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Proyecto PNUD/GEF/RLA/99/G31 Acuerdo 082
PROTECCION AMBIENTAL DEL RIO DE LA PLATA Y SU FRENTE MARITIMO: PREVENCION Y CONTROL DE LA CONTAMINACION Y PRESERVACION DE HABITATS
“Plaguicidas organoclorados y metales pesados en la
biota del Río de La Plata y su Frente Marítimo”
Dirección Técnica: Dra. Julia E. Aizpún
Grupo de Investigación: Ecotoxicología, Departamento de Ciencias Marinas,
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Mar del Plata.
Investigadores intervinientes: Dr. Víctor J. Moreno
Dra. Marcela S. Gerpe Dra. Karina S.B. Miglioranza Lic. Mariana Gonzalez Srta. Paola Ondarza
1er INFORME DE AVANCE
15 de abril de 2003
INDICE Página INTRODUCCION 1 CARACTERISTICAS BIOLOGICAS DE LAS ESPECIES Merluza 7 Corvina 8 Boga 8 Sábalo 9 MATERIALES Y METODOS 9 Determinación de contaminantes orgánicos 12 Determinación de metales pesados 15 GRADO DE AVANCE DE LAS ACTIVIDADES DESARROLLADAS 19 RESULTADOS Y DISCUSION 20 1. Condición general de los organismos. Datos morfométricos 20 1.1. Merluza 20 1.2. Corvina rubia 21 1.3. Boga 21 1.4. Sábalo 21 2. Datos preliminares sobre el estado de contaminación por POCs 21 3. Concentración y distribución de POCs 23 3.1. Merluza 23 3.1.1. Hígado 24 3.1.1.1. Parentales y metabolitos 25 3.1.2. Músculo 26 3.1.2.1. Parentales y metabolitos 27 3.2. Corvina rubia 28 3.3. Boga 28 3.4. Sábalo 29 3.4.1. Hígado 30 3.4.1.1. Parentales y metabolitos 32
4. Datos preliminares sobre el estado de contaminación por metales pesados 33
5. Concentración y distribución de metales pesados 35 5.1. Merluza 35 5.2. Corvina rubia 38 BIBLIOGRAFIA 42
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INTRODUCCION
El Río de La Plata constituye una de las cuencas fluviales más
importantes del mundo, tiene una extensión aproximada de 250 km. de largo y
cubre un área de 38.800 km2, con una cuenca hidrográfica de 3.170.000 km2
(1). Constituye un vasto sistema hidrográfico formado por los ríos Paraguay,
Paraná y Uruguay, cuya cuenca de drenaje ocupa parte de Argentina, Brasil,
Bolivia, Paraguay y Uruguay, y en Sudamérica sólo es superada por la
correspondiente al río Amazonas (2). En sus costas se encuentran ubicados
numerosos asentamientos urbanos e industriales cuyos desechos son
eliminados a las aguas del río con escaso o ningún tratamiento, como así
también extensas áreas agrícolo-ganaderas. El río también recibe el
escurrimiento superficial de la tierra y residuos de hidrocarburos provenientes
del tráfico marítimo. Es un ambiente utilizado para pesca comercial y deportiva,
navegación desde y hacia varios puertos de importancia y recreación y turismo.
Además, las aguas del río transportan una cantidad significativa de sedimentos
en suspensión, materia orgánica asociada y una variedad de contaminantes
orgánicos e inorgánicos de amplia gama, constituyendo un aporte significativo
para su frente oceánico. Debido a la importancia del Río de La Plata, tanto en
caudal como en cantidad de material transportado, su área de influencia en el
sector marino es de consideración.
En el marco del proyecto de monitoreo de la cuenca del Río de La Plata
y su frente marítimo, se estudiaron contaminantes orgánicos e inorgánicos en
especies representativas de los ambientes dulceacuícola, estuarial y marino.
Los xenobióticos son compuestos químicos presentes en los análisis de
matrices biológicas y abióticas como resultado de la contaminación, sin función
fisiológica reconocida, extraños a los sistemas biológicos, que incluyen a los
plaguicidas y compuestos químicos industriales.
El ambiente acuático puede dividirse en fases relativamente
homogéneas que incluyen el agua, sólidos en suspensión, sedimentos del
fondo y biota. Por lo tanto cualquier sustancia química, en adelante “químico”,
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incorporado en estos ambientes será particionado en las fases mencionadas.
Como muchos xenobióticos son lipofílicos y en consecuencia poco o nada
solubles en agua, se particionan en los compartimentos ricos en lípidos del
ambiente. Como resultado, los químicos frecuentemente dejan residuos que
persisten en los tejidos de la biota una vez que la exposición ha cesado.
Los compuestos lipofílicos son detoxificados en los organismos con
dificultad y en consecuencia son difíciles de excretar. La mayoría son
metabolizados o degradados muy lentamente y como consecuencia persisten
por períodos de tiempo relativamente largos. Los plaguicidas organoclorados ,
que en adelante llamaremos POCs, constituyen junto a los bifenilos
policlorados (BPCs) los grupos principales de xenobióticos orgánicos, lipofílicos
y persistentes.
La presencia de POCs en el ambiente tiene como fuente principal el
tratamiento directo de cultivos para combatir o preservar de plagas de insectos,
hongos y malezas, gran parte de los cuales se depositan en el suelo, cuerpos
de agua, biota, etc. Son contaminantes ubicuos debido a su persistencia y
naturaleza semivolátil y los aplicados en tierra llegan finalmente a los
ambientes acuáticos.
De acuerdo a sus propiedades fisico-químicas (por ej.: presión de vapor,
solubilidad en agua, partición partícula/solución) son distribuidos entre los
diferentes compartimentos bióticos y abióticos.
Los POCs incluyen 5 grupos de compuestos:
1) DDT y metabolitos.
2) Hexaclorociclohexanos o HCHs.
3) Ciclodienos (Heptacloro, Aldrin, Endosulfanes, Clordanos).
4) Toxafeno.
5) Mirex.
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Estos plaguicidas han sido utilizados intensamente en todo el mundo
durante los últimos 40 años. Debido a su persistencia y efectos adversos en el
ambiente, se han prohibido en la mayoría de los países desarrollados, con
excepción del Endosulfán.
Los organismos acuáticos están expuestos durante su vida a la acción
de contaminantes ambientales como los POCs. A concentraciones elevadas en
el ambiente originan alteraciones en el reparto de energía y metabolismo de los
organismos, tales como cambios en la dinámica de los lípidos y de las
proteínas e incluso pueden llegar a ocasionar la muerte. Por otra parte, una
exposición a largo plazo, a concentraciones insignificantes de contaminantes
puede provocar daños crónicos como alteraciones en los sistemas
inmunológicos y reproductivos .
Los plaguicidas están presentes en los organismos acuáticos como
resultado de la incorporación desde el agua, a concentraciones alrededor de
100 veces más elevada, proceso conocido como bioconcentración (3). En los
organismos de mayor talla (edad) las concentraciones son superiores, lo que
se conoce como bioacumulación. Finalmente también son incorporados
desde la dieta con un incremento 70 a 100 veces mayor en el predador que en
la presa, mecanismo conocido como biomagnificación (4).
Los organismos acuáticos en general y los peces en particular, tienen
una gran superficie corporal externa, cubierta con membranas
semipermeables, en contacto con el agua donde se encuentran los
contaminantes. Por lo tanto es probable que la difusión juegue el papel más
importante en la bioacumulación de estos compuestos en el ambiente acuático.
La incorporación desde el alimento está relacionada a la posición del
organismo en particular en la cadena alimentaria y la mayor incorporación será
por biomagnificación. De esta forma, el potencial de acumulación de
xenobióticos persistentes varía con la especie, contenido lipídico de la misma y
nicho ecológico del organismo, como también con las características del
compuesto.
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Por su lado, y a diferencia de los xenobióticos, los metales pesados son
elementos naturales que el hombre, por extracción y uso, ha alterado sus ciclos
biogeoquímicos y consecuentemente los incidentes de contaminación han
aumentado considerablemente. Los metales pesados fueron usados por el
hombre desde época inmemorable, desde la Era del fuego con el quemado de
madera, seguido por la Era de los metales donde se inició la etapa de
extracción y uso directo de los mismos y desde la Revolución Industrial la
liberación de metales al ambiente ha sido incrementada de manera importante
y sostenida.
De todos los elementos conocidos ochenta y cuatro se clasifican como
metales, por lo tanto las oportunidades de contaminación metálica son
potencialmente numerosas. No obstante no todos representan un riesgo para
el ambiente y la salud de los organismos, algunos no son tóxicos mientras que
otros, aún cuando lo sean, son muy escasos o sus compuestos son insolubles
y no biodisponibles. En el caso de los metales estudiados en este proyecto,
cadmio, cobre, cinc y mercurio, están considerados como muy tóxicos y
relativamente accesibles (5).
Los aportes de metales al ambiente pueden ser por fuentes naturales o
antropogénicas. Las primeras comprenden principalmente el desgaste
geológico y el vulcanismo, los cuales aportaron los niveles “naturales” desde
tiempos geológicos muy antiguos. Los aportes humanos están relacionados
con el manipuleo de los metales desde la extracción y procesamiento sus
minerales hasta los diversos usos que se hacen de los metales puros y sus
compuestos, los cuales constituyen fuentes quizás más importantes que las
naturales.
