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Cantidad de particulas en el aire
Ambiente N Particulas/dm3
rtico 10.000
Ocano 100.000
Campo 1.000.000
Ciudad 100.000.000
Carretera local 1.000.000.000
Humo del tabaco 100.000.000.000
Ambiente N Particulas/dm3
500.000
5.000.000
15.000.000
Cantidad de particulas endiferentes ambientes
Cantidad de particulas generadaspor la actividad humana
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Hay menos de 10000 0,1 m (0,001 mm) en un metro cbico de aire
Micrografa de cabello humano
Partcula de polen 10 m1 micrn
Aire estril: La normativa Europea: ISO 14644-1
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Aire estril: Equivalencias entre diferentes normativas
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Flujo Laminar Esteril: Principio de funcionamiento (I)
Ventajas:
Distribucin homongnea y paralela de lneas de aire.
Efecto barrido e inexistencia de zonas muertas
Evita la contaminacin cruzada
Flujo Turbulento Flujo Laminar
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Flujo Laminar Esteril: Principio de funcionamiento (II)
0,40 m/s
0,30 m/s
0,20 m/s
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Barreras de seguridad primaria: cabinas
Cabinas de flujo laminar: horizontal y vertical Aplicacin: Manipulacin de productos no txicos Proteccin: Producto
Cabinas de seguridad biolgica: clase I, clase II y clase III
Aplicacin: Manipulacin de productos txicos y/o con riesgo de infeccin Proteccin
Clase I: usuario y ambiente Clase II: producto, usuario y ambiente Clase III: produto, usuario y ambiente
Aisladores de laboratorio: de presion positiva y negativa Aplicacin:
Aislador de presin positiva: para productos sin riesgo biologico peroque requieren de elevada esterilidad
Aisladores de presin negativa: para manipular substancias nocivascomo la preparacin de productos citotxicos.
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Cabinas de flujo laminar vertical y horizontal
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LAF horizontal: principio de funcionamiento
Entrada de aire de la habitacin1
Prefiltro de entrada de aire2
Ventilador de alta eficiencia3
Filtro HEPA H-144
Flujo de aire laminar estril5
rea de trabajo sin frontal
Flujo laminar clase 10 (ISO 4)
Proteccin Nivel
Producto Total
Usuario Nula
Ambiente Nula
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Modelo especial
LAF horizontal: Modelos standard y especiales
Cabina para Fecundacin In-Vitro (FIV)Instalacin de zona calefactada para la manipulacinde ovocitos, embriones y semen.
Temperatura constante: (37+/-0,5) C
Preinstalacin de lupa estereoscpica (opcional)
Modelo Tamao (mm)
Mini H 670
AH 100 1.200MH 100 1.500
BH 100 1.800
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LAF Vertical serie 100: Principio de funcionamiento
Entrada de aire de la habitacin1
Ventilador de alta eficiencia2
Filtro HEPA H-143
Prefiltro de extraccin4
Flujo de aire laminar estril5
Flujo de extraccin6
Flujo laminar clase 10 (ISO4)
Proteccin Nivel
Producto Total
Usuario Bsica
Ambiente Nula
10% de extraccin
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LAF Vertical serie 100: Modelos standard y aplicaciones especiales
Modelo Tamao (mm)Mini V 670
PV-100 800
AV 100 1.200
BV 100 1.500
CV 100 1.800
Aplicacin especial
Superficie antivibracin para poder colocar unabalanza de precisin
Aplicable a cualquier cabina
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LAF Vertical con contencin serie 30/70:Principio de funcionamiento Serie 30/70
30% de extraccin
Entrada de aire de la habitacin1
Ventilador de alta eficiencia2
Filtro HEPA H-143
Filtro HEPA H14 de extraccin4
Flujo de aire laminar estril5
Flujo de extraccin estrril6
Flujo laminar clase 10 (ISO4)
Proteccin Nivel
Producto Total
Usuario Media
Ambiente Total
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Modelo especial
Estabulario: cabina especial para la investigacincon animales
Sistema de proteccin especial de los filtros HEPA para evitar laprematura colmatacin de estos.
