VINEO™ Kit de extracción de ADN354-8100

Guía Rápida

Por favor, lea el manual de instrucciones para obtener información completa y detallada.

• Diluir 100X W1 (ver los Apéndices 1 y 2 de las instrucciones)

• Encender la centrífuga y regularla a 4ºC

• Encender el bloque calefactor y regularlo a 95ºC

• Homogeneizar el reactivo R1

• Preparar el número requerido de columnas de purificación(= número de muestras + control)

Preparación del equipo

• Tubo + 1,8 ml muestra

Protocolo para “Análisisde mosto-vino durante

el proceso de vinificación”

• Tubo + 45 ml muestra

Protocolo para “El análisisde vino listo para embotellar”

Concentración/Lavado celular

W1100X

W11X

H2O

1,8 ml 45 ml

• Añadir 1,8 ml de W1 diluido a 1X • Añadir 45 ml de W1 diluido a 1X

1,8 mlW11X

45 mlW11X

• Añadir 1 ml de W1 diluido a 1X

1 mlW11X

6 000 g

4°C

20 seg

* *

• Centrifugar durante 5 min, 6 000 g, 4°C

• Eliminar el sobrenadante

• Agitar en vórtex durante 20 seg y después agitarinvirtiendo el tubo

• Centrifugar durante 5 min, 6 000 g, 4°C

• Eliminar el sobrenadante

• Agitar en vórtex durante 20 seg

• Transferir a un tubo de 2 ml con tapade rosca

• Centrifugar durante 5 min, 6 000 g, 4°C

• Eliminar el sobrenadante

5 min

95°C4°C

Repetir 2 veces desde * Repetir 1 vez desde *

6 000 g

4°C

5 min

20 seg

6 000 g

4°C

5 min

100 μlR2

Nuevo tubo de recogida

Lisis celular

Por favor, lea el manual de instrucciones para obtener información completa y detallada.

A partir de este paso, trabajar con guantes sin talco• Añadir 800 μl de R1

• Agitar en vórtex durante 20 seg

• Colocar en el bloque calefactor durante 15 min a 95°C

• Dejar enfriar durante 5 min

• Añadir 500 μl de sobrenadante de lisis a la columna de purificaciónNo eliminar la resina

• Centrifugar durante 10 min, 6 000 g, 20°C

• Vaciar el contenido del tubo de recuperación

• Añadir 100 μl de R2 a la columna de purificación

• Cubrir la parte superior de la columna con un nuevo tubo de recuperación

• Invertir todo (columna de purificación y tubo de recuperación)

• Centrifugar durante 3 min, 1 000 g, 20°C

Las muestras de ADN purificado pueden congelarse a -20°C,almacenarse durante 24 horas a 4°C o analizarse directamentemediante el método PCR

500 μl sobrenadante

• Añadir 100 μl de W2 frío

• Agitar en vórtex durante 5 seg

• Refrigerar durante 15 min a 4°C

• Centrifugar durante 15 min, 12 000 g, 4°C

100 μlW2

4°C

15 min

20°C

10 min

4°C

15 min

95°C

15 min800 μlR1

12 000 g

6 000 g

• Añadir 250 μl de sobrenadante de lisis a la columna de purificación

• Centrifugar durante 10 min, 6 000 g, 20°C

• Desechar el tubo de recuperación

250 μl sobrenadante

20°C

10 min

6 000 g

20°C

3 min

Purificación ADN

1 000 g

20 seg

Web site www.bio-rad.com USA 800 4BIORAD Australia 61 02 9914 2800 Austria 43 (0) 1 877 89 01 Belgium 09 385 55 11 Brazil 55 21 3237 9400Canada 1 800 268 0213 China 86 21 6305 2255 Czech Republic 420 241 430 532 Denmark 44 52 10 00 Finland 09 804 22 00 France 33 1 47 95 62 59Germany 49 (0) 89 318 84 0 Greece 30 210 777 4396 Hong Kong 852 2789 3300 Hungary 36 1 455 8800 India 1-800-180-1224Israel 03 951 4127 Italy 39 02 216 091 Japan 03 5811 6270 Korea 82 2 3473 4460 Latin America 305 894 5960 Mexico 52 555 488 7670The Netherlands 31 318 540 666 New Zealand 64 9 415 2280 Norway 23 38 41 30 Poland 48 22 331 99 99 Portugal 351 21 472 7700Romania 4021 210 1703 Russia 7 095 721 1404 Singapore 65 6415 3188 South Africa 27 11 442 8508 Spain 34 91 590 5200 Sweden 46 8 555 12700Switzerland 41 (0) 61 717 95 55 Taiwan 886 2 2578 7189 Thailand 662 651 8311 United Kingdom 44 20 8328 2000 Vietnam 848 823 6757

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Bio

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