulo en esta especie, esta estructura se llama fosa de ovulacin, est recubierta por una serosa al igual que el resto de la superficie ovrica de la yegua. tero Es un rgano tubular con tres porciones: cuernos, cuerpo y cuello (o crvix), las dos primeras presentan la misma estructura histolgica y son las que se describen a continuacin. Est constituido de una mucosa, una capa muscular y una serosa, estas tres capas histolgicas suelen denominarse como: endometrio, miometrio y perimetrio respectivamente. El endometrio presenta un epitelio de revestimiento cilndrico simple, debajo de l encontramos tejido conjuntivo laxo correspondiente a la lmina propia, en este sitio se localizan glndulas tubulares llamadas glndulas endometriales productoras de la leche uterina, no existe muscular de la mucosa ni submucosa por lo que es una sola capa de tejido conjuntivo (lmina propia-submucosa). En los rumiantes se observan elevaciones endometriales llamadas carnculas, en dichas elevaciones no existen glndulas endometriales. El miometrio consta de tres capas de msculo liso, la capa adyacente al endometrio es circular y se llama estrato submucoso, la capa intermedia se caracteriza por tener vasos sanguneos de gran calibre por lo que se llama estrato vascular y la tercera tiene fibras longitudinales y se denomina estrato subseroso. La disposicin del miometrio es caracterstica de este rgano. El perimetrio es una serosa tpica.

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Objetivo: Que el discente reconozca, identifique y ubique morfolgicamente las diferentes estructuras de tejido en testculos y ovarios, donde se lleva a cabo la maduracin de los GAMETOS (macro y microscpicamente). Duracin de la sesin: 2 horas. Material: Biolgico.- testculos y ovarios de animales adultos. Fsico.- laminillas de testculos y ovarios (Tincin Hemotoxilina eosina) Laboratorio.- 20 microscopios por sesin, aceite de inmersin y papel especial para limpieza de lentes. Interpretacin y observaciones: Se identificar con apoyo del docente la arquitectura histolgica de los testculos y ovarios y los espacios donde se lleva a cabo cada paso en la evolucin y maduracin de los gametos. Preguntas para discusin: 1.- Cul es la estructura histolgica del estroma ovrico y testicular observando con el objetivo 5x y 10x. Dibuja tus observaciones y discute con tus compaeros y profesor a que estructuras histolgicas se refiere, mencionando los nombres que recibe cada una de estas y el lugar que tiene en la maduracin de los folculos. 2.- Qu estructuras histolgicas del estroma ovrico y testicular, observas con el objetivo 40x.? Dibuja tus observaciones y discute con tus compaeros y profesor a que estructuras histolgicas se refiere, haciendo nfasis en la morfologa estructural de cada folculo en sus diferentes fases de desarrollo y de ser necesario y obsrvalo al objetivo de inmersin. 3.- Menciona las caractersticas histolgicas de un folculo primario, un secundario y de un folculo de Graaf (comntalo con tu maestro) Bibliografa especfica: Austin, C.R. (1982): Desarrollo Embrionario y Fetal. La Prensa Mdica Mexicana. Mxico. Banks William J. (1995): Histologa Veterinaria Aplicada. 2a ed. El Manual Moderno, Mxico D.F. Bacha, W. J.; Bacha, L.M.; Wood, L. M. (2001): Atlas color de Histologa Veterinaria. 2da ed. Interamericana, Buenos Aires, Argentina. Banks, W. J. (1974): Histology and Comparative Organology. The Williams & Wikins Co. Baltimore, USA. Manzalda Arce S.R., Tolosa Snchez J. (2001) Manual de prcticas de histologa Veterinaria. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.

