7/24/2019 Autoanalizer

http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 1/6

Elektroforesis adalah teknik pemisahan komponen atau molekul ber muatan berdasarkan

 perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan listrik  .[1] Medan listrik dialirkan pada suatu

medium yang mengandung sampel yang akan dipisahkan. [2] Teknik ini dapat digunakan denganmemanfaatkan muatan listrik yang ada pada makromolekul, misalnya DNA yang bermuatan

negatif.[2]

 ika molekul yang bermuatan negatif dile!atkan melalui suatu medium, kemudiandialiri arus listrik dari suatu kutub ke kutub yang berla!anan muatannya maka molekul tersebut

akan bergerak dari kutub negatif ke kutub positif. [2] "e#epatan gerak molekul tersebuttergantung pada nisbah muatan terhadap massanya serta tergantung pula pada bentuk

molekulnya.[2] $ergerakan ini dapat di%elaskan dengan gaya &orent', yang terkait dengan sifat(

sifat dasar elektris bahan yang diamati dan kondisi elektris lingkungan)

* adalah gaya &orent', + adalah muatan yang diba!a oleh ob%ek, adalah medan listrik.

-e#ara umum, elektroforesis digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan memurnikanfragmen DNA. []

Jenis elektroforesis

7/24/2019 Autoanalizer

http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 2/6

$erangkat elektroforesis gel

lektroforesis kertas adalah %enis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase diam dan

 partikel bermuatan yang terlarut sebagai fase gerak, terutama ialah ion(ion kompleks. [/] $emisahan ini ter%adi akibat adanya gradasi konsentrasi sepan%ang sistem pemisahan. [/] 

$ergerakan partikel dalam kertas tergantung pada muatan atau 0alensi 'at terlarut, luas penampang, tegangan yang digunakan, konsentrasi elektrolit , kekuatan ion, p, 0iskositas, dan

adsorpsi0itas 'at terlarut. []

lektroforesis gel ialah elektroforesis yang menggunakan gel sebagai fase diam untuk

memisahkan molekul(molekul. [3] A!alnya elektoforesis gel dilakukan dengan medium gel kan%i

4sebagai fase diam5 untuk memisahkan biomolekul yang lebih besar seperti  protein(protein. [3] "emudian elektroforesis gel berkembang dengan men%adikan agarosa dan poliakrilamida sebagai

gel media. [3]

ELISA 4singkatan bahasa 6nggris) Enzyme-linked immunosorbent assay5 atau 7penetapan kadar

imunosorben taut(en'im7 merupakan u%i serologis yang umum digunakan di berbagailaboratorium imunologi. 8%i ini memiliki beberapa keunggulan seperti teknik penger%aan yang

relatif sederhana, ekonomis, dan memiliki sensiti0itas yang #ukup tinggi. &6-A diperkenalkan

 pada tahun 19:1 oleh $eter $erlmann dan 0a ng0all untuk menganalisis adanya interaksi

antigen dengan antibodi di dalam suatu sampel dengan menggunakan en'im sebagai pelapor4reporter label 5.[1]

8mumnya &6-A dibedakan men%adi dua %enis, yaitu competitive assay yang menggunakan

kon%ugat antigen;en'im atau kon%ugat antobodi;en'im, dan non-competitive assay yangmenggunakan dua antibodi. $ada &6-A non-competitive assay, antibodi kedua akan

dikon%ugasikan dengan en'im sebagai indikator. Teknik kedua ini seringkali disebut sebagai

<Sandwich< &6-A.

8%i ini dilakukan pada plate 93(well  berbahan polistirena. 8ntuk melakukan teknik <-and!i#h<&6-A ini, diperlukan beberapa tahap yang meliputi)

1.   Well  dilapisi atau ditempeli antigen.

2. -ampel 4antibodi5 yang ingin diu%i ditambahkan.

. Ditambahkan antibodi kedua yang dikon%ugasikan dengan en'im tertentu seperti

 peroksidase alkali. Antibodi kedua ini akan menempel pada antibodi sampel sebelumnya.

/. Dimasukkan substrat en'im yang dapat menimbulkan !arna tertentu saat bereaksi.

. 6ntensitas !arna #ampuran diukur dengan spektrofotometer  yang disebut ELISA reader  

hingga mendapatkan hasil berupa densitas optis 4=D5. Dengan menghitung rata(rata

kontrol negatif yang digunakan, didapatkan nilai cut-off  untuk menentukan hasil positif(

negatif suatu sampel. asil =D yang berada di ba!ah nilai cut-off  merupakan hasilnegatif, dan demikian %uga sebaliknya.

