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“Utilización de sistemas de biodegradación para controlar la contaminación puntual en los campos de cultivos. Algunos ejemplos
latinoamericanos”
Mario Alberto Masís Mora
Junio, 2018
1
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Agenda
Introducción al tema
Desarrollo de conceptos principales
Ejemplos de aplicación
Metodología de trabajo
Ecotoxicología
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Introducción
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Introducción
Estudios en la agricultura han permitido:
• El desarrollo de cultivos más extensos
• Mayor variedad de cultivos
• Mejor calidad (planta y fruto)
• Agentes biológicos y químicos (crecimiento y control de plagas)
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Introducción
• Plaga• Cualquier tipo de organismo que llegue a afectar un producto de interés.
5Plaguicidas
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Introducción
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Uso
Actividades agrícolas de
control de plagas
Actividades pecuarias
Control de vectores de
enfermedades
Cuidado personal
Embellecimiento de áreas verdes
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Introducción
Efectos sobre los seres humanosNiveles de toxicidad
Tipo de contacto
Vía de contacto
Tiempo de exposición
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Afectación en el ambiente
Preocupante debido a la estabilidad, persistencia y toxicidad.
Mal manejo, impacto a aves, animales acuáticos, suelo, insectos polinizadores y calidad
de producción de las granjas.
Zonas agrícolas con mayor impacto.
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Tipo de contaminación en ambiente
Contaminación difusaIngreso de contaminante al medio ambiente, producto de las aplicaciones de productos
agrícolas en el campo.
Evaluación con complejos estudios de monitoreo y la realización de campañas de muestreo con alto número de muestras.
Difícil de identificar la fuente de contaminación.
Fenómenos como escorrentía, deriva, infiltración y lixiviación.
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Tipo de contaminación en ambiente
Contaminación puntualTipo de contaminación en donde se sabe que hay una presencia
identificada de contaminante.
Causa de derrame, lugar de llenado de aspersores o preparación de formulado.
Se puede mitigar estableciendo sistemas de captación.
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Sistemas de mitigación para contaminación puntual
• Quemado del material contaminadoProcesos de quemado
• Eliminación del agua del material utilizado por medio de secado
Deshidratación
• Degradación por procesos físicosDegradación de agentes químicos, fotocatalíticos
• Utilización de agentes biológicos para favorecer degradación
Biorremediación
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Sistema de biofiltro
Phytobac® Biobed
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Sistemas de mitigación para contaminación puntual
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Phytobac®
Materiales parecidos
Es un contenedor hecho de concreto o una lámina plástica en donde se elimina el agua bajo
evaporación
El agua de lavado se almacena y posteriormente se adiciona sobre el Phytobac ®
Es más flexible en cuanto a la recolección de agua
El agua se distribuye a lo largo de toda el área de biorremediación
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Phytobac ®
Mucha área
Útil para zonas con clima cálido
Debe cubrirse cuando hay temporada de lluvia
Se debe controlar la temperatura y la humedad
Presenta problemas para asegurar la homogenización del sustrato de biorremediación
14Tomado de https://www.research.bayer.com/en/phytobac.aspx
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Biofiltro
Sistema de agua residual menor carga
Otra variación del biobed
Una serie de subsistemas que dependen de la carga hidraúlica (de dos a tres contenedores)
Cada contenedor de 1 m3 interconectados
Dos contenedores a 3000 L/año con 100 g de i.a.
El agua entra por el tanque inferior percola por el tanque superior
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Sistema de biopurificación
Década de los noventa, en Suecia, uso de una biomezcla conformada por paja, turba y suelo (50:25:25).
Tratar aguas residuales con alta carga de plaguicidas de origen agrícola.
Función principal: “atenuar el impacto del contaminante en el medio ambiente por medio de la degradación de este por su retención en la materia orgánica y la actividad microbiana”.
También conocido como “biobed”.
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Sistema de biopurificación
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Concreto
Capa de césped
Biomezcla
Capa de arcilla
Suelo natural
Adaptado de Rodríguez-Rodríguez, C.E.et al, (2013). FEMS Microbiology Letters. 345, 1-12
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Biomezcla
• Fuente de los principales organismos degradadores. Pre-expuesto
Suelo:
• Fuente de alimentación de los microorganismos, alto contenido de carbono (paja, bagazo, fibra de coco, cáscara de cítricos, sarmientos, hojas de olivo, burucha de madera, papel, granza de arroz).