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Prctica No.3

Nombre: Placentas Introduccin Los placentarios (Placentalia) o euterios (Eutheria) son una infraclase de mamferos. Se caracterizan porque las cras son retenidas en el tero materno durante largo tiempo donde son alimentadas por una placenta alantoica. Los placentarios se originaron hace por lo menos 160 millones de aos, en el Jursico Superior, y actualmente se conocen ms de 5.100 especies. Eutheria es sinnimo de Placentalia (designa el mismo taxn). Fue propuesto por Thomas Henry Huxley en 1880, intentando que el trmino abarcara ms que su predecesor Placentalia. No lo logr porque ambos trminos se usan con el mismo sentido, aunque placentario es ms comn en la lengua verncula que euterio. En la nomenclatura formal de los escritos cientficos se usa ms sin embargo Eutheria. La infraclase de los euterios, tambin llamados monodelfos o placentarios, son unos mamferos de la subclase de los terios, carentes de huesos epipbicos y de bolsa, hembras con la vagina sencilla, de ah el nombre de monodelfos, que tambin se les da. Los dientes, menos los molares, tienen predecesores de leche, y el cerebro est provisto de cuerpo calloso. Son vivparos, pues las hembras poseen placenta para la nutricin del embrin, por lo que el desarrollo de ste puede prolongarse dentro del cuerpo de la madre hasta una fase relativamente avanzada, al fin de la cual se produce el parto. Son euterios todos los rdenes de mamferos actuales, con excepcin de los monotremas y marsupiales. Est dividido en numerosos rdenes vivientes y fsiles. Entre los extintos o fsiles tenemos los rdenes de los tilodontos, los teniodontos, los creodontos, los condilartros, los piroterios, los astrapoterios, los xenungulados, los protungulados, los pantodontos, los desmostilos, los ganodontes, los dinocerados, los embritpodos, los notungulados y los litopternos. Entre los rdenes vivientes tenemos los insectvoros, los macrosceldeos, los dermpteros, los foldotos, los tubulidentados, los lagomorfos, los roedores, los carnvoros, los quirpteros, los perisodctilos, los artiodctilos, los proboscdeos, los hiracoideos, los xenartros, los pinnpedos, los cetceos, los sirenios y finalmente el nuestro, los primates.

Objetivo: Que el discente reconozca, identifique y manipule las diferentes estructuras que integran la morfologa macroscpica de las placentas segn la especie domstica, mencionando los nombres y funcin de cada parte que las integran. As como las caractersticas histolgicas de cada placenta segn la especie.

Duracin de la sesin: 2 horas.

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Material: Biolgico.- Placentas de rumiantes, carnvoros, equinos y humanos o primates. Laboratorio.- Dos charolas por mesa, material de limpieza y desinfeccin para mesas y manos de discentes. Interpretacin u observaciones: Se reconocer con apoyo del docente las estructuras macroscpicas que integran las diferentes placentas de acuerdo a especie. As como se solicitara al discente hacer referencia de la estructura histolgica de cada placenta y su importancia en la sobrevivencia de los productos al nacer. Preguntas para discusin: 1.- En base a tus conocimientos tericos, participa con tus compaeros y con el apoyo del profesor describe las caractersticas de la placenta hemocorial, mencionando sus caractersticas desde el punto de vista anatmico e histolgico y las especies domsticas que presentan este tipo de placenta. 2.- En base a tus conocimientos tericos, participa con tus compaeros y con el apoyo del profesor describe las caractersticas de la placenta endoteliocorial, mencionando sus caractersticas desde el punto de vista anatmico e histolgico y las especies domsticas que presentan este tipo de placenta. 3.- En base a tus conocimientos tericos, participa con tus compaeros y con el apoyo del profesor describe las caractersticas de la placenta epiteliocorial y la sindesmocorial, haciendo nfasis en sus caractersticas desde el punto de vista anatmico e histolgico y las especies domsticas que presentan este tipo de placenta. 4.- Realiza el dibujo de la morfologa macroscpica de los diferentes tipos de placenta, que conociste en esta prctica. 5.- Participa e invita al profesor a corroborar tus conocimientos, realizando un resumen de los diferentes tipos de placenta (desde el punto de vista histolgico) en el pizarrn con el apoyo de tus compaeros. Bibliografa especfica: Austin, C.R. (1982): Desarrollo Embrionario y Fetal. La Prensa Mdica Mexicana. Mxico. Banks William J. (1995): Histologa Veterinaria Aplicada. 2a ed. El Manual Moderno, Mxico D.F. Kolb, E. (1974): Fisiologa veterinaria 2a ed. espaola Editorial Acribia, Zaragoza (Espaa). Manzalda Arce S.R., Tolosa Snchez J. (2001) Manual de prcticas de histologa Veterinaria. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.

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Prctica No.4

Nombre: Recoleccin y envo de muestras para su estudio histolgico.

