el mantenimiento de la memoria serológica por la activación policlonal de las células b de...

8/18/2019 El Mantenimiento de La Memoria Serológica Por La Activación Policlonal de Las Células B de Memoria Humana

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EL MANTENIMIENTO DE LA MEMORIA SEROLÓGICA PORLA ACTIVACIÓN POLICLONAL DE LAS CÉLULAS B DE

MEMORIA HUMANA

1. Nadia L. Bernasc ni * !". E#isa$e%%a Tra&&iai * !'. An% ni Lan(a)ecc*ia †

+ Afliaciones de los autores

Ciencia 13 de Dic 2002:vol. . 298, No. 5 01, !! 2199"2202D#$: 10.112 % science.10& 0&1

'a esti(ulaci)n !or el ant eno a trav s del rece!tor de c lulas - -/ ,se uido de la !roli eraci)n de c lulas au4iliares co nadas di erenciaci)n de los lin ocitos - v r enes es!ec fcos de ant eno en lasc lulas - de (e(oria c lulas de !las(a 1 , " ./ lulas - de (e(oria6ue llevan sus enes de in(uno lo7ulina so( tica (utada $so7reviven en los )r anos lin oides secundarios en ausencia de ant eno

' (edia las res!uestas in(unes secundarias a laso7ree4!osici)n. n contraste, las c lulas !las( ticas est ndi erenciadas, no se dividen , las al7er a el 7a o la ( dula )sea son la !rinci!al uente de anticuer!os, 6ue se secretan a una velocidadalta. 'as c lulas !las( ticas de rat)n !ueden ser de lar a vida sonca!aces de sostener la !roducci)n de anticuer!os durante varios (esesen ausencia de c lulas - de (e(oria o ant eno + , , . ;in e(7ar o,

A$s%rac%

'a !roducci)n de anticuer!os !uede durar toda la vida, a trav s de(ecanis(os 6ue si uen siendo !oco conocidos. A6u , se (uestra 6ue los

lin ocitos - de (e(oria os des!u s de la esti(ulaci)n anti nica. Aun6ue el ant eno dere uer o conduce a un au(ento transitorio de los niveles de anticuer!oses!ec fcos, la activaci)n !oliclonal en curso de las c lulas - de (e(oria

http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#fn-1http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#fn-1http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#fn-2http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.fullhttp://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-1http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-2http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-3http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-4http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-5http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#fn-1http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#fn-2http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.fullhttp://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-1http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-2http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-3http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-4http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#ref-5http://science.sciencemag.org/content/298/5601/2199.full#fn-1


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es (enos !ro7a7le 6ue las c lulas !las( ticas de lar a vida 6ue se!rodu?eron durante una res!uesta in(une va an a (antener unsu(inistro constante de anticuer!os es!ec fco durante un lar o !er odode vida, !or6ue las c lulas !las( ticas incluso las de lar a duraci)n

tienen la necesidad de ser eventual(ente ree(!la adas durante toda lavida


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(ediante la clasifcaci)n !ara la e4!resi)n de /D2& 1' los isoti!osde $ 2i&. 1 a , (arcada con ster de diacetato de car7o4iIuoresce nasuccini(idil /J; , la !rue7a de su ca!acidad !ara !roli erar enres!uesta a /!= 2i&. 1 - 1+ . n estas condiciones, las c lulas -

v r enes no se dividen, aun6ue ellas u!"re ulated is t


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La proliferación selectiva de los subgrupos de linfocitos B de memoria enrespuesta a CpG y linfocitos T auxiliares.

(A) Patrón que se utiliza para la clasi cación. Las c!lulas CD19 + aisladas por clasi cación magn!tica se ti"eron con anticuerpos frente a CD27 e isotipos de#g $ R1 % c!lulas B v&rgenes' R2 % c!lulas B de memoria de tipo #g(' R3 % c!lulas Bde memoria de tipo )s*itc+,-.

