características gerais dos vírus
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CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
Características Gerais dos Vírus
Dra. Carmen Saramago
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
1- HISTÓRICO
1886 – Adolf Mayer ���� Doença do Mosaico do Tabaco (TMD) :
• era transmissível de uma planta doente para uma saudável;
TMD
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• era transmissível de uma planta doente para uma saudável;
• não era isolado “in vitro” pela técnicas habituais;
1892 – Dmitri Iwanowski ���� Agente do TMD era filtrável;
1935 – Wendell Stanley purificou e descreveu as propriedades químicas do Vírus do TMD (facilitou visualização ao microscópio eletrônico)
1932 – Ernest Ruska ���� Inventou o Microscópio Eletrônico;
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
2- DEFINIÇÃO ����São agentes infecciosos com características próprias
� CONSTITUIÇÃO SIMPLES:
Material genético - DNA ou RNA
Capsídeo proteico
Envelope lipídico (alguns)
Vírus Nus
Vírus Envelopados
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Vírus Envelopados
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• Passam por filtros que retêm bactérias;
� TAMANHO :
Dimensões, em geral, de 20 a 1000 nm
• Não são visualizados
ao Microscópio Ótico;
nm = nanômetro = 10-9 do metro
µm = micrômetro = 10-6 do metro
mm = milímetro = 10-3 do metro
3 µm
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CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
� CRESCIMENTO :
São Parasitos Intracelulares Obrigatórios;
• Não possuem metabolismo próprio;
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• Não são isolados “in vitro” pelas
técnicas de cultura habituais;
• Não possuem enzimas relacionadas à síntese de proteínas ou de energia;
• Só crescem dentro de célula viva;
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VIRION ���� Partícula viral completa
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ESTRUTURA DA PARTÍCULA VIRAL:
Vírus EnvelopadosVírus Nus
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� CORE : Ácido nucleico DNA ou RNA
� CAPSÍDEO : Estrutura rígida formada por
unidades protéicas (capsômeros)
Funções - Proteger o material genético
Dar forma ao vírus
Participar da ligação com a célula hospedeira
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� ENVELOPE: Estrutura membranosa formada de lipídeos e proteínas
LIPÍDEOS – originados da célula
hospedeira
da matriz – fazem a ligação
do capsídeo com o envelope
glicoproteínas – projeções
PROTEÍNAS na superfície externa
Ex: Hemaglutinina
Neuraminidase
Hemolisina
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PROJEÇÕES DO ENVELOPE VIRAL:
Envelope
Enzima Ligação a Receptores
Vírus da Gripe
Ácido Nucléico
Capsídeo
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ORIGEM DO ENVELOPE VIRAL:
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Saída da Partícula Viral da Célula Hospedeira por Brotamento
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3- MORFOLOGIA DA PATÍCULA VIRAL:
ComplexaPoliédrica Helicoidal
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Adenovírus TMD
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MORFOLOGIA DA PATÍCULA VIRAL:
Poliédrica Envelopada Helicoidal Envelopada
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Vírus Varicela-ZosterVírus da Raiva
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4- MULTIPLICAÇÃO DOS VÍRUS ���� no interior de uma célula viva
�Célula Animal (Homem e outros animais)
ESPECIFICIDADE
�Célula Bacteriana
E. coli + Fago T4
TMD
�Célula Vegetal
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INFECÇÃO VIRAL
Ciclo lítico Ciclo lisogênico
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
Ciclo lítico
Ciclo lisogênico
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
1- Reconhecimento – especificidade
2- Adsorção – estruturas de fixação do vírus
presentes no capsídeo ou envelope
ligam-se a receptores da célula alvo
3- Penetração – por pinocitose ou injeção do AN
4- Desnudamento – destruição do envoltório do AN
5- Transcrição inicial
Tradução inicial – síntese das enzimas
necessárias à replicação do AN viral.
ETAPAS DA REPLICAÇÃO VIRAL
necessárias à replicação do AN viral.
