daftar pustakaditerminasi dengan cara dislokasi leher (kurang dari 2 jam) dengan ukuran 1 cm3. 2)...

59

DAFTAR PUSTAKA

1. Winarno F.G. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama;

2004.

2. Azizahwati, Kuniadi M, Hidayati H. Analisis Zat Warna Sintetik Terlarang

untuk Makanan yang Beredar di Pasaran. Majalah Ilmu Kefarmasian, IV (1),

7-10, Departemen Farmasi FMIPA-Universitas Indonesia; 2007.

3. Astomo dan Azis Eko. Analisis Rhodamin B dan Metanil Yellow dalam Jelly

di Pasar Kecamatan Jebres Kotamadya Surakarta dengan Metode

Kromatografi Lapis Tipis. Universitas Muhammadiyah Surakarta; 2008.

4. Laporan Tahunan Badan Pengawas Obat dan Makanan Tahun 2012 dari

http://www.pom.go.id/browse/laporan_tahunan diunduh pada 6 Februari

2014.

5. Djalil A.D, Hartanti D, Rahayu W.S, Prihatin R, dan Hidayah N. Identifikasi

Zat Warna Kuning Metanil (Metanil Yellow) dengan Metode Kromatografi

Lapis Tipis (KLT) pada Berbagai Komposisi Larutan Pengembang. Jurnal

Farmasi Indonesia, 03 (2), 28-29, Fakultas Farmasi UMP, Purwokerto; 2005.

6. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor :

239/Men.Kes/Per/V/85 tentang Zat Warna Tertentu yang Dinyatakan Sebagai

Bahan Berbahaya diunduh dari

http://www.pom.go.id/pom/hukum_perundangan/pdf/SK_Dirjenpom_00386.p

df pada tanggal 6 Februari 2014.

7. Anonima. Material Safety Data Sheet Metanil Yellow MSDS, (online),

(http://datasheets.scbt.com/sc-215306.pdf, diakses 7 Desember 2013); 2007.

8. Sarkar, R. and A.R. Ghosh. Metanil yellow – An azo dye induced

hispathololgical and ultrastructural changes in albino rat (Rattus

Norvegicus). The Bioscan. 7(1) : 427-432, 2012, [www.thebioscan.in]

(diunduh 7 Desember 2013).

http://www.pom.go.id/browse/laporan_tahunanhttp://www.pom.go.id/pom/hukum_perundangan/pdf/SK_Dirjenpom_00386.pdfhttp://www.pom.go.id/pom/hukum_perundangan/pdf/SK_Dirjenpom_00386.pdf

60

9. Budiarto T. Iwan, G. Nainggolan Sihombing, Oey Kam Nio. Kelainan

Patologi pada Mencit dan Tikus Disebabkan Zat Warna Rhodamine B dan

Metanil Yellow. Buletin Penelitian Kesehatan Vol XI No. 1; 1983.

10. Nagaraja, T.N. and T. Desiraju. Effects of chronic consumption of metanil

yellow by developing and adult rats on brain regional levels of noradrenaline,

dopamine and serotonin, on acetylcholine esterase activity and on operant

conditioning. Food Chem Toxicol. 1993.

[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/809524] (diunduh 7 Desember 2013).

11. Gartner, L. Hiatt. Color Textbook of Histology 3rd Edition. 2007. Available

from : www.studentconsult.com, diakses 7 Desember 2013.

12. Price SA. and Wilson LM. Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-Proses

Penyakit. Vol.2. Ed 6. Jakarta: EGC; 2005.

13. Arief, I. Zat Berbahaya dalam Makanan; 2007 (online),

(http://www.pjnhk.go.id/index2.php?option=com_content&do_pdf=1&id=58,

diakses 24 Januari 2014).

14. Anonimb. Metanil Yellow; 2007. (online), (http://www.chemicalland21.com,

diakses 24 Januari 2014).

15. Anonimc. Bahaya Keracunan Metanil Yellow Pada Pangan; 2012. (online),

(http://ik.pom.go.id/v2012/wp-content/uploads/2011/11/Bahaya-Metanil-

Yellow-pada-Pangan3.pdf, diakses 24 Januari 2014).

16. Winarno F.G. Keamanan Pangan. Bogor: Himpunan Alumni Fakultas

Teknologi Pertanian IPB; 2005.