Introduccin: En la prctica profesional el Mdico veterinario dedicado al diagnstico de enfermedades, es comn el envo y recoleccin de muestras para su estudio histolgico. De los cuidados que se tengan para hacerlo en una forma adecuada, depende en muchas ocasiones el xito para llegar a un diagnstico apropiado y poder prescribir un tratamiento especfico. Por eso resulta indispensable que el Mdico veterinario en su proceso formativo conozca las formas para recolectar y enviar muestras, as como los mtodos que se siguen para obtener las preparaciones histolgicas. Los tejidos deben recolectarse lo ms rpido posible despus de la muerte del animal. El grosor de la muestra depende del tejido, por regla general para microscopa ptica se recomienda que no sea menor a 0.5 cm3 ni mayor a 2cm3. Una vez que es recolectada la muestra es necesario someterla a la accin de agentes fsicos o qumicos para evitar su descomposicin. Los recipientes para enviar o transportar las muestras debern de ser de boca ancha, con tapa de rosca y cerrar hermticamente. Los agentes fsicos y qumicos que evitan la descomposicin de los fragmentos de tejido colectado reciben el nombre de fijadores. Los fijadores protegen la muestra del ataque bacteriano, evitan la autolisis del tejido, insolubilizan los constituyentes celulares que se pretende estudiar, evitan distorsiones y retracciones y preparan las diversas estructuras para su tincin. Diversos investigadores han propuesto distintas mezclas de agentes qumicos con accin fijadora. Entre las ms frecuentemente usadas estn: lquido de Bouin, lquido de Zenker, lquido de Helly, lquido de Carnoy y lquido de formol buferado. Existen cuatro formas de fijar los fragmentos de rganos cuando se utilizan fijadores qumicos: fijacin in situ, perfusin intravascular, perfusin intraluminal y por inmersin. Objetivo: El discente conocer distintos fijadores qumicos y diferentes formas de fijar los fragmentos de rganos de origen animal. Duracin de la sesin: 2 horas. Material: Cadver animal u rganos de origen animal. Tcnica: El discente elije los fragmentos de rganos y la forma de fijar de acuerdo a su estructura y consistencia. Se cortar un tejido de dimensiones mayores a cm cbico con la finalidad de que los alumnos observen que al cortarlo en el centro del mismo no existi fijacin.

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Interpretacin u observaciones: El discente describe el tratamiento aplicado a los diferentes fragmentos de rganos elegidos para ser fijados. Preguntas para discusin:

1. Cul es el fijador qumico ms usado para obtener cortes histolgicos para ser observados en microscopio ptico?

2. Cules son las dimensiones que deben tener los cortes de tejido para fijarse apropiadamente?

3. Cunto tiempo deben permanecer los tejidos en el fijador qumico para poder ser procesados en el histoquinete?

Evaluacin: La prctica ser acreditada por asistencia, participacin y entrega de reporte escrito. Se llevar una lista de cotejo por parte del profesor. Lugar donde se llevar a cabo: Sala de necropsias y Laboratorio de Histologa del Centro de Investigacin y Estudios Avanzados en Salud Animal, FMVZ, UAEM. Bibliografa: Manzalda Arce S.R., Tolosa Snchez J. (2001) Manual de prcticas de histologa Veterinaria. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.

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Prctica No.5

Nombre: Principios de la tcnica de histologa.

Introduccin: Los fragmentos de rganos que se deseen estudiar al microscopio pueden ser procesados por distintos mtodos. Los tres ms comnmente empleados son: el mtodo de congelacin, el de inclusin en parafina y el de inclusin en resinas plsticas. El mtodo por congelacin es rpido y se utiliza cuando se requiere la observacin del tejido lo antes posible, como en el caso de intervenciones quirrgicas. Consiste en congelar lentamente el tejido hasta que se encuentre lo suficientemente duro para cortar rebanadas de 10 micras de grosor. El mtodo de inclusin en parafina es ms tardado y consiste en sustituir el agua de los tejidos fijados e indurados por parafina, para ello se sigue el siguiente procedimiento: Deshidratacin de la muestra con alcohol. Una vez que los lquidos han sido sustituidos por alcohol, se procede a sustituir este ltimo por xilol y benceno lo que se denomina aclaramiento. Una vez aclaradas las muestras sigue el paso de impregnacin con parafina. Cuando las muestras estn embebidas en parafina se colocan en bloques que son cubiertos por ms parafina a lo que se llama inclusin. Una vez incluido en parafina, el tejido est listo para el corte. El mtodo de inclusin en resinas plsticas se utiliza comnmente para la preparacin de muestras que van a ser observadas con el microscopio electrnico. En el caso de rganos incluidos en parafina, se colocan en el micrtomo para hacer cortes aproximadamente de 4 a 7 micras de grosor. La mayora de los tejidos son incoloros, por lo que despus del corte deben teirse para facilitar su observacin al microscopio y poder diferenciar los tejidos. Para teir un corte de tejido, por lo general se suelen utilizar por lo menos dos colorantes: uno cido y otro bsico. La combinacin ms empleada es la de hematoxilina y la eosina. Objetivo: El discente comprender los principios bsicos en que se fundamenta la tcnica histolgica. Duracin de la sesin: 2 horas. Material: Tejidos de origen animal fijados en solucin de formol buferada, histoquinete, micrtomo, tren de tincin de hematoxilina-eosina. Tcnica: El discente observar el proceso histolgico en sus diferentes fases de deshidratacin, diafanizacin, impregnacin, inclusin, corte y tincin.