Ex: polimerases
- síntese de proteínas que paralisam o
metabolismo da célula hospedeira
6- Replicação do ácido nucléico viral
7- Transcrição posterior
Tradução posterior – síntese dos componentes
estruturais da partícula viral
8 - Maturação
9 - Liberação – por lise da célula ou por
brotamento (vírus envelopados)
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� Inoculação em ovos embrionados de galinha com 3 – 5 dias
5- ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:
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� Evidenciação do crescimento do vírus em ovo embrionado:
“Pocks”
Focos Hemorrágicos
Morte do embrião
Sorologia
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Preparo da vacina contra Febre Amarela em ovos embrionados
FioCruz - RJ
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� Inoculação em Cultura de Células
ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:
Células com grande capacidade de multiplicação
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Frasco de Cultura de Células
Microscópio Invertido Efeito Citopatogênico
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Células
de linhagem primária ���� embrionárias
Ex: Fibroblastos
de linhagem contínua ���� tumorais
Ex: HeLa
Hep 2Hep 2
Vero
Evidenciação do crescimento do vírus em cultura de células:
CPE (Efeito Citopatogênico) ���� Lise
Formação de sincício
Arredondamento
Corpúsculos de inclusão
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Cultura de Células Vero
ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:
Cultura de Fibroblastos
� Em Cultura de Células
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Poliovirus tipo 1 Herpes Simplex Virus
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:
Camundongo Recém-Nascido (Baby) Primatas
� Em animais de laboratório :
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Evidenciação do crescimento do vírus em animais:
Paralisia flácida ou espástica
Morte
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
VÍRUS DNAVÍRUS DNAVÍRUS DNAVÍRUS DNA
• POXVIRIDAE - Varíola, VacíniaMolusco contagioso
• HERPESVIRIDAE - Herpes simples 1, 2
Herpesvírus humano 3 � Varicela-zoster
6- CLASSIFICAÇÃO DOS VÍRUS: Herpes labialHerpes genital
Catapora ou Varicela
Zoster
Herpesvírus humano 3 � Varicela-zoster
Herpesvírus humano 4 � Epstein-Barr
Herpesvírus humano 5 � Citomegalovírus
Herpesvírus humano 8 � Sarcoma de Kaposi
• HEPADNAVIRIDAE - Hepatite B
• ADENOVIRIDAE - Adenovírus
• PAPILLOMAVIRIDAE - HPV
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
VÍRUS RNAVÍRUS RNAVÍRUS RNAVÍRUS RNA
•REOVIRIDAE - Rotavírus•TOGAVIRIDAE - Rubéola•FLAVIVIRIDAE - Febre amarela, dengue
Hepatite C•PARAMYXOVIRIDAE - Parainfluenza
CaxumbaSarampoRespiratório Sincicial
•ORTHOMYXOVIRIDAE - Influenza A, B, C
Rubéola Congênita �catarata,
•ORTHOMYXOVIRIDAE - Influenza A, B, C•FILOVIRIDAE - Ebola•RHABDOVIRIDAE - Raiva•BUNYAVIRIDAE - Hantavirus•RETROVIRIDAE - HTLV-1, HTLV-2, HIV•PICORNAVIRIDAE - Enterovirus
RhinovirusHepatovirus � Hepatite A
•DELTA – Hepatite Delta•NOROVIRIDAE – Calicivírus ( Hepatite E )
Vírus Norwalk
Rubéola Pós-Natal�catarata, glaucoma, surdez,cardiopatia,microcefalia, retardo mental.
Caxumba
Sarampo
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
• Vírus invade a célula
• Vírus causa alterações funcionais e estruturais
7- PATOGENICIDADE:
Lise Sincício
Inclusões
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8- IMUNIDADE:
• HUMORAL � Não desempenha papel na interrupção da infecção,mas é importante na prevenção de re-infecção
• CELULAR � Importante na interrupção da infecção.Célula infectada é reconhecida e destruída
• INTERFERON
� Células NK� Citotoxicidade mediada por células Ac dependentes:
fagócitos, células NK� Linfócitos T citotóxicos (TDC8)
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
INTERFERONSINTERFERONSINTERFERONSINTERFERONS
São glicoproteínas de baixo PM, secretadas pelas células eucariotas de animais vertebrados, em resposta a diversos estímulos, dentre eles as infecções virais.
