MTODOS

DE

CALIBRACIN

Calibracin

Conjunto de operaciones para establecer, bajo

ciertas condiciones especficas, la relacin entre las

seales producidas por un instrumento analtico y

los correspondientes valores de concentracin o

masa de los patrones de calibrado.

Los patrones de calibrado son cantidades de analito conocidas,

cuya respuesta al instrumento se utiliza para comparar con la

respuesta de la muestra.

Curva de Calibracin

Grfico que representa la respuesta de un

mtodo analtico en funcin de la concentracin

o masa de los patrones.

CC

Respu

esta

Respuesta lineal

Intervalo lineal

Sensibilidad

Capacidad de un mtodo para detectar un cambio en la

concentracin del analito.

SENSIBILIDAD DE CALIBRACIN: Es la pendiente de la curva de calibracin.

dC

dRm

A mayor pendiente mayor sensibilidad.

Depende de los factores instrumentales .

SENSIBILIDAD ANALTICA: Es el cociente entre la pendiente de la curva de

calibracin y la desviacin estndar de la seal.

CRR SS

dCdR

S

mj

1

Desventaja: debe ser evaluada en

cada concentracin de inters ya que

SR vara con C.

Lmite de Deteccin

Es un nmero con unidades de concentracin o de masa que

simboliza el ms bajo nivel de concentracin o de masa que el

procedimiento puede detectar como distinto del blanco.

Se define como la concentracin de analito a la

cual su seal es igual a la seal del blanco ms

tres veces la desviacin estndar del blanco.

BBLDD Syy 3

mS

C BLDD3

CC

Respuesta

yB

yB+3SB

CLDD

BymCy

Lmite de Cuantificacin

Se define de manera anloga al LDD pero es la

concentracin de analito a partir de la cual se pueden

realizar determinaciones cuantitativas con el

procedimiento analizado.

BBLDD Syy 10

Observacin:

Nunca se puede afirmar que un analito no est presente en la muestra.

Se puede decir que no es detectado o que su concentracin est por

debajo del LDD.

Intervalo de utilidad de la

Curva de Calibracin

[CLDC,CLDL]

Concentracin del Lmite de Cuantificacin y

Concentracin del Lmite de Linealidad

CC

Respu

esta

CLDC CLDL

Mtodo de Calibracin Directa

(Estndar externo)

Se realiza una curva de calibracin y se emplea el mtodo de

regresin lineal por cuadrados mnimos

Suposiciones: Relacin lineal entre seal y concentracin

La incertidumbre en la concentracin de los patrones es desestimable

Todas las mediciones tienen la misma desviacin estndar (sin importar el valor)

Efecto Matriz: juega un rol muy importante, es el cambio que experimenta una seal analtica debido a la presencia de otras sustancias presentes en la

muestra, adems del analito. Es un efecto multiplicativo ya que altera la

pendiente de la recta.

Condicin: la matriz de los patrones debe ser parecida a la de la muestra.

Mtodo de Patrn Interno

(Estndar Interno)

Para hacer las determinaciones se compara la seal del

analito con la seal del patrn interno

Cantidad conocida de un compuesto diferente del analito,

ausente en la muestra y que se aade a sta.

UTILIDAD, cuando:

La cantidad de muestra analizada vara

La respuesta del instrumento vara

Hay prdidas inevitables de muestra

Se mide la respuesta relativa del detector a una muestra de

cantidad conocida de patrn y analito

Ca/CEI

Aa/

AEI

Mtodo de Patrn Interno

(Estndar Interno)

Se grafica la relacin entre

la respuesta del analito y el

estndar interno vs. la

relacin de las

concentraciones.

Para ser estandar interno, no debe interferir con el analito, no

debe estar previamente en la muestra, debe responder en

forma similar al analito ante la modificacin de cualquier

variable y debe tener concentraciones similares al analito

Mtodo de Agregado de Patrn o

Adicin de Estndar

Consiste en aadir cantidades conocidas de analito al problema

cuyo contenido de analito se quiere saber. Se agregan volmenes

crecientes y se diluye todo a un mismo volumen final.

Se utiliza cuando la composicin de la muestra es desconocida

y/o compleja. Toma en cuenta el efecto matriz.

Suposiciones: El agregado de la solucin patrn no modifica el efecto de la matriz, este efecto es el mismo en la solucin original y en

la diluida.

La respuesta del detector es lineal.

Todas las mediciones tienen la misma desviacin estndar (sin importar el valor)

Mtodo de Agregado de Patrn o

Adicin de Estndar

T

PP

T

MA

V

VC

V

VCkSeal

Concentracin

del analito en

la muestra

Concentracin

del analito

patrn

agregado a la

muestra

Volumen de

la muestra

original

Volumen de

la solucin

patrn

Volumen

Total

Muestra +

Patrn

Se extrapola la recta hasta

seal cero y se reemplaza en

la ecuacin.

T

PPV

VC

Respuesta

CC

Patrn

Seal de la

muestra

T

MAV

VC

Es un grfico en el que se presentan consecutivamente los

valores de las medias muestrales para un determinado

mtodo o proceso de manera de tomar una accin correctiva

lo mas rpido posible.

Control de calidad Grfico control

Grfico de Shewhart

Requiere una distribucin

normal de los resultados y una

desviacin estndar constante

Se estiman la media

poblacional () y la

desviacin estndar () de los datos muestrales

Aseguramiento de la Calidad

Mtodo de Recuperacin o FortificacinSe agrega una cantidad determinada de patrn del mismo

analito a medir en al menos una de las muestras a

determinar. Luego se calcula el porcentaje de

recuperacin como:

1.50

1.70

1.90

2.10

2.30

2.50

2.70

02/08/2013

02/08/2013

02/08/2013

27/08/2013

02/09/2013

29/10/2013

06/11/2013

13/11/2013

12/12/2013

13/12/2013

16/12/2013

20/12/2013

14/01/2014

24/01/2014

03/02/2014

25/02/2014

Fecha

Valo

r m

ed

io

M

LSA

LI

LII

LS

0.0000

0.2000

02/08/2013

02/08/2013

02/08/2013

27/08/2013

02/09/2013

29/10/2013

06/11/2013

13/11/2013

12/12/2013

13/12/2013

16/12/2013

20/12/2013

14/01/2014

24/01/2014

03/02/2014

25/02/2014

Fecha

Ra

ng

o

M

75

80

85

90

95

100

105

110

115

02/08/2013

02/08/2013

02/08/2013

27/08/2013

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29/10/2013

06/11/2013

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12/12/2013

13/12/2013

16/12/2013

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03/01/2014

14/01/2014

24/01/2014

03/02/2014

24/02/2014

25/02/2014

Fecha

Valo

r m

ed

ioM

LSA

LI

LII

LS

80 %

110 %

% Recuperacin=Valor Fortificado medido

Valor Fortificado realX 100

AOAC: Association of Official Analytical Chemists