Diagnóstico microbiológico de las hepatitis virales

Juan Carlos RodríguezS. Microbiología

Hospital General Universitario de Alicante

Hepatitis A. Características generales� Provoca enfermedad aguda en mayor frecuencia al aumentar la edad: en niños es frecuente la infección y generalmente es asintomática

� No cronifica nunca� En el 1% de los casos se produce hepatitis fulminante

� Transmisión fecal-oral� Existe vacuna eficaz

Hepatitis A

Hepatitis A

Hepatitis A

Hepatitis A

Hepatitis B. Características generales� En la mayoría de los casos provoca una infección asintomática, pero en otros se presenta como una enfermedad aguda

� En algunos casos puede cronificar (5-10%) y llegar a cirrosis y a carcinoma hepático. Si hay transmisión materno-fetal, el porcentaje de persistencia es del 80%.

� Transmisión a través de sangre, fluidos biológicos, vía sexual y materno-fetal

� Existe vacuna eficaz

Hepatitis B

Hepatitis B

Hepatitis B

Hepatitis B

Hepatitis D. Características generales� Es un virus defectuoso� Necesita la presencia de HBsAg en el suero para poder replicarse

� Puede provocar coinfección (se asocia a un elevado porcentaje de hepatitis fulminante) o sobreinfección (suele cronificarse y evolucionar a formas graves)

� Se transmite igual que la hepatitis B, pero en nuestro medio se da casi exclusivamente en ADVP

� No hay vacuna

Hepatitis D

Hepatitis D

Hepatitis C. Características generales� Infección aguda, generalmente asintomática.� Cronifica el 85% de los casos, con evolución a cirrosis y a carcinoma

� Se transmite igual que la hepatitis B, pero la transmisión sexual es poco eficiente (< 5% de los casos)

� Afecta al 2-4% de la población adulta� No hay vacuna� Principal causa del transplante hepático

Hepatitis C

Hepatitis E. Características generales� Infección generalmente importada (India, Méjico y Centroamérica)

� Puede aparecer en trabajadores que trabajan con animales, principalmente cerdos

� Transmisión fecal-oral� No cronifica� No hay vacuna

Hepatitis E

Otros virus Características generales� El virus de la hepatitis G (GBV-C) no se demostrado que cause enfermedad en humanos y por tanto no se debe investigar en los pacientes

� Tampoco tiene significado clínico el virus TT

Hepatitis AMarcadores serológicos� Ig M: Aparece en la infección aguda y se mantiene 3-6 meses, por lo que es el que se emplea en el diagnóstico. Se detecta mediante ELISA

� Ig G: Indica contacto previo con el virus. Sólo útil en estudios de prevacunación y seroprevalencia. Se detecta mediante ELISA

Marcadores serológicos. Hepatitis A

Hepatitis B. Marcadores serológicosActividad viral Infección Buen

pronóstico

HBsAg AntiHBc AntiHBs

HBeAg AntiHBe

AntiHBc (IgM)

Hepatitis B. Marcadores serológicos� Hepatitis aguda

� Hepatitis curada. Desaparición de HBsAg a los 6 meses.

� Hepatitis crónica: Puede pasar a portador � Portador inactivo. Puede negativizarse el HBsAg o reactivarse la enfermedad.

Hepatitis B. Marcadores serológicos

HBsAg HBeAg AntiHBc (IgM)

AntiHBc AntiHBs AntiHBe

H. Aguda

+/(-) + + + - -

H. Curada

- - - + + +

H. Crónica

+ + -/+ + - -

Portador + - - + - +

Pre-core + - - + - +

Hepatitis B. Marcadores serológicos

Hepatitis B. Marcadores serológicos

Hepatitis BMarcadores serológicos� HBsAg (Antígeno de superficie):

� Llamado antígeno Australia� Aparece en la fase aguda y si la evolución es favorable, desaparece en 6-8 semanas

� Si se mantiene a los 6 meses indica infección persistente que puede derivar en hepatitis crónica o en un estado de portador sano (sin replicación vírica ni lesión hepática)