Diseo silencioso para evitar el estres de los animales
Resistente a los frecuentes procesos de limpieza y desinfeccin
Modelo Tamao (mm)PV 30/70 800
AV 30/70 1.200
BV 30/70 1.500
CV 30/70 1.800
LAF Vertical con contencin serie 30/70:Modelos standard y especiales
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Modelo especial
Estabulario: cabina especial cambio de jaulas
Ligera (aluminio) y fcil de trasladar.
Altura regulable automaticamente
Resistente a los frecuentes procesos de limpieza y desinfeccin
Bajo consumo
Modelo Tamao (mm)
PV 30/70 800
AV 30/70 1.200
BV 30/70 1.500
CV 30/70 1.800
LAF Vertical con contencin serie 30/70:Especial Animalario -ZOON
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Cabinas de Seguridad Biolgica
Principio de funcionamiento y modelos
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Niveles de riesgo biolgico (BSL): Definicin y ejemplos
BSLRiesgo de
infeccin en elhombre
Riesgo depropagacinal colectivo
Profilaxis Ejemplos
BSL1 Poco probable quecause enfermad No No es necesario
E. Coli, varicela, Hepatitiscanina, Bacillus subtilis,
cultivos de celulas y bacteriasno infecciosas
BSL2 Puede causar unaenfermedad
Peligro para elusuario y riesgo
que sepropague al
colectivo
Generalmenteexisten profilaxis o
tratamientoseficaces
Hepatitis B, Hepatitis C, gripe,salmonelas, VIH, Tembladera yen genral toda maiipulacin detejidos humanos o derivados
sanguinios de los que sedesconozca si existe
contaminacin
BSL3 Enfermedad grave
Serio peligropara el usuarioy riesgo que se
propague alcolectivo
Generalmenteexisten profilaxis o
tratamientoseficaces
ntrax, paperas, virus del nilooccidental, SRAS, viruela,tuberculosis, tifus, fiebre
amarilla, EEB.
BSL4 Enfermedad muygrave
Serio peligropara el usuario
y elevadoriesgo que sepropague al
colectivo
No existengeneralmente
profilaxis otratamientos
eficaces
Fiebre boliviana, Dengue,Virus de Marburgo, bola,
Hanta, Virus de Lassa y otrasenfermedades hemorrgicas
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Normativa Europea: EN 12469
Normativas de las CSB
Las cabinas de seguridad biolgica deben cumplir conla normativa europea EN 12469 (En Espaa UNE-EN12469)
Solo el certificado emitido por una entidadindependiente de reconocido prestigio avala estecumplimiento.
Esta normativa asegura que la cabina proporciona el
nivel de seguridad prometido
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Cabina de seguridad Biolgica Clase I:Principio de funcionamiento
Entrada de aire de la habitacin1
Ventilador de alta eficiencia2
Filtro HEPA H-14 de extraccin3
Flujo de extraccin estril4
Proteccin Nivel
Producto Nula
Usuario Alta
Ambiente Alta
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2
3
4
1
2
3
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Cabina de seguridad Biolgica Clase II:
Principio de funcionamiento
Entrada de aire de la habitacin1
Ventiladores de alta eficiencia2
Filtro HEPA H-14 de extraccin3
Filtro HEPA H-144
Proteccin Nivel
Producto Total
Usuario Alta
Ambiente Alta
Flujo laminar estril clase 105
Flujo de extraccin estril6
Flujo laminar clase 10 (ISO4)
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4
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CBS Clase II: Diagrama de flujo
Exhaust fan
Impulsion fan
Front slotsBack slots
Plenum
Plenum
HEPA Filter
Laminar flowWorking Chamber
External Exhaust
30 % extraccin
30 % of lab inflow
Flujo laminar ISO 4 (class 10) : Filtracin 99.999 % partculas > 0,3 mm
99.995% segn EN 1822
Mueble de la cabina de acero
pintado epoxy
70 % de recirculacin del total delflujo a travs de filtro HEPA
Vel de entrada de aire: 0,5 m/s
Velocidad flujo laminar: 0,4 m/s
Plenums interactivos peroindependientes, los ventiladores ylos sensores controlan el flujo de
la cmara y de la extraccin
Cmara de trabajo de una solapieza, acero inox
Superficie de trabajo en piezas
Iluminacin por encima de 1100lux
Frontal de cristal laminado ytemplado permitiendo acceso totala la cmara de trabajo y limpieza
por ambos lados
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Cabina de seguridad Biolgica Clase III:
Principio de funcionamiento
Entrada de aire de la habitacin1
Filtro HEPA-14 de extraccin2
Filtro HEPA H-143
Flujo laminar estril clase 104
Proteccin Nivel
Producto Total
Usuario Total
Ambiente Total
Flujo de extraccin estril5
Sin regimen de flujo laminar
1
2
3
4
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CSB Clase II: Diferentes diseos paradistintas necesidades
Bio II AdvanceBioVanguard
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CSB: Dimensiones
Diseo compacto
El innovador diseo compactoproporciona a la Bio II Advance unasgrandes prestaciones en el mnimoespacio.
