INFECÇÃO HOSPITALAR POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS COM RESISTENTÊNCIA À METICILINA
(MRSA)
Beatriz Villas Bôas Gabriela Carnevale Giovana Giacomini Milena do Valle
PROBLEMA:
A resistência bacteriana a antibióticos é um grave problema de saúde pública. Você foi convidado para fazer parte da comissão de infecção hospitalar de um hospital da rede pública para investigar a origem clonal de cepas de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) em pacientes internados. Proponha uma estratégia baseada em tecnologia de DNA, indicando as etapas e métodos a serem utilizados para fazer essa investigação.
BRAINSTORM
Coleta de sangue dos pacientes
Cultura de S.aureus com
Meticilina
Extração de DNA
Sequenciamento
Genômico (total)
Hot Spot (parcial)
PCR
SSP ou RFLPDigestões
(polimorfismos bem descritos)
ESCOLHAS
Quais são os polimorfismos relacionados à resistência de Staphylococcus aureus a meticilina?
Hospital público --- Relação custo X benefício
STAPHYLOCOCCUS AUREUS O Staphylococcus aureus é encontrado colonizando a
microbiota normal, podendo tornar-se patogênico em condições como a quebra da barreira cutânea ou diminuição da imunidade. É umas das causas mais comuns de infecções nosocomiais (infecção hospitalar).
RESISTÊNCIA À METICININA _ O QUE É?
Resistência à penincilina.----
Beta-lactamases são enzimas produzidas por algumas bactérias e são responsáveis por sua resistência a antibióticos beta-lactâmicos.
Foi criado o beta-lactâmico sintético meticilina, que era resistente à ação das beta-lactamases que o S. aureus produzia.
MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina) -penicillin-binding protein, PBP2 e são resistentes a todos os antimicrobianos beta-lactâmicos.
RESISTÊNCIA À METICININA _ COMO SE DÁ?
fonte: http://www.staphylococcus.net/
"cassete cromossômico estafilocócico mec"
ISS- 3’ orfx
TIPOS DE SCC Existem 7 tipos de SCC (I - VII), sendo que o SCCI -III estão
relacionados à infecções hospitalares (HA-MRSA)
Todos possuem a estrutura geral: (mec element)
(40 to 60
kb) mec element
2.1-kb mecA
mecA
ESCOLHA JUSTIFICADA - IMPLEMENTAÇÃO
Swab das feridas dos pacientes
Cultura de S. aureus em meio met+
Extração de DNA
PCR do gene mecA
Sequenciamento do gene mecA
Sequência
mecA iguai
s
MESMA
ORIGEM
CLONAL
QUESTÕES
Onde estão os polimorfismos?
Quantos são conhecidos?
Qual seria o tamanho ideal do fragmento para sequenciamento ou digestão?
Quantas etapas seriam necessárias no processo?
Relação custo X benefício no uso de enzimas de restrição (eletroforese de campo pulsado).
Polimorfismos existentes no complexo mec.
Análise genética de diversidade e os segmentos de DNA amplificados são aleatórios.
Resolução ideal X urgência.