BANCO DE TEJIDOS

Laura SarmientoYennifer RojasOmar CasadiegoBrian Villamizar

Para que un banco de tejidos?

Entidad encargada de:I. ObtenerII. Procesar III. AlmacenarIV. Distribuir

Los diferentes tejidos a las diferentes instituciones que lo requieran

Clases de donantes

Donante vivo autólogo donante vivo alogènico Donante cadavérico

Pasos

1. Identificación donante potencial y remisión al banco de tejidos Nombre, apellido, edad y sexo Causa de la muerte Factores de riesgo para algunas

enfermedades Información clínica Lugar donde se encuentra el cuerpo Plan de traslado Información de contacto Responsable del hospital o funeraria

2. Establecer conveniencia La evaluación del donante debe incluir una entrevista con la familia u otra fuente

relevante estudio detallado de la historia médica y

comportamental examen físico completo los resultados de la autopsia resultados de los análisis de laboratorio

realizados.

3. Examen físico del donante potencial Búsqueda de tatuajes o pircing Búsqueda de drogadicción parenteral Lesiones en piel Riesgo y signos de VIH (condiloma

perianal, linfadenopatía diseminada, sarcoma de kapossi, candidiasis oral, etc)

Hepatitis Enfermedad sistémica

Pruebas serológicas Determinación de anticuerpos citotóxicos Determinación del grupo sanguíneo Determinación del antígeno D (Rh) Prueba de histocompatibilidad HLA Prueba serológica para la sífilis Detección de anticuerpos contra el virus de la Hepatitis C Detección del antígeno de superficie HBsAg Detección de anticuerpos totales contra el AntiHBc Detección de anticuerpos contra el virus HTLV 1 y 2 Detección de anticuerpos contra VIH 1 y 2 Detección de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi Detección de anticuerpos contra CMV Detección de anticuerpos contra EBV

Prueba Piel Cardiaco Osteomuscular

ocular

ABO X X X X

Rh X X X X

HLA X X X XSífilis X X X X

CHV X X X X

Ag HBs X X X X

Anti HBc X X X X

HTLV 1-2 X X X X

VIH 1-2 X X X X

Chagas X X X X

CMV X X X X

Selección, obtención, tratamiento, validación, almacenamiento y envío

Criterios médicos de selección Edad del donante Controles bacteriológicos Obtención de los tejidos

Criterios de exclusión Enfermedad o seropositividad del VIH; Enfermedad sistémica con efectos se veros sobre los tejidos que se trasplantarán Enfermedad personal o familiar de Creutzfeldt-Jakob y otras enfermedades priónicas Hepatitis viral Rabia Esclerosis lateral amiotrófica Esclerosis múltiple Otras enfermedades neurodegenerativas; Sepsis de origen viral, micótico o bacteriano; Tuberculosis activa

De acuerdo con lo establecido en el artículo 10 del Decreto 2350 de 2004, otros criterios de exclusión son:

Haber recibido transfusión de sangre o trasplante de órganos o tejidos en países conNotificación de EEB Haber recibido hormona de crecimiento de origen humano Habérsele practicado cirugía cefálica

Además, se deben considerar los siguientes aspectos:

Restricciones de edad para algunos tejidos Trauma o patología crónica del tejido Tumor o neoplasia del tejido Infección del tejido o médula ósea a extraer Tiempo específico de isquemia caliente antes de la extracción Función apropiada del tejido Envenenamiento con agentes tóxicos que son nocivos para el tejido en particular

Tiempos de isquemia caliente

Periodo que transcurre entre la detención de la circulación y el comienzo de la conservación en el cuarto frío

PIEL, TEJIDO OSTEMUSCULAR, CARDIOVASCULAR:

24 horas si se refrigera a 4°C 12 horas sin refrigerar en climas cálidos 15 horas sin refrigerar en climas fríos

TEJIDO OCULAR: el párpado se debe mantener cerrado

15 horas refrigerado a 4°C 6 horas no refrigerado

Tiempos de isquemia fríos

periodo de conservación en el cuarto frío

Tiempos de vida útil

Tiempo que transcurre desde el momento de la extracción o rescate hasta el momento en el que el tejido conserva las propiedades necesarias para transplante

PIEL: 10 años TEJIDO OSEO: 5 años TEJIDO CARDIOVASCULAR: 10 años TEJIDO OCULAR: conservación

teórica14 días, óptima 7 días en frigorífico 4ºC (primeras 72 h)- 31ªC

BANCO DE PIEL

La piel es el órgano más grande y más visible del cuerpo humano y uno de los más importantes. función de barrera participación en la termorregulación del

cuerpo humano función sensorial Excreción función inmune producción de melanina y vitamina D.

