többdimenziós kromatográfia
DESCRIPTION
Többdimenziós kromatográfia. Deans kapcsolás. Áramlás irányának megváltoztatása, az áramlási sebesség változása nélkül. A Fluidic Modulator To Address Temperature Limitations. Three-port valve is outside oven. F 2 ’’ > F 1 > F 2 ’ > 0 Simultaneous fill and flush. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
![Page 1: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/1.jpg)
Többdimenziós kromatográfia
![Page 2: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/2.jpg)
Deans kapcsolás
Áramlás irányának megváltoztatása, az áramlási sebesség változása nélkül.
![Page 3: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/3.jpg)
• Three-port valve is outside oven.
• F2’’ > F1 > F2’ > 0
• Simultaneous fill and flush.
• Generates pulses by switching valve.
• Minimal pressure disturbances.
• No inherent temperature limitations.
A Fluidic Modulator To Address Temperature Limitations
![Page 4: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/4.jpg)
Deans kapcsoló
![Page 5: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/5.jpg)
Deans kapcsolók
Nincs benne mozgó alkatrész, és kémiailag aktív felület.
![Page 6: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/6.jpg)
Deans kapcsolás előnye a nyomelemzésnél
![Page 7: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/7.jpg)
![Page 8: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/8.jpg)
A modulátoron kifagy, fókuszódik a minta.
![Page 9: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/9.jpg)
Az együtt eluálódó csúcsok szétválasztása második dimenzión
![Page 10: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/10.jpg)
F1 = 1.0 ml min-1
F2 = 20.0 ml min-1
Modulation of a Pentane Peak
Peak widths near the theoretical limit are observed
![Page 11: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/11.jpg)
Klórozott peszticidek GC x GC analízise
![Page 12: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/12.jpg)
Benzin GC x GC analízise
![Page 13: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/13.jpg)
![Page 14: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/14.jpg)
HPLC X GC kapcsolás
A folyadék mozgófázis nem tartalmazhat lerakodó anyagokat.
![Page 15: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/15.jpg)
HPLC X GC kapcsolás
![Page 16: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/16.jpg)
HPLC X HPLC
![Page 17: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/17.jpg)
![Page 18: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/18.jpg)
Scan B
Mágneses szektorú MS működése
Minnél nagyobb a tömeg, annál nagyobb az ív. Gyakorlatban a mágneses tért változtatják (scann), hogy mindegyik ion érje a detektort.
![Page 19: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/19.jpg)
Quadrupol tömegspektrométer működési vázlata
![Page 20: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/20.jpg)
Totál ionkromatogram (TIC) és szelektált ion monitorozó (SIM) mód összehasonlítása
A SIM több nagyságrenddel érzékenyebb mint a TIC.
![Page 21: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/21.jpg)
Fragmentáció vázlata
Folyamatok•Elektronütközés•Molekula ion képződés•Fragmentációtöbb formában•Átrendeződés
EI általában 70EV energiával történik, ami kompromiszzum eredménye. A fragmentáció információgazdag, nem teljes.
![Page 22: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/22.jpg)
Total ion kromatogram (TIC) és szelektált ion kromatogram (SIM) összehasonlítása
![Page 23: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/23.jpg)
Quadrupol működési elve
![Page 24: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/24.jpg)
On-line LC/MS kapacsolás előnye
![Page 25: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/25.jpg)
Alkalmazott ionizációs módok
![Page 26: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/26.jpg)
Electron ütközésest ionzáció (EI)
![Page 27: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/27.jpg)
Fragmentáció szemléltetése
A fragmensekből összerakható az eredeti molekula.
![Page 28: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/28.jpg)
Kémiai ionizáció (CI)• Pozitív (PCI) • NH3 + e -> NH4
+ + 2 e- reagens gáz ionizáció• NH 4
+ + M > NH3 + [M+H] + protonállt molekula• NH 4 + + M > [M + NH4] + ammónium addukt
• Negatív (NCI)• NH3 - e -> NH2
- reagens gáz ionizáció• NH 2
- + M > NH2 + [M+H] - deprotonállt molekula• NH 2 + + M > [M + NH2] - ammónium addukt
A CI ~ 1Torr nyomáson történik NH3, CH4, isobután gázokkal
![Page 29: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/29.jpg)
Kémiai ionizáció előnye
A Reagens gáz nagyobb nyomása miatt a CIben nagyobb az ütközés és az ionizáció valószínűsége. A használt gázoknak kedvező az ionizálhatóságuk, ezért ionátvivőként is szolgálnak. A CI kisebb fragmentációt ad mint a EI.
1 Torr 10-6 Torr
![Page 30: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/30.jpg)
GC-MS mérés negatív kémiai ionizációval
Az érzékenységet heptafluorobutánsav (HFBA) Elektonbefogó származékkal, fokozzák
![Page 31: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/31.jpg)
GC és MS on-line kapcsolat
![Page 32: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/32.jpg)
Izotópszelektív GC-MS
![Page 33: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/33.jpg)
![Page 34: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/34.jpg)
Gyors analízisek LC/MS-sel
Ha más a fragmentáció akkor nem kell két anyagot elválasztani.
![Page 35: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/35.jpg)
MS/MS kapcsolás
![Page 36: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/36.jpg)
LC/MS kapcsolatok
![Page 37: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/37.jpg)
HPLC/MS elektrospray ionizációval
![Page 38: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/38.jpg)
HPLC/MS elektrospray ionizációval
![Page 39: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/39.jpg)
HPLC/MS atmoszférikus elektrospray ionizációval
![Page 40: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/40.jpg)
HPLC/MS atmoszférikus kémiai ionizációval (APCI)
![Page 41: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/41.jpg)
![Page 42: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/42.jpg)
APCI elmélete
![Page 43: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/43.jpg)
![Page 44: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/44.jpg)
![Page 45: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/45.jpg)
Ion csapda MS
Az ionokat parkoló pályán gyűjti és csak időnként engedi a detektorra.
![Page 46: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/46.jpg)
LC/MS készülékekben általában elektrospray (ESI) az ionizáció
• Az LC eluenst beporlasztják az MS ionizáló terébe, ahol korona kisülés történik.
• Az oldat egyre töményedik, miközben mikro cseppekké esik szét
• A vizsgálandó anyag a puffer molekuláival adduktot képezve jut a mágneses térbe.
• Általában a fragmentáció csekély.
![Page 47: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/47.jpg)
![Page 48: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/48.jpg)
Fragmentogram értékelése
Fragmentogramon mérjük a csúcsok helyét a tömeg/töltés (m/z) skálán.A csúcsok intenzitását a magasságukkal mérjük.Legnagyobb csúcs (base peak) a100%, többit ehhez mérjük.Azonos körülmények között felvett fragmentogramon egy anyag mindig ugyanolyan csúcseloszlást mutat.A mennyiségi kiértékelés alapja egy adott kiválasztott ion (SIM), vagy az összion (TIC) áramerősége.
![Page 49: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/49.jpg)
PCI és NCI spektrumok összehasonlítása
![Page 50: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/50.jpg)
Különböző ionizációs módok más fragmentációt eredményeznek
![Page 51: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/51.jpg)
Elektospray ionizáció (ESI) vázlata
1 torr 10-6 torr
![Page 52: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/52.jpg)
Elektospray ionizáció (ESI) elve
![Page 53: Többdimenziós kromatográfia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022062309/5681555d550346895dc32499/html5/thumbnails/53.jpg)
Növényvédőszerek LC/MS-MS meghatározása