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DIAM: Développement d’une nouvelle technique de spectrométrie
de masse, COINTOF-MS, pour l’étude de processus de
fragmentation de nano-systèmes
Cécile Teyssier
Groupe IPM
Séminaire 2ème année
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Rayonnement
ionisante-
Radiolyse de l’eau H, HO
Fragmentation,
ionisation des bases
Observer les effets de l‘irradiation de biomolécules à l‘échelle microscopique
Influence de l‘environnement (biomolécules entourées d‘eau)
Effet direct : l’énergie du rayonnement ionisant est absorbée par l’ADN Effet indirect : l’énergie du rayonnement ionisant est absorbée par les molécules entourant l’ADN
Pourquoi irradier les agrégats moléculaires en phase gazeuse?
Dispositif DIAM
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Techniques standards d’observation par Spectrométrie de Masse
détection des fragments chargés
Informations sur les fragments neutres via calculs (DFT, …)
A.Le Padellec et al., J.of Physics 101 012007 (2008)
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Notre particularité
COINTOF-MS (COrrelation of Ions and Neutrals in a Time Of Flight Mass Spectrometer):
Détection évènement par évènement des fragments chargés et neutres issus d’une même dissociation moléculaire sur le même détecteur
Analyse de données via ROOT
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Introduction
1) Dispositif expérimental
DIAM
Source d’agrégats
Ligne de faisceaux
Faisceaux obtenus
2) Système de détection
COINTOF
Enjeux
Principe
Acquisition
3) AnalyseCID du trimèreProbabilité de détectionRapport de branchement et efficacité
4) La suiteDétection Autres agrégats et protons
Conclusion
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Dispositif expérimental
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10-4 mbar
P0
diaphragme ( 20 ou 50 μm)
10-6 mbarH2O
He ou Ar
M
vers pompe à diffusion1200 l/s
vers pompe à diffusion1200 l/s
M : manomètre (1mbar-3bar) : vanne : T° régulée (~130°C) : T° régulée (~100°C)P0: Pression de stagnation (1-2bar)
Schéma d’ensemble de la source d’agrégats
ioniseur
filaments de tungstène
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Ligne de faisceau
Sélection en énergie
Sélection en masse
Déflecteur électrostatique
Aimant
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12/51Guillaume Bruny Groupe IPM Soutenance de thèse 3 décembre 2010
Profil du faisceau après sélection en énergie
Profil du faisceau après passage dans les quadripôles
Profil du faisceau observé dans les chambres à fils
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Faisceaux obtenus en sortie de l’aimant
Résolution en masse: 1/181
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Système de détection
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Les enjeux
Développement d’un nouveau système d’analyse à temps de vol en tandem
– permettant la détection corrélée des fragments chargés et neutres issus d’un même agrégat
• Pour chaque ion parent, le signal sur le détecteur est enregistré.
• permet de déterminer le nombre de fragments associés à une voie de dissociation
– détection sur un seul détecteur :• ne nécessite pas de signal externe pour la référence des
mesures de temps de vol • permet de travailler en faisceau continu garantissant un fort
taux de répétition
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Description du principe sur un exemple: H+(H2O)2
Collision avec He
H+(H2O)2 H3O+ + H2O
H+(H2O)2 H+ + (H2O)2 (ou H+ + 2H2O)
He
H+(H
2 O)
2
Agrégats d‘eau protonésRéactions possibles:
Détection des fragmentsTOF/MCP/Amp/FastADC (8G ech/sec ou 125psec)
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0V
-1836V
150V -150V
-1700VCollision avec le gaz He
H+(H2O) 2 H+(H2O) + H2O
Les neutres conservent la vitesse incidenteLes fragments chargés sont accélérés et atteignent le MCP en premier
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0V
-1836V
150V -150V
-1700V
Δt1
Δt1
H+(H2O) 2 H+(H2O) + H2O
Signal sur le MCP
ion
neutre
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Identification des fragments évènement par évènement
• Vitesse des fragments neutres = vitesse de l’ion parent
→ temps d’arrivée des neutres sert de référence