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Interpretacin y observaciones: El discente describir el proceso histolgico. Preguntas para discusin:

1. Cules son los tres mtodos ms comnmente empleados para obtener cortes histolgicos?

2. Qu grosor tienen los cortes por micrtomo? 3. Menciona tres tinciones especiales y su uso.

Evaluacin: La prctica ser acreditada por asistencia, participacin y entrega de reporte escrito. Se llevar una lista de cotejo por parte del profesor. Lugar donde se llevar a cabo: Laboratorio de Histologa del Centro de Investigacin y Estudios Avanzados en Salud Animal, FMVZ, UAEM. Bibliografa: Manzalda Arce S.R., Tolosa Snchez J. (2001) Manual de prcticas de histologa Veterinaria. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Prophet E.B., Mills B., Arrington J.B., Sobin L.H. (1995) Mtodos Histotecnolgicos. Instituto de Patologa de las Fuerzas Armadas de los Estados Unidos de Amrica (AFIP). Washington, D.C. ISBN: 1-881041-21-2.

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Prctica No.6

Nombre: Epitelios Introduccin: El epitelio es el tejido formado por una o varias capas de clulas unidas entre s que puestas recubren todas las superficies libres del organismo, y constituyen el revestimiento interno de las cavidades, rganos, huecos, conductos del cuerpo y la piel y que tambin forman las mucosas y las glndulas. Los epitelios tambin forman el parnquima de muchos rganos, como el hgado. Ciertos tipos de clulas epiteliales tienen vellos diminutos denominados cilios, los cuales ayudan a eliminar sustancias extraas, por ejemplo, de las vas respiratorias. Estas clulas provienen de tres hojas germinativas: Del Ectodermo proviene de la mayor parte de la piel y cavidades naturales (ano, boca, fosas nasales, poros de la piel); del Endodermo el epitelio de casi todo el tubo digestivo y el rbol respiratorio, tambin el hgado y pncreas; del Mesodermo todo el epitelio restante como en el rin y rganos reproductores. Caractersticas de los epitelios Cohesin celular: El epitelio constituye un conjunto de clulas muy unidas entre s, gracias a uniones intercelulares que son: Uniones celulares: Tienen una funcin mecnica y de transmisin de las fuerzas generadas por las de manifiesto en las preparaciones mediante nitrato de plata. Esta delgada capa de glicoprotenas que generalmente reviste las clulas epiteliales recibe el nombre de glucocalix. Se admite que estas glicoprotenas participan en los procesos celulares de pinocitosis, de adhesin entre las clulas, en fenmenos de caracterizacin inmunitaria y en otros procesos vitales. Presencia de lmina basal: Los epitelios estn sujetos a una membrana basal, compuesta de una lmina lcida y lmina densa que forman la lmina basal, y esta lo tapiza en toda su longitud basal y lo separa del tejido conectivo. La lmina lcida est compuesta de un material electrodenso. La lmina densa tiene un espesor entre 50 a 80 nanmetros. Est formada por una asociacin de colgeno tipo IV con glucoprotenas. La lmina densa no es visible al microscopio ptico, aunque la membrana basal s con coloraciones de PAS y plata. La lmina basal descansa sobre una lmina reticular de fibras de colgeno tipo I y III. Tejido avascular: El epitelio no posee vasos sanguneos, por lo que no tiene riego sanguneo propio. El metabolismo depende de la difusin de oxgeno y metabolitos procedentes de los vasos sanguneos del tejido conectivo de sostn, que est por debajo de la membrana basal. Polarizacin: Las clulas epiteliales estn polarizadas en la mayora de los casos, es decir, tienen: Un polo luminal o apical cuya superficie est en contacto con el exterior del cuerpo o con la luz del conducto o cavidad. Las especializaciones apicales son modificaciones que comprenden a la membrana citoplasmtica y a la porcin apical del citoplasma.

