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7/22/2019 Meli+Papaer+Histo
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Nombre : Melissa Coello
Los colorantes, tintes, y sondas especiales en la histologa
Resumen
La tincin de secciones de tejido fue muy influenciado por la qumica del colorante de anilina.PEHRLICH fue uno de los primeros en estudiar sistemticamente los colorantes sintticos y la
introduccin de mtodos cientficos en el campo de la tincin histolgica .La anilina es una
amina aromtica que consiste en un anillo de benceno y un grupo amino. Fue qumicamente
preparada por primera vez por destilacin de ndigo por O Unverdorben que lo nombr
"Crystallin". En 1834, tambin se obtiene a partir de alquitrn de hulla por , una sustancia que
da un color azul en el tratamiento con calcio hipoclorito. El trmino "anilina" fue dado ms
tarde por J FRITSCHE por experimentacin con ndigo. La anilina es un compuesto obtenido de
exprimir la planta indigo llamada indigoferanil a la cual debe su nombre. Este compuesto haba
sido aislado de la misma manera y lo llamaron cristalina. La diversas preparaciones "anilina"
de alquitrn de hulla y los colorantes derivados fueron posteriormente investigados , y todos
ellos demostraron finalmente ser idnticos: fenilamina, aminobenceno.
La anilina es todava una importante sustancia qumica precursora del colorante .Un punto
crucial en el desarrollo de la qumica colorante fue la preparacin de indol apartir de indigo y
de ndigo sinttico por cloracin y la consiguiente reduccin de isatina .
Desarrollo
La primera sntesis de indigo no llego hasta que isatin1 fuera producido por el cido
fenilacetico . Con la introduccin de cido cinmico, una nueva forma sinttica result an ms
til en la produccin de ndigo, cido cinmico era igualmente adecuado para la sntesis de
isatina e indol . Por ltimo, la decodificacin de la frmula ndigo se logr cuando el ndigo se
sintetiz por 2 - nitrobenzaldehdo y, por lo tanto, la estructura de ndigo era obtenido sin
duda . Ms tarde, otras rutas sintticas fueron estudiados . (Tan OT, 1986)
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Analina Indigofera tinctoria
El uso del tinte industrial anilina creci rpidamente , empezaron a fabricar mauveine , un
colorante del grupo fenazina pantentado en 1856 por WH PERKIN
La primera produccin artificial de un colorante natural era alizarina, producido por CGRAEBE y
C LIEBERMANN . Se dieron cuenta de que la alizarina era un derivado de antraceno que se
obtiene del alquitrn de hulla. Industrialmente, colorantes de antraquinona se derivan de
antraceno que es un compuesto de aceite de antraceno, una fraccin de alquitrn de hulla. La
sntesis de colorantes de indantreno es basado en la fusin de las molculas de 2-amino
antraquinona en lcali.
De las muchas clases diferentes de colorantes, tintes azoicos forman el grupo ms grande y
ms importante de los colorantes orgnicos sintticos. La estructura de los colorantes azoicos
se basa en azobenceno e incluye el grupo funcional diazo (RN = N-R '), donde el grupo N = N es
el grupo azo entre dos anillos aromticos. Lyon, H. O et col.
La Sntesis de colorantes sigue las reacciones diazotacin y acoplamiento. El mecanismo de
reaccin consiste en dos pasos. En el primer paso, diazotacin de las aminas aromaticas
primarias esto se realiza para formar sales de diazonio , llamado componente diazo.
Debido a que las sales de diazonio alifticos son muy inestables, se prefieren los compuestos
de diazonio aromticos. En un segundo paso, el acoplamiento azo se realiza con el
componente de acoplamiento: el acoplador lleva un tomo de carbono rico en electrones al
que el diazo componente se unir para cerrar la brecha entre las dos molculas con un nuevo
grupo azo (-N = N-). (watson, 1995)
La naturaleza de los sustituyentes aromticos en ambos lados del grupo azo, as como la
solubilidad en agua de los colorantes determinan los colores de los compuestos azo . La
mayora de los colorantes azoicos son de color rojo, naranja o amarillo. El desarrollo de azo y
antraquinona colorantes completan la gama de colorantes sintticos .