En cuanto a efectos, es muy conocido que cantidades traza de ciertos
elementos pueden tener una influencia negativa o positiva sobre los
organismos, la cual está relacionada con la esencialidad del mismo. Un
elemento es esencial cuando se encuentra en todos los organismos, la
concentración no varía ampliamente de especie a especie, hay síntomas de
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deficiencia cuando se disminuye o se elimina, y no puede ser reemplazado
completamente por otro ya que tiene una influencia directa sobre el organismo
por estar involucrado en su metabolismo.
Los metales pueden desarrollar diferentes funciones en los organismos,
como ser electroquímicas (formas iónicas), catalíticas (activación de enzimas) e
integración de macromoléculas específicas (hierro en hemoglobina, magnesio
en clorofila y cobalto en vitamina B12, entre otros) (6).
De todas maneras, el hecho de que un metal sea esencial no significa
que no pueda ser tóxico, manifestándose como tal cuando sus niveles superan
a aquellos requeridos por los organismos, los denominados niveles
nutricionales. En este caso, el metal se encuentra en exceso y es allí cuando
los mecanismos homeostáticos, encargados de la regulación dentro de los
valores metabólicos, se saturan o superan y el metal comienza a manifestar
efectos negativos. Los efectos varían con el metal, las concentraciones de
exposición y la condición del organismo, siendo desde disturbios a nivel
molecular (alteraciones de membranas y macromoléculas como enzimas,
proteínas y ácidos nucleicos) hasta aquellos a nivel de órganos y sistemas de
órganos, pudiendo ocasionar alteraciones fisiológicas de consideración
llegando incluso a provocar la muerte (7).
En el ambiente los metales se encuentran en los distintos
compartimentos bajo distintas formas químicas, denominadas especies físico-
químicas, las cuales están en íntima relación con la disponibilidad biológica de
los mismos, es decir, la proporción del metal total que puede ser asimilada por
los organismos. Las especies individuales pueden incluír formas particuladas y
disueltas, tales como especies inorgánicas simples, complejos orgánicos y
elementos sorbidos a una variedad de partículas coloidales. Las formas más
biodisponibles de metales son los iones disueltos y las formas orgánicas
permeables a las membranas celulares.
En el ambiente acuático los sedimentos constituyen un compartimento
muy importante ya que en ellos se concentran, por distintos procesos físicos y
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químicos, los elementos pesados que se encuentran en la columna de agua. Si
bien las concentraciones en este compartimento son elevadas, la mayor
proporción no es biodisponible, debido a que se encuentran “fijados” y solo
ciertos cambios naturales o antropogénicos los pueden movilizar. Los procesos
diagenéticos, es decir las reacciones biogeoquímicas naturales que tienen
lugar en los sedimentos, pueden ser alterados por las actividades del hombre.
Así, la liberación de sustancias orgánicas e inorgánicas a través de desechos,
la exposición de sedimentos anóxicos a la oxidación por el dragado, alteración
del flujo y mezcla del agua sobre los sedimentos por instalación de distintas
estructuras, etc., pueden constituir procesos que removilicen metales de los
mismos.
Todos los químicos mencionados son analizados frecuentemente en
peces y otros organismos acuáticos para establecer el nivel de contaminación
del ambiente del cual son originarios. Actualmente y a escala mundial, se
realizan numerosos programas de monitoreo para determinar cambios
temporales y espaciales en la contaminación de los ambientes acuáticos
mediante el análisis de residuos en muestras biológicas.
El conocimiento de los parámetros biológicos de las especies de
invertebrados y peces seleccionados en este trabajo con distribución de tallas,
largo de primera madurez sexual, ciclo reproductivo y sus hábitos tróficos,
permite considerar adecuadas a las especies analizadas provenientes del Río
de La Plata y su Frente Marítimo, para investigar los niveles de contaminantes
en esas áreas.
La fauna de peces del Río de La Plata está compuesta por dos grupos
principales, uno de peces de agua dulce y otro de origen marino. Los peces de
agua dulce provienen principalmente de la fauna de los ríos Paraná y Uruguay,
que forman el sector sur de la cuenca fluvial. La fauna de peces de origen
marino está compuesta en su mayoría por especies que habitan la región
costera de la plataforma interior del frente oceánico del Río de la Plata.
Según esta clasificación, en este primer informe analizamos:
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- Corvina rubia, especie eurihalina que cumple gran parte de su ciclo de vida
en la zona costera del Río de la Plata medio e inferior, tanto en la costa
uruguaya como en la bahía de Samborombón (Argentina) y también se
encuentra en aguas de mayor salinidad,
- Sábalo y boga, especies dulceacuícolas, provenientes del Río de La Plata
Superior y
- Merluza, especie marina, capturada en la Zona Común de Pesca
Argentino–Uruguaya.
Para obtener resultados significativos se debió realizar una elección
correcta de los parámetros a tener en cuenta, como ser:
- Elección del tejido apropiado para las determinaciones (pez entero,
órgano blanco, tejido o fracción celular).
- Consideración de las diferencias entre sexos.
- Consideración de las diferencias con el estadío de maduración del
organismo.
- Relación entre los compuestos parentales y sus metabolitos
(xenobióticos).
CARACTERISTICAS BIOLOGICAS DE LAS ESPECIES ESTUDIADAS
Las cuatro especies seleccionadas para realizar este primer informe del
proyecto son de importancia comercial, dedicadas al consumo humano, ya sea
fresco o congelado, y en el caso del sábalo y la corvina rubia, los mismos
también se utilizan en la obtención de harina de pescado.
Merluccius hubbsi (merluza común)
Es una especie netamente marina, demersal, con una distribución
geográfica en todo el Mar Argentino, presentando migraciones verticales
(diaria, trófica) y horizontales (estacional, reproductiva). Por la primera
asciende a las aguas superficiales para alimentarse durante la noche, mientras
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que en la segunda se desplaza en primavera hacia aguas menos profundas
para reproducirse. Normalmente habita entre los 50 y 500 m de profundidad, si
bien la mayor concentración se encuentra a los 200 m. En cuanto a sus hábitos
tróficos, se puede decir que es una especie carnívora, predadora y oportunista,
zooplanctófaga por excelencia hasta tallas entre 30 y 35 cm. Entre sus items
alimentarios se encuentran anchoítas, mictófidos, crustáceos y juveniles de
merluza. Es una especie de cierta longevidad, alcanzando los 14 años. La talla
de primera madurez sexual es de 36 cm para las hembras y de 33 cm para los
machos, correspondiendo a edades de 3 y 4 años respectivamente. La merluza
presenta puestas casi todo el año, con dos períodos de mayor intensidad, en el
invierno (mayo – julio) en el norte de su distribución y en el verano (octubre –
marzo) en la zona costera norpatagónica (9).
Micropogonias furnieri (corvina rubia)
Especie marina-estuarial con capacidad de soportar un amplio rango de
salinidades (eurihalina), realizando parte de su ciclo de vida en aguas
estuariales, llegando los juveniles a penetrar en ríos y arroyos que desembocan
en el mar. Es una especie costera que habita fondos arenosos y fangosos y de
la cual no se conoce con certeza si presenta migraciones. En cuanto a sus
hábitos tróficos, se puede decir que se alimenta principalmente de organismos
bentónicos como crustáceos (camarones, langostinos y cangrejos), poliquetos
y moluscos (bivalvos y caracoles). Es una especie longeva, la edad máxima
registrada fue de 30 años y la talla de primera madurez sexual es de 29 cm
para los machos y 30 cm para las hembras. Durante la época invernal las
corvinas provenientes de la Zona Común de Pesca Argentino – Uruguaya, se
encuentran en estadío de reposo gonadal (1).
Leporinus spp (boga)
Especie dulceacuícola con amplia distribución y de gran importancia en
el área estudiada, si bien su biomasa es significativamente menor a la
correspondiente al sábalo. En cuanto a sus hábitos tróficos, se puede decir que
es una especie omnívora, con predominio de la nutrición a base de vegetales
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acuáticos. No se conoce mucho sobre su ciclo reproductivo, si bien se sabe
que la edad de primera madurez es a los dos años y que el desove se
concentra entre octubre y diciembre (8).
Prochilodus platensis (syn P. lineatus, sábalo)
Especie dulceacícola, de gran importancia comercial y en términos de
biomasa, constituyendo más del 60% de la fauna ictícola de los cuerpos de
agua dulce de nuestro país. Presenta una amplia distribución en los ríos que
constituyen el sistema hidrográfico del Río de La Plata. Es una especie iliófaga
durante todo su ciclo de vida, alimentándose de la materia orgánica presente
en el fango. El sábalo presenta migraciones reproductivas cíclicas y regulares,
desde abril hasta agosto. Los ejemplares migran aguas arriba para su
reproducción, interrumpiendo la alimentación durante este período (8).
MATERIALES Y METODOS
Obtención de las muestras
En la presente etapa del proyecto se analizaron las siguientes muestras:
Ejemplares juveniles y adultos de ambos sexos de merluza común
provenientes de una campaña pesquera realizada en la Zona Común de
Pesca Argentino-Uruguaya en julio de 2002. Ejemplares analizados (n): 9
inmaduros, 2 hembras maduras y 9 machos maduros.
Ejemplares juveniles y adultos de ambos sexos de la corvina rubia
provenientes de la Bahía de Samborombón, diciembre de 2001. Ejemplares
analizados (n): 5 inmaduros, 5 hembras maduras y 5 machos maduros.
Ejemplares juveniles y hembras adultas de boga obtenidos en el Río de La
Plata superior en noviembre de 2001. Ejemplares analizados (n): 4
inmaduros y 4 hembras maduras.