OPCIONES TERAPEUTICAS

Grandes quemaduras

Ulceras de distinto origen

Oclusión de heridas como cubierta biológica transitoria.

Cierre de heridas como sustitutos de piel de largo plazo

Heridas crónicas no cicatrizadas o de cicatrización lenta

Aloinjertos de piel Donante cadavérico

• Documentación del donante • Revisión historia clínica• Identificación donante• Verificar resultados serologías• Verificar tubos para serología BST• Establecer secuencia de la extracción • Examen físico

PREPARACIÓN EXTRACCIÓN

Estado de la piel, ictericia, integridad, heridas, hematomas, traumatismos. Valoración idoneidad de los tejidos durante el procedimiento

Recogida de las muestras

Criterios de exclusión de piel Lesiones cutáneas Adicción a drogas por vía parenteral Toxicidad aguda de la piel Enfermedades cutáneas estructurales Radioterapia o quimioterapia previa. Neoplasias malignas.  Nevus de apariencia cancerosa, nevus múltiples o nevus

gigantes.  Piel difícil de extraer Infecciones tales como sepsis o bacteremia, neumonía

bacteriana, meningitis o encefalitis, sífilis, lepra, entre otras.

Criterios de selección para donantes de piel

Edad 14-75años Que no posea ninguno de los criterios

de exclusión Tiempo de isquemia caliente

Obtención del tejido

Area de trabajo

PIEL Se extraerá piel de zonas no visibles

Espalda Miembro inferior derecho Miembro inferior izquierdo

NOTA: en cada uno de éstos 3 campos se utilizará instrumental diferente y contenedores diferentes

Protocolo de extracción Identificación del donante Código de identificación del donante

Protocolo de extracción

Recogida del tejido

Documentación Nombre y dirección de la institución que

realizó la extracción Fecha, lugar, hora y persona responsable de

la extracción Nombre, edad, sexo del donante Número o código de identificación Tejido específico que se extrajo tipo de solución utilizada durante la

extracción Firma de la persona responsable

Procesamiento

Solución criopreservante

MEM (DMEM) ………………………400ml ALBÚMINA HUMANA AL 20%... .......50ml GLICEROL………… ………………….50ml

Congelamiento

Desde 4°C hasta -80 °C con un descenso de 1°C por min

almacenamiento nitrógeno en fase de vapor «cuaretena» Nitrógeno líquido

Descongelación Baño de maría

Autoinjerto donante vivo

El banco de piel autóloga tiene como finalidad la criopreservación de piel desvascularizada en lesiones tipo «degloving» de las extremidades para autotransplantar el paciente en un segundo tiempo quirúgico.

No tiene tiempo de isquemia caliente El tiempo de isquemia fria debe

efectuarse lo antes posible Se realiza una exéresis quirúrgica lo

más cuidadosa posible, limpiando bien la piel. Se lava con jabón quirúrgico sin antisépticos ni cepillado

El hospital deberá remitir a hoja de consentimiento informado para autotransplante firmada por el paciente.

Control de calidad Control microbiológico que permita identificar como mínimo lo siguiente:

Staphylococcus coagulasa positivo; Streptococcus b - hemolítico; Pseudomona sp.; Serratia sp.; Klebsiella sp.; Proteus sp.; Enterobacter sp.; Candida sp.

BANCO DE TEJIDO OSTEOMUSCULAR

Banco de Tejido Osteomuscular

Entidad encargada de:I. ObtenerII. Procesar III. AlmacenarIV. DistribuirHueso, cartílago, tendones, ligamentos, fascias, meniscos.

“Las propiedades biomecánicas de este tejido permiten su uso para reparar defectos puntuales o como grandes piezas que se utilizan para remplazo total de zonas de hueso que deben ser extraídas.”