17. Soekarto, S.T. Dasar-dasar Pengawasan dan Standarisasi Mutu Pangan.

Bogor: Penerbit Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi Institut Pertanian

Bogor; 1990.

18. Metanil Yellow. [http://www.chemicalbook.com], (diunduh bulan Februari

2014)

19. Gupta S, Sundarrajan M, and Rao K. V. Tumor Promotion by Metanil Yellow

and Malachite Green during Rat Hepatocarcinogenesis is Associated with

http://www.studentconsult.com/http://www.chemicalland21.com/

61

Dysregulated Expression of Cell Cycle Regulatory Proteins. India:

Carcinogenesis Division, Cancer Research Institute, Tata Memorial Centre;

2003.

20. Cahyadi W. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Jakarta:

Bumi Aksara. 2006: 19-27.

21. Drake et Al. Gray’s Anatomy for Students 2nd Edition. Philadephia:

Elsenvier. 2010: 355-59.

22. Susanto Hardono, Erie B.P.S Andar, R.M Suryo Adji. Systema Urogenitale.

Semarang: Bagian Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro.

2011: 5-8.

23. Faradz Sultana MH, Soejoto, Soetedjo, Bambang Witjahjo, Neni

Susilaningsih, Ratna Damma P, dkk. Lecture Notes Histologi 2. Semarang:

Bagian Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro 2011: 66-76.

24. Guyton, A.C. and John, E. Hall. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 11.

Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC; 2007.

25. Ganong, W. F. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 22. Jakarta: EGC. 2008:

725-56.

26. Soebowo, Sarjadi, Indra Wijaya, Siti Amarwati, Ika Pawitra Miranti, Awal

Prasetyo. Patologi Anatomi. Semarang: Badan Penerbit Universitas

Diponegoro. 2008: 125-47.

27. Mitchell, R.N. and Cotran, R.S. Jejas, Adaptasi, dan Kematian Sel. Dalam:

Kumar, V, Cotran, R.S, Robbins, S.L (eds). Buku Ajar Patologi Robbins

Volume 1. Edisi VII. Jakarta: EGC.2007: 7-26.

28. Alpers, C. E. And Fogo, A. B. 2007. The kidney and is collecting system.

Kumar, V., Abbas, K., Fausto, N. and Mitchell, R.N., Robbins. Basic

Pathology. 8th ed. Philadelphia: Saunders Elsevie.

29. Underwood, J.C.E. Patologi Umum dan Sistemik. Vol.2. 2nd ed. Jakarta:

EGC; 2007.

62

30. Acute Tubular Necrosis diunduh dari

http://www.brown.edu/Courses/Digital_Path/systemic_path/renal/atn.html

pada tanggal 8 Februari 2014.

31. Macfarlane, Reid, and Callander. Pathology Illustrated 5th Edition.

Philadephia: Elsenvier.

32. Kumar, Abbas, Fausto, and Mitchell. Basic Pathology 8th Edition. Jakarta:

EGC. 2007: 595-97.

33. Sudigdo S, Sofyan I. Dasar-Dasar Metodologi Penelitian Klinis, Edisi 2.

Jakarta: Sagung Seto; 2002.

34. Dahlan M. Sopiyudin. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta :

Salemba Medika; 2011.

35. Khanna S K, Srivastava L P, and Singht G B. Toxicity studies on metanil

yellow in rats. India: Industrial Toxicology Research Center; 1978.

36. Laurance, B., Keith, P., Donald, B., and Iain, B. Goodman and Gildman’s

Manual of Farmacology and Therapeutics. Boston: McGraw-Hill; 2008.

