comprovação científica asmazol

AVALIAÇÃO TOXICOLÓGICA E FARMACOLÓGICA DO EXTRATO SECO PADRONIZADO OBTIDOS DAS FOLHAS

DA Dicksonia sellowiana

Prof. Adair Roberto Soares SantosBioceutica, 2008

Carl Nathan: Nature 420, 846-852(2002)

Gökhan S. Hotamisligil: Nature 444, 860-867(2006)

Toren Finkel and Nikki J. Holbrook: Nature 408, 239-247(2000)

Carl Nathan: Nature 420, 846-852(2002)

ASMA

A asma é uma doença grave que afeta pessoas de todas as idades, culturas e localizações geográficas. Embora cada pessoa possa apresentar sintomas, diferentes, a definição de asma é muito específica.

A asma é um distúrbio inflamatório crônico dos pulmões, caracterizada por chiado, falta de ar, opressão torácica e tosse, a qual estima-se afetar mais de 100 milhões de pessoas em todo o mundo.

Família: DicksoniaceaeEspécie: Dicksonia sellowianaNomes populares: xaxim ; samambaiaçúDefinição: em 1844 pelo cientista botânico Presl

Hook

Considerado verdadeiro fóssil vivo das florestas pré-históricas.

Objetivo Geral

Analisar a ação do extrato seco padronizado de Dicksonia sellowiana no controle da

nocicepção e inflamação através de estudos farmacológicos “in vivo”, utilizando diferentes protocolos experimentais em camundongos.

Analisar os eventuais efeitos toxicológicos do extrato seco padronizado em camundongos.

•Animais

Camundongos Swiss (25-40 g) machos e/ou fêmeas mantidos em ciclo

claro/escuro de 12 h, com ração e água ad libitum.

Os procedimentos realizados foram conduzidos de acordo com as normas éticas para o estudo de dor com

animais de laboratório (Zimmermann, 1983).

Materiais e Métodos

RESULTADOS DE TOXICIDADE

AGUDA

Efeito do tratamento agudo com o extrato seco padronizado da Dicksonia

sellowiana, administrado pela via oral, sobre o percentual de mortalidade em

camundongos.

Efeito do tratamento agudo dos camundongos machos (A) ou fêmeas (B) com o extrato seco padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana (○ – 100 mg/kg; ▲- 500

mg/kg; ∆ - 1000 mg/kg; ■ - 5000 mg/kg) ou com o veículo (● – salina, 10 ml/kg) sobre a massa corporal

dos animais

1 3 6 9 12 15

0

10

20

30

40 A

Período após tratamento (Dias)

Pes

o C

orp

ora

l (g

)

1 3 6 9 12 15

0

10

20

30

40B

Período após tratamento (Dias)

Pes

o C

orp

ora

l (g

)

Efeito do tratamento agudo dos camundongos machos (A) ou fêmeas (B) com o extrato seco

padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana ou com o veículo sobre o peso do coração dos

animais

C 100 500 1000 50000

60

120

180A

Dicksonia sellowiana (mg/kg, v.o.)

Pes

o d

o C

ora

ção

(m

g)

C 100 500 1000 50000

50

100

150B


Pes

o d

o C

ora

ção

(m

g)


padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana ou com o veículo sobre o peso do pulmão dos

animais

C 100 500 1000 50000

50

100

150

200A


Pes

o d

o P

ulm

ão (

mg

)

C 100 500 1000 50000

50

100

150

200B


Pes

o d

o P

ulm

ão (

mg

)


padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana ou com o veículo sobre o peso do fígado dos

animais

C 100 500 1000 50000

400

800

1200

1600

A


Pes

o d

o F

igad

o (

mg

)

C 100 500 1000 50000

400

800

1200

B


Pes

o d

o F

igad

o (

mg

)


padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana ou com o veículo sobre o peso do rim dos

animais

C 100 500 1000 50000

40

80

120

160

200

240A


Pes

o d

o R

im (

mg

)

C 100 500 1000 50000

40

80

120

160

200B


Pes

o d

o R

im (

mg

)


padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana ou com o veículo sobre o peso do baço dos

animais

C 100 500 1000 50000

40

80

120

160A


Pes

o d

o B

aço

(m

g)