TIPOS DE INTERFERONS
TIPO 1
αααα - produzidos por células epiteliais e leucócitos em resposta a infecções
virais, bacterianas e por protozoários
ββββ - produzidos por fibroblastos
TIPO 2
γγγγ - produzidos por linfócitos TH1 e células “ natural-killer” em resposta a
antígenos, mitógenos e ativadores de células T
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
ATIVIDADE DOS INTERFERONS
• ATIVIDADE ANTIVIRAL � principalmente α e β
Bloqueio de diversas etapas da replicação viral - estado “anti-viral”
• ATIVIDADE IMUNOMODULADORA � principalmente γ
Ativação generalizada do sistema imune
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
Estado“anti-viral”
Produção de
Duraçãode 2 – 3 dias
Produção de Moléculas Efetoras
Anti-Virais(MEAVs)
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
USO TERAPÊUTICO � INTERFERON αααα
• Atividade só em células da mesma espécie• Produzido em E. coli através de DNA recombinante• Contra-indicado para indivíduos < 12 anos e > 65 anos• Não pode ser administrado por via oral
APLICAÇÕES
•Hepatite B, C e Delta•AIDS•HPV•Herpes simples ( uso tópico )•Viroses respiratórias ( spray nasal ) – uso profilático
EFEITOS INDESEJADOS � Febre, calafrios, cefaléia, mialgia, artralgia,
náuseas, vômitos, diarréia
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
• Microscopia eletrônica – só em laboratórios de pesquisa
• Citologia � Evidenciação de CPE na amostra de tecidoEx: Sincícios - HSV, VZV
Corpúsculos de inclusão - Raiva, CMV• Isolamento e Cultivo para identificação do vírus
• Detecção de material genético viral
Ex: Hibridização in situ com sondas de DNA – CMV, HPV
9- DIAGNÓSTICO DAS VIROSES:
Ex: Hibridização in situ com sondas de DNA – CMV, HPV
Dot blot – detecção de DNA viral em solução
Southern blot – caracterização de DNA viral após clivagem por endonuclease de restrição
Northern blot - caracterização de RNA viral após clivagem por endonuclease de restrição
PCR - detecção de vírus DNA
RT-PCR - detecção de vírus RNA
• Sorologia � Detecção de anticorpos IgM contra o vírus TÉCNICAS : Imunofluorescência, Elisa, Western blot
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
• Amantadina - Inibe a penetração e desnudamento do vírus• Aciclovir (ZOVIRAX) - Inibe DNA polimerase• Penciclovir• Valaciclovir• Zidovudina (AZT, RETROVIR) - Inibe a transcriptase reversa• Didanosine (DDI) - Inibe a transcriptase reversa
10- AGENTES ANTIVIRAIS :
• Didanosine (DDI) - Inibe a transcriptase reversa• Idoxuridine (HERPESINE) - Inibe replicação de vírus DNA• Ribavirina (VIRAZOLE) - Interfere na síntese de RNAm viral• Saquinavir (INVIRASE) - Inibe a protease• Lamivudina (EPIVIR) - Inibe a transcriptase reversa• Oseltamivir - Inibe neuraminidase do vírus Influenza• Interferon α (Intron A) - Inibe síntese de proteínas virais
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TARV
INIBIDORES DA TRANSCRIPTASE REVERSA
⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOSÍDEOS : Zidovudina, Didanosina, Lamivudina, Estavudina, Abacavir
⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOTÍDEOS : Tenofovir⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOTÍDEOS : Tenofovir
⇒ NÃO-ANÁLOGOS DE NUCLEOSÍDEOS : Efavirenz, Nevirapina
INIBIDORES DA PROTEASE
Amprenavir, Indinavir, Atazanavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir,
Norvirapina
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OUTROS USOS
⇒LAMIVUDINA : Hepatite B
⇒ RIBAVIRINA : Hepatite C Viroses respiratórias (Influenza, Respiratório sincicial)
AerosolAerosol
⇒AMANTADINA, RIMANTADINA : Influenza A
⇒ACICLOVIR : Herpes simplesHerpes zoster
⇒INTERFERON αααα : Hepatite B, C, DeltaAIDS
CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS
FIM