Con 759 mm de profundidad y 1260mm de alto es la cabina mscompacta del mercado
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Fcil limpieza y acceso al interior de la cabina
CSB: Cristal frontal fcil de limpiar
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CSB: Control con regulacin automtica
Control con autorregulacin de lacolmatacin de los filtros
Control con regulacin automtica
(monitorizacin por microprocesador) que
compara continuamente los valores reales
de los parmetros seleccionados con los
valores de validacin.
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Parmetros:
Nivel de colmatacin de los filtros: permite la planificacin del
cambio de filtros.
Velocidad del flujo laminar
CSB: Pantalla de fcil lectura
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Cdigo cromtico indicando visualmente el estado:
Pantalla verde: Cabina en condiciones seguras
Pantalla roja: Cabina fuera de especificaciones
Pantalla amarilla: UV en funcionamiento
CSB: Sistema de alarmas fiable
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Ventanas laterales
Reposabrazos
Inclinacin frontal de 10
La parte frontal con ngulo de 10permite adoptar una postura detrabajo ergonmica y evita la fatiga.
Laterales de vidrio transparente,maximizan la luz y la visibilidad enel interior, ofreciendo un entorno detrabajo luminoso y abierto
Doble reposabrazos de serieextraible
CSB: Ergonoma
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Sin Junta: fugas Con Junta: hermeticidad
CSB: Estanqueidad de la cmara
Sellado hermtico por junta de silicona
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Fcil y rapido sistema de cambio de filtros
nico e innovador 4F SystemFast, Friendly & eFFicient System: el sistemapatentado de cambio de filtros se realiza por la parte frontal de la cabina conla ayuda de herramientas comunes, reduciendo en tan solo 5 minutos eltiempo requerido para cambiar filtros.
CSB: Todos los servicios desde el frontal
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Prefiltro que cubre el 100% del retornodel aire Incrementa drsticamente la vida de los
filtros HEPA Maximiza el efecto de descontaminacin
(sin capas de suciedad en el interior dela cabina)
CSB: Prefiltracin
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CSB: Sin pre-filtro
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CBS con tercera etapa de filtracin
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CSB Clase II para manipular citostaticos (I)
Entrada de aire de la habitacin1
Ventiladores de alta eficiencia3
Filtro HEPA H-14 de extraccin4
Filtro HEPA H-14 de flujo laminar5
Proteccin Nivel
Producto Biolgico Total
Producto Citotxico Total
Usuario Alta
Ambiente Alta
Flujo laminar estril clase 106
Flujo de extraccin estril7
Flujo laminar clase 10 (ISO4)
Filtro HEPA H-14 de recogida de citostaticos2
1
2
3
4
5
6
3
7
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Cabina informatizada
Lector cdigo de barras
Impresora cdigo de barras
Pantalla tctil integrada
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Aisladores de laboratorio
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Tecnologias para la proteccin del producto y/o elusuario
Habitacinclasificada
Cabinadeflujo
laminar
Barriersystem
Habitacinsin
clasificacin
AsepticosAbiertos
Asepticoscerrados
Asepticoscon
contencincerrados
Contencincerrados
Barriersystem
CabinaSeguridad
Biolgica
ZonaClasificasda
Zonanoclasificada
Proteccin UsuarioProteccin producto
Presin positiva Presin Negativa
Fiabilidade
n
cuanto
a
uso
AISLADORES
ASEPTICOS
CONTENCION
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Aislador de presion positiva: Sterilator
La cmara de trabajo del Sterlilator se encuentra en presin positivarespecto a la habitacin.