(B) estimulación con CpG. e cultivaron / 0 12 3 c!lulas B marcadas conC4 5 en presencia o ausencia de CpG 6227% #L819% o fragmentos 4 $ab :- 6 deanticuerpo de cabra a #g +umana. La #L819 y los fragmentos de anti8#g solos oen combinación no lograron inducir la proliferación de c!lulas B.

(C) C!lulas T auxiliares $T+-. e cultivaron 12 3 subcon;untos de c!lulas Bmarcados con C4 5 con un clon de c!lulas T auxiliares alorreactivas y c!lulasmononucleares estimulantes $al mismo tiempo irradiados- en ausencia o

presencia de CpG 6227 o fragmentos de #g anti8+umanos. La proliferación

celular se midió en el d&a 9. 5n todos los experimentos% los eventos se midierondurante un tiempo ;o de modo que la amplitud del pico es proporcional alrendimiento de la c!lula. Los resultados son representativos de al menos 12experimentos. e obtuvieron resultados comparables utilizando c!lulas Baisladas por selección negativa.

'as c lulas activadas reciente(ente (i ran a reas de c lulas - de loste?idos lin oides secundarios donde interact@an con las c lulas - en

or(a co nada, !osi7le(ente no co nada 1 . ara !ro7ar lares!uesta de las c lulas - a las c lulas au4iliares no co nadas,cultiva(os su7con?untos de c lulas - (arcadas con /J; en !resenciade un clon de c lulas au4iliares alorreactivas, esti(ulados !or c lulas!resentadoras de ant eno alo nicas a!ro!iadas. n estas condicionesde cultivo, el clon de c lulas au4iliares no ue ca!a de reconocer lasc lulas -, !ro!orcionando de este (odo 7 stander a uda la activaciónbystandard de células B de memoria, activación que se produciría a consecuencia deinfecciones no relacionadas. De acuerdo con esta hipótesis, citoquinas generadasdurante el desarrollo de la respuesta inmune contra antígenos no relacionados conaquellos que originalmente indujeron la producción de estas células B de memoria,podrían estimular su diferenciación a células palsmáticas de vida media larga. enausencia de una interacci)n de ti!o co nada 1" . Aun6ue las c lulas -de (e(oria de ti!o FsGitc


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sufciente el inicio de la !roli eraci)n de las c lulas - de (e(oria


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(A y B)


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anticuer!os $ = rente a , en relaci)n con el total de c lulas $ =secretoras, era de 1 en 1.800 en la san re !eri rica 1 en 950 encultivos de c lulas - de (e(oria con esti(ulaci)n !oliclonal. n el(is(o donante, el suero con $ = anti" ue de 5,1 u % (l con res!ectoa 10 ( del total de $ = es decir, 1 (ol cula anti" !or cada 2000(ol culas de $ = . ;e o7serv) una correlaci)n si(ilar entre las c lulas!las( ticas circulantes las c lulas !las( ticas eneradas in vitro envarios donantes "in(unes a7la ;1 . stos resultados indican 6ue 7a?ocondiciones esta7les, las c lulas !las( ticas es!ec fcas !ara ant enosde (e(oria se eneran continua(ente a recuencias 6ue sonconsistentes con una activaci)n !oliclonal de las c lulas - de (e(oria.

2. Lna se&6nda !redicci)n del (odelo de activaci)n !oliclonal es 6ue7a?o condiciones de estado estacionario !ero no des!u s del est (ulo ,

el nivel de anticuer!os s ricos a un ant eno dado de7e reIe?ar larecuencia de c lulas - de (e(oria es!ec fcas de res!uesta aactivadores !oliclonales. ara !ro7ar esta !redicci)n, se activan c lulas- con /!= e $'"15 se (ide (ediante diluci)n li(itante la recuenciade c lulas - de (e(oria de $ = es!ec fcas de ant eno 1+ . n cincodonantes e4a(inados varios a>os des!u s de la esti(ulaci)nanti nica,