Especmenes histolgicos se preparan como es usual en la histopatologa de rutina que incluye
la preservacin y la inclusin. Antes de la tincin, las secciones se cortaron con un microtomo.
En ciertos casos, las secciones de criostato o preparaciones de celodoina son necesarias.Adems, se pueden utilizar los frotis de clulas a partir de suspensiones.
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Las tinciones se aplican para hacer que la estructura celular sea ms fcil de visualizar que en
los especmenes no teidos y, bajo ciertas condiciones, pueden revelar compuestos
moleculares y las diferencias asociadas con la evolucin o condiciones patolgicas. Por lo
tanto, las manchas en general estn dirigidos como sondas especiales que poseen
especificidad variable en funcin de la selectividad con la que se reacciona. Comparable a la
biologa molecular, la sonda trmino puede ser usado para definir un reactivo que sea
adecuado para detectar o medir la presencia de una molcula particular. El trmino la sonda
se puede aplicar a todas las coloraciones, an ms especialmente en los casos en que
reacciones con reactivos altamente especficos se llevan a cabo tales como anticuerpos,
secuencias de nucletidos u otras de molculas de unin de alta afinidad.
Antiguas y clsicas tinciones histolgicas todava mantienen su importancia en la histologa,
algunas de ellos son incluso indispensables, incluso si la mayora de ellos carecen de
especificidad estrictamente definida. (David B. Apfelberg, 1979)
Junto con las sondas moleculares de alta especificidad molecular descrita a continuacin , queconstituyen una valiosa repertorio de histlogo por sus estudios microscpicos. Hay cientos de
tinciones histolgicas de las cuales se describen algunos de los mtodos comunes en la
siguiente tabla.
Diferentes tipos de tinciones
Fig. 1. Alcian Blue
Fig. 2. Van Gieson
Fig. 3. Hematoxilina-eosina
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Fig. 4. Hale
Fig. 5. PAS
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Tabla 1 (wolf d. kuhlmann, 2010)
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La interaccin de los tintes con los tejidos
Los colorantes se obtienen ya sea a partir de fuentes naturales o de produccin sinttica con
la introduccin de los colorantes de anilina, a partir de medidados del siglo 19, colorantesnaturales tienen casi perdido su papel en la histologa con la excepcin de hematoxilina de los
rboles Logwood que todava sigue siendo de gran importancia en la histopatologa de rutina.
PEHRLICH fue uno de los primeros en estudiar sistemticamente los tintes de anilina y para
introducir mtodos cientficos en el campo de la tincin histolgico. Entonces, DE Grbler
Verzeichnis der Farbstoffe (1880) y el Farbstofftabellen dio las primeras descripciones de los
colorantes naturales y sintticos existentes.
Colour index fue publicado como gua de referencia para la manufacturas y consumidores de la
sociedad amerciana de qumicos y coloristas textiles . Los Colorantes se enumeran de acuerdo
al ndice de color para Nombres Genricos y Nmeros de acuerdo a la constitucin ColourIndex. Para cada nombre del producto, ndice de Color Internacional enumera el fabricante, la
forma fsica, y el uso principal .
Tincin histolgica se basan en principios qumicos y fsicos relacionados con las siguientes
reacciones:
- Reacciones electrostticas: sustancias de tinte estn compuestas de cromforos azo y los
grupos auxochrome , y las ltimas propiedades definen el colorante como un colorante cido o
un colorante bsico;
- Impregnacin del metal: la capacidad intrnseca de ciertas estructuras celulares paraprecipitar cantidades de iones metlicos submicroscpicas (iones de plata) que son
desarrollada por un proceso de reduccin, o la impregnacin de componentes metal en la
clulas en una denominada reaccin de argentaffine despus de pretratamientos oxidantes;
- Coloraciones selectivos debido a la solubilidad de los colorantes: tincin con Sudn grasa,
aceite de color rojo y otros colorantes de grasa que se basan en las diferencias de solubilidad
del colorante dentro de los dos medios de comunicacin, es decir, la difusin de la solucin de
tinte alcohlico en la grasa de las muestras;
- Reacciones citoqumicas: la aplicacin de las reacciones qumicas definidas, las reacciones de
enzima-substrato para peroxidasas, fosfatasas, etc, o tincin selectiva de molculas del tejido
despus de su modificacin qumica;
- Sondas de ligando especificas: la selectividad de la tincin celular se define por sonda
molecular aplicada y su especificidad hacia molculas celulares con las cuales reaccionan,
anticuerpos, lectinas, nucletidos.