C 100 500 1000 50000

40

80

120

160B


Pes

o d

o B

aço

(m

g)

- O extrato seco padronizado obtido das folhas da Dicksonia sellowiana administrado agudamente por via oral para camundongos, tanto machos quanto fêmeas até a dose de 5.000 mg/kg, apresentou boa tolerabilidade e baixa toxicidade quando avaliado sobre diversos parâmetros comportamentais. Além disso, não foi observado morte nos animais até a maior dose utilizada (5.000 mg/kg).

Conclusão - I

- O extrato causou pequenas alterações comportamentais tais como diminuição da sensibilidade ao aperto de cauda, principalmente em doses mais elevadas. No entanto, estas alterações foram observadas somente nas primeiras 4 h após a administração do produto.

- O extrato não produziu nenhum sinal de toxicidade aguda, durante os 15 dias de observação, além de não alterar de forma significativa o peso de vários órgãos vitais tais como: coração, pulmão, fígado, baço e rim.

Conclusão - II

- Conclui-se, portanto que o extrato seco padronizado obtido das folhas da Dicksonia sellowiana quando administrado agudamente pela via oral para camundongos de ambos os sexos demonstrou boa tolerabilidade e ausência de efeitos tóxicos agudos importantes, justificando assim a continuação dos estudos toxicológicos crônicos

RESULTADOS DE TOXICIDADE

CRÔNICA

Efeito do tratamento crônico, durante 90 dias consecutivos, com o extrato seco padronizado de Dicksonia sellowiana,

administrado pela via oral, sobre o percentual de mortalidade em

camundongos. Extrato padronizado de Dicksonia sellowiana (mg/kg, v.o.)

Sexo N Morte (%)

0 Macho 10 20

Fêmea 10 10

300 Macho 10 20

Fêmea 10 10

600 Macho 10 20

Fêmea 10 10

1000 Macho 10 40

Fêmea 10 40

2000 Macho 10 65

Fêmea 10 60

A dose letal 50 (DL50) calculada para o extrato da Dicksonia sellowiana foi de 1609,0 e 1461,0 mg/kg para os camundongos fêmeas e machos, respectivamente.

Efeito do tratamento crônico, durante 90 dias consecutivos com o extrato padronizado de Dicksonia sellowiana, administrado pela via oral, sobre a variação de ingesta média de comida e bebida

dos camundongos ao final de tratamento. Grupo(mg/kg,

v.o.)

Sexo Ração (g) H20 (mL)

0 Macho 6,05 ± 0,19 5,76 ± 0,15

300 Macho 4,61 ± 0,15 ***

3,88 ± 0,13 ***

600 Macho 5,04 ± 0,25 **

4,42 ± 0,17 ***

1000 Macho 5,38 ± 0,18 * 4,42 ± 0,19 ***

2000 Macho 5,04 ± 0,24 **

4,45 ± 0,23 ***

0 Fêmea 4,77 ± 0,21 3,92 ± 0,27

300 Fêmea 4,00 ± 0,14 * 3,35 ± 0,16

600 Fêmea 4,14 ± 0,23 * 3,69 ± 0,25

1000 Fêmea 5,47 ± 0,21 * 4,45 ± 0,24

2000 Fêmea 3,78 ± 0,28** 2,94 ± 0,28*

- Os valores representam a média da variação da ingesta sólida (g/animal/dia) e liquida (ml/animal/dia) de 4 - 10 animais o erro padrão da média.- Difere significativamente do grupo controle (veículo, 0), * p<0,05; ** p<0,01 e *** p<0,001.

Efeito do tratamento crônico, durante 90 dias consecutivos, com o extrato padronizado de Dicksonia sellowiana, administrado pela

via oral, sobre a massa do baço, rim, coração, pulmão e fígado dos camundongos.

Grupo (mg/ kg,

v.o.)