Material lignoceluloso:
• Aumentar la capacidad de adsorción, mantiene condiciones aerobias, control de temperatura y humedad. Turba o compost.
Componente húmico:
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Usos del SBP
En Europa:
• Suecia, Francia, Reino Unido, Italia, Bélgica, España, Grecia y Dinamarca
En América:
• Argentina, Brasil, Perú, Ecuador, Guatemala, El Salvador, Máxico, Uruguay, Chile y Costa Rica
En Costa Rica:
• Investigaciones con diferentes materiales lignocelulósicos, con el uso del hongo Trametes versicolor, para degradar algunos carbamatos, triazinas, organofosoforados, neonicotinoides, bencimidazoles, entre otros.
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Medición de los contaminantes
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Para analizar las moléculas de interés
Disolvente de extracción
Extracción sólido-líquido, ASE, Soxhlet,
Microondas
Limpieza de la muestraPermeación en gel, utilización de SPE,
filtración, dispersión
Detección de la o las moléculas de interés
Utilización de equipos costosos como
cromatógrafos de gases y de líquidos
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Método de QuEChERS
2003
2014
2011
2007
Lehotay et al., publican el método en
AOAC
2007
Lehotay et al., publican una recopilación
de modificaciones al método.
2011
Grupo del CICA,
publica estudios en
SBP con esta
metodología
2014-2017
Anastassiades et al., publican el método.
2003
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Cromatografía de líquidos acoplados a un espectrómetro de masas
22
Enter Your
Screenshot HereInyecciónde
muestra
Separaciónen la
columna
Nebulizaciónde la
muestray fase
móvil
Deteccióna través
del Sistema de
filtrosQQQ
LC-MS/MS
0201
03 04
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LC-MS/MS
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Screenshot Here
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Algunas investigaciones Latinoamericanas
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Uruguay
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Metodología de QuEChERS en biomezcla
Extracción5 g de biomezcla + 10 mL de agua
Agitación y reposo
15 mL de ACN acid. al 1% con HOAc, agitación
Adición de sales (MgSO4, NaCl,NaOAc)
Agitación y centrifugación
Limpieza
Alícuota de 3 mL
Limpieza en fase dispersa con PSA, C18, MgSO4
Agitación y centrifugación
Inyección1,5 mL se pone en N2
Se lleva a sequedad
Se reconstituye con (Agua:ACN)
Filtra, LC-MS/MS
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Experimento de biodegradación en un SBP
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Pared impermeable
Biomezcla
Adición de contaminantesResiduo de laboratorio
Extracción de muestraDías 0, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128, 256.
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Experimento de biodegradación en un SBP
SubmuestrasMétodo de extracción
Medición LC-MS/MS
Se grafica Cn vs T
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Condiciones instrumentales de trabajo
Sección Condición
Volumen de inyección 6 µL en un loop de 2 µL
Temperatura de la columna 40 °C
Fase móvil A Agua acidificada al 0,1% con ácido fórmico
Fase móvil B Metanol acidificado al 0,1% con ácido fórmico
Columna Poroshell 120 EC-C18 (100 mm x 2.1 mm d.i., tamaño de partícula 2,7 µm)
Modo de adquisición de datos Modo Positivo con el sistema dMRM
Cromatógrafo Agilent Technologies, serie 1290
Detector Agilent Technologies, modelo 6460, Espectrómetro de masas de triple cuadrupolo
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Ensayo de toxicidad
Protocolo EPA-823-B-01-002 (EPA 2001)
•40 mL de agua destilada a 10 g de muestra sólida con residuos de plaguicidas.
•Se colocarán en agitación para obtener el elutriadoy con este extracto realizar las pruebas toxicológicas.
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Ensayo de toxicidad aguda en Daphnia magna
Las pruebas toxicológicas se
realizarán por triplicado
Viales de vidrio de 25 mLcon 5 neonatos de dáfnidos (< 24 h)
Se expondrán a 10 mL de diluciones apropiadas del elutriado, en un
lugar oscuro a (23 ± 1) °C.
La finalización del bioensayo se hace a las
24 h y 48 h de exposición
Se medirá el 50 % de inmovilización de las
dafnias
TOXCALC-Toxic Data Analysis Software
(Tidepool ScientificSoftware, CA, USA), para determinar la toxicidad.
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Ensayo de fitotoxicidad por germinación de semillas de lechuga
10 semillas5 mL de
elutriadosPlatos Petri
Oscuridad y 22°C
Comparación contra
controles
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