Ejemplares juveniles y adultos de ambos sexos de sábalo capturados en el
Río de La Plata superior en noviembre de 2001. Ejemplares analizados (n):
5 inmaduros, 2 hembras maduras y 3 machos maduros.
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En la Figura 1 se presentan las áreas correspondientes a los muestreos
de las especies estudiadas.
Figura 1: Zonas de distribución y muestreo de las especies estudiadas en el presente informe de avance.
De cada ejemplar se determinó el peso total usando una balanza
granataria (al 0,01g) y el largo estándar con un ictiómetro. También se pesó el
hígado y el contenido estomacal con una balanza analítica (al 0,0001g). De
cada organismo se determinaron los índices hepático (IH), gonadal (IG) y el de
condición (K), los cuales fueron calculados de la siguiente manera:
IH = peso hígado x 100 / peso total
IG = peso gónada x 100 / peso total
K = peso total x 100 / largo total3
(pesos expresados en gramos y largo en centímetros)
Durante la disección de los organismos se determinó el sexo de los
mismos, identificándose las gónadas femeninas o masculinas a simple vista.
OCEANO ATLANTICO
Boga / Sábalo
Corvina rubia
Merluza común
33
35
37
3958 5462
Río de La Plata
50
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Los tejidos elegidos para llevar a cabo el estudio fueron hígado, músculo
dorsal y contenido estomacal. Una vez extraídos, el tejido/órgano fue envuelto
en papel de aluminio (contaminantes orgánicos) o en bolsas de polietileno
(metales pesados) y conservados a -20°C hasta el momento de su análisis.
Para las determinaciones los organismos seleccionados se agruparon en
"pooles" determinándose así la muestra a analizar. La agrupación de tejidos
bajo esta manera permite una estimación más cercana a la realidad de los
niveles de contaminación, dado que se presenta una mayor parte de la
población bajo estudio, alcanzando una mayor representatividad. Cada grupo
de tejido fue homogenizado sin perder el frío hasta obtener una mezcla
homogénea del mismo. Los homogenatos fueron utilizados para la
determinación de los contaminantes orgánicos y los metales pesados.
Los resultados informados son promedio de dos determinaciones.
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Determinación de contaminantes orgánicos
Extracción y fraccionamiento de los POCs
Los plaguicidas organoclorados debido a su conocido carácter lipofílico,
son extraídos de las muestras junto al material lipídico. Para todos los tejidos
se empleó la misma metodología (Figura 2)
+ Figura 2: Esquema de la metodología utilizada para la extracción, purificación y análisis cuali-cuantitativo de los POCs en las muestras de peces.
Homogenización de la muestra
Submuestra 2-3 gramos SO4Na2 anhidro
Extracción en Soxhlet 4 horas
Cromatografía de permeación en gel (GPC)
Lípidos %
POCs
Fraccionamiento en columna de Acido Silícico Activado
Fracción A
Análisis cuali-cuantitativo por cromatografía gaseosa con detector de captura electrónica (GC-ECD)
Fracción B
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Preparación de las muestras Para cada tejido, se tomaron 3 g (al 0.0001 g) del homogenato y se los
mezcló con suficiente SO4Na2 anhidro en un mortero de vidrio hasta formar un
polvo homogéneo fino. Se determinó que la relación óptima g tejido: g sulfato
de sodio fue 1:9. El objetivo de este tratamiento fue lograr una completa
deshidratación de la muestra.
Extracción de lípidos y/o material lipofílico por método Soxhlet Se utilizó como solvente de extracción 110 ml. de mezcla
hexano:diclorometano de calidad “para análisis de plaguicidas” en una relación
50:50. Cada extracción tuvo una duración de 4 hs. El extracto obtenido fue
evaporado a 30°C hasta un volumen final de 3 ml.
Remoción de lípidos por cromatografía de permeación en gel (GPC) Los lípidos del extracto obtenido fueron removidos por cromatografía de
permeación en gel. Dicha cromatografía se basa en el principio de exclusión
molecular. La filtración o permeación en gel es una forma de separación
cromatográfica en columna con relleno de perlas. Los compuestos grandes,
mayores que el límite de exclusión (lípidos), pasan a través de la columna sin
impedimento, siendo recolectados en una primera fracción. Por su parte, los
compuestos pequeños como los POCs penetran en los poros de las perlas y
por lo tanto se retardan en el pasaje por la columna siendo colectados en una
segunda fracción.
Se utilizó una columna de 30 mm. de diámetro x 30 cm. de altura
rellena con perlas Bio Beads SX-3 y previamente calibrada con un blanco de
aceite de origen vegetal. La muestra se sembró en la parte superior de la
columna y se eluyó con 280 ml. de mezcla hexano–diclorometano en relación
55:45, a razón de 5 ml./min. Los primeros 40 ml. fueron descartados. Los
segundos 90 ml., correspondientes a los lípidos (primera fracción), se
colectaron en una probeta. De igual manera, se procedió con los últimos 150
ml. donde se encontraban los POCs (segunda fracción).
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La fracción de lípidos (90 ml.) fue traspasada a un balón previamente
tarado y se llevó a sequedad por evaporación a una temperatura entre 40-50
°C, con bomba de vacío. Finalmente, se secó con gas nitrógeno AP (alta
pureza) y así, por diferencia de peso se obtuvo el peso de los lípidos de la
muestra analizada.
Fraccionamiento de los POCs (2º fracción de GPC)
La segunda fracción obtenida en la GPC fue evaporada a 27-30 ºC
hasta un volumen final de 2 ml. para realizar su fraccionamiento por
cromatografía de adsorción. Para ello se utilizó una columna de 1 cm. de
diámetro interno y 30 cm. de longitud, rellena de ácido silícico, previamente
activado a 200 °C durante 24 horas. La columna se lavó previamente con 20
ml. de hexano y se sembró la muestra en la parte superior. Se eluyó con 40 ml.
de hexano obteniéndose la fracción A donde se encuentran los plaguicidas
aldrin, heptacloro y parte del DDE, luego con 80 ml. de mezcla hexano-
diclorometano (50:50), se obtuvo la fracción B, donde se encuentran:
α−, β−, γ−, y δ− HCH, heptacloro epóxido, α− y γ− clordano, α- y β-endosulfan ,
endosulfán sulfato, resto del DDE, DDT, DDD, dieldrin, endrin y endrin
aldehído. Las 2 fracciones fueron evaporadas a 27–30ºC hasta un volumen
final de 1 ml. y traspasadas a viales para su análisis cuali-cuantitativo.
Análisis cuali-cuantitativo de los POCs (10)
El análisis cuali-cuantitativo de los POCs se realizó por Cromatografía
Gaseosa con Detector de Captura Electrónica (GC-ECD). El detector de
captura electrónica responde selectivamente a las moléculas que contienen
átomos electronegativos, tal como los átomos de cloro de los POCs. A medida
que el gas portador He fluye a través del detector, una lámina de Ni63 radiactivo
ioniza las moléculas de He y forma electrones lentos, los cuales se desplazan
hacia el ánodo. Al colectarse estos electrones producen una corriente de fondo
constante. Si en ese momento se introduce en el detector una muestra que
contenga moléculas que capturan electrones, la corriente disminuye y con una
calibración apropiada se relaciona la pérdida de corriente con la concentración
de la muestra.
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Se utilizó un cromatógrafo Shimadzu–17A equipado con detector de
captura electrónica (63Ni) y columna capilar DB-5 de Supelco, de 0.25 mm de
diámetro interno, 0.25 µm. de espesor de fase, 30 m. de longitud y operada en
modo "splitless". Las condiciones operativas y el programa de calentamiento de
columna fueron los siguientes: temperatura del inyector: 275°C; temperatura
del detector: 300°C; temperatura inicial de columna: 100°C, 1 min., gradiente
de 5 °C/min. hasta 150°C, 1 min., luego gradiente de 1.5 °C/min. hasta 240°C,
0 min. Luego a 10ºC/min hasta 300°C, 3 min. Velocidad del flujo de Helio: 3.7
cm/seg.
Los diferentes compuestos se identificaron por medio de estándares
externos a través de sus tiempos de retención y utilizando el #PCB 103 como
estándar interno.
Se analizó un estándar, Mix 16 (M-001H, Accustandard, New Haven,
CT) para la confección de las curvas de calibración correspondientes para cada
compuesto.
Expresión de los resultados
Las concentraciones de POCs están expresadas en ng/g o ppb (peso
húmedo), ng/g o ppb (peso seco) y ng/g o ppb de lípidos.
Límites de detección del método Los límites de detección del método (peso seco) fueron: < 0.006, para
los HCHs, heptacloros y el aldrin; < 0.1 para el heptacloro epóxido, dieldrin,
endrin, endrin aldehído, clordanos y endosulfanes y < 0.2 para los DDTs.
Determinación de metales pesados
Determinación de Mercurio total El método usado para la determinación de mercurio total es el descripto
por Moreno et al. (11).
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• Mineralización de las muestras
Se pesaron 100 a 200 mg de muestra en tubos de ensayo de 5 ml, se
agrega 50 ml de mezcla de ácido nítrico y ácido sulfúrico (1:4) y se calienta a
64°C durante 90 minutos (agitando cada 10’). Luego de enfriados los tubos en
un baño de hielo, se le añade 15 ml de solución de permanganato de potasio
(6%) para aumentar la oxidación de la materia orgánica. Al día siguiente de
agrega peróxido de hidrógeno hasta completar la oxidación.