Sexo Baço (%) Rim (%) Coração (%) Pulmão (%) Fígado (%)

0 Macho 0,30 (0,26 – 0,33)

0,64 (0,61 – 0,68)

0,55 (0,52 – 0,58)

0,58 (0,48 – 0,68)

3,88 (3,32 – 4,44)

300 Macho 0,30 (0,27 – 0,32)

0,59 (0,54 – 0,63)

0,43*** (0,39 – 0,46)

0,51 (0,45 – 0,56)

4,35 (4,10 – 4,60)

500 Macho 0,29 (0,27 – 0,31)

0,59 (0,55 – 0,63)

0,44*** (0,40 – 0,48)

0,51 (0,43 – 0,59)

3,86 (3,60 – 4,12)

1000 Macho 0,26 (0,24 – 0,29)

0,60 (0,56 – 0,64)

0,44*** (0,41 – 0,47)

0,50 (0,47 – 0,53)

4,35 (3,88 – 4,82)

2000 0,37** (0,32 – 0,41)

0,68 (0,59 – 0,77)

0,47 * (0,41 – 0,54)

0,55 (0,50 – 0,59)

4,56 (4,25 – 4,87)

0 Fêmea 0,38 (0,34 – 0,42)

0,46 (0,43 – 0,49)

0,39 (0,36 – 0,42)

0,52 (0,47 – 0,57)

3,84 (3,68 – 4,01)

300 Fêmea 0,35 (0,32 – 0,38)

0,48 (0,46 – 0,50)

0,42 (0,40 – 0,45)

0,58 (0,53 – 0,62)

3,91 (3,74 – 4,08)

500 Fêmea 0,40 (0,36 – 0,43)

0,47 (0,45 – 0,49)

0,39 (0,37 – 0,41)

0,56 (0,51 – 0,62)

3,84 (3,60 – 4,08)

1000 Fêmea 0,38 (0,34 – 0,42)

0,42 (0,39 – 0,45)

0,38 (0,34 – 0,43)

0,48 (0,44 – 0,51)

3,93 (3,50 – 4,35)

2000 Fêmea 0,30* (0,25 – 0,34)

0,47 (0,43 – 0,51)

0,39 (0,33 – 0,45)

0,58 (0,54 – 0,63)

4,24 (3,92 – 4,56)

Os valores representam a média de peso dos órgãos de 4 - 10 animais juntamente com o intervalo de confiança de 95%.Os valores foram obtidos através da relação (em percentagem) do peso dos órgãos pela massa corpórea dos animais (através da seguinte formula: peso do órgão/peso do animal x 100)

- O extrato seco padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana administrado por via oral para camundongos durante 90 dias, tanto em machos quanto em fêmeas nas doses de 300, 600, 1000 e 2000 mg/kg, apresentou de maneira geral boa tolerabilidade e relativa toxicidade quando avaliado sobre diversos parâmetros bioquímicos, hematológicos e histopatológicos.

Conclusão - III

- O extrato seco padronizado de Dicksonia sellowiana administrado por via oral para camundongos durante 90 dias provocou a letalidade de 65 e 60% dos camundongos machos e fêmeas na dose de 2000 mg/kg, respectivamente. As DL50s calculadas foram 1609,0 e 1461,0 mg/kg para os camundongos fêmeas e machos, respectivamente

- Foram observadas alterações importantes no consumo de ração e água nos camundongos machos e redução da ingesta de ração nos camundongos fêmeas em todas as doses analisadas e de água somente na dose de 2000 mg/kg nos camundongos fêmeas, contudo ocorreu redução do peso corporal nos camundongos machos e fêmeas somente na dose de 2000 mg/kg.

Conclusão - IV

- O extrato causou em camundongos machos aumento significativo dos níveis plasmáticos de glicose em todas as doses analisadas e de colesterol e triglicérides nas maiores doses utilizadas, enquanto que nas fêmeas ocorreu apenas aumento de albumina, globulina, glicose e colesterol nas doses de 600, 1000 e 2000 mg/kg.