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Microvellosidades: Son expansiones citoplasmticas cilndricas limitadas por la unidad de membrana cuya principal funcin es aumentar la superficie de absorcin. Estereocilias: Son microvellosidades largas que se agrupan en forma de manojos piriformes. Son inmviles, estaran relacionados con la absorcin y transporte de lquidos. Se ubican en el epitelio del epiddimo o plexos coroideos. Cilios: Formaciones celulares alargadas dotadas de movimiento pendular u ondulante. Son ms largas que las microvellosidades. Flagelos: Su estructura es semejante a la de una cilia aunque de longitud mayor. Un polo o basal cuya superficie est en contacto y paralela a la lmina basal sobre la que se apoya la clula. Pueden existir: Invaginaciones: Son repliegues de la membrana ms o menos profundos que compartimentan el citoplasma basal. Hemidesmosomas: Son desmosomas monocelulares que posibilitan la unin del epitelio a la lmina basal. Superficies laterales que mantienen unidas las clulas entre s, mediante las uniones celulares. Esta polaridad espacial afecta a la disposicin de los orgnulos y a las distintas funciones de las membranas en las distintas superficies celulares. Regeneracin: Los epitelios estn en continua regeneracin: Las clulas epiteliales tienen un ciclo celular de corta duracin, debido al desgaste continuo al que estn sometidas. Por cada clula madre que se divide, sobrevive una que contina dividindose y otra que sufrir el proceso de diferenciacin celular y especializacin, hasta envejecer y morir por apoptosis. Desarrollo embrionario de los epitelios: Los epitelios son los primeros tejidos que aparecen en la ontogenia, pudiendo derivar de cualquiera de las tres hojas o capas celulares que constituyen el embrin: mesodermo, ectodermo o endodermo. Los epitelios derivados del mesodermo que revisten las cavidades celmicas (cavidades pulmonares, cavidad cardaca y abdomen) se llaman mesotelios y los que tapizan los vasos sanguneos: endotelios. Todas las sustancias que ingresan o se expulsan del organismo deben atravesar un epitelio. La mayora de los tumores malignos se originan en los epitelios y se denominan carcinomas. Funcin de los epitelios Proteccin: Los epitelios protegen las superficies libres contra el dao mecnico, la entrada de microorganismos y regulan la prdida de agua por evaporacin, por ejemplo la epidermis de la piel. Secrecin de sustancias: Por ejemplo el epitelio glandular. Adquiere la capacidad de sintetizar y secretar molculas que producen efecto especfico. Absorcin de sustancias: Por ejemplo los enterocitos del epitelio intestinal, que poseen: Enterocilios, que son unas expansiones filiformes largas carentes de movimiento situadas en el polo luminal que parecen contribuir a la absorcin. Los enterocilios estn formados por un haz central de filamentos de actina y un fieltro terminal de protenas. Microvellosidades, que son unas expansiones cilndricas de la membrana del polo luminal que aumentan la superficie de las clulas intestinales. Estn formados por: a) Un haz de 25-35 filamentos de actina en el eje, b) Vilina, un polipptido que mantiene unido el haz de actina, c) Fieltro terminal de anclaje en la vaso (miosina, tropomiosina y otros polipptidos). Numerosas enzimas indispensables para la digestin y el transporte de diversas sustancias.

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Recepcin sensorial: Los epitelios contienen terminaciones nerviosas sensitivas que son importantes en el sentido del tacto en la epidermis, del olfato en el epitelio olfativo, del gusto en epitelio lingual y forman los receptores de algunos rganos sensoriales. Excrecin: Es la funcin que realiza muchos de los epitelios renales. Transporte: Es una de las funciones que realizan el epitelio respiratorio al movilizar el moco al exterior mediante el movimiento de los cilios, o el epitelio de las trompas de Falopio, al transportar el cigoto al tero. Clasificacin de los epitelios

Segn la funcin del epitelio: o Epitelio de revestimiento o pavimentoso: Es el que recubre externamente

la piel o internamente los conductos y cavidades huecas del organismo, en el que las clulas epiteliales se disponen formando lminas.

o Epitelio glandular: Es el que forma las glndulas y tiene gran capacidad de producir sustancias.

o Epitelio sensorial: Contiene clulas sensoriales y en una forma epitelial adicional.

o Epitelio respiratorio: De las vas areas. o Epitelio intestinal: Contiene clulas individuales con funcin sensorial

especfica. Segn la forma de las clulas epiteliales:

o Epitelios planos o escamosos: Formado por clulas planas, con mucho menos altura que anchura y un ncleo aplanado.

o Epitelios cbicos: Formado por clulas cbicas, con igual proporcin en altura y anchura y un ncleo redondo.

o Epitelios prismticos o cilndricos: Formado por clulas columnares, con altura mucho mayor que la anchura y un ncleo ovoide.