• Medición de la absorbancia de las muestras
Este procedimiento se realizó con un Espectrofotómetro de Absorción
Atómica Perkin-Elmer Analyst 300 con horno de grafito HGA800 y FIAS 100.
En el momento de las mediciones, a cada tubo se le agrega solución de cloruro
estañoso (10%), cuya función es reducir el mercurio a su estado elemental.
Luego el mercurio es barrido con una corriente de aire y entra en la celda de
cuarzo del equipo, obteniéndose las señales correspondientes.
Cada set de tubos está constituido por las muestras problema y 6
muestras testigo: una es el blanco de reactivos y los restantes contienen
concentraciones crecientes conocidas de mercurio, con las cuales se realiza
una curva de calibración para calcular las concentraciones de las muestras.
• Condiciones del equipo para las mediciones:
Altura de la celda (mm) 20
Longitud de onda de la lámpara de mercurio (nm) 253,7
Abertura (Å) 3,8
Corriente de la lámpara (mA) 3
Determinación de las concentraciones de cadmio, cinc y cobre
Para las determinaciones de estos metales se sigue el método descripto
por FAO/SIDA (12).
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• Mineralización de las muestras
Se pesa aproximadamente 1g de muestra problema y se acidifica con
4ml de ácido perclórico y ácido nítrico concentrados (1:3). Se calienta en baño
de glicerina (temperatura menor a 85°C) hasta reducir su volumen a
aproximadamente 1ml, luego se lleva a 5ml con ácido nítrico (1%).
• Medición de las absorbancias de las muestras
Las absorbancias son medidas por Espectrofotometría de Absorción
Atómica (EAA) con llama aire/acetileno con corrección de fondo mediante
lámpara de deuterio. Además de los tubos correspondientes a las muestras, se
lee un blanco de reactivos y testigos con concentraciones conocidas y
crecientes de estándares de los tres metales a medir. Al igual que para el caso
del mercurio, se realiza una curva de calibración a partir de la cual se
determinan las concentraciones de cada uno de los metales en las distintas
muestras analizadas.
• Condiciones del EAA para las determinaciones
CADMIO COBRE CINC
Altura del quemador mm 3 4 4
Longitud de onda de las lámparas nm 228,8 324,7 213,9
Abertura Å 3,8 3,8 3,8
Corriente de la lámpara mA 5 7 6
Flujo de aire lt/min 10 10 10
Flujo de acetileno lt/min 1,3 2,3 2,4
Las determinaciones se realizaron con un EAA Perkin-Elmer Analyst 300
con horno de grafito HGA800 y FIAS 100. Las muestras son filtradas
previamente a la aspiración al espectrofotómetro, para evitar la entrada de
partículas produciendo su apagado. Debido a que las muestras son pasadas
por un filtro, también se realizó un blanco del mismo en las corridas de los
metales, lo cual descarta la posibilidad de que el mismo aporte metales y por lo
tanto estemos sobrestimando las muestras.
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 18 de 43
Expresión de los resultados
En todos los casos los resultados están expresados en µg/g de tejido
húmedo (ppm).
Límites de detección Los límites de detección del método, expresados en ppm, para los cuatro
metales analizados son: Cd 0,003, Zn 0,004, Cu 0,004 y Hg 0,005.
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 19 de 43
Especie
Tej
ido
Sexo
Dis
ecci
ón
Ext
rac.
líp
idos
GPC
Cua
nt.
lípid
os
Sílic
a ge
l
GC
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ad
Min
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Hg
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l E
AA
H
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tal
Min
. Cd,
C
u, Z
n E
AA
Cd,
C
u, Z
n Pr
oces
. da
tos
2 X X X X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X X X X M
SD X X X X X X X X X X X X X 2 X X X X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X X X X
MERLUZA
H SD X X X X X X X X X X X X X 2 X X X X X X X X 1 X X X X X X X X M
SD X X X X X X X X 2 X X X X X n.d. 1 X X X X X X
SÁBALO
H SD X X X X X n.d. 2 X X X X X X
M SD X X X X X X 2 X X X X X X
H SD X X X X X n.d. 2 X X X X X n.d.
BOGA
CE SD X X X X X n.d. 2 X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X M
SD X X X X X X X X X X 2 X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X H
SD X X X X X n.d. X X X X 2 X X X X X n.d. X X X X 1 X X X X X n.d. X X X X
CORVINA
CE SD X X X X X n.d. X X X X 2 X 1 X M
SD X 2 X 1 X
LISA
H SD X 2 X 1 X M
SD X 2 X 1 X H
SD X 2 X 1 X
GATUZO
CE SD X
M SD Caracol Atigrado MV SD
Almeja asiática E SD Corbícula E SD Mejillón E SD
Mejillón asiático E SD
Metales Pesados Orgánicos
Cuadro 1: Grado de avance de las actividades programadas. M: músculo, H: hígado, CE: contenido estomacal, MV: masa visceral, E: entero, 1: macho, 2: hembras, S.D.: sin diferenciar, X: realizado, n.d.: no determinado, cuadrícula vacía: a realizar
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 20 de 43
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
1. Condición general de los organismos: datos morfométricos
Los pesos y tallas totales y los índices de condición (K), hepático (IH) y
gonadal (IG) de los organismos utilizados en el presente estudio están
indicados en el Cuadro 2.
Sexo Estadío Peso
Total Largo total K IH IG
Hembra M 373.85 ± 49.67 38 ± 1.41 0.68 5.86 - Macho M 304.36 ± 45.07 36.55 ± 1.1 0.62 4.96 - S.D. I 204.48 ± 29.84 32.06 ± 1.16 0.62 3.92 - M
erluza
Hembra M 758.96 ± 259.29 41.16 ± 4.52 1.09 9.56 4.05 Macho M 925.26 ± 353.87 44.5 ± 5.41 1.05 8.94 1.80 S.D. I 272.21 ± 16.43 29.43 ± 0.96 1.07 1.00 0.52 Co
rvina
Hembra M 1588.93 ± 558.54 52.36 ± 3.99 1.11 0.63 0.57 S.D. I Bo
ga
Hembra M 1831.53 ± 15.87 51.7 ± 1.27 1.33 1.32 3.25 Macho M 1558.17 ± 202.4 53.07 ± 6.43 1.04 0.77 - S.D I 663.69 ± 230.14 38.8 ± 0.41 1.14 0.53 0.28 Sá
balo
Cuadro 2: Datos morfométricos de las especies de peces capturados en el Río de La Plata y su Frente Marítimo. S.D.: sin diferenciar, M: maduro, I: inmaduro. 1.1-Merluza
Las gonadas de los ejemplares maduros se presentaron en estadío de
reposo gonadal, siendo los pesos de las mismas despreciables, razón por la
cual no se determinaron sus IG. El K de las hembras maduras presentó un
valor ligeramente superior al de los machos maduros y al de los organismos
inmaduros. Respecto a los IH los valores mas elevados correspondieron
también a las hembras maduras seguidos en orden decreciente por los machos
y organismos inmaduros.
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 21 de 43
1.2-Corvina El K no presentó diferencias marcadas entre adultos de ambos sexos y
entre maduros e inmaduros. Los IH e IG de los organismos capturados en
noviembre presentaron valores mayores a los obtenidos en corvinas
capturadas en la misma zona durante los meses de invierno (período de reposo
gonadal) (13). Así estas observaciones indican que las corvinas capturadas en
noviembre se encuentran en el período de pre-freza (elevado IG) y de
alimentación intensiva (elevado IH). Los organismos inmaduros, por su parte,
presentaron valores mas elevados de IH y marcadamente menores de IG,
respecto a los maduros, como era de esperar.
1.3-Boga El valor del K de las hembras utilizadas en este trabajo coincide con los
valores obtenidos por Delfino et al. (8) correspondientes a bogas en periodo de
post-freza los cuales fueron capturados aguas arriba en primavera. El valor
bajo del IG encontrado en los ejemplares analizados en este trabajo sugeriría
que dichos organismos se encuentran en periodo de post-presa.
1.4 -Sábalo El K de las hembras maduras presentó un valor superior al de los
machos maduros y organismos inmaduros. Esta relación también fue
observada en los IH e IG. Teniendo en cuenta la fecha de captura y los valores
elevados del IG de las hembras, sugiere que estos organismos se encuentran
en periodo de pre-freza.
2. Datos preliminares sobre el estado de la contaminación por POCs en las especies de peces capturadas en el Río de La Plata y el Frente Marítimo.
En esta primera etapa se consideró valioso informar la concentración
promedio de POCs (sin diferenciación de sexos y estadios gonadales) de los
tejidos con el objeto de poder comparar estos resultados con otros realizados
sobre las mismas especies u otras como así también capturados en otros
lugares del mundo. Se detectaron POCs en todos los tejidos/órganos y
contenidos estomacales de las especies analizados (Cuadro 3).
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 22 de 43
Este cuadro muestra las concentraciones promedio de POCs en la
totalidad de las muestras analizadas.
Especie Tejido % lípidos POCs ng/g ph POCs ng/g lípidos
Hígado 48.55 (44.2-51.8)a 23.74 ± 6.54b 48.89 Merluza Músculo 1.18 (1.0-1.5) 6.56 ± 3.32 555.93
Hígado 5.55 (4.17-6.78) A.D. A.D. Músculo 1.34 (1.05-1.87) A.D. A.D. Corvina Cont. Estomacal 1.68 (1.1-2.82) A.D. A.D.
Hígado 7.77 (2.9-12.6) A.D. A.D. Músculo 0.9 (0.6-1.2) A.D. A.D. Boga Cont. Estomacal 2.17 (0.9-3.43) A.D. A.D.