Usos del Tejido Osteomuscular

Cirugía ortopédica y traumatología

Cirugía maxilofacial e implantología

Otorrinolaringología

Cirugía urológica

Ligamentoplastia: Sustitución

Aporte óseo en fracturas: Regeneración

Cirugía tumoral: Sustitución

Aporte óseo: Sustitución luego de extraccion

Timpanoplastia: reparación tímpano

Tratamiento de la incontinencia urinaria: Injerto de fascia para reubicar vejiga

Comportamiento Biologico

V

Tomado de Fundacion Cosme y Damian: http://www.cydbank.org/index.php

Obtención de Tejido Osteomuscular

Selección del donanteVivo : en autoinjertos, remplazo de cadera por prótesis(cabeza femoral)Cadáver: grandes trozos óseos, y osteocondrales con o sin ligamentos

˂ 45 años Cartilagos, Meniscos y osteocondrales alograficos

˂ 55 años Tendones y Fascia lata

Cabeza de fémur y otros huesosSin restricción

Edad

Obtención de Tejido Osteomuscular

Selección del DonanteExamen físico e historia clínica

a) Segmentos esqueléticos grandes para ayuda estructural, el donante debe haber tenido un bajo riesgo de osteoporosis.

b) Segmentos metafisiarios y epifisiarios se obtienen para proporcionar una ayudaestructural, se debe considerar el cerramiento de las placas epifisiarias de crecimiento deldonante.

c) Se deben excluir donantes con irradiación local, infección del tejido, intoxicación aguda(cianuro, plomo, mercurio, oro) y osteoporosis establecida.

Obtención de Tejido Osteomuscular

Extracción del tejidoo Aviso a Médico equipo de guardia o Especifica características donante y tejidos a extraero Notifica al equipo hora inicio extraccióno Acuerda horario con transporte si desplazamientoo Verificación: instrumental quirúrgico, material fungible, medios

de preservación y antibióticos necesario en antequirófano

Pruebas analíticas: establecer el tipo de muestras que se va a remitir al laboratorio y las diferentes determinaciones que se van a efectuar sobre las mismas.

Evitar el riesgo de transmisión de enfermedades

Asegurar la idoneidad del tejido

Obtención de Tejido Osteomuscular Extracción del tejido

Tomado de: Francisco Javier Iglesias Muñoz. Establecimiento de Tejidos Humanos. Fundación Clínica San Francisco. León. 20 de Mayo de 2010

Procesamiento de Tejido Osteomuscular

Disección Los injertos extraidos se mantienen, a –4ºC, bajo estrictas normas

de asepsia Resultados definitivos de cultivos y de pruebas serológicas “Visto bueno” de seguridad Fase de limpieza y corte de

los injertos

Remoción de tejidos blandosInjertos limpios y cortados

Lavados a presión con agua estéril y/o sumergir en soluciones antimicrobianas

Tomado de Fundacion Cosme y Damian: http://www.cydbank.org/index.php

Almacenamiento del Tejido OsteomuscularAlmacenamientoEl tejido debe ser modificado o preservado para reducir su inmunogenicidad al trasplantarlos. Estos procesos de modificación son:

Congelamiento

Liofilización

Irradiación

– 85ºC y –160ºC

Deshidratación máxima

Extrae el 95% del agua

Se obtiene matriz ósea inorgánica

Esterilización 2ria Tx pierde

resistencia mecanica

Almacenamiento del Tejido Osteomuscular

Almacenamiento del Tejido Osteomuscular

Criopreservantes Dimetilsulfóxido (DMSO) y Glicerol Desciende el punto de congelación Regulan la cinética de deshidratación Estabilizan la membrana plasmática Reducen la lesión mecánica

+

Deshidratación irreversible

Cristales de Hielo

Almacenamiento de Tejido Osteomuscular

Se determina: Integridad tisular y viabilidad celular Límites de tolerancia en la utilización de

sustancias crioprotectoras Protocolos de almacenamiento debidamente

validados

Fecha de caducidad

Producto Final

Aloinjertos

Anatomía Procesamiento

Esterilización

Presentación

Cortical Fresco Procesado estéril

Polvo

Esponjoso Congelado Irradiado Particulado

Diafisiario Liofilizado Oxido de etileno

Gel

Osteocondral

Desmineralizado

Pasta

Bloques o tiras

Autoinjertos

Aspirado de médula ósea o de células osteogénicas procesadas

Hueso Esponjoso

Hueso cortical no vascularizado

Hueso vascularizado

Tomado de: Francisco Javier Iglesias Muñoz. Establecimiento de Tejidos Humanos. Fundación Clínica San Francisco. León.

Distribución del Tejido Osteomuscular

Transporte: asegurar que el tejido llega al destino sin que haya sufrido perdida significativa de las propiedades que lo hacen útil para trasplante.(T°, envasado.)

Decreto 2493 Art25: “Los componentes anatómicos serán distribuidos en el territorio nacional de manera tal que se garantice la equidad en la asignación de los componentes anatómicos sin discriminación alguna, por razones de origen familiar estrato socioeconómico, sexo, raza, lengua, religión, opinión política o filosófica.”