7/24/2019 Autoanalizer

http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 3/6

8%i ini memiliki beberapa kerugian, salah satu di antaranya adalah kemungkinan yang besar

ter%adinya hasil false positive karena adanya reaksi silang antara antigen yang satu dengan

antigen lain.[2] asil berupa false negative dapat ter%adi apabila u%i ini dilakukan pada window period , yaitu !aktu pembentukan antibodi terhadap suatu 0irus  baru dimulai sehingga %umlah

antibodi tersebut masih sedikit dan kemungkinan tidak dapat terdeteksi. []

$engertian Dan *ungsi Autoanaly'er 

Autoanaly'er adalah analisa otomatis menggunakan teknik aliran khusus bernama

>analisis aliran kontinu 4?*A5@, di#iptakan pada tahun 19: oleh &eonard -keggs, $hD dan

 pertama dibuat oleh ?orporation Te#hni#on. Aplikasi pertama adalah untuk klinis 4medis5

analisis. Autoanaly'er sangat mengubah karakter laboratorium  pengu%ian kimia dengan

memungkinkan peningkatan yang signifikan dalam %umlah sampel yang dapat diolah. Desain

didasarkan pada pemisahan aliran terus mengalir dengan gelembung udara sebagian besar 

mengurangi lambat, #eroboh, dan kesalahan metode manual ra!an analisis.

enis(%enis tes yang dibutuhkan meliputi tingkat en'im 4seperti banyak dari tes fungsi hati5,

tingkat ion 4misalnya natrium dan kalium5, dan lainnya 4seperti glukosa, albumin serum, atau

kreatinin5. 6on sederhana sering diukur dengan elektroda selektif ion, yang memungkinkan satu

 %enis ion melalui, dan perbedaan mengukur tegangan n'im dapat diukur dengan tingkat mereka

mengubah salah satu 'at !arna yang lain, Dalam tes ini, hasil untuk en'im yang diberikan

sebagai suatu kegiatan, bukan sebagai konsentrasi en'im. Tes(tes lain menggunakan perubahan

kolorimetri untuk menentukan konsentrasi bahan kimia yang bersangkutan. "ekeruhan %uga

dapat diukur.

 AutoAnaly'ers digunakan terutama untuk analisis laboratorium rutin dalam bidang

medis, 6nstrumen ini biasanya menentukan tingkat albumin, alkali fosfatase, aspartate

transaminase 4A-T5, nitrogen urea darah, bilirubin, kalsium, kolesterol, kreatinin, glukosa, fosfor 

anorganik, protein, dan asam urat dalam sampel darah tubuh serum atau lainnya. AutoAnaly'ers

mengotomatisasi langkah analisis sampel berulang yang seharusnya dapat dilakukan se#ara

manual oleh seorang teknisi, untuk tes medis seperti yang disebutkan sebelumnya. Dengan #ara

ini, sebuah autoanaly'er dapat menganalisis ratusan sampel setiap hari dengan satu teknisi

operasi. A!al autoanaly'er instrumen masing(masing beberapa sampel diu%i se#ara berurutan

untuk analit indi0idu. "emudian Model AutoAnaly'ers seperti -MA? diu%i untuk analit se#ara

 bersamaan dalam sampel.

7/24/2019 Autoanalizer

http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 4/6

2.2. $rinsip =perasi

1.  ?ontinuous *lo! Analy'er 

Dalam ?*A aliran #ontinue dari material dibagi dengan gelembung udara ke segmen

diskrit di mana reaksi kimia ter%adi.Aliran terus(menerus sampel #air dan reagen digabungkan

dan diangkut dalam gulungan tubing dan pen#ampuran. Tubing mele!ati sampel dari satu alat

untuk yang lain dengan alat masing(masing melakukan fungsi yang berbeda, seperti distilasi,

dialisis, ekstraksi, pertukaran ion, pemanasan, inkubasi, dan rekaman berikutnya dari sinyal.

-ebuah prinsip penting dari sistem ini adalah pengenalan gelembung udara. The gelembung

udara setiap segmen sampel ke dalam paket diskrit dan bertindak sebagai penghalang antara

 paket untuk men#egah kontaminasi silang saat mereka melakukan per%alanan di sepan%ang pipa.

elembung udara %uga membantu pen#ampuran dengan men#iptakan aliran turbulen 4aliran

 bolus5, dan menyediakan operator dengan #ek #epat dan mudah dari karakteristik aliran #airan.

-ampel dan standar diperlakukan dengan #ara yang persis sama saat mereka melakukan

 per%alanan pan%ang pipa, menghilangkan perlunya sinyal steady state, namun, karena adanya

gelembung membuat profil gelombang hampir persegi, memba!a sistem ke keadaan stabil tidak 

se#ara signifikan menurunkan throughput 4generasi ketiga ?*A analisis rata(rata 9B atau lebih

sampel per %am5 dan diinginkan dalam sinyal steady state 4keseimbangan kimia5 yang lebih

akurat.

