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8/18/2019 La Cromatografía en Columna Utiliza Una Columna de Vidrio Vertical Que Se Llena Con Un Soporte Sólido Adsorbe…
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La cromatografía en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un
soporte sólido adsorbente (fase estacionaria: los más utilizados son gel de sílice (SiO2)
al!mina ("l2O#))$ La muestra que se quiere separar se deposita en la parte superior
de este soporte$ %l resto de la columna se llena con el eluente (disolvente que
constitue la fase móvil) que& por efecto de la gravedad& 'ace mover la muestra a
travs de la columna$ Se establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la faseestacionaria el disolvente eluente que flue por la columna$ ebido a que cada uno
de los componentes de una mezcla establecerá interacciones diferentes con la fase
estacionaria la móvil& serán transportados a diferentes velocidades se conseguirá
su separación$ "sí& de manera similar a otros tipos de cromatografía& las diferencias en
las velocidades de desplazamiento a travs del medio sólido se corresponden con
diferencias en los tiempos de elución por la parte inferior de la columna para cada uno
de los componentes de la muestra original& que se recogerán en fracciones diferentes$
La polaridad del eluente afecta las velocidades relativas con las que los diferentes
componentes de la mezcla se mueven en la columna$ Los disolventes polares
compiten más eficientemente con las molculas polares de una mezcla por los lugarespolares del adsorbente$ *or lo tanto& un disolvente polar desplazará las molculas&
incluendo las más polares& rápidamente a travs de la columna$ Si el disolvente es
mu polar la elución será mu rápida generalmente 'abrá poca separación de los
componentes de la mezcla$ Si por el contrario el disolvente es mu apolar& no eluirán
los compuestos de la columna$ *or lo tanto& la elección del eluente es crucial para el
+ito de la cromatografía en columna$ " menudo se utiliza un gradiente creciente de
polaridad para la elución$ La ,,- se utiliza para determinar elegir el sistema
solvente adecuado para cada separación$.
BIBLIOGRAFIA
1 Immaculada A ; Núria C ; Amparo C ;ImmaculadaD ; Núria L ; DiegoM ; Erneso N ;Lluisa !; Gloria Rosell ;" #Operaciones Basicas En ElLa$oraorio De %u&mica"# '(p)**+++"u$"edu*o$l,*o$l,-./casellano*cromaogra0a"(ml"
. Ro$er 2(ornon Morrison3 and Ro$er Neilson Bo4d3 QuímicaOrgánica 5!earson Educaci6n3 17789"
"l agregar etanol a la muestra donde se encuentra el azul de metileno naran/a demetilo& va a darse una elusión del colorante azul de metileno por la atracción que tiene
Ilustración 1. Estructura química del Naranja de metilo y azúl de metileno.
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la amina por el 'idrogeno del etanol& esto 'ace que este colorante sea más a fin con la
fase móvil se de primero su elusión& el naran/a de metilo no reacciona porque el
grupo cromóforo azo ( 0 1 1 0 ) 1o siente afinidad por la fase móvil si esta tiene un
p3 alcalino$2
Reacción 1. Reacción del azúl de metileno con etanol.
Se agregó agua luego de la completa elusión del azul de metileno& para e+pulsar de la
columna cualquier residuo de etanol que pueda reaccionar con el acido actico& el cualserá adicionado posteriormente a la columna así evitar la formación de un ester no
deseado en el análisis cromatográfico$2
"l agregar ácido actico se dio lugar a la elusión del naran/a de metilo debido a la
afinidad que siente el grupo cromóforo azo por el 'idrógeno en medio ácido$ %sta
reacción en p3 #$4 'ace que el naran/a de metilo se muestre en un color ro/o como se
pudo ver en la práctica$2
Reacción . Naranja de metilo reacciona con ácido ac!tico.
BIBLIOGRAFIA
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1 Immaculada A ; Núria C ; Amparo C ;ImmaculadaD ; Núria L ; DiegoM ; Erneso N ;Lluisa !; Gloria Rosell ;" #Operaciones Basicas En ElLa$oraorio De %u&mica"# '(p)**+++"u$"edu*o$l,*o$l,-./casellano*cromaogra0a"(ml"
. Ro$er 2(ornon Morrison3 and Ro$er Neilson Bo4d3 QuímicaOrgánica 5!earson Educaci6n3 17789"
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