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L’Immunohistochimie
Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin LaurieUniversité Bordeaux 2
Master 1 Neurosciences et Neuropsychopharmacologie
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Tissu
Traceur
Anticorps
Antigène
Introduction
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La Préparation des Tissus
Fixation
Déshydratants
Agents de pontage chimique
Les composés métalliques
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La Préparation des Tissus
Congélation
Congélation à haute pression
Congélation ultra rapide
Congélation par pallier
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Inclusion
Cryoprotection
La Préparation des Tissus
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Coupe
Coupes à froid
Vibratome
Microtomie à main
La Préparation des Tissus
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Les Anticorps
Chaine légère Chaine lourde
Domaines Variables
Domaines constants(espèce-dépendants)
VL
VHCL CH
CH
VHVL
CL
CH
CH
CH
CH
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La Production D’Anticorps
Antigène Sang
Préparation de la
Solution
In Vivo Solution d’Anticorps Polyclonaux
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La Production d’Anticorps
In Vivo Solution d’Anticorps Monoclonaux
Ganglions/rate
Lymphocytes B Cellules Myélomateuses
FusionClonage In Vitro
In VitroMultiplication
Sélection
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Le Système RévélateurLes traceurs fluorescents
Les traceurs enzymatiques
Les traceurs métalliques
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Tissu
Immunohistochimie Directe Immunohistochimie Indirecte
Les Méthodes de Marquage
Anticorps Primaire
Anticorps secondaire
Antigène
Traceur
Traceur
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Les Méthodes de Marquage
Complexe avidine – biotine (ABC)
Peroxydase
Biotine
Avidine
H2O2
H2O
Diaminobenzidine
Précipité marron
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Les Méthodes de MarquageMarquage multiple
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Conclusion
Nombreuses étapes intermédiaires: - Perméabilisation - Blocages des sites non spécifiques - Rinçages
Montage
Pas un seul et unique protocole!
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Merci de votre attention
Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin Laurie