http://www.brown.edu/Courses/Digital_Path/systemic_path/renal/atn.html

63

LAMPIRAN

Lampiran 1. Cara Perhitungan Dosis

Tabel 15. Tabel Konversi Perhitungan Dosis Untuk Berbagai Hewan Uji36

Mencit

20 gr

Tikus

20 gr

Marmut

400 gr

Kelinci

1,5 kg

Kucing

2 kg

Kera

4 kg

Anjing

12 kg

Manusia

70 kg

Mencit

20 gr

1,0 7,0 13,25 27,8 29,7 64,1 124,2 387,9

Tikus

200 gr

0,14 1,0 1,74 3,9 4,2 9,2 17,8 56,0

Marmut

400 gr

0,08 0,57 1,0 2,25 2,4 5,2 10,2 31,5

Kelinci

1,5 kg

0,04 0,25 0,44 1,0 1,08 2,4 4,5 14,2

Kucing

1,5 kg

0,03 0,23 0,41 0,92 1,0 2,2 4,1 13,0

Kera

4 kg

0,016 0,12 0,19 0,42 0,45 1,0 1,9 6,1

Anjing

12 kg

0,008 0,06 0,10 0,22 0,24 0,52 1,0 3,1

Manusia

70 kg

0,0026 0,018 0,031 0,07 0,076 0,16 0,32 1,0

Dosis sub letal metanil yellow yang dapat menimbulkan efek pada ginjal tikus adalah

3000 mg/kgBB8

=200

1000 𝑥 3000 𝑚𝑔

=600 𝑚𝑔

200 𝑔𝑟𝑎𝑚 𝑡𝑖𝑘𝑢𝑠

64

Perhitungan:

Dosis metanil yellow untuk tikus dengan berat 200 gram adalah:

Faktor konversi dosis tikus 200 gram ke mencit 20 gram = 0,14

Maka dosis metanil yellow untuk mencit dengan berat 20 gram adalah:

= 600 mg 𝑥 0,14

=84 𝑚𝑔

20 𝑔𝑟𝑎𝑚 𝑚𝑒𝑛𝑐𝑖𝑡

= 4200 mg/kgBB

a) Perlakuan pertama = 1 x dosis sub letal = 1 x 4200 = 4200 mg/kgBB/hari

b) Perlakuan kedua = ½ x dosis sub letal = ½ x 4200 = 2100 mg/kgBB/hari

c) Perlakuan ketiga = ¼ x dosis sub letal = ¼ x 4200 = 1050 mg/kgBB/hari

d) Perlakuan kontrol = 0 x dosis sub letal = 0 x 4200 = 0 mg/kgBB/hari

65

Lampiran 2. Metode Baku Histologis Pemeriksaan Jaringan

A. Cara pengambilan jaringan dan fiksasi

1) Mengambil jaringan sesegera mungkin setelah mencit Balb/c

diterminasi dengan cara dislokasi leher (kurang dari 2 jam) dengan

ukuran 1 cm3.

2) Kemudian memasukkan ke dalam larutan fiksasi dengan urutan

sebagai berikut :

a) Fiksasi dalam larutan formalin 10%.

b) Dehidrasi dengan alkohol 30% selama 20 menit I, 20 menit II, dan

20 menit III.

Lalu lanjutkan dengan alkohol 40% 1 jam

alkohol 50% 1 jam

alkohol 60% 1 jam

alkohol 70% 1 jam

alkohol 80% 1 jam

alkohol 90% 1 jam (alkohol 70%-80% dapat ditunda

sampai keesekan harinya).

c) Larutan xylol alkohol 1 : 1 dengan waktu kurang lebih 24 jam.

d) Clearing dengan larutan xylol 1, 2, 3 dengan waktu masing-

masing 20 menit, sehingga jaringan terlihat tembus pandang.

66

e) Xylol parafin 1 : 1 selama 20 menit/24 jam dengan dipanaskan

dalam oven 600C.

f) Embeding dan bloking: parafin 1, 2, 3 selama 20 menit, lalu

jaringan dicetak blok paraffin kemudian didinginkan, sehingga

cetakan dapat dibuka.

g) Trimming: memotong balok-balok paraffin sehingga jaringan

mudah dipotong dengan mikrotom.

B. Cara pemotongan blok (sectioning)

1) Menyiapkan kaca objek bersih.

2) Kaca objek diberi albumin ditengahnya dan direkatkan.

3) Blok yang sudah disiapkan dipotong dengan ketebalan 5 mikron, lalu

dimasukkan dalam air panas kurang lebih 600C. Setelah jaringan

mengembang, jaringan diambil dengan kaca objek yang sudah diberi

albumin.

4) Kemudian dikeringkan.

5) Parafin yang ada pada kaca objek atau jaringan dihilangkan dengan

dipanaskan dalam oven 600C atau dengan tungku.

