többdimenziós kromatográfia

Többdimenziós kromatográfia

Deans kapcsolás

Áramlás irányának megváltoztatása, az áramlási sebesség változása nélkül.

• Three-port valve is outside oven.

• F2’’ > F1 > F2’ > 0

• Simultaneous fill and flush.

• Generates pulses by switching valve.

• Minimal pressure disturbances.

• No inherent temperature limitations.

A Fluidic Modulator To Address Temperature Limitations

Deans kapcsoló

Deans kapcsolók

Nincs benne mozgó alkatrész, és kémiailag aktív felület.

Deans kapcsolás előnye a nyomelemzésnél

A modulátoron kifagy, fókuszódik a minta.

Az együtt eluálódó csúcsok szétválasztása második dimenzión

F1 = 1.0 ml min-1

F2 = 20.0 ml min-1

Modulation of a Pentane Peak

Peak widths near the theoretical limit are observed

Klórozott peszticidek GC x GC analízise

Benzin GC x GC analízise

HPLC X GC kapcsolás

A folyadék mozgófázis nem tartalmazhat lerakodó anyagokat.

HPLC X GC kapcsolás

HPLC X HPLC

Scan B

Mágneses szektorú MS működése

Minnél nagyobb a tömeg, annál nagyobb az ív. Gyakorlatban a mágneses tért változtatják (scann), hogy mindegyik ion érje a detektort.

Quadrupol tömegspektrométer működési vázlata

Totál ionkromatogram (TIC) és szelektált ion monitorozó (SIM) mód összehasonlítása

A SIM több nagyságrenddel érzékenyebb mint a TIC.

Fragmentáció vázlata

Folyamatok•Elektronütközés•Molekula ion képződés•Fragmentációtöbb formában•Átrendeződés

EI általában 70EV energiával történik, ami kompromiszzum eredménye. A fragmentáció információgazdag, nem teljes.

Total ion kromatogram (TIC) és szelektált ion kromatogram (SIM) összehasonlítása

Quadrupol működési elve

On-line LC/MS kapacsolás előnye

Alkalmazott ionizációs módok

Electron ütközésest ionzáció (EI)

Fragmentáció szemléltetése

A fragmensekből összerakható az eredeti molekula.

Kémiai ionizáció (CI)• Pozitív (PCI) • NH3 + e -> NH4

+ + 2 e- reagens gáz ionizáció• NH 4

+ + M > NH3 + [M+H] + protonállt molekula• NH 4 + + M > [M + NH4] + ammónium addukt

• Negatív (NCI)• NH3 - e -> NH2

- reagens gáz ionizáció• NH 2

- + M > NH2 + [M+H] - deprotonállt molekula• NH 2 + + M > [M + NH2] - ammónium addukt

A CI ~ 1Torr nyomáson történik NH3, CH4, isobután gázokkal

Kémiai ionizáció előnye

A Reagens gáz nagyobb nyomása miatt a CIben nagyobb az ütközés és az ionizáció valószínűsége. A használt gázoknak kedvező az ionizálhatóságuk, ezért ionátvivőként is szolgálnak. A CI kisebb fragmentációt ad mint a EI.

1 Torr 10-6 Torr

GC-MS mérés negatív kémiai ionizációval

Az érzékenységet heptafluorobutánsav (HFBA) Elektonbefogó származékkal, fokozzák

GC és MS on-line kapcsolat

Izotópszelektív GC-MS

Gyors analízisek LC/MS-sel

Ha más a fragmentáció akkor nem kell két anyagot elválasztani.

MS/MS kapcsolás

LC/MS kapcsolatok

HPLC/MS elektrospray ionizációval

HPLC/MS elektrospray ionizációval

HPLC/MS atmoszférikus elektrospray ionizációval

HPLC/MS atmoszférikus kémiai ionizációval (APCI)

APCI elmélete

Ion csapda MS

Az ionokat parkoló pályán gyűjti és csak időnként engedi a detektorra.

LC/MS készülékekben általában elektrospray (ESI) az ionizáció

• Az LC eluenst beporlasztják az MS ionizáló terébe, ahol korona kisülés történik.

• Az oldat egyre töményedik, miközben mikro cseppekké esik szét

• A vizsgálandó anyag a puffer molekuláival adduktot képezve jut a mágneses térbe.

• Általában a fragmentáció csekély.

Fragmentogram értékelése

Fragmentogramon mérjük a csúcsok helyét a tömeg/töltés (m/z) skálán.A csúcsok intenzitását a magasságukkal mérjük.Legnagyobb csúcs (base peak) a100%, többit ehhez mérjük.Azonos körülmények között felvett fragmentogramon egy anyag mindig ugyanolyan csúcseloszlást mutat.A mennyiségi kiértékelés alapja egy adott kiválasztott ion (SIM), vagy az összion (TIC) áramerősége.

PCI és NCI spektrumok összehasonlítása

Különböző ionizációs módok más fragmentációt eredményeznek

Elektospray ionizáció (ESI) vázlata

1 torr 10-6 torr

Elektospray ionizáció (ESI) elve

Növényvédőszerek LC/MS-MS meghatározása