� Se detecta en suero mediante ELISA y existe una técnica confirmatoria de neutralización

Hepatitis BMarcadores serológicos� Anti HBs (Anticuerpo frente al antígeno de superficie): � Indica recuperación de la enfermedad� Aparece a los 3 meses de la infección aguda si el paciente se cura

� Confiere protección contra la reinfección� Es el único presente en vacunados� Se detecta mediante ELISA

Hepatitis BMarcadores serológicos� Anti HBc (Anticuerpo frente al antígeno del core): � Se realizan dos determinaciones por ELISA: Anticuerpos totales y IgM

� Los anticuerpos totales están en todas las fases de la enfermedad pero no protegen de la reinfección

� La Ig M-AntiHBc es el primer anticuerpo que aparece en la fase aguda y puede mantenerse 12-18 meses. También puede encontrarse en algunos pacientes con hepatitis crónica

Hepatitis BMarcadores serológicos� Ag HBe-AntiHBe:

� El Ag Hbe se detecta en suero en fase aguda y en fase crónica activa. Se correlaciona con la replicación viral y la viremia

� Su presencia es signo de elevada contagiosidad y su desaparición es signo de buen pronóstico

� Los pacientes con variantes pre-core defectuosas no tienen este antígeno, pero tienen replicación viral persistente y mal pronóstico

� La aparición de AntiHBe en una infección aguda indica buen pronóstico

� La presencia en hepatitis persistentes con HBsAg indica buen pronostico excepto en la pre-core

Hepatitis BMarcadores serológicos� Detección de DNA:

� Se detecta de forma cuantitativa por PCR a tiempo real

� Sirve para detectar la viremia y su cuantificación refleja la situación de los hepatocitos. Por tanto sirve para:

� Confirmar resultados serológicos dudosos� Control de los tratamientos� Diferenciar portador de hepatitis crónica

Hepatitis BMarcadores serológicos� Genotipado y detección de mutantes

� Mediante PCR e hibridación con sondas fijadas en tiras de celulosa (LIPA)

� También por secuenciación.� Es útil para:

� Permite dividir los virus en varios genotipos A-G� Permite detectar las variantes pre-core� Permite detectar cepas resistentes a lamivudina, adefovir y entecavir

Hepatitis C. Diagnóstico� Técnica de cribado: Detección de anticuerpos totales mediante ELISA

� Los anticuerpos aparecen 4-6 semanas postinfección, pero en algunos casos pueden retrasarse meses.

� Todos los resultados positivos deben ser confirmados

� Pruebas confirmatorias: Inmunoblot o PCR

Hepatitis C. Diagnóstico

Hepatitis C. Diagnóstico� La PCR positiva indica la presencia del virus en sangre.

� Útil para:� Diagnóstico de las primoinfecciones (periodo ventana)

� Confirmación de los resultados del ELISA� Seguimiento del tratamiento

� La detección del Ag de core mediante ELISA es una técnica con las mismas utilidades que la PCR

Hepatitis C. Genotipado� El genotipo del virus influye en la respuesta al tratamiento (1b es el que peor responde)

� Se realiza mediante una amplificación por PCR del fragmento variable y por hibridación posterior con sondas fijadas en un papel de celulosa (LIPA)

� Si no se puede hacer el genotipado por ausencia de virus, puede hacerse serotipado (buscando anticuerpos específicos de cada genotipo)

Hepatitis C. Genotipado

Hepatitis C. Genotipado

Hepatitis C. GenotipadoGenotipo General HIV No HIV

1b 38.4 27.3 41.5

3a 23.1 25.4 22.5

1a 13.5 16.4 12.8

1a/1b 8.5 9.1 8.4

4 9.2 10.9 8.8

Hepatitis D. Marcadores serológicos� Solo se debe buscar este agente si existe presencia de HBsAg en suero del paciente (hepatitis B aguda, portador o hepatitis crónica)

� Se detecta mediante la busqueda de anticuerpos totales mediante ELISA

� Mediante PCR se detecta la presencia de virus en suero