Segn el nmero de capas de clulas que lo formen: o Epitelio simple. o Epitelio estratificado.

Objetivo: Esta prctica microscpica est dedicada a reconocer la estructura de los epitelios, analizando su arquitectura, ubicacin y algunas caractersticas bsicas de sus funciones. Para lo cual requerimos de laminillas teidas con tcnicas convencionales, como Hematoxilina y Eosina (HE), para observar las caractersticas de los epitelios. Duracin de la sesin: 2 horas. Material: Fsico.- Laminillas de piel, trquea, pulmn, esfago, tracto intestinal, vejiga urinaria, urter, rin y tero teidas con hematoxilina eosina. Laboratorio.- 20 microscopios por sesin, aceite de inmersin y papel especial para limpieza de lentes.

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Interpretacin u observaciones: Se identificar, con apoyo del docente la arquitectura histolgica de los epitelios, especificando las caractersticas de cada tipo y ubicacin de los rganos. Preguntas para discusin: 1.- Menciona cmo determinas la bsqueda microscpica de los epitelios en un corte histolgico? 2.- Realiza el dibujo de los tipos de epitelio encontrados en el tejido pulmonar y trquea, indicando con flechas el nombre de cada epitelio identificado. 3.- Realiza el dibujo de los tipos de epitelio encontrados en la vejiga urinaria, y urter, indicando con flechas el nombre de cada epitelio identificado. 4.- Realiza el dibujo de los tipos de epitelio encontrados en el corte de intestino, indicando con flechas el nombre de cada epitelio identificado y si encontraste alguna estructura anexa a algn epitelio. 5.- Realiza el dibujo de los tipos de epitelio encontrados en el corte de tero, indicando con flechas el nombre de cada epitelio identificado y si encontraste alguna estructura anexa a algn epitelio. Evaluacin: La prctica ser acreditada por asistencia, participacin y entrega de reporte escrito realizado in situ. Lugar donde se llevar a cabo: laboratorio de prcticas de la FMVZ Bibliografa especfica: Banks William J. (1995): Histologa Veterinaria Aplicada. 2a ed. El Manual Moderno, Mxico D.F. Bacha, W. J.; Bacha, L.M.; Wood, L. M. (2001): Atlas color de Histologa Veterinaria. 2da ed. Interamericana, Buenos Aires, Argentina. Banks, W. J. (1974): Histology and Comparative Organology. The Williams & Wikins Co. Baltimore, USA. Ham, A. W. (1997): Tratado de Histologa. 8a. Ed. Interamericana, S. A. Mxico. Junqueira, L.C. y Carneiro, J. (1988): Histologa. 3a ed. Salvat editores, Barcelona, Espaa. Paulsen, F.D. (1991): Histologa Bsica. El Manual Moderno, S.A de C.V. Mxico, D.F. Manzalda Arce S.R., Tolosa Snchez J. (2001) Manual de prcticas de histologa Veterinaria. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.

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Prctica No.7

Nombre: Tejido conjuntivo Introduccin

La denominacin "tejido conjuntivo" (o "tejido conectivo") es un trmino que agrupa diversos subtipos de tejidos; entendido as (sin ninguna aclaracin) se hace referencia entonces a "los tejidos conjuntivos" en general, especializados y no especializados. Para referirse exclusivamente al tejido conectivo no especializado, sin caer en ambigedades, se utiliza la denominacin "tejido conjuntivo propiamente dicho". Lo llaman tejido adiposo encefalorraquideo. El tejido conectivo propiamente dicho es aquel tipo de tejido conectivo ubicuo, de funcin ms general, menos diferenciado desde una ptica histofisiolgica.

Tejidos conectivos no especializados: Tejido conectivo laxo: (es siempre irregular): Tejido conectivo mucoso o gelatinoso, Tejido conjuntivo reticular, Tejido mesenquimal Tejido conectivo denso: Tejido conectivo denso regular, Tejido conectivo denso irregular.

