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INTRODUCCION A LA HISTOLOGÍA
DR. LUIS ALVARO MELO BURBANO
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¿Qué es la Histología?
• Histo = tejido | Logos = tratado
• Análisis de la composiciónmicroscópica y la respectiva funcióndel material biológico.
• Rama de la Anatomía que estudialos tejidos de animales y plantas
• Anatomía Microscópica: Tejidos,Célula, Órganos y Sistemas
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¿Cuál es el Objetivo de la Histología?
• Conducir al estudiante a comprender la micro anatomíade las células, tejidos y órganos.
• Correlacionar la estructura con la función
¿Cuál es la competencia de la Histología?
• El estudiante identifica con certeza los diferentes tejidosdel cuerpo humano, y comprende claramente su función
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Recuento Histórico
• 1.600: Invención del microscopio
• Marcelo Malpighi es el fundador de la Histología
• 1.665: Hooke descubre las células
• 1.830: Descubrimiento del Núcleo
• 1.838: Teoría Celular Vegetal – Schleiden
• 1.839: Teoría Celular Animal – Schwann
• Advenimiento de la Citología
• Virchow confirma la Teoría Omnis cellula e cellula
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Generalidades
• Se concluyo que existen los 4 tejidos fundamentales.
• La célula es el elemento fundamental de todos los organismosvivos
• El tejido se forma por la agrupación ordenada de células con lamisma función
• Los órganos son unidades funcionales mayores compuestospor distintos tipos de tejido
• Los sistemas comprenden varios órganos con funcionesrelacionadas, homogéneo
• Los sistemas difusos son grupos celulares con funcionesrelacionadas, localizadas en varios órganos
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La histología representa el conector entre la bioquímica, la
fisiología y la genética, y los procesos patológicos y la clínica
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MÉTODOS HISTOLOGICOS
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Métodos histológicos
• Son las técnicas encaminadas a preparar el tejido para su observación microscópica.
• Procedimientos Vitales Flujo sanguíneo
• Procedimientos Supravitales Cultivo de Tejido y Manipulación Celular
• Procedimientos Postvitales Inanimados
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Proceso Histológico
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Fijación
• Preservar las características morfológicas y moleculares del tejido
• Evitar Procesos Degradativos Autolisis, Putrefacción
• Métodos de Fijación
• Físicos: Congelación y Calor
• Químicos: Inmersión y Perfusión
• Fijadores: Alcohol etílico, Acido Acético, Glutaraldehído, Formaldehido (formalina)
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Inclusión
• Endurecer la muestra para cortarla
• Paso previo: lavar y deshidratar (xenol)
• Aclarado = solventes orgánicos (xileno) para extraer exceso de alcohol
• Parafina y Resina
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Inclusión• Previa Deshidratación y Aclaramiento
• Congelación: Crioprotector.
• Inclusión: Infiltración parafina o resina
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Corte
• Micrótomo para parafina: 5 – 20 µm
• Vibratomo: 30 – cientos de µm de grosor
• Micrótomo de Congelación: 30 – 100 µm
• Criostato: 10 – 40 µm
• Ultra micrótomo: nanómetros
• Ultracriotomo: nanómetros
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Tinción
• Colorantes Ácidos y Básico
• Enlace electrostático
• Acidofília y basofília
• Eosina ácido Citoplasma Rosado
• Hematoxilina base ADN y ARN Azul
• Tinción General: Hematoxilina – Eosina
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Hematoxilina
• Uso: Tinción General
• Color: Azul
• Resultado: Núcleo, Regiones ácidas del citoplasma, Ácidos Nucleicos, RER
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Eosina
• Uso: Tinción General
• Color: Rosado
• Resultado: Regiones básicas del citoplasma, Fibras colágenas, fibras elásticas. Eritrocitos Anaranjado/Rojo
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Hematoxilina – Eosina = Tinción General
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TÉCNICAS AVANZADAS
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Histoquímica
• Proporciona información sobre la presencia ylocalización de macromoléculas intracelulares yextracelulares.
• Se utiliza el reactivo de PASMagenta
• Localización de Carbohidratos
• Se utilizan anticuerpos marcado con fluoresceína
• Gran especificidad y alta afinidad
• Método directo e indirecto
• Enfermedades Autoinmunes y Oncológicas
Inmunohistoquímica
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Histoquímica con Lectinas
• Proteínas capaces de unirse a compuestos glúcidos
• Requiere un marcador
• Localización de Carbohidratos
RADIOAUTOGRAFÍA
Se utilizan isótopos radiactivos en macromoléculas
Información directa respecto al sitio dentro de la céluladonde se sintetiza un producto específico
Medible en el tiempo
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Observación
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Observación
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Observación
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Artefactos o artificios
• Estructuras del preparado que no existen en el tejido vivo.
• Aparecen artificialmente durante el proceso de preparación
• Retracción del tejido
• Plegamiento
• Roturas del tejido
• Precipitados de colorante
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Síntesis
1. Cual es el objetivo de la histología?
2. Cuales son los tejidos fundamentales?
3. Para que sirve la fijación?
4. Por que se deben teñir los tejidos?
5. Qué función cumple el objetivo?
6. Que es un artefacto?