Cromatografa de reparto o de particin

La cromatografa de reparto consiste en la separacin de los componentes de una mezcla sobre una fase estacionaria constituida por un soporte slido inerte cubierto por una pelcula lquida que es fuertemente retenida por dicha fase. La separacin se efecta por medio de una fase fluida mvil que es el solvente de desarrollo que es inmiscible con el lquido del soporte estacionario y que transporta los componentes a lo largo de la F. E.

Los componentes se van separando segn sean sus solubilidades relativas en el lquido de la fase estacionaria y la fase mvil.Se define entonces el coeficiente de reparto o constante de distribucin como el cuociente de la concentracin del soluto en la fase mvil y su concentracin en la fase estacionaria: Kd = CM / CE

Aquellas sustancias que presentan un alto valor de Kd son movilizadas ms rpidamente que aquellas que tienen un bajo valor de Kd.

As en la cromatografa de reparto los solutos se van separando secuencialmente, de acuerdo con sus respectivos valores de Kd.

Fases estacionarias Como ya se ha sealado, la fase estacionaria est constituida por un soporte slido y un lquido fuertemente retenido que lo recubre superficialmente.

Este lquido habitualmente es agua, pero tambin puede ser de naturaleza orgnica, cuando el solvente es polar.

Diversas sustancias pueden ser utilizadas como fases slidas segn cmo retengan el agua ( lquido polar).Fases slidas que retienen el agua por adsorcin: slica gel desactivada y tierra de diatomeas tambin desactivada con agua.Fases slidas que retienen el agua por formacin de puentes de hidrgeno: papel cromatogrfico y celulosa en polvo.

Solventes de desarrollo o fase mvil En la cromatografa de reparto, la capacidad transportadora de un solvente puede evaluarse a travs de su capacidad para formar puentes de hidrgeno con el agua del soporte estacionario. As se habla de eluyentes hidrfilos e hidrfobos.

Eluyentes mas usuales ordenadosde acuerdo a su carcter hidroflico decreciente Formalina metanol cido actico etanol isopropanol acetona n propanol terbutanol n butanol alcohol n amlico acetato de etilo ter etlico acetato de n butilo cloroformo benceno tolueno- ciclohexano ter de petrleo.

Para el desarrollo del cromatograma debe elegirse el solvente menos hidrfilo posible que permita el desplazamiento.

Se deduce que los analitos (solutos) tardan ms tiempo en eluirse si se usa una fase mvil poco polar.

Es decir, cuanto ms polar sea el analito, ms tardar en eluir.

La cromatografa de reparto se divide en fase normal, y fase reversa, cuyas principales diferencias radican en las distintas polaridades de sus fases estacionarias y mviles.

Cromatografa en fase normal En este caso la fase estacionaria es polar y la mvil apolar. La retencin tiene lugar en esa especie de capa lquida depositada en la fase estacionaria (polar) y la fase mvil (apolar). Donde el analito menos polar ser el primero que se eluye y el ms polar el ltimo en eluir.

Cromatografa en fase reversa En la cromatografa de fase reversa su fase estacionaria en apolar, y la fase mvil polar.

La retencin se produce en esta especie de capa lquida depositada qumicamente como consecuencia de la distinta solubilidad relativa entre la fase estacionaria (apolar) y la fase mvil (polar).

Los compuestos ms retenidos son los ms apolares. La retencin y selectividad se controlan fundamentalmente con la composicin de la fase mvil. Para obtener una fase mvil de fuerza de elucin ptima, se ensayan mezclas de metanol, acetonitrilo o tetrahidrofurano en agua.

Actualmente, el 75% de los anlisis con HPLC (cromatografa lquida de alta resolucin) se realizan en fase reversa.

Permite un anlisis directo de muestras acuosas y de compuestos solubles en agua o en disolventes relativamente polares (metanol) y con peso molecular no superior a 2000 o 3000 uma.

Aplicaciones de la Cromatografa de Reparto en productos alimenticiosedulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas,aditivos en bebidas refrescantes, colorantes, aminocidos, protenas,carbohidratos, lpidos

CUESTIONARIOCompleta la siguiente tabla comparativa con los parmetros que se indican a continuacin:

2. De qu depende la separacin en la cromatografa de adsorcin?Enumera los requisitos de un adsorbente.Cmo se clasifican los adsorbentes de acuerdo a su capacidad de retencin de los solutos?Cmo se clasifican las fases estacionarias en la cr. de reparto de acuerdo a su capacidad de retencin de los solutos?En qu consiste la activacin de los adsorbentes y qu intencin tiene su activacin?

7. En la cr. de adsorcin qu es el factor de retencin y cul es su utilidad?8. En la cr. de reparto qu es el coeficiente de reparto y cul es su utilidad?Al realizar una cromatografa qu datos no pueden omitirse?Utilidades o aplicaciones de cada tipo de cromatografa, de adsorcin y de reparto.Diferencias entre cromatografa de reparto de fase normal y de fase reversa.Ordena los siguientes eluyentes en forma creciente de polaridad: Benceno ter de petrleo - etanol ter etlico acetona.