Hígado 8.82 (7.9-11.1) 21.8 ± 12.19 247.16 Sábalo Músculo 6.46 (1.5-11.4) A.D. A.D.
Cuadro 3: Concentraciones totales de POCs en los diferentes tejidos de los peces analizados, capturadas en el Río de La Plata y su Frente Marítimo. Ph: peso húmedo. a: rango, b: desviación estándar, A.D.: a determinar
Debido a la naturaleza lipofílica de los POCs, estos se acumulan en los
tejidos de los organismos acuáticos en general, de acuerdo a su nivel lipídico
(14-15). Por este motivo el contaminante orgánico incorporado está relacionado
a la concentración y a la composición lipídica del tejido (16).
Los tejidos hepáticos de las cuatro especies mostraron mayores
porcentajes de lípidos que el músculo, siendo la relación % lípidos en músculo /
% lípidos en hígado menor en la merluza (pez magro) y mayor en el sábalo
(pez graso).
La concentración de POCs en los tejidos de las cuatro especies de
peces analizadas, indican en una primera aproximación, que:
a- En el músculo de la merluza, tejido analizado por las implicancias
que acarrea para el consumo humano, las concentraciones fueron
menores a los niveles de tolerancia establecidos por, la guía
americana de consumidores (1.7 ug/g) (17).
b- En el hígado de la merluza y el sábalo, órgano que refleja el ingreso
reciente de contaminantes, los valores fueron menores a los hallados
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 23 de 43
en peces que habitan zonas estuariales de otras latitudes y mayores
a los registrados en hígado de Odontesthes bonaeriensis, de Mar
Chiquita (18)
3. Concentración y distribución de POCs
3.1.Merluza
El Cuadro 4 muestra los porcentajes medios de lípidos y
concentraciones promedio de POCs totales en la merluza (Merluccius hubbsi).
Concentración de POCs Sexo Tejido % Humedad % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.
Músculo 75.24 1.04 7.66 10.18 Hembra Hígado 44.9 44.15 25.65 57.13
Músculo 77.86 1.0 9.35 12.01 Macho Hígado 39.4 51.8 24.51 62.21
Músculo 80.03 1.5 7.21 9.01 S.D. Hígado 39.80 49.7 21.05 52.89
Cuadro 4: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de merluza. ph: peso húmedo, ps: peso seco, S.D.: sin diferenciar
Las concentraciones de POCs en los tejidos de los organismos
inmaduros fueron inferiores a aquellas de los maduros de ambos sexos. Este
aumento de la concentración de POCs con la edad y/o talla del organismo se
conoce como el proceso de bioacumulación y se ha observado en varias
especies (3-4).
El tejido hepático de organismos inmaduros y maduros de ambos sexos
presentaron mayores concentraciones de lípidos y plaguicidas totales (ng/g ph)
que en el músculo. Así, la naturaleza lipofílica de los POCs determina que
estos se acumulen en los tejidos de los organismos de acuerdo a su nivel
lipídico. Se ha comprobado que variaciones cualitativas en los lípidos alterarían
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 24 de 43
los niveles de contaminantes por los cambios en el número y tipo de sitios de
unión disponibles para los POCs.
Al comparar ambos sexos, se observó que los machos maduros
presentaron mayores concentraciones de POCs que las hembras tanto en el
hígado como en el músculo (expresado en ng/g ph). Este resultado sería
consecuencia de que los machos no poseen la capacidad de desprenderse
durante la puesta de grandes cantidades de lípidos con contaminantes ligados
a ellos, como ocurre en las hembras (14-15, 19). Resultados similares fueron
encontrados en C. guatucupa (20).
La concentración de POCs expresada en ng/g lípidos, presentó valores
mas elevados en el músculo que en hígado. En este último tejido las
concentraciones de POCs en ambos sexos fueron similares, sugiriendo la
exposición de ambos a una misma dieta.
3.1.1. Hígado La figura 3 muestra la distribución porcentual de los grupos de POCs en
el tejido hepático de la merluza. La misma distribución de grupos fue observada
en el tejido hepático de los organismos maduros e inmaduros, presentando el
siguiente orden decreciente: ciclodienos > DDTs > HCHs.
Figura 3: Distribución porcentual de grupos de POCs en el tejido hepático de organismos maduros e inmaduros de merluza
En el Cuadro 5 se muestran las concentraciones de plaguicidas (ng/g
peso húmedo) en el tejido hepático de la merluza.
0%
20%
40%
60%
80%
100%
hembras machos juveniles
HCHs DDTs ciclodienos
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 25 de 43
Organismos maduros Plaguicida Hembra Macho
Organismos inmaduros
α-HCH 0,616 0,480 0,447 β−HCH 0,139 0,120 0,076 γ-HCH 0,864 0,517 0,876 δ-HCH 0,193 0,054 0,088
Σ HCH 1.812 1.17 1.487
Heptacloro 0,057 0,033 - Hept. Epóxido 0,248 0,554 0,319
Σ Heptacloros 0.305 0.587 0.319
Aldrin - - - Dieldrin 2,322 2,711 1,934 Endrin 0,850 1,352 1,284
Σ Aldrines 3.172 4.063 3.218
α-Endosulfán 0,834 0,637 0,380 β-Endosulfán 1,655 1,785 2,265 Endosulfán sulfato 7,891 6,982 11,796
Σ Endosulfanes 10.379 9.404 8.543
γ-clordano 0,874 0,877 1,119 α-clordano 1,430 0,848 1,862
Σ Clordanos 2.304 1.726 2.981
DDE 5,128 4,900 0,665 DDD 2,009 1,720 2,169 DDT 0,422 0,681 1,264
Σ DDTs 7.558 7.301 4.098
TOTAL 25,531 24,251 26.545 Cuadro 5: Concentración de POCs (ng/g peso húmedo) en el tejido hepático de la merluza.
El grupo de los endosulfanes, perteneciente al grupo de los ciclodienos,
fue el más importante cuantitativamente seguidos en orden decreciente por los
DDTs, aldrines, clordanos, HCHs y heptacloros en todos los organismos.
3.1.1.1.Parentales y metabolitos
La relación entre las concentraciones del metabolito a su compuesto
parental nos indica la capacidad de la especie a biotransformar o detoxificar los
plaguicidas organoclorados.
-Endosulfanes: El metabolito endosulfán sulfato predominó sobre sus
parentales: α- y β-endosulfán en el tejido hepático de organismos maduros e
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 26 de 43
inmaduros y la relación α-/β- fue < 1.
-DDTs: La relación metabolito/parental fue > 1 en todos los organismos
predominando el DDD en los organismos inmaduros y el DDE en lo maduros.
-Heptacloros: Fue el grupo de menor importancia dentro de los ciclodienos.
La relación Heptacloro/Heptacloro epóxido fue < 1 en todos los casos.
-Aldrines: El aldrin no estuvo presente en el hígado. El dieldrin y endrin,
productos del metabolismo del aldrin y en ocasiones usados como plaguicidas,
fueron los principales compuestos dentro del grupo, guardando la relación
dieldrin > endrin.
-Clordanos: Este grupo estuvo presente en todos los organismos, con una
relación α-/γ-clordano ≥ 1.
-HCHs: En todos los organismos, el isómero γ- fue el compuesto más
importante dentro del grupo, seguido por el isómero α-.
3.1.2.Músculo La figura 4 muestra la distribución porcentual de los grupos de POCs en
el tejido muscular de la merluza. La distribución de grupos fue similar en
hembras maduras y organismos inmaduros, siendo el orden ciclodienos >
HCHs > DDTs, mientras que los machos maduros presentaron el mismo orden
que en el tejido hepático: ciclodienos > DDTs > HCHs.
Figura 4: Distribución porcentual de grupos de POCs en el tejido muscular de organismos maduros e inmaduros de merluza
En el Cuadro 6 se muestran las concentraciones de plaguicidas en el
tejido muscular de la merluza.
0%20%40%60%80%
100%
hembras machos juvenilesHCHs DDTs ciclodienos
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 27 de 43
Organismos maduros Plaguicida Hembra Macho
Organismos inmaduros
α-HCH 0,077 0,057 0,120 β−HCH 0,051 0,040 0,127 γ-HCH 0,350 0,293 0,545 δ-HCH 0,190 0,083 0,147
Σ HCH 0.668 0.473 0.939
Heptacloro 0,013 - - Hept. Epóxido 0,049 - 0,024
Σ Heptacloros 0.062 - 0.024
Aldrin - - - Dieldrin 0,176 0,227 0,115 Endrin - - -
Σ Aldrines 0.176 0.2278 0.115
α-Endosulfán 0,035 - 0,049 β-Endosulfán 0,084 - - Endosulfán sulfato 5,933 6,729 5,543
Σ Endosulfanes 6.052 6.729 5.592
γ-clordano 0,214 0,124 0,249 α-clordano - - 0,092
Σ Clordanos 0.214 0.124 0.342
DDE 0,237 1,646 0,015 DDD 0,054 - - DDT 0,202 0,153 0,184
Σ DDTs 0.492 1.799 0.199
TOTAL 7,665 9,351 7,209 Cuadro 6: Concentración de POCs (ng/g peso húmedo) en el tejido muscular de la merluza.
Dentro de los ciclodienos, el grupo de los endosulfanes fue
cuantitativamente el mas importante, seguido por los clordanos, aldrines y
heptacloros tanto en hembras maduras como en organismos inmaduros,
mientras que en los machos estuvo seguido por los aldrines y clordanos.