C. Pewarnaan HE

Slide jaringan dimasukkan dalam :

1) Xylol 1, 2, 3 masing-masing 10 menit.

2) Rehidrasi dengan alkohol xylol selama 5 menit.

3) Bilas alkohol 30-96% masing-masing kurang lebih 30 menit.

67

4) Bilas aquades 1x kurang lebih 10 menit.

5) Rendam dalam hematosiklin kurang lebih 10 menit.

6) Bilas dengan air mengalir sampai bersih.

7) Bilas aquades, lalu acid alcohol (alkohol+NaCl 0,9%).

8) Bilas alkohol 50-96%.

9) Eosin kurang lebih 2-5%.

10) Bilas alkohol 96% sebanyak 2x.

11) Bilas alkohol xylol.

12) Keringkan dengan kertas saring, langsung dibersihkan kotoran-kotoran

yang ada disekitar jaringan.

13) Xylol 1 (5 menit), xylol 2 (5 menit) tetesi asam canada, langsung

ditutup kaca penutup.

14) Preparat sudah siap untuk diamati di atas mikroskop.

68

Lampiran 3 : Hasil Gambaran Histopatologi Ginjal

Kelompok Kontrol Kelompok Perlakuan P1

Kelompok Perlakuan P2 Kelompok Perlakuan P3

Keterangan :

Sel Normal

Sel Degenerasi ditandai dengan pembengkakan sel

Sel Nekrosis ditandai dengan inti yang menghilang

69

Lampiran 4 : Diagram Batang Indeks Degenerasi dan Nekrosis

Keterangan:

Kontrol : Kelompok yang hanya diberikan pakan dan minum standar tanpa

pemberian metanil yellow

Perlakuan 1 : Kelompok dengan pemberian metanil yellow dosis 84 mg/KgBB/hari

selama 30 hari


selama 30 hari


selama 30 hari

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

Degenerasi

Kontrol

Perlakuan 1

Perlakuan 2

Perlakuan 3

0

0.5

1

1.5

2

2.5

Nekrosis

Kontrol

Perlakuan 1

Perlakuan 2

Perlakuan 3

70

Lampiran 5 : Hasil Analisis SPSS

Degenerasi

Case Summaries

Degenerasi

5 1,000 ,0000 1,000 1,0 1,0

5 2,520 ,6099 2,400 1,8 3,4

5 2,920 ,4817 2,800 2,4 3,6

5 3,680 ,2280 3,600 3,4 4,0

20 2,530 1,0687 2,700 1,0 4,0

Kelompok

K

P1

P2

P3

Total

N Mean Std. Deviation Median Minimum Maximum

Tests of Normalityb

,178 5 ,200* ,981 5 ,940

,198 5 ,200* ,957 5 ,787

,237 5 ,200* ,961 5 ,814

Kelompok

P1

P2

P3

Degenerasi

Stat ist ic df Sig. Stat ist ic df Sig.

Kolmogorov -Smirnova

Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true signif icance.*.

Lillief ors Signif icance Correctiona.

Degenerasi is constant when Kelompok = K. It has been omit ted.b.

Test of Homogeneity of Variancea

2,023 2 12 ,175

1,182 2 12 ,340

1,182 2 9,161 ,349

1,954 2 12 ,184

Based on Mean

Based on Median

Based on Median and

with adjusted df

Based on t rimmed mean

Degenerasi

Levene

Stat ist ic df 1 df 2 Sig.

Degenerasi is constant when Kelompok = K. It has been omitted.a.

71

Box Plot

Oneway Anova

Post Hoc Tests

ANOVA

Degenerasi

19,078 3 6,359 38,776 ,000

2,624 16 ,164

21,702 19

Between Groups

Within Groups

Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Multiple Comparisons

Dependent Variable: Degenerasi

Bonf erroni

-1,5200* ,2561 ,000 -2,291 -,749

-1,9200* ,2561 ,000 -2,691 -1,149

-2,6800* ,2561 ,000 -3,451 -1,909

1,5200* ,2561 ,000 ,749 2,291

-,4000 ,2561 ,827 -1,171 ,371

-1,1600* ,2561 ,002 -1,931 -,389

1,9200* ,2561 ,000 1,149 2,691

,4000 ,2561 ,827 -,371 1,171

-,7600 ,2561 ,054 -1,531 ,011

2,6800* ,2561 ,000 1,909 3,451

1,1600* ,2561 ,002 ,389 1,931

,7600 ,2561 ,054 -,011 1,531

(J) Kelompok

P1

P2

P3

K

P2

P3

K

P1

P3

K

P1

P2

(I) Kelompok

K

P1

P2

P3

Mean

Dif f erence

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

95% Conf idence Interv al

The mean dif f erence is signif icant at the .05 lev el.*.