- Em conjunto, as análises bioquímicas, hematológicas, e anatomo-patológicas (macroscópica e microscópica) realizadas nos animais tratados com salina (controle) ou com as diversas doses do extrato seco padronizado de Dicksonia sellowiana (300, 600, 1000 e 2000 mg/kg) por via oral durante 90 dias, detectaram alterações pontuais em alguns desses parâmetros, demonstrando que o extrato seco padronizado das folhas da Dicksonia sellowiana quando administrado cronicamente para camundongos de ambos os sexos demonstrou média tolerabilidade e razoáveis sinais toxicicidade, principalmente em relação à letalidade.

Conclusão - V

RESULTADOS DE DOR

NOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICONOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICONOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICONOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICO

• Modelo de nocicepção simples, rápido e de observação inequívoca;

• Substâncias que atuam tanto no SNC quanto SNP;

• Liberação de mediadores endógenos da dor (bradicinina, serotonina, histamina, citocinas (IL-1, TNF, entre outras), PG’s...);




• Injeção i.p. de ácido acético (0,6%, 10 ml/kg);

• Contração da musculatura abdominal e extensão de uma das patas posteriores (COLLIER

et al., 1968; BENTLEY et al., 1981).

• Quantificado cumulativamente (0 a 20 min), considerado como índice de nocicepção.





Características:Características:Características:Características:

Método:Método:Método:Método:Azul de Evans (2,5%, 100l, intra-orbital)

C 30 100 300 10000

10

20

30

40

50

***

***

**

DI50: 187,7 (172,3 - 204,6)

Inibição: 74 7

D. sellowiana (mg/kg, v.o.)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

S C 30 100 300 10000

5

10

15

20

25

*

**

DI50: 64,1 (34,5 - 119,0)

Inibição: 93 6


Azu

l d

e E

van

s (

g/m

l)

0 0,5 1 2 4 6

0

10

20

30

40

50

60

70

ControleD. sellowiana (300 mg/kg,v.o.)

***

****

2811% 436%

334%

Tempo (h)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

Efeito antinociceptivo (analgésico) da D. Efeito antinociceptivo (analgésico) da D. sellowiana na nocicepção causada pelo sellowiana na nocicepção causada pelo

ácido acético em camundongosácido acético em camundongos

V C Indo L-Noarg0

10

20

30

40

50

(100mg/Kg, i.p) (10mg/kg, i.p)

Acetic acid (0,6%, 450 l/i.p.)

******98±2%

944%

#

Nu

mb

er o

f W

rith

es

V C Indo L-Noarg0

5

10

15

20

#

***

***932%

665%

(100mg/Kg, i.p) (10mg/kg, i.p)

Acetic acid (0,6%, 450 l/i.p.)

Eva

ns

Blu

e (

g/m

l)

Efeito antinociceptivo (analgésico) da Efeito antinociceptivo (analgésico) da Indometacina e da L-NOARG na Indometacina e da L-NOARG na

nocicepção causada pelo ácido acético nocicepção causada pelo ácido acético em camundongosem camundongos

Efeito antinociceptivo (analgésico) do Efeito antinociceptivo (analgésico) do extrato e de frações obtidas da D. extrato e de frações obtidas da D.

sellowiana na nocicepção causada pelo sellowiana na nocicepção causada pelo ácido acético em camundongosácido acético em camundongos

C 30 100 3000

10

20

30

40

50

**

***

***

Fr. Alcoloídica (mg/kg, v.o.)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões DI50= 88,6 (28,3-252,8)

Inibição= 75+1%

C 30 100 300 10000

10

20

30

40

50

**

***

*

DI50= 143.5 (117.3-175.5)Inibição= 74+9%

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões


C 30 100 3000

10

20

30

40

50

**

***

*

Fr. Clorofórmica (mg/kg, v.o.)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

DI50= 92,5 (53,3-160,6)Inibição= 74+4%

C 10 30 100 3000

10

20

30

40

50

***

*** ***

DI50= 50,1 (41,9-59,8)Inibição= 77+10%

Fr. Acet. Etila (mg/kg, v.o.)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