Las protenas se comportan como molculas anfteros, es decir, que poseen grupos tanto
cidos como bsicos que contribuyen a acidofilia o basofilia. La interaccin protena-colorante
se debe principalmente a la carga neta. En el punto isoelctrico (pI) la carga neta esdespreciable y la unin de cargado de los colorantes ser mnima. Entonces, a continuacin en
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el pI, las protenas se unen a colorantes cidos (colorantes aninicos) y por encima de pl, las
protenas se unen a los colorantes bsicos (colorantes catinicos). A pH fisiolgico, las
protenas pueden presentar carga neta positiva o negativa . Por lo tanto, su comportamiento
es acidfilo con afinidad por los colorantes cidos o basfilo con afinidad por los colorantes
bsicos.
Muchas tinciones qumicas de tinte son producidas debido a la formacin de uniones salinas
entre tinte y sustancia celular. Todo el mecanismo es sin duda ms complejo y a menudo no es
totalmente entendido. La formacin de vinculacin sal significa que un colorante cido
(colorante aninico), tales como eosina se unir un grupo bsico (de carga positiva) de la
protena (= sustancia acidfilo). Por otra parte, un colorante bsico (colorante catinico), tales
como azul de metileno se unir un grupo cido (cargado negativamente) de la protena (=
sustancia basfila).
Tinciones histolgicas especiales
Sobre la base de colorantes bsicos y cidos, un nmero de tintes con ortocromtica,
policromtica y colores metacromtica se han experimentado con el propsito de distinguir
ciertos elementos de preparaciones histolgicas. Por ejemplo, una de los primeros colorantes
aplicados con xito de combinacin era una mezcla de colorantes cidos y bsicos para que se
coloree parsitos en frotis de sangre. l utiliz el azul de metileno y eosina simultneamente.
El aspecto mas interesante de esta mezcla fue la observacin de que el combinado tena
propiedades que eran diferentes de los tintes usados solos. Tales mezclas de colorantes se
han refinado an ms y ahora se conoce como WRIGHT, Giemsa o tintes de May-Grnwald.
Ellos pueden estar caracterizados como eosina de metileno derivados azules o de azul de
metileno. Hoy en da, la aplicacin simultnea de tales cidos y mezclas de colorantes bsicosse conocen como Tinciones modificadas de Romanowsky . (H. O. Lyon, 1994)
El mecanismo de tincin verdadera de los tintes de Romanowsky es an desconocido. Al
menos tres procesos fundamentales se han dilucidado, brevemente.
- Orthochromasia: tincin con rosa de eosina (componente colorante cido) y tincin con azul
de metileno (componente bsico tinte),
- Policromasia: tincin en capas con ambos colorantes,
- Metacromasia: cambio de color del colorante bsico de azul a violeta / prpura debido a la
alta concentracin de polianiones (sustancias muy cidas) en la muestra de color.
Bibliografa1.David B. Apfelberg, M. F. (1979). Histology of port wine stains following argon laser
treatment.jprs, 232-237.
2.H. O. Lyon, A. P. (1994). Standardization of reagents and methods used in cytological and
histological practice with emphasis on dyes, stains and chromogenic reagents. Kluwer
Academic Publishers.
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3.Tan OT, C. J. (1986). Histologic responses of port-wine stains treated by argon, carbon
dioxide, and tunable dye lasers. A preliminary report. europa pub med central.
4.watson, w. (1995). Fluorescent and Luminescent Probes for Biological Activity. san diego .