3.1.2.1.Parentales y metabolitos
-Endosulfanes: Al igual que en el hígado se observó un predominio del
metabolito endosulfán sulfato. Los compuestos parentales, α- y β-endosulfán,
presentaron concentraciones bajas, inferiores a 0.1 ng/g.
-DDTs: La relación metabolito/parental (DDE/DDT) fue > 1 en los machos y ≤ 1
en hembras y organismos inmaduros.
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 28 de 43
-Heptacloros: Las concentraciones de los componentes de este grupo fueron
muy bajas, inferiores a 0.05 ng/g.
-Aldrines: El dieldrin fue el único representante del grupo, mostrando
concentraciones similares entre los diferentes organismos.
-Clordanos: El isómero γ- fue el compuesto mas importante dentro del grupo
en todos los organismos.
-HCHs: El isómero γ- predominó en todos los organismos, seguido por el
isómero δ-.
3.2.Corvina
El Cuadro 7 muestra los porcentajes medios de lípidos y humedad en la
corvina (Micropogonias furnieri)
Concentración de POCs Sexo Tejido %
Humedad % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.
Músculo 77.34 1.87 A.D. A.D. Hígado 78.4 6.78 A.D. A.D. Hembra C. estom. N.D. 1.1 A.D. A.D.
Músculo 79.5 1.05 A.D. A.D. Hígado 57.1 5.7 A.D. A.D. Macho C. estom. N.D. 2.82 A.D. A.D.
Músculo 78.9 1.1 A.D. A.D. Hígado N.D. 4.17 A.D. A.D. S.D. C. estom. N.D. 1.14 A.D. A.D.
Cuadro 7: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de corvina. ph: peso húmedo, ps: peso seco, A.D.: a determinar, N.D.: no determinado, S.D.: sin diferenciar 3.3.Boga
El Cuadro 8 muestra los porcentajes medios de lípidos y humedad en la
boga (Leporinus spp.)
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 29 de 43
Concentración de POCs Sexo Tejido % Humedad % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.
Músculo 77.07 1.2 A.D. A.D. Hígado 76.57 12.6 A.D. A.D. Hembra C. estom. N.D. 3.43 A.D. A.D.
Músculo 78.9 0.5 A.D. A.D. Hígado N.D. 2.94 A.D. A.D. S.D. C. estom. N.D. 0.91 A.D. A.D.
Cuadro 8: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de boga. ph: peso húmedo, ps: peso seco, A.D.: a determinar, N.D.: no determinado, S.D.: sin diferenciar
3.4.Sábalo
El Cuadro 9 muestra los porcentajes medios de lípidos y
concentraciones promedio de POCs totales en el sábalo (Prochilodus platensis)
(syn. P. lineatus)
Concentración de POCs Sexo Tejido Humedad relativa % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.
Músculo 74.6 6.5 A.D. A.D. Hembra Hígado N.D. 11.1 22.855 N.D.
Músculo 68.6 11.4 A.D. A.D. Macho Hígado 77.11 7.98 25.025 32.45
Músculo 78.02 1.46 A.D. A.D. S.D. Hígado N.D. 7.42 17.526 N.D.
Cuadro 9: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de sábalo. ph: peso húmedo, ps: peso seco, A.D.: a determinar, N.D.: no determinado, S.D.: sin diferenciar
Las concentraciones de POCs en los tejidos de los organismos
inmaduros fueron inferiores a aquellas de los maduros de ambos sexos,
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 30 de 43
mostrando la capacidad de bioacumulación de estos compuestos. Asimismo,
las concentraciones en los machos maduros fueron mayores que en las
hembras, sugiriendo que al igual que en la merluza, esta especie pierde
importantes cantidades de POCs unidos a los lípidos de los ovocitos durante el
desove.
3.4.1. Hígado La figura 5 muestra la distribución porcentual de los grupos de POCs en
el tejido hepático del sábalo. La misma distribución de grupos fue observada en
hembras maduras y organismos inmaduros, presentando el siguiente orden
decreciente: ciclodienos > DDTs = HCHs, mientras que en los machos, la
concentración de DDTs fue mayor, siendo la relación DDTs > HCHs.
Figura 5: Distribución porcentual de grupos de POCs en el tejido hepático de organismos maduros e inmaduros del sábalo
En el Cuadro 10 se muestran las concentraciones de plaguicidas (ng/g
peso húmedo) en el tejido hepático del sábalo.
0%
20%
40%
60%
80%
100%
hembras machos juvenilesHCHs DDTs ciclodienos
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 31 de 43
Organismos maduros Plaguicida Hembra Macho
Organismos inmaduros
α-HCH 0.434 0.476 0.440 β−HCH 1.415 0.790 0.742 γ-HCH 1.028 0.700 1.156 δ-HCH 0.314 0.301 0.519
Σ HCH 3.191 2.267 2.857
Heptacloro 0.001 - - Hept. Epóxido 0.901 0.314 0.257
Σ Heptacloros 0.902 0.314 0.257
Aldrin - - - Dieldrin 1.136 0.847 0.185 Endrin 0.414 - 0.330
Σ Aldrines 1.550 0.847 0.514
α-Endosulfán 3.990 0.299 0.859 β-Endosulfán 2.851 2.134 1.938 Endosulfán sulfato 4.055 2.389 7.875
Σ Endosulfanes 10.897 4.821 10.673
γ-clordano 2.199 4.078 0.110 α-clordano 0.892 2.984 0.771
Σ Clordanos 3.091 7.062 0.881
DDE 0.483 0.331 4.131 DDD 1.833 7.473 1.539 DDT 0.907 1.909 0.805
Σ DDTs 3.223 9.714 2.344
TOTAL 22.855 25.025 17.526 Cuadro 10: Concentración de POCs (ng/g peso húmedo) en el tejido hepático del sábalo.
Los organismos inmaduros presentaron un predominio de los grupos
mas hidrofílicos, tales como endosulfanes y HCHs, constituyendo el 77% del
total de los POCs. Este resultado estaría relacionado con la posición trófica de
los organismos inmaduros, los cuales se alimentan de eslabones tróficos
inferiores. Asimismo, en estos organismos la incorporación de POCs por las
branquias (principalmente aquellos presentes en la columna de agua, tal como
HCHs y endosulfanes) adquiere una gran importancia, factor que justifica el
predominio de ambos grupos de plaguicidas.
El grupo de los endosulfanes, perteneciente al grupo de los ciclodienos,
fue el más importante cuantitativamente (50%) en las hembras maduras
seguidos por DDTs, clordanos y HCHs a concentraciones similares. Por su
parte, en los machos maduros se observó un predominio de los grupos mas
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hidrofóbicos, tales como DDTs y clordanos, constituyendo en 70% del total de
POCs, seguidos en orden decreciente por endosulfanes y HCHs. Esta
diferencia entre hembras y machos maduros estaría relacionado con la
capacidad que poseen las hembras en detoxificarse especialmente de
compuestos altamente hidrofóbicos durante el periodo de desove, como se
mencionó anteriormente.
3.4.1.1.Parentales y metabolitos
-Endosulfanes: El metabolito endosulfán sulfato predominó sobre sus
parentales: α- y β-endosulfán en el tejido hepático de organismos maduros e
inmaduros.
-DDTs: La relación metabolito/parental fue > 1 en todos los organismos
predominando el DDE en los organismos inmaduros y el DDD en lo maduros.
-Heptacloros: Fue el grupo de menor importancia dentro de los ciclodienos.
La relación Heptacloro/Heptacloro epóxido fue < 1 en todos los casos.
-Aldrines: El aldrin no estuvo presente en el hígado. El dieldrin y endrin, fueron
los principales compuestos dentro del grupo, guardando la relación dieldrin >
endrin.
-Clordanos: Este grupo estuvo presente en todos los organismos, con una
relación γ-/α-clordano > 1, en organismos maduros y < 1 en los inmaduros.
-HCHs: En los organismos maduros, el isómero β- fue el compuesto mas
importante dentro del grupo, seguido por el isómero γ-, mientras que en los
organismos inmaduros predomino el isómero γ-.
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4. Datos preliminares sobre el estado de la contaminación por metales pesados en las especies de peces capturadas en el Río de La Plata y su Frente Marítimo.
Al igual que como se presentó la información sobre POCs, una primera
evaluación de los resultados de metales serán analizados sin diferenciar sexo
ni estadio de maduración (CUADRO 11).
Concentración µg/g ph Especie Tejido Hg Cd Cu Zn
Músculo 0,36±0,25a ND 3,86±2,00 29,26±6,61 Merluza Hígado 1,02±0,20 1,15±0,38 3,61±1,54 35,12±5,53
Músculo 0,24±0,06 ND 2,62±0,52 15,30±1,00 Hígado 1,18±0,25 1,11±0,84 4,37±0,74 23,25±4,30 Corvina Cont. Estomacal 1,50±0,16 2,58±0,59 4,72±0,68 24,00±6,42
Cuadro 11: Concentraciones totales de metales pesados en merluza y corvina rrubia capturadas en el estuario del Río de La Plata y su Frente marítimo. ph: peso húmedo, a desviación estándar.
De los cuatro metales estudiados, las concentraciones más altas fueron
las correspondientes a cinc, seguidas por las de cobre. Estos metales son
esenciales para el normal funcionamiento metabólico de los organismos, de allí
que sus concentraciones generalmente puedan superar a las de mercurio y
cadmio, de los cuales no se conoce una función fisiológica. En cuanto al
cadmio, las concentraciones fueron no detectables en el músculo de ambas
especies, mientras que el mercurio estuvo por encima del límite de detección.
