extracciÓn del licopeno y b

5/12/2018 EXTRACCIÓN DEL LICOPENO Y B - slidepdf.com

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EXTRACCIÓN DEL LICOPENO Y B-CAROTENO DEL TOMATE

Resumen

Se aislaron los pigmentos vegetales licopeno y beta caroteno del tomate, a partir de una

extracción solido-liquido con diclorometano como solvente; estos compuestos se

purificaron por cromatografía en columna y caracterizaron por espectrofotometría UV-vis,

determinando tres máximos de absorción para el licopeno en 482nm, 514nm y 455nm y

dos para el beta caroteno en 448nm y 474nm, confirmando con base en los datos de la

literatura la extracción de estos carotenoides.

Palabras clave: licopeno, beta caroteno, tomate.

Análisis de resultados

En la primera etapa del proceso de extracción de los carotenoides, la pasta de tomate setrató con 20mL de etanol 95% con el fin de separar todos los compuestos polares que no

son de interés y de esta manera disminuir la complejidad del extracto. Entre las

sustancias separadas en esta etapa, se encuentran los minerales como el K, P, Ca, Na, y

Mg, el agua que es aproximadamente el 93% del tomate, los azucares, algunas proteínas,

y las vitaminas hidrosolubles B1, B2, B3, B6, B9, B12 y C, que hacen parte del tomate.

Los compuestos apolares que quedaron en el residuo de la pasta, entre los que se

encuentran los carotenoides, así como algunas grasas y vitaminas (A y E) se extrajeron

por maceración química con diclorometano como solvente ( fig. 1) que al ser de naturaleza

apolar solubiliza muy bien estos compuestos.

Fig. 1 Extracción de los carotenoides del tomate

Extraídos los analitos de interés junto con otros componentes de igual polaridad, se

procedió a realizar una extracción liquido-liquido con una solución saturada de NaCl, la

cual al aumentar la fuerza iónica del medio, destruye cualquier emulsión que se genere y



hace mas polar esta fase, por lo que si existen algunos componentes apolares disueltos

en la fase acuosa, son arrastrados hacia la orgánica (fig. 2). El extracto orgánico separado

se trató con NaSO4 anhidro, con el fin de eliminar las trazas de agua presentes en esta

fase.

Fig. 2 Extracción liquido-liquido de los carotenoides

El solvente diclorometano se evaporó con el rotavaporador, con lo que se obtuvo un

residuo fino color anaranjado, el cual contenía los carotenoides. Este residuo se disolvió

con una pequeña cantidad de tolueno, que al ser un solvente más apolar que el

diclorometano, es más selectivo, por lo que solubiliza los componentes más apolares del

extracto, como el licopeno y el beta caroteno (fig. 2).

La purificación de estos pigmentos se realizó por cromatografía en columna, utilizando

como fase estacionaria silica gel. La muestra se introdujo en la columna previamente

humedecida con diclorometano y se empezó adicionar este solvente (fase móvil) hasta la

elución del licopeno, que al ser el más apolar de los dos carotenoides fue eludido primero.

Dado que la fase estacionaria es de naturaleza polar, retiene con mayor fuerza el

componente con carácter más levemente polar de estos dos compuestos, por lo que el



beta-caroteno fue el último en ser eludido (fig. 3). La elución de este pigmento se realizó

con metanol, un solvente de carácter polar.

Fig. 3 Separación por cromatografía en columna del licopeno y beta caroteno

Debido al gran número de dobles enlaces conjugados que presentan estos carotenoides

en su estructura, absorben radiación en la región visible del espectro electromagnético,

razón por la cual exhiben su color característico. Tanto el licopeno como el beta caroteno,

se caracterizaron por espectrofotometría UV-vis, obteniendo sus espectros en el rango de

300-700nm.

Grafico 1. Espectro de absorción del licopeno extraído

Grafico 2. Espectro de absorción teórico del licopeno



A partir de los gráficos 1 y 2 se determina que el compuesto extraído corresponde al

licopeno, ya que su espectro de absorción el cual muestra tres máximos (482nm, 514nm y

455nm) coincide con el reportado en la literatura. El desplazamiento del espectro

experimental hacia longitudes de onda mayores, se debe a un efecto batocrómico

generado por el solvente. Cabe mencionar que el licopeno al absorber radiación azul

verdosa (482nm) de la luz blanca, emite el color anaranjado observado.

Grafico 3. Espectro de absorción del beta caroteno extraído

Grafico 4. Espectro de absorción teórico del beta caroteno

Como se puede observar en los gráficos 3 y 4, se determina que el beta caroteno fue

aislado satisfactoriamente del tomate, ya que los máximos de absorción del espectro

obtenido para este compuesto (448nm y 474nm) coinciden con los registrados en la

literatura; Sin embargo se debe tener en cuenta que este pigmento no esta totalmente



puro, ya que se puede observar en el espectro ciertas bandas que no corresponden a

este carotenoide.

A parte de la caracterización por esta técnica espectroscópica, también se llevó a cabo

dos pruebas cualitativas para determinar carotenoides; una con acido sulfurico y otra con

tricloruro de antimonio. Tanto el licopeno como el beta caroteno dieron positivo estos

ensayos, ya que al reaccionar con estos reactivos, se observó que tomaban una color

azul intensa, característica de los carotenoides al llevar a cabo estas reacciones.

Conclusiones.

A partir de espectrofotometría UV-vis y pruebas cualitativas, se logró establecer que los

carotenoides licopeno y beta caroteno es aislaron satisfactoriamente del tomate.

En el espectro obtenido del beta caroteno se observa que este pigmento no esta

totalmente puro, ya que las bandas características de este compuesto están solapadas

por las bandas de otros componentes.

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