→ pour une vitesse donnée, chaque différence de temps est associée à un fragment chargé particulier
• Travail en faisceau continu• Nombre de fragment pour chaque voie de dissociation• Rapports de branchements accessibles
Avantages
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Résolution temporelle de 0.125 nsPas de temps mort à l’intérieur d’un évènement
H+(H2O)3 H+(H2O) + 2(H2O)
Exemple d’acquisition par l’ADC rapide
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Gestion des données
• Pour mener une étude statistique → grande quantité de fichiers (typiquement 1 million)
• Stockage au Centre de Calcul de l’IN2P3• Classification des données par le logiciel ROOT
Logiciel développé par le CERN pour l’analyse et la présentation des données et conçu à l’origine pour la physique des particules
Création des fichiers au format .root avec une organisation en arbre, branche et feuille
Pré-analyse
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Les différents paramètres restent corrélés entre eux
Exemple d’arbre obtenu avec ROOT
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0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 18000
30
60
90C
ount
s
t (nsec)
H+
H+(H2O)
H+(H2O)2
Dissociation de HDissociation de H++(H2O)(H2O)33
+ (H2O)
+ (H2O)2 or many neutral fragments
P.H. Dawson, Int.,J. Mass, Spectrom Ion Phys 43, 195 (1982)
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Sélection d’évènements: déclenchement par un trigger externe
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Vérification des paramètres expérimentaux
• Seuil en amplitude 1er pic: 8mV
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Vérification des paramètres expérimentaux
• Seuil en amplitude 2ème pic: 14mV
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Vérification des paramètres expérimentaux
• Fenêtre en temps [200;400]
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Corrélation
T2-T1
T3-T2
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Analyse de données
![Page 30: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/30.jpg)
H+(H2O)2
H+(H2O)
H+
Dissociation induite par collision de H+(H2O)3
Δt en ns
No
mb
re d
’évè
nem
ents
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Estimation de la probabilité de détection de l’ion positif
• Hyp: on néglige les voies de dissociation associées à H+
p
p
N
N
nst
nst 1
30,3
30,2
32
21
Voie de dissociation Fragments détectés probabilitéCaractéristiques
H+(H2O)2 + H2O
H+(H2O) + (H2O)2
H+(H2O) + 2 H2O
R1 p+ p
R2 p+ p
R’2 p+ p p
R’2 p+ p (1-p)
R’2 (1-p+) p p
H+(H2O)2, H2O
H+(H2O), (H2O)2
H+(H2O), H2O, H2O
H+(H2O), H2O
H2O, H2O
2 frag. Δt21 grand
2 frag. Δt21 grand
2 frag. Δt21 grand
2 frag. Δt21 petit
3 frag. Δt21 grand Δt32 petit
nst 30lim
coupes dans les données sur le nombre de pics et les différences de temps
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Nbre de pics = 2 && Temps2-Temps1<30
Nbre de pics = 3 && Temps3-Temps2<30
Coupes dans les données
395
14951
30,3
30,2
32
21
p
p
N
N
nst
nst
%421p
![Page 33: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/33.jpg)
Comparaison
• Énergie de l’ion dans notre expérience: 8*19/55+1.7=4.5keV
• Ramenée à une masse pour comparaison: 4.5/19=0.235keV
B.L Peko, T.M StephenAbsolute detection efficiencies of low energy H,H−,H+,H+2 , H+3 incident on a multichannel plate detector, Nucl. Instum. Methods in Physics Research B , 171, 597 (2000)
26%
N.B.: Pas le même MCP
![Page 34: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/34.jpg)
H+(H2O)2
H+(H2O)
H+
Dissociation induite par collision de H+(H2O)3
Δt en ns
No
mb
re d
’évè
nem
ents
Fenêtre d’acquisition
![Page 35: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/35.jpg)
Spectrométrie du nombre de fragments
N(2f) :
N(3f) : H+(H2O) + 2 (H2O)
H+H2O + (H2O)2 Mais c’est un peu plus compliqué!
Il faut prendre en compte la probabilité de détection des différents fragments
![Page 36: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/36.jpg)
Spectrométrie de masse couplée à la mesure du nombre de fragments
Exemple : perte de deux molécules d’eau pour H+(H2O)n
H+(H2O)n H+(H2O)n-2 + (H2O)2
H+(H2O)n-2 + H2O + H2O
1-R
R
Sélection du fragment chargé H+(H2O)n-2: condition sur deltaT entre 1er et 2ème frag.