C 10 30 100 3000

10

20

30

40

50

******

***

DI50= 50,8 (43,2-59,8)Inibição= 81+8%

Fr. Hexânica (mg/kg, v.o.)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

C 30 100 200 3000

10

20

30

40

50

***

**

Fr. Aquosa (mg/kg, v.o.)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

**

DI50= 69,8 (58,8-82,9)Inibição= 75+3%

NOCICEPÇÃO INDUZIDA PELA FORMALINANOCICEPÇÃO INDUZIDA PELA FORMALINANOCICEPÇÃO INDUZIDA PELA FORMALINANOCICEPÇÃO INDUZIDA PELA FORMALINA

• Modelo de nocicepção que mais se aproxima da dor clínica (TJOLSEN e HOLE, 1997) ;

• Apresenta 2 fases distintas de nocicepção, envolvendo diferentes mediadores químicos;

• 1ª fase (0 a 5 min, neurogênica), estimulação direta dos nociceptores (fibras C e A), associada a liberação de AAE, neuropeptídeos, HIST e 5-HT.

• Interfase (5 a 15 min, silenciosa), atuação das vias inibitórias.

• 2ª fase (15 a 30 min, inflamatória), liberação de mediadores pró-inflamatórios (BK, HIST, PG’s, 5-HT e adenosina).

• Modelo de nocicepção que mais se aproxima da dor clínica (TJOLSEN e HOLE, 1997) ;

• Apresenta 2 fases distintas de nocicepção, envolvendo diferentes mediadores químicos;

• 1ª fase (0 a 5 min, neurogênica), estimulação direta dos nociceptores (fibras C e A), associada a liberação de AAE, neuropeptídeos, HIST e 5-HT.

• Interfase (5 a 15 min, silenciosa), atuação das vias inibitórias.

• 2ª fase (15 a 30 min, inflamatória), liberação de mediadores pró-inflamatórios (BK, HIST, PG’s, 5-HT e adenosina).

• Injeção de 20 µl de formalina (2,5%), na pata posterior direita de camundongos;

• Contato do animal, lambendo ou mordendo a pata injetada com formalina;

• Quantificado cumulativamente (0-5 e 15-30 min), considerado como índice de nocicepção.

• Injeção de 20 µl de formalina (2,5%), na pata posterior direita de camundongos;

• Contato do animal, lambendo ou mordendo a pata injetada com formalina;

• Quantificado cumulativamente (0-5 e 15-30 min), considerado como índice de nocicepção.


Método:Método:Método:Método:

Efeito antinociceptivo (analgésico) da D. Efeito antinociceptivo (analgésico) da D. sellowiana na nocicepção causada pela sellowiana na nocicepção causada pela

formalina em camundongosformalina em camundongos

C 30 100 300 10000

25

50

75

100

***

****

DI50: 391,8 (209,5-732,9)

Inibição: 613%

A

Tem

po

de

Rea

ção

(s)


C 30 100 300 10000

100

200

300

400

***

**

DI50: 574.1 (422.9-779.3)

Inibição: 628%

B

Tem

po

de

Rea

ção

(s)


XXXX

XX

XXXX

XX

Comportamento de “biting” induzido por diferentes agentes flogísticos

SP 0,1 nmol/sítio

D. sellowiana(10-1000 mg/kg, v.o.)

60’

5 e 15’

IL-11 pg/sítio

TNF-0,1 pg/sítio


substância P em camundongossubstância P em camundongos

Sal C 30 100 3000

25

50

75

100

***

*


Tem

po

de

Rea

ção

(s)

DI50: 115,1 (72,2 - 183,6)

Inibição: 95 6


Interleucina 1Interleucina 1ββ em camundongos em camundongos

Sal C 30 100 3000

50

100

150

200

250

***

*


DI50: 90,0 (55,5 - 145,9)

Inibição: 78 8

Tem

po

de

Rea

ção

(s)

**


TNF-TNF-αα em camundongos em camundongos

Sal C 100 300 10000

50

100

150

200

250

**


DI50: 473,7 (347,6 - 645,7)

Inibição: 69 8

Tem

po

de

Rea

ção

(s)

*

- Esses resultados analisados em conjunto, indicam que o extrato obtidos da D. sellowiana apresenta significativo efeito antinociceptivo em camundongos.

- Além disso, os nossos dados também mostram que o extrato foi efetivo em reduzir a nocicepção induzida por diferentes agentes flogísticos (IL-1beta, TNF-alfa e SP) envolvidos na gênese da inflamação e na dor.