Tejidos conectivos especializados: Tejido adiposo,Tejido cartilaginoso, Tejido seo, Tejido hematopoytico, Tejido sanguneo (sangre). Dependiendo de los criterios histolgicos usados para la clasificacin de los tejidos, la sangre es considerada por algunos como un tipo especializado de tejido conectivo cuya matriz es lquida (Plasma sanguneo); otros entienden la sangre como un tejido bsico ms, elevando a cinco el nmero de tejidos primordiales: tejidos epitelial, conectivo, sanguneo, muscular, y nervioso. Como mesnquima embrionario, se entiende al conjunto de tejidos mesenquimales del embrin. El tejido mesenquimal es el tejido conectivo del organismo embrionario, no importa su origen. En general, se establece que los tejidos conectivos embrionarios tienen origen mesodrmico. Con el desarrollo embrionario y luego fetal, el tejido mesenquimal "va madurando" y diferencindose, no slo hacia los diferentes tipos de tejido conectivo (laxo, denso, adiposo, cartilaginoso, seo, hematopoytico y sanguneo), sino tambin hacia el tejido muscular. De esta forma, mltiples estructuras parten de la diferenciacin del mesnquima. Tejido conectivo denso modelado: El tejido conectivo denso modelado o regular, se forma por el ordenamiento paralelo de las fibras colgenas (teidas de azul) entre las se observan fibroblastos (ncleos ovoides de cromatina laxa) y fibrocitos (ncleos alargados de cromatina densa) que se disponen paralelos tambin a las fibras colgenas. Las fibras colgenas son las ms abundantes y gruesas del tejido conectivo. Existen 15 tipos, siendo la colgena de tipo 1 la ms abundante. Vistos al natural las fibras son de color blanquecino, y son sintetizadas por: fibroblasto, osteoblasto, odontoblasto, condroblasto y clula muscular lisa.

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Componentes del tejido Como todo tejido, est constituido por clulas y componentes extracelulares asociados a las clulas. La sustancia fundamental y las fibras son los componentes extracelulares conocidos genricamente como matriz extracelular de los cuales dependen mayoritariamente las caractersticas morfofisiolgicas de los tejidos conectivos en general. La siguiente es una descripcin de los elementos que conforman el tejido conectivo no especializado (tanto laxo como denso). Sustancia fundamental La sustancia fundamental (SF) es un material translcido, extensamente hidratado y de consistencia gelatinosa, en el que estn inmersas las clulas y las fibras tisulares y otros componentes en solucin. La fase acuosa de la SF funciona como un solvente que permite el intercambio de metabolitos (nutrientes y desechos) de una clula a otra a travs del espacio intersticial. Las caractersticas fsico-qumicas de la SF estn dadas por su composicin biolgica: protenas y glucosaminoglucanos (GAGs) asociados (proteoglicanos). Inicialmente conocidos como mucopolisacridos cidos, actualmente identificados como GAGs, principalmente se hallan: condroitn sulfato, heparn sulfato, queratn sulfato y cido hialurnico. Los GAGs son macromolculas complejas de polisacridos (polmeros hidrfilos) asociados a protenas, con reaccin cida y numerosos grupos aninicos que atraen cationes solubles (principalmente Na+) con un gran efecto osmolar (por "arrastre de agua") que contribuye a la turgencia de la matriz intercelular. En las preparaciones convencionales "se lavan" los polmeros, por ello se aplican tcnicas histolgicas especiales para conservar la SF en las preparaciones: fijacin con vapores de ter-formaldehdo de cortes congelados para microscopa ptica; sino, congelacin presurizada + criosustitucin + inclusin a baja temperatura para microscopa ultraestructural. El colorante azul de toluidina presenta el fenmeno de metacromasia (vira a prpura) al contacto con la SF. Generalmente se usan tinciones especiales: cido perydico de Schiff (PAS +), azul Alcin, hierro coloidal, etc. Otros componentes asociados

glucoprotenas de adhesin: o fibronectina, laminina, trombospondina. o integrinas

productos de excrecin celular (hormonas, factores de crecimiento, quimiotcticos, etc.).

Fibras

Las fibras que componen la matriz intercelular pueden ser de varios tipos: fibras colgenas, fibras elsticas y microfibrillas. Por mucho, cualitativa y cuantitativamente, el clageno es la fibra ms importante y ms abundante en nuestro organismo. Los fibroblastos son las principales clulas productoras de las fibras colgenas y elsticas; otros tipos de clulas de origen mesenquimal tambin sintetizan fibras (msculo liso, clulas mesoteliales, etc.) y tambin las clulas epiteliales. Fibras colgenas. Las fibras colgenas sirven para resistir estiramientos y estn presentes en todo tipo de tejido conjuntivo en particular los tendones, los ligamentos y las fascias.