• Détection de 2 fragments: cas 1 OU cas 2 avec détection d’un seul neutre sur les deux
N2 = I x R2 x (1-R) x P+ x P + I x R2 x R x P+ x P x (1-P) + I x R2 x R x P+ x (1-P) x P
cas 1: production du dimère neutre
cas 2: production de 2 molécules d’eau
• Détection de 3 fragments : cas 2
N3 = I x R2 x R x P+ x P x P
RP
PRR
N
N
)1(21
3
2
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• En 2010
• En 2011
37,016,83
2 N
N
Perte de deux molécules d’eau pourH+(H2O)3 et H+(H2O)2
• En 2010
• En 2011
41,093,143
2 N
N
07,015,53
2 N
N
15,004,103
2 N
N
P2011 < P2010 évolution de la probabilité de détection
Rdimère < Rtrimère
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Résolution
• Systèmes d’équation:
• Inconnues:
P2010, P2011, Rd, Rt
t
tt
RP
PRR
2010
2010 )1(2115,5
d
dd
RP
PRR
2010
2010 )1(2116,8
t
tt
RP
PRR
2011
2011)1(2104,10
d
dd
RP
PRR
2011
2011)1(2193,14
Pb: les 4 équations ne sont pas indépendantes
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Graphiquement
14.93
8.16
10.04
5.15
0.29 0.49une solution possible
Une autre solution possible
0,2 0,33
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Estimation des probabilités de détection et rapports de branchement
• Proba détection 2010: 35% ± 7%• Proba détection 2011: 21% ± 4%
• Rapport de branchement dimère:
• Rapport de branchement trimère:
• Hyp: probabilités de détecter chargés et neutres identiques
Proba en 2011 trouvée dans l’expérience précédente: 21% ± 4%
H+(H2O)2 → H+ + 2H2O R = 0,39 ± 0,08H+(H2O)2 → H+ + (H2O)2 R’ = (1-R)
H+(H2O)3 → H+(H2O) + 2H2O R = 0,65 ± 0,15H+(H2O)3 → H+(H2O) + (H2O)2 R’ = (1-R)
![Page 41: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/41.jpg)
La suite…
![Page 42: DIAM: Développement dune nouvelle technique de spectrométrie de masse, COINTOF-MS, pour létude de processus de fragmentation de nano-systèmes Cécile Teyssier](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062622/551d9dbf497959293b8e07ef/html5/thumbnails/42.jpg)
Détection
• Nouveau TOF linéaire de plus grande acceptance
• Détecteur à localisation spatiale
• Couplage possible avec un TOF orthogonal
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Futures expériences
• Le faisceau de protons sera opérationnel le mois prochain. → irradiation de nanosystèmes à étudier
• Agrégats de biomolécules entourées de molécules d’eau. Expériences prévues avec la pyridine (cycle de l’ADN)
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Conclusion
• La nouvelle méthode COINTOF est très prometteuse (brevet déposé niveau national, niveau international en cours)
• De belles expériences en perspective…
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Merci de votre attention!
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ionNeutre 1
Neutre 2
évènement à 3 fragments : H3O+ et 2 molécules neutres
Différence de temps d’arrivée entre les différents fragments
ionNeutre
H+(H2O)3 H+ (H2O) + 2(H2O) Δt
Δt
dt
dt
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Différence de temps d’arrivée entre 2 fragments neutres
La différence de temps est liée à une différence de vitesse.La différence de vitesse est liée à l’état d’énergie de l’agrégat.
∆t neutre 1 – neutre 2 (ns)
Nom
bre
d’év
ènem
ents
20 50 125 220
meV
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Collision avec He à vitesse constante (130×103ms-1)
H+(H2O)2 H+ + (H2O)2
H3O+ + H2O
H+(H2O)3 H+ + (H2O)3
H3O+ + (H2O)2
H+(H2O)2 + H2O
H+(H2O)4 H+ + (H2O)4
H3O+ + (H2O)3
H+(H2O)2 + (H2O)2
H+(H2O)3 + H2OH+(H2O)5 H+ + (H2O)5
H3O+ + (H2O)4
H+(H2O)2 + (H2O)3
H+(H2O)3 + (H2O)2
H+(H2O)4 + H2O
H+(H2O)2
H+(H2O)3
H+(H2O)4
H+(H2O)5
H+(H
2O
) 2
H+(H
2O
)
H+(H
2O
) 3
Différence de temps de vol entre le fragment neutre et le fragment chargé
Dissociation induite par collision de H+(H2O)n :
Δt0Δt1Δt2Δt3H+(H2O) H+ + (H2O)
H+(H2O)Δt0
Δt0
Δt0
Δt0
Δt0
Δt1
Δt1
Δt1
Δt1
Δt2
Δt2
Δt2
Δt3
Δt3