helicobacter pylori (igas y test de ureasa)
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EVALUACIÓNDE LOS NIVELES DE INMUNOGLOBULINA
A SECRETORA ANTI-Helicobacter pylori Y TEST DE UREASA
EN UNA POBLACIÓN INFANTIL DE CUMANÁ, ESTADO
SUCRE
Introducción
Introducción
Helicobacter pylori Enfermedad
Crónica
OMS 1994
Carcinógeno tipo I
IntroducciónTaxonomía
Reino: Procarionte
Orden: Eubacteriales
Superfamilia: Proteobacteria
Familia: Helicobacteriaceae
Género: HelicobacterSiglo XIX
Bacilo Gram
negativo, forma de
S, móvil, 4-6
flagelos
Introducción
Factor de Virulencia
Citotoxina(CagA)
Codificada por el gen CagA
Gastritis crónica, atrófica, úlcera
péptica
Citotoxinavacuolizante
(VagA)
Codificada por el gen VagA
Formación de las vacuolas en
células del epitelio gástrico
Introducción
Tratamiento erradicadorOmeprazol
Claritromicina
Amoxicilina
Signos y Síntomas
Dolor epigástrico
Náuseas
Vómitos
Pérdida del apetito
Asfixia
Flatulencia
Introducción
Diagnóstico de H. pylori
Técnicas Invasivas
Técnicas no InvasivasPrueba rápida de ureasa
Sensibilidad 98,0%
Especificidad 97,0%
Introducción
Pacientes infectados
por H. pyloriIgG, IgA, IgM
Producen
Indican infección inicial
o activa
ELISA
Sensibilidad 90,0%
Especificidad 85,0%
Introducción
Inmunoglobulinas
La IgA constituye
De 10-15%
La IgAs puede jugar un
papel protector contra la
colonización de H. pylori.
Los individuos con deficiencias
de IgA, pueden mostrar una
mayor frecuencia de infecciones
gastrointestinales causadas por
patógenos entéricos.
Introducción
• Tasas elevadas de infección en la infancia
• 70-80%
Países con bajas
condiciones higiénico-sanitarias
• La infección se concentra en la edad adulta
• 11-60%
Naciones desarrolladas
Se observan mayores tasas de
infección en clases socialmente
bajas con nivel cultural escaso,
con malos hábitos higiénicos-
dietéticos y hacinamiento .60% de la población
venezolana, portadora
de H. pylori
Úlcero-péptica
Gastritis atrófica
Adenocarcinoma
gástrico
Introducción
Observándose una tendencia
al aumento de los niveles de
IgAs, siendo estos niveles
más elevados en pacientes
con gastritis crónica activa y
H. pylori positivo.
Cavazza et al., 2005
Introducción
La detección de IgAs presentó una
buena correlación con los hallazgos
histológicos y bioquímicos; además,
cuando se confrontó con los valores de
IgG en suero, expresó una mejor
correspondencia con la enfermedad.
Ortíz et al., 2009
Objetivos
Objetivos
General
Evaluar la presencia de Inmunoglobulina
A secretora (IgAs) anti- Helicobacter pylori
(H. pylori) y la prueba de ureasa en una
población infantil de Cumaná, estado
Sucre.
ObjetivosEspecíficos
Determinar la presencia de la IgAs anti- H.pylori ensaliva utilizando ensayo inmunoenzimático (ELISA)en la población infantil en estudio.
Determinar mediante la prueba de ureasa lapresencia de H. pylori en las muestras de biopsiasde la población infantil estudiada.
Asociar los niveles de IgAs anti- H. pylori con laprueba de ureasa en la población infantil estudiada.
Metodología
Metodología
Edad: 2-12 años
Ambos sexos
Autorización
firmada por el
representante
Recolección de
la muestra
Población
MetodologíaRecolección de la muestra de saliva
Las muestras fueron
transportadas en dichos envases
estériles y se conservaron a -
20ºC.
Recolección de la muestra de biopsia
Olympus XQ10-OES
La muestra se colocó
en el medio comercial
CLO-test.