Lista de espera (Red de donantes) Urgencia Clínica

Tejido cardiovascular

Trasplante de tejido cardiovascular

Definiciones

Válvulas cardíacas protésicas (VCP): Compuestos artificiales concebidos para reemplazar una válvula cardíaca humana, que constan de un orificio a través del cual fluye la sangre y de un mecanismo oclusor que cierra y abre el orificio.

PRÓTESIS MECÁNICAS

Modelo jaula-bola

Lowell Edwards(izquierda) y

Albert Starr (derecha)

Válvula de flujo central

Válvula bivalva de St Jude Medical. Vistas de tres planos. Angulo de apertura de 85 grados. Dos valvas semicirculares están conectados con la cubierta del orificio por un mecanismo de bisagra tipo mariposa. Las hojas pivotean durante la apertura, creando 3 áreas del flujo, 1 central y 2 periféricos.

Válvula aórtica de Carbomedics (modelo Top Hat)

VÁLVULAS BIOLÓGICAS

Nomenclatura biológica

El autoinjerto (autograft) se refiere a una translocación dentro del mismo individuo, ejemplo: de la válvula pulmonar hacia la posición de la válvula aortica.

• El tejido valvular autógeno involucra la fabricación de una válvula de tejido no valvular del propio paciente, ejemplo: el pericardio.

• El aloinjerto (allograft) se refiere al trasplante de un donante de la misma especie; ejemplo: válvula pulmonar o aortica del donante hacia la posición aórtica o pulmonar del receptor.

• El heteroinjerto (heterograft) o xenoinjerto (xenograft), es cuando la válvula es trasplantada de otras especies, ya sea válvula intacta, ej., válvula aórtica porcina, o un modelo de válvula de tejido heterógeno, ejemplo: pericardio bovino.

Válvula de autoinjerto

Ross Granville Harrison

Biólogo y anatomista estadounidense

Válvulas pericárdicas autógenas.

Válvulas de homoinjerto o aloinjerto

Válvulas porcinas de heteroinjerto.

Válvulas pericárdicas bovinas

Válvula pericardica bovina de Carpentier- Edwards

Bioprótesis sin soporte (stenless)

Proceso de obtención del tejido

EL DONANTE

Los tres tipos de donantes para tejidos cardiacos y vasculares son:

• Donantes vivos:

• Donantes multiorgánicos con diagnóstico de muerte según criterios neurológicos (muerte cerebral):

• Donantes cadáveres:

Criterios de exclusión de tejido cardiovascular:

a)Historia o evidencia de endocarditis, miocarditis, fiebre reumática y otras enfermedadesvalvulares del corazón;b)Trauma de tórax particularmente trauma penetrante (incluyendo inyección intra cardiaca);c)Enfermedad infecciosa cardiaca;d) Enfermedad cardiaca valvular;e)Cirugía cardiaca previa de la válvula.

Controles de calidad

En válvulas cardiacas:4.1 Medición del diámetro interno (en mm)4.2 Medición de la longitud (en mm)4.3 Características de las válvulas

Competencia del aparato valvular4.5 Número de cúspides (estructuras en el borde de la válvula)4.6 Presencia de fenestraciones (defectos lineales)4.7 Ateromas (placas de tejido)4.8 Calcificaciones (depósitos de color blanco)4.9

Controles microbiológicos:a) Clostridium sp;b) Streptococcus pyogenes (grupo A);c) Staphylococcus aureus;d) Enterococos sp;e) Bacilos gram negativos;f) Hongos sp.

BANCO DE OJOS

BANCO DE OJOSEl papel y la función de un banco de ojos es obtener, evaluar, almacenar, distribuir córneas de donantes adecuados y otros tejidos oculares, y los cirujanos oftálmicos que necesitan para llevar a cabo los procedimientos de acuerdo con un horario regular.

EL OJO

La córnea es un tejido avascular

altamente especializado que refracta y transmite la luz.

Es aproximadamente el 0,5-mm de espesor, de forma centralizada y 1-mm de espesor

periféricamente.

Está delimitado externamente por un epitelio escamoso no queratinizado, que

descansa sobre un estroma de tejido homogéneo relativamente pobre en agua

SELECCIÓN DE DONANTESL

La selección de donantes de córnea potenciales se realiza a través deuna evaluación general de la siguiente información.