La cmara de trabajo est a una presin ligeramente superior que losSAS de materiales para asegurar las condiciones aspticas de la
cmara donde se manipulan las muestras
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La cmara de trabajo del Cytolator se encuentra en presin negativarespecto a la habitacin
La cmara de trabajo est a una presin ligeramente inferior que losSAS de materiales para asegura la proteccin del producto, usuario y
ambiente
Aislador de presion positiva: Cytolator
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Sterilator Size (mm)
CS 1201 1.200
CS 1801 1.800
Aisladores de laboratorio: Modelos estandar
Cytolator Size (mm)
CS 1202 1.200
CS 1802 1.800
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CSB Clase III: MSC III
El rea de trabajo de la Cabina se encuentra a una presin negativacomo mnimo de 200 Pa respecto a la habitacin.
La presin de la cmara de trabajo es negativa para proporcionarproteccin mxima al usuario.
Sin rgimen de flujo laminar: se recomienda la manipulacinnicamente de una muestra para evitar contaminaciones cruzadas.
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MSC III Size (mm)
MSC III 1200 1.200
MSC III 1500 1.500MSC III 1800 1.800
CSB Clase III: Modelos estandar
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Rango de Cabinas y Aisladores para trabajos de alto
riesgo Biologico en laboratorios
MSC III
Manipulacin deagentes BSL 4
STERILATOR
Manipulacin deproductos sin alto riesgo
biolgico pero connecesidad de un
ambienteextremandamente estril
CYTOLATOR
Proceso de productosCitotxicos
ISOFLOW
Aislador Modular
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Cabinas de flujo laminar vs AisladoresVentajas e inconvenientes
Cabinas de flujo laminar Aisladores
Flujo laminar vertical Menor precio del equipo Mayor ergonomaRequiere que el equipo este en una zona
sin corrientes de aire (puertas, salidas deaire acondicionado) y que el usuariotrabaje de forma adecuada en su interior(sin movimientos bruscos de brazos ydesplazamiento de muestras/material...)
Aislador de P (+) Presin positiva de 50 Pa garantizan una
elevada esterilidad de la zona de trabajo No hace falta ningn tipo de requerimientode ubicacin ni manipulado
CSB clase II Construida segn normativa EN-12469 ycertificacin TUV Nord Menor precio del equipo Mayor ergonoma Requiere que el equipo este en una zonasin corrientes de aire (puertas, salidas deaire acondicionado) y que el usuariotrabaje de forma adecuada en su interior(sin movimientos bruscos de brazos ydesplazamiento de muestras/material...)
Aislador de P (-) No estn regulados por ninguna normativaEuropea.
Presin negativa de 90 Pa garantizanelevada proteccin al usuario No hace falta ningn tipo de requerimientode ubicacin ni manipulado
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Cabinas de flujo laminar vs Aisladores
Ventajas e inconvenientesCabinas de flujo laminar Aisladores
CSB clase II con tercera etapa defiltracinConstruida segn normativa EN-12469 ycertificacin TUV Nord Menor precio del equipo Mayor ergonoma Requiere que el equipo este en una zonasin corrientes de aire (puertas, salidas deaire acondicionado) y que el usuariotrabaje de forma adecuada en su interior(sin movimientos bruscos de brazos ydesplazamiento de muestras/material...)
Aislador de P (-) con tercera etapade filtracin No estn regulados por ninguna normativaEuropea.
Presin negativa de 90 Pa garantizanelevada proteccin al usuario No hace falta ningn tipo de requerimientode ubicacin ni manipulado
CSB clase IIIConstruida segn normativa EN-12469Presin mnima de 200 Pa en la cmarade trabajo segn normativaEstrictas pruebas de estanqueidad segnnormativa.
