Download - Tinción de gram (1)
![Page 1: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/1.jpg)
Tinción de Gram
![Page 2: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/2.jpg)
Antecedentes
Descrita y desarrollada por Christian Gram en 1884.
• Esta tinción es la más importante en microbiología, pues permite diferenciar a las bacterias en base a su : Afinidad tintorial: GRAM POSITIVAS y GRAM NEGATIVAS .Morfología: COCÁCEAS, BACILOS, COCOBACILOS, VIBRIOS, ESPIRILOS, ESPIROQUETAS visualizar su Agrupación: CADENAS, TETRADAS, RACIMOS.
![Page 3: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/3.jpg)
Fundamento
El cristal violeta es un colorante que penetra la pared celular de bacterias Gram positivas y negativa.
Posteriormente se agrega el lugol que es mordiente y se forma un complejo con el cristal violeta.
Durante el proceso de decoloración con alcohol-acetona, la gruesa pared de los Gram positivos impide la salida del colorante manteniendo la coloración violeta.
![Page 4: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/4.jpg)
Fundamento
En cambio, por el alto contenido lipídico de la pared de los Gram negativos, el alcohol-acetona genera poros , por los cuales, escapa el cristal violeta, la bacteria se decolora y tiñe de color rojo con el colorante de contraste.
![Page 5: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/5.jpg)
Paso N° 1
Preparar el frotis bacteriano:
![Page 6: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/6.jpg)
Paso N°2
Teñir con cristal violeta 1 minuto
![Page 7: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/7.jpg)
Paso N°3
Lavar con abundante agua el exceso de colorante
![Page 8: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/8.jpg)
Paso N°4
Cubrir con lugol 1 min
![Page 9: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/9.jpg)
Paso N°5
Lavar con agua el exceso de Lugol
![Page 10: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/10.jpg)
Paso N°6
Decolorar con alcohol-acetona aproximadamente 30 seg
![Page 11: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/11.jpg)
Paso N°7 y N°8
Lavar con abundante agua para eliminar el resto de decolorante.
Teñir con Safranina 1 min.
![Page 12: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/12.jpg)
Paso N°9 y 10
Lavar con abundante agua para eliminar el colorante de contraste.
Secar la preparación.
![Page 13: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/13.jpg)
Paso N° 11
Observar al microscopio, con objetivo de inmersión (100X)
![Page 14: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/14.jpg)
Resumen de los pasos de la Tinción de Gram
![Page 15: Tinción de gram (1)](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022050706/55a4d8d31a28ab315a8b4889/html5/thumbnails/15.jpg)
Factores que considerar en la tinción de Gram
• –No se debe sobrepasar los tiempos de tinción y decoloración.–Los cultivos viejos hacen que las bacterias Gram positivas se tiñan parcial o totalmente de color rosa.–Hay que tomar en cuenta que el agua usada en el frotis se encuentre en el rango de Ph 7-7.8 ya que:*Los Gram positivos pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez.*Los gramnegativos pueden hacerse Gram positivos al aumentar la alcalinidad.