Conclusão - VI

RESULTADOS NAINFLAMAÇÃO

Lavagem da cavidadeLavagem da cavidade

AplicaçãoAplicação

Contagem Total de CélulasContagem Total de Células

DiferencialDiferencial

ExsudatoExsudato

Câmera de Neubauer

PLEURISIA

C CAR 3 10 30 100 3000.0

2.5

5.0

7.5

10.0

#

**

************

Dicksonia selowiana (mg/kg, v.o.)

DI50: 4,8 (3,5-6,5)Inibição: 902%

Leu

cóci

tos

tota

is (

x 10

6 )

C CAR 3 10 30 100 3000.0

2.5

5.0

7.5

10.0

#

***

*********

***


DI50: 5,0 (4,0 - 6,3)Inibição: 87 2%

Neu

tró

filo

s (x

10

6)

C CAR 3 10 30 100 3000

1

2 #

******

******


DI50: 17,9 (15,9 - 20,2)Inibição: 100%

Mo

nó

cito

s (x

10

6)

C CAR 3 10 30 100 3000

5

10

15


Azu

l d

e E

van

s (

g/m

l)

***

#

*

DI50: 69,0 (58,1 - 82,1)Inibição: 70 13%

EFEITO DA D. sellowiana NA PLEURISIA INDUZIDA PELA CARRAGENINA EM CAMUNDONGOS

Leu

cóc

ito

s (x

106)

C CAR Indo Dexa0

1

2

3

4

5###

*** ***

A

5,0 0,5 mg/kg, i.p.

Azu

l de

Eva

ns

(g

/ml)

C CAR Indo Dexa0

1

2

3

4

###

***

***

B

5,0 0,5 mg/kg, i.p.

Neu

tró

filo

s (

x10

6)

C CAR Indo Dexa0

1

2

3

4

###

*** ***

C

5,0 0,5 mg/kg, i.p.

Mo

no

nu

clea

res

(x10

6)

C CAR Indo Dexa0

1

2D

5,0 0,5 mg/kg, i.p.

EFEITO DA INDOMETACINA E DA DEXAMETASONA NA PLEURISIA INDUZIDA PELA CARRAGENINA EM CAMUNDONGOS

- Esses resultados analisados em conjunto, indicam que o extrato obtidos da D. sellowiana apresenta significativo efeito antiinflamatório em camundongos.

- Além disso, os nossos dados também mostram que o extrato foi efetivo em reduzir tanto a migração quando a extravasamento de plasmático induzida pelo agente flogístico (Carragenina) em camundongos.

Conclusão - VII

- Esses resultados parcial do presente estudo analisados em conjunto, indicam que o extrato seco padronizado obtidos da folhas da D. sellowiana apresenta significativo efeito antiinflamatório e antinociceptivo em camundongos.

- Além disso, os nossos dados também mostram que o extrato apresenta reduzidos efeitos toxicológicos tanto agudo quanto crônico, justificando a continuidade dos estudos. Fornecendo portanto subsídios científicos para a sua utilização popular, bem como na produção de um fitoterápico.

Conclusão - VIII

NOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICONOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICONOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICONOCICEPÇÃO INDUZIDA PELO ÁCIDO ACÉTICO
















Método:Método:Método:Método:Azul de Evans (2,5%, 100l, intra-orbital)

C 30 100 300 10000

10

20

30

40

50

***

***

**

DI50: 187,7 (172,3 - 204,6)

Inibição: 74 7


Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões

S C 30 100 300 10000

5

10

15

20

25

*

**

DI50: 64,1 (34,5 - 119,0)

Inibição: 93 6


Azu

l d

e E

van

s (

g/m

l)

0 0,5 1 2 4 6

0

10

20

30

40

50

60

70

ControleD. sellowiana (300 mg/kg,v.o.)

***

****

2811% 436%

334%

Tempo (h)

Nú

mer

o d

e C

on

torç

ões


ácido acético em camundongosácido acético em camundongos

Extrato hidroalcoólico Xaxim

comprovação científica asmazol

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