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Clasificación e
Identificación
bacteriana Tema 3.
Clasificación bacteriana
Tamaño
Morfología
Características de tinción
En función de…
1.Tamaño
2.Forma
3.Características de tinción
Tinción de Gram
Tinción de Ziehl-Neelsen
Otras tinciones: Blanco de Calcoflúor Panóptico Azul de Lactofenol etc.
Diferencias constitutivas en la estructura de
la pared bacteriana
Tinción de Gram
http://www.youtube.com/watch?v=XouOC0gRfyc
(lugol)
Parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (ác. micólico)
(Cryptosporidium spp., Micobacterium spp., Nocardia spp.,
Actinomices spp.)
Resisten la decoloración con alcohol-ácido (BAAR)
Requiere calor
Tinción de Ziehl-Neelsen
Añadir fucsina-fenicada (5 min)
Calentar hasta la emisión de vapores (3-5 min)
Decolorar con alcohol-ácido (1-3 min)
Aplicar azul de metileno (1 min)
Identificación de bacterias
MUESTRA
COLONIA
EN
CULTIVO PURO
MATERIAL
GENÉTICO
Métodos fenotípicos
Pruebas rápidas
Catalasa
Coagulasa
Oxidasa
Prueba de la catalasa
Agua oxigenada diluida + emulsionar colonia bacteriana
Aparición de burbujas de oxígeno por la
acción de la catalasa del m.o. sobre el H2O2
Negativo
Positivo
- La catalasa es una enzima que protege a las células frente al peróxido
de hidrógeno producido en el metabolismo del oxígeno
- Cataliza la formación de agua y oxígeno a partir del peróxido de
hidrógeno
Cocos Grampositivos
H2O2 H2O + O2
Prueba de la coagulasa
Coagula el plasma por la presencia
de la enzima plasmocoagulasa
La coagulasa es una enzima capaz de desnaturalizar la fibrina del plasma
Se añade una suspensión densa de bacterias a un tubo
pequeña con plasma y se incuba a 37 oC.
Bacilos/Cocos Gramnegativos
Detecta la presencia de “citocromo C oxidasa” en la cadena de
trasporte de electrones
Puede detectarse en el laboratorio utilizando un aceptor de electrones
artificial (p-fenilendiamina)
Prueba de la Oxidasa
Se utiliza para diferenciar Pseudomonas spp (+) de Enterobacterias (-)
Serotipo:
-Según los, antígenos presentes en la superficie celular También, según factores de virulencia, lipopolisacáridos en bacterias gram-, presencia de
exotoxinas, plásmidos, bacteriófagos, etc.
- Permite diferenciar organismos a nivel de subespecie
- Diferencia subpoblaciones con pruebas serológicas (Las respuestas inmunitarias del organismo frente a un serotipo de un microorganismo
(p.e. la gripe) pueden no proteger frente a otro serotipo de la misma especie)
Otras identificaciones de las bacterias
Genotipo: contenido genético fenotipo
Serogrupo: definidos por el polisacárido capsular
(Neisseria meningitidis 13 serogrupos)
Clasificación Bacteriana
Cocos
Grampositivos
Bacilos
Grampositivos
Bacterias
Grampositivas
Aerobios
Anaerobios
Aerobios
Anaerobios
Cocos
Gramnegativos
Bacilos
Gramnegativos
Bacterias
Gramnegativas
Aerobios
Anaerobios
Aerobios
Anaerobios
Cocos Grampositivos
Estafilococos (Staphylococcus spp.)
- En tétradas ó racimos
- Catalasa positivos
- 2 clases: Coagulasa negativos: SCN
Coagulasa positivos: S. aureus
Estreptococos (Streptococcus spp. / Enterococcus spp)
- Catalasa negativos
- En parejas ó cadenas
- -hemólisis (alfa-hemólisis), -hemólisis
(beta-hem.) ó - hemólisis (no hemólisis)
Hemólisis
Capacidad de lisar los hematíes mediante la producción de
hemolisinas
-hemólisis /
hemólisis total -hemólisis /
No hemólisis
-hemólisis /
hemólisis parcial
Bacilos Grampositivos
Según características morfológicas :
• Corineformes ( No esporulados)
• Familia Bacillaceae (Esporulados)
Esporulados (aerobios o anaerobios)
No esporulados (aerobios o anaerobios)
Cocos Gramnegativos
Género Neisseria
Bacilos Gramnegativos
Otras bacterias
■ Bacterias ácido alcohol resistentes
■ Bacterias Gramnegativos curvadas
■ Espiroquetas
■ Bacterias de crecimiento intracelular obligado
Otras bacterias
Otras bacterias