2.  *lo! 6n%e#tion Analy'er 

Metode *6A dapat digunakan untuk kedua reaksi #epat serta reaksi lambat. 8ntuk reaksi

lambat, pemanas sering dimanfaatkan. Ceaksi ini tidak perlu untuk men#apai penyelesaian

karena semua sampel dan standar yang diberikan pada periode yang sama untuk bereaksi. 8ntuk 

tes yang khas biasanya diukur dengan *6A 4misalnya, nitrit, nitrat, amoniak, fosfat5 tidak %arang

untuk memiliki throughput 3B(12B sampel per %am. Metode *6A dibatasi oleh %umlah !aktu yang

diperlukan untuk memperoleh sinyal terukur se%ak !aktu tempuh melalui pipa #enderung untuk 

memperluas pun#ak ke titik di mana sampel dapat saling menyatu. -ebagai aturan umum,

metode *6A tidak boleh digunakan %ika sinyal yang memadai tidak dapat diperoleh dalam !aktu

dua menit, dan sebaiknya kurang dari satu.

7/24/2019 Autoanalizer

http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 5/6

2..  Ma#am(Ma#am Autoanali'er 

Autoanaliser adalah suatu alat yang pada prinsipnya di#iptakan manusia untuk 

memudahkan peker%aan manusia. Autoanaliser didesign untuk beker%a dengan ketelitian tinggi

dan dengan !aktu yang #epat serta dapat menangani banyak sampel sekaligus. $ada

laboratorium klinik terdapat 2 ma#am autoanaliser, yaitu)

a. Autoanaliser untuk pemeriksaan hematologi

Adalah alat yang digunakan untuk memeriksa darah lengkap dengan #ara menghitung

dan mengukur sel(sel darah se#ara otomatis berdasarkan 0ariasi impedansi aliran listrik atau

 berkas #ahaya terhadap sel(sel yang dile!atkan.Alat ini beker%a berdasarkan prinsip flo!

#ytometer. *lo! #ytometri adalah metode pengukuran %umlah dan sifat(sifat sel yang dibungkusoleh aliran #airan melalui #elah sempit. Cibuan sel dialirkan melalui #elah tersebut sedemikian

rupa sehingga sel dapat le!at satu per satu, kemudian dilakukan penghitungan %umlah sel dan

ukurannya. Alat ini %uga dapat memberikan informasi intraseluler, termasuk inti sel. $emeriksaan

yang bisa dilakukan oleh autoanaliser %enis ini adalah kadar b, umlah sel(sel darah 4 eritrosit,

lekosit, trombosit5 , enis lekosit, hematokrit, dsb.

 b. Autoanaliser untuk pemeriksaan kimia klinik 

Autoanaliser ini digunakan untuk pemeriksaan kimia klinik, yaitu mengukur kadar 'at('at

yang terkandung dalam darah, #ontohnya adalah glukosa, asam urat, -=T, -$T, kolesterol,

trigliserid, gamma T, albumin,dsb. $rinsip dari alat ini adalah melakukan prosedur pemeriksaan

kimia klinik se#ara otomatis mulai dari pemipetan sampel, penambahan reagen, inkubasi, serta

 pemba#aan serapan #ahayanya. "elebihan autoanaliser adalah bah!a tahapan analitik dapat

dilakukan dengan #epat dan bisa digunakan untuk memeriksa sampel dengan %umlah banyak 

se#ara bersamaan.

2./. ?ara $era!atan

6nilah hal yang perlu diperhatikan oleh konsumen karena ada beberapa alat ( alat yang

 bisa dikatakan <bandel<. Namun sebandel ( bandelnya alat tersebut, tetap sa%a harus mendapatkan

 perhatian khusus seperti

( -uhu ruangan

( &akukan #ontrol se#ara berkala

7/24/2019 Autoanalizer

http://slidepdf.com/reader/full/autoanalizer 6/6

( -elalu #ek reagen

Ada beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam menggunakan alat ini, seperti)-ampel %angan sampai aglutinasi, gunakan sampel darah yang sudah ditambahkan antikoagulan.

$astikan tidak ada darah yang menggumpal karena akan merusak hasil %ika terhisap.

2..?ara "alibrasi Autoanali'er 

Autoanaliser memang sangat membantu analis dalam menger%akan tahapan analitik 

namun perlu diperhatikan, setiap hari baik autoanaliser hematologi atau kimia klinik harus selalu

dikalibrasi untuk men%amin keakuratan hasil.

8ntuk autoanaliser kimia klinik, #ara kalibrasinya adalah dengan menggunakan serum

#ontrol. -erum yang sudah diketahui komposisi dan kadarnya diperiksa dengan menggunakan

autoanaliser seperti memeriksa sampel. asil yang didapat dibandingkan dengan kadar serum#ontrol. ika masih dalam range, maka autoanaliser masih memberikan hasil yang 0alid sehingga

dapat digunakan untuk memeriksa sampel.

Eegitu %uga untuk autoanaliser hematologi, digunakan darah yang konsentrasinya sudah

diketahui dengan pasti. Darah #ontrol tersebut dilakukan pemeriksaan sama seperti pemeriksaan

sampel lalu hasilnya dibandingkan dengan kadar darah #ontrol sebenarnya.

"alibrasi yang seperti di%elaskan di atas dilakukan setiap hari sebelum melakukan

 pemeriksaan pada sampel sehingga hasil yang didapatkan akurat.

Eerikut ini adalah beberapa #ontoh dari autoanaliser)