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Fibras reticulares: forman parte de una red de soporte, son inelsticos presentes envolviendo rganos. Antiguamente consideradas fibras diferentes, son fibras compuestas por colgeno tipo III. Fibras elsticas. Las fibras elsticas estn compuestas por dos tipos de protenas: la elastina y la fibrilina. Son fibras ms delgadas que las fibras colgenas y abundan en tejidos conectivos laxos. Las fibras elsticas tienen un aspecto ramificado y entramado tipo red en el TC laxo; o sino, un aspecto fibroso paralelo y de banda perforada en el TC denso. Para poder visualizar estas fibras hay que emplear tcnicas tinctoriales especiales como: el mtodo de Weigert (resorcina-fuscina) o mtodo de Halmi (aldehdo-fuscina), pues son dficilmente distinguibles con la tincin comn de hematoxilina-eosina. Son extremadamente elsticas y estn adaptadas al estiramiento, pues pueden incrementar hasta 1,5 veces su longitud frente a la traccin y volver a su posicin normal. As, las fibras elsticas estn presentes en tejidos y rganos donde se necesita esta propiedad fsica: la trquea, las cuerdas vocales y las paredes de los vasos sanguneos (aorta). La elastasa pancretica es la enzima especializada en la digestin de esta protena fibrilar. El latirismo es una enfermedad toxicolgica que afecta la sntesis de las fibras elsticas, es producida por la ingestin de la planta Lathyrus odoratus. Microfibrillas. La fibrilina es una glucoprotena fibrilar de 350 kD asociada especialmente a las fibras elsticas y abundante en la lmina basal de los epitelios. Clulas del tejido conjuntivo Aunque algunas de ellas son levemente mviles (clulas libres), las clulas del tejido conjuntivo son esencialmente fijas e inmviles (clulas ssiles).

Clulas mesenquimales. Son caractersticos en los estados embrionario y fetal como elemento celular en el tejido mesenquimal. Son las que se diferencian en los restantes tipos de clulas conjuntivas. Se pueden localizar en los capilares despus del nacimiento.

Fibroblastos. Clulas altamente basoflicas debido a su alto contenido de Retculo Endoplasmtico. Llamados fibrocitos en su estado inactivo.

Adipocitos o clulas adiposas. Son clulas que almacenan grasa, constituyendo sta el mximo bulto de su citoplasma.

Clulas reticulares. Tienen forma de estrella y participan junto con las fibras reticulares en glndulas y el sistema linfoide.

Glbulos blancos. Los componentes celulares del sistema inmune, de varios tipos y funciones. Tambin llamados leucocitos.

Tejido conectivo laxo El TC laxo se caracteriza porque la presencia de clulas y componentes extracelulares de la matriz en proporcin es ms abundante que los componentes fibrilares. Hay varios subtipos de TC laxo. Tejido conectivo mucoso. Es un tejido conectivo laxo en el que predomina la sustancia fundamental amorfa compuesta por cido hialurnico. La celularidad es media, principalmente fibroblastos y macrfagos, irregularmente dispersos en la matriz jaleosa. No es frecuente penetrar este tipo de tejido en el adulto, pero s en el cordn umbilical del recin nacido, un material conocido como Gelatina de Wharton; tambin en la pulpa de los dientes en escasa cantidad.

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Tejido conectivo reticular. El tipo reticular de TC laxo se caracteriza porque abundan las fibras reticulares argirfilas, compuestas por colgeno de tipo III. Dan un aspecto de entramado de red tipo malla, en el que se distribuyen los fibroblastos esparcidos por la matriz. El TC reticular compone la estroma de la mdula sea, el bazo, los ganglios linfticos y el timo, dando sustento y armazn microclimtico al parnquima. Tejido mesenquimal. Compone el mesnquima embrionario, o la totalidad de los tejidos conectivos diferenciados y en diferenciacin en el embrin. Estos tejidos primariamente tienen una consistencia laxa y son ricos en clulas mesenquimales que por diferenciacin aportan clulas especficas para cada tipo de tejido maduro. Tejido conectivo denso o fibroso El tejido conectivo denso puede adoptar dos tipos bsicos de configuraciones: Tejido conectivo denso regular. Es el tipo de TC que forma los tendones, aponeurosis, ligamentos y en general

histología y embriología

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