Para manipulacin de patgenos delgrupo 4
Aislador de P (-) No estn regulados por ninguna normativaEuropea.
Presin negativa de 90 Pa.No es aconsejable este tipo de aisladorespara el manipulado de patgenos del grupo 4.
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Ubicacin, Instalacin y Validacin
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CSB: Ubicacin, Instalacin y Validacin
Las CSB son uno de los pasos a tener encuenta de los programas de Bioseguridad
Las Buenas Practicas de Laboratorio (GLPs)son indispensables para trabajar de forma
biosegura
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Ubicacin: Aspectos a considerar
Antes escoger la ubicacin de su CSB, verificar si:
Es posible el acceso al emplazamiento final?
El recorrido de la CSB al emplazamiento escogido se realizar por ascensor
o escaleras?
Que dimensiones tiene todo el recorrido? Considere el espacio del
ascensor/escaleras, espacio de los pasillos, puertas etc
El usuario tendr suficiente espacio para realizar su trabajo dentro de la
cabina una vez instalada?
La altura de su laboratorio es superior a 2,5 m?
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Ubicacin optima:
Cabina
1 m
Cabina
1,5 m
Cabina
1 m
CabinaCabina
2,5 m
Cabina
1,5 m
30 cm
0,72 m
1,45 m
2,5 m
Cabina
Cabina
1 m
Cabina
1 m
Cabina
1,5 m
Cabina
1 m
CabinaCabina
2,5 m
Cabina
1,5 m
30 cm
0,72 m
1,45 m
2,5 mCabina
1 m
CabinaCabina
1 m
Cabina
1,5 m
CabinaCabina
1,5 m
Cabina
1 m
Cabina
Cabina
1 m
CabinaCabina
2,5 m
CabinaCabinaCabinaCabina
2,5 m
Cabina
1,5 m
Cabina
1,5 m
CabinaCabina
1,5 m
30 cm
0,72 m
1,45 m
2,5 m
30 cm
0,72 m
1,45 m
2,5 m
Cabina
Cabina
1 m
CabinaCabina
Cabina
Cabina
1 m
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Instalacin: conduccin al exterior
La CSB debe ser conducida al exterior? Y si sta es necesaria,de que longitud estamos hablando?
La CSB se conducir al exterior:
Cuando se trabaje con productos voltiles o vapores txicos (considerando
tambin los productos utilizados para la limpieza y su concentracin) Cuando la diferencia entre la cabina y el techo sea inferior a 30 cm
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Instalacin: Accesorios para la conduccin al exterior
Existen diferentes accesorios para la correcta conduccin de la cabina al
exterior:
Conexion tipo campana (canopy)para una extraccin conducida
segura
Valvula antiretorno
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Validacin
Test de validacin despus de lainstalacin de la CSB
CFL HCFL
V 10%CFL
V 30%CSB CYTO
Validacin de filtros Hepa-14:Fugas del filtro de flujo laminar
s s s s s
Validacin de filtros Hepa-14:Fugas del filtro de extraccin
n/a n/a s s s
Validacin de filtros Hepa-14:Fugas del filtro de aspiracin
n/a n/a n/a n/a s
Test de velocidaddel flujo laminar s s s s s
Test de velocidad deentrada
n/a s s s s
Diferencial de presin s s s s s
Test de humo s s s s s
Despus instalar la cabina, esta debe ser validada con los siguientes tests:
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Validacin: Certificacin individual
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Como trabajar de forma segura en una
Cabina de Flujo Laminar
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Como trabajar de forma segura en una CSB (I)
1. Prepare la hoja de trabajo (check list de los materiales) paraplanificar la actividad a realizar en la cabina y utilizar el equipo deproteccin personal necesario para un trabajo seguro:
a. Identifique todo el material necesario para llevar a cabo el trabajo:
Equipos
Cultivos
Medios de cultivo, reactivos
Materiales
b. Utilice el equipo de proteccin personal necesario:
Guantes, bata y otras prendas de vestir para: Protegerle de los agentes con los que trabaja
Que usted no contamine la cabina, los cultivos o
otros materiales de investigacin
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Como trabajar de forma segura en una CSB (II)
2. Prepare la cabina antes de empezar a trabajar:
a. Encienda la cabina 5 minutos antes de empezar a trabajar en ellapara estabilizar el flujo laminar.