72

Nekrosis

Case Summaries

Nekrosis

5 1,000 ,0000 1,000 1,0 1,0

5 2,400 ,5831 2,400 1,6 3,2

5 2,040 ,5550 2,200 1,2 2,6

5 1,280 ,2683 1,400 1,0 1,6

20 1,680 ,6971 1,500 1,0 3,2

Kelompok

K

P1

P2

P3

Total

N Mean Std. Deviation Median Minimum Maximum

Tests of Normalityb

,166 5 ,200* ,989 5 ,977

,213 5 ,200* ,939 5 ,656

,273 5 ,200* ,852 5 ,201

Kelompok

P1

P2

P3

Nekrosis

Stat ist ic df Sig. Stat ist ic df Sig.

Kolmogorov -Smirnova

Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true signif icance.*.

Lillief ors Signif icance Correctiona.

Nekrosis is constant when Kelompok = K. I t has been omitted.b.

Test of Homogeneity of Variancea

,840 2 12 ,456

,625 2 12 ,552

,625 2 10,039 ,555

,807 2 12 ,469

Based on Mean

Based on Median

Based on Median and

with adjusted df

Based on t rimmed mean

Nekrosis

Levene

Stat ist ic df 1 df 2 Sig.

Nekrosis is constant when Kelompok = K. It has been omitted.a.

73

Box Plot

Oneway Anova

Post Hoc Tests

ANOVA

Nekrosis

6,352 3 2,117 11,763 ,000

2,880 16 ,180

9,232 19

Between Groups

Within Groups

Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Multiple Comparisons

Dependent Variable: Nekrosis

Bonf erroni

-1,4000* ,2683 ,001 -2,207 -,593

-1,0400* ,2683 ,008 -1,847 -,233

-,2800 ,2683 1,000 -1,087 ,527

1,4000* ,2683 ,001 ,593 2,207

,3600 ,2683 1,000 -,447 1,167

1,1200* ,2683 ,004 ,313 1,927

1,0400* ,2683 ,008 ,233 1,847

-,3600 ,2683 1,000 -1,167 ,447

,7600 ,2683 ,072 -,047 1,567

,2800 ,2683 1,000 -,527 1,087

-1,1200* ,2683 ,004 -1,927 -,313

-,7600 ,2683 ,072 -1,567 ,047

(J) Kelompok

P1

P2

P3

K

P2

P3

K

P1

P3

K

P1

P2

(I) Kelompok

K

P1

P2

P3

Mean

Dif f erence

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

95% Conf idence Interv al

The mean dif f erence is signif icant at the .05 lev el.*.

74

Lampiran 6 : Ethical Clearance

75

Lampiran 7 : Surat Keterangan Melakukan Penelitian

76

Lampiran 8 : Dokumentasi Penelitian

Pemeliharaan Penyondean

Terminasi Pembedahan

Pengambilan Ginjal Organ Ginjal Mencit Balb/c

77

Lampiran 9 : Biodata Mahasiswa

Identitas

Nama : Anthony Susilo

NIM : 22010110120121

Tempat/tanggal lahir : Jakarta, 13 September 1992

Jenis kelamin : Laki-Laki

Alamat : Jalan Sawo Raya No. 7, Rawamangun, Jakarta Timur

Nomor HP : 08979449294

Email : [email protected]

Riwayat Pendidikan Formal

1. SD : SD Tarakanita 5 Lulus tahun : 2004

2. SMP : SMP Tarakania 4 Lulus tahun : 2007

3. SMA : SMA Kolese Kanisius Lulus tahun : 2010

4. S1 : Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Masuk tahun: 2010

daftar pustakaditerminasi dengan cara dislokasi leher (kurang dari 2 jam) dengan ukuran 1 cm3. 2)...

Documents