Historial médico y social

Edad, no hay limite de edad

examen post mortem

Serología para sífilis Detección de anticuerpos contra el

virus de la hepatitis C Detección del antígeno de superficie

del virus de la hepatitis B Detección de anticuerpos contra el

virus de la inmunodeficiencia humana 1 y 2

examen serológico inspección in situ del ojo donante

causa de la muerte hora de la muerte circunstancias de la muerte la historia clínica pasada reciente actividad y comportamiento que aumenta el

riesgo de enfermedades transmisibles.

Limite de tiempo para la extracción

El parpado se debe mantener cerrado, ya que esto y la refrigeración del cadáver puede prolongar el tiempo de extracción.

La extracción se acepta hasta 15 horas después de la muerte, si se aseguran las medidas protectoras

CRITERIOS DE EXCLUSIONHistoria De Retinoblastoma

Distrofia De Cornea

Queratocono

Uveítis

Cirugía De Cornea Incluyendo cirugía Con Laser

Ulceras

Infecciones De Ojo

Desordenes Congénitos O Adquiridos Del Ojo

Tecnicas de evaluación de córneas

TECNICAS DE EVALUACION DE CORNEAS

:

Evaluación En Lámpara De Hendidura

también llamada biomicroscopio, es un dispositivo óptico que se utiliza en oftalmología para la exploración de las estructuras de la

porción anterior del ojo

Evaluación Y Recuento De Células Endoteliales En Microscopio Especular

son necesarios para mostrar la morfología celular bueno, un recuento de células mínimo de 2000 células / mm ², y una ausencia

sustancial de pleomorfismo, o distrofia.

Paquimetria

es la medida del espesor del tejido corneal o grosor de la córnea, este examen puede ser realizado con diferentes métodos, por

ejemplo con ultrasonido. El método más moderno es a través de una tomografía, tridimensional de toda la extensión de la córnea y el

espesor en todos sus puntos

DECONTAMINACION DE OJOS DE DONANTES

Los ojos se enjuagan con agua del grifo y después se sumergieron en las soluciones

estériles siguientes

0,5% polivinilpirrolidona en H20 , pH 6,0 durante 2 minutos

0,1% de tiosulfato de sodio en la solución salina tamponada con fosfato (PBS) durante 1 minuto, y PBS, donde se dejan hasta que la escisión del botón corneo escleral se realiza

Este procedimiento ha sido descrito para reducir el porcentaje de ojos contaminados del 77% al

34%.

La tarea de reducir aún más la tasa de contaminación se deja a los antibióticos añadidos a las soluciones de almacenamiento de la córnea

ALMACENAMIENTOel almacenamiento corneal a 4 º C

se lleva a cabo en presencia de agentes deturgescent que, cuando

se añade a los medios de almacenamiento mantiene el

estroma pobre en agua y preservar la transparencia de la córnea

durante unos días.

Los medios más comúnmente utilizados corneales de

almacenamiento contienen dextrano y / o sulfato de condroitina como

agentes deturgescent.

Líquidos de almacenamiento también contener antibióticos (gentamicina sola o en combinación con

stretomicina) que, junto con la baja temperatura, impedir o limitar el crecimiento bacteriano.

Soluciones disponibles en el mercado también se

complementa con una serie de aditivos (fuentes de energía,

antioxidantes, componentes de estabilización de la membrana,

factores de crecimiento), pero su contribución específica para el almacenamiento corneal nunca

se ha aclarado.

ALMACENAMIENTOEl cultivo de órganos de almacenamiento consta de dos fases

un período de almacenamiento en medio de cultivo (EMEM modificada) sin

agentes deshidratantes,

una fase más corta de-hinchazón y el transporte en el

mismo medio suplementado con dextrano.

Cultivo de órgano de medios contiene penicilina, estreptomicina y nistatina (o

anfotericina B), para contrarrestar el crecimiento de contaminantes

microbiológicos.

Un periodo de almacenamiento de 35 días se puede lograr sin una pérdida

significativa de las células endoteliales.

CAMPOS DE APLICACIONLa córnea y otros tejidos relacionados con ella pueden obtenerse de diferentes

maneras:

Córnea para queratoplastia

Penetrante (preservada en Optisol-GS® a

4ºC y preservada en cultivo a 31ºC en medio E-

MEM)

Tejido Ocular para

queratoplastia Lamelar (Globo

ocular en cámara

húmeda a 4ºC y córnea en

Optisol-GS® a 4ºC)

Tejido Ocular para trasplante

de Limbo (Globo ocular

en cámara húmeda a 4ºC y

córnea en Optisol-GS® a

4ºC)

Esclera (en etanol al 70% a

temperatura ambiente)

La cultura de la donación y el trasplante …..un reto de todos.

GRACIAS