Download - Microorganismos en Biotecnologia
BiotecnologíBiotecnología:a:
• Uso de microorganismos vivos o de sus productos en procesos industriales o ambientales a gran escala
Tecnología microbiana tradicional:Fermentaciones
alcohólicasProducción de productos
farmacéuticos , aditivos alimentarios, enzimas y sustancias químicas industriales
Biorremediación
Tecnología microbiana con organismos alterados mediante procesos de ingeniería genética:
• Fabricación de hormonas • Moduladores del sistema inmune• Vacunas
Microorganismos industriales• No todos los microorganismos
tienen un uso industrial
• Microorganismos industriales producen uno o más productos específicos
• El microorganismo es modificado antes de ingresar a la industria: se altera genéticamente por mutación o por recombinación
• Microorganismos industriales son especialistas metabólicos capaces de producir específicamente y con un alto rendimiento, metabolitos particulares
• La fuente de todas las cepas industriales es el ambiente natural
• Las cepas industriales se depositan en colecciones de cultivos que sirven como almacén
Requisitos de un microorganismo industrial:• Producir la sustancia de interés• Crecer rápidamente en un medio de cultivo barato• Fabricar el producto en un período corto• Desarrollarse en cultivo puro y en gran escala• Ser estable genéticamente pero susceptible de
manipulación genética• Cultivos que se mantengan durante períodos largos en
laboratorio y en planta industrial• Facilidad para inocular en grandes fermentadores• No debe ser peligroso para el hombre o las plantas y
animales de interés económico• Posibilidad de retirar fácilmente las células del cultivo
Clases de productos industriales
Metabolitos microbianos
• Alcohol• Ácido acético• Ácido láctico• Aminoácidos• Vitaminas • Antibióticos• Esteroides• Alcaloides
Células microbianas• Proteína unicelular:
levaduras, algas, bacterias y hongos
• Células para la inoculación:bacterias fijadoras de nitrógeno, micorrizas, inóculos para la fermentación de lácteos y embutidos
EnzimasDigestión de almidones, lípidos y proteínasSíntesis de antibióticos semisintéticos
Clasificación de los productos industriales según su uso:
• Productos farmacéuticos de origen microbiano
• Biotecnología microbiana en agricultura
• Sustancias químicas y aditivos alimentarios
• Productos químicos comerciales y producción de energía
• Biorremediación
Productos farmacéuticos de origen microbiano
• Antibióticos• Hormonas esteroides• Insulina• Hormona del crecimiento• Linfocinas• Péptidos neuroactivos• Factores de coagulación sanguínea• Activador del plasminógeno tisular• Vacunas • Anticuerpos monoclonales para diagnóstico y terapia
Biotecnología microbiana en agricultura
• Productos farmacéuticos veterinarios de origen microbiano
• Inóculos radiculares• Ingeniería genética de plantas
mediada por microorganismos como portadores genéticos
Sustancias químicas y aditivos alimentarios
Sustancias especiales y aditivos alimentarios:• Aminoácidos:
• Glutamato: potenciar el sabor• Aspartato+alanina: modular el sabor de jugos de frutas• glicina: mejorar el sabor de alimentos dulces• Aspartame: endulzar• Lisina y metionina: aditivos nutrivos• Cisteína antioxidante de jugos de frurtas• Triptofano + histidina: evita la rancidez de los alimentos
• Vitaminas: rivoflavina, vitamina B12, vitamina C
Productos químicos comerciales y producción de energía
Productos químicos comerciales de estructura sencilla y bajo valor monetarios
• Etanol (combustible para motores)
• Ácido acético• Ácido láctico • Glicerol
Crecimiento y formación de productos industriales
Sustrato para el crecimiento
Células Metabolito primario
Sustrato para el crecimiento
Células Metabolito primario
Metabolito secundario
Sustrato para el crecimiento
Células Metabolito primario
Metabolito Secundario
Fermentaciones• Para procesos industriales, se
usan fermentadores de hasta de 400.000 litros de capacidad
• Los fermentadores son construidos de acero inoxidable y tienen una camisa externa la cual puede ser esterilizada inicialmente y enfriadada durante la fermentación.
• Spargers e impellers en el vessel son usados para la aireación y revolver el contenido.
• The vessel may contain various devices for monitoring the environmental conditions within the culture, so that these factors can be controlled to obtain high product yields.
• El proceso puede ser aeróbico o anaeróbico.
• En general, mayor dificultas en procesos aeróbicos que necesitan una adecuada airreación del tanque que contiene altas concentraciones de biomasa
Producción de productos de mamíferos por microorganismos modificados por ingeniería genética
Desarrollo de un proceso biotecnológico:• Si el gen o los genes que codifican para la
producción de una proteína de mamífero se pueden clonar dentro de un microorganismo
• Si se obtiene una buena expresión de este gen
Productos biotecnológicos fabricados por DNA recombinante
Proteínas de sangre para:• Disolver coágulos• Promover la coagulación sanguínea• Desarrollar glóbulos rojos
Hormonas para: • Tratamiento de diabetes• Regulación del calcio• Alivio del dolor• Osteoporosis• Diuréticos y antihipertensivos
Moduladores inmunes:• Estimulantes de las células T• Activador de células B• Agentes antivirales, anticancerígenos,
antitumorales, antiinflamatorios• Tratamiento de infecciones
• Vacunas:• Prevención de infección• Hepatitis B• Sarampión• Cólera• Rabia• Sida (no en el mercado, sólo en experimentación)
• Antícuerpos monoclonales:• Proteínas específicas que reconocen y se fijan a un solo
antígeno• Tratamiento de cáncer, deshacerse de sustancias químicas tóxicas
de las células tumorales• Tratamiento de enfermedades cardíacas: destruir coágulos de
sangre catalizados por plaquetas• Diagnóstico clínico: embarazo y enfermedades humanas y
animalesNo todos los productos están en el mercado
El biofilm• Se forma cuando en medio
acusoso las bacterias se adhieren a las superficies en ambientes acuosos y empiezan a excretar un limo:
• Una sustacia pegajosa que puede sujetarse a toda clase de material (metales, plástico, partículas de suelo, materiales de implemento médicos y tejidos.
• Un biofilm puede estar formado por una sola especie de bacteria
• Más a menudo consiste de muchas especies de bacterias, hongos, algas, protozoos, de residuos y productos de la corrosión.
• Aunque pegados a una superficie, los microorganismos del biofilm llevan a cabo una variedad de reacciones benéficas o perjudiciales, desde el punto de vista humano
modifican las condiciones
ambientales que lo rodean.
Qué importancia tiene el biofilm para la industria?
• Biofilm en una membrana de ósmosis inversa
Los biofilms microbianos sobre las superficies cuestan billones de pesos al año en equipo dañado, productos contaminantes, pérdida de energía e infecciones médicas.
• Los métodos convencionales para matar bacterias (antibióticos y desinfección) son a menudo inefectivos contra las bacterias del biofilm.
Las enormes dosis de agentes antimicrobianos requeridas para liberar los sistemas del biofilm:
• Son ambientalmente indeseables ( y quizás no permitidas por las regulaciones ambientales)
• Médicamente impracticables (aunque matan las bacterias del biofilm, también matan el paciente).
• Así nuevas estrategias basadas en un mejor conocimiento de cómo las bacterias se sujetan, crecen y se desprenden son una urgente necesidad para muchas industrias y para la bioremediación.
• Los procesos microbianos sobre superficies también ofrecen oportunidades por sus efectos industriales y ambientales positivos:
•Bioremediación en sitios con residuos peligrosos
•Biofiltración industrial del agua•Biobarreras para proteger el suelo y las aguas subterráneas de contaminación.
• La ubicuidad y el significado del fenómeno biofilm es confirmado por el interés de industrias:
• Petróleo• Especialidades químicas• Minas• Agua para bebida• Productos de limpieza• Empresas de servicios públicos
Se necesitan investigación interdisciplinaria y educación para crear métodos de uso industrial en desarrollo de productos y ayuda a quienes la
necesiten.
Areas de Investigación Fundamental sobre biofilms:
• Entendimiento de porqué los microorganismos del biofilm son más dificultosos de matar en comparación con microorganismos suspendidos.
Características moleculares y genéticas de los microorganismos del biofilm.
Estructura y función de un biofilm. Fenómenos de sujetamiento de los microorganismos
del biofilm. Métodos analíticos del biofilm. • Modelación de la actividad del biofilm.
Ejemplo de necesidades de investigación en relación al biofilm:
Investigación y campos de aplicación de tecnologías para el control de microorganismos fermentadores en campos petroleros.
Investigación y evaluación de productos potenciales para control del biofilm en drenajes de fregaderos, inodoros, piscinas y otros ambientes domésticos.
Evaluación de coberturas anti-infectivas sobre vendas para heridas, catéteres, válvulas cardíacas y otras superficies relacionadas con la práctica médica.
Desarrollo de tecnologías de biobarreras y bioremediación.
Investigación sobre el impacto del crecimiento renovado del biofilm en los sistemas de distribución de agua potable
Desarrollo de tecnologías para el control del biofilm asociado a la corrosión
Investigación del impacto y el control de biofilm en membranas de tratamiento y desalinización del agua.
Evaluación de la penetración de biocidas dentro del biofilm.
Determinación del papel del biofilm en el origen del "agua azul" en sistemas de distribución de agua potable que usan tuberías de cobre.
Desarrollo de tecnologías bioeléctricas para el control o incremento del biofilm en aplicaciones médicas.
Biorremediación:
Aplicación industrial de la biotecnología ambiental:
• Biodegradación: Microorganismos para la degradación de sustancias químicas de desecho tóxicas o indeseables, xenobióticas no recalcitrantes
• Futuro: microorganismos modificados genéticamente para degradar recalcitrantes
Tratamientos anaerobios
Se utilizan para:• Estabilización de lodos• Desperdicios sólidos en vertederos• Tratamiento de agua industriales y domésticas con alta DBO
Proceso:
• Requiere de interacciones sinérgicas entre cuatro grupos microbianos:
• I. Bacterias hidrolíticas• II. Bacterias fermentadoras• III. Bacterias acetogénicas• IV. Bacterias metanogénicas
Acetogénesis:bacterias acetogénicas
ACIDOS GRASOS DE CADENA LARGAPropiónico, butírico .(volátiles); alcoholes, compuestos aromáticos (benzoato)
Metanogénicas:Bacterias
metanogénicas reductoras (autótrofos)
Hidólisis por exoenzimas de: bacterias fermentativas, Protozoos, levaduras y mohos
COMPUESTOS ORGÁNICOS SIMPLES
Azúcares, aminoácidos, péptidos
Acidogénesis por exoenzimas de: bacterias fermentativas
H2, CO2Ácido acético
(Acetato)
CO2 CO2
CH4
Metanogénicas:Bacterias
metanogénicas acetogénicas
COMPUESTOS ORGÁNICOS COMPLEJOSProteínas, carbohidratos y lípidos
Factores que controlandigestión anaerobia
1. Temperatura2. Tiempo de retención hidrolítica (TRH o HRT, hydrolic
retention time)
3. pH 4. Composición del desperdicio5. Competencia con bacterias productoras de
sulfuro (respiradoras de azufre).
6. Tóxicos (oxígeno, amoníaco, solventes clorinados, benceno, formaldehído, ácidos volátiles, etc.)
Ventajas:1. No requiere oxígeno.2. Menos energía invertida en el proceso.3. Produce metano.4. Produce de 3-20 veces menos lodos que
tratamiento aerobio (20-150 vs. 400-600 kg biomasa/m3 DQO).
5. Eficiente a elevadas cargas de DBO.6. Preservación de actividad aun cuando el sistema
no operare por largos períodos de tiempo.7. Remoción de hidrocarburos clorinados, co-
metabolismo, etc.
Desventajas:
1. Más lento que tratamiento aerobio (requiere > tiempos de contacto o sea > tiempos de retención hidráulica).
2. Más sensitivo a choques tóxicos.3. Requiere mayor tiempo de aclimatación.
Procesos de tratamiento combinado en pequeña escala tipo Jokaso
• Restaurantes y hoteles (50 personas)• La calidad del efluente puede llegar a tener 20
mg/l omenos de DBO.
Contact anaerobic room
• Método del filtro anaerobio y contacto aerobio• http://www.apec-vc.or.jp/co-op/s_pollution/index.htm
Pozo séptico
Línea de drenaje
Trampa de grasas
Pozo sépticoConductos de distribución
Campo de absorción
Trampa de grasas
Remueve entre:• 80 - 70% de materiales hidrofóbicos • 40 - 50% de grasa emulsionadas
Tratamientos Biológicos Aerobios
Gran parte de la materia orgánica disuelta se mineraliza a CO2, H2O y biomasa (sólidos que pueden ser
removidos)
Tratamiento de aguas residuales:Trata. 1rio + Trata. 2rio = Remoción 80-90% DBO
Posterior a un tratamiento de sedimentación primaria
los desperdicios que contienen materia orgánica disuelta son transferidos a un tanque aireado
mecánicamente
Durante este proceso, las poblaciones heterotróficas se desarrollan vigorosamente y predominan en el tanque.
Tipos de tratamientos aerobios:
1. Crecimiento suspendido • Lagunas de oxidación
(disperso)• •Lodos activados
(agregados)
2. Biopelículas• • Filtros de goteo (Zooglea
ramigera)• • Biodiscos (Filtros RBC):• (Sphaerotilus, Beggiatoa,
Nocardia, Oscillatoria, Desulfovibrio)
• Filtros aerobios sumergidos• Reactores de lecho fluidizado
Tratamiento aeróbico secundario de aguas residuales:
Agua residual
Sedimentación
Cribado
Lodo insoluble
Digestión anaeróbica
Lodo digerido:
Incineración
Lodo soluble
Oxidación
Desinfección
Efluente tratado al río
Procesos biológicos
Lodos activados
Filtros de flujo lento
Procesos no
biológicos
Lodos activados:
• Método de tratamiento continuo
Efluente
CribaTanque de aclimatación
Tanque de aireación
Descarga de agua
Exceso de lodo
Deshidratador
TortasTanque de concentración
Clarificador
• Se forman flocs de microbios en los cuales la materia orgánica es a la vez adsorbida y oxidada.
• Los flocs sedimentan en un tanque agujereado, y son incorporados a un digestor de lodos anaerobios, donde el material orgánico restante es es convertido en productos gaseosos.
Tratamiento con lodos activados
Diversidad Microbiana de los lodos activados:
Bacterias Escherichia coli Enterobacter Pseudomonas Achromobacter Flavobacterium Zooglea Desulfovibrio Sphaerotilus Filamentosas: Beggiatoa, Nocardia,
Oscillatoria
• Protozoarios ciliados (Vorticella)
• Hongos y levaduras ( Menor densidad)
Parámetros físico-químicos que afectan los lodos activados:
pH Temperatura Nutrientes Viscosidad Potencial redox Habitabilidad del ambiente
Relación alimento/ microorganismos A/M: importante parámetro de diseñoA/M:
[DBO (kg/m3) x Flujo (m3/d)] [Sólidos Reactor (kg/m3) x Vol (m3)
• Remoción en diferentes tipos de aireación:
Aireación extendida: • (0.03 < A/M < 0.8): > 90% remoción DBO Convencional: • (0.8 < A/M < 2): 80-90% remoción DBOAlta rata: • (A/M > 2): <80% remoción DBO
Sedimentación secundaria Tiempo medio de residencia celular (MCRT :Mean Cell Residence Time)
Floculación biológica:
• Proceso natural que ocurre bajo condiciones físico/química específicas.
Crecimiento disperso:
• No ocurre floculación• La sedimentación sería
imposible.
El tiempo medio de residencia de los lodos
es un importante determinante de la
floculación de la biomasa por gravedad
(separación de
microorganismos del efluente tratado).
• Usualmente el tiempo de residencia es de al menos 3 días, pero menor de 15 días
• Por fuera de este rango disminuye la capacidad de compactación del lodo.
Capacidad de Clarificación:
• Un mayor crecimiento disperso influye en la calidad del efluente, pues determina mayor concentración de sólidos suspendidos y más dificultad para la clarificación.
Capacidad de Compactación: • Es la taza de sedimentación
de los lodos concentrados• Determina la efectividad del
clarificador
Grado de compactación =[volumen ocupado por 1 g de
lodo después de 30 min]
• " BULKING" o entumecimiento del lodo:
• Formaçión de espuma en los decantadores de lodos activados.
• Los flóculos formados poseen poca densidad y suben a la superficie en vez de sedimentar.
Problemas en la sedimentación (Bulking )
1. MCRT (tiempo de residencia)2. C:N & C:P3. Niveles de oxígeno disuelto4. Biológico: sobrecrecimiento de bacterias
filamentosas como Sphaerotilus, Beggiatoa, Thiotrix, Bacillus, hongos filamentosos como Geotrichum, Cephalosporium, Cladosporium & Penicillum
• Los filtros por goteo han sido adoptados por la industria alimentaria y tintorera
• Efecto del tratamiento: se espera entre un 75 - 80% de remoción de DNO y 60 - 70% de DQO
• Los costos de equipamiento y operación menos caros que los de lodos activados
• Flujos bajos para concentrar materia orgánica del efluente y permitir la formación del biofilm sobre el lecho filtrante.
BiodiscosRotating Biological Contactor (RBC)
Consultar:• http://www.state.sd.us/denr/DES/P&S/designcriteria/design-10.html• http://www.apec-vc.or.jp/co-op/s_pollution/docs/s3_9_1.htm
• Se espera que los biodiscos remuevan entre el:
• 75 - 90 % de de DBO• 60 - 70 % de DQO.
• Costos: El equipo es más caro que el de los lodos activados. El costo de operación es bajo, sólo el que se necesita para la rotación de los discos
• Se necesita tiempo de aclimatación para que se forme el biofilm grueso y anaerobico
• Malos olores debido al H2S y otros