3. Trabaje en la cabina de forma segura para minimizar su riesgo de
contaminacin y el de la muestra:a. Limpie y desinfecte la superficie de trabajo, el interior de la cmaray el cristal con una solucin bactericida adecuada, alcohol al 70% o eldesinfectante adecuado para cada ocasin.
b. Desinfecte todos los objetos (materiales y equipos) antes de situarlosen el interior de la cabina.
c. Ubique todo el material a utilizar en el interior de la cabina antes deempezar a trabajar para evitar que ningn contaminante pase haciadentro o hacia fuera del rea de trabajo.
d. Mantenga todos los objetos a 10 cm del cristal.
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Como trabajar de forma segura en una CSB (III)
e. No site los objetos encima del perforado (frontal y trasero) para nobloquear el flujo laminar.
f. No obstruya la extraccin de la cabina.g. No obstruya la sonda de velocidad de la cabina.h. No sobrecargue la cabina: ubique en su interior nicamente el
material que necesite para el trabajo a realizar en ese momento.i. No utilice las cabinas como almacn de productos o material de
laboratorio.j. Divida su rea de trabajo en tres zonas:
rea para residuos:recipiente de residuos
rea limpia: reactivos,medios de cultivo
rea de trabajo
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Como trabajar de forma segura en una LAF (IV)
Distribuyendo el material en estas tres zonasconseguir:
Realizar el mnimo nmero posible demovimientos en la cabina
No mezclar materiales estriles con
residuos. Tener despejada la zona de
manipulacin (rea de trabajo).
Tener controlado el material residualdentro de un recipiente controlado.
k. Cuando mueva objetos dentro de la cabinaprocure:
Realizar movimientos suaves
Mover manos y brazos desde fuerahacia dentro de la cabina, intentandono realizar movimientos laterales.
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Como trabajar de forma segura en una LAF (V)
l. Trabaje bajo las siguientes tcnicas aspticas:
Mantenga las botellas, viales y tubos paralelos al flujo laminar.
Vaya transfiriendo continuamente el material desechable en elcontenedor de residuos.
Si es posible, trabaje con un nico cultivo cada vez y recoja antesde pasar al siguiente.
Introduzca en la cabina material libre de partculas por lo que espreferible el uso de tubos con tapones de rosca en lugar dealgodn .
Todo el material que introduzca en la cabina debe estar en unrecipiente cerrado para evitar la contaminacin al exterior.
No introduzca materiales que emitan fcilmente partculas comoel papel, madera, cartn, lpices o gomas de borrar.
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Como trabajar de forma segura en una LAF (VI)
4. Una vez finalizado el trabajo:
Desinfecte todas las superficies de la cabina:
Superficie de trabajo
Laterales y pared frontal
Cristal Debajo de las bandejas (si es accesible)
Qutese el equipo de proteccin personal y deseche lo necesario
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Como trabajar de forma segura en una LAF (VII)
5. Otras recomendaciones tiles
No es recomendable el uso de mecheros Bunsen o similares paraevitar turbulencias del flujo laminar o el deterioro de los filtrosHepa.
Las cabinas deben estar ubicadas lejos de puertas y ventanas paraevitar posibles corrientes de aire que puedan alterar el flujo laminary por lo tanto disminuir su proteccin.
Durante la utilizacin de la cabina, no est permitido comer, beber omasticar chicle.
No se pueden manipular gases corrosivos, inflamables o explosivosdentro de la cabina.
Las partes no accesibles de la cabina (ventiladores, plenums,filtros) solo pueden ser manipuladas por tcnicos autorizados.
Para garantizar una total seguridad, se recomienda a todos usuariosque ante cualquier duda consulten el manual o acudan a suresponsable
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Muchas gracias por su atencinPreguntas y respuestas