Metodología
ELISA
Lectura a 450 nm, con un
lector de ELISA marca
Rayto, modelo RT-
2100C.
100 de saliva
en microplacas
Se lavo 3 veces
con 300 de sln
de lavado
30’ 18-25ºC
100 de
antisuero anti-
IgA
Se lavo 3 veces
con 300 de sln
de lavado
30’ 18-25ºC
100 de sustrato
crómogeno
15’ 18-25ºC
100 de sln de
parada
Procedimiento
Metodología
Procedimiento
CLO-test
Biopsia colocada
en el test
3 h a
37ºC
Transcurrido el tiempo
de incubación, se
colocó a TA.
Positivo
Negativo
(NH2)2CO+2H2O+H+
2NH4++HCO3
-
ureas
a
MetodologíaAnálisis Estadístico
Estadística Descriptiva (Tablas)
Chi-cuadrado ( 2) con un nivel de
confiabilidad de 95,0%
Resultados y Discusión
Resultados y DiscusiónTabla 1. Relación porcentual de los resultados de la Inmunoglobulina A secretora anti-
H. pylori en saliva en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología infantil
del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná,
estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011.
Inmunoglobulina
A secretora anti-
H. pylori
Número (Nº) Porcentaje (%)
Positivo 16 44,4
Negativo 20 55,6
Total 36 100
Cavazza et al., (2005)
Ortiz et al., (2003)
Resultados y DiscusiónTabla 2. Relación porcentual de los resultados de la prueba de ureasa en pacientes
que acudieron al servicio de gastroenterología infantil del Servicio Autónomo Hospital
Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, septiembre-
diciembre de 2011.
Test de Ureasa
para H. pylori
Número (Nº) Porcentaje (%)
Positivo 13 36,1
Negativo 23 63,9
Total 36 100
Salvatierra et al., (2000)
Sánchez et al., (2008)
Resultados y DiscusiónTabla 3. Asociación entre la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori y la
prueba de ureasa en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología
infantil del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”,
Cumaná, estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011.
Test de
Ureasa
Inmunoglobulina A secretora
Presencia Porcentaje
(%)
Ausencia Porcentaje
(%)
Total Porcentaje
(%)
2
Positivo 12 33,3 1 2,8 13 36,1
15,97Negativo 4 11,1 19 52,8 23 63,9
Total 16 44,4 20 55,6 36 100
*: p<0,01 (significativo); ns: p>0,01 (no significativo)
Cavazza et al., (2005)
ConclusionesLa prueba de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori arrojo excelentes resultados queconcuerdan con la patología del paciente.
La técnica de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. puede ser utilizada para elpylori monitoreo deltratamiento durante la infección.
La prueba de ureasa, confiere resultadosdirectamente proporcionales a la cantidad debacterias presentes en la muestra.
La prueba de ureasa y la Inmunoglobulina Asecretora anti-H. pylori son variablesindependientes, no se encuentran asociadasentre sí.
Existe asociación entre la Inmunoglobulina Asecretora anti-H. pylori y la forma activa de lagastristis crónica causada por H. pylori.
RecomendacionesEs recomendable utilizar, al menos, dos métodos para eldiagnóstico de H. pylori.
Promover cursos y campañas de entrenamiento dirigidos a losbioanalistas y a estudiantes para dar a conocer las nuevastécnicas para el diagnóstico de H. pylori.
Para la determinación de H. pylori a través de técnicas noinvasoras y fácilmente aplicables, destaca la Inmunoglobulina Asecretora en saliva por su facilidad de obtención, sensibilidad,especificidad y que además muestra una alta certeza paratamizar pacientes positivos para H. pylori, es por ello que serecomienda el uso de esta técnica en los laboratorios depruebas especiales.
Para futuros estudios, podrían incluirse un número mayor depacientes con un rango de edad más amplio, un número mayorde pruebas a emplear o realizar monitoreo del tratamiento através de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori.