Microbiología Médica I
Tema # 10
Lic. Yudy Aranguren
Enero 2009
UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”
DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL
SECCION DE MICROBIOLOGÍA
BLOQUE 2:
TEMA 10: CONTENIDO:
• Cocos Gram positivos patógenos
• Morfotipos
• Géneros
• Características biológicas
• Diferenciación bioquímica
OBJETIVOS:
10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al
Gram
10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus
según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas.
10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos
Gram positivos
COCOS GRAM POSITIVOS
GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA
GÉNERO
STAPHYLOCOCCUS
GÉNERO
STREPTOCOCCUS
Clasificación de Lancefield:
Grupo A
Grupo B
Grupo C
Grupo D
No tipificables
GÉNERO
ENTEROCOCCUS
No Enterococcus:
Streptococcus bovis
1984 Estudios
ADN
GÉNERO:
• Cocos Gram positivo
Tinción de Gram
GENERALIDADES:
• No forman esporas
• Tienen forma redondeada y se presentan en pares o en grupos en forma de racimos de uva
• Inmóviles
• Aerobios y anaerobios facultativos
• Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC.
• Fáciles de cultivar
• Algunos producen pigmentos
• Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares
- +
• Resistente a concentraciones de sal (7%)
Agar Salado Manitol 7%
• Son catalasa positivo:
ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA
Staphylococcus saprophyticus
Staphylococcus aureus.
Staphylococcus epidermidis
Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente inmunocomprometidos
CARACTERISTICAS :
• Produce pigmentos (algunas cepas)
• Coagulasa positivo• Manitol positivo
• Beta Hemolítico
IgGProteína A
Pared celularPeptidoglicano
Ac. Teicóico:
Adherencia inespecífica
Cápsula: Inhibe la fagocitosis
Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.
FACTORES DE PATOGENICIDAD: ESTRUCTURA CELULAR
U
U
U
UU
U
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U
U
UU
U
U
U
U
TOXINAS:
Leucocidina
Hemolisinas
Toxina del sindrome del
shock tóxico (TSST-1)
Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”
ENZIMAS (Invasinas):
Hialuronidasa
Lipasas
Nucleasa
Coagulasa
Estafiloquinasa
FACTORES DE PATOGENICIDAD: FACTORES SOLUBLES
Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa protectora
Lipasas
Proteasas
Hialuronidasa
Nucleasa
PRODUCTOS CELULARES:
ENZIMAS (Invasinas):
Difusión de la bacteria en los tejidos.
ENTEROTOXINAS
• Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación alimentaria
• Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de macrófagos
• Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica.
EXOTOXINAS:
• Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas del SST.
• Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel escaldada”
CARACTERISTICAS :
• Coagulasa negativo
• No hemolíticos
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Sensible a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Presenta un glicocalix de protección
• Adherencia a superficies plásticas y metálicas
CARACTERISTICAS :
• No contiene proteína A
• Coagulasa negativo
• No hemolítico
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Resistente a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra
Diagnóstico de laboratorio
REDUCCIÓN DE NITRATOS
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
? ?
NEGATIVAS
GÉNERO
Streptococcus
GÉNERO
Staphylococcus
POSITIVAS
PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
REDUCCIÓN DE NITRATOS
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
• S. aureus
• S. epidermidis
• S. saprophyticus?
POSITIVAS
SENSIBILIDAD
A
LA
NOVOBIOCINA
COAGULASA
POSITIVA NEGATIVA
Staphylococcus aureus
S. epidermidis S. saprophyticus ?
+ -
SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA
SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO
RESISTENTE-CON
CRECIMIENTO
S. epidermidis S. saprophyticus
MORFOTIPOS
CARACTERISTICAS DEL GÉNERO
• Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas
o en pares
• No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae
• No son esporulados
• Catalasa negativo
• Aerobios facultativos
• Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos
• Fermentan azucares sin producir gas
- +
• Producen diferentes patrones de hemólisis:
ALFA
BETA
GAMMA
Grupo D no Enterococcus(Streptococcus bovis)
Enterococcus sp.
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS
Streptococcus pyogenes
Streptococcus agalactiae
Enterococcus sp( algunas cepas)
Streptococcus pneumoniae
Streptococcusviridans
Enterococcus sp( algunas cepas)
Streptococcus pyogenes
Streptococcus agalactiae
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR
• Clasificación de Rebeca Lancefield (1933)
• Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo
GRUPO A
GRUPO B
Enterococcus sp.
GRUPO D (ac. Teicóico)
GRUPO C y G
CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS:
Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género.
• Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep • Posee más de 20 pruebas bioquímicas
API 20 Strep
ENFERMEDADES
FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes
• Diplococos Gram positivos
Alfa hemolíticos
• Poseen cápsula FACTOR DE VIRULENCIA
Factores de patogenicidad:
1.- Cápsula
2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión
3.- Toxinas:
• Hemolisina dermatotóxica (neumolisina)
• Leucocidina
• Sensibles a la Optoquina
CARACTERÍSTICAS:
• Son beta hemolíticos
Streptococcus agalactiae
• Hidrolisan el hipurato
• Prueba de CAMP: El estreptococo
del grupo B produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de S. aureus. S.pyogenes
S. aureus
S. agalactiae
Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa, hialuronidasa, y hemolisina
+ -
CARACTERÍSTICAS:
• Morfotipo: Diplococos
• Aerobios facultativos
• Hemólisis Gamma (No hemoliticos)
• Poco exigentes para cultivar
• Crecen a 6,5% de NaCl
• Enfermedades nosocomiales: Resistencia natural a cefalosporinas y otros antibióticos
• 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal
Enterococcus faecalis 85-90%
Enterococcus faecium 5-10%
FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas,
beta lactamasa
CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
1.- Hidrólisis de bilis-esculina:
Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina
POSITIVO
-+ -+
2- Crecimiento en solución salina al 6,5%
• Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) : CRECEN
• No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN
+ -
CARACTERISTICAS:
• Habitan la boca principalmente: Flora normal
• Responsables de las caries
• Hemólisis Alfa
Streptococcus mutans
Streptococcus mitis
Streptococcus salivarium
Streptococcus sanguis
• No son tipificables con las pruebas anteriores
COCOS GRAM POSITIVOS
(Cadenas y pares)(Grupos)
HemolisisCoagulasa
MUESTRA: Extendido y frotis para Tinción de Gram
• Exudado faringeo
• Pus
• Sangre
• LCR
1.- EXAMEN DIRECTO: Tinción de Gram
Gram: cocos Gram positivos
EN RACIMOS ?
EN CADENAS?
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM POSITIVOS
2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
REDUCCIÓN DE NITRATOS
NEGATIVAS
Streptococcus
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
• S. aureus
• S. epidermidis
• S. saprophyticus?
POSITIVAS
COAGULASA
POSITIVA NEGATIVA
Staphylococcus aureus
S. epidermidis S. saprophyticus?
SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA
SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO
RESISTENTE-CON
CRECIMIENTO
S. epidermidis S. saprophyticus
Enterococcus sp (Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
S. pyogenes
(Grupo-A)Sensible a Bacitracina
S. agalactiae (Grupo-B)
Prueba Camp positiva
S. pneumoniaeSensible a Optoquina
Grupo Viridans Reacciones bioquímicas
ALFA GAMMA BETA
Streptococcus3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE: Agar sangre en 10% Co2:
Enterococcus sp (Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
Enterococcus sp (Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
Grupo-D
No EnterococcusNo crece en NaCl 6,5%
Grupo Viridans Reacciones bioquímicas
PRUEBA BIOQUÍMICASTAPHYLOCOCCUS
AUREUSSTAPHYLOCOCCUS
EPIDERMIDISSTAPHYLOCOCCUS
SAPROPHYTICUS
Coagulasa POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO
Produce pigmentos SI NO NO
Crece a 7% NaCl SI SI SI
Fermenta
ManitolSI NO NO
Sensibilidad a
la Novobiocina ----- SI NO
AUTOEVALUACIÓN
TIPO DE HEMÓLISIS
AUTOEVALUACIÓN
NO HEMOLITICO
Unidos podemos
cambiar al mundo!