Si bien no se analizaron diferentes especies físico-químicas de mercurio, se
sabe, por la bibliografía internacional, que los peces acumulan mercurio en el
músculo como metilmercurio (21). Por esta razón, podemos asegurar que el
mercurio encontrado en el músculo de merluza y corvina sería bajo esa
especie, la cual sería de fácil asimilación para sus predadores incluso el
hombre. De todos modos cabe aclarar que las concentraciones encontradas no
superan los límites internacionalmente aceptados para el consumo (0,7 µg/g;
22).
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Al analizar de manera general los hígados de ambas especies, podemos
decir que las concentraciones entre las mismas no presentaron diferencias,
tanto para mercurio como para cadmio, presentando concentraciones
superiores a los límites de consumo mencionados. Esta situación revela la
capacidad de este órgano para acumular metales, lo cual está íntimamente
relacionado con su función natural. El hígado recibe y metaboliza los nutrientes
asimilados por el organismo, teniendo una actividad metabólica alta, procesos
que involucran también a todas aquellas sustancias que siguen la misma vía
que los nutrientes. Además, el hígado es un órgano que presenta
concentraciones elevadas de metalotioneína, proteínas de bajo peso molecular
que unen metales divalentes en su molécula (23). Estas macromoléculas
presentan altas concentraciones de cisteína, responsable de dicha unión a
través de sus grupos sulfhidrilos (-SH).
De la misma manera que para mercurio, las concentraciones de cadmio
encontradas en el hígado responden a la misma situación. El hígado es un
órgano blanco para los metales pesados en general y en especial para aquellos
no esenciales, cuya presencia se debe a la incorporación del ambiente. El nivel
trófico que ocupan los peces en las tramas acuáticas y en especial las dos
especies estudiadas en este informe de avance, consumidores secundarios o
terciarios, la dieta es el principal aporte de metales. Por tal motivo, es
interesante conocer las concentraciones de estos metales en sus especies
alimento o en el contenido estomacal. Lamentablemente los ejemplares de
merluza analizados presentaban los estómagos vacíos y por tal motivo sólo se
pudieron analizar los contenidos de la corvina rubia. Las concentraciones de
mercurio estuvieron en el mismo orden que las encontradas en el hígado,
mientras que las de cadmio duplicaron a las hepáticas. Esto significa un aporte
de cadmio mayor que mercurio en su dieta, lo cual está relacionado con la
alimentación de la corvina, crustáceos y bivalvos, acumuladores de metales y
de cadmio en particular (24,25).
Como conclusiones preliminares de este análisis general de ambas
especies, podemos decir que:
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1. El músculo estuvo por debajo de los límites permitidos para su consumo, no
constituyendo un riesgo para la salud humana.
2. El hígado permitirá evaluar procesos de acumulación en las especies
estudiadas debido a su capacidad concentradora.
5. Concentración y distribución de metales pesados
5.1. Merluza
En el Cuadro 12 se presentan las distribuciones de los cuatro metales
estudiados en músculo e hígado de juveniles (sin diferenciar sexo).
Merluza (Juveniles)
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
Conc
entr
ació
n (p
pm)
Mercurio 0.08 0.83
Cadmio 0.00 0.77
Cinc 22.44 29.16
Cobre 1.56 2.00
Músculo Hígado
Cuadro 12: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares juveniles de merluza.
En este estadio se observa que las concentraciones de cinc superaron
ampliamente a los otros 3 metales, principalmente las correspondientes a los
no esenciales. Dentro de estos últimos, solamente el mercurio estuvo por
encima de los límites de detección para ambos tejidos, mientras que el cadmio
sólo en el hígado. Esta situación fue la misma que presentaron los adultos
(Cuadro 13), si bien las concentraciones de las hembras fueron inferiores a las
encontradas en los machos.
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Cuadro 13: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares adultos de ambos sexos de de merluza.
En el análisis de cada metal en particular (Cuadro 14) las concentraciones
del músculo fueron inferiores a las correspondientes al hígado, incluso las
primeras fueron no detectables para el cadmio.
Tanto para los metales esenciales, cobre y cinc, como los no esenciales,
mercurio y cadmio, se puede observar que los adultos presentan una mayor
concentración que los juveniles. Esto estaría evidenciando un proceso de
bioacumulación con la talla, estimativo de la edad, en esta especie.
Merluza (Hembras adultas)
0.0
10.0
20.0
30.0
40.0
M ercurio 0.43 0.99
C admio 0.00 1.53
C inc 35.63 36.11
C o bre 5.23 5.06
M úsculo Hígado
Merluza (Machos adultos)
0.0
10.0
20.0
30.0
40.0
50.0
M ercurio 0.57 1.23
C admio 0.00 1.16
C inc 29.7 40.08
C o bre 4.80 3.78
M úsculo Hígado
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Cuadro 14: Distribución de las concentraciones de metales pesados (µg/g ph) en músculo e hígado de juveniles y adultos de la merluza.
Cuando se comparan los sexos, solo en adultos, se encontraron
diferentes patrones de acuerdo al metal. En el caso de los metales no
esenciales, las concentraciones de mercurio en los machos fueron mayores
que las correspondientes a las hembras, mientras que en éstas últimas se
encontraron las más elevadas de cadmio. Esto podría deberse a dos factores,
la diferencia de alimentación entre ambos sexos o alguna condición particular
de cada sexo. En el primer caso, no hay evidencia de migraciones tróficas
diferenciales entre sexos como tampoco que las hembras preden sobre
diferentes ítems alimentarios que los machos (26). De esta manera, la dieta no
constituiría una razón para dicha diferencia. Quizás la respuesta a esta
situación esté relacionada con la puesta por parte de las hembras, la cual
Mercurio
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
1,2
1,4
Con
cent
raci
ón (p
pm)
Músculo 0,08 0,57 0,43Hígado 0,83 1,23 0,99
Juveniles Machos Adultos Hembras Adultas
Cadmio
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
1,2
1,4
1,6
1,8
Con
cent
raci
ón (p
pm)
Músculo 0,00 0,00 0,00Hígado 0,77 1,16 1,53
Juveniles Machos Adultos Hembras Adultas
Cinc
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
30,0
35,0
40,0
45,0
Con
cent
raci
ón (p
pm)
Músculo 22,44 29,7 35,63Hígado 29,16 40,08 36,11
Juveniles Machos Adultos Hembras Adultas
Cobre
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0C
once
ntra
ción
(ppm
)
Músculo 1,56 4,80 5,23Hígado 2,00 3,78 5,06
Juveniles Machos Adultos Hembras Adultas
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 38 de 43
permitiría a las mismas eliminar mercurio bajo su forma metilada y así reducir
las concentraciones hepáticas. En el caso del cadmio, del cual no se conoce
bajo que especie(s) preferentemente se encuentra en los peces, estaría
imposibilitado de ser eliminado por la puesta.
En el caso de los metales esenciales, cobre y cinc, las mayores
concentraciones del primero se encontraron en músculo mientras que las de
cinc en el hígado. Nuevamente y para ambos metales, las hembras no
presentaron diferencias importantes entre ambos tejidos. Quizás los cambios
metabólicos que se producen en relación a la puesta también tengan una
influencia sobre estos metales esenciales, lo cual sería esperable por su
condición.
5.2. Corvina rubia
En esta especie también se pudieron analizar los contenidos
estomacales, dato que enriquece los resultados obtenidos y principalmente su
discusión. Permite inferir de alguna manera, el aporte dietario de los metales
bajo estudio.
La corvina rubia, especie de hábitos estuariales y con una distribución
costera, presentó diferentes concentraciones al compararla con la merluza. En
el caso de mercurio y cadmio los valores estuvieron dentro del mismo rango,
las de cinc fueron menores y las de cobre mayores que los datos obtenidos en
merluza. Esto se debe principalmente a los ítems que constituyen la dieta de
cada especie. La corvina es una especie que se alimenta de organismos del
fondo, los cuales se caracterizan por acumular metales (24,25,26), mientras
que la merluza es omnívora, se alimenta de una amplia variedad de especies
con distintas posiciones tróficas que la expone a diversos niveles de metales.
Por esta razón, no se han encontrado diferencias entre las concentraciones de
los metales no esenciales, ya que ambas tienen la posibilidad de incorporarlos
via alimento.
Para analizar cada estadio de la corvina en particular, se presenta en el
Cuadro 15 las concentraciones de los metales pesados estudiados en los
juveniles de corvina rubia (sin diferenciar sexos).
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Cuadro 15: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares juveniles de corvina rubia.
Este estadio presentó la misma situación encontrada en merluza, donde
las concentraciones de cadmio fueron no detectables sólo en el músculo,
mientras que las más altas se encontraron en el contenido estomacal. Estas
elevadas concentraciones responden a la importancia que tienen los moluscos
y sedimentos en el tracto digestivo, acumuladores por excelencia de metales
pesados (25, 28,29). Este patrón de distribución de los metales estudiados
dentro de cada estadio también se presentó en los adultos de ambos sexos
(Cuadro 16).
Corvina (Juveniles)
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
M ercurio 0.18 0.90 1.36
C admio 0.00 0.21 2.70
C inc 15.64 18.65 23.07
C o bre 2.08 3.25 4.85
M úsculo Hígado C .Es to macal
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 40 de 43
Cuadro 16: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares juveniles de corvina rubia.