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Figura 3

(A y B) Correlación entre los niveles de anticuerpos en suero y la frecuenciade c!lulas B de memoria en condiciones de estado estacionario. La frecuenciade las c!lulas B de memoria de tipo #gG espec& cos para el virus del sarampióno TT se midió por dilución limitante en presencia de CpG y la #L86. Los niveles

de anticuerpos en suero se determinaron por 5L# $ensayo deinmunoabsorción ligado a enzimas-. Los cuadrados vac&os representanmediciones tomadas de diferentes donantes con inmunidad a largo plazo.

5n (B) % los c&rculos representan las mediciones realizadas en el mismo donanteantes $c&rculo vac&o- y 3 semanas despu!s $c&rculo relleno- estimulado con TT.


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(C) Los niveles de anticuerpos de tipo #gG en el sobrenadante de las c!lulas B policlonales activados en relación con los niveles s!ricos. n donante fue probado antes $5TD1- y / semanas despu!s $5TD6- del refuerzo con TT.

3. Lna %ercera !redicci)n del (odelo de activaci)n !oliclonal es 6uedurante una res!uesta es!ec fca de ant eno, la (a or dis!oni7ilidadde c lulas activadas dar lu ar a una (a or !roducci)n de c lulas!las( ticas de es!ecifcidades no relacionadas. or lo tanto,esti(ula(os cinco donantes sanos con se (idi), con el tie(!o, eln@(ero de c lulas !las( ticas circulantes 6ue secretan anticuer!os deti!o $ = rente a o a otros ant enos de (e(oria. n un casore!resentativo 2i&. + A , las c lulas !las( ticas 6ue secretananticuer!os !ara anti" se incre(entaron desde el d a al d a 8des!u s del re uer o dis(inu eron a los !ocos d as. 'as c lulas!las( ticas secretoras de $ = au(entaron con la (is(a cin tica, entodos los casos su n@(ero su!era al de las c lulas !las( ticas "es!ec fco, co


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secretoras de #gG $cuadrados vac&os- y anticuerpos #gG circulantes a TT $c&rculos rellenos-% se midieron T.gondii $cuadrados rellenos-% y el virus delsarampión $tri=ngulos rellenos-.

$ B - 5volución temporal de los anticuerpos de tipo #gG en suero para el TT en elmismo donante. e obtuvieron resultados comparables en cinco donantes.

l e4!eri(ento esti(ulante ta(7i n o reci) una idea de la i(!ortanciarelativa de las c lulas !las( ticas de corta duraci)n de lar avida. Des!u s de est (ulo con , el au(ento de anticuer!os $ =es!ec fcos en un actor de M 80 del d a 5 al 8, conco(itante con el !icode la eneraci)n de c lulas !las( ticas, se (antuvo en un nivel de(eseta durante 2 (eses, dis(inu endo a !artir de entonces con una

vida (edia de M B0 d as 2i&. + - . 'a cin tica de los niveles deanticuer!os en suero se !uede e4!licar !or dos eventos distintos:

• l r !ido au(ento o7servado des!u s del re uer o era de7ido a la!roducci)n de randes n@(eros de c lulas !las( ticas de cortaduraci)n, (ientras 6ue la (eseta la lenta dis(inuci)n !osterioren los niveles de anticuer!os e4cediendo M 20"d as de vida (ediade la $ =


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• or el contrario, en el (odo !oliclonal, todas las c lulas - de(e(oria res!onden a los est (ulos a(7ientales al so(eterse a la!roli eraci)n continua la di erenciaci)n. De esta (anera, un nivelconstante de c lulas !las( ticas los anticuer!os en suero

te)rica(ente !odr a (antenerse a lo lar o de un lar o !er odo devida


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un co(!onente o el otro !uede a7rir nuevas v as !ara la vacunaci)ne ectiva.

J$N.

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