Al evaluar la situación dentro de cada metal (Cuadro 17) se encontraron
patrones de acumulación diferentes de acuerdo al sexo y al tejido/órgano
analizado, si bien es general el aumento de concentración de juvenil a adulto.
Corvina (Machos Adultos)
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
M ercurio 0.30 1.38 1.47
C admio 0.00 1.87 3.10
C inc 16.08 27.08 30.84
C o bre 2.66 4.10 3.99
M úsculo Hígado C .Es to macal
Corvina (Hembras Adultas)
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
M ercurio 0.25 1.27 1.67
C admio 0.00 1.25 1.94
C inc 14.17 24.33 18.11
C o bre 3.11 4.68 5.33
M úsculo Hígado C .Es to macal
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 41 de 43
Cuadro 17: Distribución de las concentraciones de metales pesados (µg/g ph) en músculo e hígado de juveniles y adultos de la merluza
En el caso del cinc dicho aumento es más evidente en el hígado y lo
mismo ocurre con el cobre, esto significa un ingreso dietario de estos metales
esenciales incrementando los niveles naturales de los mismos. Los metales no
esenciales también evidenciaron una acumulación en este tejido y en músculo
solamente mercurio y de manera atenuada.
En el contenido estomacal es donde se encontraron las concentraciones
más altas, lo cual evidencia un aporte directo de los cuatro metales, siendo
más elevadas que las encontradas en el hígado y el músculo. Con esta
evaluación podríamos decir que los metales estudiados no han manifestado
procesos de magnificación, ya que sus presas presentaban concentraciones
superiores.
Mercurio
0 . 0
0 . 5
1 . 0
1 . 5
2 . 0
Músc ulo 0.18 0.30 0.25
Hí gado 0.90 1.38 1.27
C .Est omac a l 1.36 1.47 1.67
J uv enile s Mac hos A dult os Hembras A dult as
Cadmio
0 . 0
1 . 0
2 . 0
3 . 0
4 . 0
Músc ulo 0.00 0.00 0.00
Hí gado 0.21 1.87 1.25
C .Est omac a l 2.70 3.10 1.94
J uv enile s Mac hos A dult os Hembras A dult as
Cinc
0 . 0
1 0 . 0
2 0 . 0
3 0 . 0
4 0 . 0
Músc ulo 15.64 16.08 14.17
Hí gado 18.65 27.08 24.33
C .Est oma c a l 23.07 30.84 18.11
J uv eniles Mac hos A dult osHembras
A dult as
Cobre
0 . 0
2 . 0
4 . 0
6 . 0
Músc ulo 2.08 2.66 3.11
Hí g a do 3.25 4.10 4.68
C .Est o ma c a l 4.85 3.99 5.33
J uv eni les Ma c ho s A dult os He mbra s A dult a s
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BIBLIOGRAFIA 1. López Laborde, J., 1998. Marco geonorfológico y geológico del Río de la
Plata. En: El Río de la Plata: una revisión ambiental. Eds. P.G. Wells y G.R. Daborn, Cap. 1, 1-16.
2. Informe de la Comisión Administradora del Río de la Plata, 1990. Relevamiento de los recursos pesqueros del Río de la Plata superior. CARP-INIDEP-INAPE, 123pp.
3. Porte, C. y Albaigés, J., 1993. Bioaccumulation patterns of hydrocarbons and polychlorinated biphenyls and bivalves, crustaceans and fishes. Arch. Environ. Contam. and Toxicol., 26:273-281.
4. Petersen, G.I. y Kristensen, P., 1998. Bioaccumulation of lipophilic substances in fish early stage. Environ. Toxicol. Chem., 17 (7): 1385-1395.
5. Förstner, U. y Wittmann, G.T.W. 1983. Metal pollution in the aquatic environment. Springer-Verlag, Berlin, 486pp.
6. Klaassen, C.D. (ed.) 2001. Casarett and Doull´s Toxicology. The basic science of poisons. 6ta. Edición. McGraw-Hill Co. Inc., 1236pp.
7. Fergusson, J.E. 1991. The heavy elements: chemistry, environmental impact and health effects. Pergamon Press, 614pp.
8. Delfino, R. y Baigún, C., 1985. Marcaciones de peces en el embalse de Salto Grande, Río Uruguay (Argentina-Uruguay). Rev. Asoc. Cs. Nat. del Litoral 16 (1): 85-93.
9. Prenski, B. y Angelescu, V. 1993. Ecología trófica de la merluza común (Merluccius hubbsi) del Mar Argentino. Parte 3. Consumo anual de alimento a nivel poblacional y su relación con la explotación de las pesquerías multiespecíficas. INIDEP Doc.Cientif. 1, 118pp.
10. Metcalfe, T.L., Metcalfe, C.D. 1997. The trophodynamics of PCBs Including mono and non-ortho congeners in the food web of north-central Lake Ontario. Sci. of the total Environ. 201, 245-272.
11. Moreno, V.J., Pérez, A., Bastida, R., de Moreno, J.E.A. y Malaspina, A.M. 1984. Distribución de mercurio total en los tejidos de un delfín nariz de botella (Tursiops gephyreus, Lahille, 1908) de la provincia de Buenos Aires (Argentina). Rev. Invest. Des. Pesq., 4: 93-102.
12. FAO/SIDA 1983. Manual de métodos de investigación del medio ambiente acuático. Parte 9. Análisis de presencia de metales y organoclorados en los peces. FAO Doc. Téc. Pesca, 212:1-35.
13. Lanfranchi, A.L., de Moreno, J.E.A., Moreno, V.J., Metcalfe, T. and Menone, M.L., 1998. Distribution of organochlorine compòunds in tissues of croaker (Micropogonias furnieri) from Samborombón Bay, Argentina. Environ. Sci. 6 (1): 55-67.
14. Albaigés, J., Farrán, A., Soler, M., Gallifa, A. y Martín, P., 1987. Accumulation and distribution of biogenic and pollutants hydrocarbons, PCBs and DDT in tissues of western Mediterranean fishes. Mar. Environ. Res., 22:1-18.
15. Gundersen, D.T., Miller, R., Mischler, A., Elpers, K., Mims, S.D., Millar, J.G. y Blazer, V. 2000. Biomarker response and health of polychlorinated biphenyls and chlordane contaminated paddle fish from the Ohio River Basin, U.S.A. Environ. Toxicol. Chem., 19 (9): 2275-2285.
16. Asplund, L., Athanaciadou, M., Sjodn, A., Bergman, A. y Borgeson, H. 1999. Organohalogen substances in muscle, egg and blood from healthy Baltic
PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 43 de 43
salmon (Salmo salar) and Baltic salmon that produce offspring with the M74 Syndrome. Ambio, 25 (1):67-76.
17. Hellou, J., Warren, W.C. y Mercer, G. 1995. Organochlorines in Pleuronectidae: Comparison between three tissues of three species inhabiting northwest Atlantic. Arch. Environ. Contam. Toxicol., 29: 302-308.
18. Menone, M.L., Aizpún, J.E., Moreno, V.J., Lanfranchi, A.L., Metcalfe, T.L. y Metclafe C.D., 2000. PCBs and organochlorines in tissues of silverside (Odontesthes bonariensis) from coastal lagoon in Argentina. Arch. Environ. Contam. Toxicol. 38 (2): 202-208.
19. Von Westernhagen, H., Rosenthal, H., Dethlefsen, V., Ernst, W., Harms, U. y Hansen, P.D., 1981. Bioaccumulating substances and reproductive success in Baltic flounder (Platichthys flesus). Aquat. Toxicol. 1:85-99.
20. Lanfranchi, A.L. 2003. Compuestos organoclorados en la biota de zonas estuariales bonaerenses. Tesis Doctoral. FCEyN, Universidad Nacional de Mar del Plata, 188pp.
21. Law, J.R., Filerman, C.E., Hopkins, A.D.,Baker,J.R., Harwood,J., Jackson,D.B., Kenedy,S., Martin, A.S. y Morris, R.J. 1991. Concentrations of metals in liver of marine mammals (seals, porpoise and dolphins) from waters around British Isles. Mar.Pollut.Bull., 22:183-191.
22. Nauen, CE. 1983. Compilation of legal limits for hazardous substances in fish and fishery products. FAO Fish. Circ., Nro. 764, 102pp.
23. Hylland, K., Haux,C., Hogstrand,C., Sletten, K. y Andersen, R.A. 1994. Properties of cod metallothionein, its presence in different tissues and effects of cadmium and zinc treatment. Fish Physiol.Biochem., 13(1):81-91.
24. Petri,G. y Zauke,C.P. 1993. Trace metals in crustaceans in the Antarctic Ocean. Ambio, 22:529-436.
25. Zauke, C.P.,Clason,B., Savinov, V.M. y Savinova T. En prensa Heavy metals of inshore benthic invertebrates from the Barents sea. Sci. Total Environ.
26. Cousseau, M.B. y Perrotta, R.G. 1998. Peces marinos de Argentina. Biología, distribución, pesca. INIDEP, 163pp.
27. Brozek,M. y Madsen, P.B. 2001. Environmental quality status in the Danish Wadden sea. Monitoring and assessment 2000. Wadden Sea Newsletter, 2:10-13.
28. Fernandes.H.M. 1997. Heavy metal distribution in sediments and ecological risk assessment: the role of diagenetic processes in reducing metal toxicity in bottom sediments. Environ.Pollut., 97:317-325.
29. Keller, B.E.M., Lajtha, K. y Cristofor, S. 1998. Trace metal concentrations in the sediments and plants of the danube delta, Romania. Wetlands, 18:42-50